CN111060576A - 检测黄曲霉毒素b1的电化学传感器和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种利用核酸适配体修饰的电极构建的电化学传感器和检测方法，可以实现快速灵敏检测黄曲霉毒素B1。本发明将电化学标记物(例如亚甲基蓝)标记到核酸适配体的特定碱基位点上，相应的核酸适配体利用末端标记的硫醇，核酸适配体被固定到金电极表面。通过测定亚甲基蓝的电化学信号变化可以实现对黄曲霉毒素B1的检测。

Description

检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器和方法
技术领域
本发明属于电化学分析技术领域，具体涉及一种基于核酸适配体检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器和方法。
背景技术
黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的有毒次生代谢产物，黄曲霉毒素对人体健康产生很大的危害，具有致癌性、致突性、致畸性和免疫毒性等。黄曲霉毒素污染广，在食品和农作物等中污染较普遍。其中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)的毒性强、在黄曲霉毒素中占比高，世界各国都对黄曲霉毒素B1及其他黄曲霉毒素在食品中的含量制定了严格的限量标准。现场灵敏、快速检测黄曲霉毒素特别是黄曲霉毒素B1在食品安全、质量监控、环境分析等很多领域具有重要的意义和需求。目前常用的色谱分析、质谱分析法等往往需要较昂贵的仪器、操作复杂繁琐、所需时间长、需要专业人员、检测费用高，虽然可以满足准确定量检测黄曲霉毒素的要求，但在现场、快速、低成本检测方面仍有不少局限。
核酸适配体(Aptamer)是可以与目标分子选择性结合的单链脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)。核酸适配体可以从随机序列的核酸文库中筛选得到。目前，随着筛选技术的进步，很多目标分子的核酸适配体已经得到。作为一种核酸型的亲和配体，核酸适配体在分析传感方面具有很多优势，例如其可以通过化学方法合成、合成纯度高、批次重现性好、容易引入功能基团用于标记或固定化、热稳定性高。核酸适配体与目标分子结合时往往引起构象的变化，有利于构建传感分析方法。由于这些优点，核酸适配体在分析传感领域具有很好的应用前景，可克服免疫抗体的局限。利用核酸适配体作为亲和配体为检测黄曲霉毒素B1提供了新的途径和手段。目前，已有不同形式的基于核酸适配体检测黄曲霉毒素B1的分析方法被报道。
电化学传感器具有成本低、灵敏、操作简单、抗干扰能力强等优点，在现场检测、快速检测方面具有很多优势。利用具有特异性识别功能的核酸适配体，结合电化学检测，适配体电化学传感器在临床检测、环境分析、食品安全等方面有具有潜力。然而，目前不少报道的针对黄曲霉毒素B1的基于适配体的电化学分析方法往往需要多个步骤，检测步骤繁琐，检测耗时，而且大多数电化学传感器不能重复使用，因此这些方法并不利于快速灵敏分析黄曲霉毒素B1。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明提出了一种基于核酸适配体检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器和方法，可以快速、灵敏地分析黄曲霉毒素B1。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，包括：利用黄曲霉毒素B1核酸适配体修饰的电极，其中所述黄曲霉毒素B1核酸适配体带有电化学标记物，所述电化学标记物位于所述黄曲霉毒素B1核酸适配体的特定碱基上以增强检测信号。
在一些实施方案中，所述黄曲霉毒素B1核酸适配体为特异性结合黄曲霉毒素B1的DNA序列。
在一些实施方案中，所述电化学标记物为亚甲基蓝或二茂铁。
在一些实施方案中，所述特定碱基选自A、G、C或T。
在一些实施方案中，所述DNA序列包括SEQ ID NO：1或由SEQ ID NO：1组成，其5’端或3’端利用硫醇分子修饰，所述电化学标记物位于所述序列的第14、18、20或22位的T碱基上，或者所述DNA序列包括在SEQ ID NO：1的一端或两端减少或增加一个或多个碱基的序列，所述电化学标记物位于与SEQ ID NO：1的上述T碱基对应的T碱基上。
在一些实施方案中，所述电极为金电极或具有金涂层或纳米金材料修饰的电极。
一种所述电化学传感器的制备方法，包括：将带有电化学标记物标记的黄曲霉毒素B1核酸适配体固定在电极上。
所述电极可以为金属电极或非金属电极，优选为金电极，具体步骤包括：将金电极浸入含有黄曲霉毒素B1核酸适配体的缓冲溶液，静置0.5-2(例如1小时或1.5小时)小时后利用超纯水清洗；将所述金电极浸入含有封闭剂的缓冲溶液，静置1-3小时(例如1.5小时、2小时或2.5小时)后利用超纯水清洗。所述缓冲溶液可以为PBS缓冲溶液，pH为7-8(例如7.2、7.5或7.8)，所述核酸适配体的浓度为0.1-10μM(例如0.2μM、0.5μM、1μM、2μM、3μM、5μM或8μM)，所述封闭剂优选为巯基己醇，巯基己醇的浓度为1-5mM(例如2mM、3mM或4mM)。
在一些实施方案中，所述电极为经过表面处理的金电极。优选地，所述表面处理包括将所述金电极打磨(例如利用0.01-0.1μm的氧化铝粉打磨)后使用超纯水超声清洗，再进行进一步表面清洗，如电化学清洗或化学法清洗等。
一种利用所述电化学传感器检测黄曲霉毒素B1的方法，包括将所述电极在含有待测样品的反应缓冲溶液中温育，然后采用电化学法进行测定。
在一些实施方案中，所述反应缓冲溶液为含有Mg2+(例如MgCl2，其浓度为1-100mM，优选为10-30mM)的Tris-HCl缓冲溶液、HEPES缓冲溶液或磷酸盐缓冲溶液，pH为7-8(例如7.2、7.5或7.8)。
在一些实施方案中，所述电化学法选自方波伏安法、差分脉冲伏安法或交流伏安法。
在一些实施方案中，所述电化学法选自方波伏安法，在所述方波伏安法中，电压范围为0～-0.5V，采样间隔1mV，幅度25mV，频率60Hz。
与现有技术相比，本发明具有如下的优点和效果：
本发明采用特定碱基上标记了电化学标记物的核酸适配体构建了核酸适配体电化学传感器检测黄曲霉毒素B1，这种适配体传感器针对黄曲霉毒素B1能产生明显电流信号变化，这种传感器具有操作简单、高灵敏、传感器响应迅速、检测时间短、传感器容易再生可重复使用等优点。
进行检测时，只需将修饰了核酸适配体的金电极加入到样品溶液中室温温育，就可实现检测。在优化的实验条件下，本发明所制备的传感器针对黄曲霉毒素B1的检测限达到了8pM，具有很宽的浓度检测范围，而且该传感器可以用于多种复杂样品基质中黄曲霉毒素B1的灵敏检测。电化学传感器可以通过超纯水清洗得到再生，而且具有很好的稳定性。
附图说明
图1用于比较序列中不同碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测AFB1的信号响应；
图2为序列中第18个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测AFB1的典型方波伏安检测曲线；
图3为序列中第18个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器方波伏安法检测AFB1，MB峰电流与AFB1浓度关系；
图4用于说明本发明实施例中电化学传感器的选择性；
图5为利用第22个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测AFB1，MB峰电流与AFB1浓度关系；
图6为在稀释的白葡萄酒中检测AFB1的结果；
图7为在稀释的牛奶样品中检测AFB1的结果。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明作进一步的详细说明。
本发明结合核酸适配体和电化学传感器的优势，发展了利用适配体序列内部特定碱基上标记电化学标记物(例如亚甲基蓝(MB))检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，通过系统考察不同标记碱基位点，发现可产生灵敏信号响应的标记位点，可实现对黄曲霉毒素B1的灵敏快速检测，且这种电化学传感器容易再生可重复使用，该传感器容易制备，传感方法简便、响应快速且灵敏度高。
本发明的这种核酸适配体电化学传感器的构建和检测方法的基本原理如下，适配体序列特定碱基(如A、G、C或T碱基)位点带有电化学标记物(例如亚甲基蓝)修饰的核酸适配体被修饰固定到金电极上。当目标分子存在时，目标分子与适配体结合导致适配体构象改变，使电化学标记物分子周边的环境发生变化，导致电化学标记物在电极表面的电子传递速率改变，因而核酸适配体与目标分子结合后引起电化学标记物电流改变。根据电流信号的变化可以实现对黄曲霉毒素B1的检测。
本发明实施例考察了核酸适配体序列中一系列不同的T碱基标记位点，优选出了几个可以产生明显信号变化的T碱基标记位点，包括可对目标分子产生信号增加型响应的标记位点。采用最优的特定T碱基位点上标记了MB的核酸适配体构建出的电化学传感器可以实现高灵敏检测黄曲霉毒素B1，检测限达到8pM。这种新型电化学传感器响应迅速、容易再生、灵敏度高、稳定性好、检测浓度范围宽等优势。
需要说明的是，MB修饰的特定位点并不限于T碱基，还可以是A、G或C碱基，电化学标记物也并不限于亚甲基蓝，采用其他电化学标记物(例如二茂铁等)均可能获得相似的技术效果。
针对黄曲霉毒素B1的传感检测，所述核酸适配体为可结合黄曲霉毒素B1的核酸适配体，本发明实施例中用到的核酸适配体序列为SEQ ID NO：1(5′-CACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTG-3′)，其中5’端修饰硫醇分子用于将适配体固定到金电极表面。亚甲基蓝(methylene blue，缩写MB)修饰到序列中的特定T碱基上。
在另外的实施例中，核酸适配体序列还可以是在SEQ ID NO：1所示DNA序列的一端或两端减少或增加一个或多个碱基的序列，例如在其一端或两端减少1-3个碱基(例如2个)或增加1-10个(例如2、3、4、5、6、7、8、9个)碱基而得到的序列，例如：
5′-ACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGT-3′(SEQ ID NO：2)；
5′-GCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGC-3′(SEQ ID NO：3)；
5′-GGCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGCC-3′(SEQ ID NO：4)。
SEQ ID NO：2-4中的电化学标记物位于与SEQ ID NO：1的上述特定T碱基对应的T碱基上，例如，在一个实施例中，电化学标记物位于SEQ ID NO：1的T14、T18、T20或T22上，则相应地，在SEQ ID NO：2中，电化学标记物位于T13、T17、T19或T21上；在SEQ ID NO：3中，电化学标记物位于T15、T19、T21或T23上；在SEQ ID NO：4中，电化学标记物位于T16、T20、T22或T24上，以此类推。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的实验材料和试剂，如无特殊说明，均为自常规试剂公司购买得到的。
反应缓冲溶液：10mM Tris-HCl(pH 7.5)+20mM MgCl2，也可是含有20mM MgCl2的其他缓冲溶液(如HEPES缓冲溶液，或磷酸盐缓冲溶液)。
所用DNA序列由生工生物工程(上海)股份有限公司合成制备纯化。
金电极购自上海辰华公司，直径2毫米
电化学检测：采用三电极系统，工作电极为适配体修饰的金电极，参比电极为Ag/AgCl(3M KCl)，对电极为铂丝。电化学检测中，将特定位点上带有MB标记的核酸适配体修饰的金电极在含有不同浓度AFB1的反应缓冲溶液中室温温育3分钟后，采用方波伏安法进行测定(范围0～-0.5V，采样间隔1mV，幅度25mV，频率60Hz)，记录MB的峰电流。
实施例1：核酸适配体电化学传感器的制备
将特定T碱基带有MB标记且5’末端带有硫醇修饰的核酸适配体固定到金电极表面作为电化学传感器。利用硫醇与金的反应将末端带有硫醇的适配体固定到金电极表面，具体步骤如下：金电极表面采用粒径为0.05μm的氧化铝粉打磨，然后使用超纯水超声清洗电极。采用三电极体系，在0.5M H2SO4溶液中，-0.35V to 1.55V范围内进行反复循环伏安扫描，对金电极表面进行电化学清洗。表面处理干净的金电极浸没在50μL含有所述核酸适配体(1μM)的PBS溶液(137mM NaCl，2.7mM KCl，10mM Na2HPO4，1.75mM KH2PO4，pH 7.5)中，室温静置1小时，然后超纯水冲洗。把金电极浸没在200μL含2mM封闭剂巯基己醇(MCH)的PBS溶液中，室温静置2小时，然后超纯水清洗，制得电化学传感器。
实施例2：MB标记在不同T碱基位点的核酸适配体对应的电化学传感器对AFB1的信号响应比较
利用实施例1中的方法，制备电化学传感器，其中修饰核酸适配体到金电极时，其浓度为200nM。本实施例考察了一系列单个MB标记在核酸适配体序列(SEQ ID NO：1)中不同T碱基位置(T5，T7，T8，T10，T12，T14，T16，T18，T20，T22和T25，分别对应核酸适配体序列中第5、7、8、10、12、14、16、18、20、22和25个碱基T)的核酸适配体对应的电化学传感器，利用方波伏安法考察了所对应的电化学传感器在不含AFB1的空白样品和含有200nMAFB1样品溶液中MB的峰电流信号。如图1所示，T14、T18、T20、T22上标记MB对应的电化学传感器，溶液中加入AFB1，MB峰电流信号明显增加。而其他碱基T位点上标记MB对应的电化学传感器在AFB1加入后，MB峰电流信号有下降或者信号变化不显著。
实施例3：SEQ ID NO：1序列中第18个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测AFB1
按照实施例1中的方法，制备传感器，利用SEQ ID NO：1序列中第18个碱基T(T18)上标记MB的核酸适配体检测AFB1。电化学检测中，将核酸适配体修饰的金电极浸入到含有不同浓度AFB1的反应缓冲溶液中，温育3分钟后，采用方波伏安法进行测定。实验结果如图2所示，随着AFB1浓度的增加，测得的MB的方波伏安曲线峰电流逐渐升高。图2检测曲线由低到高对应的AFB1浓度分别为0、0.04、5、25、125、625、1500、3000nM AFB1。图3给出了AFB1浓度与方波伏安检测中MB对应的峰电流的关系，针对AFB1的检测，根据样品溶液峰电流与空白样品溶液峰电流差值是空白溶液电流信号偏差的3倍以上，确定方法检测限为8pM AFB1。图3所示，考察的最高检测浓度为3μM，信号变化显著。
实施例4电化学传感器的选择性
本发明考察了所述电化学传感器的选择性。利用实施例3中对应的电化学传感器，采用实施例3中相同的方法检测其他真菌毒素分子，如赭曲霉毒素A(OTA)，赭曲霉毒素B(OTB)，伏马毒素B1(FB1)，伏马毒素B2(FB2)，玉米赤霉烯酮(ZAE)，浓度均为200nM。与空白溶液样品相比，这些被检测的分子并不能使对应的电化学传感器产生明显的峰电流信号变化，而作为对照黄曲霉毒素B1(AFB1，浓度都是200nM)存在时与空白样品峰电流信号相比，峰电流信号明显增加。检测结果如图4所示，纵坐标显示了被测样品存在时产生的峰电流信号与空白样品溶液峰电流信号的差值。结果说明本发明的电化学传感器具有很好的选择性，考察的赭曲霉毒素A(OTA)，赭曲霉毒素B(OTB)，伏马毒素B1(FB1)，伏马毒素B2(FB2)，玉米赤霉烯酮(ZAE)不产生干扰。
实施例5：序列中第22个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测AFB1
按照实施例1中的方法，本实施例利用SEQ ID NO：1序列中第22个碱基T(T22)上标记MB的核酸适配体制备了电化学传感器，并检测AFB1。电化学检测中，将适配体修饰的金电极浸入到含有不同浓度AFB1的反应缓冲溶液中，温育3分钟后，采用方波伏安法进行测定。实验结果如图5所示，随着AFB1浓度的增加，测得的峰电流信号逐渐升高。针对AFB1的检测，根据样品溶液峰电流与空白溶液峰电流差值是空白溶液电流信号偏差的3倍以上，确定方法检测限为8pM AFB1。如图5所示，考察的最高检测浓度为3μM。
实施例6：利用核酸适配体电化学传感器检测稀释葡萄酒中的AFBn
按照实施例1中的方法，制备电化学传感器，利用SEQ ID NO：1序列第18个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测稀释的白葡萄酒中的AFB1。白葡萄酒采用反应缓冲溶液稀释10倍。电化学检测中，将适配体修饰的金电极浸入到含有不同浓度AFB1的10倍稀释的葡萄酒中，采用实施例2中相同方法进行检测。实验结果如图6所示，随着AFB1浓度的增加，测得的峰电流信号逐渐升高，表明所述的电化学传感器可以检测稀释葡萄酒中的AFB1。
实施例7、利用核酸适配体电化学传感器检测稀释牛奶中的AFB1
按照实施例1中的方法，制备电化学传感器，利用SEQ ID NO：1序列中第18个碱基T上标记MB的核酸适配体对应的电化学传感器检测稀释的牛奶中的AFB1。牛奶采用缓冲溶液10倍稀释。采用实施例2中的方法进行测定。实验结果如图7所示，随着AFB1浓度的增加，测得的峰电流信号逐渐升高，表明所述的电化学传感器可以检测稀释牛奶中的AFB1。
对比例1
将MB修饰在3’端，其余均与实施例3相同，结果表明：相应的传感器的检测限大于1nMAFB1，高于在T18碱基上修饰MB对应的传感器的检测限，表明MB修饰在特定碱基T18上的检测效果更好。
在本发明的另一些实施例中，采用SEQ ID NO：2-4所示的序列作为黄曲霉毒素B1核酸适配体，结果表明，上述序列能够取得相似的检测效果。
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
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Claims (10)

1.一种检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，包括：利用黄曲霉毒素B1核酸适配体修饰的电极，其特征在于，所述黄曲霉毒素B1核酸适配体带有电化学标记物，所述电化学标记物位于所述黄曲霉毒素B1核酸适配体的特定碱基上以增强检测信号。
2.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，其特征在于，所述黄曲霉毒素B1核酸适配体为特异性结合黄曲霉毒素B1的DNA序列。
3.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，其特征在于，所述电化学标记物为亚甲基蓝或二茂铁。
4.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，其特征在于，所述特定碱基选自A、G、C或T。
5.根据权利要求2所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，其特征在于，所述DNA序列包括SEQ ID NO：1或由SEQ ID NO：1组成，其5’端或3’端利用硫醇分子修饰，所述电化学标记物位于所述序列的第14、18、20或22位的T碱基上，或者，所述DNA序列包括在SEQ IDNO：1的一端或两端减少或增加一个或多个碱基的序列，所述电化学标记物位于与SEQ IDNO：1的上述T碱基对应的T碱基上。
6.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器，其特征在于，所述电极为金电极或具有金涂层或纳米金材料修饰的电极。
7.一种权利要求1-6任一项所述电化学传感器的制备方法，包括：将带有电化学标记物的黄曲霉毒素B1核酸适配体固定在电极上。
8.根据权利要求7所述的电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述电极为经过表面处理的金电极；优选地，所述表面处理包括将所述金电极打磨后使用超纯水超声清洗，再进行电化学清洗或化学清洗。
9.一种利用权利要求1-6任一项所述电化学传感器检测黄曲霉毒素B1的方法，包括将所述电极在含有待测样品的反应缓冲溶液中温育，然后采用电化学法进行测定；优选地，所述反应缓冲溶液为含有Mg2+(例如MgCl2，其浓度为1-100mM，优选为10-30mM)的Tris-HCl缓冲溶液、HEPES缓冲溶液或磷酸盐缓冲溶液，pH为7-8(例如7.2、7.5或7.8)。
10.根据权利要求9所述的方法，所述电化学法选自方波伏安法、差分脉冲伏安法或交流伏安法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109870497A (zh) * 2019-03-25 2019-06-11 天津科技大学 一种检测黄曲霉毒素b1电化学适配体传感器的制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102866185A (zh) * 2012-09-06 2013-01-09 北京航空航天大学 基于g-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法
CN105567836A (zh) * 2016-02-01 2016-05-11 河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 一种测定黄曲霉毒素b1的信号放大核酸适配体传感器及其制备方法
CN109342526A (zh) * 2018-11-26 2019-02-15 东南大学 一种电化学适体传感器检测黄曲霉毒素b1的方法
CN109870497A (zh) * 2019-03-25 2019-06-11 天津科技大学 一种检测黄曲霉毒素b1电化学适配体传感器的制备方法
CN110006868A (zh) * 2019-04-20 2019-07-12 北京师范大学 提升氧化石墨烯基适配体传感器响应性能的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102866185A (zh) * 2012-09-06 2013-01-09 北京航空航天大学 基于g-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法
CN105567836A (zh) * 2016-02-01 2016-05-11 河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 一种测定黄曲霉毒素b1的信号放大核酸适配体传感器及其制备方法
CN109342526A (zh) * 2018-11-26 2019-02-15 东南大学 一种电化学适体传感器检测黄曲霉毒素b1的方法
CN109870497A (zh) * 2019-03-25 2019-06-11 天津科技大学 一种检测黄曲霉毒素b1电化学适配体传感器的制备方法
CN110006868A (zh) * 2019-04-20 2019-07-12 北京师范大学 提升氧化石墨烯基适配体传感器响应性能的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHAO WANG 等: "A signal-on electrochemical aptasensor for rapid detection of aflatoxin B1 based on competition with complementary DNA", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109870497A (zh) * 2019-03-25 2019-06-11 天津科技大学 一种检测黄曲霉毒素b1电化学适配体传感器的制备方法
CN109870497B (zh) * 2019-03-25 2021-07-09 天津科技大学 一种检测黄曲霉毒素b1电化学适配体传感器的制备方法

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