CN111053743B - 一种前列地尔脂质体及其制备方法 - Google Patents

一种前列地尔脂质体及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111053743B
CN111053743B CN201811202568.6A CN201811202568A CN111053743B CN 111053743 B CN111053743 B CN 111053743B CN 201811202568 A CN201811202568 A CN 201811202568A CN 111053743 B CN111053743 B CN 111053743B
Authority
CN
China
Prior art keywords
liposome
alprostadil
solution
maltose
egg yolk
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811202568.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111053743A (zh
Inventor
李春雷
高玉清
刘勋涛
张素娟
李桂霞
王世霞
王艳玲
耿玉茹
杨丽霞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Original Assignee
CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd filed Critical CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Priority to CN201811202568.6A priority Critical patent/CN111053743B/zh
Publication of CN111053743A publication Critical patent/CN111053743A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111053743B publication Critical patent/CN111053743B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/557—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins
    • A61K31/5575—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins having a cyclopentane, e.g. prostaglandin E2, prostaglandin F2-alpha
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供一种前列地尔脂质体，含有前列地尔、蛋黄卵磷脂、麦芽糖和二丁基羟基甲苯，其中平均双层数量L为1.1‑1.5，优选L为1.3。所述的前列地尔脂质体，每个制剂单位含有前列地尔10‑40μg，蛋黄卵磷脂3‑40mg，麦芽糖50‑600mg和二丁基羟基甲苯20‑160μg，脂质体粒径80‑200nm。本发明的脂质体，在制备过程中形成较多的寡层脂质体，活性成分被包裹在不同层内，在释放时，包裹在里层的药物需要跨多层膜，从而延缓了药物从脂质体中的释放，使其具有缓释效果和更好的疗效。

Description

一种前列地尔脂质体及其制备方法
技术领域
本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种前列地尔脂质体及其制备方法。
背景技术
前列地尔(PGE1)具有广泛的生物学效应，临床上在心血管疾病、呼吸系统疾病、脑血管疾病、糖尿病并发症、肺动脉高压、肾病、男性不育疾病、肝肾综合征(HRS)等方面均有应用。但前列地尔不良反应表现在注射时局部有疼痛、肿胀、刺激性、发热、发红、瘙痒等现象发生，其机制是前列地尔进入人体后会刺激机体血管，产生5-羟色胺和缓激肽，引发对血管的炎症和疼痛作用，随着药物浓度的加大，其不良反应也会越严重。并且在血液循环过程中，前列地尔会被肺、肝及肾中的15-羟基脱氢酶迅速失活，从而导致疗效的丧失。
第一代的前列地尔为普通粉针剂，不具备靶向性，在肺部极易被灭活，副反应也非常大，注射后患者血管疼痛严重，还伴有严重的消化道反应，疗效虽好，但临床上无法应用。第二代前列地尔为环糊精包合物，通过环糊精包裹虽减少了一部分局部副反应，但不具备靶向性，用药剂量较大，一般为100-200μg，而到达病变部位的有效成分又较少，影响临床效果。第三代前列地尔为脂微球制剂，因将前列地尔包封在油水界面处，避免了前列地尔在血液循环过程中，尤其是在肺部的失活，减少了药物的使用剂量，常用剂量为5μg、10μg。但是脂微球制剂仍存在一定的刺激性，且稳定性差，必须在0-5℃贮存，产品的有效期只有12个月，其降解产物前列腺素A1限度高，约为主药的60％，不便于临床使用。
美国脂质体公司(The liposome Company,Inc.)申请的美国专利US5811118(下文简称118专利)，其1500ml批量脂质体的工艺和处方如下：
成分 总量 每1ml中含量
蛋黄卵磷脂(EPC) 7.06g 4.4mg
麦芽糖 150g 100mg
无水乙醇 8.38ml 0.00558ml
二丁基羟基甲苯(BHT) 45mg 0.03mg
前列地尔(PGE1) 15mg 0.01mg
其实施例1公开的脂质体的制备方法为：1500ml注射用水加入到烧杯中，并设置有一个氮气鼓泡至少30分钟。150g麦芽糖加入到烧杯中，搅拌直至溶解，仍有氮气保护。该混合溶液有1440ml，其pH为4.81。
在另一个烧杯中，加入7.06g EPC，6ml无水乙醇混合脂质体溶解，然后加入45mgBHT，混合直至溶解。然后向该混合溶液加入15mgPGE1，混合直至溶解。剩余2.38ml乙醇用于冲洗PGE1剩余物。
将该乙醇溶液吸入到10ml容量的玻璃注射器，并通过一个14号套管慢慢地注入到持续充氮气并快速搅拌的麦芽糖溶液中，时间11分钟。在加入乙醇/脂质混合物中，溶液变混浊，显示脂质体形成。然后用注射用水将悬浮液稀释至1500ml的最终体积。
该脂质体用0.2μm的膜挤出3遍，然后用0.1μm膜挤出5遍，所得的脂质体的粒径为169nm。然后将该脂质体溶液通过密理博的0.22μm膜除菌过滤。最终按照10.5ml/瓶的规格将样品装入50ml的西林瓶中，按照下述程序进行冷冻干燥。该冻干样可立即使用或储存供日后使用。
用10ml的0.01M醋酸盐缓冲液(pH4.3)复溶冻干样品，则混悬液的pH约为4.3。
冷冻干燥：50ml的西林瓶中装入10.5ml的脂质体混悬液，丁基橡胶塞。这些西林瓶放在冻干机的板层上，板层在0℃维持1.5h，然后将板层温度降低至-45℃，下降速率0.8℃/min，然后维持1h。然后将真空设定为100mμmHg。板层温度升高至-28℃，升温速率0.5℃/min，真空100mμmHg。在此条件下维持50h，然后将板层温度升高至25℃，升温速率0.5℃/min，并维持22h。然后将西林瓶在部分真空下塞住。
脂质体一般具有脂质分子形成的双层脂质膜，118专利中记载其所制备的脂质体为一种大的单层脂质体(LUV)，只含有一个双层脂质膜，其平均双层数量L为1。为了与其进行比较，发明人按照118专利的方法制备的脂质体，后文简称为118脂质体。
发明内容
本发明的前列地尔脂质体，与118脂质体不同，其中含有一定比例的寡层脂质体，其平均双层数量L为1.1-1.5，优选1.3，从而导致本发明制备的产品具有更好的缓释效应，以及更好的稳定性。本发明的实施例5对脂质体的稳定性进行了考察，长期试验稳定性数据表明，本发明的脂质体在2-8℃条件下，放置3年后，含量、有关物质等各项指标均符合产品质量标准要求。实施例6的疗效比较实验表明，本发明的前列地尔脂质体比118脂质体具有更好的疗效。
定义：
本发明中所述“寡层脂质体”(Oligolamellar vesicles，OLVs)是指双层脂质膜与内水相溶液交替形成的多层结构的囊泡，具有2-4层同心双层脂质膜。
本发明中所述“平均双层数量L”是指脂质分子形成的双层脂质膜的平均个数。
本发明提供一种前列地尔脂质体，含有前列地尔、蛋黄卵磷脂、麦芽糖和二丁基羟基甲苯，其特征在于平均双层数量L为1.1-1.5。
所述的前列地尔脂质体，其特征在于L为1.3。
所述的前列地尔脂质体，其特征在于每个制剂单位含有前列地尔10-40μg，蛋黄卵磷脂3-40mg，麦芽糖50-600mg和二丁基羟基甲苯20-160μg，所述脂质体粒径80-200nm。
所述的前列地尔脂质体，其特征在于每个制剂单位含有前列地尔20-30μg，蛋黄卵磷脂6-30mg，麦芽糖100-450mg和二丁基羟基甲苯40-120μg，所述脂质体粒径80-200nm。
所述的前列地尔脂质体，其特征在于每个制剂单位含有前列地尔20μg，蛋黄卵磷脂8.8mg，麦芽糖200mg和二丁基羟基甲苯60μg，所述脂质体粒径100-180nm。
本发明还提供制备上述前列地尔脂质体的方法，含有如下步骤：将前列地尔、蛋黄卵磷脂、二丁基羟基甲苯用无水乙醇溶解形成溶液，然后将上述溶液通过小孔三通装置恒速打入快速搅拌的麦芽糖溶液中，形成脂质体溶液，搅拌均匀后，将上述脂质体溶液采用高压挤出仪进行整粒处理，控制其粒径为80-200nm之间，除菌过滤，冻干，即得所述前列地尔脂质体。
其中，乙醇溶液恒速打入的速度为1-15ml/min，优选3-10ml/min。
其中，麦芽糖溶液的速度为1600-10000ml/min，优选2000-8000ml/min。
其中，三通孔径为0.5-2mm，优选0.7-1.5mm。
上述的前列地尔脂质体，其特征在于将其用于周围动脉闭塞性疾病引起的间歇性跛足，慢性动脉闭塞症引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，脏器移植术后抗栓治疗，动脉导管依赖性先天性心脏病。
本发明将活性物质前列地尔装载到脂质体中，提高了前列地尔的稳定性，减缓了在制备和贮存过程中前列地尔的降解，解决了前列地尔市售制剂脂微球仓储条件苛刻和有效期短的问题；延长了前列地尔在体内的循环时间，减少了15-羟基脱氢酶的作用，从而使本品的体内作用时间延长、疗效增强，体现了本品具有缓释性、高效性的制剂优势。
我们对本发明制备的产品进行了小鼠的常压耐缺氧试验、小鼠肺栓塞试验、大鼠动静脉旁路血栓试验、大鼠下腔静脉血栓试验，结果表明明显优于118脂质体。我们拟申请的适应症为周围动脉闭塞性疾病引起的间歇性跛足；慢性动脉闭塞症(血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化症等)引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，改善心脑血管微循环障碍；脏器移植术后抗栓治疗，用以抑制移植后血管内的血栓形成；动脉导管依赖性先天性心脏病，用以缓解低氧血症，保持导管血流以等待时机手术治疗。
采用本发明制备的脂质体，在制备过程中形成较多的寡层脂质体，PGE1被包裹在不同层内(见附图2-5)。在释放时，包裹在里层的药物需要跨多层膜，从而延缓了药物从脂质体中的释放，使其具有一定的缓释效果，其平均双层数量L为1.1-1.5。
本发明制备前列地尔脂质体的方法与118专利中方法的不同之处在于：本发明采用交叉流混合方式，即将脂相溶液以恒定的速度注入到循环流动的水相溶液中，如附图1所示，水相溶液用蠕动泵控制以一定的流速从水相罐底部流出，混合后再从顶部进入水相罐，而脂相则与水相的流动方向成垂直状态。当脂相溶液和水相溶液接触后，乙醇迅速扩散，磷脂分子聚集形成脂质体，同时高速流动的脂相溶液和水相溶液以垂直的方向相互接触，形成的巨大的撞击力可以起到降低脂质体粒度的作用。其结构通过电镜照片(附图2-5)和脂膜层数(附图6-9)的测定可以证明。
附图说明
附图1三通交叉流混合示意图
附图2实施例1批次1脂质体的冷冻透射电镜图
附图3实施例1批次2脂质体的冷冻透射电镜图
附图4实施例1批次3脂质体的冷冻透射电镜图
附图5实施例2的脂质体的冷冻透射电镜图
附图6实施例1批次1脂质体的31P-NMR扫描图谱
附图7实施例1批次2脂质体的31P-NMR扫描图谱
附图8实施例1批次3脂质体的31P-NMR扫描图谱
附图9实施例2的脂质体的31P-NMR扫描图谱
具体实施方式
以下实施例是对本发明的具体说明，不应对本发明的范围构成限制。其中实施例1-3列举了本发明前列地尔脂质体的处方和制备，实施例4测定了所述脂质体的平均双层数量L值，实施例5对脂质体的稳定性进行了考察，实施例6是本发明前列地尔脂质体与118脂质体的疗效比较实验。
实施例1：将300mg的前列地尔、132g的蛋黄卵磷脂、900mg的BHT用165ml的无水乙醇溶解形成脂相溶液，将3000g麦芽糖制成水相溶液，浓度为10％，调整水相溶液和脂相溶液的流速，分别为2000ml/min和3ml/min，然后将乙醇溶液采用附图1方式打入快速流动的麦芽糖溶液中，待脂相溶液全部注入到麦芽糖溶液后，继续搅拌约10min，使溶液混合均匀。将上述脂质体溶液采用高压挤出仪整粒，0.45μm+0.22μm+0.1μm的聚碳酸酯膜各一张，挤出1-5遍，将其平均粒径控制在120-200nm，粒径检测采用马尔文激光粒度仪Zetasizer NanoZS，实测值为147.4nm。
将药液经0.22μm滤芯除菌过滤后，分装于经灭菌的西林瓶中，制成15000个制剂单位，每瓶2ml，按照设定的程序进行冷冻干燥处理，即可得到稳定的冻干产品。冻干程序如下所示：
Figure BDA0001830363570000051
对冻干后样品采用核磁共振波谱法测定测得平均双层数量L为1.31，见附图6，采用冷冻透射电镜观察得到附图2。
实施例2：将300mg的前列地尔、90g的蛋黄卵磷脂、900mg的BHT用115ml的无水乙醇溶解形成脂相溶液，将2400g麦芽糖制成水相溶液，浓度为8％，调整水相溶液和脂相溶液的流速，分别为4000ml/min和6ml/min，然后将乙醇溶液采用图1方式打入快速流动的麦芽糖溶液中，待脂相溶液全部注入到麦芽糖溶液后，继续搅拌约20min，使溶液混合均匀。将上述脂质体溶液采用高压挤出仪整粒，0.45μm+0.22μm+0.1μm的聚碳酸酯膜各一张，挤出1-5遍，将其平均粒径控制在120-200nm，粒径检测采用马尔文激光粒度仪Zetasizer Nano ZS，实测值为131.6nm，后续操作同实施例1。对冻干后样品采用核磁共振波谱法测得平均双层数量L为1.135，见附图9。采用冷冻透射电镜观察得到附图5。
实施例3：将300mg的前列地尔、300g的蛋黄卵磷脂、1500mg的BHT用375ml的无水乙醇溶解形成脂相溶液，将3600g麦芽糖制成水相溶液，浓度为12％调整水相溶液和脂相溶液的流速，分别为6500ml/min和10ml/min，然后将乙醇溶液采用图1方式打入快速流动的麦芽糖溶液中，待脂相溶液全部注入到麦芽糖溶液后，继续搅拌约30min，使溶液混合均匀。将上述脂质体溶液采用高压挤出仪整粒，0.45μm+0.22μm+0.1μm的聚碳酸酯膜各一张，挤出1-5遍，将其平均粒径控制在120-200nm，粒径检测采用马尔文激光粒度仪Zetasizer Nano ZS，实测值为174.1nm，后续操作同实施例1。采用核磁共振波谱法测得平均双层数量L为1.46，并采用冷冻透射电镜观察。
实施例4：按照实施例1的方法再制备5批产品，分别命名为批次2、3、4、5和6，实施例1的产品命名为批次1，采用31P-NMR的方法对平均双层数量L进行测定，数据见表1。
表1
批次 1 2 3 4 5 6
L 1.31 1.285 1.295 1.31 1.29 1.26
实施例5：采用中国药典2015年版规定的方法，对实施例1批次1的产物进行稳定性考察，长期稳定性试验结果见表2。实施例4中其余5个批次的产品的长期稳定性数据也符合产品质量标准要求。
表2长期试验稳定性数据
Figure BDA0001830363570000061
Figure BDA0001830363570000071
从表2可见，本发明的脂质体在2-8℃条件下，放置3年后，含量、有关物质等各项指标与0月时相比，均无明显变化，符合产品质量标准要求。
实施例6：对实施例1批次1的产物进行药效学评价，并比较其与118脂质体的疗效强弱。
(1)对常压耐缺氧小鼠存活时间的影响
试验方法：18-20g雄性KM小鼠分别静脉单次给予生理盐水、本发明脂质体20μg/kg和118脂质体20μg/kg。在给药后30min分别将小鼠立即放入盛有10g钠石灰的150mL广口瓶内，盖上瓶盖用凡士林密封，同时记时，以小鼠停止呼吸为死亡指标，记录存活时间，试验结果采用SPSS19.0统计软件，One-way ANOVA进行组间检验。试验结果见表3。
表3
药物 剂量(μg/kg) 动物数 存活时间(min) 存活时间延长率(％)
空白组 0 12 15.9±1.3 --
本发明脂质体 20 13 19.2±2.1***,$ 20.8
118脂质体 20 12 17.5±1.6 10.1
***P<0.001,与空白组比较；$P<0.05与118脂质体比较。
从上述结果可以看出：单次静脉给药后30min，本发明前列地尔脂质体20μg/kg和118脂质体20μg/kg均能显著延长常压缺氧小鼠的存活时间。在给药后30min与118脂质体(P<0.05)相比疗效显著增强。本发明脂质体有效作用维持时间明显延长。
(2)对胶原-肾上腺素诱导的小鼠肺血栓模型的影响
18-22g雄性KM小鼠分别静脉单次给予生理盐水、本发明脂质体5，10和20μg/kg。在给药后10min和30min分别尾静脉再次注射胶原-肾上腺素混悬液11mL/kg(胶原蛋白1.25mg/mL，肾上腺素45μg/mL)，造成小白鼠体内血栓模型。观察注入胶原-肾上腺素混悬液后5min内小鼠死亡数，计算小鼠的存活率。存活率采用SPSS19.0进行组间X2检验。试验结果见表4。
表4
Figure BDA0001830363570000072
Figure BDA0001830363570000081
***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05，与空白组比较；
从上述结果可以看出：与空白对照组相比，本发明前列地尔脂质体5，10和20μg/kg剂量在单次静脉给药后10min和30min均能显著延长肺血栓小鼠的生存率。本发明脂质体有效作用维持时间明显延长。
(3)对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响
雄性SD大鼠分别静脉单次给予生理盐水、本发明前列地尔脂质体10μg/kg和118脂质体10μg/kg。静脉注射给药18min后，大鼠腹腔注射10％水合氯醛(3.5mL/kg)麻醉，仰位固定，分离出右侧颈总动脉和左侧颈外静脉。在三段乙烯管的中段放入一根事先称重的长6cm的棉线，以肝素生理盐水溶液(12.5U/mL)充满。将该管的一端插入左颈外静脉后，注入12.5U/mL肝素0.2mL，夹住管壁。另一端插入右颈总动脉，手术完成后，开放血流，血液从右侧颈总动脉流至聚乙烯管内，再返流入左颈外静脉。15min后阻断血流，迅速取出线并称重，总重量减去线重量即得血栓湿重。随后将线40℃烘干称干重。计算血栓的干重和湿重，试验结果采用SPSS19.0统计软件，One-way ANOVA进行组间检验。试验结果见表5。
表5
Figure BDA0001830363570000082
**P＜0.01，与空白组相比。
从上述结果可以看出：单次静脉给药后18min，本发明前列地尔脂质体(10μg/kg)与等剂量118脂质体均能显著降低大鼠动-静脉旁路形成血栓的湿重，对血栓湿重的抑制率分别为27.4％和16.3％。与等剂量118脂质体相比，本发明前列地尔脂质体(10μg/kg)作用更佳。
(4)对大鼠下腔静脉血栓形成的影响
雄性SD大鼠分别静脉单次给予生理盐水、本发明前列地尔脂质体2.5，5和10μg/kg。静脉注射给药30min后，大鼠腹腔注射10％水合氯醛(3.5mL/kg)麻醉，腹中部皮肤去毛，沿腹正中线剪开进腹，将腹腔内肠管移出体外。打开腹膜，仔细游离左肾静脉与下腔静脉汇合处，用4号外科非吸收性丝线于左肾静脉下方结扎下腔静脉和左肾静脉水平下腔静脉段主要属支，将外置肠管回纳腹腔。依次缝合腹壁和皮肤。2h后重新开腹，然后在结扎线下方2cm处夹闭血管，纵向剖开下腔静脉管腔，用镊子轻镊出栓块，立即称量血栓湿重，然后置60℃烘箱中烘干24h，精确称量干重。试验结果采用SPSS19.0统计软件，One-way ANOVA进行组间检验。试验结果见表6。
表6
Figure BDA0001830363570000091
**p<0.01，与空白组相比；***p<0.001，与空白组相比。
从上述试验结果可以看出，与空白组相比，本发明前列地尔脂质体2.5，5和10μg/kg剂量依赖性的降低大鼠下腔静脉血栓的湿重和干重。
本发明将活性物质前列地尔装载到脂质体的双层中，提高了前列地尔的稳定性，减缓了在制备和贮存过程中前列地尔的降解，解决了前列地尔市售制剂脂微球仓储条件苛刻和有效期短的问题；长期稳定性试验数据表明：本发明产品在2-8℃贮存，产品的有效期可达到36个月，且前列腺素A1显著降低，36个月的稳定性数据显示前列腺素A1约占标示量的3.5％，而脂微球的有效期为12个月。
本发明将活性物质前列地尔装载到脂质体的双层中，延长了前列地尔在体内的循环时间，减少了15-羟基脱氢酶的作用，从而使本品的体内作用时间延长、疗效增强，体现了本品具有缓释性、高效性的制剂优势。
前列地尔脂质体是蛋黄卵磷脂形成的脂质体，前列地尔由于在低pH下有较强的脂溶性，嵌在于脂质体的磷脂双分子层中。本品的平均粒度在100nm以上，形成一定的寡层脂质体，前列地尔被包裹在不同层内(附图2)。在释放时，包裹在里层的药物需要跨多层膜，延缓了药物从脂质体中的释放，使其具有一定的缓释效果，从而使本品的疗效增强(实施例5和6)。
本发明采用交叉流的混合方式制备的脂质体均有一定比例的寡层脂质体，前列地尔被包裹在不同层内(附图2)，在释放时，包裹在里层的药物需要跨多层膜，延缓了药物从脂质体中的释放，使其具有一定的缓释效果，从而导致本发明制备的产品的疗效增强。而118专利中明确声明，其脂质体为一种大的单层脂质体(LUV)，其产品的药物释放相对于本品而言，释放速度应快于本发明产品，从而会导致其疗效应低于本品。

Claims (8)

1.一种前列地尔脂质体，其特征在于平均双层数量L为1.1-1.5，每个制剂单位含有前列地尔10-40μg，蛋黄卵磷脂3-40mg，麦芽糖50-600mg和二丁基羟基甲苯20-160μg，所述脂质体粒径80-200nm，所述前列地尔脂质体由下述方法制备得到：将前列地尔、蛋黄卵磷脂、二丁基羟基甲苯用无水乙醇溶解形成溶液，然后将上述溶液通过小孔三通装置恒速打入快速搅拌的麦芽糖溶液中，形成脂质体溶液，搅拌均匀后，将上述脂质体溶液采用高压挤出仪进行整粒处理，控制其粒径为80-200nm之间，除菌过滤，冻干，即得所述前列地尔脂质体，所述平均双层数量L是指脂质分子形成的双层脂质膜的平均个数。
2.如权利要求1所述的前列地尔脂质体，其特征在于平均双层数量L为1.3。
3.如权利要求1所述的前列地尔脂质体，其特征在于每个制剂单位含有前列地尔20-30μg，蛋黄卵磷脂6-30mg，麦芽糖100-450mg和二丁基羟基甲苯40-120μg，所述脂质体粒径80-200nm。
4.如权利要求3所述的前列地尔脂质体，其特征在于每个制剂单位含有前列地尔20μg，蛋黄卵磷脂8.8mg，麦芽糖200mg和二丁基羟基甲苯60μg，所述脂质体粒径100-180nm。
5.如权利要求1所述的前列地尔脂质体，其特征在于乙醇溶液恒速打入的速度为3-10ml/min。
6.如权利要求1所述的前列地尔脂质体，其特征在于麦芽糖溶液快速搅拌的速度为2000-8000ml/min。
7.如权利要求1所述的前列地尔脂质体，其特征在于三通孔径为0.7-1.5mm。
8.权利要求1-4中任一项所述的前列地尔脂质体在制备治疗周围动脉闭塞性疾病引起的间歇性跛足、慢性动脉闭塞症引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛、脏器移植术后抗栓治疗、动脉导管依赖性先天性心脏病的药物中的应用。
CN201811202568.6A 2018-10-16 2018-10-16 一种前列地尔脂质体及其制备方法 Active CN111053743B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811202568.6A CN111053743B (zh) 2018-10-16 2018-10-16 一种前列地尔脂质体及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811202568.6A CN111053743B (zh) 2018-10-16 2018-10-16 一种前列地尔脂质体及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111053743A CN111053743A (zh) 2020-04-24
CN111053743B true CN111053743B (zh) 2023-07-14

Family

ID=70296639

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811202568.6A Active CN111053743B (zh) 2018-10-16 2018-10-16 一种前列地尔脂质体及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111053743B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023151638A1 (zh) * 2022-02-11 2023-08-17 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 前列地尔脂质体预防和/或治疗肾损伤的用途

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5811118A (en) * 1987-05-22 1998-09-22 The Liposome Company, Inc. Methods of treatment using unilamellar liposomal arachidonic acid metabolite formulations
US5262168A (en) * 1987-05-22 1993-11-16 The Liposome Company, Inc. Prostaglandin-lipid formulations
US5925375A (en) * 1987-05-22 1999-07-20 The Liposome Company, Inc. Therapeutic use of multilamellar liposomal prostaglandin formulations
DE69423773T2 (de) * 1993-11-04 2000-07-20 Liposome Co Inc Behandlungsverfahren unter verwendung unilamellar-liposomaler arachiddonsäuremetabolit-formulierungen
US9962393B1 (en) * 2015-06-21 2018-05-08 Angiosoma Research, Inc. Method for treating vascular disease by administering a liposomal prostaglandin composition

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
杨明 等.脂质体的制备.《药剂学》.中国医药科技出版社,2018,(第2版), *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111053743A (zh) 2020-04-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2616494C2 (ru) Наночастицы, несущие химиотерапевтическое противораковое лекарственное средство
AU2022204217B2 (en) Compositions comprising 5-cholesten-3, 25-diol, 3-sulfate (25hc3s) or pharmaceutically acceptable salt thereof and at least one cyclic oligosaccharide
US20210338570A1 (en) Radiation sensitizer or anti-cancer chemotherapy sensitizer
AU2016276767B2 (en) Composition and methods for treatment of loss of fluids leading to hypotension and/or hypovolemia
EP3551198B1 (en) Compositions and methods for treatment of loss of fluids leading to hypotension and/or hypovolemia
US20080214480A1 (en) Method for Treating Sickle Cell Disease and Sickle Cell Disease Sequalae
CN111053743B (zh) 一种前列地尔脂质体及其制备方法
CN108144042B (zh) 一种含葡萄糖聚合物的腹膜透析液及其制备方法
AU2007246046A1 (en) Pharmaceutical composition comprising high concentrate of polydatin
WO2020108193A1 (zh) 一种前列腺素e1甲酯注射用冻干制剂及制备和应用
CN113577096B (zh) 一种用于治疗慢性创伤的组合制剂及其制备方法
CN113456654B (zh) 一种稳定的药物组合物
CN106562953B (zh) 羟基红花黄色素a在制备治疗糖尿病足溃疡的药物中的应用、药物及药物制备方法
JI et al. Preparation of disulfiram naonosuspensions and their anti-tumor efficacy in vitro and in vivo
CN101879308B (zh) 人尿激肽原酶在制备治疗急性肾衰药物中的应用
CN114306355B (zh) 二苯乙烯苷在制备预防或治疗失血性休克药物中的应用
CN112451475B (zh) 一种用于治疗空洞型肺结核的长效缓释凝胶
Bell et al. Autotransplantation of the pancreas in sheep: insulin secretion from the transplant
CN111671718B (zh) 一种氟比洛芬酯注射液及其制备方法
CN109771414B (zh) 一种治疗失血性休克的药物组合物
CN112957477B (zh) 一种调控肝窦内皮细胞的纳米载体及其制备方法和应用
CN118105417A (zh) 麻黄根乙酸乙酯部位在预防或治疗肺动脉高压中的应用
CN116115566A (zh) 一种七叶皂苷钠脂质体及其制备方法
김재선 Efficacy, and safety of 6% hydroxyethyl starch 130/0.4 to albumin in post-operative patients following pancreaticoduodenectomy
WO2024023295A1 (en) Imatinib formulation for parenteral administration

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40026786

Country of ref document: HK

SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant