CN111019163B - 一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法及所得产品和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法及所得产品和应用，该方法先将透明质酸或其盐在含有三偏磷酸钠的碱性溶液中进行第一步交联反应，然后在快速搅拌下流加有机溶剂，使透明质酸以微球形式析出，再在微球中进行第二步交联反应；反应结束后调节反应液pH值至中性，继续流加有机溶剂，过滤并收集沉淀物，经洗涤和干燥得产物。本发明制备方法既保证了交联剂高效的利用率，又保证了交联反应有效的交联效率，所得产品经水溶胀得到的凝胶具有优异的抗透明质酸酶降解的能力，应用前景广泛。

Description

一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法及所得产品和 应用

技术领域

本发明涉及一种透明质酸交联产物的制备方法，特别是涉及一种三偏磷酸钠作为交联剂制备交联透明质酸粉末的方法，还涉及按照此方法得到的产品和该产品的应用，属于透明质酸技术领域。

背景技术

透明质酸是一种直链高分子酸性粘多糖，是人体内一种固有的成分，没有种属特异性，广泛分布在人体的关节软骨、晶状体、皮肤等组织中。保湿作用是透明质酸重要的作用之一，与其他保湿剂相比，周围环境的相对湿度对其保湿型的影响较小。透明质酸具有良好的生物相容性和生物降解性，可作为生物医药材料，在医学上有广泛应用，但其稳定性差，易被酸、碱、热、自由基以及透明质酸酶等降解，限制了其应用。

为了应对透明质酸的上述缺点，很多学者纷纷对透明质酸进行改性研究，在透明质酸的羧基或羟基上进行结构修饰，如酯化改性、酰胺化改性、交联改性和接枝改性等手段，目前研究较多的是交联改性，主要应用于化妆品和医疗器械领域，使用的交联剂主要为1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)。

专利CN 101821294 B提供了一种溶胀性交联透明质酸粉末的制造方法，该方法使用的交联剂为二乙烯基砜和缩水甘油醚类，为透明质酸粉末在醇溶液中的非均相反应，交联发生在透明质酸颗粒的表面，具有交联效率低下、交联剂使用量大、透明质酸粉末的颗粒度大小影响产物交联度等缺点。

专利CN 101878230 B提供了一种乳液中交联透明质酸的方法，该方法将透明质酸的碱水溶液加入油相中，形成油包水的乳液，再加入包含二缩水甘油醚类交联剂的溶液，进行交联反应。该法同样为非均相反应，交联剂与油包水乳液中的透明质酸进行交联反应，具有交联效率低下、交联度不可控以及交联剂残留等问题。

专利CN 105670011 B描述了一种交联透明质酸干粉的制备方法，透明质酸溶解于预混了缩水甘油醚类交联剂的无机盐水溶液中，溶解均匀后，流加有机溶剂使透明质酸析出沉淀，交联反应在该沉淀内部进行。该法透明质酸反应浓度低，基本在1％左右，交联剂在中性反应条件下不能充分发挥其作为交联剂的作用，交联剂利用率低，并且所得干粉在使用时配制成的0.2％凝胶的动力粘度变化很大，通过调整反应参数来调整凝胶有/无颗粒感的可控性较差，不适合大规模生产。

专利CN 109762183 A涉及一种三偏磷酸钠交联透明质酸钠凝胶的制备方法，该方法将透明质酸与三偏磷酸钠在碱性溶液中进行交联反应，反应结束后，将凝胶切小块于酸性溶液中溶胀，至体积不变即得无色、透明、无颗粒的透明质酸交联水凝胶。该法制备的是无颗粒的水凝胶，制备过程中使用的交联剂用量大，并且由于透明质酸本身浓度太高，使得整个反应必须在半固态下进行，在交联反应和溶胀阶段对设备的要求非常高，不适合大规模生产。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法及所得的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末，该方法采用安全性高的三偏磷酸钠作为交联剂，采用交联---有机溶剂沉淀----二次交联的方式进行反应，透明质酸先后在溶液和微球中进行交联反应，交联剂利用率高，交联效率高，所得产品的抗酶解能力增强，同时具有稳定的粘度。此外，通过交联剂用量的调整可以使所得产品在水溶胀后具有平滑感和颗粒感两种不同的肤感体验。

进一步的，本发明还提供了上述所得三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的应用。水溶胀后具有平滑感的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末形成的凝胶具有滑而不腻的肤感，相比普通透明质酸更耐酶解，可以应用到膏霜乳液等化妆品、关节注射液和组织填充剂中。水溶胀后有颗粒感的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末形成的凝胶具有柔软的颗粒，经过短暂轻盈的按摩即可破裂，可以应用到洗面奶、沐浴液、洗发水等洗护用品中，利用其较高的黏稠度也可用于手术中防粘连和光热电辐射等的隔离。

本发明提供了一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将三偏磷酸钠与碱性溶液混合，搅拌均匀；

(2)将透明质酸或其盐加入步骤(1)的溶液中，在搅拌下进行交联反应；

(3)在搅拌下向步骤(2)的反应液中流加有机溶剂或其水溶液，使透明质酸或其盐以及透明质酸或其盐的交联产物以微球形式析出，流加结束后在静止状态下进行交联反应；

(4)反应结束后，调整步骤(3)的反应液pH值至中性，然后在搅拌下流加有机溶剂或其水溶液使反应产物以微球形式沉淀，收集沉淀，将沉淀洗涤、干燥，得三偏磷酸钠交联透明质酸粉末。

进一步的，步骤(1)中，所述碱性溶液为透明质酸交联所常用的碱性溶液，例如氢氧化钠、氢氧化钾、强碱弱酸盐的水溶液，所述强碱弱酸盐可以是碳酸钠、碳酸氢钠等，常用的碱性溶液为氢氧化钠水溶液。

进一步的，步骤(1)中，所用的碱性溶液的浓度为0.5～1.5wt％，优选为0.8～1.2wt％。

进一步的，步骤(2)中，所用的透明质酸或其盐的分子量为400～2000kDa，优选为1000～ 1500kDa。在此分子量范围内，所得产品可以满足不同应用环境的粘度及其他性能要求。所述的透明质酸盐是生物医药领域常用的盐，例如钠盐、钾盐、钙盐等，最常用的是钠盐。

进一步的，透明质酸或其盐在步骤(2)的溶液中的浓度为0.08～0.15g/mL，优选为0.09～ 0.12g/mL。

进一步的，步骤(2)中，三偏磷酸钠、碱性溶液和透明质酸或其盐形成的混合物中，透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.004～0.04。随着三偏磷酸钠用量的增加，最终所得交联透明质酸粉末经水溶胀后的状态发生变化，当透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.004～0.015时，最终得到的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末经水溶胀后为无颗粒、平滑的凝胶，该凝聚具有滑而不粘的肤感，当透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.02～ 0.04时，最终得到的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末经水溶胀后为有明显磨砂软颗粒的凝胶，该磨砂软颗粒经过短暂轻盈的按摩即可破裂。当透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为 1:0.015～0.02时，最终得到的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末经水溶胀后形成的凝胶中有颗粒存在，但肤感不明显。优选的，透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.008～0.03，在此质量比范围内，具有交联剂利用度高和制得的水凝胶动力粘度变化幅度小的优势。

进一步的，步骤(2)中，交联反应的温度为20～60℃，优选为25～45℃。在此温度下，反应时间为0.5～1h。

进一步的，步骤(2)中，在300～400rpm的搅拌速度下进行交联。

进一步的，步骤(3)中，在400～600rpm的高搅拌转速下流加有机溶剂或其高浓度水溶液，会使体系内析出沉淀。在高速搅拌下流加有机溶剂或其水溶液，可以使透明质酸或其盐以及其交联产物以微球的形式析出，而非以纤维状沉淀的形式。透明质酸或其盐以及其交联产物形成细小的微球后，停止搅拌静止状态下可以拉近微球间的距离，在接近均相的环境中，微球内和微球间的交联反应同时进行，交联度可控，交联效率大幅提升。

进一步的，步骤(3)中，所述有机溶剂可以是任意可以使透明质酸、透明质酸盐、透明质酸或其盐的交联产物从水溶液中析出的溶剂，例如乙醇、丙酮、丙醇、异丙醇、乙二醇等，优选为乙醇。有机溶剂水溶液的浓度大于等于75wt％小于100wt％。有机溶剂或其水溶液的加入量与步骤(2)中的透明质酸或其盐的体积质量比为8～20mL:1g。

进一步的，步骤(3)中，交联反应的温度为20～60℃，优选为25～45℃。在此温度下，反应时间为5～8h。

进一步的，步骤(4)中，向体系中加入酸使pH至中性，所述酸为盐酸或磷酸溶液，优选为盐酸溶液。

进一步的，步骤(4)中，在400～600rpm的搅拌转速下流加有机溶剂或其水溶液，使产物以微球形式析出。所用有机溶剂为乙醇、丙酮、丙醇、异丙醇或乙二醇，优选为乙醇。有机溶剂水溶液的浓度大于等于75wt％小于100wt％。优选的，有机溶剂或其水溶液的加入量与步骤(2)中的透明质酸或其盐的体积质量比为3～5mL:1g。

进一步的，步骤(4)中，收集的沉淀用有机溶剂或其水溶液洗涤，有机溶剂或其水溶液的定义如前面所述。优选的，沉淀先用浓度较低的有机溶剂水溶液洗涤，然后再用浓度较高的有机溶剂水溶性或纯的有机溶剂进行洗涤。

进一步的，步骤(4)中，所述干燥为真空干燥，真空干燥温度为25～60℃，优选为40～ 50℃。

本发明上述方法可以得到两种不同肤感的交联透明质酸产物。该产物具有粘度稳定、抗酶解能力强的优势，也在本发明保护范围之内。水溶胀后具有平滑感的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末形成的凝胶具有滑而不腻的肤感，相比普通透明质酸更耐酶解，可以应用到膏霜乳液等化妆品、关节注射液和组织填充剂中。水溶胀后有颗粒感的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末形成的凝胶具有柔软的颗粒，经过短暂轻盈的按摩即可破裂，对皮肤可以起到按摩的作用，可以应用到洗面奶、沐浴液、洗发水等洗护用品中，利用其较高的黏稠度也可用于手术中防粘连和光热电辐射等的隔离。因此，上述三偏磷酸钠交联透明质酸粉末在化妆品、洗护用品、外科手术防粘连产品、关节注射液、光热电辐射隔离产品、组织填充剂中的应用也在保护范围之内。

本发明的有益效果如下：

(1)本发明先将透明质酸或其盐在含有三偏磷酸钠的碱性溶液中进行第一步交联反应，然后在快速搅拌下流加有机溶剂或其水溶液，使透明质酸及交联产物以微球形式析出，再在微球中进行第二步交联反应，既保证了交联剂高效的利用率，又保证了交联反应有效的交联效率，在微球中交联形成的交联透明质酸结构会更加致密，经水溶胀得到的凝胶具有优异的抗透明质酸酶降解的能力，且吸水和保水能力更强；

(2)本发明使用FDA已批准用作食用级淀粉的三偏磷酸钠作为交联剂，交联剂安全、对人体无害，且交联剂使用量大幅减少；

(3)所得交联透明质酸粉末具有平滑和颗粒两种不同的肤感，水溶胀后肤感较普通透明质酸更加清爽、不粘腻，同时稳定性更好；

(4)所得交联透明质酸粉末可以用于化妆品、洗护用品、外科手术防粘连产品、关节注射液、光热电辐射隔离产品、组织填充剂等产品中，应用范围广阔。

具体实施方式

为更好地理解本发明，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。下述说明仅是示例性的，并不对其内容进行限制。

下述实施例中，如无特别说明，所述浓度均为质量百分浓度。

实施例1

将2g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.26g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴30℃下加入20g透明质酸(分子量为1360kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应0.5h。调整转速为600rpm，向反应液中流加320mL 95％乙醇，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于乙醇溶液中，继续交联反应6h。开启搅拌，用2mol/L 的盐酸溶液调节反应液pH至7.2，600rpm下继续流加60mL 95％乙醇，微球沉淀于乙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥 12h，得交联透明质酸粉末18g。

实施例2

将2g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.16g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴20℃下加入20g透明质酸(分子量为1360kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应1h。调整转速为600rpm，向反应液中流加400mL 95％乙醇，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于乙醇溶液中，交联反应8h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至7.0，600rpm下继续流加100mL 95％乙醇，微球沉淀于乙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸粉末16.8g。

实施例3

将3g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.072g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴25℃下加入18g透明质酸(分子量为1700kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下400rpm搅拌反应0.5h。调整转速为600rpm，向反应液中流加270mL异丙醇，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于异丙醇溶液中，交联反应5h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至7.2，600rpm下继续流加60mL异丙醇，微球沉淀于异丙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％异丙醇、异丙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，40℃真空干燥 18h，得交联透明质酸粉末16.6g。

实施例4

将1g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.13g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴30℃下加入16g透明质酸(分子量为1360kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应0.5h。调整转速为600rpm，向反应液中流加240mL 95％乙醇，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于乙醇溶液中，交联反应6h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至6.8，600rpm下继续流加50mL 95％乙醇，微球沉淀于乙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸粉末13.6g。

实施例5

将2g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.4g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴40℃下加入 20g透明质酸(分子量为1360kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应0.5h。调整转速为600rpm，向反应液中流加320mL 95％乙醇，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于乙醇溶液中，交联反应7h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至7.0，600rpm下继续流加80mL 95％乙醇，微球沉淀于乙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸粉末16.5g。

实施例6

将1g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.75g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴40℃下加入30g透明质酸(分子量为500kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应1h。调整转速为400rpm，向反应液中流加600mL丙酮，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于丙酮溶液中，交联反应8h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至7.2，400rpm下继续流加120mL丙酮，微球沉淀于丙酮溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％丙酮、丙酮各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸粉末27g。

实施例7

将3g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.72g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴40℃下加入18g透明质酸(分子量为2000kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应0.5h。调整转速为600rpm，向反应液中流加160mL 95％乙醇，透明质酸及交联产物以微球状态析出，流加结束停止搅拌，静置，微球悬浮于乙醇溶液中，交联反应6h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至6.9，600rpm下继续流加60mL 95％乙醇，微球沉淀于乙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸粉末16.8g。

实施例8

将真空干燥温度由50℃调整为60℃，其余参数及操作同实施例1，得交联透明质酸粉末 17.8g。

实施例9

将水浴温度调整为20℃，其余参数及操作同实施例1，得交联透明质酸粉末18.4g。

实施例10

将水浴温度调整为60℃，其余参数及操作同实施例5，得交联透明质酸粉末17.2g。

对比例1

将0.8g氢氧化钠溶解于80mL水中，加入2g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴30℃下加入20g透明质酸(分子量为1360kDa)，分散均匀，反应6h后结束，将凝胶切小块后，于0.1mol/L的900mL盐酸溶液中溶胀，间歇搅拌，溶胀至体积不变，得约2％交联透明质酸凝胶，冷冻干燥得海绵状交联透明质酸18.9g。

对比例2

将2g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.26g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴30℃下加入20g透明质酸(分子量为1360kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm向反应液中流加360mL95％乙醇，透明质酸以纤维状沉淀析出，反应体系呈现固液混悬状态，搅拌交联反应6h，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至6.9，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿粉末，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸粉末18.3g。

对比例3

将2g氢氧化钠溶解于200mL水中，加入0.26g三偏磷酸钠，搅拌溶解，水浴30℃下加入20g透明质酸(分子量为1360kDa)，搅拌溶解后，溶液状态下300rpm搅拌反应0.5h。维持转速300rpm，向反应液中流加320mL 95％乙醇，透明质酸及交联产物以纤维状态析出，流加结束停止搅拌，静置，析出的纤维状透明质酸沉降于乙醇溶液下层，继续交联反应6h。开启搅拌，用2mol/L的盐酸溶液调节反应液pH至7.2，300rpm下继续流加60mL 95％乙醇，纤维状交联透明质酸沉淀于乙醇溶液底部，过滤收集沉淀，依次用75％乙醇、95％乙醇各洗涤三次，过滤得湿固体，50℃真空干燥12h，得交联透明质酸纤维状固体17.6g。

实施例11抗酶解试验

取46.2μL透明质酸酶原液加入至50mL容量瓶中，加入5mM PBS缓冲溶液定容，配制成300IU/mL的酶溶液。称取各实施例和对比例得到的样品16mg，分别置于20mL的带盖的刻度试管中，加入PBS缓冲溶液6mL使样品混合均匀，然后分别加入上述配制好的透明质酸酶溶液2mL，混合均匀，置于42℃水浴静置，每隔10min取样100μL，于10mL离心管中，加入5mMPBS缓冲液6mL，混合均匀，沸水浴中煮沸2min，冷却至室温，在232nm波长下测定吸光度，吸光度不再增加时停止测量，记录时间即为样品的酶解时间。以分子量为 1480kDa的透明质酸作为对照。测定结果见下表1：

表1

样品	酶解时间(min)
		对照	90
实施例1	130
		实施例2	130
实施例3	110
		实施例4	120
实施例5	150
		实施例6	170
实施例7	180
		实施例8	130
实施例9	110
		实施例10	180
对比例1	120
		对比例2	110
对比例3	130

由此可见，所有试验样品均表现出了良好的抗酶解性，实施例1-4和实施例8-9由于交联剂用量少，其酶解时间低于交联剂用量较多的实施例5-7和实施例10。对比例1虽然使用了本发明范围最大值2倍的交联剂用量，但其抗酶解性与本发明实施例并无明显优势，对比例2使用了与实施例1相同量的交联剂，其抗酶解能力低于实施例1。

实施例12动力粘度及肤感测试

将各实施例和对比例得到的交联透明质酸粉末分别称取0.2g和2.0g，加入100mL水溶胀均匀，使用BROOKFIELD粘度计于25℃下测试凝胶动力粘度，同时对0.2％凝胶进行肤感测试，取少量放置于手臂内侧，用食指划圈涂抹，测试结果见下表2：

表2

由上表可以看出，当透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.004～0.015(实施例 1-4、8-9)时，制得的交联透明质酸粉末配制为0.2％水凝胶动力粘度稳定在2000mPa.s左右，且肤感是平滑无颗粒感的凝胶。当透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.02～0.04(实施例5-7、10)时，制得的交联透明质酸粉末配制为0.2％水凝胶动力粘度稳定在5300mPa.s 左右，且肤感是磨砂软颗粒感的凝胶。从对比例1看，即使交联剂用量大，所得0.2％水凝胶的动力粘度也较低，从对比例2和3看，在交联剂用量与实施例1相同的情况下，本发明交联-有机溶剂沉淀形成微球-二次交联的制备步骤所得的0.2％水凝胶的动力粘度较高。

实施例13稳定性测试

以各实施例和对比例样品作为测试对象，每个样品取2份，每份0.2g(干重)密封于西林瓶中，放置于60℃稳定性试验箱进行稳定性测试，分别于0天、5天和10天取样，样品溶于100mL水中充分溶胀并搅拌均匀，使用BROOKFIELD粘度计于25℃下测试凝胶动力粘度，测试3次取平均值作为该天的样品动力粘度。测试结果见下表3。

表3

由上表可以看出，实施例1-10的0.2％水凝胶在60℃条件下放置10天后动力粘度变化幅度均较小，其中实施例5-7、10由于凝胶中颗粒的存在，其动力粘度幅度比实施例1-4、8-9 更小。实施例1的0.2％水凝胶在60℃条件下放置10天后的动力粘度变化幅度均明显低于对比例1-3，说明本发明方法提高了交联效率和交联剂利用率，所得产品稳定性更好。

实施例14保湿性测试

受试志愿者30人，分别在左右手前臂内侧标记4×4cm²试验区域，同一手臂同时标记3 个区域，区域间隔1.5cm。按2.0±0.1mg样品/cm²剂量，使用乳胶指套将试样均匀涂抹于试验区域内，直至所有样品均受测试。使用皮肤水分测试仪进行受试区域的皮肤水分含量测试，分别测定各受试区域涂抹前及涂抹后1h、3h、6h、24h的皮肤水分含量，每个区域平行测定三次，取平均值。

采用皮肤水分含量增加率作为试样保湿性测试评价指标，计算公式如下：

测试结果如下表4所示。

表4

由上表可以看出，使用本发明制备得到的交联透明质酸与对比例相比具有更强的保水保湿能力。

Claims (23)

1.一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）将三偏磷酸钠与碱性溶液混合，搅拌均匀；

（2）将透明质酸或其盐加入步骤（1）的溶液中，在搅拌下进行交联反应；

（3）在搅拌下向步骤（2）的反应液中流加有机溶剂或其水溶液，使透明质酸或其盐以及透明质酸或其盐的交联产物以微球形式析出，流加结束后在静止状态下进行交联反应；

（4）反应结束后，调整步骤（3）的反应液pH值至中性，然后在搅拌下流加有机溶剂或其水溶液使反应产物以微球形式沉淀，收集沉淀，将沉淀洗涤、干燥，得三偏磷酸钠交联透明质酸粉末；

透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.004～0.04；

透明质酸或其盐在步骤（2）的溶液中的浓度为0.08～0.15g/mL；

步骤（3）和（4）中， 在400～600 rpm的搅拌速度下流加有机溶剂或其水溶液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（1）中，所述碱性溶液为氢氧化钠、氢氧化钾或强碱弱酸盐的水溶液。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（1）中，所述碱性溶液为氢氧化钠水溶液。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征是：碱性溶液的浓度为0.5～1.5 wt%。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是：碱性溶液的浓度为0.8～1.2wt%。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，所述透明质酸或其盐的分子量为400 kDa～2000 kDa。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，所述透明质酸或其盐的分子量为1000 kDa～1500 kDa。

8.根据权利要求1或6所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.008～0.03。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐在步骤（2）的溶液中的浓度为0.09～0.12g/mL。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（3）中，有机溶剂或其水溶液的加入量与步骤（2）中的透明质酸或其盐的体积质量比为8～20mL:1g。

11.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：步骤（4）中，有机溶剂或其水溶液的加入量与步骤（2）中的透明质酸或其盐的体积质量比为3～5mL:1g。

12.根据权利要求1、10或11所述的制备方法，其特征是：步骤（3）和（4）中，所述有机溶剂均为乙醇、丙酮、丙醇、异丙醇或乙二醇。

13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征是：步骤（3）和（4）中，所述有机溶剂均为乙醇。

14.根据权利要求1、10或11所述的制备方法，其特征是：步骤（3）和（4）中，有机溶剂水溶液的浓度均大于等于75wt%小于100wt%。

15.根据权利要求1、2、10或11所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，在300-400 rpm的搅拌速度下进行交联。

16.根据权利要求1、2、10或11所述的制备方法，其特征是：步骤（2）和（3）中，交联反应的温度均为20～60℃。

17.根据权利要求16所述的制备方法，其特征是：步骤（2）和（3）中，交联反应的温度均为25～45℃。

18.根据权利要求1、2、10或11所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，交联反应的时间为0.5～1h；步骤（3）中，交联反应的时间为5～8h。

19.根据权利要求1、2、10或11所述的制备方法，其特征是：步骤（4）中，所述干燥为真空干燥，真空干燥温度为25～60℃。

20.根据权利要求19所述的制备方法，其特征是：真空干燥温度为40～50℃。

21.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.004～0.015时，最终得到的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末经水溶胀后为无颗粒、平滑的凝胶，透明质酸或其盐与三偏磷酸钠的质量比为1:0.02～0.04时，最终得到的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末经水溶胀后为有磨砂软颗粒的凝胶。

22.按照权利要求1-21中任一项所述的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法制得的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末。

23.权利要求22所述的三偏磷酸钠交联透明质酸粉末在制备化妆品、洗护用品、外科手术防粘连产品、关节注射液、光热电辐射隔离产品或组织填充剂中的应用。