CN111017871A - 一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列及其制备方法和用途 - Google Patents
一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111017871A CN111017871A CN201910955862.2A CN201910955862A CN111017871A CN 111017871 A CN111017871 A CN 111017871A CN 201910955862 A CN201910955862 A CN 201910955862A CN 111017871 A CN111017871 A CN 111017871A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nanowire array
- concentration
- silicon nanowire
- silicon
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 64
- 239000011258 core-shell material Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 139
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 title claims description 139
- 239000010703 silicon Substances 0.000 title claims description 139
- 239000002070 nanowire Substances 0.000 title claims description 82
- 238000004416 surface enhanced Raman spectroscopy Methods 0.000 claims abstract description 75
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 36
- 238000002536 laser-induced breakdown spectroscopy Methods 0.000 claims abstract description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- PQTCMBYFWMFIGM-UHFFFAOYSA-N gold silver Chemical class [Ag].[Au] PQTCMBYFWMFIGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 67
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 59
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 55
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 54
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 52
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 46
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 36
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 35
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 32
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 32
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 31
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 claims description 28
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 26
- VYXSBFYARXAAKO-WTKGSRSZSA-N chembl402140 Chemical compound Cl.C1=2C=C(C)C(NCC)=CC=2OC2=C\C(=N/CC)C(C)=CC2=C1C1=CC=CC=C1C(=O)OCC VYXSBFYARXAAKO-WTKGSRSZSA-N 0.000 claims description 20
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 18
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 18
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 18
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 17
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 17
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 15
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 14
- SJECZPVISLOESU-UHFFFAOYSA-N 3-trimethoxysilylpropan-1-amine Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCN SJECZPVISLOESU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 11
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 11
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 11
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 claims description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 10
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 10
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 9
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- 238000005576 amination reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 238000005530 etching Methods 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000003376 silicon Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 claims description 5
- 238000003486 chemical etching Methods 0.000 claims description 4
- -1 silver ions Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 3
- 239000002078 nanoshell Substances 0.000 claims description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000014670 detection of bacterium Effects 0.000 abstract description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 7
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 7
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 7
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 5
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 4
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000035040 seed growth Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000010065 bacterial adhesion Effects 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910000510 noble metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000000479 surface-enhanced Raman spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 description 1
- CDXSJGDDABYYJV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethanol Chemical compound CCO.CC(O)=O CDXSJGDDABYYJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 238000002371 ultraviolet--visible spectrum Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B1/00—Nanostructures formed by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
- B82B1/001—Devices without movable or flexible elements
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B3/00—Manufacture or treatment of nanostructures by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
- B82B3/0009—Forming specific nanostructures
- B82B3/0014—Array or network of similar nanostructural elements
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y30/00—Nanotechnology for materials or surface science, e.g. nanocomposites
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y40/00—Manufacture or treatment of nanostructures
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/65—Raman scattering
- G01N21/658—Raman scattering enhancement Raman, e.g. surface plasmons
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/71—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light thermally excited
- G01N21/718—Laser microanalysis, i.e. with formation of sample plasma
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Manufacturing & Machinery (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Composite Materials (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Powder Metallurgy (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载SiNWs(SiNWs‑Au@Ag)的制备方法,以及一种适配体修饰的金银双金属SERS标签(Apt‑SERS tag)的制备方法,并且利用这两种材料以及LIBS和SERS检测技术实现水中细菌的高效捕获及快速检测。
Description
技术领域
本发明属于环境生物监测技术领域,具体涉及一种基于Au@Ag核壳纳 米粒子负载硅纳米线阵列及其制备方法和用途。
背景技术
水源性致病菌及相关疾病已成为公共卫生和人类健康的主要威胁之一, 消除及检测水源性致病菌是改善水质和评估微生物污染的关键。随着纳米科 技的快速发展,具有特殊形貌和优异表面性能的纳米材料被广泛用于生物技 术和生物医学等领域,借助于纳米材料人们已开发出了一些能够选择性去除 或捕获细菌的方法,这些方法大多使用抗生素或抗体为作为特异性识别元件 对纳米材料进行修饰(参见Analytica Chimica Acta2017,987,91-97;ACS Applied Materials&Interfaces 2013,5(21),10874-10881;ACSNano 2008,2(9), 1777-1788;Analytical Chemistry 1993,65(15),2036-2039),不仅修饰过程复 杂成本高,而且可能出现抗生素耐受性增加的风险。因此,细菌的消除或捕 获方法仍有改进的余地。
近年来,垂直排列的硅纳米线阵列(SiNWs)由于其特殊形态及物理化 学性质而成为众多研究领域的热点,研究发现细菌不仅可以识别SiNWs基底 的硅纳米线(参见NanoLetters 2013,13(6),2864-2869),而且SiNWs基底的 纳米级形貌还可以促进硅纳米线与细菌胞外细胞器间的相互作用(参见 Angewandte Chemie International Edition 2014,53(23),5837-5841)。此外,研 究表明SiNWs基底的硅纳米线直径与一些生物分子尺寸相当,因此可以增强 SiNWs与这些生物分子间的界面作用而提高检测灵敏度(参见Analytical Chemistry 2007,79(9),3291-3297)。然而,想要获得优异的捕获效率实现低浓度细菌的消除或捕获,SiNWs基底仍然需要经生物配体或连接分子的修 饰,这些繁琐的化学修饰及生物配体的不稳定性限制了SiNWs的实际使用。
关于细菌粘附在纳米结构表面的研究已经证明,在某些情况下机械因素 对细菌粘附的影响比化学作用更大(参见Biomaterials 2015,73,185-197),而 且最近关于纳米粒子修饰多孔电极用于细菌捕获及检测的研究表明,次级纳 米结构的多维物理作用可以实现细菌的有效捕获而无需任何生物配体或连接 分子(参见Biosensors andBioelectronics 2018,101,52-59)。基于此,SiNWs 基底或许可以采用纳米粒子进行简单的修饰后用于细菌捕获。Au@Ag核壳 纳米粒子(Au@Ag NPs)具有金纳米均一稳定的特征,同时又具有银纳米优 异的光学性质和抗菌活性等特点,在众多领域都引起了广泛的兴趣。目前还 没有关于采用Au@Ag核壳纳米粒子对SiNWs基底进行修饰以实现水中细菌 捕获的相关报道。
尽管传统的检测方法(如平板菌落计数,PCR,ELISA等)能够有效的 检测细菌,但是耗时的培养过程,繁琐的前处理,以及昂贵的试剂限制了这 些方法的广泛使用。激光诱导击穿光谱(laser induced breakdown spectroscopy, 简称LIBS)与表面增强拉曼光谱(surface-enhanced Raman scattering,简称 SERS)由于能够实现快速高灵敏度检测而成为化学和生物材料鉴定和检测的 有力工具。这两种技术可以分别提供目标物的原子和分子信息,同时SERS 在定量分析方面的不足还可以通过LIBS进行弥补,因此LIBS和SERS的联用为开发细菌检测新策略创造了机会(参见Analytica Chimica Acta,DOI: https://doi.org/10.1016/j.aca.2018.06.058)。LIBS可以直接获取细菌细胞的元素 信息而实现定量分析,根据细菌细胞内含有的矿物元素的LIBS光谱与细菌 浓度建立定量关系,从而实现快速定量分析。而基于SERS检测细菌则可以 分为以下两种,一是借助纳米粒子的热点效应直接获取细菌的指纹光谱,二 是通过SERS标签(tag)标记后间接检测细菌。采用拉曼信号强的SERS标 签与目标细菌特异性结合后进行细菌检测,可以避免干扰实现高灵敏度检测。 而这种SERS标签一般是贵金属纳米粒子表面修饰提供SERS信号的报告分 子,再修饰与细菌特异性结合的连接分子,通过SERS标签可以实现细菌的 高灵敏度检测。而目前关于LIBS与标记SERS联用建立细菌检测的方法报 道较少。
发明内容
本发明的目的是基于Au@Ag核壳纳米粒子负载SiNWs (SiNWs-Au@Ag)的制备方法,以及一种适配体修饰的金银双金属SERS 标签(Apt-SERS tag)的制备方法,并且利用这两种材料以及LIBS和SERS 检测技术实现水中细菌的高效捕获及快速检测。
为实现上述目的,本发明通过种子生长法制备单分散的Au@Ag核壳纳 米粒子,并负载到氨基化的SiNWs表面制备SiNWs-Au@Ag基底。 SiNWs-Au@Ag基底捕获细菌后,可以通过LIBS进行快速定量检测,或者 与Apt-SERS tag结合后通过SERS进行特异性识别。
本发明中一种硅纳米线阵列,其为负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳米 线阵列。
Au@Ag核壳纳米粒子:以纳米金为核,在其表面包覆一层纳米银为壳, 所构成的具有核壳结构的纳米粒子。
硅纳米线阵列:直径长度均匀的硅纳米线在硅衬底上取向一致,排列整 齐的阵列结构。
进一步的,所述硅纳米线阵列的纳米线直径200~400nm,间距200~600 nm。
进一步的,所述Au@Ag核壳纳米粒子粒径为25~35nm。
进一步的,所述硅纳米线阵列采用金属辅助化学刻蚀法制备,优选地, 按照如下方法制备:
a.将硅片用丙酮、水进行超声清洗,放入浓硫酸与双氧水的混合溶液中 进一步清洗,最后用超纯水清洗得到干净的硅片;
优选地,所述硅片为单面抛光方形硅片,大小为0.8cm*0.8cm,P/N型, 电阻率为0.01~0.02Ω.cm;所述双氧水浓度为30%,浓硫酸与双氧水体积 比为3:1;
b.将步骤a清洗干净的硅片注入氢氟酸水溶液中浸泡1~5分钟,在硅片 表面形成硅-氢键(Si-H);
优选地,所述氢氟酸水溶液浓度为1~10%;
c.将步骤b处理的硅片浸泡至含硝酸银和氢氟酸混合溶液中反应1~5分 钟,使硅片表面沉积一层银纳米粒子,然后用超纯水洗去硅片表面残留的银 离子;
其中,所述硝酸银与氢氟酸混合溶液中硝酸银浓度为1~10mM,氢氟 酸浓度为1~20%;
d.将步骤c表面沉积银纳米粒子的硅片浸入氢氟酸与双氧水混合液中, 于室温下避光刻蚀0.5~5h,再将刻蚀后的硅片浸泡至稀硝酸中使银纳米粒子 溶解,然后用超纯水洗涤得到硅纳米线阵列;
其中,所述氢氟酸与双氧水混合液中氢氟酸浓度为1~20%,双氧水浓度 为0.1~0.9%;所述稀硝酸浓度为5~50%。
金属辅助化学刻蚀,硅片覆盖贵金属膜或纳米粒子后在由HF和氧化剂 (一般为双氧水)混合液中刻蚀。
进一步的,所述Au@Ag核壳纳米粒子按照如下方法制备:
A.取粒径为15~25nm的金纳米种子;优选地,所述金纳米种子采用柠 檬酸三钠还原氯金酸制备;其中,所述柠檬酸三钠浓度为0.1~2%;所述氯 金酸浓度为0.1~1mM;
B.向步骤A的金纳米种子中加入硝酸银,混匀后加入抗坏血酸和氨水, 在碱性条件下,抗坏血酸将硝酸银还原,在金纳米种子表面生成银纳米壳, 即得Au@Ag核壳纳米粒子;
其中,所述硝酸银浓度为0.1~1mM;所述抗坏血酸浓度为0.1~1mM; 所述氨水浓度为0.1~1%。
进一步的,所述硅纳米线阵列,其特征在于:它按照如下方法制备
①将硅纳米线阵列氨基化,优选地:将硅纳米线阵列置于浓硫酸与双氧 水的混合溶液中,加热至90℃反应25~40分钟,使硅纳米线阵列表面羟基 化,经超纯水和无水乙醇洗涤,氮气吹干后置入含3-氨基丙基三甲氧基硅烷 的乙醇和乙酸混合液中,反应0.5~3小时得到表面氨基化的硅纳米线阵列;
其中,所述乙醇和乙酸混合液中乙醇和乙酸的体积比为5:2;所述3-氨 基丙基三甲氧基硅烷的浓度为0.1~2%;
②将表面氨基化的硅纳米线阵列置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液中,浸 泡,优选地:将氨基化的硅纳米线阵列置于置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液 中浸泡12小时,使Au@Ag NPs通过Ag-N键结合至硅纳米线阵列,用超纯 水洗涤除去未结合的Au@Ag NPs即得到负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳 米线阵列。
进一步的,本发明硅纳米线阵列的制备方法步骤如下:
①将硅纳米线阵列氨基化,优选地:将硅纳米线阵列置于浓硫酸与双氧 水的混合溶液中,加热至90℃反应25~40分钟,使硅纳米线阵列表面羟基 化,经超纯水和无水乙醇洗涤,氮气吹干后置入含3-氨基丙基三甲氧基硅烷 的乙醇和乙酸混合液中,反应0.5~3小时得到表面氨基化的硅纳米线阵列
其中,所述乙醇和乙酸混合液中乙醇和乙酸的体积比为5:2;所述3-氨 基丙基三甲氧基硅烷的浓度为0.1~2%;
②将表面氨基化的硅纳米线阵列置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液中,浸 泡,优选地:将氨基化的硅纳米线阵列置于置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液 中浸泡12小时,使Au@Ag NPs通过Ag-N键结合至硅纳米线阵列,用超纯 水洗涤除去未结合的Au@Ag NPs即得到负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳 米线阵列。
进一步的,所述硅纳米线阵列作为基底在细菌检测中的应用。
本发明一种细菌的检测方法,是本发明负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅 纳米线阵列作为基底,采用LIBS进行检测,它包括如下步骤:
将负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳米线阵列基底置入待检溶液中,于 37℃振荡孵育后取出硅纳米线阵基底,并用超纯水淋洗除去未结合牢固的细 菌,自然干燥后进行LIBS检测;
其中,所述待测液的细菌浓度为1×10~1×106CFU/mL;所述超纯水淋 洗次数为2~5次。
本发明一种细菌的检测方法,是本发明负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅 纳米线阵列作为基底,利用Apt-SERS tag进行SERS检测,它包括如下步骤:
将载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳米线阵列基底置入待检溶液中,于37℃振荡孵育后取出硅纳米线阵基底基底,并用超纯水淋洗除去未结合牢固 的细菌,然后将基底置入适配体修饰的金银双金属SERS标签(Apt-SERS tag) 中,于37℃振荡孵育3小时后,取出基底并用超纯水淋洗为结合牢固的 Apt-SERS tag,待自然干燥后进行SERS检测;
其中,所述待测液的细菌浓度为1×103~1×106CFU/mL;所述超纯水淋 洗次数为2~5次。
进一步的,所述Apt-SERS tag的制备方法包括如下步骤:
Ⅰ.向粒径为15~25nm的金纳米种子溶液中加入罗丹明6G溶液,室 温下搅拌2小时得到R6G包覆的金纳米粒子(Au-R6G);优选地,所述金纳 米种子采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备;其中,所述柠檬酸三钠浓度为0.1~ 2%;所述氯金酸浓度为0.1~1mM;
其中,所述罗丹明6G的浓度为10-6~10-4M;
Ⅱ.将步骤Ⅰ制备的R6G包覆的金纳米粒子离心,洗去多余的R6G并 重悬于超纯水中,然后加入硝酸银溶液,混匀后加入抗坏血酸溶液和氨水, 涡旋20秒即得到双金属SERStag;
其中,所述硝酸银溶液浓度为0.1~1mM;所述抗坏血酸溶液浓度为0.1~1 mM;所述氨水浓度为0.1~1%;所述双金属SERS tag的粒径为20~40nm;
Ⅲ.向步骤Ⅱ制备的SERS tag中加入适配体,搅拌反应2小时,然后离 心洗去未结合的适配体并重悬于超纯水中得到适配体修饰的SERS tag (Apt-SERS tag);
其中,所述适配体5’端为巯基修;所述适配体浓度为0.1~2μM。
本发明提供如下具体方案:
本发明第一方面提供一种SiNWs-Au@Ag基底的制备方法,具体步骤如 下:
(1)采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备金纳米种子(Au seeds)。
优选的,所述柠檬酸三钠浓度为0.1~2%。
优选的,所述氯金酸浓度为0.1~1mM。
优选的,所述金纳米种子(Au seeds)粒径为15-25纳米。
(2)通过种子生长法制备Au@Ag核壳纳米粒子:向步骤(1)制备的 金纳米种子中加入硝酸银,混匀后加入抗坏血酸(AA)和氨水,在碱性条件 下抗坏血酸将硝酸银还原,在金纳米种子表面生成银纳米壳。
优选的,所述硝酸银浓度为0.1~1mM。
优选的,所述抗坏血酸浓度为0.1~1mM。
优选的,所述氨水浓度为0.1~1%。
优选的,所述Au@Ag核壳纳米粒子粒径为25~35nm。
(3)将硅片一次用丙酮、超纯水进行超声清洗,放入浓硫酸与双氧水的 混合溶液中进一步清洗,最后用超纯水清洗得到干净的硅片。
优选的,所述硅片为单面抛光方形硅片,大小为0.8cm*0.8cm,P/N型, 电阻率为0.01~0.02Ω.cm。
优选的,所述双氧水浓度为30%,浓硫酸与双氧水体积比为3:1。
(4)将步骤(3)清洗干净的硅片注入氢氟酸水溶液中浸泡3分钟,在 硅片表面形成硅-氢键(Si-H)。
优选的,氢氟酸水溶液浓度为1~10%。
(5)将步骤(4)处理的硅片浸泡至含硝酸银和氢氟酸混合溶液中反应 1分钟,使硅片表面沉积一层银纳米粒子,然后用超纯水洗去硅片表面残留 的银离子。
优选的,所述硝酸银与氢氟酸混合溶液中硝酸银浓度为1~10mM,氢氟 酸浓度为1~20%。
(6)将步骤(5)表面沉积银纳米粒子的硅片浸入氢氟酸与双氧水混合 液中,于室温下避光刻蚀1h,再将刻蚀后的硅片浸泡至稀硝酸中使银纳米粒 子溶解,然后用超纯水洗涤得到SiNWs。
优选的,所述氢氟酸与双氧水混合液中氢氟酸浓度为1~20%,双氧水浓 度为0.1~0.9%。
优选的,所述稀硝酸浓度为5~50%。
优选的,所述SiNWs基底硅纳米线的直径200~400nm,间距200~600 nm,长度为3~6μm。
(7)将步骤(6)制备的SiNWs置入浓硫酸与双氧水的混合溶液中,加 热至90℃反应30分钟使其表面羟基化,经超纯水和无水乙醇洗涤,氮气吹 干后置入含3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTMS)的乙醇和乙酸混合液中,反 应1小时得到表面氨基化的SiNWs(SiNWs-NH2)。
优选的,所述乙醇和乙酸混合液中乙醇和乙酸的体积比为5:2。
优选的,所述3-氨基丙基三甲氧基硅烷的浓度为0.1~2%。
(8)将步骤(7)制备的SiNWs-NH2置入步骤(2)制备的Au@Ag核 壳纳米粒子溶胶中浸泡12小时,使Au@Ag NPs通过Ag-N键结合至SiNWs, 用超纯水洗涤除去未结合的Au@AgNPs即得到SiNWs-Au@Ag。
本发明第二方面提供一种适配体修饰的金银双金属SERS标签 (Apt-SERS tag)的制备方法,具体步骤如下:
(9)向上述步骤(1)制备的金纳米种子(Au seeds)溶液中加入罗丹明 6G溶液,室温下搅拌2小时得到R6G包覆的金纳米粒子(Au-R6G)。
优选的,所述罗丹明6G的浓度为10-6~10-4M。
(10)将步骤(9)制备的R6G包覆的金纳米粒子离心,洗去多余的R6G 并重悬于超纯水中,然后加入硝酸银溶液,混匀后加入抗坏血酸溶液和氨水, 涡旋20秒即得到双金属SERS tag。
优选的,所述硝酸银溶液浓度为0.1~1mM。
优选的,所述抗坏血酸溶液浓度为0.1~1mM。
优选的,所述氨水浓度为0.1~1%。
优选的,所述双金属SERS tag的粒径为20~40nm。
(11)向步骤(10)制备的SERS tag中加入适配体,缓慢搅拌反应2小 时,然后离心洗去未结合的适配体并重悬于超纯水中得到适配体修饰的 SERS tag(Apt-SERS tag)。
优选的,所述适配体5’端为巯基修饰。
优选的,所述适配体浓度为0.1~2μM。
本发明第三方面提供一种基于SiNWs-Au@Ag捕获并通过LIBS检测饮 用水中细菌的方法,具体步骤如下:
(12)将步骤(8)制备的SiNWs-Au@Ag基底置入细菌溶液中,于37℃ 振荡孵育,并通过平板计数测定SiNWs-Au@Ag基底加入前后菌液中细菌浓 度的变化,并计算捕获效率。
优选的,所述菌液的细菌浓度为4~6×106CFU/mL。
优选的,所述孵育时间为10~90分钟。
(13)将步骤(8)制备的SiNWs-Au@Ag基底置入添加细菌的饮用水 中,于37℃振荡孵育后取出SiNWs-Au@Ag基底,并用超纯水淋洗除去未结 合牢固的细菌,自然干燥后进行LIBS检测。
优选的,所述待测液的细菌浓度为1×10~1×106CFU/mL。
优选的,所述超纯水淋洗次数为2~5次。
本发明第四方面提供一种基于SiNWs-Au@Ag捕获细菌并利用 Apt-SERS tag进行SERS检测的方法,具体步骤如下:
(14)将步骤(8)制备的SiNWs-Au@Ag基底置入添加细菌的饮用水 中,于37℃振荡孵育后取出SiNWs-Au@Ag基底,并用超纯水淋洗除去未结 合牢固的细菌,然后将基底置入步骤(11)制备的Apt-SERS tag中,于37℃ 振荡孵育3小时后,取出基底并用超纯水淋洗为结合牢固的Apt-SERS tag, 待自然干燥后进行SERS检测。
优选的,所述待测液0的浓度为1×103~1×106CFU/mL。
优选的,所述超纯水淋洗次数为2~5次。
本发明第五方面提供一种基于SiNWs-Au@Ag杀灭细菌的方法,具体操 作如下:
(15)在TSB培养液中接种适量细菌后,加入步骤(8)制备的 SiNWs-Au@Ag基底,在37℃恒温振荡器中培养12小时,通过测定菌液的 OD600或平板菌落计数考察基底的抗菌效率。
优选的,所述TSB培养液接入细菌后细菌浓度为1×106CFU/mL。
本发明优点在于:
(1)所制备的SiNWs-Au@Ag基底无需复杂的化学修饰即可实现细菌 的高效捕获,其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的捕获容量分别为8.6和 5.5×106cells/cm2。
(2)结合SiNWs-Au@Ag捕获及LIBS检测,可实现饮用水中细菌快速 定量检测,检测限可低至10CFU/mL。
(3)通过Apt-SERS tag与SiNWs-Au@Ag基底捕获的目标细菌间的特 异性结合,利用SERS特征信号可以特异性识别鼠伤寒沙门氏杆菌。
(4)基于基底硅纳米线间的物理作用和Au@Ag的抗菌作用,所制备的 SiNWs-Au@Ag基底对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌率分别为90%和 ~100%。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段, 在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、 替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容再作进一步 的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。 凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为本发明所涉及的SiNWs-Au@Ag基底制备、细菌捕获、及LIBS 检测流程图。
图2为本发明所涉及的Apt-SERS tag的制备及SERS检测流程图。
图3为本发明制备的Au@Ag紫外-可见光谱及透射电镜图。
图4为本发明制备的SiNWs和SiNWs-Au@Ag的扫描电镜图。
图5为本发明制备的金银双金属SERS标签(Apt-SERS tag)的SERS 光谱和透射电镜。
图6为本发明制备的SiNWs-Au@Ag基底对水中细菌捕获效率随时间的 变化。
图7为本发明制备的SiNWs,SiNWs-Au@Ag,及SiNWs-Au@Ag捕获 细菌后LIBS光谱。
图8为本发明制备的SiNWs-Au@Ag基底捕获不同细菌与Apt-SERS tag 结合后的SERS光谱。
图9为本发明制备的SiNWs,SiNWs-Au@Ag处理的TSB培养基中细菌 生长情况。
具体实施方式
本发明所涉及的SiNWs-Au@Ag基底制备、细菌捕获、及LIBS检测流 程图如图1所示。
实施例1、SiNWs-Au@Ag基底的制备
通过种子生长法合成Au@Ag核壳纳米粒子:首先制备金纳米种子(Au seeds),取1mL 25mM氯金酸水溶液加至50mL超纯水中,磁力搅拌下加 热至沸腾,然后快速注入3mL1%柠檬酸三钠水溶液,继续加热反应30分 钟至混合液颜色变为酒红色,然后自然冷却至室温即得金纳米种子溶胶。取 1ml金纳米种子溶胶至1.5mL离心管中,加入2-14μL 0.1M硝酸银溶液, 涡旋混匀10秒,然后加入等体积的抗坏血酸(0.1M)及2μL 25%氨水,涡 旋混匀20秒即得到Au@Ag核壳纳米粒子溶胶,根据硝酸银加入体积,得 到的Au@Ag核壳纳米粒子标注为Au@Ag(2)至Au@Ag(14)。
SiNWs的制备:通过化学刻蚀法制备,首先硅片经丙酮超声洗涤10分 钟,超纯水洗涤2~5次,98%H2SO4/30%H2O2(3:1,v/v)混合液浸泡10min, 超纯水洗涤2~5次,5%HF浸泡3分钟。然后将清洗干净的硅片浸泡至含4.8 M HF和0.005M AgNO3的水溶液中1分钟,使硅片表面沉积银纳米粒子(Ag NPs),用超纯水洗去硅片表面残留的银离子,并将其浸入含4.8M HF和0.15 M H2O2的刻蚀液中室温下避光刻蚀1h。最后将刻蚀后的硅片浸泡至稀硝酸(硝酸/水,1:1,v/v)中使Ag NPs溶解,用超纯水洗涤后即得到SiNWs。
SiNWs-Au@Ag的制备:将步骤2)制备的SiNWs置入98%H2SO4/30% H2O2(3:1,v/v)混合液加热至90℃浸泡30min使其表面羟基化,经超纯水和无 水乙醇洗涤后,将其浸入1%的3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTMS)溶液中 (乙醇/乙酸,5:2,v/v),反应1小时得到氨基化的SiNWs(SiNWs-NH2), 最后将SiNWs-NH2置入上述加入8μL硝酸银制备的Au@Ag NPs溶胶中浸 泡12小时,使Au@Ag NPs通过Ag-N键结合至SiNWs,用超纯水洗涤除去 未结合的Au@AgNPs即得到SiNWs-Au@Ag。
实施例2、适配体修饰的金银双金属SERS标签(Apt-SERS tag)的制 备
取1mL实施例1中制备的金纳米种子溶胶,加入50μL 10-5M罗丹明 6G(R6G),室温下搅拌2小时得到R6G包覆的金纳米粒子(Au-R6G),离 心洗去多余的罗丹明6G并重悬于1mL超纯水中,并加入10μL 0.1M硝酸 银,涡旋10秒后加入等体积的抗坏血酸(0.1M)及2μL 25%氨水,涡旋混匀 20秒即得到双金属SERS tag溶胶。最后,向SERS tag溶胶中加入退火后的适配体,缓慢搅拌反应2小时,离心洗去未结合的适配体,并重悬于1mL 超纯水中得到适配体修饰的SERS tag。
本实施例所用适配体为,鼠伤寒沙门氏杆菌特异性结合适配体,序列为: 5’-SH-C6-TATGGCGGCGTCACCCGACGGGGACTTGACATTATGACAG-3’。
实施例3、基于SiNWs-Au@Ag捕获水中细菌
细菌培养:将大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏杆菌接种在 25mL胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB)中,于37℃振荡培养10小时,取5mL培 养后的菌液在6000rpm离心5分钟,并用超纯水洗涤三次,最后分散在超纯 水中,测定OD600并通过平板计数确定细菌浓度。
将实施例1制备的SiNWs-Au@Ag基底置入1mL含大肠杆菌或金黄色 葡萄球菌的菌液中,于37℃振荡孵育,并在不同时间间隔取10μL菌液通过 平板计数测定菌液中细菌浓度的变化,计算SiNWs-Au@Ag基底捕获效率。 试验结果表明,SiNWs-Au@Ag能捕获水中的细菌(如图6所示)。
实施例4、基于SiNWs-Au@Ag捕获并结合LIBS检测饮用水中细菌
将实施例1制备的SiNWs-Au@Ag基底置入1mL添加大肠杆菌或金黄 色葡萄球菌的饮用水中,于37℃振荡孵育40分钟,然后将SiNWs-Au@Ag 基底取出,并用超纯水淋洗除去未结合牢固的细菌,自然干燥后进行LIBS检 测。LIBS检测参数如下:激光脉冲能量30mJ,脉宽4-7ns,重复频率10Hz, 延时1μs,门宽:10μs,采集20*20个位点,每个位点间距为300μm, 每个位点累计5发激光得到一个LIBS光谱。试验结果表明,SiNWs-Au@Ag 能检测饮用水中细菌(如图7所示)。
实施例5、基于SiNWs-Au@Ag捕获细菌并利用Apt-SERS tag进行特 异性检测
将实施例1制备的SiNWs-Au@Ag基底置入1mL细菌溶液中,于37℃ 振荡孵育40分钟后取出基底,并用超纯水淋洗除去未结合牢固的细菌,然后 将基底置入实施例2制备的Apt-SERS tag中,于37℃振荡孵育3小时后,取 出基底并用超纯水淋洗未结合牢固的Apt-SERS tag,待自然干燥后进行SERS 检测。SERS检测参数如下:激光功率10mW,积分时间10秒,随机采集 50个位点。试验结果说明,SiNWs-Au@Ag能够捕获细菌,并利用Apt-SERS tag可进行特异性检测(如图8所示)。
实施例6、SiNWs-Au@Ag抗菌活性的研究
将实施例1制备的SiNWs-Au@Ag基底的加入1mL含有细菌的TSB培 养液中,细菌浓度为1×106CFU/mL,在37℃恒温振荡器中培养12小时, 通过测定未加SiNWs-Au@Ag基底和加有基底的TSB菌液的OD600或平板菌 落计数考察基底的抗菌能力。试验结果说明,SiNWs-Au@Ag能够有效抗菌 (如图9所示)。
综上,本发明公开了一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载SiNWs (SiNWs-Au@Ag)的制备方法,以及一种适配体修饰的金银双金属SERS 标签(Apt-SERS tag)的制备方法,并且利用这两种材料以及LIBS和SERS 检测技术实现水中细菌的高效捕获及快速检测。
SEQUENCE LISTING
<110> 四川大学
<120> 一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列及其制备方法和用途
<130> GYKH1486-2019P018091CCZ
<150> 2018111742658
<151> 2019-10-09
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 40
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 鼠伤寒沙门氏杆菌特异性结合适配体
<400> 1
tatggcggcg tcacccgacg gggacttgac attatgacag 40
Claims (10)
1.一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列,其特征在于:其为负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳米线阵列。
2.根据权利要求1所述的硅纳米线阵列,其特征在于:所述硅纳米线阵列的纳米线直径200~400nm,间距200~600nm;所述Au@Ag核壳纳米粒子粒径为25~35nm。
3.根据权利要求1或2所述硅纳米线阵列,其特征在于:所述硅纳米线阵列采用金属辅助化学刻蚀法制备,优选地,按照如下方法制备:
a.将硅片用丙酮、水进行超声清洗,放入浓硫酸与双氧水的混合溶液中进一步清洗,最后用超纯水清洗得到干净的硅片;
优选地,所述硅片为单面抛光方形硅片,大小为0.8cm*0.8cm,P/N型,电阻率为0.01~0.02Ω.cm;所述双氧水浓度为30%,浓硫酸与双氧水体积比为3:1;
b.将步骤a清洗干净的硅片注入氢氟酸水溶液中浸泡1~5分钟,在硅片表面形成硅-氢键(Si-H);
优选地,所述氢氟酸水溶液浓度为1~10%;
c.将步骤b处理的硅片浸泡至含硝酸银和氢氟酸混合溶液中反应1~5分钟,使硅片表面沉积一层银纳米粒子,然后用超纯水洗去硅片表面残留的银离子;
其中,所述硝酸银与氢氟酸混合溶液中硝酸银浓度为1~10mM,氢氟酸浓度为1~20%;
d.将步骤c表面沉积银纳米粒子的硅片浸入氢氟酸与双氧水混合液中,于室温下避光刻蚀0.5~5h,再将刻蚀后的硅片浸泡至稀硝酸中使银纳米粒子溶解,然后用超纯水洗涤得到硅纳米线阵列;
其中,所述氢氟酸与双氧水混合液中氢氟酸浓度为1~20%,双氧水浓度为0.1~0.9%;所述稀硝酸浓度为5~50%。
4.根据权利要求1或2所述硅纳米线阵列,其特征在于:所述Au@Ag核壳纳米粒子按照如下方法制备:
A.取粒径为15~25nm的金纳米种子;优选地,所述金纳米种子采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备;其中,所述柠檬酸三钠浓度为0.1~2%;所述氯金酸浓度为0.1~1mM;
B.向步骤A的金纳米种子中加入硝酸银,混匀后加入抗坏血酸和氨水,在碱性条件下,抗坏血酸将硝酸银还原,在金纳米种子表面生成银纳米壳,即得Au@Ag核壳纳米粒子;
其中,所述硝酸银浓度为0.1~1mM;所述抗坏血酸浓度为0.1~1mM;所述氨水浓度为0.1~1%。
5.根据权利要求1或2所述硅纳米线阵列,其特征在于:所述基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列按照如下方法制备:
①将硅纳米线阵列氨基化,优选地:将硅纳米线阵列置于浓硫酸与双氧水的混合溶液中,加热至90℃反应25~40分钟,使硅纳米线阵列表面羟基化,经超纯水和无水乙醇洗涤,氮气吹干后置入含3-氨基丙基三甲氧基硅烷的乙醇和乙酸混合液中,反应0.5~3小时得到表面氨基化的硅纳米线阵列;
其中,所述乙醇和乙酸混合液中乙醇和乙酸的体积比为5:2;所述3-氨基丙基三甲氧基硅烷的浓度为0.1~2%;
②将表面氨基化的硅纳米线阵列置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液中,浸泡,优选地:将氨基化的硅纳米线阵列置于置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液中浸泡12小时,使Au@Ag核壳纳米粒子通过Ag-N键结合至硅纳米线阵列,用超纯水洗涤除去未结合的Au@Ag核壳纳米粒子即得到负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳米线阵列。
6.一种制备权利要求1~5任一项所述硅纳米线阵列的方法,其特征在于:步骤如下:
①将硅纳米线阵列氨基化,优选地:将硅纳米线阵列置于浓硫酸与双氧水的混合溶液中,加热至90℃反应25~40分钟,使硅纳米线阵列表面羟基化,经超纯水和无水乙醇洗涤,氮气吹干后置入含3-氨基丙基三甲氧基硅烷的乙醇和乙酸混合液中,反应0.5~3小时得到表面氨基化的硅纳米线阵列
其中,所述乙醇和乙酸混合液中乙醇和乙酸的体积比为5:2;所述3-氨基丙基三甲氧基硅烷的浓度为0.1~2%;
②将表面氨基化的硅纳米线阵列置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液中,浸泡,优选地:将氨基化的硅纳米线阵列置于置于Au@Ag核壳纳米粒子溶液中浸泡12小时,使Au@Ag核壳纳米粒子通过Ag-N键结合至硅纳米线阵列,用超纯水洗涤除去未结合的Au@Ag NPs即得到负载Au@Ag核壳纳米粒子的硅纳米线阵列。
7.权利要求1~5任一项所述硅纳米线阵列作为基底在细菌检测中的应用。
8.一种细菌的检测方法,其特征在于:利用权利要求1~5任一项所述硅纳米线阵列作为基底,采用LIBS进行检测;
优选地,所述检测方法包括如下步骤:
将权利要求1~5任一项所述硅纳米线阵基底置入待检溶液中,于37℃振荡孵育后取出硅纳米线阵基底,并用超纯水淋洗除去未结合牢固的细菌,自然干燥后进行LIBS检测;
其中,所述待测液的细菌浓度为1×10~1×106CFU/mL;所述超纯水淋洗次数为2~5次。
9.一种细菌的检测方法,其特征在于:利用权利要求1~5任一项所述硅纳米线阵列作为基底,利用Apt-SERS tag进行SERS检测。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,它包括如下步骤:
将权利要求1~5任一项所述硅纳米线阵基底置入待检溶液中,于37℃振荡孵育后取出硅纳米线阵基底基底,并用超纯水淋洗除去未结合牢固的细菌,然后将基底置入适配体修饰的金银双金属SERS标签(Apt-SERS tag)中,于37℃振荡孵育3小时后,取出基底并用超纯水淋洗为结合牢固的Apt-SERS tag,待自然干燥后进行SERS检测;
其中,所述待测液的细菌的浓度为1×103~1×106CFU/mL;所述超纯水淋洗次数为2~5次。
优选地,所述Apt-SERS tag的制备方法包括如下步骤:
Ⅰ.向粒径为15~25nm的金纳米种子溶液中加入罗丹明6G(R6G)溶液,室温下搅拌2小时得到R6G包覆的金纳米粒子(Au-R6G);优选地,所述金纳米种子采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备;其中,所述柠檬酸三钠浓度为0.1~2%;所述氯金酸浓度为0.1~1mM;
其中,所述罗丹明6G的浓度为10-6~10-4M;
Ⅱ.将步骤Ⅰ制备的R6G包覆的金纳米粒子离心,洗去多余的R6G并重悬于超纯水中,然后加入硝酸银溶液,混匀后加入抗坏血酸溶液和氨水,涡旋20秒即得到双金属SERS tag;
其中,所述硝酸银溶液浓度为0.1~1mM;所述抗坏血酸溶液浓度为0.1~1mM;所述氨水浓度为0.1~1%;所述双金属SERS tag的粒径为20~40nm;
Ⅲ.向步骤Ⅱ制备的SERS tag中加入适配体,搅拌反应2小时,然后离心洗去未结合的适配体并重悬于超纯水中得到适配体修饰的SERS tag(Apt-SERS tag);
其中,所述适配体5’端为巯基修饰;所述适配体浓度为0.1~2μM。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811174265 | 2018-10-09 | ||
CN2018111742658 | 2018-10-09 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111017871A true CN111017871A (zh) | 2020-04-17 |
Family
ID=70200158
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201910955862.2A Pending CN111017871A (zh) | 2018-10-09 | 2019-10-09 | 一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111017871A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112692298A (zh) * | 2020-12-01 | 2021-04-23 | 中国人民解放军战略支援部队航天工程大学 | 一种核壳结构纳米金银复合材料衬底的制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102072931A (zh) * | 2010-12-09 | 2011-05-25 | 华东师范大学 | 一种基于硅纳米线的生物传感器制备方法及在dna检测中的应用 |
CN104076075A (zh) * | 2014-06-25 | 2014-10-01 | 复旦大学 | 金纳米颗粒-二氧化钛纳米线阵列复合材料及其制备方法和应用 |
-
2019
- 2019-10-09 CN CN201910955862.2A patent/CN111017871A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102072931A (zh) * | 2010-12-09 | 2011-05-25 | 华东师范大学 | 一种基于硅纳米线的生物传感器制备方法及在dna检测中的应用 |
CN104076075A (zh) * | 2014-06-25 | 2014-10-01 | 复旦大学 | 金纳米颗粒-二氧化钛纳米线阵列复合材料及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
LEHUI LU等: "Seed-mediated growth of large, monodisperse core-shell gold-silver nanoparticles with Ag-like optical properties", 《CHEM. COMMUN.》 * |
SANGYEOP LEE等: "Biological imaging of HEK293 cells expressing PLCγ1 using surface-enhanced raman microscopy", 《ANAL. CHEM.》 * |
VLADIMER A. SIVAKOV等: "Silver coated platinum core-shell nanostructures on etched Si nanowires: atomic layer deposition (ALD) processing and application in SERS", 《CHEMPHYSCHEM》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112692298A (zh) * | 2020-12-01 | 2021-04-23 | 中国人民解放军战略支援部队航天工程大学 | 一种核壳结构纳米金银复合材料衬底的制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Yang et al. | Reproducible E. coli detection based on label-free SERS and mapping | |
Aslan et al. | Fast and slow deposition of silver nanorods on planar surfaces: application to metal-enhanced fluorescence | |
Zhang et al. | Multifunctional magnetic–plasmonic nanoparticles for fast concentration and sensitive detection of bacteria using SERS | |
Liu et al. | A visual electrochemiluminescence resonance energy transfer/surface plasmon coupled electrochemiluminescence nanosensor for Shiga toxin-producing Escherichia coli detection | |
US20210102900A1 (en) | Biosensor based on trititanium dicarbide two-dimensional metal carbide catalyzed luminol electrogenerated chemiluminescence probe and preparation method | |
CN106290514B (zh) | 一种基于硅酞菁功能化的TiO2介观晶体的黄曲霉毒素光电化学检测方法 | |
Bi et al. | A molecularly imprinted polymer combined with dual functional Au@ Fe3O4 nanocomposites for sensitive detection of kanamycin | |
CN102661944A (zh) | 一种金属粒子阵列基表面增强拉曼散射基底的制备方法 | |
Wang et al. | Silica-coated silver nanoparticles decorated with fluorescent CdTe quantum dots and DNA aptamers for detection of tetracycline | |
Wang et al. | Highly sensitive and reproducible silicon-based surface-enhanced Raman scattering sensors for real applications | |
Zhang et al. | Label-free immunosensor based on Au@ Ag2S nanoparticles/magnetic chitosan matrix for sensitive determination of ractopamine | |
CN113588745B (zh) | 一种灵敏度可控的Pb2+诱导的双放大电化学发光检测方法 | |
CN104359893A (zh) | 一种sers基底的热构重组制备方法 | |
Wang et al. | Detection of IL-8 in human serum using surface-enhanced Raman scattering coupled with highly-branched gold nanoparticles and gold nanocages | |
Fu et al. | Fabrication of refreshable aptasensor based on hydrophobic screen-printed carbon electrode interface | |
CN112858257A (zh) | 一种检测食源性致病菌的多功能集成拉曼纳米传感器 | |
Li et al. | Thermo-responsive molecularly imprinted sensor based on the surface-enhanced Raman scattering for selective detection of R6G in the water | |
Zhou et al. | Silver nanocluster based sensitivity amplification of a quartz crystal microbalance gene sensor | |
CN105738341A (zh) | 一种重金属汞离子检测方法 | |
Moghtader et al. | Bacterial detection using bacteriophages and gold nanorods by following time-dependent changes in Raman spectral signals | |
Qin et al. | In situ microliter-droplet anodic stripping voltammetry of copper stained on the gold label after galvanic replacement reaction enlargement for ultrasensitive immunoassay of proteins | |
Ansari et al. | Emerging optical and electrochemical biosensing approaches for detection of ciprofloxacin residues in food and environment samples: A comprehensive overview | |
CN106887295A (zh) | 一种磁性银花纳米颗粒的结构及制备方法 | |
CN111017871A (zh) | 一种基于Au@Ag核壳纳米粒子负载硅纳米线阵列及其制备方法和用途 | |
Tan et al. | Stretchable and Flexible Micro–Nano Substrates for SERS Detection of Organic Dyes |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200417 |