CN111012759A - 负载ngf的花状钌纳米粒子及制备方法以及其在阿尔兹海默症中的应用 - Google Patents

负载ngf的花状钌纳米粒子及制备方法以及其在阿尔兹海默症中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种负载NGF的花状钌纳米粒子及制备方法以及其在阿尔兹海默症中的应用。该制备方法包括如下步骤：(1)将钌纳米材料和神经生长因子加入到PBS缓冲液中，密封后在4℃条件下静置，得到混合溶液I；(2)将混合溶液I、相变材料十四醇和乙醇溶液混合均匀，然后在40～50℃水浴条件下进行超声分散，离心，水洗，得到负载NGF的花状钌纳米粒子。本发明中获得的花状钌纳米粒子具有优异的光热效果，在NIR照射下，该材料可以有效的透过BBB，并在病灶区域响应性相变，释放NGF，从而实现修复神经元的损伤和抑制Tau相关AD发病机制的多个关键途径，因此可将其用于治疗阿尔兹海默症，在生物医学中具有良好的应用前景。

Description

负载NGF的花状钌纳米粒子及制备方法以及其在阿尔兹海默 症中的应用
技术领域
本发明属于纳米药物技术领域，特别涉及一种负载NGF的花状钌纳米粒子及制备方法以及其在阿尔兹海默症中的应用。
背景技术
阿尔茨海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病，临床表现为认知功能严重受损。目前尚无有效的AD治疗药物。AD的主要病理特征为患者大脑中形成老年斑块(β淀粉样蛋白的胞外堆积)和神经原纤维的缠结(过度磷酸化Tau蛋白的聚集体)。然而，基于β淀粉样蛋白这一假说的临床疗法纷纷在临床试验以失败而告终。因此，寻找新的靶点是AD药物研究的一个重要方向。
Tau是一种高度水溶性，天然未折叠的磷酸化蛋白质，主要位于成熟神经元的轴突中，其生理功能是促进微管聚合和稳定化并维持神经功能。然而，由于多种蛋白激酶和磷酸酶的功能失衡，导致tau蛋白过度磷酸化。Tau蛋白的过度磷酸化通过改变蛋白质电荷和构象并暴露微管结合结构域，从而导致tau蛋白聚集。此外，tau蛋白过度磷酸化和tau蛋白异常聚集所形成的神经原纤维缠结促使活性氧(ROS)产生，造成神经元损伤，最终导致神经元的凋亡，影响学习和记忆缺失。因此，抑制Tau蛋白的过度磷酸化和修复受损神经元成为有希望治疗AD的方法。
神经生长因子(NGF)已被证明可以抑制Tau蛋白过度磷酸化，修复神经元的损伤，轴突导向，细胞形态，以及学习和记忆的缺陷。然而，由于NGF无法透过血脑屏障(BBB)和较短的全身半衰期，导致其无法在脑部富集发挥理想的治疗效果。因此，设计以非侵入性方式高效递送NGF透过BBB并在病灶区受控缓释的药物治疗系统，具有重要的临床意义。
目前，纳米材料由于其独特的物理和化学性质不仅被广泛用于药物递送载体，而且还应用于包括AD在内的多种脑部疾病的诊断和治疗。在众多无机金属纳米材料中，钌纳米材料由于具有良好的生物相容性，高表面积和高封装效率等特性，受到越来越多的关注。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法。
本发明的另一目的在于提供所述方法制备得到的负载NGF的花状钌纳米粒子。
本发明的再一目的在于提供所述负载NGF的花状钌纳米粒子在制备治疗阿尔兹海默症的药物中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：一种负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，包括如下步骤：
(1)将钌纳米材料(Ru NPs)和神经生长因子(NGF)加入到PBS缓冲液中，密封后在4℃条件下静置，得到混合溶液I；
(2)将混合溶液I、相变材料十四醇(PCM)和乙醇溶液混合均匀，然后在40～50℃水浴条件下进行超声分散，离心，水洗，得到负载NGF的花状钌纳米粒子(NGF-PCM@Ru NPs)。
步骤(1)中所述的PBS缓冲液的pH值为7.4。
步骤(1)中所述的钌纳米材料(Ru NPs)的用量为按每毫升PBS缓冲液配比1.20～1.30mg钌纳米材料计算；优选为按每毫升PBS缓冲液配比1.25mg钌纳米材料计算。
步骤(1)中所述的钌纳米材料(Ru NPs)和神经生长因子(NGF)的质量比为20～30:1；优选为25：1。
步骤(1)中所述的钌纳米材料(Ru NPs)优选为通过如下方法制备得到：
(a)将三氯化钌(RuCl3)溶解到高氯酸溶液中，然后加入非离子表面活性剂、氨基修饰的胶体二氧化硅纳米粒子(AFSN)和硼氢化钠(NaBH4)溶液，进行超声处理，离心，洗涤，得到纳米颗粒；
(b)将步骤(a)得到的纳米颗粒分散到氢氟酸溶液中(以去除二氧化硅模板)，然后离心、洗涤、干燥，得到钌纳米材料(Ru NPs)。
步骤(a)中所述的高氯酸溶液的浓度为0.5mmol/L～0.2mol/L；优选为0.2mol/L。
步骤(a)中所述的高氯酸溶液中的高氯酸与三氯化钌的摩尔比为0.7～1:1；优选为1:1。
步骤(a)中所述的非离子表面活性剂优选为P407。
步骤(a)中所述的非离子表面活性剂和三氯化钌的质量比为10:5～6；优选为50:25～29.04；更优选为50:29.04。
步骤(a)中所述的混合优选为采用涡旋的方式进行混合。
所述的涡旋的时间优选为1～3min；优选为3min。
步骤(a)中所述的氨基修饰的胶体二氧化硅纳米粒子与三氯化钌的质量比为3:29.4～30；优选为3:29.04。
步骤(a)中所述的硼氢化钠溶液的浓度优选为0.1mol/L。
步骤(a)中所述的硼氢化钠溶液中的硼氢化钠与三氯化钌的摩尔比优选为5:1。
步骤(a)中所述的超声处理的条件为：在36～38℃、50～70Hz条件下超声反应4h；优选为：在37℃、50Hz条件下超声反应4h。
步骤(a)中所述的洗涤为采用去离子水进行洗涤；优选为采用去离子水洗涤三次以上。
步骤(b)中所述的氢氟酸溶液的浓度为质量百分比20～40％；优选为质量百分比20％。
步骤(b)中所述的分散的时间为12h～15h；优选为12h。
步骤(b)中所述的干燥的优选条件为：室温下干燥2天以上。
所述的室温的温度优选为25～26℃。
步骤(1)中所述的静置的时间为2～4h；优选为3h。
步骤(2)中所述的相变材料十四醇(PCM)与所述钌纳米材料(Ru NPs)的质量比为1～5:1；优选为3～3.5:1；更优选为3.2:1。
步骤(2)中所述的乙醇溶液的浓度为质量百分比70％～95％；优选为质量百分比75％。
步骤(2)中所述的乙醇溶液与混合溶液I的体积比为1:1～2；优选为1:1.25。
步骤(2)中所述的水浴的温度优选为45℃。
步骤(2)中所述的超声分散的频率为50Hz。
步骤(2)中所述的超声分散的时间为20～30min；优选为30min。
步骤(2)中所述的离心的条件为：5000～10000rpm离心10～15min；优选为：6000rpm离心15min。
步骤(2)中所述的水涤的次数优选为3次以上。
一种负载NGF的花状钌纳米粒子，通过上述任一项所述的方法制备得到。
所述的负载NGF的花状钌纳米粒子在制备治疗阿尔兹海默症(AD)的药物中的应用。
所述的药物通过抑制Tau蛋白过度磷酸化，Tau的聚集，降低氧化应激，减少炎症反应，恢复神经元的损伤等途径实现治疗阿尔兹海默症(AD)的目的。
所述的药物在NIR照射下透过血脑屏障(BBB)，使负载的NGF在脑中富集，即增强NGF在脑中的生物利用度，以实现修复神经元的损伤和抑制Tau相关AD发病机制的多个关键途径，从而可以有效抑制AD的发病进展，具有潜在治疗AD的应用价值。
所述的NIR为808nm NIR。
所述的药物的使用条件为：40～43℃(优选为42℃)保持4～6min(优选为5min)，即可以在近红外光下照射下使头部温度升高至40～43℃(优选为42℃)，并保持4～6min(优选为5min)。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明运用双模板法制备花状中空纳米钌，然后将其作为载体负载NGF并用PCM密封，合成具有高稳定性和良好生物相容性的新型纳米材料(NGF-PCM@Ru NPs)，由于该纳米材料具有优异的光热效果，在NIR照射下，纳米材料可以有效的透过BBB，并在病灶区域响应性相变，释放NGF，从而实现修复神经元的损伤和抑制Tau相关AD发病机制的多个关键途径，进而可以有效抑制AD的发病进展，其具有潜在治疗AD的应用价值，且至今未发现NGF-PCM@Ru NPs制备在治疗阿尔兹海默症药物方面的报道。
(2)本发明中采用温度刺激响应性相变材料十四醇(PCM，熔点：39-40℃)作为热响应开关，合成智能温控释放NGF的钌纳米材料，该钌纳米材料在近红外(NIR)照射下具有优异的光热效应，使其具备提高BBB渗透性和温度响应释放药物的潜力。
(3)本发明制备的纳米材料可以稳定高效地负载NGF，并在NIR照射下透过BBB，在脑中富集，而且当温度超过40℃后，PCM慢慢融化使封孔打开，缓慢释放药物NGF，增强NGF在脑中的生物利用度，以高效的抑制Tau过度磷酸化和Tau的聚集，降低氧化应激和恢复神经损伤，在生物医学等中显示出巨大的应用前景。
(4)本发明提供的NGF-PCM@Ru NPs制备过程简单，产品可直接保存和使用。
附图说明
图1是Ru NPs和NGF-PCM@Ru NPs纳米材料的形貌图；其中，A为Ru NPs的形貌图；B为NGF-PCM@Ru NPs的形貌图。
图2是在NIR照射下体外NGF的释放图；其中，A为分别在37℃，42℃下，NGF-PCM@RuNPs纳米材料中NGF的释放图；B为在NIR照射下NGF-PCM@Ru NPs纳米材料的受控NGF释放图。
图3是NGF-PCM@Ru NPs纳米材料清除活性氧的图；其中，A为使用DCFH-DA探针获得的SH-SY5Y细胞中ROS的共聚焦荧光图像(SH-SY5Y细胞在OA存在下用Ru NPs，NGF或NGF-PCM@Ru NPs预处理)；B为通过流式细胞仪确定DCFH-DA荧光强度的定量分析。
图4是NGF-PCM@Ru NPs纳米材料抑制Tau过度磷酸化和恢复神经损伤的图；其中，A为WT小鼠和AD小鼠脑内Tau过度磷酸化聚集的免疫组织化学分析(用RuNPs，NGF和NGF-PCM@RuNPs+NIR处理的AD小鼠)；B为WT小鼠和AD小鼠脑内神经细胞尼氏染色的免疫组织化学分析(用RuNPs，NGF和NGF-PCM@RuNPs+NIR处理的AD小鼠)。
图5是NGF-PCM@Ru NPs纳米材料具有良好光热效应并在NIR下透过BBB的图；其中，A为NGF-PCM@Ru NPs在808nm近红外激光照射下的体内光热效应；B为使用埃文斯蓝(Evansblue)作为BBB完整性指标，处理后的小鼠大脑的照片。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。除非特别说明，本发明所用试剂和原材料均可通过市售获得。
本发明中涉及的AFSN为氨基修饰的胶体二氧化硅纳米粒子，粒径大小为100nm左右，其根据中国专利申请(申请号为：201811296201.5，名称为“用于结直肠癌靶向治疗的介孔钌纳米粒子及其制备方法和应用”)中的实施例1制备得到。
实施例1：Ru NPs和NGF-PCM@Ru NPs纳米材料的制备
(1)Ru NPs的合成：
将29.04mg RuCl3溶于7.0mL含高氯酸(0.2mol/L)的水中，然后加入50mg表面活性剂P407(购自Aladdin试剂公司)通过涡旋溶解1～3min。随后加入3.0mg AFSN颗粒进行超声处理10min。完全溶解后，加入7.0mL 0.1mol/L的NaBH4水溶液，然后在超声波清洗机(50Hz)中将混合物超声处理4h(37℃)，离心分离产物，然后将得到纳米颗粒用水洗涤三次后再分散于20％(w/w)氢氟酸(HF)溶液中12h以除去二氧化硅模板，最后将所得产品用水洗涤三次并在室温(25～26℃)下干燥2天，即可得到纳米颗粒Ru NPs。
(1)NGF-PCM@Ru NPs纳米材料的合成：
在1mL PBS缓冲液(pH7.4)中将50ug NGF(神经生长因子，购自武汉海特生物制药股份有限公司)与1.25mg RuNPs(NGF与RuNPs的质量比为1：25)的J进行混合然后密封并在4℃下储存3h。然后将混合溶液与4mg十四醇(相变材料十四醇，熔点：39～40℃，简称PCM；购自Aladdin试剂公司)，2mL去离子水，1mL酒精(质量分数75％)加入反应器处于45℃水浴中。超声分散30min后，将混合物溶液保持在真空泵送条件下直至排出溶剂。通过以6000rpm离心15min并用去离子水洗涤三次获得NGF-PCM@Ru NPs。
Ru NPs和NGF-PCM@Ru NPs纳米材料的形貌如图1所示。
实施例2：在NIR照射下体外NGF的释放的效果
(1)将NGF-PCM@Ru NPs纳米材料(终浓度为20μg/mL)分散在0.1M PBS缓冲液中，然后将获得的溶液分别放置在37℃和42℃(溶液初始温度为37℃，用808nm NIR处理使温度从37℃升至42℃)的旋转平台中，每隔1h，取等分试样并用新鲜PBS缓冲液替换。将样品放在4℃下储存，最后使用NGF ELISA试剂盒(购自Peprotech,Israel)进一步定量；结果见图2A所示。
(2)将NGF-PCM@Ru NPs纳米颗粒(终浓度为20μg/mL)分散在0.1M PBS缓冲液中，然后将获得的溶液放置在37℃水浴中及连续摇动，每隔2h，混合溶液用808nm NIR处理5min。释放NGF的量通过NGF ELISA试剂盒测定，结果见图2B所示。
实施例3：NGF-PCM@Ru NPs+NIR对降低氧化应激的作用
本实验中SH-SY5Y细胞购自ATCC公司，培养条件为放在含有10％(v/v)胎牛血清(FBS)，1％(w/v)链霉素或青霉素的DMEM培养基中培养，然后将细胞放在37℃，加湿含5％二氧化碳的细胞培养箱中。
将SH-SY5Y细胞接种在激光共聚焦培养皿中孵育24小时。用冈田酸(OA)(40nM)预处理细胞后孵育12小时，然后向培养基中分别加入RuNPs(实施例1步骤(1)制备，OA+RuNPs组)，NGF(OA+NGF组)，NGF-PCM@Ru NPs(终浓度均为20μg/mL)，其中NGF-PCM@Ru NPs要进行808nm NIR(1W/cm2)处理5min(OA+NGF-PCM@Ru NPs+NIR组)，以冈田酸且未添加任何药物为对照(OA组)，为未作任何处理的细胞为空白对照(对照组)。在共培养24小时后，将SH-SY5Y细胞用5μM/L的2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)(氧化敏感荧光探针)孵育30min，接下来通过激光扫描共聚焦显微镜(Leica TCS SP5，Leica Microsystems，Wetzlar，德国)在激发波长488nm，发射波长535nm下进行检测及通过流式细胞仪进行定量分析。
结果见图3所示：OA诱导细胞内ROS水平的上调，但经过NGF-PCM@Ru NPs(20μg/ml)并在808nm NIR(1W/cm2)照射5min后，与OA组相比，SH-SY5Y细胞内荧光强度显著降低，治疗的效果是最佳的。
实施例4：NGF-PCM@Ru NPs+NIR抑制Tau过度磷酸化和恢复神经损伤的作用
本实验中的动物：使用6个月的雌性野生型C57BL/6小鼠()。所有C57BL/6小鼠从广东医学实验动物中心购买，所有动物实验均按照暨南大学实验动物中心管理规定执行。
立体定位注射：用3％戊巴比妥钠对C57BL/6小鼠进行腹膜内麻醉，并置于立体定位装置中。OA(130nl，40μM)或生理盐水(0.9％NaCl 130nl)立体定向显微注射到右侧小鼠单侧，注射至外侧杏仁核(前囟坐标：前/后-1.94，内侧/外侧-3.15，背侧/腹侧-4.5)，输注速率为60nl/min；随后，将针保持在适当位置以允许扩散，然后在5min内缓慢移除。注射OA和生理盐水的小鼠分别作为AD模型组和对照组。将小鼠分成5组(每组n＝7)：对照组，OA，OA+RuNPs，OA+NGF，OA+NGF-PCM@Ru NPs+NIR(5min)。纳米系统的浓度分别为20μg/mL。
将小鼠进行安乐死，然后把小鼠的脑取出，并将脑放在4％多聚甲醛中固定24小时。将脑包埋在石蜡中；将石蜡包埋的脑组织制作成切片进行Tau染色(AT180染色)(购自Sigma)以检测小鼠小叶皮质中的Tau斑块；并使用尼氏染色切片检测小鼠海马神经元细胞质中的尼氏体。
结果见图4所示：OA诱导的AD模型小鼠与对照组小鼠相比，AT180染色明显可见。然而，NGF-PCM@Ru NPs+NIR处理后，AD小鼠外侧杏仁核AT180免疫反应性水平明显降低，表明NGF-PCM@Ru NPs能有效地抑制Tau过度磷酸化。另外，海马区神经细胞的损伤严重影响记忆和学习能力，通过尼氏染色观察小鼠海马区神经细胞的损伤，与正常的小鼠相比，经OA诱导的小鼠只有非常少的尼氏体，并且其海马中的细胞出现收缩和碎裂。在RuNPs处理组中，仍观察到细胞皱缩和神经元丢失。相比之下，NGF治疗效果较好，减轻了神经元丢失的损伤。这是因为NGF具有修复神经细胞损伤的功能。特别值得一提的是在NGF-PCM@Ru NPs+NIR处理后，神经元与正常组无明显差异，神经元排列整齐密集，这可能是NGF-PCM@Ru NPs+NIR能有效地提高NGF生物利用度，从而使NGF-PCM@Ru NPs+NIR组的作用效果明显优于单独的NGF组。这些结果证明了NGF-PCM@Ru NPs+NIR可有效的修复神经元的损伤和挽救神经元的丢失。
实施例5：NGF-PCM@Ru NPs在NIR照射下能透过血脑屏障的作用
将雌性野生型C57BL/6小鼠(广东医学实验动物中心)分为三组：(1)NIR，(2)NGF-PCM@Ru NPs，(3)NGF-PCM@Ru NPs+NIR。所有小鼠均接受静脉注射伊文思蓝(100μL，2wt％)溶液。30分钟后，对于NGF-PCM@Ru NPs和NGF-PCM@Ru NPs+NIR组，以20μg/mL，1.5mg/kg的剂量静脉内注射NGF-PCM@Ru NPs溶液。再过一小时后，用808nm NIR(1W cm-2)照射NIR和NGF-PCM@Ru NPs+NIR组的小鼠5分钟。在照射过程中，使用红外热像仪监控头部的局部温度。24小时后，处死小鼠并切除大脑以进行拍照。
结果见图5所示：将小鼠头部的温度升高至40～43℃，并保持5min。24小时后，收集小鼠大脑。如大脑照片所示，仅在用NGF-PCM@Ru NPs注射和NIR照射处理的小鼠的脑中观察到埃文斯蓝(Evans blue)的染色。这些结果意味着通过RuNPs良好的光热效应改善了BBB渗透性，进而增强NGF-PCM@Ru NPs透过BBB的能力。而这种方式为治疗药物跨越BBB进入脑实质提供可能。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将钌纳米材料和神经生长因子加入到PBS缓冲液中，密封后在4℃条件下静置，得到混合溶液I；
(2)将混合溶液I、相变材料十四醇和乙醇溶液混合均匀，然后在40～50℃水浴条件下进行超声分散，离心，水洗，得到负载NGF的花状钌纳米粒子。
2.根据权利要求1所述的负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的钌纳米材料和神经生长因子的质量比为20～30:1；
步骤(2)中所述的相变材料十四醇与所述钌纳米材料的质量比为1～5:1；
步骤(2)中所述的乙醇溶液的浓度为质量百分比70％～95％；
步骤(2)中所述的乙醇溶液与混合溶液I的体积比为1:1～2。
3.根据权利要求2所述的负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的钌纳米材料和神经生长因子的质量比为25:1；
步骤(2)中所述的相变材料十四醇与所述钌纳米材料的质量比为3～3.5:1；
步骤(2)中所述的乙醇溶液的浓度为质量百分比75％；
步骤(2)中所述的乙醇溶液与混合溶液I的体积比为1:1.25。
4.根据权利要求1所述的负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的钌纳米材料通过如下方法制备得到：
(a)将三氯化钌溶解到高氯酸溶液中，然后加入非离子表面活性剂、氨基修饰的胶体二氧化硅纳米粒子和硼氢化钠溶液，进行超声处理，离心，洗涤，得到纳米颗粒；
(b)将步骤(a)得到的纳米颗粒分散到氢氟酸溶液中，然后离心、洗涤、干燥，得到钌纳米材料。
5.根据权利要求4所述的负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，其特征在于：
步骤(a)中所述的高氯酸溶液的浓度为0.5mmol/L～0.2mol/L；
步骤(a)中所述的高氯酸溶液中的高氯酸与三氯化钌的摩尔比为0.7～1:1；
步骤(a)中所述的非离子表面活性剂为P407；
步骤(a)中所述的非离子表面活性剂和三氯化钌的质量比为10:5～6；
步骤(a)中所述的氨基修饰的胶体二氧化硅纳米粒子与三氯化钌的质量比为3:29.4～30；
步骤(a)中所述的硼氢化钠溶液的浓度为0.1mol/L；
步骤(a)中所述的硼氢化钠溶液中的硼氢化钠与三氯化钌的摩尔比为5:1；
步骤(a)中所述的超声处理的条件为：在36～38℃、50～70Hz条件下超声反应4h；
步骤(a)中所述的洗涤为采用去离子水进行洗涤；
步骤(b)中所述的氢氟酸溶液的浓度为质量百分比20～40％；
步骤(b)中所述的分散的时间为12h～15h；
步骤(b)中所述的干燥的条件为：室温下干燥2天以上。
6.根据权利要求1所述的负载NGF的花状钌纳米粒子的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的PBS缓冲液的pH值为7.4；
步骤(1)中所述的静置的时间为2～4h；
步骤(2)中所述的超声分散的时间为20～30min；
步骤(2)中所述的离心的条件为：5000～10000rpm离心10～15min；
步骤(2)中所述的水涤的次数为3次以上。
7.一种负载NGF的花状钌纳米粒子，其特征在于：通过权利要求1～6任一项所述的方法制备得到。
8.权利要求7所述的负载NGF的花状钌纳米粒子在制备治疗阿尔兹海默症的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：
所述的药物通过抑制Tau蛋白过度磷酸化，Tau的聚集，降低氧化应激，减少炎症反应，以及恢复神经元的损伤实现治疗阿尔兹海默症的目的；
所述的药物在NIR照射下透过血脑屏障，使负载的NGF在脑中富集。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：
所述的药物的使用条件为：40～43℃保持4～6min。
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