CN111011597B - 一种功能性动物生长与免疫调节剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种功能性动物生长与免疫调节剂及其制备方法；其中，一种功能性动物生长与免疫调节剂，其包括如下组分：灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液；其制备方法包括如下步骤：(1)分别制备灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液；(2)将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液按比例称取复配，制备得到成品。本发明技术的优点在于综合了发酵中草药和药用真菌的双重优点和功效，是一种绿色、安全、高效的微生物制剂，可以有效的提高动物机体免疫力，增强动物防抗病能力，提高动物生产性能和生长速度；并且能有效降低牛舍中氨气浓度，有效的降低了养殖对环境的污染。

Description

一种功能性动物生长与免疫调节剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及微生物发酵技术领域，特别是涉及一种功能性动物生长与免疫调节剂及其制备方法。
背景技术：
随着饲用抗生素的普及甚至滥用，其所带来的负面效应日益突出。欧盟自2006年起全面禁止抗生素作为饲料添加剂；美国近年来几乎冻结了所有新型抗生素的审批；我国政府也先后颁布了一系列饲料药物添加剂使用规范，并于2019年下发公告要求自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。动物饲料使用抗生素对人类最大的伤害是动物产品中的残余抗生素可经食物链被人类食用而进入人体内或者经由废水排入土地内，再进入人体。经过这样演变会放大抗药菌种的散布或者突变出更顽固的微生物而感染人类。养殖场的动物身上的抗药菌种也可能经由空气传播而传到人类。这种抗药性菌种诱发的影响因素包括药物使用时间、使用剂量及抗生素种类等。有些抗药性菌种是多重药物抗药性，是公共卫生的一大挑战。
在畜禽养殖过程中使用抗生素虽然能够带来短期的经济利益，可是利益背后所隐藏的健康危机，如果不从源头上加强管理，必将给整个畜牧产业，乃至人类的生命安全造成威胁。因此如何采取具体措施，抑制并杜绝抗生素在养殖业中的滥用，是维护畜牧业健康可持续发展的首要任务。而开发和利用健康、安全、高效的新型饲用抗生素替代产品已势在必行，同时这也是畜牧业可持续发展的必然选择。
发明内容：
本发明的第一个目的在于提供一种提高动物机体免疫力，增强动物防抗病能力，提高动物生产性能和生长速度的功能性动物生长与免疫调节剂。
本发明的第二个目的在于提供一种提高动物机体免疫力，增强动物防抗病能力，提高动物生产性能和生长速度的功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法。
本发明的第一个目的由如下技术方案实施：一种功能性动物生长与免疫调节剂，其包括如下组分：灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液。
进一步，各组分的体积份数为：灵芝菌液10～20份、蛹虫草菌液10～20份、桑黄菌液5～15份、茯苓菌液5～15份、发酵中草药液40～50份。
进一步，所述发酵中草药液包括如下原料药：黄芪、板蓝根、甘草、金银花、黄芩和黄花地丁。
进一步，所述发酵中草药液中各原料药的质量份数为：黄芪5～10份、板蓝根5～10份、甘草2～5份、金银花3～6份、黄芩3～6份、黄花地丁3～6份。
进一步，灵芝总多糖产量≥50.36mg/100ml，菌丝体含量≥155.2mg/100ml，灵芝酸总产量≥4.08mg/100ml；虫草总多糖产量≥152mg/100ml，菌丝体含量≥267mg/100ml，虫草素含量≥14.57mg/100ml，虫草酸总产量≥98.5mg/100ml；桑黄总多糖产量≥67.22mg/100ml，菌丝体含量≥115.25mg/100ml，菌丝体中桑黄黄酮含量≥4.33mg/100ml；茯苓总多糖产量≥61.73mg/100ml，菌丝体含量≥107.18mg/100ml；黄芪多糖≥814mg/100ml，黄芪甲苷含量≥1.58mg/100ml，板蓝根粗多糖≥4.29mg/ml；植物乳杆菌植物亚种(CFU/g)≥6.2×108，鼠李糖乳杆菌≥4.8×108，γ-氨基丁酸含量≥22.15mg/100ml。
本发明的第二个目的由如下技术方案实施：一种功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法，其包括如下步骤：
(1)分别制备灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液；
其中，灵芝菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20g，KH2PO4 3g，MgSO4.7H2O 1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液制备方法如下：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0～50.0kg、蛋白胨3.0～6.0kg、酵母浸粉3.0～6.0kg，KH2PO4 0.5～1.5kg、MgSO4.7H2O 0.2～1.0kg、维生素B10.05～0.1kg，纯净水1000L，pH 5.5～6.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2000～3000ml，将灵芝(Ganoderma lingzhi)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25～30℃、转速150～180r/min、振荡培养72～96h，制备得到灵芝种子菌液。
液态发酵条件：将上述灵芝种子菌液按照5％～15％的质量比，接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25～30℃、通风量0.5～1.5m3/h、罐压0.01～0.02MP、转速100r～150r/min、培养96～120h，制备得到灵芝菌液。
蛹虫草菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液按如下方法制备得到：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖20.0～40.0kg、蛋白胨5.0～15.0kg、KH2PO4 1.5～2.5kg、MgSO4.7H2O 0.5～1.5kg、维生素B10.05～0.1kg，纯净水1000L，pH 6.0～7.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2000～3000ml，将蛹虫草(Cordyceps militaris)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度23～28℃、转速160～200r/min、振荡培养72～96h，制备得到蛹虫草种子菌液。
液态发酵条件：将蛹虫草种子菌液按照5％～15％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度23～28℃、通风量0.5～1.5m3/h、罐压0.01～0.02MP、转速160～200r/min、培养72～96h，制备得到蛹虫草菌液。
桑黄菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖20.0～40.0kg、玉米淀粉15.0～25.0kg、酵母浸粉3.0～6.0kg、蛋白胨3.0～6.0kg、KH2PO4 2.0～3.0kg、MgSO4.7H2O 1.0～2.0kg、维生素B10.01～0.05kg，纯净水1000L，pH 5.5～7.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2000～3000ml，将桑黄(Phellinus linteus)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25～30℃、转速160～200r/min、振荡培养72～96h，制备得到桑黄种子菌液。
液态发酵条件：将上述桑黄种子菌液按照10％～20％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25～30℃、通风量0.5～1.5m3/h、罐压0.01～0.02MP、转速160～200r/min、培养72～96h，制备得到桑黄菌液。
茯苓菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖20.0～40.0kg、玉米粉15.0～25.0kg、酵母浸粉3.0～6.0kg、蛋白胨10.0～20.0kg、KH2PO4 0.5～1.5kg、MgSO4.7H2O 1～2kg、维生素B10.01～0.05kg，纯净水1000L，pH 5.0～6.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2000～3000ml，将茯苓(Wolfiporia cocos)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度23～28℃、转速120～180r/min、振荡培养72～96h，制备得到茯苓种子菌液。
液态发酵条件：将上述茯苓种子菌液按照5％～15％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度23～28℃、通风量0.5～1.5m3/h、罐压0.02～0.05MP、转速120～180r/min、培养72～96h，制备得到茯苓菌液。
(2)将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液按比例称取复配，制备得到成品。
进一步，所述步骤(2)中各组分的体积份数为：灵芝菌液10～20份、蛹虫草菌液10～20份、桑黄菌液5～15份、茯苓菌液5～15份、发酵中草药液40～50份。
进一步，所述发酵中草药液包括如下原料药：黄芪、板蓝根、甘草、金银花、黄芩和黄花地丁。
进一步，所述发酵中草药液中各原料药的质量份数为：黄芪5～10份、板蓝根5～10份、甘草2～5份、金银花3～6份、黄芩3～6份、黄花地丁3～6份。
发酵中草药液按如下方法制备得到：
A.按质量比例称取原料药：黄芪5～10份、板蓝根5～10份、甘草2～5份、金银花3～6份、黄芩3～6份、黄花地丁3～6份。
B.将以上称取的中草药粉碎，过40目筛，混合均匀后加入纯净水，115℃蒸煮60min，待液体冷却后，采用反清洗过滤器滤去药渣取上清液制得中草药发酵母液。
C.种子培养基：酪蛋白胨10～15g、牛肉浸膏10～15g、酵母浸粉2～5g、葡萄糖20～30g、乙酸钠2～5g、柠檬酸二铵1～2g、Tween80 0.5～1g、K2HPO4 1～2g、MgSO4.7H2O 0.1～0.2g、MnSO4.H2O 0.02～0.05g、CaCO3 2～5g、中草药发酵母液1000ml，pH6.8，在温度121℃下灭菌30min，制备得到种子培养基。
D.液态发酵培养基：酪蛋白胨10.0～15.0kg、牛肉浸膏10.0～15.0kg、酵母浸粉2.0～5.0kg、葡萄糖20.0～30.0kg、乙酸钠2.0～5.0kg、柠檬酸二铵1.0～2.0kg、Tween800.5～1.0kg、K2HPO4 1.0～2.0kg、MgSO4.7H2O 0.1～0.2kg、MnSO4.H2O 0.02～0.05kg、CaCO32.0～5.0kg、中草药发酵母液1000L，pH6.0～7.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基。
E.培养条件：
种子培养条件：
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基2000～3000ml，将植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)斜面菌种按每50～100ml一环的比例接入种子培养基中，温度35～40℃、转速120～150r/min、振荡培养24～48h，制备得到植物乳杆菌植物亚种菌液。
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基2000～3000ml，将鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)斜面菌种按每50～100ml一环的比例接入种子培养基中，温度35～40℃、转速120～150r/min、振荡培养24～48h，制备得到鼠李糖乳杆菌菌液。
液态发酵条件：将植物乳杆菌植物亚种菌液和鼠李糖乳杆菌菌液分别按照5％～10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤D制备得到；发酵35～40℃、通风量0.5～1.5m3/h、罐压0.01～0.02MP、转速120～150r/min、培养24～48h，制备得到发酵中草药液。
发酵中草药液是模拟中药在人体内的消化分解过程，采用现代生物工程技术，在动物体外建立一个"工业化肠胃系统"，采用多种益生菌，对中药进行预消化、分解和转化，把大分子的中间物质，分解转化成为能够被直接吸收的有效小分子物质。因此，本发明发酵中草药液具有抗菌消炎、提高动物免疫力、促进动物生长的功效。
进一步，所述步骤(2)制备得到的成品中，灵芝总多糖产量≥50.36mg/100ml，菌丝体含量≥155.2mg/100ml，灵芝酸总产量≥4.08mg/100ml；虫草总多糖产量≥152mg/100ml，菌丝体含量≥267mg/100ml，虫草素含量≥14.57mg/100ml，虫草酸总产量≥98.5mg/100ml；桑黄总多糖产量≥67.22mg/100ml，菌丝体含量≥115.25mg/100ml，菌丝体中桑黄黄酮含量≥4.33mg/100ml；茯苓总多糖产量≥61.73mg/100ml，菌丝体含量≥107.18mg/100ml；黄芪多糖≥814mg/100ml，黄芪甲苷含量≥1.58mg/100ml，板蓝根粗多糖≥4.29mg/ml；植物乳杆菌植物亚种(CFU/g)≥6.2×108，鼠李糖乳杆菌≥4.8×108，γ-氨基丁酸含量≥22.15mg/100ml。具有抗癌、抗炎、抗菌、抗溃疡和增强机体免疫力等功效。
本发明的优点：
本发明综合了发酵中草药和药用真菌的双重优点和功效，是一种绿色、安全、高效的微生物制剂，产品不但口感好、疗效快、效果确切并且无毒副作用，同时还富含动物体所需的益生菌群。对动物疾病不但有良好的治疗效果，同时还可以有效的提高动物机体免疫力，增强动物防抗病能力，提高动物生产性能和生长速度。并且能有效降低牲畜舍中氨气浓度，有效的降低了养殖对环境的污染。
附图说明：
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为一种功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法工艺流程图。
具体实施方式：
以下通过具体实施例详细说明本发明的技术及特点，但这些实施例并非用以限定本发明的保护范围。
实施例所用菌种：本发明以下实施例中所用灵芝(Ganoderma lingzhi)、蛹虫草(Cordyceps militaris)、桑黄(Phellinus linteus)、茯苓(Wolfiporia cocos)、植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)和鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)，分别购买于中国工业微生物微生物保藏管理中心(CICC)、中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)和中国林业微生物菌种保藏管理中心(CFCC)。其中，灵芝菌种保藏编号为CICC 14029，蛹虫草菌种保藏编号为CICC 14015，桑黄菌种保藏编号为CFCC 81183，茯苓菌种保藏编号为CGMCC 5.78，植物乳杆菌植物亚种保藏编号为CICC6238，鼠李糖乳杆菌保藏编号为CICC 6141。
实施例1：如图1所示，一种功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法，其包括如下步骤：
1.将灵芝(Ganoderma lingzhi)、蛹虫草(Cordyceps militaris)、桑黄(Phellinus linteus)、茯苓(Wolfiporia cocos)分别按以下方法进行液态发酵，制备得到灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液。
(1)灵芝菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20g，KH2PO4 3g，MgSO4.7H2O 1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液制备方法如下：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖50.0kg、蛋白胨5.0kg、酵母浸粉5.0kg，KH2PO4 1.0kg、MgSO4.7H2O 0.5kg、维生素B10.05kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将灵芝(Ganoderma lingzhi)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度28℃、转速150r/min、振荡培养96h，制备得到灵芝种子菌液。
液态发酵条件：将上述灵芝种子菌液按照10％的质量比，接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度8℃、通风量1.2m3/h、罐压0.02MP、转速150r/min、培养96h，制备得到灵芝菌液。
(2)蛹虫草菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液按如下方法制备得到：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0kg、蛋白胨10.0kg、KH2PO4 2.0kg、MgSO4.7H2O1.0kg、维生素B10.05kg，纯净水1000L，pH6.5，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将蛹虫草(Cordyceps militaris)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25℃、转速180r/min、振荡培养96h，制备得到蛹虫草种子菌液。
液态发酵条件：将蛹虫草种子菌液按照10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25℃、通风量1.0m3/h、罐压0.02MP、转速180r/min、培养96h，制备得到蛹虫草菌液。
(3)桑黄菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0kg、玉米淀粉20.0kg、酵母浸粉5.0kg、蛋白胨5.0kg、KH2PO4 3.0kg、MgSO4.7H2O 1.5kg、维生素B10.02kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将桑黄(Phellinus linteus)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度28℃、转速180r/min、振荡培养84h，制备得到桑黄种子菌液。
液态发酵条件：将上述桑黄种子菌液按照12％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度28℃、通风量1.0m3/h、罐压0.02MP、转速180r/min、培养84h，制备得到桑黄菌液。
(4)茯苓菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0kg、玉米粉20.0kg、酵母浸粉5.0kg、蛋白胨15.0kg、KH2PO4 1.0kg、MgSO4.7H2O 1.5kg、维生素B10.02kg，纯净水1000L，pH5.5，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将茯苓(Wolfiporia cocos)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25℃、转速150r/min、振荡培养72h，制备得到茯苓种子菌液。
液态发酵条件：将上述茯苓种子菌液按照10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25℃、通风量1.2m3/h、罐压0.02MP、转速150r/min、培养72h，制备得到茯苓菌液。
2.制备发酵中草药液，具体包括如下步骤：
A.按质量比例称取原料药：黄芪100.0kg、板蓝根70.0kg、甘草30.0kg、金银花50.0kg、黄芩50.0kg、黄花地丁50.0kg。
B.将以上称取的中草药粉碎，过40目筛，混合均匀后加入1000L纯净水，115℃蒸煮60min，待液体冷却后，采用反清洗过滤器滤去药渣取上清液制得中草药发酵母液。
C.种子培养基：酪蛋白胨10.0g、牛肉浸膏10.0g、酵母浸粉5.0g、葡萄糖20.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H2O 0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO3 2.0g、中草药发酵母液1000ml，pH6.8，在温度121℃下灭菌30min，制备得到种子培养基。
D.液态发酵培养基：酪蛋白胨10.0kg、牛肉浸膏10.0kg、酵母浸粉5.0kg、葡萄糖20.0kg、乙酸钠5.0kg、柠檬酸二铵2.0kg、Tween80 1.0kg、K2HPO4 2.0kg、MgSO4.7H2O0.2kg、MnSO4.H2O 0.05kg、CaCO3 5.0kg、中草药发酵母液1000L，pH6.8，温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
E.培养条件：
种子培养条件：
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基3000ml，将植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)斜面菌种按每100ml一环的比例接入种子培养基中，温度37℃、转速150r/min、振荡培养24h，制备得到植物乳杆菌植物亚种菌液。
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基3000ml，将鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)斜面菌种按每100ml一环的比例接入种子培养基中，温度37℃、转速150r/min、振荡培养24h，制备得到鼠李糖乳杆菌菌液。
液态发酵条件：将植物乳杆菌植物亚种菌液10％和鼠李糖乳杆菌菌液10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤D制备得到；发酵37℃、通风量0.8m3/h、罐压0.02MP、转速130r/min、培养30h，制备得到发酵中草药液。
3.将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液按如下体积份数：灵芝菌液20份、蛹虫草菌液20份、桑黄菌液10份、茯苓菌液10份、发酵中草药液40份，称取复配，制备得到成品。
制备得到的成品中，灵芝总多糖产量≥57.2mg/100ml，灵芝菌丝体含量≥173.5mg/100ml，灵芝酸总产量≥5.15mg/100ml；虫草总多糖产量≥170mg/100ml，虫草菌丝体含量≥290mg/100ml，虫草素含量≥17.16mg/100ml，虫草酸总产量≥112mg/100ml；桑黄总多糖产量≥81.5mg/100ml，桑黄菌丝体含量≥139.7mg/100ml，桑黄菌丝体中桑黄黄酮含量≥6.032mg/100ml；茯苓总多糖产量≥79.8mg/100ml，茯苓菌丝体含量≥123.4mg/100ml；黄芪多糖≥1000mg/100ml，黄芪甲苷含量≥2mg/100ml；板蓝根粗多糖≥6.09mg/ml；植物乳杆菌植物亚种(CFU/g)≥1.0×109，鼠李糖乳杆菌≥8.0×108，γ-氨基丁酸含量≥29.8mg/100ml。
实施例2：如图1所示，一种功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法，其包括如下步骤：
1.将灵芝(Ganoderma lingzhi)、蛹虫草(Cordyceps militaris)、桑黄(Phellinus linteus)、茯苓(Wolfiporia cocos)分别按以下方法进行液态发酵，制备得到灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液。
(1)灵芝菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20g，KH2PO4 3g，MgSO4.7H2O 1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液制备方法如下：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0～50.0kg、蛋白胨3.0～6.0kg、酵母浸粉3.0～6.0kg，KH2PO4 0.5～1.5kg、MgSO4.7H2O 0.2～1.0kg、维生素B10.05～0.1kg，纯净水1000L，pH 5.5～6.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将灵芝(Ganoderma lingzhi)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度26℃、转速160r/min、振荡培养84h，制备得到灵芝种子菌液。
液态发酵条件：将上述灵芝种子菌液按照8％的质量比，接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度26℃、通风量1.0m3/h、罐压0.01MP、转速160r/min、培养84h，制备得到灵芝菌液。
(2)蛹虫草菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液按如下方法制备得到：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖25.0kg、蛋白胨5.0kg、KH2PO4 1.5kg、MgSO4.7H2O0.8kg、维生素B10.03kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将蛹虫草(Cordyceps militaris)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度23℃、转速160r/min、振荡培养84h，制备得到蛹虫草种子菌液。
液态发酵条件：将蛹虫草种子菌液按照8％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度23℃、通风量1.0m3/h、罐压0.01MP、转速160r/min、培养84h，制备得到蛹虫草菌液。
(3)桑黄菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖20.0kg、玉米淀粉15.0kg、酵母浸粉3.0kg、蛋白胨3.0kg、KH2PO4 2.0kg、MgSO4.7H2O 1.0kg、维生素B10.03kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将桑黄(Phellinus linteus)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25℃、转速160r/min、振荡培养72h，制备得到桑黄种子菌液。
液态发酵条件：将上述桑黄种子菌液按照10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25℃、通风量1.2m3/h、罐压0.01MP、转速160r/min、培养72h，制备得到桑黄菌液。
(4)茯苓菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖20.0kg、玉米粉15.0kg、酵母浸粉3.0kg、蛋白胨10.0kg、KH2PO4 0.8kg、MgSO4.7H2O 1.0kg、维生素B10.03kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将茯苓(Wolfiporia cocos)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度23℃、转速120r/min、振荡培养84h，制备得到茯苓种子菌液。
液态发酵条件：将上述茯苓种子菌液按照10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度23℃、通风量1.0m3/h、罐压0.02MP、转速120r/min、培养84h，制备得到茯苓菌液。
2.制备发酵中草药液，具体包括如下步骤：
A.按质量比例称取原料药：黄芪70.0kg、板蓝根70.0kg、甘草30.0kg、金银花60.0kg、黄芩60.0kg、黄花地丁60.0kg。
B.将以上称取的中草药粉碎，过40目筛，混合均匀后加入1000L纯净水，115℃蒸煮60min，待液体冷却后，采用反清洗过滤器滤去药渣取上清液制得中草药发酵母液。
C.种子培养基：酪蛋白胨10.0g、牛肉浸膏10.0g、酵母浸粉5.0g、葡萄糖20.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H2O 0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO3 2.0g、中草药发酵母液1000ml，pH6.8，在温度121℃下灭菌30min，制备得到种子培养基。
D.液态发酵培养基：酪蛋白胨12.0kg、牛肉浸膏12.0kg、酵母浸粉3.0kg、葡萄糖25.0kg、乙酸钠3.0kg、柠檬酸二铵1.5kg、Tween80 0.5kg、K2HPO4 1.5kg、MgSO4.7H2O0.15kg、MnSO4.H2O 0.03kg、CaCO3 3.0kg、中草药发酵母液1000L，pH6.5，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
E.培养条件：
种子培养条件：
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基3000ml，将植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)斜面菌种按每80ml一环的比例接入种子培养基中，温度35℃、转速120r/min、振荡培养30h，制备得到植物乳杆菌植物亚种菌液。
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基3000ml，将鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)斜面菌种按每80ml一环的比例接入种子培养基中，温度35℃、转速120r/min、振荡培养30h，制备得到鼠李糖乳杆菌菌液。
液态发酵条件：将植物乳杆菌植物亚种菌液按质量百分比5％和鼠李糖乳杆菌菌液按质量百分比5％接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤D制备得到；发酵35℃、通风量1.0m3/h、罐压0.01MPa、转速150r/min、培养24h，制备得到发酵中草药液。
3.将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液按如下体积份数：灵芝菌液15份、蛹虫草菌液15份、桑黄菌液15份、茯苓菌液15份、发酵中草药液40份，称取复配，制备得到成品。
制备得到的成品中，灵芝总多糖产量≥50.36mg/100ml，菌丝体含量≥155.2mg/100ml，灵芝酸总产量≥4.08mg/100ml；虫草总多糖产量≥152mg/100ml，菌丝体含量≥267mg/100ml，虫草素含量≥14.57mg/100ml，虫草酸总产量≥98.5mg/100ml；桑黄总多糖产量≥67.22mg/100ml，菌丝体含量≥115.25mg/100ml，菌丝体中桑黄黄酮含量≥4.33mg/100ml；茯苓总多糖产量≥61.73mg/100ml，菌丝体含量≥107.18mg/100ml；黄芪多糖≥814mg/100ml，黄芪甲苷含量≥1.58mg/100ml，板蓝根粗多糖≥4.29mg/ml；植物乳杆菌植物亚种(CFU/g)≥6.2×108，鼠李糖乳杆菌≥4.8×108，γ-氨基丁酸含量≥22.15mg/100ml。
对比例1：一种功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法，其包括如下步骤：
1.将灵芝(Ganoderma lingzhi)、蛹虫草(Cordyceps militaris)、桑黄(Phellinus linteus)、茯苓(Wolfiporia cocos)分别按以下方法进行液态发酵，制备得到灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液。(以下制备方法及参数与实施例相应部分完全相同)
(1)灵芝菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20g，KH2PO4 3g，MgSO4.7H2O 1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液制备方法如下：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖50.0kg、蛋白胨5.0kg、酵母浸粉5.0kg，KH2PO4 1.0kg、MgSO4.7H2O 0.5kg、维生素B10.05kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将灵芝(Ganoderma lingzhi)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度28℃、转速150r/min、振荡培养96h，制备得到灵芝种子菌液。
液态发酵条件：将上述灵芝种子菌液按照10％的质量比，接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度8℃、通风量1.2m3/h、罐压0.02MP、转速150r/min、培养96h，制备得到灵芝菌液。
(2)蛹虫草菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液按如下方法制备得到：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0kg、蛋白胨10.0kg、KH2PO4 2.0kg、MgSO4.7H2O1.0kg、维生素B10.05kg，纯净水1000L，pH6.5，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将蛹虫草(Cordyceps militaris)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25℃、转速180r/min、振荡培养96h，制备得到蛹虫草种子菌液。
液态发酵条件：将蛹虫草种子菌液按照10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25℃、通风量1.0m3/h、罐压0.02MP、转速180r/min、培养96h，制备得到蛹虫草菌液。
(3)桑黄菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0kg、玉米淀粉20.0kg、酵母浸粉5.0kg、蛋白胨5.0kg、KH2PO4 3.0kg、MgSO4.7H2O 1.5kg、维生素B10.02kg，纯净水1000L，pH 6.0，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将桑黄(Phellinus linteus)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度28℃、转速180r/min、振荡培养84h，制备得到桑黄种子菌液。
液态发酵条件：将上述桑黄种子菌液按照12％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度28℃、通风量1.0m3/h、罐压0.02MP、转速180r/min、培养84h，制备得到桑黄菌液。
(4)茯苓菌液按如下方法制备：
A.种子培养基：马铃薯提取液1000ml，葡萄糖20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O1.5g，维生素B1微量，pH6.0，温度115℃下灭菌25min，制备得到种子培养基。
其中，马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成小块，加蒸馏水1000ml煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml。
B.液态发酵培养基：葡萄糖30.0kg、玉米粉20.0kg、酵母浸粉5.0kg、蛋白胨15.0kg、KH2PO4 1.0kg、MgSO4.7H2O 1.5kg、维生素B10.02kg，纯净水1000L，pH5.5，在温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
C.培养条件：
种子培养条件：5000ml三角瓶中装步骤A制备的种子培养基2500ml，将茯苓(Wolfiporia cocos)斜面菌种制成菌悬液接入种子培养基中，温度25℃、转速150r/min、振荡培养72h，制备得到茯苓种子菌液。
液态发酵条件：将上述茯苓种子菌液按照10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤B制备得到；发酵温度25℃、通风量1.2m3/h、罐压0.02MP、转速150r/min、培养72h，制备得到茯苓菌液。
2.将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液和茯苓菌液按如下体积比：灵芝菌液(V/V)20份、蛹虫草菌液(V/V)20份、桑黄菌液(V/V)10份、茯苓菌液(V/V)10份，称取复配，制备得到成品。
对比例2：发酵中草药液的具体制备方法，包括如下步骤：
A.按质量比例称取原料药：黄芪100.0kg、板蓝根70.0kg、甘草30.0kg、金银花50.0kg、黄芩50.0kg、黄花地丁50.0kg。
B.将以上称取的中草药粉碎，过40目筛，混合均匀后加入1000L纯净水，115℃蒸煮60min，待液体冷却后，采用反清洗过滤器滤去药渣取上清液制得中草药发酵母液。
C.种子培养基：酪蛋白胨10.0g、牛肉浸膏10.0g、酵母浸粉5.0g、葡萄糖20.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H2O 0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO3 2.0g、中草药发酵母液1000ml，pH6.8，在温度121℃下灭菌30min，制备得到种子培养基。
D.液态发酵培养基：酪蛋白胨10.0kg、牛肉浸膏10.0kg、酵母浸粉5.0kg、葡萄糖20.0kg、乙酸钠5.0kg、柠檬酸二铵2.0kg、Tween80 1.0kg、K2HPO4 2.0kg、MgSO4.7H2O0.2kg、MnSO4.H2O 0.05kg、CaCO3 5.0kg、中草药发酵母液1000L，pH6.8，温度121℃下灭菌30min，制备得到液态发酵培养基。
E.培养条件：
种子培养条件：
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基3000ml，将植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)斜面菌种按每100ml一环的比例接入种子培养基中，温度37℃、转速150r/min、振荡培养24h，制备得到植物乳杆菌植物亚种菌液。
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基3000ml，将鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)斜面菌种按每100ml一环的比例接入种子培养基中，温度37℃、转速150r/min、振荡培养24h，制备得到鼠李糖乳杆菌菌液。
液态发酵条件：将植物乳杆菌植物亚种菌液10％和鼠李糖乳杆菌菌液10％的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤D制备得到；发酵37℃、通风量0.8m3/h、罐压0.02MP、转速130r/min、培养30h，制备得到发酵中草药液。
以上制备方法及参数与实施例相应部分完全相同。
实施例3：功能性动物生长与免疫调节剂动物饲养试验
1.材料与方法
1.1试验地点
现代牧业(和林格尔)有限公司
1.2试验材料
1.2.1受试物及试验添加量
表1-1受试物及试验添加量
Figure BDA0002287958310000261
1.2.2饲料：青贮玉米、玉米秸秆、羊草、正大犊牛精料补充料等。
1.2.3试剂和器材：Microlab—300型半自动生化分析仪、电子称。
2.试验方法:
2.1试验设计：
根据牛群统计报告，选取100头3月龄左右，体况良好、体重相近，品种及生产性能一致的荷斯坦犊牛，然后将牛群进行配对随机分成4组，试验组和对照组各25头犊牛。选定的所有犊牛在分组后，开始进入预饲期(7天)。预饲期内，试验组牛群在其日粮中逐量添加受试物，使牛群逐步适应所饲喂的受试产品；对照组日粮中不添加任何药物及微生物饲料添加剂(各组基础日粮中均不含受试添加剂产品和其他任何药物及微生物饲料添加剂)。在预饲期开始前对各组牛群分别进行空腹称重，空腹采血检测血液生化指标，检测牛群的腹泻情况，检测采食量。预饲期结束后进入正试期，正试期为60天。正试期内试验组牛群分别按要求添加受试物。受试物直接混合于试验牛群日粮中进行饲喂。在饲喂过程中试验人员一定要仔细观察试验组和对照组牛群的采食情况，同时确保试验组牛群采食的均匀性，避免互相抢食和剩料。
2.2观察指标：
2.2.1平均日增重：正试期开始后，每间隔10天进行一次体重的测量。为避免不同情况下称重造成的误差，一般在早晨饲喂前空腹称重，计算始重和末重。每次称重的时间和顺序基本相同。
增重(kg/头)＝末重(kg/头)-始重(kg/头)
平均日增重(kg/头.天)＝总增重(kg)÷每组牛群数量(头)÷试验天数(天)
2.2.2腹泻率：从预饲期第0天开始每隔2天检查并记录一次各组牛群的腹泻发生情况。
2.2.3采食量：从预饲期第0天开始每天检测一次各组牛群的采食量。
总采食量(kg)＝总投喂量(kg)－剩余料量(kg)
平均采食量(kg/头.天)＝总采食量(kg)÷每组数量(头)
2.2.4牛血液生化指标：
预饲期开始前和试验结束后对空腹试验牛颈静脉采血，分离血清，－20℃冰箱保存备用。用Microlab—300型半自动生化分析仪测定血液指标。
2.2.5牛舍氨气指标：
预饲期开始前和试验结束后，使用恩尼克斯GS10-NH3氨气检测仪分别对各组牛舍进行氨气检测。
2.3饲养管理：
饲喂方式：日喂料2次，自由饮水，其它管理参照牛场管理执行。
3.试验结果分析
3.1试验牛群生产性能测定结果分析
表3-1试验牛群生产性能分析
Figure BDA0002287958310000281
注：同行数据肩注字母不同，表示差异显著(P＜0.05)，相同者表示差异不显著(P＞0.05)，下表同。
从表3-1可以看出，试验组A、试验组B和试验组C的平均日增重分别比对照组提高15.41％、12.78％和17.73％。试验组平均日增重显著(P＜0.05)高于对照组，试验组产品对促进动物生长效果显著。试验组A、试验组B和试验组C的日均采食量分别比对照组提高8.93％、6.63％和11.73％。试验组日均采食量显著(P＜0.05)高于对照组。
3.2试验牛群腹泻情况统计分析
表3-2不同试验日期各组平均腹泻头数及腹泻率统计表
Figure BDA0002287958310000282
从表3-2可以看出，试验组A、试验组B和试验组C的腹泻率分别较对照组降低了66.57％、57.14％和71.43％。试验证明，三组试验产品对犊牛腹泻均有显著的预防和治疗效果。
3.3试验牛群血液生化指标测定结果分析
表3-3试验牛群血液生化指标分析
Figure BDA0002287958310000291
注：同行数据肩注字母不同，表示差异显著(P＜0.05)，相同者表示差异不显著(P＞0.05)，下表同。
从表3-3可以看出，试验组A、试验组B和试验组C的总蛋白分别比对照组提高5.05％、7.72％和11.74％；白蛋白分别比对照组提高8.93％、6.63％和11.73％；血清中免疫球蛋白IgA分别比对照组提高22.84％、29.74％和40.09％；免疫球蛋白IgG分别比对照组提高16.8％、21.44％和29.92％；各项指标均显著(P＜0.05)高于对照组。
3.4试验牛群牛舍氨气测定结果分析
表3-4试验牛群牛舍氨气测定结果分析
Figure BDA0002287958310000292
注：同行数据肩注字母不同，表示差异显著(P＜0.05)，相同者表示差异不显著(P＞0.05)，下表同。
从表3-4可以看出，对照组牛舍的氨气浓度试验后较试验前升高了8.54％，试验前后没有显著变化；试验组A、试验组B和试验组C牛舍的氨气浓度试验后较试验前分别降低了33.98％、30.32％和43.17％。
4.讨论和结论
通过对犊牛饲养试验得出，在不改变饲喂环境及饲喂方法的情况下，试验组A、试验组B和试验组C的牛群平均日增重分别比对照组提高了15.41％、12.78％和17.73％；日均采食量分别比对照组分别提高了8.93％、6.63％和11.73％；腹泻率分别较对照组降低了66.57％、57.14％和71.43％；总蛋白分别比对照组提高5.05％、7.72％和11.74％；白蛋白分别比对照组提高8.93％、6.63％和11.73％；血清中免疫球蛋白IgA分别比对照组提高22.84％、29.74％和40.09％；免疫球蛋白IgG分别比对照组提高16.8％、21.44％和29.92％；牛舍的氨气浓度试验后较试验前分别降低了33.98％、30.32％和43.17％。
本发明产品综合了发酵中草药和药用真菌的双重优点和功效，是一种绿色、安全、高效的微生物制剂。本发明产品对动物腹泻不但有良好的预防和治疗效果，同时还可以有效的提高动物机体免疫力，增强动物防抗病能力，提高动物生产性能和生长速度。并且能有效降低牛舍中氨气浓度，有效的降低了养殖对环境的污染。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种功能性动物生长与免疫调节剂，其特征在于，其包括如下组分：灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液；
各组分的体积份数为：灵芝菌液10～20份、蛹虫草菌液10～20份、桑黄菌液5～15份、茯苓菌液5～15份、发酵中草药液40～50份；
所述发酵中草药液包括如下原料药：黄芪、板蓝根、甘草、金银花、黄芩和黄花地丁；
所述发酵中草药液中各原料药的质量份数为：黄芪5～10份、板蓝根5～10份、甘草2～5份、金银花3～6份、黄芩3～6份、黄花地丁3～6份；
分别制备灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液；将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液按比例称取复配，制备得到成品；
发酵中草药液按如下方法制备得到：
A.按质量比例称取原料药：黄芪5～10份、板蓝根5～10份、甘草2～5份、金银花3～6份、黄芩3～6份、黄花地丁3～6份；
B.将以上称取的中草药粉碎，过40目筛，混合均匀后加入纯净水，115℃蒸煮60min，待液体冷却后，采用反清洗过滤器滤去药渣取上清液制得中草药发酵母液；
C.种子培养基：酪蛋白胨10～15g、牛肉浸膏10～15g、酵母浸粉2～5g、葡萄糖20～30g、乙酸钠2～5g、柠檬酸二铵1～2g、Tween800.5～1g、K2HPO41～2g、MgSO4.7H2O0.1～0.2g、MnSO4.H2O0.02～0.05g、CaCO32～5g、中草药发酵母液1000ml，pH6.8，在温度121℃下灭菌30min，制备得到种子培养基；
D. 液态发酵培养基：酪蛋白胨10.0～15.0kg、牛肉浸膏10.0～15.0kg、酵母浸粉2.0～5.0kg、葡萄糖20.0～30.0kg、乙酸钠2.0～5.0kg、柠檬酸二铵1.0～2.0kg、Tween800.5～1.0kg、K2HPO41.0～2.0kg、MgSO4.7H2O0.1～0.2kg、MnSO4.H2O0.02～0.05kg、CaCO32.0～5.0kg、中草药发酵母液1000L，pH6.0～7.0，在温度115～121℃下灭菌20min～30min，制备得到液态发酵培养基；
E.培养条件：
种子培养条件：
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基2000～3000ml，将植物乳杆菌植物亚种（Lactobacillus plantarum subsp. plantarum）斜面菌种按每50～100ml一环的比例接入种子培养基中，温度35～40℃、转速120～150r/min、振荡培养24～48h，制备得到植物乳杆菌植物亚种菌液；
5000ml三角瓶中装步骤C制备的种子培养基2000～3000ml，将鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）斜面菌种按每50～100ml一环的比例接入种子培养基中，温度35～40℃、转速120～150r/min、振荡培养24～48h，制备得到鼠李糖乳杆菌菌液；
液态发酵条件：将植物乳杆菌植物亚种菌液和鼠李糖乳杆菌菌液分别按照5%～10%的质量比接种到液态发酵罐中的液态发酵培养基中，液态发酵培养基由步骤D制备得到；发酵35～40℃、通风量0.5～1.5m³/h、罐压0.01～0.02MPa、转速120～150r/min、培养24～48h，制备得到发酵中草药液。
2.如权利要求1所述的一种功能性动物生长与免疫调节剂的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：
（1）分别制备灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液；各组分的体积份数为：灵芝菌液10～20份、蛹虫草菌液10～20份、桑黄菌液5～15份、茯苓菌液5～15份、发酵中草药液40～50份；所述发酵中草药液包括如下原料药：黄芪、板蓝根、甘草、金银花、黄芩和黄花地丁；各原料药的质量份数为：黄芪5～10份、板蓝根5～10份、甘草2～5份、金银花3～6份、黄芩3～6份、黄花地丁3～6份；
（2）将制备得到的灵芝菌液、蛹虫草菌液、桑黄菌液、茯苓菌液和发酵中草药液按比例称取复配，制备得到成品。
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