CN110997680B - 新型化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)的化合物及其在治疗中的用途，例如在治疗分枝杆菌感染或在治疗由分枝杆菌引起的疾病例如结核病中的用途。

Description

新型化合物
发明领域
本发明涉及一种新型化合物、包含它们的组合物以及其在治疗中的用途，例如在治疗分枝杆菌感染或治疗由分枝杆菌引起的疾病，例如结核病(也被称为TB)中的用途。
发明背景
根据世界卫生组织2014年发布的报告，每年将近一千万人感染结核病(TB)，每年造成150万人死亡。尽管有可用的治疗结核病的方法，但由于导致结核病的致病细菌结核分枝杆菌对许多一线治疗药物如异烟肼和利福平产生了抗药性，该病的发病率仍开始上升。
乙硫异烟胺是异烟肼的结构类似物，经常被开处方用于治疗耐多药结核病(MDRTB)，其与异烟肼一样有效。然而，与乙硫异烟胺的使用有关的缺点是，为了在血液中获得可接受的药物浓度,需要高达1g/天)，这与包括神经毒性和致命的肝毒性在内的严重副作用相关联。因此，需要减少临床剂量和对乙硫异烟胺的暴露。
因此，本发明的一个目的是提供新型化合物，该化合物能够增强用于治疗结核病的药物的活性，特别是可通过EthA通路活化的药物，例如乙硫异烟胺。本发明的另一个目的是提供用于治疗结核病(TB)的新型化合物。
PCT公开号WO 2014/096369描述了带有芳基、环烷基或杂芳基取代基的螺异噁唑啉化合物。据称这类化合物可用于治疗结核病。
发明概述
在本发明的第一方面中，提供了式(I)的化合物：
Figure BDA0002385324790000021
其中R1为卤素；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲基；取代有一个或多个氟的乙基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基；或其药学上可接受的盐。
在本发明的第二方面中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗，特别是用于治疗结核病。
在本发明的第三方面中，提供了一种在有需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
在本发明的第四方面中，提供了一种在有需要的哺乳动物中治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的方法，该方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐。
在本发明的第五方面中，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗分枝杆菌感染或由分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。
在本发明的第六方面中，提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗分枝杆菌感染或治疗由分枝杆菌感染引起的疾病。
在本发明的第七方面中，提供了一种药物组合物，其包含：(a)式(I)的化合物或其药学上可接受的盐；(b)药学上可接受的赋形剂。
在本发明的第八方面，提供了一种组合，其为(a)式(I)的化合物或其药学上可接受的盐；和(b)至少一种其他抗分枝杆菌药剂的组合。
发明详述
如上所述，本发明的一个方面涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0002385324790000031
其中R1为卤素；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲基；取代有一个或多个氟的乙基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基。
在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物。
在一个实施方案中，R1为氟、氯或溴；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲基；取代有一个或多个氟的乙基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氟、氯或溴；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；单、二或三氟甲基；单、二或三氟甲氧基；2-氟乙基；2,2-二氟乙基；2,2,2-三氟乙基；2-氟乙氧基、2,2-二氟乙氧基；或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氯或溴；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；单、二或三氟甲基；单、二或三氟甲氧基；2-氟乙基；2,2-二氟乙基；2,2,2-三氟乙基；2-氟乙氧基、2,2-二氟乙氧基；或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氟、氯、溴、氰基、C1-6直链烷基、C3-4支链烷基、C1-6直链烷氧基、C3-4支链烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氯、溴、氰基、C1-6直链烷基、C3-4支链烷基、C1-6直链烷氧基、C3-4支链烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氟、氯、溴、氰基、C1-6直链烷基、C3-4支链烷基、C1-6直链烷氧基、C3-4支链烷氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氯、溴、氰基、C1-6直链烷基、C3-4支链烷基、C1-6直链烷氧基、C3-4支链烷氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氟、溴、氰基、C1-4直链烷基、C1-6直链烷氧基、C4支链烷氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为溴、氰基、C1-4直链烷基、C1-6直链烷氧基、C4支链烷氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
在一个实施方案中，R1为氟、溴、氰基、甲基、乙基、三氟甲基，2,2,2-三氟乙氧基，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丁氧基或己氧基。
在一个实施方案中，R1为溴、氰基、甲基、乙基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙氧基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丁氧基或己氧基。
在一个实施方案中，R1为三氟甲基。
可用于本发明的具体化合物包括：
4,4,4-三氟-1-[3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基]丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-丙氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-异丁氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-己氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
1-(3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；
1-(3-乙氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-甲氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-(三氟甲基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-甲基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
1-(3-乙基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；
8-(4,4,4-三氟丁酰基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-3-甲腈；和
4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮。
术语和定义
如本文所用，术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。但是，更具体地，是指氟、氯或溴。
如本文所用，术语“氰基”指-CN。
如本文所用，术语“C1-6直链烷基”是指具有1-6个碳原子的直链烷基。因此，术语“C1-6直链烷基”包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基和正己基。
如本文所用，术语“C3-4支链烷基”指具有3个或四个碳原子的支链烷基基团。因此，术语“C3-4支链烷基”包括异丙基、仲丁基和异丁基。
如本文所用，术语“C1-6直链烷氧基”是指具有1-3个碳原子的直链烷氧基基团。因此，术语“C1-6直链烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、正戊基氧基和正己基氧基。
如本文所用，术语“C3-4支链烷氧基”是指具有3个或4个碳原子的支链烷氧基。因此，术语“C3-4支链烷氧基”包括异丙氧基、仲丁氧基和异丁氧基。
如本文所用，术语“取代有一个或多个氟的甲基″是指被一个、两个或三个氟原子取代的甲基。因此，术语“取代有一个或多个氟的甲基”包括单氟甲基(-CH2F)、二氟甲基(-CHF2)和三氟甲基(-CF3)。
如本文所用，术语“取代有一个或多个氟的乙基”指被1、2、3、4或5个氟原子取代的乙基。因此，术语“取代有一个或多个氟的乙基”包括2-氟乙基(-CH2CH2F)、2,2-二氟乙基(-CH2CHF2)和2,2,2-三氟乙基(-CH2CF3)。
如本文所用，术语“取代有一个或多个氟的甲氧基”是指甲氧基，其中甲基的碳被一个、两个或三个氟原子取代。因此，术语“取代有一个或多个氟的甲基”包括单氟甲氧基(-OCH2F)、二氟甲氧基(-OCHF2)和三氟甲氧基(-OCF3)。
如本文所用，术语“取代有一个或多个氟的乙氧基”指乙氧基，其中乙基的碳被1、2、3、4或5个氟原子取代。因此，术语“取代有一个或多个氟的乙基”包括2-氟乙氧基(-OCH2CH2F)、2,2-二氟乙氧基(-OCH2CHF2)和2,2,2-三氟乙氧基(-OCH2CF3)。
应当理解，式(I)的化合物可以以不同的互变异构形式存在。所有可能的互变异构体均预期在本发明的范围内。
本文所用术语"本发明的化合物"意为式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。术语"本发明的一个化合物"意为如上定义的本发明的任何一种化合物。
此外，将理解的是，短语诸如“式(I)的化合物或其药学上可接受的盐”或“本发明的化合物”旨在涵盖式(I)的化合物、式(I)化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物，或其任何药学上可接受的组合。因此，出于说明性目的在此通过非限制性示例的方法，“式(I)化合物或其药学上可接受的盐”包括以溶剂化物形式存在的式(I)化合物的药学上可接受的盐，并且该短语还包括式(I)化合物和式(I)化合物的药学上可接受的盐的混合物。
应当理解，本文提及的式(I)化合物或其药学上可接受的盐包括作为游离碱或其药学上可接受的盐的式(I)化合物。因此，在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物。在另一个实施方案中，本发明可以涉及式(I)化合物的药学上可接受的盐。
术语“药学上可接受的”指在合理的医学判断范围内适合与人类和动物组织接触而无过度毒性，刺激性或其他问题或并发症，与合理的受益/风险比相称的化合物(包括盐)、材料、组合物和剂型。
药学上可接受的盐尤其包括Berge,J.Pharm.Sci.,1977,66,1-19中所述的那些，或列于P H Stahl和C G Wermuth,editors,Handbook of Pharmaceutical Salts；Properties,Selection and Use,第二版Stahl/Wermuth:Wiley-VCH/VHCA,2011(参见http://www.wiley.com/WileyCDA/WileyTitle/productCd-3906390519.html)中的那些。
合适的药学上可接受的盐可包括酸加成盐。这种盐可以通过与合适的酸反应形成，任选地在合适的溶剂如有机溶剂中反应，得到可以通过结晶和过滤分离的盐。
代表性的药学上可接受的酸加成盐包括但不限于：4-乙酰氨基苯甲酸盐、醋酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐(besylate)、苯甲酸盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、丁酸盐、依地酸钙、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐(camsylate)、癸酸盐(decanoate)、己酸盐(hexanoate)、辛酸盐(octanoate)、肉桂酸盐、柠檬酸盐、环己氨磺酸盐、二葡萄糖酸盐、2,5-二羟基苯甲酸盐、双琥珀酸盐、十二烷基硫酸盐、依地酸盐(乙二胺四乙酸盐)、依托酸盐(月桂基硫酸盐)、乙烷-1,2-二磺酸盐(乙二磺酸盐)、乙磺酸盐(esylate)、甲酸盐、富马酸盐、半乳酸盐(粘酸盐)、龙胆酸盐(2,5-二羟基苯甲酸盐)、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、戊二酸盐、甘油磷酸盐、乙醇酸盐、己基间苯二酚盐、马尿酸盐、海巴明(N,N′-二(去氢枞基)-乙二胺)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、羟萘甲酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐(mesylate)、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘-1,5-二磺酸盐(萘二磺酸盐)、萘-2-磺酸盐(萘磺酸盐)、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、对氨基苯磺酸盐、对氨基水杨酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、泛酸酯、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、苯基乙基巴比妥酸盐、磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、焦谷氨酸盐、丙酮酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、硬脂酸盐、次醋酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(8-氯茶碱)、硫氰酸盐、三乙基碘、十一酸盐、十一碳烯酸盐和戊酸盐。
如本文所用，术语“治疗有效量”是指与未接受该量的相应受试者相比，能够使疾病、病症或副作用的治疗、治愈、预防或改进得到改善，或使该疾病或病症的进展速度减少的任何量。
适当的“治疗有效量”将取决于许多因素，包括例如受试者的年龄和体重，需要治疗的确切病症及其严重程度，制剂的性质以及给药途径，并且最终由主治医师决定。
化合物制备
本发明的化合物可以通过多种方法制备，包括标准化学方法。除非另有说明，否则任何先前定义的变量将继续具有先前定义的含义。说明性的一般合成方法在以下方案中列出，并且可以容易地经调整用于制备其他本发明的化合物。本发明的具体化合物可以根据实施例部分中公开的实验步骤制备。
用于合成式(I)化合物的一般程序在以下反应方案1至7中描述，并在实施例中说明。
式(Ia)化合物的制备
Figure BDA0002385324790000071
式(Ia)的化合物为式(I)的烷氧基螺环化合物，其可以根据方案1(如下)通过用例如TFA对式(II)的烷氧基螺环化合物的Boc保护基进行脱保护并进一步将TFA盐氨基基团与4,4,4-三氟丁酸偶联来制备。中间体化合物式(II)可以通过使相应的市售醇(ROH)与卤代螺环N-Boc保护的式(IV)化合物反应来制备，其合成描述如下。
Figure BDA0002385324790000081
方案1–式(I)的化合物的制备，其中R1为C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基
或者，可以根据方案2(如下)，在合适的碱(如碳酸钾)的存在下，通过使相应的市售醇(ROH)与式(IIIa)的卤代螺环三氟丁酰胺化合物反应来制备作为烷氧基螺化合物的式(Ia)化合物。
Figure BDA0002385324790000082
方案2–式(I)化合物的替代制备方法，其中R1为C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基
式(Ib)化合物的制备
可以根据方案3(以下)通过使式(IV)的化合物与4,4,4-三氟丁酸偶联来制备作为烷基螺环化合物的式(Ib)的化合物。式(IV)的化合物可通过将市售的4-亚甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯与式(V)的肟化合物环化，并用酸例如盐酸进一步裂解N-Boc保护基来制备。
Figure BDA0002385324790000091
方案3式(I)化合物的制备，其中R1为C1-6直链烷基或C3-4支链烷基
式(Ic)化合物的制备
式(Ic)的氰基化合物可以根据方案4(如下)通过在合适的溶剂例如DMF中用例如氰化钠对化合物(IIIa)进行亲核取代来制备。
Figure BDA0002385324790000092
方案4–式(I)化合物的制备，其中R1为CN
式(Id)化合物的制备
式(Id)的氟化合物可以根据方案5(以下)，通过在合适的溶剂例如DMSO中用例如氟化钾将化合物(IIIa)进行卤素取代来制备。
Figure BDA0002385324790000093
方案5–式(I)化合物的制备，其中R1为F
中间体(IIIa)和(V)的制备
式(V)的肟中间体可以通过式(VI)的中间体化合物与N-琥珀酰亚胺如NBS或NCS的卤化反应来制备，如方案6(如下)所示。式(VI)的肟中间体(其中R为甲基或乙基)可以通过使式(VII)的相应的醛与例如羟胺反应来制备。或者，可以通过2,2,2-三氟-1-甲氧基乙醇与羟胺反应制备三氟甲基肟中间体，其中R为三氟甲基。
Figure BDA0002385324790000101
方案6–中间体V的制备
可以通过在例如碳酸氢钠的存在下使市售的4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯与二溴羟基碳亚胺反应来制备式(III)的卤代螺环N-Boc保护的中间体。
Figure BDA0002385324790000102
方案7–中间体III的制备
以类似的方式，中间体(IIIa)可以通过烯烃(VIII)与二溴羟基碳亚胺在如上所述的相同条件下反应来制备。中间体(VIII)可通过在标准条件下使氨基盐酸盐中间体(IX)与4,4,4-三氟丁酸偶联反应来制备。最后，可以通过用盐酸处理市售的4-亚甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯制备氨基中间体(IX)。在这方面，请参见下面的方案8。
Figure BDA0002385324790000103
方案8–中间体IIIa的制备
使用方法
一方面，本发明涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。
在另一方面，本发明涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗分枝杆菌感染。分枝杆菌感染是由分枝杆菌导致的感染引起的。
分枝杆菌可以是以下分枝杆菌种类之一：结核分枝杆菌复合体(Mycobacteriumtuberculosis complex)(MTC)、鸟分枝杆菌复合体(Mycobacterium avium complex)(MAC)、戈登分枝杆菌分支(Mycobacterium gordonae clade)、堪萨斯分枝杆菌分支(Mycobacterium kansasii clade)、龟分枝杆菌分支(Mycobacterium chelonae clade)、偶发分枝杆菌分支(Mycobacterium fortuitum clade)、副偶发分枝杆菌分支(Mycobacterium parafortuitum clade)或牝牛分枝杆菌分支(Mycobacterium vaccaeclade)。所述分枝杆菌还可以是溃疡分枝杆菌(Mycobacterium ulcerans)或麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)。
结核分枝杆菌复合体(MTC)的成员包括结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)、非洲分枝杆菌(Mycobacterium africanum)、牛分枝杆菌(Mycobacteriumbovis)、牛分枝杆菌BCG(Mycobacterium bovis BCG)、卡氏分枝杆菌(Mycobacteriumcanetti)、山羊分枝杆菌(Mycobacterium caprae)、田鼠分枝杆菌(Mycobacteriummicroti)和海豹分枝杆菌(Mycobacterium pinnipedii)。这些分枝杆菌是人类和动物结核病的病原体。结核分枝杆菌是人类结核病的主要原因。
在一个实施方案中，分枝杆菌是结核分枝杆菌复合体(MTC)的成员。
在一个实施方案中，所述感染是结核分枝杆菌感染。换句话说，分枝杆菌感染是由结核分枝杆菌导致的感染引起的。
在一个实施方案中，结核分枝杆菌具有多重耐药性。在另一个实施方案中，结核分枝杆菌对乙硫异烟胺具有抗性。
鸟分枝杆菌复合体(MAC)的成员包括鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)、鸟分枝杆菌副结核亚种(Mycobacterium avium paratuberculosis)、Mycobacterium aviumsilaticum、候米瑟氏鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium hominissuis)、哥伦比亚分枝杆菌(Mycobacterium columbiense)和Mycobacterium indicus pranii。
戈登分枝杆菌分支的成员包括亚洲分枝杆菌(Mycobacterium asiaticum)和戈登分枝杆菌(Mycobacterium gordonae)。
堪萨斯分枝杆菌分支的成员包括胃分枝杆菌(Mycobacterium gastri)和堪萨斯分枝杆菌(Mycobacterium kansasii)。
龟分枝杆菌分支的成员包括脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus)、Mycobacterium bolletii和龟分枝杆菌(Mycobacterium chelonae)。
偶发分枝杆菌分支的成员包括Mycobacterium boenickei、Mycobacteriumbrisbanense、Mycobacterium cosmeticum、偶发分枝杆菌(Mycobacterium fortuitum)、偶发分枝杆菌解乙酰胺亚种(Mycobacterium fortuitum subspecies acetamidolyticum)、Mycobacterium houstonense、马德里分枝杆菌(Mycobacterium mageritense)、新奥尔良分枝杆菌(Mycobacterium neworleansense)、外来分枝杆菌(Mycobacteriumperegrinum)、Mycobacterium porcinum、塞内加尔分枝杆菌(Mycobacteriumsenegalense)和败血症分枝杆菌(Mycobacterium septicum)。
副偶发分枝杆菌分枝的成员包括南非分枝杆菌(Mycobacteriumaustroafricanum)、迪氏分枝杆菌(Mycobacterium diernhoferi)、Mycobacteriumfrederiksbergense、Mycobacterium hodleri、新金分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)和副偶发分枝杆菌(Mycobacterium parafortuitum)。
因此，分枝杆菌感染可能是由以下分枝杆菌导致的感染引起的：结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、牛分枝杆菌BCG、卡氏分枝杆菌、山羊分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、海豹分枝杆菌、鸟分枝杆菌、鸟分枝杆菌副结核亚种、Mycobacterium avium silaticum、候米瑟氏鸟分枝杆菌、哥伦比亚分枝杆菌、Mycobacterium indicus pranii、亚洲分枝杆菌、戈登分枝杆菌、胃分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、Mycobacterium bolletii、龟分枝杆菌包括Mycobacterium boenickei、Mycobacterium brisbanense、Mycobacteriumcosmeticum、偶发分枝杆菌、偶发分枝杆菌解乙酰胺亚种、Mycobacterium houstonense、马德里分枝杆菌、新奥尔良分枝杆菌、外来分枝杆菌、Mycobacterium porcinum、塞内加尔分枝杆菌、败血症分枝杆菌、南非分枝杆菌、迪氏分枝杆菌、Mycobacteriumfrederiksbergense、Mycobacterium hodleri、新金分枝杆菌、副偶发分枝杆菌、溃疡分枝杆菌和麻风分枝杆菌。
在另一方面，本发明涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗由分枝杆菌感染引起的疾病，其中分枝杆菌选自上文所述的那些。
由分枝杆菌感染引起的疾病包括但不限于结核病(例如，由结核分枝杆菌引起的结核病)、麻风病(例如，由麻风分枝杆菌引起的麻风病)、约内氏病(Johne′s disease)(例如，由鸟分枝杆菌副结核亚种引起的约内氏病)、布路里溃疡或班兹达溃疡(Buruli orBairnsdale ulcer)(例如，由溃疡分枝杆菌引起的布路里溃疡或班兹达溃疡)、克罗恩病(Crohn′s disease)(例如，由鸟分枝杆菌副结核亚种引起的克罗恩病)、肺病或肺部感染、肺炎、粘液囊、滑膜、腱鞘、局部脓肿、淋巴结炎、皮肤和软组织感染、温德米尔夫人综合征(Lady Windermere syndrome)(例如，由鸟分枝杆菌复合体(MAC)引起的温德米尔夫人综合征)、MAC肺部疾病、播散性鸟分枝杆菌复合体(DMAC)、播散性鸟胞内分枝杆菌复合体(DMAIC)、热管肺(例如，由鸟分枝杆菌复合体引起的热管肺)、MAC乳腺炎、MAC化脓性肌炎或肉芽肿病。
在一个实施方案中，所述疾病是结核病。因此，本发明的一个方面涉及式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，其用于治疗结核病。
在一个实施方案中，本发明涉及一种在有需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。如本文所述，分枝杆菌感染是由分枝杆菌造成的感染引起的。所述分枝杆菌如上文所述。
在一个实施方案中，所述分枝杆菌感染是结核分枝杆菌感染。
在另一个实施方案中，本发明涉及在有需要的哺乳动物中治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药物上可接受的盐。
在一个实施方案中，所述疾病是结核病。因此，本文还描述了一种在有需要的哺乳动物中治疗结核病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，所述哺乳动物为人类。
本领域技术人员将理解，本文中提及的治疗是指对已确定的病状的治疗。然而，根据情况，本发明的化合物也可用于预防某些疾病。因此，在一个实施方案中，提供了对疾病如结核病(TB)的治疗或预防。在另一个实施方案中，提供了对疾病例如结核病的治疗。在另一个实施方案中，提供了对疾病如结核病的预防。
在另一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗分枝杆菌感染或用于治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。
本文还描述了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗结核病的药物中的用途。
在一个实施方案中，用于治疗结核病的式(I)化合物或其药学上可接受的盐与硫代酰胺共同施用。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是乙硫异烟胺。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是丙硫异烟胺。
因此，在一个实施方案中，提供了一种用于治疗结核病的药物组合物，其中所述组合物包含(a)式(I)的化合物；(b)硫代酰胺，例如乙硫异烟胺或丙硫异烟胺；和任选地(c)药学上可接受的赋形剂。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种在有需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其与硫酰胺组合，其中所述硫酰胺可以是乙硫异烟胺。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是丙硫异烟胺。如本文所述，分枝杆菌感染是由分枝杆菌引起的感染导致的。所述分枝杆菌如上文所述。
在一个实施方案中，所述分枝杆菌感染是结核分枝杆菌感染。
在另一个实施方案中，本发明涉及在有需要的哺乳动物中治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其与硫代酰胺组合，其中所述硫代酰胺可以是乙硫异烟胺。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是丙硫异烟胺。
在一个实施方案中，所述疾病是结核病。因此，本文还描述了一种在有需要的哺乳动物中治疗结核病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其与硫代酰胺组合，其中所述硫代酰胺可以是乙硫异烟胺。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是丙硫异烟胺。
在另一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与硫代酰胺(例如，乙硫异烟胺)的组合在制备用于治疗分枝杆菌感染或治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是丙硫异烟胺。
本文还描述了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与硫代酰胺(例如，乙硫异烟胺)的组合在制备用于治疗结核病的药物中的用途。在另一个实施方案中，所述硫代酰胺是丙硫异烟胺。
在一个实施方案中，用于上述方法和治疗中的式(I)化合物为4,4,4-三氟-1-(3-(三氟甲基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮，其具有以下结构：
Figure BDA0002385324790000151
药物组合物
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐通常但并非必须地在施用于患者之前被配制成药物组合物。因此，另一方面，提供了药物组合物，其包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂。
药物组合物可以通过任何合适的途径给药，例如通过口服(包括含服或舌下)、直肠、吸入、鼻内、局部(包括含服，舌下或透皮)或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)途径施用。特别地，本发明的药物组合物可以通过口服或静脉内途径给药。
合适的可药用赋形剂包括以下类型的赋形剂：载体、稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、制粒剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、助溶剂、悬浮剂、乳化剂、甜味剂、调味剂、掩味剂、着色剂、防结块剂、保湿剂、螯合剂、增塑剂、增粘剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。
配制本发明化合物的合适方法对本领域技术人员来说是熟悉的，描述于Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st版2006中。
药物组合物可以每单位剂量包含预定量的活性成分的单位剂量形式提供。优选的单位剂量组合物是那些包含每日剂量或亚剂量或其适当分数的活性成分的组合物。因此，该单位剂量可以每天多于一次给药。优选的单位剂量组合物是包含如上所述的每日剂量或亚剂量(用于一天给药一次以上)或其适当分数的活性成分的组合物。
当本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗结核病时，它们可以单独使用或与其他治疗剂(例如其他抗分枝杆菌药剂，如抗结核药剂和/或抗病毒药剂，包括抗逆转录病毒药剂)组合使用。
例如，本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其与另外的抗结核药组合。在一个实施方案中，所述组合包含两种、三种、四种、五种、六种或七种另外的抗结核药剂。例如，在多重耐药结核病的治疗中，通常将四种或更多种药物的组合施用于患者。例如，在药物敏感性结核病的治疗中，通常将三种或四种药物的组合施用于患者。
另外的抗结核药是正在开发、被批准或推荐用于治疗结核病的药物，并且可以选自以下药剂：异烟肼(isoniazid)、利福平(rifampin)、吡嗪酰胺(pyrazinamide)、乙胺丁醇(ethambutol)、莫西沙星(moxifloxacin)、利福喷丁(rifapentine)、氯法齐明(clofazimine)、乙硫异烟胺(ethionamide)、丙硫异烟胺(prothionamide)、戊氧苯硫脲(isoxyl)、氨硫脲(thiacetazone)、利福布汀(rifabutin)、二芳基喹啉如贝达喹啉(bedaquiline)(TMC207)或TBAJ-587、硝基咪唑并-噁嗪PA-824、德拉马尼(delamanid)(OPC-67683)、噁唑烷酮(oxazolidinone)，如利奈唑胺(linezolid)、特地唑胺(tedizolid)、雷得唑来(radezolid)、sutezolid(PNU-100480)、泼斯唑来(posizolid)(AZD-5847)或TBI-223、EMB类似物SQ109、OPC-167832、GSK3036656(也称为GSK070)、GSK2556286、GSK3211830、苯并噻嗪酮如BTZ043或PBTZ169、氮杂吲哚(azaindole)，如TBA-7371、二硝基苯甲酰胺(dinitrobenzamide)，或β-内酰胺(beta-lactam)，如美罗培南(meropenem)、法罗培南(faropenem)、厄他培南(ertapenem)、替比培南(tebipenem)或β-内酰胺组合如AUGMENTIN(阿莫西林-克拉维酸(amoxicillin-clavulanate))。
在一个实施方案中，抗结核药剂可以选自异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、莫西沙星、利福喷丁、氯法齐明、乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲、氨硫脲、贝达喹啉(TMC207)、硝基咪唑并-噁嗪PA-824、德拉马尼(OPC-67683)、噁唑烷酮如利奈唑胺、特地唑胺、雷得唑来、sutezolid(PNU-100480)、或泼斯唑来(AZD-5847)、EMB类似物SQ109、OPC-167832、GSK3036656A(也称为GSK070)、GSK2556286、GSK3211830和苯并噻嗪酮或二硝基苯甲酰胺。
根据本发明的组合可以进一步包含抗病毒药剂，包括抗逆转录病毒药剂。
该抗逆转录病毒药剂可以选自齐多夫定(zidovudine)、去羟肌苷(didanosine)、拉米夫定(lamivudine)、扎西他滨(zalcitabine)、阿巴卡韦(abacavir)、司他夫定(stavudine)、阿德福韦(defovir)、阿德福韦二匹伏酯(adefovir dipivoxil)、福齐夫定(fozivudine)、todoxil、恩曲他滨(emtricitabine)、阿洛夫定(alovudine)、氨多索韦(amdoxovir)、艾夫他滨(elvucitabine)、奈韦拉平(nevirapine)、地拉韦啶(delavirdine)、依法韦伦(efavirenz)、洛韦胺(loviride)、immunocal、奥替普拉(oltipraz)、卡普韦林(capravirine)、lersivirine、GSK2248761、TMC-278、TMC-125、依曲韦林(etravirine)、沙奎那韦(saquinavir)、利托那韦(ritonavir)、茚地那韦(indinavir)、奈非那韦(nelfinavir)、安普那韦(amprenavir)、福沙那韦(fosamprenavir)、brecanavir、地瑞那韦(darunavir)、阿扎那韦(atazanavir)、替拉那韦(tipranavir)、帕利那韦(palinavir)、拉西那韦(lasinavir)、恩夫韦肽(enfuvirtide)、T-20、T-1249、PRO-542、PRO-140、TNX-355、BMS-806、BMS-663068和BMS-626529、5-Helix、雷特格韦(raltegravir)、埃替格韦(elvitegravir)、GSK1349572、GSK1265744、vicriviroc(Sch-C)、Sch-D、TAK779、马拉维若(maraviroc)、TAK449、去羟肌苷(didanosine)、替诺福韦(tenofovir)、洛匹那韦(lopinavir)和地瑞那韦(darunavir)。
本发明的一个化合物(即式(I)化合物或其药学上可接受的盐)可与可通过EthA途径激活的抗结核药组合使用。本领域技术人员能够确定特定化合物是否可以通过EthA途径激活，例如，通过应用以下出版物中描述的方法：“Activation of the prodrugethionamide is regulated by mycobacteria”A.R.Baulard等人,Journal ofBiological Chemistry,2000,pages 28326-28331。
更具体地，抗结核药剂可以选自硫代酰胺家族，如乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲和氨硫脲。
在一个实施方案中，本发明的一个化合物(即式(I)化合物或其药学上可接受的盐)与乙硫异烟胺组合使用。在该实施方案中，本发明的化合物(即式(I)化合物或其药学上可接受的盐)已显示出增强乙硫异烟胺的活性。
所述组合可以方便地以药物组合物或制剂的形式存在。因此，本文还涉及组合物，其包含：(a)本文所述的本发明化合物(即式(I)化合物或其药学上可接受的盐)，以及(b)本文所述的一种或多种药学上可接受的载体，以及(c)至少一种其他抗结核药剂和(d)任选地，抗病毒药剂，包括抗逆转录病毒药剂。
本发明的一个化合物(即式(I)的化合物或其药学上可接受的盐)和其他治疗剂可以一起或分开施用，当分开施用时，可以按任何顺序分开或依次施用(通过相同或不同的施用途径)。将选择本发明的一个化合物(即式(I)的化合物或其药学上可接受的盐)和其他治疗活性剂的量以及相对的施用时间，以获得所需的组合治疗效果。
实施例
现在将通过以下非限制性实施例说明本发明。尽管下面描述了本发明的具体实施例，但是本领域技术人员将理解，可以进行各种改变和修改。当提到以与其他制备相似的方式或通过其他制备的一般方法进行制备时，其可包括常规参数的变化，例如时间、温度、后处理条件、试剂量的细微变化等。
缩写
下面列举了本文使用的某些缩写和符号的定义。应当理解，该列表不是穷举的，但是对于本领域技术人员而言，本文以下未定义的那些缩写和符号的含义将是显而易见的。在描述本发明时，根据元素周期表识别化学元素。
ACN 乙腈
anh 无水的
CDCl3 氘代氯仿
CD2Cl2 氘代二氯甲烷
CyHex 环己烷
DCM 二氯甲烷
DIPEA 二异丙基乙胺
DMAP 4-二甲氨基吡啶
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO-d6 氘代二甲基亚砜
EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
EtOAc 乙酸乙酯
Ex. 实施例
HBTU N,N,N′,N′-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐
HPLC 高效液相色谱
lnt. 中间体
M 摩尔浓度
MS 质谱
min 分钟
N 标准浓度
NaH 氢化钠
NMR 核磁共振
TFA 三氟乙酸
TEA 三乙胺
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱
rt 室温
UPLC 超高效液相色谱
记录了质子核磁共振(1H NMR)光谱，并报告了相对于内标四甲基硅烷(TMS)向低场化学位移的百万分率(δ)。NMR数据的缩写如下：s＝单峰,d＝二重峰,t＝三重峰,q＝四重峰,m＝多重峰,dd＝双二重峰,dt＝双三重峰,app＝表观,br＝宽峰。使用电喷雾(ES)电离技术获得质谱。所有温度均以摄氏度为单位。
在以下某些中间体和实施例中，起始原料是通过参考其他中间体或实施例编号来标识的。这并不表示来自任何特定中间体或实施例的实际材料必须在本文举例说明的后续步骤中使用，而是用作表示相关化合物名称的速记手段。
中间体
中间体1:3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002385324790000191
向4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(FLUOROCHEM，2g，10.14mmol)和碳酸氢钠(8.52g，101.38mmol)在EtOAc(50mL)中的悬浮液中加入二溴甲醛肟(FLUOROCHEM，5g，24.74mmol)。将反应混合物在室温搅拌5天。添加硅藻土，并将所得浆液在真空下过滤，并用EtOAc洗涤。蒸发溶剂，并将残余物通过硅胶色谱柱纯化，使用CyHex/EtOAc梯度作为洗脱剂进行洗脱(CyHex/EtOAc 95/5至90/10)以制备白色固体的标题化合物(7.29g,92％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm:3.72-3.64(m,2H),3.40-3.31(m,2H),2.95(s,2H),1.92-1.84(m,2H),1.72-1.65(m,2H),1.45(s,9H).[ES+MS]m/z319,321(MH+).
中间体2:3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002385324790000201
在0℃向2,2,2-三氟乙醇(SIGMA-ALDRICH，282mg，2.82mmol)在2mL THF中的溶液中添加NaH(SIGMA-ALDRICH，112,8mg，2,82mmol)并将混合物搅拌30分钟。然后在0℃加入中间体1 3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-甲酸叔丁基酯(300mg,0.94mmol)并将混合物在80℃搅拌2天。溶液用饱和氯化铵溶液洗涤，并用EtOAc萃取(×2)。有机层用无水MgSO4干燥并过滤。真空蒸发溶剂。残留物通过硅胶色谱柱纯化，使用CyHex/EtOAc梯度作为洗脱剂进行洗脱(0-20％EtOAc洗脱30min，20％EtOAc洗脱10min)以获得标题化合物(200mg,63％).[ES+MS]m/z 339(MH+)。
中间体3-5的制备方法类似于中间体2所述的方法，但用表1中所示的醇代替醇(2,2,2-三氟乙醇)。产物通过硅胶色谱柱纯化，使用CyHex/EtOAc梯度作为洗脱剂进行洗脱(0-10％EtOAc洗脱30min，10％EtOAc洗脱10min).
Figure BDA0002385324790000202
Figure BDA0002385324790000211
表1
中间体6:4-亚甲基哌啶盐酸盐
Figure BDA0002385324790000212
在0℃下向4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(APOLLO，10g，50.7mmol)的二噁烷(130mL)溶液中加入4M HCl的二噁烷溶液(ALFA-AESAR，130mL，507mmol，10当量)，并将混合物在室温搅拌过夜。通过UPLC和TLC监测显示反应已完成。真空除去溶剂，得到所需化合物4-亚甲基亚哌啶盐酸盐，其无需进一步纯化即可用于下一步(7.6g,100％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:9.19(br s,2H),4.86(s,2H),3.06(t,J＝6.0Hz,4H),2.41(t,J＝6.0Hz,4H).
中间体7:4,4,4-三氟-1-(4-亚甲基哌啶-1-基)丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000213
将EDC.HCl(ALFA-AESAR，19.4g，101.3mmol)、TEA(ALFA-AESAR，28mL，202.5mmol)和4,4,4-三氟丁酸(ALFA-AESAR，14.4g，101.3mmol)的DCM(200mL)溶液于室温搅拌10min，然后加入中间体6(6.77g，50.6mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物用水洗涤，分离两相，并将水相进一步用DCM萃取。收集的有机层经(无水)Na2SO4干燥，过滤并蒸发。如此获得的粗产物通过快速色谱纯化(Si SNAP 340,CyHex/EtOAc，从9/1至6/4)以获得浅黄色油状的所需产物(10.34g,92％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:4.83(s,2H),3.70-3.59(m,2H),3.51-3.44(m,2H),2.65-2.47(m,4H),2.30-2.21(m,4H).[ES+MS]m/z 222(MH+).
中间体8:2,2,2-三氟乙醛肟
Figure BDA0002385324790000221
在0℃向搅拌中的2,2,2-三氟-1-甲氧基乙醇(ALFA-AESAR，20g，153.8mmol)和盐酸羟胺(AVRA，12.8g，184.5mmol)的甲醇(30mL)溶液中加入水(70ml)，然后在0℃下缓慢加入50％氢氧化钠溶液(FINAR，36ml)。将反应混合物的温度升至26℃，并在相同温度下搅拌16小时。通过TLC监测反应。反应完成后，将正己烷(250mL)加入反应混合物中，并分离各层。用6M HCl酸化水层(pH＝3)，然后用乙醚(3×500mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到为无色液体的标题化合物(18g，粗产物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:9.11(br s,1H),7.54-7.46(m,1H).
中间体9:2,2,2-三氟-N-羟基亚胺代乙酰溴
Figure BDA0002385324790000222
在0℃下，向搅拌中的中间体8(18g，159.2mmol)的DMF(90mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(AVRA，31.1g，175.2mmol)的DMF(90mL)溶液。将反应混合物在26℃下搅拌3h。通过TLC监测反应。反应完成后，将反应混合物倒入冰水(300mL)中，并用乙醚(3×400mL)萃取。有机层用盐水(300mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色油状物的标题化合物(25g，粗产物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:11.55(br s,1H).
中间体10:丙醛肟
Figure BDA0002385324790000223
向搅拌的丙醛(ALFA-AESAR，2g，34.43mmol)和K2CO3(CHEMLABS，9.36g，68.87mmol)的DCM(30mL)溶液中加入盐酸羟胺(AVRA，2.86g，41.32mmol)。将反应混合物在26℃搅拌16小时。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物用水(200mL)稀释，并用DCM(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水溶液(50mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到白色固体的标题化合物(1.0g)。粗产物化合物无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.50(br s,1H),6.70(t,J＝5.4Hz,1H),2.26-2.22(m,2H),1.14-1.09(m,3H).
中间体11:N-羟基亚胺代丙酰氯
Figure BDA0002385324790000231
在26℃，向搅拌的中间体10(1g，13.681mmol)的DMF(10mL)溶液中分批加入N-氯代琥珀酰亚胺(AVRA，2.19g，16.41mmol)，将反应混合物在26℃搅拌30分钟。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物用水(100mL)稀释，并用EtOAc(2×50mL)萃取，将合并的有机层用盐水溶液(50mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。得到为无色液体的标题化合物(1.0g，68.4％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:8.32(br s,1H),2.53(q,J＝7.4Hz,2H),1.21(t,J＝7.4Hz,3H).
中间体12:N-羟基亚胺代乙酰氯
Figure BDA0002385324790000232
在0℃下，向(E)-乙醛肟(TCI，1g，16.949mmol)的DMF(10mL)溶液中分批加入N-氯琥珀酰亚胺(AVRA，2.9g，22.03mmol)。将反应混合物的温度升至26℃并在相同温度保持3小时。通过TLC监测反应。反应完成后，将反应混合物用冰水(100mL)稀释，并用乙醚(2×300mL)萃取。将有机层用盐水(200mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤，并将滤液减压浓缩，得到为无色液体的标题化合物(1.2g，粗产物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:8.48(br s,1H),2.27(s,3H).
中间体13:3-(三氟甲基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-甲酸叔丁基酯.
Figure BDA0002385324790000233
在0℃向搅拌的中间体9(6g，30.41mmol)的DCM(60mL)溶液中分批加入碳酸氢钾(ALFA-AESAR，6.09g，60.83mmol)。随后在0℃逐滴添加4-亚甲基环己烷甲酸叔丁酯(OAKWOOD，5.86g，30.415mmol)。将反应混合物在26℃下搅拌16h。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物倒入水(200mL)中，并用EtOAc(3×250mL)萃取。有机层用盐水(200mL)洗涤，并用(无水)Na2SO4干燥，然后过滤并在减压下浓缩。粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目)，用0-10％EtOAc的石油醚溶液洗脱。收集纯级分并减压浓缩，得到为浅黄色液体的标题化合物(6.5g，56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:3.80-3.63(m,2H),3.42-3.35(m,2H),2.91(q,J＝1.5Hz,2H),1.94-1.89(m,2H),1.77-1.67(m,2H),1.47(s,9H).[ES-MS]m/z307(M-H).
中间体14和15:通过类似于中间体13所述的方法制备，但是用表2中所示的化合物代替中间体9，并且还将碳酸氢钾更换为TEA。
Figure BDA0002385324790000241
Figure BDA0002385324790000251
表2
中间体16:3-(三氟甲基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯盐酸盐
Figure BDA0002385324790000252
在0℃向搅拌的中间体13(3g，9.73mmol)的EtOAc(30mL)溶液中滴加4M HCl的EtOAc溶液(SYMAX，30mL)。将反应混合物在26℃下搅拌2小时。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用二乙醚(150mL)洗涤，干燥，得到为灰白色固体的标题化合物(2.21g，粗产物)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:9.42(br s,2H),3.28(s,2H),3.20-3.04(m,4H),2.14-2.00(m,4H).[ES+MS]m/z 209(MH+).
中间体17和18用类似于中间体16所述的方法制备，但用表3所示的化合物代替了中间体13。
Figure BDA0002385324790000253
表3
实施例
实施例1:4,4,4-三氟-1-[3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基]丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000261
将中间体2(200mg，0.59mmol)溶解在2mL DCM中，并在0℃滴加TFA(2mL)。将混合物在0℃搅拌10分钟。向反应混合物中加入碳酸氢钠饱和溶液，并用EtOAc萃取产物。有机层用无水MgSO4干燥，过滤，然后浓缩至干，得到黄色残余物。
在氩气下于0℃向DIPEA(ALFA-AESAR，0.3ml，1.76mmol)的DMF(5mL)溶液中添加HBTU(SIGMA-ALDRICH，669mg，1.76mmol)和4,4,4-三氟丁酸(ALFA-AESAR，125mg，0.88mmol)。然后添加以上残留物，并将混合物在氩气下于室温搅拌过夜。然后在真空下除去DMF。通过HPLC(恒定梯度，CAN/H2O甲酸铵pH 3.8：36/64)纯化残余物，得到标题化合物(137mg，64％)。1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δppm:4.54(q,J＝8.3Hz,2H),4.13-4.05(m,1H),3.66-3.45(m,2H),3.35-3.26(m,1H),2.87(s,2H),2.68-2.37(m,4H),2.10-1.84(m,2H),1.78-1.66(m,2H).[ES+MS]m/z 363(MH+).
实施例2-4通过类似于实施例1所述的方法制备，用表4中所示的化合物代替了中间体2。还对纯化步骤进行了调整。
Figure BDA0002385324790000262
Figure BDA0002385324790000271
表4
a通过HPLC纯化(pH 3.8,恒定梯度,ACN/H2O甲酸铵:33/67)
b通过HPLC纯化(pH 3.8,恒定梯度,ACN/H2O甲酸铵:39/61)
c通过HPLC纯化(pH 3.8,恒定梯度,ACN/H2O甲酸铵:54/46)
实施例5和中间体19:1-(3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000281
向中间体7(9.3g，42mmol)和碳酸氢钠(ALFA-AESAR，35.3g，420mmol)的EtOAc(300ml)悬浮液中加入二溴甲醛肟(COMBI-BLOCKS，10.2g，50mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2天。然后加入硅藻土，将所得浆液在真空下过滤并用EtOAc洗涤，蒸发溶剂，并将残余物(约20g)通过快速色谱法(Si SNAP 340，CyHex/EtOAc从8/2至1/1)纯化以获得无色油状的标题化合物(12.23g,85％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:4.32-4.20(m,1H),3.69-3.60(m,1H),3.59-3.47(m,1H),3.31-3.20(m,1H),3.00(s,2H),2.67-2.43(m,4H),2.07-1.96(m,2H),1.78-1.68(m,2H).[ES+MS]m/z 343,345(MH+).
实施例6:1-(3-乙氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000282
向搅拌的中间体19(0.100g，0.29mmol)的EtOH(4mL)溶液中加入固体碳酸钾(ALFA-AESAR，0.101g，0.73mmol)，并将得到的悬浮液在密封小瓶中于70℃剧烈搅拌20小时。UPLC检查显示仍存在起始原料。然后向反应混合物中加入K3PO4(ALFA-AESAR，0.168g，0.73mmol)，并在70℃下延长加热4小时，直到起始原料被消耗。过滤悬浮液，蒸发滤液，得到粗产物，将其通过半制备LCMS纯化，得到为浅黄色固体的标题化合物(0.0427g，47％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:4.08(q,J＝7.03Hz,2H),3.65-3.55(m,1H),3.50-3.37(m,3H),2.84(s,2H),2.65-2.56(m,2H),2.49-2.40(m,2H),1.78-1.56(m,4H),1.27(t,J＝7.03Hz,3H).[ES+MS]m/z 309(MH+).
实施例7:4,4,4-三氟-1-(3-甲氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000291
在0℃下，向搅拌的中间体19(1g，2.914mmol)的甲醇(10mL)溶液中分批加入甲醇钠(AVRA，786mg，14.5mmol)。将反应混合物加热至70℃，保持16小时。通过TLC监测反应。反应完成后，将反应混合物用水(100mL)淬灭，并用EtOAc(3×200mL)萃取。有机层用盐水(200mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤并减压蒸发。粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶100-200目)，用0-30％EtOAc的石油醚溶液洗脱。收集纯的级分并减压浓缩，得到为灰白色固体的标题化合物(800mg，93％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:4.24-4.17(m,1H),3.86(s,3H),3.63-3.49(m,2H),3.30-3.21(m,1H),2.75(s,2H),2.62-2.44(m,4H),2.08-1.95(m,2H),1.71-1.61(m，2H).[ES+MS]m/z 295(MH+).
实施例8:4，4，4-三氟-1-(3-(三氟甲基)-1-氧杂-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000292
在0℃向搅拌的中间体16(2.2g，9.016mmol)和4,4,4-三氟丁酸(OAKWOOD，1.53g，10.819mmol)的DMF(25mL)溶液中加入EDC.HCl(SILVERY，4.3g，22.54mmol)和DMAP(AVRA，3.2g，27.04mmol)。将反应混合物在26℃搅拌16h。通过TLC监测反应。反应结束后，将反应混合物倒入冰冷却的水(200mL)中并用EtOAc(3x250 mL)萃取。有机层用盐水(200mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤，并将滤液减压浓缩。通过柱色谱法(硅胶100-200目)纯化粗产物(3.2g)，用0-20％EtOAc的石油醚溶液洗脱。收集纯的级分并减压浓缩，得到为白色固体的标题化合物(1.7g，56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:4.33-4.25(m,1H),3.74-3.62(m,1H),3.60-3.49(m,1H),3.33-3.21(m,1H),2.94(s,2H),2.64-2.45(m,4H),2.07-1.94(m,2H),1.80-1.68(m,2H).[ES+MS]m/z 333(MH+).
实施例9和10通过类似于实施例8所述的方法制备，用表5中所示的化合物代替中间体16。
Figure BDA0002385324790000301
表5
实施例11:8-(4,4,4-三氟丁酰基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-3-甲腈
Figure BDA0002385324790000302
在0℃向搅拌的中间体1(5.5g，17.231mmol)的EtOAc(50mL)溶液中加入4M HCl的EtOAc溶液(SYMAX，50mL)。然后将反应混合物在室温搅拌3小时。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物用乙醚(3×20mL)研磨，并将固体干燥，得到3-氯-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯盐酸盐(主要产物,[ES+MS]m/z 175(MH+))和3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯盐酸盐(次要产物,[ES+MS]m/z 219，221(MH+))的混合物(4.0g,粗产物)，其为为浅黄色固体。
在0℃向搅拌的该混合物(500mg)和4,4,4-三氟丁酸(MATRIX，500mg，3.554mmol)的DMF(10mL)溶液中加入DMAP(AVRA，860mg，4.109mmol)和EDC.HCl(ASHVARSHA，1.13g，5.92mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。通过TLC监测反应。完成后，将反应混合物倒入冰冷的水(50mL)中，并用EtOAc(2×50mL)萃取。有机层用1N HCl(50mL)和盐水(100mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤，并将滤液减压蒸发，得到600mg的为褐色粘稠液体的以下化合物的混合物：1-(3-氯-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮和1-(3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮。
在26℃向先前的化合物的混合物(200mg)的DMF(5mL)溶液中加入氰化钠(ASHVARSHA，65mg，1.342mmol)。将反应混合物加热至100℃并在相同温度下搅拌8小时。通过TLC监测反应进程。反应完成后，将反应混合物用冰水(5mL)淬灭，并用EtOAc(2×50mL)萃取。将有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤，并将滤液减压浓缩。通过柱色谱法(硅胶100-200目)纯化粗产物，用80％EtOAc的石油醚溶液洗脱。收集纯的级分并减压浓缩，得到为灰白色固体的标题化合物(150mg，78％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm:4.35-4.25(m,1H),3.75-3.63(m，1H)，3.59-3.49(m，1H)，3.32-3.21(m,1H),2.96(s,2H),2.64-2.43(m,4H)，2.05-1.92(m，2H)，1.80-1.68(m，2H).[ES+MS]m/z 290(MH+).
实施例12:4，4，4-三氟-1-(3-氟-1-氧杂-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮
Figure BDA0002385324790000311
在26℃向与实施例11中的相同中间体的混合物(1-(3-氯-1-氧杂-2，8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮和1-(3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮)(3g)的DMSO(20mL)溶液中逐份加入氟化钾(COMBIBLOCKS,1.7g,30.131mmol)。将反应混合物加热至150℃，并在微波下搅拌3小时。通过TLC监测反应进程。反应完成后，将反应混合物用水(200mL)稀释，并用EtOAc(2×150mL)萃取。有机层用盐水(150mL)洗涤，经(无水)Na2SO4干燥，过滤，并将滤液减压浓缩。通过制备型HPLC(Kromosil柱)纯化粗产物：历时16分钟从0％至100％CAN/H2O(0.2％甲酸)的梯度。收集纯级分，并在冻干下除去溶剂，得到为浅黄色胶状物的标题化合物(11mg，0.4％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:3.61-3.41(m,4H),3.14(d,J＝4.9Hz,2H),2.68-2.58(m,2H),2.55-2.44(m,2H),1.84(t,J＝5.8Hz,2H),1.74(t,J＝5.9Hz,2H).[ES+MS]m/z 283(MH+).
生物学活性
测定乙硫异烟胺(ETH)与实施例1-11的组合对结核分枝杆菌GFP菌株的生长抑制
1.分枝杆菌重组菌株的构建。
结核分枝杆菌菌株H37Rv-GFP。通过整合质粒pNIP48的转化获得了表达绿色荧光蛋白的结核分枝杆菌的重组菌株H37Rv(H37Rv-GFP)。(Abadie等人,2005；Cremer等人,2002)。在该源自Ms6分枝杆菌噬菌体的质粒中，在强分枝杆菌启动子pBlaF作用下克隆GFP基因，并且GFP被组成型表达。该质粒还含有潮霉素抗性基因。
结核分枝杆菌菌株W4-E1-GFP(突变体)。结核分枝杆菌菌株E1是北京菌株W4的衍生物，该菌株是在含乙硫异烟胺的琼脂平板(20μg/ml)上选择的。该菌株在EthA中携带Gly343Ala突变。如上所述，使用pNIP48转化W4-E1菌株，得到荧光菌株W4-E1-GFP。
2.荧光分枝杆菌的生长和制备
在25cm2组织培养瓶中，将维持在-80℃的细菌储备液用于接种5ml Middlebrook7H9培养基，该培养基补充有油酸-白蛋白-右旋糖-过氧化氢酶(OADC,Difco,Sparks MD,USA)和50μgml-1潮霉素(Invitrogen,Carlsbad,CA USA)。将烧瓶在37℃不摇动孵育7天。然后将培养物用新鲜培养基稀释直至OD600为0.1。在培养瓶(75cm2)中装入50ml稀释的培养物，将其在37℃下不摇动培养7天。
3.微量板制备
将乙硫异烟胺(Sigma，E6005)在DMSO中稀释为0.1mg/mL和0.8mg/ml；将等分试样冷冻保存在-20℃。将测试化合物重悬于DMSO中，最终浓度为10μM。将乙硫异烟胺和测试化合物转移到384孔低容量聚丙烯板(Corning，编号3672)中，并用于制备测定板。使用Echo550液体处理器(Labcyte)在黑色的Greiner 384孔透明底聚苯乙烯板(Greiner，编号781091)中进行化合物的三倍连续稀释(通常在30至4.5e-3μM范围内)，共计10份。补偿DMSO体积，以使所有孔中的浓度相等(0.3％)。
然后使用Echo将乙硫异烟胺转移到384孔板中。对于涉及H37Rv-GFP的测定，ETH的终浓度为0.1μg/ml，对于涉及W4-E1-GFP的测定，ETH的终浓度为0.8μg/ml。对于每个孔，测定板上DMSO的最终量保持＜1％v/v。
测定板中的对照包括0.3％的DMSO(阴性对照)和1μg/ml的INH(阳性对照)。参照板包括利福平、INH和ETH，浓度范围为30至1.8e-3μg/ml(15个点，2倍稀释)。
将要加入测定板的H37Rv-GFP或W4-E1-GFP的培养物在PBS(Gibco，14190)中洗涤两次，重悬于新鲜培养基(无潮霉素)中，并在37℃生长5天。
最后，将培养物稀释，至其OD600nm为0.02(使用不添加潮霉素的新鲜培养基)，并将50μL转移至每个测定板。将测定板在37℃孵育5天。在Victor 3多标记酶标仪(PerkinElmer)上使用exc＝485nm/em＝535nm获取荧光信号。
结果
EC50_H37Rv用于衡量本发明化合物增强乙硫异烟胺抗H37Rv菌株的活性的能力，而EC50_Mutant用于衡量本发明化合物增强乙硫异烟胺抗对乙硫异烟胺具有抗性的结核病菌株的活性的能力。
基本上根据上述步骤对实施例1至12进行了测试，发现所有实施例1至12的平均EC50_H37Rv为<0.75μM，并且平均EC50_Mutant为<3.0μM。
实例1、2、5至8、10和11的平均EC50_H37Rv为<0.20μM，并且平均EC50_Mutant为<1.0μM。
实施例6至8的平均EC50_H37Rv为＜0.04μM，并且平均EC50_Mutant为＜0.45μM。实施例8的平均EC50_H37Rv为0.038μM，并且平均EC50_Mutant为0.14μM。
为了比较，在与上述相同的测定中测试了WO 2014/096369的实施例10，发现其EC50_H37Rv为0.89μM，EC50_Mutant为3.5μM。
结核分枝杆菌体外H37Rv的人巨噬细胞THP-1抑制测定(细胞内测定)
细胞内筛选是鉴定在人类巨噬细胞中有活性的新型抗结核化合物的重要工具。这种离体测定可以代表模仿疾病的生理条件，并考虑到宿主细胞的有利贡献。(Sorrentino,F.等人(2016)Antimicrob.Agents Chemother.60(1),640-645.)
该方法按Sorrentino,F.等人(2016)Antimicrob.Agents Chemother.60(1),640-645(补充材料)中所述进行，除了在将THP-1感染的细胞接种到384孔板之前、在洗涤步骤的最后一步用40um细胞过滤器过滤被感染的巨噬细胞，以除去细胞团块并获得单细胞悬浮液。
基本上根据上述测定法(不存在乙硫异烟胺)测试实施例的化合物，发现实施例1、2和4至10的IC50小于0.5μM。发现实施例5、6、7、8和10的IC50小于0.1μM。发现实施例6、7和8的IC50小于或等于0.05μM。

Claims (25)

1.式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0003712134320000011
其中
R1为卤素；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲基；取代有一个或多个氟的乙基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基。
2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氟、氯或溴；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；取代有一个或多个氟的甲基；取代有一个或多个氟的乙基；取代有一个或多个氟的甲氧基；或取代有一个或多个氟的乙氧基。
3.权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氟、氯或溴；氰基；C1-6直链烷基；C3-4支链烷基；C1-6直链烷氧基；C3-4支链烷氧基；单、二或三氟甲基；单、二或三氟甲氧基；2-氟乙基；2,2-二氟乙基；2,2,2-三氟乙基；2-氟乙氧基,2,2-二氟乙氧基；或2,2,2-三氟乙氧基。
4.前述权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氟、氯、溴、氰基、C1-6直链烷基、C3-4支链烷基、C1-6直链烷氧基、C3-4支链烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
5.前述权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氟、氯、溴、氰基、C1-6直链烷基、C3-4支链烷基、C1-6直链烷氧基、C3-4支链烷氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
6.前述权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氟、溴、氰基、C1-4直链烷基、C1-6直链烷氧基、C4支链烷氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基或2,2,2-三氟乙氧基。
7.前述权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氟、溴、氰基、甲基、乙基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙氧基、甲氧基，乙氧基、正丙氧基、异丁氧基或己氧基。
8.根据前述权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其选自：
4,4,4-三氟-1-[3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基]丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-丙氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-异丁氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-己氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
1-(3-溴-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；
1-(3-乙氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-甲氧基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-(三氟甲基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
4,4,4-三氟-1-(3-甲基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮；
1-(3-乙基-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；
8-(4,4,4-三氟丁酰基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-3-甲腈；和
4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮。
9.根据权利要求8的化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物为4,4,4-三氟-1-(3-(三氟甲基)-1-氧杂-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)丁-1-酮，其具有以下结构：
Figure FDA0003712134320000021
10.根据权利要求1至9所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗分枝杆菌感染或由分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。
11.根据权利要求10的用途，其中所述分枝杆菌感染是结核分枝杆菌感染。
12.根据权利要求1至9所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗结核病的药物中的用途。
13.一种药物组合物，其包含(a)根据权利要求1至9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐；和(b)药学上可接受的赋形剂。
14.一种组合，其为(a)根据权利要求1至9中任一项的化合物或药学上可接受的化合物和(b)另一种抗分枝杆菌药剂的组合。
15.根据权利要求14的组合，其中至少一种其他抗分枝杆菌药剂是抗结核药剂。
16.根据权利要求15的组合，其中所述抗结核病药剂选自：异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、莫西沙星、利福喷丁、氯法齐明、乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲、氨硫脲、利福布汀、二芳基喹啉药剂、硝基咪唑并-噁嗪PA-824、德拉马尼(OPC-67683)、噁唑烷酮药剂、EMB类似物SQ109、OPC-167832、GSK3036656(也称为GSK070)、GSK2556286、GSK3211830、苯并噻嗪酮药剂、氮杂吲哚药剂、二硝基苯甲酰胺药剂、β-内酰胺药剂或β-内酰胺药剂组合。
17.根据权利要求16的组合，其中所述氮杂吲哚药剂为TBA-7371。
18.根据权利要求16的组合，其中β-内酰胺药剂为美罗培南、法罗培南、厄他培南或替比培南。
19.根据权利要求16的组合，其中所述β-内酰胺药剂组合为AUGMENTIN(阿莫西林-克拉维酸)。
20.根据权利要求16的组合，其中所述二芳基喹啉药剂为贝达喹啉(TMC207)或TBAJ-587。
21.根据权利要求16的组合，其中所述苯并噻嗪酮药剂为BTZ043或PBTZ169。
22.根据权利要求16的组合，其中所述噁唑烷酮药剂为利奈唑胺、特地唑胺、雷得唑来、sutezolid(PNU-100480)、泼斯唑来(AZD-5847)或TBI-223。
23.根据权利要求16至22中任一项所述的组合，其进一步包含抗病毒药剂。
24.根据权利要求23的组合，其中所述抗病毒药剂为抗逆转录病毒药剂。
25.根据权利要求24的组合，其中所述抗逆转录病毒药剂选自：齐多夫定、去羟肌苷、拉米夫定、扎西他滨、阿巴卡韦、司他夫定、阿德福韦、阿德福韦二匹伏酯、福齐夫定、todoxil、恩曲他滨、阿洛夫定、氨多索韦、艾夫他滨、奈韦拉平、地拉韦啶、依法韦伦、洛韦胺、immunocal、奥替普拉、卡普韦林、lersivirine、GSK2248761、TMC-278、TMC-125、依曲韦林、沙奎那韦、利托那韦、茚地那韦、奈非那韦、安普那韦、福沙那韦、brecanavir、地瑞那韦、阿扎那韦、替拉那韦、帕利那韦、拉西那韦、恩夫韦肽、T-20、T-1249、PRO-542、PRO-140、TNX-355、BMS-806、BMS-663068和BMS-626529、5-Helix、雷特格韦、埃替格韦、GSK1349572、GSK1265744、vicriviroc(Sch-C)、Sch-D、TAK779、马拉维若、TAK449、去羟肌苷、替诺福韦、洛匹那韦和地瑞那韦。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111184718A (zh) * 2018-11-15 2020-05-22 鲁南制药集团股份有限公司 法罗培南在制备治疗初治病原学阳性肺结核药物中的用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014096369A1 (fr) * 2012-12-21 2014-06-26 Universite De Droit Et De La Sante De Lille 2 Composes de type spiroisoxazoline ayant une activite potentialisatrice de l'activite d'un antibiotique

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI347946B (en) * 2002-10-11 2011-09-01 Otsuka Pharma Co Ltd 2,3-dihydro-6-nitroimidazo[2,1-b]oxazole compound
DE102005044813A1 (de) * 2005-05-19 2007-10-04 Grünenthal GmbH Substituierte Spiro-Verbindungen und deren Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln
FR3000065A1 (fr) * 2012-12-21 2014-06-27 Univ Lille Ii Droit & Sante Composes bicycliques ayant une activite potentialisatrice de l'activite d'un antibiotique actif contre les mycobacteries-composition et produit pharmaceutiques comprenant de tels composes
KR20150034498A (ko) * 2013-09-26 2015-04-03 주식회사 엘지화학 벤팅 커버를 구비하는 배터리 셀 및 이를 포함하는 이차전지

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014096369A1 (fr) * 2012-12-21 2014-06-26 Universite De Droit Et De La Sante De Lille 2 Composes de type spiroisoxazoline ayant une activite potentialisatrice de l'activite d'un antibiotique

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Identification of Better Pharmacokinetic Benzothiazinone Derivatives as New Antitubercular Agents;Kai Lv;《ACS Medicinal Chemistry Letters》;20170510;第8卷;636-641页 *
Reversion of antibiotic resistance in Mycobacterium tuberculosis by spiroisoxazoline SMARt-420;Nicolas Blondiaux;《Science》;20170317;第355卷;1206-1211页 *
Whole cell screen based identification of spiropiperidines with potent antitubercular properties;Subramanyam J. Tantry;《Bioorg. Med. Chem. Lett.》;20150603;第25卷;3234-3245页 *

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