CN110974812A - 一种gpr35受体新激动剂及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及天然产物中靶向活性分子及其应用，具体涉及天然产物中GPR35受体新激动剂及其应用。所述GPR35受体新激动剂包括以大黄酸、槲皮素、7‑去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分。体外细胞实验表明，本发明中GPR35受体新激动剂包括的天然化合物对GPR35受体具有激动作用。目前研究表明GPR35受体与哮喘、心力衰竭、高血压、炎症、冠状动脉心脏病、代谢综合症、疼痛和癌症等疾病密切相关，据此本发明的GPR35受体新激动剂为这些相关疾病的药物开发提供了候选化合物。

Description

一种GPR35受体新激动剂及其应用
技术领域
本发明涉及天然产物中靶向活性分子及其应用，具体涉及天然产物中GPR35受体新激动剂及其应用。
背景技术
GPR35受体是G蛋白偶联受体家族中的一个孤儿受体，其生物学功能还不是很清楚。GPR35受体在白细胞、单核细胞、噬中性粒细胞、T细胞、树突细胞等免疫细胞，胰腺、小肠、结肠和脾脏等各种组织中表达。随着小分子化合物库筛选和有潜力的内源性激动剂的发现，逐步证明GPR35受体可能与疼痛、高血压、冠状动脉疾病、早发性炎症性疾病、炎症和哮喘等疾病相关，因此GPR35受体非常有可能成为一个新颖的、有潜力的治疗靶标。
天然产物一直是药物的重要来源，其含有结构丰富的化合物及临床有效性，为新药提供了源泉。据统计，目前约30％～40％的药物直接或间接来源于天然产物。如具有镇痛作用的吗啡、抗疟疾的青蒿素、抗肿瘤的紫杉醇、抗高血压的利血平及具有降糖作用的阿卡波糖等。因此，从天然产物中获得先导活性分子仍是新药研发的重要策略。鉴于在阐明GPR35受体的生物学和药理学的研究中GPR35的受体激动剂存在活性不高、结构单一等问题，因此寻找新的、有潜力的配体对于阐明GPR35受体的生物学、药理学功能和发展针对GPR35受体的药物是非常必要的。
目前，关于本发明的大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇通过技术手段证明对GPR35受体有激动作用的技术方案尚未报道。
发明内容
有鉴于此，本发明实施例期望提供一种GPR35受体新激动剂及其应用，目的之一是提供商品化天然产物中具有激动GPR35受体作用的化合物；目的之二是提供此类化合物的激动活性强弱；目的之三是提供此类化合物在临床上的应用范围。
为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
本发明实施例提供了一种GPR35受体新激动剂，包括以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分。
进一步地，所述大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇的化学结构如下：
Figure BDA0002169253340000031
进一步地，所述GPR35受体激动剂包括以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分，其中还可添加有药学上可接受的载体和/或赋形剂，如：淀粉、氯化钠、微晶纤维素、山梨酸和/或甘露醇等。该组合物的给药方式可以是但不限于经静脉注射、口服、肌肉、皮下、皮肤表面、局部注射等方式给药，其剂型可以但不限于是注射液、冻干粉针剂、注射微球、脂质体、片剂、胶囊剂、水剂、散剂、糊剂、喷雾剂、颗粒剂、软胶囊、滴丸剂、凝胶剂、贴片、膏剂等，其中优选注射液、冻干粉针剂、片剂和胶囊剂。
进一步地，将以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂溶解在含0.1％DMSO的HBSS缓冲盐中，以浓度为1～200μM加入到接种CHO-hGPR35细胞的384微孔板中，检测响应信号谱，与敏喘宁的响应信号谱具有轮廓相似性。
进一步地，将以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂溶解在含0.1％DMSO的HBSS缓冲盐中，以浓度为1～200μM加入到接种CHO-hGPR35细胞的384微孔板中，预处理5～60min，加入浓度为1μM的敏喘宁，检测响应信号谱，此信号低于敏喘宁本身的响应信号。
进一步地，将拮抗剂ML-145以浓度0.01～100000nM加入到接种CHO-hGPR35细胞的微孔板中，预处理5～60min，再加入以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂，检测响应信号谱。
更进一步地，所述响应信号低于将以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂溶解在含0.1％DMSO的HBSS缓冲盐中，以浓度为1～200μM加入到接种CHO-hGPR35细胞的384微孔板中而检测得到的响应信号。
进一步地，所述包括的大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物各活性成分之间对GPR35受体的激动作用存在不一样的强度。
更进一步地，所述大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物活性成分对GPR35受体激动作用按依次减弱的顺序排列为大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇。
进一步地，所述大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物均来自天然产物中。
本发明实施例还提供了一种GPR35受体激动剂在制备预防和/或治疗疾病药物中的应用，使用上述GPR35受体新激动剂，所述应用包括哮喘、心力衰竭、高血压、炎症、冠状动脉心脏病、代谢综合症、疼痛和癌症等疾病中的一种或二种以上病症的临床治疗。
本发明有益效果如下：
1)提供了一种GPR35受体新激动剂，体外细胞实验表明，本发明中GPR35受体新激动剂包括的天然化合物对GPR35受体具有激动作用；
2)目前研究表明GPR35受体与哮喘、心力衰竭、高血压、炎症、冠状动脉心脏病、代谢综合症、疼痛和癌症等疾病密切相关，据此本发明的GPR35受体新激动剂为这些相关疾病的药物开发提供了候选化合物。
附图说明
图1为实施例1在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号；
其中，图1A为敏喘宁在CHO-hGPR35细胞上的实时DMR响应信号；图1B为敏喘宁在CHO-hGPR35细胞上的激动剂量响应曲线、敏喘宁的脱敏剂量响应和ML145的拮抗剂量响应曲线。
图2为实施例2在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号；
其中，图2A为天然化合物在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号；图2B为天然化合物预处理1h后，200nM敏喘宁在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号。
图3为激动分析-天然化合物在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号；脱敏分析-化合物预处理1h后，200nM敏喘宁在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号；拮抗分析-1μM ML145在预处理10min后，天然化合物在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号。
图4为实施例4在CHO-hGPR35细胞上的DMR响应信号；
其中，图4A为7-去甲基银杏双黄酮、大黄酸和丹参酮IIA在CHO-hGPR35细胞上的剂量响应曲线；图4B为芦荟大黄素、黄芩苷、大豆苷元和木樨草甘在CHO-hGPR35细胞上的剂量响应曲线；图4C为木兰花碱、槲皮素、原金丝桃素和四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇在CHO-hGPR35细胞上的剂量响应曲线；图4D为去甲波尔定、隐丹参酮和异黄腐醇在CHO-hGPR35细胞上的剂量响应曲线。
具体实施方式
为了能够更加详尽地了解本发明的特点与技术内容，下面结合附图及实施例对本发明的实现进行详细阐述，所附附图及实施例仅供参考说明之用，并非用来限定本发明。
实施例1：GPR35受体筛选模型的构建
材料敏喘宁和ML145购于Sigma公司；天然化合物购于上海源叶生物科技有限公司，CHO-hGPR35细胞由本公司转染筛选得到。检测平台为康宁第三代
Figure BDA0002169253340000071
成像仪，检测的信号为细胞动态质量重置(DMR)引起的波长位移。
GPR35受体的激动探针为敏喘宁，拮抗探针为ML145。本发明首先基于无标记细胞整合药理学技术，在CHO-hGPR35细胞上使用探针敏喘宁和ML145建立激动分析、脱敏分析和拮抗分析的模型，为后续天然化合物的筛选奠定基础。将处于对数生长期的CHO-hGPR35细胞，分别接种于384孔的细胞板的不同孔中，每孔的接种体积为40μL，每孔接种的细胞数目为1×104个，将接种好的细胞板置于细胞培养箱中培养24h后进行激动、脱敏和拮抗实验。激动分析是将不同浓度的敏喘宁作用于CHO-hGPR35细胞，浓度分别为10000nM、5000nM、2500nM、1250nM、625nM、312.5nM、156.25nM、78.13nM、39.06nM、19.53nM、9.77nM、4.88nM、2.44nM和1.22nM，实时监测敏喘宁的DMR响应信号；脱敏分析为不同浓度的敏喘宁预处理CHO-hGPR35细胞1h后，浓度分别为10000nM、5000nM、2500nM、1250nM、625nM、312.5nM、156.25nM、78.13nM、39.06nM、19.53nM、9.77nM、4.88nM、2.44nM和1.22nM，再加入恒定浓度200nM的敏喘宁，实时检测脱敏的DMR响应信号；拮抗分析为不同浓度的ML145预处理CHO-hGPR35细胞10min后，浓度分别为25000nM、8333.33nM、2777.78nM、925.93nM、308.64nM、102.88nM、34.29nM和11.43nM，再加入恒定浓度200nM的敏喘宁，实时监测拮抗的DMR响应信号。所获得的GPR35受体的DMR特征谱见图1A，激动分析、脱敏分析和拮抗分析的DMR剂量曲线见图1B。从图1A中可以看出，GPR35受体的典型DMR信号特征为10min左右DMR正信号达到一定的平台。由图1B可以看出，敏喘宁激动分析的EC50值、敏喘宁脱敏分析的IC50值和ML145拮抗敏喘宁的IC50值分别为51.4±11.0nM、72.6±15.6nM和165.2±35.4nM。
实施例2：天然化合物在GPR35受体模型上的初步筛选
将处于对数生长期的CHO-hGPR35细胞，分别接种于384孔的细胞板的不同孔中，每孔的接种体积为40μL，每孔接种的细胞数目为1×104个，将接种好的细胞板置于细胞培养箱中培养24h再进行实验。首先监测待筛选化合物(终浓度为100μM)作用于CHO-hGPR35细胞的响应信号；然后使用敏喘宁(终浓度为200nM)处理CHO-hGPR35细胞，监测待测化合物对敏喘宁在CHO-hGPR35细胞上响应信号的影响。
将所有化合物以100μM的终浓度作用于CHO-hGPR35细胞，产生的DMR响应信号强度见图2A；化合物预处理CHO-hGPR35细胞1h后，加入200nM的敏喘宁的DMR响应信号强度见图2B。根据GPR35受体新激动剂的判断依据——化合物本身有明显的DMR响应强度且能降低敏喘宁的DMR响应强度，即在图2A中有明显的DMR响应强度且在图2B中的没有明显的DMR响应强度。从图2A和2B中可以看出11-异绿原酸、12-齐墩果酮酸、14-4,5-二咖啡酰奎宁酸、27-醋酸棉酚、35-芦荟大黄素、54-黄芩苷、68-7-去甲基银杏双黄酮、86-鼠尾草酚、116-隐丹参酮、121-氯化矢车菊素、127-大豆苷元、149-多烯紫杉醇、179-灵芝酸G、184-栀子苷、192-银杏酸C17-1、217-金丝桃素、222-野鸢尾黄素、231-芹糖异甘草苷、232-异鼠李素、236-异黄腐醇、242-山奈酚、257-木樨草甘、261-木兰花碱、323-槲皮素、327-大黄酸、348-高黄芩素、349-灯盏花乙素、353-番泻苷A、379-丹参酮IIA、381-远华蟾毒精、392-盐酸拓扑替康、396-钩藤碱E、399-硫酸长春碱、424-短叶苏木酚酸、430-黄牛木酮、456-原金丝桃素、472-四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇和474-去甲波尔定有hGPR35受体新激动剂作用，从这些化合物本身响应信号图2A中可以看出在这些化合物有明显的信号强度，且在图2B中能降低敏喘宁的DMR响应强度。由此可以判断上述化合物对GPR35受体有激动作用。
实施例3：活性化合物的靶点特异性验证
通过比对图2A和2B，推断上述化合物对GPR35受体有激动作用，但这些化合物的靶点特异性需进一步的验证。有激动活性的化合物需要用GPR35特异性拮抗剂ML145来验证产生的DMR信号是否能被抑制，用以确定是否为GPR35特异性激动作用。
将处于对数生长期的CHO-hGPR35细胞，分别接种于384孔的细胞板的不同孔中，每孔的接种体积为40μL，每孔接种的细胞数目为1×104个，将接种好的细胞板置于细胞培养箱中培养24h再进行实验。首先对上述38个化合物的激动和脱敏作用进行重复验证，然后使用ML145(终浓度为1μM)处理CHO-hGPR35细胞，对待测化合物在CHO-hGPR35细胞上响应信号的影响进行监测。
结果显示在上述化合物中，11-异绿原酸、12-齐墩果酮酸、14-4,5-二咖啡酰奎宁酸、27-醋酸棉酚、217-金丝桃素、232-异鼠李素、242-山奈酚、348-高黄芩素、349-灯盏花乙素、353-番泻苷A、399-硫酸长春碱、424-短叶苏木酚酸和430-黄牛木酮能重复出对GPR35受体的激动和脱敏作用，但其自身产生的信号不能被GPR35受体特异性拮抗剂ML145抑制，说明这些化合物不是GPR35受体的特异性激动剂。35-芦荟大黄素、54-黄芩苷、68-7-去甲基银杏双黄酮、116-隐丹参酮、127-大豆苷元、236-异黄腐醇、257-木樨草甘、261-木兰花碱、323-槲皮素、327-大黄酸、379-丹参酮IIA、456-原金丝桃素、472-四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇和474-去甲波尔定能重复出对GPR35受体的激动和脱敏作用，其自身产生的信号也能被GPR35受体特异性拮抗剂ML145抑制，说明这些化合物是GPR35受体的特异性激动剂。
实施例4：活性化合物对GPR35受体的激动强度表征
将芦荟大黄素、黄芩苷、7-去甲基银杏双黄酮、隐丹参酮、大豆苷元、异黄腐醇、木樨草甘、木兰花碱、槲皮素、大黄酸、丹参酮IIA、原金丝桃素、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇和去甲波尔定分别作用于CHO-hGPR35细胞。7-去甲基银杏双黄酮、大黄酸和丹参酮IIA的浓度梯度为50000nM、12500nM、3125nM、781.25nM、195.31nM、48.83nM、12.21nM和3.05nM，其余化合物的浓度梯度为100000nM、25000nM、6250nM、1560nM、390.63nM、97.66nM、24.41nM和6.10nM。7-去甲基银杏双黄酮、大黄酸和丹参酮IIA的剂量曲线见图4A，芦荟大黄素、黄芩苷、大豆苷元和木樨草甘的剂量曲线见图4B，木兰花碱、槲皮素、原金丝桃素和四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇的剂量曲线见图4C，去甲波尔定、隐丹参酮和异黄腐醇的剂量曲线见图4D。从图4可以看出，化合物能呈剂量依赖的激动GPR35受体，芦荟大黄素、黄芩苷、7-去甲基银杏双黄酮、隐丹参酮、大豆苷元、异黄腐醇、木樨草甘、木兰花碱、槲皮素、大黄酸、丹参酮IIA、原金丝桃素、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇和去甲波尔定的EC50值分别为：51.17±10.98μM、27.73±5.95μM、12.42±2.67μM、＞100μM、53.95±11.58μM、＞100μM、60.07±14.18μM、67.45±14.47μM、2.79±0.59μM、0.16±0.03μM、56.75±12.18μM、12.68±2.72μM、48.75±10.46μM和51.52±11.06μM，其中EC50值越低表明化合物对GPR35受体的激动作用越强，因此上述化合物对GPR35受体的激动作用强弱顺序为大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇。
这里，以上所涉及的化学物质的中英文名称及表征方法作为公知常识，本领域的技术人员能够理解。
本发明实施例只是介绍其具体实施方式，不在于限制其保护范围。本行业的技术人员在本实施例的启发下可以作出某些修改，故凡依照本发明专利范围所做的等效变化或修饰，均属于本发明专利权利要求范围内。

Claims (10)

1.一种GPR35受体新激动剂，其特征在于：所述GPR35受体新激动剂包括以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分。
2.根据权利要求1所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：所述GPR35受体新激动剂包括以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分，其中还可添加有药学上可接受的载体和/或赋形剂。
3.根据权利要求1所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：将以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂溶解在含0.1%DMSO的HBSS缓冲盐中，以浓度为1 ~ 200 μM加入到接种CHO-hGPR35细胞的384微孔板中，检测响应信号谱，与敏喘宁的响应信号谱具有轮廓相似性。
4.根据权利要求1所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：将以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂溶解在含0.1%DMSO的HBSS缓冲盐中，以浓度为1 ~ 200 μM加入到接种CHO-hGPR35细胞的384微孔板中，预处理 5 ~ 60 min，加入浓度为1 μM的敏喘宁，检测响应信号谱，此信号低于敏喘宁本身的响应信号。
5.根据权利要求1所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：将拮抗剂ML-145以浓度0.01 ~ 100000 nM加入到接种CHO-hGPR35细胞的微孔板中，预处理5 ~ 60 min，再加入以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂，检测响应信号谱。
6.根据权利要求5所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：所述响应信号低于将以大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物及其对应药学上可接受的成盐化合物中的一种或两种以上为活性成分的所述GPR35受体新激动剂溶解在含0.1%DMSO的HBSS缓冲盐中，以浓度为1 ~ 200 μM加入到接种CHO-hGPR35细胞的384微孔板中而检测得到的响应信号。
7.根据权利要求1所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：所述包括的大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物各活性成分之间对GPR35受体的激动作用存在不一样的强度。
8.根据权利要求7所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：所述大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物活性成分对GPR35受体激动作用按依次减弱的顺序排列为大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇。
9.根据权利要求1所述的GPR35受体新激动剂，其特征在于：所述大黄酸、槲皮素、7-去甲基银杏双黄酮、原金丝桃素、黄芩苷、四氢二甲氧基二苯并喹啉二醇、芦荟大黄素、去甲波尔定、大豆苷元、丹参酮IIA、木樨草甘、木兰花碱、隐丹参酮和异黄腐醇化合物均来自天然产物中。
10.一种GPR35 受体激动剂在制备预防和/或治疗疾病药物中的应用，其特征在于：使用如权利要求1至9中任一项所述的GPR35受体新激动剂；所述应用包括哮喘、心力衰竭、高血压、炎症、冠状动脉心脏病、代谢综合症、疼痛和癌症等疾病中的一种或二种以上病症的临床治疗。
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