CN110964775A - 一种芽孢杆菌数量的检测方法 - Google Patents

一种芽孢杆菌数量的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110964775A
CN110964775A CN201911192921.1A CN201911192921A CN110964775A CN 110964775 A CN110964775 A CN 110964775A CN 201911192921 A CN201911192921 A CN 201911192921A CN 110964775 A CN110964775 A CN 110964775A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bacillus
emulsifier
normal saline
detection
dilution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201911192921.1A
Other languages
English (en)
Inventor
孙长坡
杜稳
刘虎军
赵一凡
常晓娇
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Academy of National Food and Strategic Reserves Administration
Original Assignee
Academy of National Food and Strategic Reserves Administration
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Academy of National Food and Strategic Reserves Administration filed Critical Academy of National Food and Strategic Reserves Administration
Priority to CN201911192921.1A priority Critical patent/CN110964775A/zh
Publication of CN110964775A publication Critical patent/CN110964775A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • C12Q1/06—Quantitative determination

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明实施例公开了一种芽孢杆菌数量的检测方法，涉及微生物检测技术领域，其包括：采用含有乳化剂的生理盐水对含有芽孢杆菌的检测样品进行稀释；将稀释液涂布到平板上，经过培养得到芽孢杆菌菌落，根据芽孢杆菌菌落的统计结果计算所述检测样品中芽孢杆菌数量；本发明上述检测方法采用含有乳化剂的生理盐水对检测样品进行稀释，通过乳化剂能够改善不同状态芽孢杆菌在生理盐水中的表面张力，进而更好的促进不同状态芽孢杆菌在生理盐水中的分散，能够充分使得芽孢杆菌在生理盐水中均匀分布，进而提高了芽孢杆菌数量检测的准确度。

Description

一种芽孢杆菌数量的检测方法
技术领域
本发明实施例涉及微生物检测技术领域，具体涉及一种芽孢杆菌数量的检测方法。
背景技术
芽孢杆菌(Bacillus)是能形成芽孢(内生孢子)的杆菌或球菌，其包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠球菌属等，并广泛存在于土壤、水、空气和动物肠道中。芽孢杆菌能够分泌多种能抑制动物病原体生长的酶类和抗生素，并能直接利用水中的硝酸盐和亚硝酸盐起到净化水质的作用，其在环境净化、水产水质净化、动物饲料中具有重要的应用。
目前，市场上含有芽孢杆菌的产品越来越多，产品中芽孢杆菌的活菌数量是衡量产品质量的重要指标，因此，为了保障产品质量，准确、快速的检测产品中芽孢杆菌的活菌数量也越来越受到重视。
现有技术中，一般采用平板计数法对产品中芽孢杆菌的活菌数量进行检测，具体是将待检样品采用生理盐水进行稀释，然后将稀释液进行平板涂布，静置培养后进行菌落计数，再计算待检样品中的芽孢杆菌活菌数量；然而，由于待检样品中芽孢杆菌主要是以芽孢(芽孢是在细菌生长后期，形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠体构造，它内部为空腔状)的状态存在，且芽孢的质量轻于细菌菌体，因此，采用生理盐水对待检样品进行稀释后，芽孢大多漂浮在稀释液上部，芽孢不能均匀分布于稀释液中，从而导致选取进行平板涂布的样品中芽孢数量与理论的芽孢数量存在较大偏差，进而导致检测准确度较低。
发明内容
为此，本发明实施例提供一种芽孢杆菌数量的检测方法，以解决现有技术中由于稀释液中芽孢分布不均而导致的芽孢杆菌数量检测准确度较低的问题。
为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：
根据本发明实施例的第一方面提供一种芽孢杆菌数量的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：
采用含有乳化剂的生理盐水对含有芽孢杆菌的检测样品进行稀释；
将稀释液涂布到平板上，经过培养得到芽孢杆菌菌落，根据芽孢杆菌菌落的统计结果计算所述检测样品中芽孢杆菌数量。
本发明上述检测方法采用含有乳化剂的生理盐水对检测样品进行稀释，通过乳化剂能够改善不同状态芽孢杆菌在生理盐水中的表面张力，进而更好的促进不同状态芽孢杆菌在生理盐水中的分散，能够充分使得芽孢杆菌在生理盐水中均匀分布，进而提高了芽孢杆菌数量检测的准确度。
进一步地，所述稀释具体包括：
采用含有乳化剂的生理盐水对检测样品进行初步稀释，得到稀释母液；
采用所述含有乳化剂的生理盐水对所述稀释母液进行梯度稀释，得到不同稀释度的稀释子液。
进一步地，所述梯度稀释之前，需对所述稀释母液进行匀浆处理。
本发明通过对稀释母液进行匀浆处理，能够充分使得芽孢杆菌在生理盐水中均匀分布，更好地促进检测样品中芽孢杆菌在梯度稀释过程中呈等比例稀释，进而实现在高稀释度情况下对芽孢杆菌的准确计数，提高了芽孢杆菌数量检测的准确度。
进一步地，所述匀浆处理具体为采用匀浆机以3000-8000r/min的转速对所述稀释母液匀浆1-3min；通过对匀浆参数的具体限定，能够充分地促进芽孢杆菌在生理盐水中的均匀分散，并避免过高的匀浆转速对芽孢杆菌造成机械损伤，而影响平板计数中菌落的形成，直接导致芽孢杆菌计数不准确。
进一步地，所述初步稀释的稀释倍数为8-12倍；通过对初步稀释倍数的限定，能够保障检测样品中芽孢杆菌的充分分散，更好地提高芽孢杆菌检测的准确度。
进一步地，所述含有乳化剂的生理盐水中乳化剂的体积含量为0.5-3％；通过对乳化剂含量的进一步地限定，既能防止由于乳化剂含量过低导致芽孢杆菌在生理盐水中分布不均匀又能防止由于乳化剂含量过高导致芽孢杆菌中未形成芽孢的菌体死亡，避免了平板计数过程中芽孢杆菌菌落计数值与实际菌落数不符的情况，进而提高了芽孢杆菌计数的准确度。
进一步地，所述乳化剂为水包油型乳化剂；优选地，所述水包油型乳化剂为吐温20或吐温60；通过对乳化剂类型及种类的具体限定，能够更好的促进芽孢杆菌在生理盐水中的分散，进一步提高芽孢杆菌的检测准确度。
进一步地，所述平板计数过程中，平板涂布量为90-110μL；平板培养温度为36-38℃，时间为14-16h；通过对平板涂布量、培养温度和时间的限定，能够保障单个芽孢杆菌菌落的形成，也能够避免多个菌落重叠而影响菌落计数。
进一步地，所述检测样品为芽孢杆菌发酵菌液或芽孢杆菌菌剂。
进一步地，所述芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌中至少一种。
本发明实施例具有如下优点：
(1)采用含有乳化剂的生理盐水对检测样品进行稀释，通过乳化剂能够改善不同状态芽孢杆菌在生理盐水中的表面张力，进而更好的促进不同状态芽孢杆菌在生理盐水中的分散，能够充分使得芽孢杆菌在生理盐水中均匀分布，进而提高了芽孢杆菌数量检测的准确度。
(2)通过选用易溶于水的水包油型乳化剂，能够更好地促进芽孢杆菌在生理盐水中的分散，而采用油包水型乳化剂易导致油包水型乳化剂和生理盐水进行分层，导致芽孢在生理盐水中分散不均，进而提高芽孢杆菌的检测准确度。
(3)通过对乳化剂含量的限定，既能防止由于乳化剂含量过低导致芽孢杆菌在生理盐水中分布不均匀又能防止由于乳化剂含量过高导致芽孢杆菌中未形成芽孢的菌体死亡，避免了平板计数过程中芽孢杆菌菌落计数值与实际菌落数不符的情况，进而提高了芽孢杆菌计数的准确度。
(4)通过对匀浆参数的具体限定，能够充分的促进芽孢杆菌在生理盐水中的均匀分散，并避免过高的匀浆转速对芽孢杆菌造成机械损伤，而影响平板计数中菌落的形成，进而提高芽孢杆菌计数的准确度。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例提供一种芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含有乳化剂的生理盐水对含有芽孢杆菌的检测样品进行稀释；
将稀释液涂布到平板上，经过培养得到芽孢杆菌菌落，根据芽孢杆菌菌落的统计结果计算所述检测样品中芽孢杆菌数量。
在一实施例中，对乳化剂的种类没有特别的限定，只要能够满足将芽孢均匀分散于生理盐水中即可，优选地，乳化剂为油包水型乳化剂或水包油型乳化剂；更优选地，乳化剂为水包油型乳化剂；更进一步优选地，水包油型乳化剂为吐温20或吐温60；水包油型乳化剂易溶于水，能够更好地促进芽孢杆菌在生理盐水中的分散，而油包水型乳化剂不能溶于水，易导致油包水型乳化剂和生理盐水进行分层，导致芽孢在生理盐水中分散不均。
在另一实施例中，对含有乳化剂的生理盐水中乳化剂的含量没有特别限定，优选地，含有乳化剂的生理盐水中乳化剂的体积含量为0.5-3％，具体可以是0.5％、1％、2％、3％；以上体积含量均在20℃下的数值。
在另一实施例中，检测样品可以为含有芽孢杆菌的任何样品，例如，通过芽孢杆菌发酵得到的发酵菌液或含有芽孢杆菌的菌剂。
下面将通过实施例来对本发明加以详述，但本发明并不限于这些实施例。
以下各实施例采用的原料及仪器如下：
枯草芽孢杆菌发酵菌液：菌株为ASAG-35；
地衣芽孢杆菌发酵菌液：菌株为ASAG-38；
生理盐水：浓度0.9％；北京试剂公司；
吐温20：购买于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；
吐温60：购买于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；
匀浆机：厂家IKA，型号T25。
实施例1
本实施例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含体积含量为3％的吐温60的生理盐水对枯草芽孢杆菌发酵菌液稀释107倍，对稀释的枯草芽孢杆菌发酵菌液进行平板涂布，涂布量为100μL，随后在36℃下培养16h，然后进行菌落计数；再根据菌落计数结果计算检测样品中芽孢杆菌数量。
上述菌落计数结果为208个，根据芽孢杆菌数量＝稀释倍数×菌落数×涂布量公式计算得到样品中芽孢杆菌数量为2.08×1010CFU/ml。
实施例2
本实施例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含有吐温60的生理盐水对枯草芽孢杆菌发酵菌液进行初步稀释10倍，得到稀释母液，其中含有吐温60的生理盐水中吐温60的体积含量为3％；
将稀释母液采用上述含有吐温60的生理盐水按10倍稀释倍数进行梯度稀释，得到不同稀释度的稀释液，再将不同稀释度的稀释液分别进行平板涂布，涂布量为100μL，随后在36℃下培养16h，然后进行菌落计数；
根据菌落计数结果计算枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量。
实施例3
本实施例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含有吐温60的生理盐水对枯草芽孢杆菌发酵菌液进行初步稀释10倍，得到稀释母液，其中含有吐温60的生理盐水中吐温60的体积含量为3％；
采用匀浆机以3000r/min的转速对稀释母液匀浆3min；
将匀浆处理后的稀释母液采用上述的含有吐温60的生理盐水按10倍稀释倍数进行梯度稀释，得到不同稀释度的稀释液，再将不同稀释度的稀释液分别进行平板涂布，涂布量为100μL，随后在36℃下培养16h，然后进行菌落计数；
根据菌落计数结果计算枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量。
实施例4
本实施例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含有吐温20的生理盐水对枯草芽孢杆菌发酵菌液进行初步稀释10倍，得到稀释母液，其中含有吐温20的生理盐水中吐温20的体积含量为0.5％；
采用匀浆机以8000r/min的转速对稀释母液匀浆1min；
将匀浆处理后的稀释母液采用上述的含有吐温20的生理盐水按10倍稀释倍数进行梯度稀释，得到不同稀释度的稀释液，再将不同稀释度的稀释液分别进行平板涂布，涂布量为100μL，随后在38℃下培养14h，然后进行菌落计数；
根据菌落计数结果计算枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量。
实施例5
本实施例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含有吐温20的生理盐水对枯草芽孢杆菌发酵菌液进行初步稀释10倍，得到稀释母液，其中含有吐温20的生理盐水中吐温20的体积含量为1％；
采用匀浆机以6000r/min的转速对稀释母液匀浆2min；
将匀浆处理后的稀释母液采用上述的含有吐温20的生理盐水按10倍稀释倍数进行梯度稀释，再将不同稀释度的稀释液分别进行平板涂布，涂布量为100μL，随后在37℃下培养15h，然后进行菌落计数；
根据菌落计数结果计算枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量。
实施例6
本实施例为一种地衣芽孢杆菌发酵菌液中地衣芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法包括：
采用含有吐温20的生理盐水对地衣芽孢杆菌发酵菌液进行初步稀释10倍，得到稀释母液，其中含有吐温20的生理盐水中吐温20的体积含量为2％；
采用匀浆机以6000r/min的转速对稀释母液匀浆2min；
将匀浆处理后的地衣芽孢杆菌发酵菌液采用上述的含有吐温20的生理盐水按10倍稀释倍数进行梯度稀释，得到不同稀释度的稀释液，再将不同稀释度的稀释液分别进行平板涂布，涂布量为100μL，随后在37℃下培养15h，然后进行菌落计数；
根据菌落计数结果计算地衣芽孢杆菌发酵菌液中地衣芽孢杆菌数量。
实施例7
本实施例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法与实施例5中的检测方法基本相同，区别仅在于生理盐水中的吐温20替换为司盘60，且生理盐水中司盘60的含量为1％。
对照例1
本对照例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法与实施例5中的检测方法基本相同，区别仅在于初步稀释和梯度稀释均采用生理盐水进行。
对照例2
本对照例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法与实施例5中的检测方法基本相同，区别仅在于生理盐水中的吐温20的体积含量为6％。
对照例3
本对照例为一种枯草芽孢杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量的检测方法，该检测方法与实施例5中的检测方法基本相同，区别仅在于将初步稀释后的枯草芽孢杆菌发酵菌液在匀浆机中以10000r/min处理2min。
实验例1
1、实验方法：
选取枯草芽孢杆菌发酵菌液平均分为8份，每份10ml；将8份枯草芽孢杆菌发酵菌液分别按照实施例2-5、实施例7以及对照例1-4中的检测方法进行检测，其中，各实施例和对照例中梯度稀释度分别为106、107、108、109、1010；每个实施例和对照例均做两组平行实验。
2、实验结果：
上述不同实施例和对照例的计数结果如表1所示：
表1不同检测方法、不同稀释度菌落计数结果
Figure BDA0002294021460000091
3、实验分析
(1)由表1中实施例2-5计数结果可知，实施例2-5各稀释梯度菌落个数均呈梯度关系，其中，实施例3的检测结果中，稀释107倍菌落个数为234、251个，稀释108倍菌落个数为24、23个，稀释109倍的菌落个数为2、2个，因此，本发明实施例的检测方法具有较高的检测准确度，按照国标GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》上的记载说明计算各实施例2-5中检测得到的枯草杆菌发酵菌液中枯草芽孢杆菌数量，其中，实施例5的总数计算方法如下：[(234×107+251×107)/2]×10＝2.4×1010，表1中其他实施例的计算方法参照实施例5的计算方案；然而由表1中实施例7的实验数据可知，在稀释106和稀释107时显然不呈比例稀释，可见采用司盘60乳化液并不能充分的使得芽孢杆菌均匀分布，影响计数结果准确度。
(2)由表1中对照例1-3的计数结果可知，对照例1各稀释梯度菌落个数均不呈梯度关系，且三个不同稀释度的菌落数均在30-300CFU范围之内，具体为稀释107倍菌落个为289、276个，108倍菌落个数为114、101个，109倍的菌落个数为33、34个，1010倍的菌落个数为15、14个；由此可见，无法按照国标GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》上的方法进行计数；然而，对照例2中虽然菌落数呈梯度稀释，但由于吐温20含量过高，导致未形成芽孢的芽孢菌体死亡，导致活菌数减少，最终导致计数准确度较低；对照例3中活菌数量同样显著降低，研究表明，通过过高转速进行匀浆，同样使得部分芽孢杆菌的机械损伤，最终影响菌落计数，导致计数不准确。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种芽孢杆菌数量的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：
采用含有乳化剂的生理盐水对含有芽孢杆菌的检测样品进行稀释；
将稀释液涂布到平板上，经过培养得到芽孢杆菌菌落，根据芽孢杆菌菌落的统计结果计算所述检测样品中芽孢杆菌数量。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述乳化剂为水包油型乳化剂。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述水包油型乳化剂为吐温20或吐温60。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述含有乳化剂的生理盐水中乳化剂的体积含量为0.5-3％。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述稀释具体包括：
采用含有乳化剂的生理盐水对检测样品进行初步稀释，得到稀释母液；
采用所述含有乳化剂的生理盐水对所述稀释母液进行梯度稀释，得到不同稀释度的稀释液。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述梯度稀释之前，对所述稀释母液进行匀浆处理。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述匀浆处理具体为采用匀浆机以3000-8000r/min的转速对所述稀释母液匀浆1-3min。
8.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述初步稀释的稀释倍数为8-12倍。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测样品为芽孢杆菌发酵菌液或芽孢杆菌菌剂。
10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌中至少一种。
CN201911192921.1A 2019-11-28 2019-11-28 一种芽孢杆菌数量的检测方法 Pending CN110964775A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911192921.1A CN110964775A (zh) 2019-11-28 2019-11-28 一种芽孢杆菌数量的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911192921.1A CN110964775A (zh) 2019-11-28 2019-11-28 一种芽孢杆菌数量的检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110964775A true CN110964775A (zh) 2020-04-07

Family

ID=70032263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911192921.1A Pending CN110964775A (zh) 2019-11-28 2019-11-28 一种芽孢杆菌数量的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110964775A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111850087A (zh) * 2020-07-07 2020-10-30 武汉微康益生菌研究院有限公司 一种凝结芽孢杆菌菌粉芽孢的检测方法
CN113234791A (zh) * 2021-06-25 2021-08-10 长沙和光生物科技有限公司 一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101586144A (zh) * 2009-07-03 2009-11-25 武汉科诺生物科技股份有限公司 5千亿活芽胞/克枯草芽胞杆菌原粉活芽胞数的检测方法
CN104152376A (zh) * 2014-07-30 2014-11-19 湖南豫园生物科技有限公司 芽孢保护剂、应用及微生物肥料中产芽孢菌含量的检测方法
CN105200116A (zh) * 2015-09-25 2015-12-30 武汉科诺生物科技股份有限公司 一种快速测定复合微生物菌剂中多粘类芽孢杆菌含量的方法
CN108034607A (zh) * 2017-12-27 2018-05-15 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 凝结芽孢杆菌的检测方法及培养基
CN110106227A (zh) * 2019-04-28 2019-08-09 中储粮油脂工业东莞有限公司 一种检测食用油中菌落总数的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101586144A (zh) * 2009-07-03 2009-11-25 武汉科诺生物科技股份有限公司 5千亿活芽胞/克枯草芽胞杆菌原粉活芽胞数的检测方法
CN104152376A (zh) * 2014-07-30 2014-11-19 湖南豫园生物科技有限公司 芽孢保护剂、应用及微生物肥料中产芽孢菌含量的检测方法
CN105200116A (zh) * 2015-09-25 2015-12-30 武汉科诺生物科技股份有限公司 一种快速测定复合微生物菌剂中多粘类芽孢杆菌含量的方法
CN108034607A (zh) * 2017-12-27 2018-05-15 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 凝结芽孢杆菌的检测方法及培养基
CN110106227A (zh) * 2019-04-28 2019-08-09 中储粮油脂工业东莞有限公司 一种检测食用油中菌落总数的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吉鹤立: "《中国食品添加剂及配料使用手册》", 30 June 2016, 中国质检出版社 *
崔学文等: "自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂D值测定的影响因素", 《中国消毒学杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111850087A (zh) * 2020-07-07 2020-10-30 武汉微康益生菌研究院有限公司 一种凝结芽孢杆菌菌粉芽孢的检测方法
CN113234791A (zh) * 2021-06-25 2021-08-10 长沙和光生物科技有限公司 一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109105752B (zh) 一种豆瓣甜瓣子分阶段快速发酵的方法
CN103205376B (zh) 一株适用于发酵饲料的植物乳杆菌及其应用
CN110964775A (zh) 一种芽孢杆菌数量的检测方法
CN103642891A (zh) 一种化妆品微生物的检测方法
CN105483204A (zh) 一种用于快速检测霉菌和酵母菌的检测皿及制备方法
CN105039202B (zh) 一种沙门氏菌、单增李斯特菌和副溶血弧菌复合增菌的选择性培养基及其制备方法
CN101525583B (zh) 枯草芽孢杆菌dcy-1及在生物发酵中的应用
Pei et al. Isolation and identification of fungi found in contaminated fermented milk and antifungal activity of vanillin
Zhang et al. Effects of Lactobacillus plantarum on the fermentation profile and microbiological composition of wheat fermented silage under the freezing and thawing low temperatures
Davies et al. Efficient improvement of silage additives by using genetic algorithms
CN104342372B (zh) 一种利用益生菌发酵生产酵母水解物的方法
CN116855414B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌及其在发酵豆制品中的应用
Gamba et al. Application of whey permeate fermented with kefir grains for the shelf-life improvement of food and feed
CN110718266B (zh) 一种用于评估乳酸菌发酵食品安全性的预测模型的建立及应用方法
Bouatenin et al. The contribution of microorganisms to the fermentation of cassava dough during attiéké processing in Cote d’Ivoire
CN101586144B (zh) 5千亿活芽胞/克枯草芽胞杆菌原粉活芽胞数的检测方法
CN114717150B (zh) 一种植物乳杆菌crs33及其应用
Barrette et al. Development of bacterial contamination during production of yeast extracts
Schaertel et al. Impedimetric detection of yeast and mold
Wu et al. Brettanomyces as a starter culture in rice-steamed sponge cake: A traditional fermented food in China
CN109161501B (zh) 一种饲用地衣芽孢杆菌及其应用
Suo et al. Changes in microbial community during the factory production of sweet dumplings from glutinous rice determined by high-throughput sequencing analysis
CN104745671A (zh) 一种抗乳酸发酵菌干扰的大肠杆菌含量测定方法
Usukura Comparison of different temperature conditions for microbial enumeration of Aspergillus brasiliensis in the preservative efficacy test
CN115466697B (zh) 一株罗伊氏乳杆菌hlre05及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200407

RJ01 Rejection of invention patent application after publication