CN110960467A - 一种无菌面膜及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种无菌面膜，包括面膜基材和营养液，面膜基材为石墨烯‑生物纤维素‑寡肽‑胡椒素基材，营养液由以下质量百分含量的原料组成：低分子透明质酸钠0.01‑5％、透明质酸钠0.01‑5％、甘油1‑10％、增稠剂0.5‑20％、促渗透吸收剂0.1‑5％、辣蓼提取物0.1‑10％、余量为中性电位水，上述组分的用量之和为100％。采用石墨烯‑生物纤维素‑寡肽‑胡椒素基材作为面膜基材，该基材具备吸收性好、促渗透强，且贴服性好优势。本发明的无菌面膜通过中性电位水与辣蓼提取物的配合，有效降低产品灭菌前初始污染菌数量，降低辐照剂量。本发明还公开了无菌面膜的制备方法，将中性电位水分批次加入，从而使得较低辐照剂量即可杀灭产品中的微生物，降低产品辐照过程中原料的降解，保证产品无菌。

Description

一种无菌面膜及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种面膜，尤其涉及一种无菌面膜及其制备方法。
背景技术
目前，高端面膜制备中存在两大问题，即防腐剂的较大刺激性和织布式面膜较小渗透皮肤能力。在面膜产品中，由于面膜中水含量非常多，容易受微生物污染，所以对灭菌和防腐能力有较高的要求。现有的面膜通常添加防腐剂，防腐剂可以保护面膜产品免受微生物污染、变质，以延长产品的货架寿命。但对于护肤本身而言是无用成分，甚至可能会增加肌肤的刺激性和致过敏性等。为确保产品的安全性，防止消费者因使用受微生物污染的产品而引起可能的感染，如果防腐剂添加的量不够，则可能出现微生物适应周围的生长环境，产生抗药性，从而导致防腐失效。而且一般来说，大多数防腐剂或对抗细菌有效或对抗真菌有效，不能同时对两者有效，目前市面上为复配防腐剂较多。织布式面膜透气性差，在皮肤表面的渗透能力较弱，影响皮肤对面膜中有效成分的吸收。
专利CN 109077940 A一种电解水制备的美容面膜及其制备方法中利用电位水替代防腐剂，制备了一款非美容面膜。但是该专利制备方法存在以下缺点：1、其制备过程中需要用到电位水来乳化、搅拌，但是已有研究表明，酸性电位水在时间延长、震荡和搅拌过程中都会是pH上升，ORP值下降和有效氯的损失，或当接触空气、光线、有机物或利用蒸馏水和去离子水稀释，温度加热到50℃以上时，就变成普通用水，从而影响其抑菌效果。即电位水的抑菌效果持久性与整个面膜体系的制备过程息息相关，而该体系制备过程中的搅拌、乳化等均会影响电位水抑菌效果，单独使用电位水作为防腐剂，需要整个体系中添加的电位水浓度达到制备后及存储时效内要求，电位水中发挥抑菌效用的主要为次氯酸，电位水浓度越高，有效氯浓度越高，整个体系的味道也越大，在面膜的使用过程中顾客的使用体感也会越差。此外，用电位水单独作为防腐剂，需要管控面膜的储存温度，因为温度对电位水的防腐效果影响较大，而防腐效果则决定了产品的效期，此管控环节也会耗损成本。因此单独用电位水作为防腐剂存在以上弊端。
随着科技的进步，水光果酸换肤等医学美容被越来越多的人诉求。而美容术后的肌肤由于皮肤屏障受损，非常敏感脆弱。因此开发中一种不含防腐剂，安全、无刺激，适用于皮肤屏障受损、易被吸收的无菌面膜具有极其重要的意义。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种无菌面膜，具有渗透性好，营养成分吸收利用率高的特点。
本发明的目的之二在于提供一种无菌面膜的制备方法。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种无菌面膜，包括面膜基材和营养液，所述面膜基材为石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材，所述营养液由以下质量百分含量的原料组成：低分子透明质酸钠0.01-5％、透明质酸钠0.01-5％、甘油1-10％、增稠剂0.5-20％、促渗透吸收剂0.1-5％、辣蓼提取物0.1-10％、余量为中性电位水，上述组分的用量之和为100％。
进一步地，所述增稠剂为羧甲纤维素钠、卡波姆、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶中的至少一种。
进一步地，所述促渗透吸收剂为丙二醇、氮酮、丹参酮、聚乙烯吡咯烷酮、薄荷、丁香中的至少一种。
进一步地，所述低分子量透明质酸钠的分子量为20-40万，透明质酸钠的分子量为100-150万。
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
所述无菌面膜的制备方法，包括以下步骤：取一半用量的中性电位水加入透明质酸钠、低分子透明质酸钠、甘油、增稠剂、促渗透吸收剂、辣蓼提取物，搅拌溶解均匀后，加入至剩余中性电位水中，然后将面膜营养液灌装至装有石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的面膜包装袋内，辐照灭菌，即为成品。
进一步地，所述石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的制备过程如下：
(1)在含有菌种的培养基中加入寡肽和胡椒素，将接种后的培养基均匀倒入灭菌后的面膜模具中，硅胶膜封口，静态培养得到寡肽-胡椒素-生物纤维素基材，将得到的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材洗去残余培养基和细胞残骸，多次洗涤后得到白色透明状膜片即为寡肽-胡椒素-生物纤维素底膜；
(2)取石墨烯含量为0.5-2.0mg/ml石墨烯分散液超声后，和未接种的培养基配置成浓度范围0.024-0.67mg/ml的不同浓度石墨烯的混合培养基，超声后备用；
(3)以喷雾状将上述步骤(2)中的含有石墨烯的混合培养基喷洒在上述步骤(1)的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材底膜上，单位基底膜面积上喷洒混合培养基的体积为0.01-0.02ml/cm2，喷洒次数为6-50次，按照石墨烯的浓度由低到高的顺序喷洒，每次喷洒后待底膜表面的混合培养基消耗完毕后再进行下次的喷洒，最终形成厚度为1～15mm的石墨烯-寡肽-胡椒素-生物纤维素面膜基材。
进一步地，所述菌种为活化葡糖醋杆菌菌株1.1812。
进一步地，上述步骤(1)中在静态培养过程为：30℃恒温静置培养5天。
进一步地，上述步骤(1)中寡肽和胡椒素在培养基中的质量/体积的百分含量分别为0.2-0.5％和0.5-1％。
进一步地，上述步骤(1)和步骤(2)中采用的培养基为上述步骤(1)和步骤(2)中的培养基由以下质量/体积比的原料组成：葡萄糖5％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，柠檬酸0.1％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸二氢钾0.1％，余量为水。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1、本发明的无菌面膜通过中性电位水与辣蓼提取物的配合，有效降低产品灭菌前初始污染菌数量，延长灭菌前制备及运输周期，降低辐照剂量，从而节约成本。
2、在制备过程中预先使用一半中性电位水，杀灭制备过程中携带的微生物，等溶解均匀后加入剩下一半中性电位水，保证整个制备过程中有效抑菌成分浓度，同时利用剩下一半中性电位水的抑菌能力抑制送灭菌过程中的微生物，从而使得较低辐照剂量即可杀灭产品中的微生物，降低产品辐照过程中部分原料降解，保证产品无菌。
3、通过中性电位水与辐照协同配合，制备无菌面膜，既克服了传统防腐剂在辐照过程中变味、防腐效果下降等缺陷，还增加了产品安全性，产品的细胞毒为二级，无皮肤刺激，通过辐照灭菌一方面保证产品无菌保证水平，另一方面，通过辐照，有效还原中性电位水中氯，消除产品中的味道，提升消费者使用愉悦感。
4、通过添加中性电位水，增加了产品的水分渗透性，提高了营养物质的吸收度。因为中性电解水是纳米小分子水，渗透皮肤能力强并有有收敛性，有助于有效成分的吸收及水分的吸收。虽然辐照过程中有效氯被还原，但不影响电位水分子粒径，因此相较于纯化水，本产品的水分及营养物质渗透性更好。
5、采用石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材作为面膜基材，该基材具备吸收性好、促渗透强，且贴服性好优势。石墨烯具有吸收储存远红外线和释放远红外的功能，可在20-35℃的低温状态下，对6-14微米波长远红光吸收率达88％以上，有助于提高皮肤表面温度，使毛细血管扩张，改善身体的微循环，能打开肌肤毛孔，促使面膜中的营养成分渗入肌肤，增强肌肤对营养液的吸收。
同时胡椒素能改善和促进皮肤对营养素的吸收和利用，提高营养素的生物利用度，从而促进营养液中的营养成分及面膜基材中寡肽的吸收。其原理为：通过干扰皮肤角质层的细胞间脂质，增加脂质双层的流动性，这种增强的流动性可促进活性物分子扩散通过脂质双层的碳氢化合物部位。石墨烯与胡椒素的配合使用，有效提高了皮肤对本产品中有效成分的吸收与利用率。
通过添加生物纤维素，在剥离面膜时把皮肤的分泌物、皮屑、污物等吸出，使毛孔清洁，面膜中的营养液有效渗入皮肤里，起到增进皮肤机能的作用。生物纤维素发酵过程中添加寡肽，先制备成生物纤维素-寡肽-胡椒素底膜，一方面寡肽存在于基材中，协同增加面膜基材的吸水及保湿性，另一方面生物纤维素中寡肽和胡椒素嵌入到生物纤维素网络中，经后处理后，部分生物纤维素被洗掉，导致纤维三维网络的间隙变大；而由于“器壁效应”，寡肽大部分集中在生物纤维素膜更接近培养液的部分，产生“上致密，下疏松”的结构，这种结构更贴近于人体皮肤结构，有助于营养成分的吸收，更加柔软，富有弹性，使面膜的使用体验更好。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
下述实施例所用的培养基的由以下质量/体积比的原料组成：葡萄糖5％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，柠檬酸0.1％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸二氢钾0.1％，余量为水。
实施例1
一种无菌面膜，包括面膜基材和营养液，面膜基材为石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材，营养液包括以下质量百分含量的原料：分子量为20-40万低分子透明质酸钠2％、分子量为100-150万透明质酸钠3％、甘油5％、羧甲纤维素钠10％、丙二醇3％、辣蓼提取物1％、中性电位水76％。
上述无菌面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材
A：在含有活化葡糖醋杆菌菌株1.1812菌种的培养基中加入0.2％的寡肽(质量/体积比)和1％胡椒素(质量/体积比)，将接种后的培养基均匀倒入灭菌后的面膜模具中，硅胶膜封口，30℃恒温静置培养5天，静态培养得到寡肽-胡椒素-生物纤维素基材，将得到的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材洗去残余培养基和细胞残骸，多次洗涤后得到白色透明状膜片即为寡肽-胡椒素-生物纤维素底膜；
B：取石墨烯含量为0.5-1.0mg/ml石墨烯分散液超声15min，和未接种的培养基配置成浓度范围0.024-0.35mg/ml的不同浓度石墨烯的混合培养基，超声15min备用；
C：以喷雾状将上述步骤(2)中的含有石墨烯的混合培养基喷洒在上述步骤(1)的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材底膜上，单位基底膜面积上喷洒混合培养基的体积为0.01ml/cm2，喷洒次数为6次，按照石墨烯的浓度由低到高的顺序喷洒，每次喷洒后待底膜表面的混合培养基消耗完毕后再进行下次的喷洒，最终形成厚度为1mm的石墨烯-寡肽-胡椒素-生物纤维素面膜基材。
(2)取一半用量的中性电位水加入透明质酸钠、低分子透明质酸钠、甘油、增稠剂、促渗透吸收剂、辣蓼提取物，搅拌溶解均匀后，加入至剩余中性电位水中，然后将面膜营养液灌装至装有石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的面膜包装袋内，辐照灭菌，即为成品。
实施例2
一种无菌面膜，包括面膜基材和营养液，面膜基材为石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材，营养液包括以下质量百分含量的原料：分子量为20-40万低分子透明质酸钠0.01％、分子量为100-150万透明质酸钠0.09％、甘油4％、卡波姆和聚乙烯醇的混合物0.5％、氮酮和丹参酮的混合物0.1％、辣蓼提取物0.3％、中性电位水95％。
上述无菌面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材
A：在含有活化葡糖醋杆菌菌株1.1812菌种的培养基中加入0.3％的寡肽(质量/体积比)和0.5％胡椒素(质量/体积比)，将接种后的培养基均匀倒入灭菌后的面膜模具中，硅胶膜封口，30℃恒温静置培养5天，静态培养得到寡肽-胡椒素-生物纤维素基材，将得到的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材洗去残余培养基和细胞残骸，多次洗涤后得到白色透明状膜片即为寡肽-胡椒素-生物纤维素底膜；
B：取石墨烯含量为0.5-2.0mg/ml石墨烯分散液超声20min，和未接种的培养基配置成浓度范围0.024-0.67mg/ml的若干不同浓度石墨烯的混合培养基，超声20min备用；
C：以喷雾状将上述步骤(2)中的含有石墨烯的混合培养基喷洒在上述步骤(1)的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材底膜上，单位基底膜面积上喷洒混合培养基的体积为0.015ml/cm2，喷洒次数为50次，按照石墨烯的浓度由低到高的顺序喷洒，每次喷洒后待底膜表面的混合培养基消耗完毕后再进行下次的喷洒，最终形成厚度为15mm的石墨烯-寡肽-胡椒素-生物纤维素面膜基材。
(2)取一半用量的中性电位水加入透明质酸钠、低分子透明质酸钠、甘油、增稠剂、促渗透吸收剂、辣蓼提取物，搅拌溶解均匀后，加入至剩余中性电位水中，然后将面膜营养液灌装至装有石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的面膜包装袋内，辐照灭菌，即为成品。
实施例3
一种无菌面膜，包括面膜基材和营养液，面膜基材为石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材，营养液包括以下质量百分含量的原料：分子量为20-40万低分子透明质酸钠5％、分子量为100-150万透明质酸钠5％、甘油10％、聚乙烯吡咯烷酮20％、聚乙烯吡咯烷酮5％、辣蓼提取物10％、中性电位水45％。
上述无菌面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材
A：在含有活化葡糖醋杆菌菌株1.1812菌种的培养基中加入0.5％的寡肽(质量/体积比)和1％胡椒素(质量/体积比)，将接种后的培养基均匀倒入灭菌后的面膜模具中，硅胶膜封口，30℃恒温静置培养5天，静态培养得到寡肽-胡椒素-生物纤维素基材，将得到的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材洗去残余培养基和细胞残骸，多次洗涤后得到白色透明状膜片即为寡肽-胡椒素-生物纤维素底膜；
B：取石墨烯含量为1.0-2.0mg/ml石墨烯分散液超声20min，和未接种的培养基配置成浓度范围0.048-0.67mg/ml的若干不同浓度石墨烯的混合培养基，超声20min备用；
C：以喷雾状将上述步骤(2)中的含有石墨烯的混合培养基喷洒在上述步骤(1)的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材底膜上，单位基底膜面积上喷洒混合培养基的体积为0.02ml/cm2，喷洒次数为30次，按照石墨烯的浓度由低到高的顺序喷洒，每次喷洒后待底膜表面的混合培养基消耗完毕后再进行下次的喷洒，最终形成厚度为10mm的石墨烯-寡肽-胡椒素-生物纤维素面膜基材。
(2)取一半用量的中性电位水加入透明质酸钠、低分子透明质酸钠、甘油、增稠剂、促渗透吸收剂、辣蓼提取物，搅拌溶解均匀后，加入至剩余中性电位水中，然后将面膜营养液灌装至装有石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的面膜包装袋内，辐照灭菌，即为成品。
对比例1
对比例1提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：将中性电位水替换为酸性电位水，其余均和实施例1相同。
对比例2
对比例2提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：省去辣蓼提取物，其余均和实施例1相同。
对比例3
对比例3提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：在步骤(2)中取全部的中性电位水加入其它原料混合，其余均和实施例1相同。
对比例4
对比例4提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：面膜基材为石墨烯-生物纤维素-寡肽基材，省去胡椒素，其余均和实施例1相同。
对比例5
对比例5提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：面膜基材为生物纤维素-寡肽-胡椒素基材，省去石墨烯，其余均和实施例1相同。
对比例6
对比例6提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：面膜基材为生物纤维素-寡肽基材，省去石墨烯和胡椒素，其余均和实施例1相同。
对比例7
对比例7提供一种无菌面膜，和实施例1的区别为：面膜基材为石墨烯-生物纤维素-胡椒素基材，省去寡肽，其余均和实施例1相同。
分别检测3d和5d时实施例1和对比例1至3的初始污染菌数量和辐照剂量。初始污染菌检测方法：依据GB/T19973.1-2015医疗器械的灭菌-微生物方法-第1部分：产品上微生物总数的测定。辐照剂量选定参考依据：GB18280.2-2015医疗保健产品灭菌辐射第2部分，结果如表1所示。
表1(可以)
Figure BDA0002345238740000101
Figure BDA0002345238740000111
由表1可以看出，对比例1至3的初始污染菌量和辐照保证无菌剂量高于实施例1，说明将中性电位水替换为酸性电位水，或者省去辣蓼提取物，以及将中性电位水一次性加入均会影响初始污染菌量，当初始污染菌量较高时，需要的辐照保证无菌剂量较高，辐照剂量提高后会影响产品的品质，如会引起透明质酸和增稠剂严重降解，产品易出现析出物，面膜营养液状态变得稀，影响使用，本申请的无菌面膜通过添加中性电位水和辣蓼提取物相结合，有效降低产品灭菌前初始污染菌数量，延长灭菌前制备及运输周期，降低辐照剂量，保证产品的品质。在制备过程中预先使用一半中性电位水，杀灭制备过程中携带的微生物，等溶解均匀后加入剩下一半中性电位水，保证整个制备过程中有效抑菌成分浓度，同时利用剩下一半中性电位水的抑菌能力抑制送灭菌过程中的微生物，从而使得较低辐照剂量即可杀灭产品中的微生物，降低产品辐照过程中部分原料降解，保证产品无菌。
皮肤表层中的水分含量基本能够反映产品的保湿效果，水分含量越高，保湿效果越好。随机选取100名志愿者，分为五组，每组20人，分别在志愿者的左前臂选出2.5×2.5cm正方形作为实验区域，将实施例1和对比例4至7的面膜贴在相应的实验区域，20min后采用Corneometer CM825测试仪检测每个实验者的实验区域的水分含量，每个实验者重复测试5次取平均值，同一样品取20名志愿者的平均值，结果如表2所示。
表2
Figure BDA0002345238740000121
由表2可以看出使用实施例1的产品后皮肤中的水分含量高于对比例4至7，对比例4至7中分别省去石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素面膜基材中的一种或多种组分后，保湿效果变差，如对比例4中省去胡椒素，对比例5中省去石墨烯，对比例6中同时省去上述两种成分，保湿效果变差，这是因为石墨烯有助于提高皮肤表面温度，使毛细血管扩张，改善身体的微循环，能打开肌肤毛孔，促使面膜中的营养成分渗入肌肤，增强肌肤对营养液的吸收，同事胡椒素通过干扰皮肤角质层的细胞间脂质，增加脂质双层的流动性，这种增强的流动性可促进活性物分子扩散通过脂质双层的碳氢化合物部位。石墨烯与胡椒素的配合使用，有效提高了皮肤对本产品中有效成分的吸收与利用率。
对比例7中省去寡肽，保湿性能也不及实施例1，这是因为一方面寡肽存在于基材中，协同增加面膜基材的吸水及保湿性，另一方面生物纤维素中寡肽和胡椒素嵌入到生物纤维素网络中，经后处理后，部分生物纤维素被洗掉，导致纤维三维网络的间隙变大；而由于“器壁效应”，寡肽大部分集中在生物纤维素膜更接近培养液的部分，产生“上致密，下疏松”的结构，这种结构更贴近于人体皮肤结构，有助于营养成分的吸收，更加柔软，富有弹性，使面膜的使用体验也更好。寡肽可抑制透明质酸钠酶活性，从而降低自身透明质酸钠及营养液中透明质酸钠的降解，增加皮肤对透明质酸钠的吸收利用度。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种无菌面膜，包括面膜基材和营养液，其特征在于，所述面膜基材为石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材，所述营养液由以下质量百分含量的原料组成：低分子透明质酸钠0.01-5％、透明质酸钠0.01-5％、甘油1-10％、增稠剂0.5-20％、促渗透吸收剂0.1-5％、辣蓼提取物0.1-10％、余量为中性电位水，上述组分的用量之和为100％。
2.根据权利要求1所述无菌面膜，其特征在于，所述增稠剂为羧甲纤维素钠、卡波姆、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶中的至少一种。
3.根据权利要求1所述无菌面膜，其特征在于，所述促渗透吸收剂为丙二醇、氮酮、丹参酮、聚乙烯吡咯烷酮、薄荷、丁香中的至少一种。
4.根据权利要求1所述无菌面膜，其特征在于，所述低分子量透明质酸钠的分子量为20万-40万，透明质酸钠的分子量为100-150万。
5.如权利要求1所述无菌面膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取一半用量的中性电位水加入透明质酸钠、低分子透明质酸钠、甘油、增稠剂、促渗透吸收剂、辣蓼提取物，搅拌溶解均匀后，加入至剩余中性电位水中，然后将面膜营养液灌装至装有石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的面膜包装袋内，辐照灭菌，即为成品。
6.根据权利要求5所述无菌面膜的制备方法，其特征在于，所述石墨烯-生物纤维素-寡肽-胡椒素基材的制备过程如下：
(1)在含有菌种的培养基中加入寡肽和胡椒素，将接种后的培养基均匀倒入灭菌后的面膜模具中，硅胶膜封口，静态培养得到寡肽-胡椒素-生物纤维素基材，将得到的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材洗去残余培养基和细胞残骸，多次洗涤后得到白色透明状膜片即为寡肽-胡椒素-生物纤维素底膜；
(2)取石墨烯含量为0.5-2.0mg/ml石墨烯分散液超声后，和未接种的培养基配置成浓度范围0.024-0.67mg/ml的不同浓度石墨烯的混合培养基，超声后备用；
(3)以喷雾状将上述步骤(2)中的含有石墨烯的混合培养基喷洒在上述步骤(1)的寡肽-胡椒素-生物纤维素基材底膜上，单位基底膜面积上喷洒混合培养基的体积为0.01-0.02ml/cm2，喷洒次数为6-50次，按照石墨烯的浓度由低到高的顺序喷洒，每次喷洒后待底膜表面的混合培养基消耗完毕后再进行下次的喷洒，最终形成厚度为1～15mm的石墨烯-寡肽-胡椒素-生物纤维素面膜基材。
7.根据权利要求6所述无菌面膜的制备方法，其特征在于，所述菌种为活化葡糖醋杆菌菌株1.1812。
8.根据权利要求6所述无菌面膜的制备方法，其特征在于，上述步骤(1)中在静态培养过程为：30℃恒温静置培养5天。
9.根据权利要求6所述无菌面膜的制备方法，其特征在于，上述步骤(1)中寡肽和胡椒素在培养基中的质量/体积的百分含量分别为0.2-0.5％和0.5-1％。
10.根据权利要求6所述无菌面膜的制备方法，其特征在于，上述步骤(1)和步骤(2)中的培养基由以下质量/体积比的原料组成：葡萄糖5％，蛋白胨0.5％，酵母膏0.5％，柠檬酸0.1％，磷酸氢二钠0.2％，磷酸二氢钾0.1％，余量为水。
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