CN110938131B - 一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用 - Google Patents

一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110938131B
CN110938131B CN201911086928.5A CN201911086928A CN110938131B CN 110938131 B CN110938131 B CN 110938131B CN 201911086928 A CN201911086928 A CN 201911086928A CN 110938131 B CN110938131 B CN 110938131B
Authority
CN
China
Prior art keywords
asp
rdldapddvdff
glu
arg
pro
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201911086928.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110938131A (zh
Inventor
张少辉
占文静
李金涛
张伯宇
范梦珠
李明逸
郭婷婷
栾媛媛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Huitai Life Health Technology Co ltd
Shanghai Jiaotong University
Original Assignee
Zhejiang Huitai Life Health Technology Co ltd
Shanghai Jiaotong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Huitai Life Health Technology Co ltd, Shanghai Jiaotong University filed Critical Zhejiang Huitai Life Health Technology Co ltd
Priority to CN201911086928.5A priority Critical patent/CN110938131B/zh
Publication of CN110938131A publication Critical patent/CN110938131A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110938131B publication Critical patent/CN110938131B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及蛋白领域，具体涉及一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF及其制备方法和应用，生物活性多肽RDLDAPDDVDFF其氨基酸序列为Arg‑Asp‑Leu‑Asp‑Ala‑Pro‑Asp‑Asp‑Val‑Asp‑Phe‑Phe。经过体外抗炎活性实验、体内抗衰老实验，验证了多肽RDLDAPDDVDFF具有较好的抗炎功能和抗衰老活性，一方面，本发明的生物活性多肽RDLDAPDDVDFF能够促进巨噬细胞一氧化氮诱生量的增加，提高机体抵御外界病原体感染的能力，降低机体发病率；另一方面，有较好的抗衰老活性，能够提高线虫繁殖能力，提高生命的质量，对开发具有抗炎功能、抗衰老功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。

Description

一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及蛋白领域，尤其是涉及一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF及其制备方法和应用。
背景技术
随着生活水平的提高，人们对饮食的要求从“追求量”转变为对“质”的追求。因此对具有特殊功能的生物活性肽的研究成为热点。近些年来，人们发现一些食物来源的多肽类物质具有良好的生物活性，如玉米短肽、大豆肽、牛乳多肽等。而且实验验证可能具有抗衰老、抗菌、抗癌、抗炎、降血压等功能。
这些多肽可以通过微生物发酵、消化酶解等多种途径得到，并且大多具有生物活性的多肽是由864~875个氨基酸残基组成，分子量小于6000Da，含有一定量的疏水氨基酸、芳香族氨基酸。
目前，现有技术中有一些关于抗衰老生物活性肽的研究，但是具有抗氧化或抗衰老功能的不同于现有多肽的新的生物活性多肽仍然是目前需要进一步研究的方向，以进一步扩大生物活性多肽的多样性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF及其制备方法和应用。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
本发明第一方面，提供一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF，其氨基酸序列为Arg-Asp-Leu-Asp-Ala-Pro-Asp-Asp-Val-Asp-Phe-Phe，如SEQ ID NO：1所示。
较优的，所述生物活性多肽为小鼠骨髓来源巨噬细胞肽。具体来源于Serrate RNAeffector molecule homolog蛋白，并且为Serrate RNA effector molecule homolog蛋白第864~875位的氨基酸残基。Serrate RNA effector molecule homolog蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
Serrate RNA effector molecule homolog蛋白的氨基酸序列以及对应的核苷酸序列为既有技术，编码Serrate RNA effector molecule homolog蛋白第864~875位氨基酸残基的核苷酸片段能编码成熟的生物活性多肽RDLDAPDDVDFF。
较优的，所述生物活性多肽具有抗炎和抗衰老功能。
本发明第二方面，提供了所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的制备方法，可以通过基因工程的方法人工合成，可以从细胞中通过分离纯化的方法直接获得，可以直接通过化学合成制备。
本发明第三方面，提供了所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF在制备具有抗炎功能的食品、保健品、药物或化妆品中的应用。
本发明第四方面，提供了所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF在制备具有抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。
本发明第五方面，提供了所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF在制备同时具有抗炎和抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。
具体而言，本发明的生物活性多肽RDLDAPDDVDFF可以用于制备减少自由基对皮肤伤害的化妆品、制备具有抗炎和/或抗衰老的药物。
本发明第六方面，提供了一种抗炎产品，包括所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF或所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的衍生物；所述的抗炎产品包括抗炎食品、抗炎保健品、抗炎药物或抗炎化妆品；所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的衍生物，是指在生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。
本发明第七方面，提供了一种抗衰老产品，包括所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF或所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的衍生物；所述的抗衰老产品包括抗衰老食品、抗衰老保健品或抗衰老药物；所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的衍生物，是指在生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。
本发明第八方面，提供了一种同时具有抗炎功能和抗衰老功能的产品，包括所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF或所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的衍生物；具有抗炎功能和抗衰老功能的产品包括食品、保健品或药物；所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的衍生物，是指在生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。
本发明生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的有益效果为：本发明的小鼠骨髓来源巨噬细胞生物活性多肽RDLDAPDDVDFF具有较好的抗炎活性和抗衰老活性；一方面，本发明的生物活性多肽RDLDAPDDVDFF能够促进巨噬细胞一氧化氮诱生量的增加，提高机体抵御外界病原体感染的能力，降低机体发病率；另一方面，有较好的抗衰老活性，能够提高线虫繁殖能力，提高生命的质量，对开发具有抗炎功能、抗衰老功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。
附图说明
图1：质量色谱提取图（m/z=712.8195）；
图2：质荷比为712.8195的片段的二级质谱图；
图3：质荷比为712.8195的多肽az、by断裂情况；
图4：生物活性多肽RDLDAPDDVDFF对秀丽线虫生殖能力影响的实验结果。
具体实施方式
在进一步描述本发明具体实施方案之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规的分子生物学、生物化学、染色质结构和分析、分析化学、细胞培养、重组DNA技术及相关领域的常规技术。这些技术在现有文献中已有完善说明，具体可参见Sambrook等MOLECULAR CLONING ：A LABORATORY MANUAL，Second edition，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989 and Third edition，2001 ；Ausubel 等，CURRENT PROTOCOLS INMOLECULAR BIOLOGY，John Wiley & Sons，New York，1987 and periodic updates ；theseries METHODS IN ENZYMOLOGY，Academic Press，San Diego ；Wolffe，CHROMATINSTRUCTURE AND FUNCTION，Third edition，Academic Press，San Diego，1998 ；METHODSIN ENZYMOLOGY，Vol.304，Chromatin (P.M.Wassarman and A.P.Wolffe，eds.)，AcademicPress，San Diego，1999 ； 和METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY，Vol.119，ChromatinProtocols(P.B.Becker，ed.)Humana Press，Totowa，1999等。
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1 活性肽RDLDAPDDVDFF的人工合成
一、生物活性肽的合成
人工合成生物活性肽RDLDAPDDVDFF。
二、生物活性肽的确认
1）UPLC分析
UPLC条件如下：
仪器：Waters ACQUITY UPLC超高效液相-电喷雾-四级杆-飞行时间质谱仪
色谱柱规格：BEH C18 色谱柱
流速：0.4mL/min
温度：50℃
紫外检测波长：210nm
进样量：2μL
梯度条件：A液：含有0.1%甲酸（v/v）的水，B液：含有0.1%甲酸（v/v）的乙腈
Time(min) %A %B
0 95.0 5.0
1.50 80.0 20.0
3.50 60.0 40.0
5.00 40.0 60.0
7.00 15.0 85.0
8.00 0.0 100.0
11.00 0.0 100.0
11.50 95.0 5.0
13.00 95.0 5.0
2）质谱分析
质谱条件如下：
离子方式：ES+
质量范围（m/z）：100-1000
毛细管电压（Capillary）（kV）：3.0
采样锥（V）：35.0
离子源温度（℃）：115
去溶剂温度（℃）：350
去溶剂气流（L/hr）：700.0
碰撞能量（eV）：4.0
扫描时间（sec）：0.25
内扫描时间（sec）：0.02
根据以上分析方法，利用超高效液相-电喷雾-四级杆-飞行时间质谱，对生物活性肽RDLDAPDDVDFF进行色谱分析和质谱分析，其质量色谱提取图如图1所示，提取此峰的二级质谱图和az、by断裂情况如图2和3所示，可得此峰的多肽质荷比为712.8195Da，保留时间是85.5 min。
3）结果
由图3可知，根据az、by断裂的情况，经过 Mascot 软件分析计算，得到质荷比712.8195Da的片段序列为Arg-Asp-Leu-Asp-Ala-Pro-Asp-Asp-Val-Asp-Phe-Phe（RDLDAPDDVDFF），记为SEQ ID NO：1。该片段与Serrate RNA effector molecule homolog蛋白第864~875位的残基序列相对应，Serrate RNA effector molecule homolog蛋白氨基酸序列的GenBank编号为AAH66831.1，序列见SEQ ID NO：2。
实施例2 生物活性肽的抗炎活性实验
生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的促巨噬细胞一氧化氮诱生量的测定（Griess法）
1. 实验试剂及仪器：
试剂：实验动物 balb/c小鼠（雄性6-8周龄）小鼠骨髓巨噬细胞来源生物活性肽RDLDAPDDVDFF；LPS，购自Sigma公司；中性红染色液，碧云天生物技术研究所生产。
仪器设备：LRH-250F生化培养箱 上海恒科技有限公司；GL-22M高速冷冻离心机上海卢湘仪离心机仪器有限公司； Hera cell 150 CO2 培养箱 Heraeus公司；DragonWellscan MK3酶标仪 Labsystems公司。
2. 试验方法：
加入细胞个数为2×106/ml的细胞悬液100μl/孔，贴壁纯化后加入含肽的RPMI1640完全培养液（10%FBS）200μl/孔，炎症组在24h时加入LPS至终浓度10μg/ml，连续培养48h后，收集培养液上清50μl/孔，在培养液上清中依次添加Griess试剂1和Griess试剂2各50μl/孔，室温反应10分钟后，在540nm波长下测定吸光度值（OD540）。
3. 实验结果及分析：
表1 生物活性多肽RDLDAPDDVDFF促巨噬细胞一氧化氮诱生量的测定
实验分组 正常组 炎症组
细胞空白 0.0593±0.0517 0.3238±0.0382
RDLDAPDDVDFF 1mg/ml 0.1286±0.0255** 0.4890±0.0243**
RDLDAPDDVDFF0.5mg/ml 0.1229±0.0133** 0.3359±0.0306**
RDLDAPDDVDFF0.1mg/ml 0.0596±0.0037 0.2481±0.0189**
注：*，与阴性对照比较，有显著性差异(P ＜0.05)；
**，与阴性对照组比较，有显著性差异(P ＜0.01)
实验结果见表1，由表1可知，在实验组中添加生物活性多肽RDLDAPDDVDFF，浓度分别为1 mg/mL和0.5mg/mL，对于正常情况下生长和LPS造炎症情况下生长的促进巨噬细胞的一氧化氮诱生量均有促进作用。与细胞空白组相比，具有显著性差异（P<0.05）。当生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的添加浓度为0.1 mg/mL，在LPS造炎症情况下相比，也能促进巨噬细胞一氧化氮诱生量的增加，并具有显著性差异（P<0.05）。但是与正常情况下生长的细胞空白组相比，没有显著性差异。说明生物活性多肽RDLDAPDDVDFF在一定浓度条件下具有促进巨噬细胞一氧化氮诱生量增加的能力。
实施例3 生物活性肽的抗衰老活性实验
生物活性多肽RDLDAPDDVDFF对秀丽线虫生殖能力影响的实验
1. 实验试剂及仪器：
试剂：秀丽线虫（Caenorhabditis elegans），复旦大学附属中西结合研究院；大肠菌株E.coli OP50，复旦大学附属中西结合研究院；琼脂粉，国药集团化学试剂有限公司；酵母粉，国药集团化学试剂有限公司；实施例1获得的小鼠骨髓巨噬细胞来源生物活性多肽RDLDAPDDVDFF。
仪器设备：力康RO15纯水系统，力康生物医疗科技有限公司；G136T型 Zealway智能高温灭菌锅，厦门致微仪器科技有限公司；THZ-32型台式恒温振荡器，上海精密实验设备有限公司；TDL-40B离心机，上海安亭科学仪器厂；卢湘仪GL-22M高速冷冻离心机，上海卢湘仪仪器有限公司；博迅BJ-CD SERIES 生物安全柜，上海博讯实业有限公司；Nikko倒置电子显微镜，尼康株式会社。
2. 实验方法：
（1） NGM平板制备
取大肠杆菌菌种于LB平板划线，挑取单菌落于10ml LB液体培养基中，37℃，200rpm，振荡培养24h，至OD600=0.4用于接种NGM平板喂养线虫。 取100μL菌液涂于60mmNGM平板，注意菌液边缘应距离平板边缘0.5cm左右。已涂布的NGM平板在室温(21-25℃)过夜后即可使用。
（2）线虫培养
本实验中所用的线虫均为雌雄同体，在标准培养条件(温度20℃，湿度40％～60％)下培养生长。
（3）线虫的同期化处理
1）高氯酸钠漂白法
准备孕虫生长板(即板中80％以上虫子处于生殖期)2-3板，取5ml M9缓冲液冲洗2次，将缓冲液吸入15ml离心管中，1000 r/min离心3min，弃去上清。加入5ml新配同期化漂白液，室温下剧烈振荡2.5min，以将成虫虫体腐蚀。离心，弃去上清。保证总处理时间不能超过5min，防止损伤虫卵。再加入M9缓冲液将沉淀重悬，混匀后离心，弃去上清，重复此过程3次。
2） 限时产卵法
挑取若干条处于产卵期的线虫于同一平板内，挑取的具体数量以所需同期化线虫数目为依据。一般条件下，一条产卵期线虫能在1h以内产卵6个左右。在平板中培养0.5h后，挑出平板中线虫，则平板中的卵处于同一生长时期。
（4）指标测定
本实验以秀丽线虫作为动物模型，挑取同期化处理后的L4期线虫到相应浓度的NGM板中。每个浓度至少8条线虫，每个NGM板转入一条，记为0 天，以后每天移至新板中直至线虫生殖基本不再产卵，在其进入产卵期之前对线虫总产卵数进行计数。
3. 实验结果及分析：
实验结果如图4所示，与不喂食多肽RDLDAPDDVDFF的空白组相比较，喂食不同质量浓度的实验组中，其平均产卵数均有不同程度的增加。喂食的多肽RDLDAPDDVDFF浓度为300mg/L时，线虫平均产卵数与空白组相比具有极其显著的差异（P<0.01），而在其浓度为400mg/L、500mg/L时，与空白组相比却只呈现显著性差异（P<0.05），这也进一步证明了300mg/L为混合肽多肽RDLDAPDDVDFF作用最佳浓度，随着肽浓度的提高并不会抑制线虫生殖，而是其作用效果减弱。综上所述，多肽RDLDAPDDVDFF在一定浓度下能明显提升线虫的生殖能力。同时，此实验结果表明，多肽RDLDAPDDVDFF 300mg/L为最适浓度。但随着浓度的增加，线虫的生殖能力却不再出现明显提高。
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 上海交通大学；浙江辉肽生命健康科技有限公司
<120> 一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF及其制备方法和应用
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Arg Asp Leu Asp Ala Pro Asp Asp Val Asp Phe Phe
1 5 10
<210> 2
<211> 875
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Met Gly Asp Ser Asp Asp Glu Tyr Asp Arg Arg Arg Arg Asp Lys Phe
1 5 10 15
Arg Arg Glu Arg Ser Asp Tyr Asp Arg Ser Arg Glu Arg Asp Glu Arg
20 25 30
Arg Arg Gly Asp Asp Trp Asn Asp Arg Glu Trp Asp Arg Gly Arg Glu
35 40 45
Arg Arg Ser Arg Gly Glu Tyr Arg Asp Tyr Asp Arg Asn Arg Arg Glu
50 55 60
Arg Phe Ser Pro Pro Arg His Glu Leu Ser Pro Pro Gln Lys Arg Met
65 70 75 80
Arg Arg Asp Trp Asp Glu His Ser Ser Asp Pro Tyr His Ser Gly Tyr
85 90 95
Asp Met Pro Tyr Ala Gly Gly Gly Gly Gly Pro Thr Tyr Gly Pro Pro
100 105 110
Gln Pro Trp Gly His Pro Asp Val His Ile Met Gln His His Val Leu
115 120 125
Pro Ile Gln Ala Arg Leu Gly Ser Ile Ala Glu Ile Asp Leu Gly Val
130 135 140
Pro Pro Pro Ile Met Lys Ser Phe Lys Glu Phe Leu Leu Ser Leu Asp
145 150 155 160
Asp Ser Val Asp Glu Thr Glu Ala Val Lys Arg Tyr Asn Asp Tyr Lys
165 170 175
Leu Asp Phe Arg Arg Gln Gln Met Gln Asp Phe Phe Leu Ala His Lys
180 185 190
Asp Glu Glu Trp Phe Arg Ser Lys Tyr His Pro Asp Glu Val Gly Lys
195 200 205
Arg Arg Gln Glu Ala Arg Gly Ala Leu Gln Asn Arg Leu Lys Val Phe
210 215 220
Leu Ser Leu Met Glu Ser Gly Trp Phe Asp Asn Leu Leu Leu Asp Ile
225 230 235 240
Asp Lys Ala Asp Ala Ile Val Lys Met Leu Asp Ala Ala Val Ile Lys
245 250 255
Met Glu Gly Gly Thr Glu Asn Asp Leu Arg Ile Leu Glu Gln Glu Glu
260 265 270
Glu Glu Glu Gln Ala Gly Lys Thr Gly Glu Ala Ser Lys Lys Glu Glu
275 280 285
Ala Arg Ala Gly Pro Ala Leu Gly Glu Gly Glu Arg Lys Ala Asn Asp
290 295 300
Lys Asp Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Gln Ala Glu Asn Asp Ser Ser
305 310 315 320
Asn Asp Asp Lys Thr Lys Lys Ser Glu Gly Asp Gly Asp Lys Glu Glu
325 330 335
Lys Lys Glu Glu Ala Glu Lys Glu Ala Lys Lys Ser Lys Lys Arg Asn
340 345 350
Arg Lys Gln Ser Gly Asp Asp Ser Phe Asp Glu Gly Ser Val Ser Glu
355 360 365
Ser Glu Ser Glu Ser Glu Gly Gly Gln Ala Glu Glu Glu Lys Glu Glu
370 375 380
Ala Glu Glu Ala Leu Lys Glu Lys Glu Lys Pro Lys Glu Glu Glu Lys
385 390 395 400
Glu Lys Pro Lys Asp Ala Ala Gly Leu Glu Cys Lys Pro Arg Pro Leu
405 410 415
His Lys Thr Cys Ser Leu Phe Met Arg Asn Ile Ala Pro Asn Ile Ser
420 425 430
Arg Ala Glu Ile Ile Ser Leu Cys Lys Arg Tyr Pro Gly Phe Met Arg
435 440 445
Val Ala Leu Ser Glu Pro Gln Pro Glu Arg Arg Phe Phe Arg Arg Gly
450 455 460
Trp Val Thr Phe Asp Arg Ser Val Asn Ile Lys Glu Ile Cys Trp Asn
465 470 475 480
Leu Gln Asn Ile Arg Leu Arg Glu Cys Glu Leu Ser Pro Gly Val Asn
485 490 495
Arg Asp Leu Thr Arg Arg Val Arg Asn Ile Asn Gly Ile Thr Gln His
500 505 510
Lys Gln Ile Val Arg Asn Asp Ile Lys Leu Ala Ala Lys Leu Ile His
515 520 525
Thr Leu Asp Asp Arg Thr Gln Leu Trp Ala Ser Glu Pro Gly Thr Pro
530 535 540
Pro Val Pro Thr Ser Leu Pro Ser Gln Asn Pro Ile Leu Lys Asn Ile
545 550 555 560
Thr Asp Tyr Leu Ile Glu Glu Val Ser Ala Glu Glu Glu Glu Leu Leu
565 570 575
Gly Ser Ser Gly Gly Pro Pro Pro Glu Glu Pro Pro Lys Glu Gly Asn
580 585 590
Pro Ala Glu Ile Asn Val Glu Arg Asp Glu Lys Leu Ile Lys Val Leu
595 600 605
Asp Lys Leu Leu Leu Tyr Leu Arg Ile Val His Ser Leu Asp Tyr Tyr
610 615 620
Asn Thr Cys Glu Tyr Pro Asn Glu Asp Glu Met Pro Asn Arg Cys Gly
625 630 635 640
Ile Ile His Val Arg Gly Pro Met Pro Pro Asn Arg Ile Ser His Gly
645 650 655
Glu Val Leu Glu Trp Gln Lys Thr Phe Glu Glu Lys Leu Thr Pro Leu
660 665 670
Leu Ser Val Arg Glu Ser Leu Ser Glu Glu Glu Ala Gln Lys Met Gly
675 680 685
Arg Lys Asp Pro Glu Gln Glu Val Glu Lys Phe Val Thr Ser Asn Thr
690 695 700
Gln Glu Leu Gly Lys Asp Lys Trp Leu Cys Pro Leu Ser Gly Lys Lys
705 710 715 720
Phe Lys Gly Pro Glu Phe Val Arg Lys His Ile Phe Asn Lys His Ala
725 730 735
Glu Lys Ile Glu Glu Val Lys Lys Glu Val Ala Phe Phe Asn Asn Phe
740 745 750
Leu Thr Asp Ala Lys Arg Pro Ala Leu Pro Glu Ile Lys Pro Ala Gln
755 760 765
Pro Pro Gly Pro Ala Gln Ile Leu Pro Pro Gly Leu Thr Pro Gly Leu
770 775 780
Pro Tyr Pro His Gln Thr Pro Gln Gly Leu Met Pro Tyr Gly Gln Pro
785 790 795 800
Arg Pro Pro Ile Leu Gly Tyr Gly Ala Gly Ala Val Arg Pro Ala Val
805 810 815
Pro Thr Gly Gly Pro Pro Tyr Pro His Ala Pro Tyr Gly Ala Gly Arg
820 825 830
Gly Asn Tyr Asp Ala Phe Arg Gly Gln Gly Gly Tyr Pro Gly Lys Pro
835 840 845
Arg Asn Arg Met Val Arg Gly Asp Pro Arg Ala Ile Val Glu Tyr Arg
850 855 860
Asp Leu Asp Ala Pro Asp Asp Val Asp Phe Phe
865 870 875

Claims (3)

1.一种生物活性多肽RDLDAPDDVDFF，其特征在于，其氨基酸序列为Arg-Asp-Leu-Asp-Ala-Pro-Asp-Asp-Val-Asp-Phe-Phe。
2.编码权利要求1所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的多核苷酸。
3.如权利要求1所述生物活性多肽RDLDAPDDVDFF的制备方法，其特征在于，直接通过化学合成制备。
CN201911086928.5A 2019-11-08 2019-11-08 一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用 Active CN110938131B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911086928.5A CN110938131B (zh) 2019-11-08 2019-11-08 一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911086928.5A CN110938131B (zh) 2019-11-08 2019-11-08 一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110938131A CN110938131A (zh) 2020-03-31
CN110938131B true CN110938131B (zh) 2021-07-09

Family

ID=69907510

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911086928.5A Active CN110938131B (zh) 2019-11-08 2019-11-08 一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110938131B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112812170B (zh) * 2021-01-21 2022-05-31 浙江辉肽生命健康科技有限公司 具有氨基酸结构llpkkte的生物活性多肽及其制备方法和应用
CN117247427B (zh) * 2023-05-16 2024-08-23 杭州禾泰健宇生物科技有限公司 一种肽类化合物、组合物及其应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1315342A (zh) * 2000-03-23 2001-10-03 上海博道基因技术有限公司 新的人抗砷相关蛋白及其编码序列
CN101186641A (zh) * 2007-11-29 2008-05-28 宁夏回族自治区水产研究所 一种与抗砷相关蛋白及其编码基因与应用
WO2008138916A1 (en) * 2007-05-10 2008-11-20 Pronota N.V. Isolation of peptides and proteomics platform
EP3004141A1 (en) * 2013-06-03 2016-04-13 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Histone deacetylase ( hdac) biomarkers in multiple myeloma
CN107840880A (zh) * 2017-11-14 2018-03-27 上海交通大学 一种生物活性多肽glnyyqqkpva及其制备方法和应用
CN108017702A (zh) * 2017-11-14 2018-05-11 上海交通大学 一种生物活性多肽fppqsvls及其制备方法和应用
CN108997483A (zh) * 2018-08-30 2018-12-14 上海交通大学 一种生物活性多肽dqdlvli及其制备方法和应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040142325A1 (en) * 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
CN1618808A (zh) * 2003-11-21 2005-05-25 上海人类基因组研究中心 肝癌相关蛋白及其编码序列和用途
CN102190715B (zh) * 2010-03-02 2013-05-01 中国科学院植物研究所 一种植物砷抗性相关的蛋白及编码基因及其应用

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1315342A (zh) * 2000-03-23 2001-10-03 上海博道基因技术有限公司 新的人抗砷相关蛋白及其编码序列
WO2008138916A1 (en) * 2007-05-10 2008-11-20 Pronota N.V. Isolation of peptides and proteomics platform
CN101186641A (zh) * 2007-11-29 2008-05-28 宁夏回族自治区水产研究所 一种与抗砷相关蛋白及其编码基因与应用
EP3004141A1 (en) * 2013-06-03 2016-04-13 Acetylon Pharmaceuticals, Inc. Histone deacetylase ( hdac) biomarkers in multiple myeloma
JP2016523236A (ja) * 2013-06-03 2016-08-08 アセチロン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＡｃｅｔｙｌｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． 多発性骨髄腫におけるヒストン脱アセチル化酵素（ｈｄａｃ）バイオマーカー
CN107840880A (zh) * 2017-11-14 2018-03-27 上海交通大学 一种生物活性多肽glnyyqqkpva及其制备方法和应用
CN108017702A (zh) * 2017-11-14 2018-05-11 上海交通大学 一种生物活性多肽fppqsvls及其制备方法和应用
CN108997483A (zh) * 2018-08-30 2018-12-14 上海交通大学 一种生物活性多肽dqdlvli及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Basic Strong Cation Exchange Chromatography, BaSCX, a Highly Efficient Approach for C-Terminomic Studies Using LysargiNase Digestion;Qingqing Li 等;《Anal Chem》;20200309;第92卷(第7期);第4742-4748页 *
H2PLQ9 (H2PLQ9_PONAB);UniProtKB;《UniProtKB》;20120321;H2PLQ9 *
The linker peptide of the ArsA ATPase;J Li 等;《Mol Microbiol》;20000131;第35卷(第2期);第361-367页 *
白芍总苷对巨噬细胞一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶生成的影响及其机制研究;陈刚 等;《中国免疫学杂志》;20080430;第24卷(第4期);第345-347页 *
白藜芦醇对秀丽线虫衰老的影响;陆沛 等;《成都医学院学报》;20121220;第7卷(第3期);第359-363页 *
秀丽隐杆线虫在抗衰老领域应用的研究进展;游牧 等;《中国美容医学》;20160229;第25卷(第2期);第104-107页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110938131A (zh) 2020-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110938130B (zh) 一种生物活性多肽rvfqplphenkpltl及其制备方法和应用
CN110938129B (zh) 一种生物活性多肽sklvpvgygirkl及其制备方法和应用
CN108794593B (zh) 一种生物活性多肽gsvndvq及其制备方法和应用
CN110938131B (zh) 一种生物活性多肽rdldapddvdff及其制备方法和应用
CN108997483B (zh) 一种生物活性多肽dqdlvli及其制备方法和应用
CN108794590B (zh) 一种生物活性多肽epgivnld及其制备方法和应用
CN110903376B (zh) 一种生物活性多肽rislplptfssl及其制备方法和应用
CN108794587B (zh) 一种生物活性多肽kvtpyqa及其制备方法和应用
CN108794603B (zh) 一种生物活性多肽tvtmlmttil及其制备方法和应用
CN108794605B (zh) 一种生物活性多肽srpetsg及其制备方法和应用
CN108794600B (zh) 一种生物活性多肽snlievt及其制备方法和应用
CN110938128B (zh) 一种生物活性多肽pkcpkcdkevyfaervtsl及其制备方法和应用
CN108558991B (zh) 一种生物活性多肽giqdpkep及其制备方法和应用
CN111100196A (zh) 一种生物活性多肽qilsvpgwtysr及其制备方法和应用
CN108794596B (zh) 一种生物活性多肽enpraf及其制备方法和应用
CN109160945B (zh) 一种生物活性多肽dklaq及其制备方法和应用
CN108794588B (zh) 一种生物活性多肽fdptlhq及其制备方法和应用
CN107814842B (zh) 一种生物活性多肽sqskvlpvpe及其制备方法和应用
CN108017709B (zh) 一种生物活性多肽kepmigvnqela及其制备方法和应用
CN108794595B (zh) 一种生物活性多肽iyqmvha及其制备方法和应用
CN108586588B (zh) 一种生物活性多肽apmisaasvh及其制备方法和应用
CN110938132B (zh) 一种生物活性多肽kswnetfharl及其制备方法和应用
CN107759666B (zh) 一种生物活性多肽aqtqslvypfpgpihn及其制备方法和应用
CN107880107B (zh) 一种生物活性多肽qvlsntvpa及其制备方法和应用
CN108794586B (zh) 一种生物活性多肽ldendiil及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant