CN110938132B - 一种生物活性多肽kswnetfharl及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及蛋白领域，具体涉及一种生物活性多肽KSWNETFHARL及其制备方法和应用，生物活性多肽KSWNETFHARL其氨基酸序列为Lys‑Ser‑Trp‑Asn‑Glu‑Thr‑Phe‑His‑Ala‑Arg‑Leu。经过体外抗氧化活性实验、体内抗衰老实验，验证了多肽KSWNETFHARL具有较好的抗氧化功能和抗衰老活性，一方面，本发明的生物活性多肽KSWNETFHARL具有较高的抗氧化能力；另一方面，有较好的抗衰老活性，能够清除机体内的自由基，提高生命的质量，对开发具有抗氧化功能、抗衰老功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。

Description

一种生物活性多肽KSWNETFHARL及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及蛋白领域，尤其是涉及一种生物活性多肽KSWNETFHARL及其制备方法和应用。
背景技术
随着生活水平的提高，人们对饮食的要求从“追求量”转变为对“质”的追求。因此对具有特殊功能的生物活性肽的研究成为热点。近些年来，人们发现一些食物来源的多肽类物质具有良好的生物活性，如玉米短肽、大豆肽、牛乳多肽等。而且实验验证可能具有抗衰老、抗菌、抗癌、抗氧化、降血压等功能。
这些多肽可以通过微生物发酵、消化酶解等多种途径得到，并且大多具有生物活性的多肽是由2～20个氨基酸残基组成，分子量小于6000Da，含有一定量的疏水氨基酸、芳香族氨基酸。
巨噬细胞是机体抵御外界有害物质入侵的第二道防线，广泛存在于机体各种组织中，是主要免疫应答细胞，通过吞噬及分泌细胞因子参与免疫应答、免疫调节等生物学功能，在免疫系统中发挥着重要的作用。对于巨噬细胞中存在的多肽具有的功能进行研究。
目前，现有技术中有一些关于抗衰老生物活性肽的研究，但是具有抗氧化或抗衰老功能的不同于现有多肽的新的生物活性多肽仍然是目前需要进一步研究的方向，以进一步扩大生物活性多肽的多样性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生物活性多肽KSWNETFHARL及其制备方法和应用。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
本发明第一方面，提供一种生物活性多肽KSWNETFHARL，其氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu，如SEQ ID NO：1所示。
较优的，所述生物活性多肽为小鼠骨髓来源巨噬细胞肽。具体来源于ATP-synthase subunit D蛋白，并且为ATP-synthase subunit D蛋白第32～42位的氨基酸残基。ATP-synthase subunit D蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
ATP-synthase subunit D蛋白的氨基酸序列以及对应的核苷酸序列为既有技术，编码ATP-synthase subunit D蛋白第32～42位氨基酸残基的核苷酸片段能编码成熟的生物活性多肽KSWNETFHARL。
较优的，所述生物活性多肽具有抗氧化和抗衰老功能。
本发明第二方面，提供了所述生物活性多肽KSWNETFHARL的制备方法，可以通过基因工程的方法人工合成，可以从细胞中通过分离纯化的方法直接获得，可以直接通过化学合成制备。
本发明第三方面，提供了所述生物活性多肽KSWNETFHARL在制备具有抗氧化功能的食品、保健品、药物或化妆品中的应用。
本发明第四方面，提供了所述生物活性多肽KSWNETFHARL在制备具有抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。
本发明第五方面，提供了所述生物活性多肽KSWNETFHARL在制备同时具有抗氧化和抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用。
具体而言，本发明的生物活性多肽KSWNETFHARL可以用于制备减少自由基对皮肤伤害的化妆品、制备具有抗氧化和/或抗衰老的药物。
本发明第六方面，提供了一种抗氧化产品，包括所述生物活性多肽KSWNETFHARL或所述生物活性多肽KSWNETFHARL的衍生物；所述的抗氧化产品包括抗氧化食品、抗氧化保健品、抗氧化药物或抗氧化化妆品；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的衍生物，是指在生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。
本发明第七方面，提供了一种抗衰老产品，包括所述生物活性多肽KSWNETFHARL或所述生物活性多肽KSWNETFHARL的衍生物；所述的抗衰老产品包括抗衰老食品、抗衰老保健品或抗衰老药物；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的衍生物，是指在生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。
本发明第八方面，提供了一种同时具有抗氧化功能和抗衰老功能的产品，包括所述生物活性多肽KSWNETFHARL或所述生物活性多肽KSWNETFHARL的衍生物；具有抗氧化功能和抗衰老功能的产品包括食品、保健品或药物；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的衍生物，是指在生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸侧链基团上、氨基端或羧基端进行羟基化、羧基化、羰基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、酯化或糖基化等修饰，得到的多肽衍生物。
本发明生物活性多肽KSWNETFHARL的有益效果为：本发明的小鼠骨髓来源巨噬细胞生物活性多肽KSWNETFHARL具有较好的抗氧化活性和抗衰老活性；一方面，本发明的生物活性多肽KSWNETFHARL具有较高的抗氧化能力；另一方面，有较好的抗衰老活性，能够清除机体内的自由基，提高生命的质量，对开发具有抗氧化功能、抗衰老功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。
附图说明
图1：质量色谱提取图(m/z＝463.5754)；
图2：质荷比为463.5754的片段的二级质谱图；
图3：质荷比为463.5754的多肽az、by断裂情况；
图4：Trolox标准曲线；
具体实施方式
在进一步描述本发明具体实施方案之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规的分子生物学、生物化学、染色质结构和分析、分析化学、细胞培养、重组DNA技术及相关领域的常规技术。这些技术在现有文献中已有完善说明，具体可参见Sambrook等MOLECULAR CLONING：A LABORATORY MANUAL，Second edition，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989 and Third edition，2001；Ausubel等，CURRENT PROTOCOLS INMOLECULAR BIOLOGY，John Wiley&Sons，New York，1987and periodic updates；theseries METHODS IN ENZYMOLOGY，Academic Press，San Diego；Wolffe，CHROMATINSTRUCTURE AND FUNCTION，Third edition，Academic Press，San Diego，1998；METHODS INENZYMOLOGY，Vol.304，Chromatin(P.M.Wassarman and A.P.Wolffe，eds.)，AcademicPress，San Diego，1999；和METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY，Vol.119，ChromatinProtocols(P.B.Becker，ed.)Humana Press，Totowa，1999等。
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1活性肽KSWNETFHARL的人工合成
一、生物活性肽的合成
1.称取RINK树脂3g(取代度0.3mmol/g)于150ml的反应器中，用50ml的二氯甲烷(DCM)浸泡。
2.2小时后，用3倍树脂体积的氮-二甲基甲酰胺(DMF)洗涤树脂，然后抽干，如此重复四次，将树脂抽干后待用。
3.向反应器中加入一定量的20％哌啶(哌啶/DMF＝1:4,v:v)，放在脱色摇床上摇晃20min，以此来脱去树脂上的Fmoc保护基团。脱完保护后用3倍树脂体积的DMF洗涤四次，然后抽干。
4.取少量树脂用茚三酮(九井水合茚三酮)法检测(检A、检B各两滴，100℃反应1min)，树脂有颜色，说明脱保护成功。
5.称取氨基酸Lys适量和1-羟基-苯并三唑(HOBT)适量于50ml的离心管中，加入20ml的DMF将其溶解，然后加入3ml的N,N二异丙基碳二亚胺(DIC)振荡摇匀1min，待溶液澄清后加入到反应器中，然后将反应器置于30℃的摇床中反应。
6.2小时后，用一定量的醋酸酐封头(醋酸酐:DIEA:DCM＝1:1:2,v:v:v)半小时，然后用3倍树脂体积的DMF洗涤四次，抽干待用。
7.向反应器中加入一定量的20％哌啶(哌啶/DMF＝1:4，v:v)，放在脱色摇床上摇晃20min，以此来脱去树脂上的Fmoc保护基团。脱完保护后用DMF洗涤四次，然后抽干。
8.取少量树脂用茚三酮(九井水合茚三酮)法检测(检A、检B各两滴，100℃反应1min)，树脂有颜色，说明脱保护成功。
9.称取后面第二个氨基酸适量和HOBT适量于50ml的离心管中，加入25ml的DMF将其溶解，然后加入2.5ml的DIC振荡摇匀1min，待溶液澄清后加入到反应器中，然后将反应器置于30℃的摇床中反应。
10.1小时后，取少量树脂检测，用茚三酮法检测(检A、检B各两滴，100℃反应1min)，若树脂为无色，说明反应完全；若树脂有颜色，说明缩合不完全，继续反应。
11.待反应完全后，用DMF洗涤树脂四次，然后抽干，向反应器中加入一定量的20％哌啶(哌啶/DMF＝1:4,v:v)，放在脱色摇床上摇晃20min，以此来脱去树脂上的Fmoc保护基团。脱完保护后用DMF洗涤四次，然后抽干检测保护是否脱去。
12.按照步骤9-11依次接上氨基酸Ser、Trp、Asn、Glu、Thr、Phe、His、Ala、Arg、Leu。
13.待接上最后一个氨基酸后，脱去保护，用DMF洗涤四次，然后用甲醇将树脂抽干。然后用95切割液(三氟乙酸:1,2乙二硫醇:3，异丙基硅烷:水＝95:2:2:1，v:v:v)将多肽从树脂上切割下来(每克树脂加10ml切割液)，并用冰乙醚(切割液：乙醚＝1:9,v:v)离心沉降四次。
至此，人工合成了生物活性肽KSWNETFHARL。
二、生物活性肽的确认
1)UPLC分析
UPLC条件如下：
仪器：Waters ACQUITY UPLC超高效液相-电喷雾-四级杆-飞行时间质谱仪
色谱柱规格：BEH C18色谱柱
流速：0.4mL/min
温度：50℃
紫外检测波长：210nm
进样量：2μL
梯度条件：A液：含有0.1％甲酸(v/v)的水，B液：含有0.1％甲酸(v/v)的乙腈
Figure GDA0002839041260000061
2)质谱分析
质谱条件如下：
离子方式：ES+
质量范围(m/z)：100-1000
毛细管电压(Capillary)(kV)：3.0
采样锥(V)：35.0
离子源温度(℃)：115
去溶剂温度(℃)：350
去溶剂气流(L/hr)：700.0
碰撞能量(eV)：4.0
扫描时间(sec)：0.25
内扫描时间(sec)：0.02
根据以上分析方法，利用超高效液相-电喷雾-四级杆-飞行时间质谱，对生物活性肽KSWNETFHARL进行色谱分析和质谱分析，其质量色谱提取图如图1所示，提取此峰的二级质谱图和az、by断裂情况如图2和3所示，可得此峰的多肽质荷比为463.5754Da，保留时间是28.3min。
3)结果由图3可知，根据az、by断裂的情况，经过Mascot软件分析计算，得到质荷比463.5754Da的片段序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu(KSWNETFHARL)，记为SEQ ID NO：1。该片段与ATP-synthase subunit D蛋白第32～42位的残基序列相对应，ATP-synthase subunit D蛋白氨基酸序列的GenBank编号为AAL83962.1，序列见SEQ ID NO：2。
实施例2生物活性肽的抗氧化活性实验
一、ABTS法测定生物活性肽KSWNETFHARL体外抗氧化能力
1.实验试剂和仪器：
总抗氧化能力检测试剂盒(Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS法)，购自上海碧云天生物科技公司；ABTS溶液，氧化剂溶液，水溶性维生素E(Trolox溶液)(10mmol/L)，实施例1获得的小鼠骨髓巨噬细胞来源生物活性肽KSWNETFHARL。
主要仪器：Sunrise酶标仪，奥地利Tecan公司产品；96孔细胞培养板，美国Millipore公司制造；分析天平，Meitelei-tolido公司产品。
2.实验方法：
(1)ABTS工作液的配制
根据总抗氧化能力检测试剂盒说明书，将ABTS溶液和ABTS氧化剂溶液1:1混合，避光存放12-16h后使用。配好的ABTS母液在室温下避光存放，2-3天内稳定。使用前，用PBS稀释ABTS工作母液38-42倍，使得ABTS工作液的吸光度减去相应PBS空白对照后，A734为0.7±0.05，ABTS工作液锡纸避光保存，现配现用。
(2)生育酚(Trolox)标准曲线曲线的制作测定
在96孔板的每个检测孔中加入200μL ABTS工作液，标准曲线检测孔中按表3要求加入10μL用PBS稀释的生育酚(Trolox)溶液，空白对照孔中加入10μL PBS，轻轻混匀。室温孵育4min后，在734nm处检测吸光值。
表1生育酚(Trolox)标准曲线测定的溶液配制
Figure GDA0002839041260000071
根据实验的结果，用Excel拟合回归曲线并得出回归方程，结果见图4所示。Trolox标准曲线线性关系良好，其相关系数达到0.998，表明该标准曲线的准确度和精密性都符合检测要求，可用于后续结果计算。从图中可以看出，Trolox标准曲线与吸光值呈现良好的反比关系，Trolox溶液的浓度越高，其在734nm下吸光值越低，即所测样品的清除自由基能力越强。
(3)ABTS法测定生物活性多肽KSWNETFHARL的抗氧化能力
在96孔板的每个检测孔中加入200μL ABTS工作液，样品检测孔中加入10μL待测样品，空白对照孔中加入10μL PBS，轻轻混匀。室温孵育4min后，用酶标仪在734nm处检测吸光值。根据标准曲线计算出样品的总抗氧化能力。总抗氧化能力表示方式以Trolox标准溶液的浓度来表示，按照下式计算自由基清除率，实验结果见表2。
总抗氧化能力(mmol/g)＝CTrolox/CS
式中：CTrolox——与样品吸光值相同的Trolox标准溶液浓度(mmol/L)
CS——合成多肽样品的浓度(mg/mL)
表2 ABTS法测定生物活性多肽KSWNETFHARL的总抗氧化能力结果
Figure GDA0002839041260000081
通过总抗氧化能力法(Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS法)对多肽KSWNETFHARL的体外总抗氧化活性进行了测定，发现生物活性多肽KSWNETFHARL相比空白组其吸光值有一定程度的降低，具有较好的还原氧化物质的能力。由表2可知，发现多肽KSWNETFHARL的总抗氧化能力随着多肽浓度的升高而升高，在浓度为5mg/mL情况下，多肽KSWNETFHARL的总抗氧化水平达到0.1987mmol/g，即在5mg/m L的浓度下，其总抗氧化能力与1mmol/L Trolox的总抗氧化能力相持平。因此，可认定发明的生物活性多肽KSWNETFHARL具有显著的抗氧化能力。
实施例3生物活性肽的抗衰老活性实验
一、生物活性多肽KSWNETFHARL对体内器官抗氧化水平作用的实验
1.实验试剂及仪器：
试剂：实验动物ICR小鼠(雄性5周龄)，上海市实验动物中心；D-gal，国药集团化学试剂有限公司；多聚甲醛，国药集团化学试剂有限公司；氯化钠，国药集团化学试剂有限公司；实施例1获得的小鼠骨髓巨噬细胞来源生物活性肽KSWNETFHARL；BCA蛋白试剂盒，南京凯基生物科技有限公司；MDA脂质过氧化物试剂盒，南京凯基生物科技有限公司；SOD超氧化物歧化酶试剂盒，南京建成生物科技有限公司；T-AOC总抗氧化力试剂盒，南京建成生物科技有限公司。
仪器设备：CM-230型摩尔超净水，上海摩勒科学仪器有限公司；密理博MilliporeMILLEX GP0.22μm滤膜，美国密理博公司；GL-22M高速冷冻离心机，上海卢湘仪离心机仪器有限公司。
2.实验方法：
(1)动物衰老模型造模
将ICR小鼠适应性饲养一周后，分为4组，每组6只。组1为低剂量灌胃组，小鼠每天以500mg/kg的剂量颈背部皮下注射D-gal，并以1mg/只·天的剂量灌胃生物活性多肽KSWNETFHARL；组2为高剂量灌胃组，小鼠每天以500mg/kg的剂量颈背部皮下注射D-gal，并且3mg/只的·天剂量灌胃生物活性多肽KSWNETFHARL；组3为空白组，小鼠正常生长；组4为动物模型组，小鼠每天以500mg/kg的剂量颈背部皮下注射D-gal，并且灌胃浓度为0.9％的生理盐水；D-gal的注射周期与多肽的灌胃周期均为42天。每3天更换垫料，并保证饲料与蒸馏水的供给。每五天称量一次小鼠的体重，根据小鼠的体重配制D-gal注射液，且D-gal注射液经0.22μm针筒式滤膜过滤，以保证无菌。
(2)获取动物脏器
实验周期完成后，以摘眼球取血法获取小鼠的血液，获得血液后断颈处死小鼠，而后将小鼠的躯体置于低温冰盒上，并迅速摘取小鼠的大脑、脾脏、肝脏和肾脏，所获得的脏器均放置于预先灭菌的1.5mL离心管中，所有器官样品均保存在-80℃冰箱内备检。处置实验动物过程中的所有操作遵循2006年科学技术部发布的《关于善待实验动物的指导性意见》。所摘取的小鼠脾脏直接浸泡于预先配制好的4％多聚甲醛溶液中，以固定其形态。多聚甲醛粉末较为难溶，可以加入微量的碳酸氢钠将pH值调节至碱性，以助溶。多聚甲醛溶液的配制需要在通风橱内完成。
(3)样品检测
所有需检测的脏器，均在低温环境下研磨，并用4℃无菌PBS溶液稀释成10％的组织匀浆液，4℃条件下4000g离心后，吸取取上清液，弃去沉淀，根据试剂盒说明书操作，或置于-80℃冰箱待测。
3.实验结果及分析：
从表3-1中可知，相对于动物模型组小鼠，多肽灌胃组小鼠的肝脏与肾脏中的SOD含量均呈现显著性的增加(P<0.01)。意味着多肽灌胃组的小鼠虽然受到长期大剂量的D-gal的刺激，即使D-gal的过量注射也没有完全破坏小鼠体内SOD酶系，说明在注射周期内，实验动物在持续不断地受到致衰老因子的刺激情况下，会导致不同器官内SOD含量的减少，但同时摄入一定量的多肽KSWNETFHARL对小鼠体内的氧化损伤具有一定保护作用。
表3-1各组实验动物小鼠不同器官内SOD含量的变化
Figure GDA0002839041260000101
注：*标示与模型组对照比较，有显著性差异(P<0.05)；**标示与模型组对照比较，有显著性差异(P<0.01)，下同。
从表3-2中可知，动物模型组小鼠的肝脏MDA含量为26.79±7.01nmol/L，与动物模型组比较，多肽灌胃的两组小鼠肝脏中的MDA含量呈现显著性差异(P<0.01)。由于MDA可用于估计动物体内脂质过氧化物的堆积情况，故由此可知，动物模型组小鼠在致衰老模型形成过程中，由于过量的D-gal的长期注射，使小鼠的糖代谢途径发生紊乱，产生大量自由基从而造成氧化损伤，其肝脏组织内出现大量脂质过氧化物，MDA作为脂质过氧化物，其在动物体内含量的升高，能从侧面反应出小鼠体内抗氧化酶系活力的降低。而多肽灌胃组小鼠肝脏MDA含量的显著降低，说明多肽KSWNETFHARL的摄入能有效地保护重要组织器官免受不良因子刺激产生大量的脂质过氧化物。
表3-2各组实验动物小鼠不同器官内MDA含量的变化情况
Figure GDA0002839041260000102
从表3-3可知，动物模型组小鼠的肝脏T-AOC值为0.68±0.23U/mgprot，相比较于模型组，多肽高剂量与低剂量灌胃组小鼠均与之呈现显著性差异(P<0.05)；动物模型组小鼠的肾脏T-AOC含量为0.61±0.25U/mgprot，与动物模型组小鼠相比较，低剂量灌胃组与之呈现显著性差异(P<0.05)，高剂量灌胃组小鼠也与之呈现显著性差异(P<0.01)。此结果表明，在整个实验周期内，由于实验动物持续不断地受到致衰老因子的刺激，动物模型组小鼠的肝脏、肾脏组织遭到破坏，导致其总抗氧化能力降低。与动物模型组和空白组比较，多肽灌胃组小鼠主要器官的总抗氧化能力在受到致衰老因子的刺激过程中始终维持在一个较高的水平，说明摄入生物活性多肽KSWNETFHARL使动物机体及其主要器官具有较高的自我保护功能。
表3-3各组实验动物小鼠体内T-AOC的变化情况
Figure GDA0002839041260000111
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 上海交通大学；浙江辉肽生命健康科技有限公司
<120> 一种生物活性多肽KSWNETFHARL及其制备方法和应用
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Lys Ser Trp Asn Glu Thr Phe His Ala Arg Leu
1 5 10
<210> 2
<211> 161
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Met Ala Gly Arg Lys Leu Ala Leu Lys Thr Ile Asp Trp Val Ser Phe
1 5 10 15
Val Glu Val Met Pro Gln Asn Gln Lys Ala Ile Gly Asn Ala Leu Lys
20 25 30
Ser Trp Asn Glu Thr Phe His Ala Arg Leu Ala Ser Leu Ser Glu Lys
35 40 45
Pro Pro Ala Ile Asp Trp Ala Tyr Tyr Arg Ala Asn Val Ala Lys Pro
50 55 60
Gly Leu Val Asp Asp Phe Glu Lys Lys Tyr Asn Ala Leu Lys Ile Pro
65 70 75 80
Val Pro Glu Asp Lys Tyr Thr Ala Leu Val Asp Gln Glu Glu Lys Glu
85 90 95
Asp Val Lys Ser Cys Ala Glu Phe Val Ser Gly Ser Gln Leu Arg Ile
100 105 110
Gln Glu Tyr Glu Lys Gln Leu Glu Lys Met Arg Asn Ile Ile Pro Phe
115 120 125
Asp Gln Met Thr Ile Asp Asp Leu Asn Glu Ile Phe Pro Glu Thr Lys
130 135 140
Leu Asp Lys Lys Lys Tyr Pro Tyr Trp Pro His Gln Pro Ile Glu Asn
145 150 155 160
Leu

Claims (6)

1.一种生物活性多肽KSWNETFHARL的应用，其特征在于，所述生物活性多肽KSWNETFHARL在制备具有抗氧化功能的食品、保健品、药物或化妆品中的应用；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu。
2.一种生物活性多肽KSWNETFHARL的应用，其特征在于，所述生物活性多肽KSWNETFHARL在制备具有抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu。
3.一种生物活性多肽KSWNETFHARL的应用，其特征在于，所述生物活性多肽KSWNETFHARL在制备具有抗氧化和抗衰老功能的食品、保健品或药物中的应用；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu。
4.一种抗氧化产品，其特征在于，包括生物活性多肽KSWNETFHARL；所述的抗氧化产品包括抗氧化食品、抗氧化保健品、抗氧化药物或抗氧化化妆品；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu。
5.一种抗衰老产品，其特征在于，包括生物活性多肽KSWNETFHARL；所述的抗衰老产品包括抗衰老食品、抗衰老保健品、抗衰老药物或抗衰老化妆品；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu。
6.一种具有抗氧化和抗衰老功能的产品，其特征在于，包括生物活性多肽KSWNETFHARL；具有抗氧化和抗衰老功能的产品包括食品、保健品或药物；所述生物活性多肽KSWNETFHARL的氨基酸序列为Lys-Ser-Trp-Asn-Glu-Thr-Phe-His-Ala-Arg-Leu。
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