CN110897935B - 用于抑制生物膜形成的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种低刺激性的，抑制在口腔内或者牙齿的表面生成生物膜的组合物，更加详细而言，涉及一种通过含有植物油，从而在牙齿上形成涂层来抑制生物膜的形成，预防牙齿变色，缓和因作为发泡剂使用的表面活性剂引起的刺激，同时对唇部保湿也有效的组合物，具体涉及一种用于口腔的组合物。

Description

用于抑制生物膜形成的组合物

技术领域

本发明涉及一种低刺激性的，抑制在口腔内或者牙齿的表面生成生物膜的组合物，更加详细而言，涉及一种通过含有植物油，从而在牙齿上形成涂层来抑制生物膜的形成，预防牙齿变色，缓和因作为发泡剂使用的表面活性剂引起的刺激，同时对唇部保湿也有效的组合物，具体涉及一种用于口腔的组合物。

背景技术

牙齿是由磷酸钙(Calcium phosphate)而成的无机质，作为与其相关的疾病大致有龋齿和牙周病。其中，龋齿占据从孩童到成人为止牙科疾病的最大一部分，而且发生频率也在变高。根据大韩民国牙科医生协会的报告，儿童中90％以上都有龋齿(Dental caries)的经验，成人中80％以上都有牙龈疾病。引起该疾病的主要原因是口腔内微生物引起的感染，因细菌、食物、唾液的相互作用而诱发该疾病。即，因食物和唾液、龈沟液等而持续供应口腔内细菌的发育中所需的营养成分和水分，口腔内的环境保持适合微生物发育的温度(37℃)、pH(接近中性)。

作为诱发牙周病的代表性的微生物有变异链球菌(Streptococcus mutans)和中间普雷沃菌(Prevotella intermedia)。该类微生物引起将食物内存在的蔗糖(Sucrose)生成葡萄糖(Glucose)和果糖(Fructose)的微生物代谢过程，从而在牙面上形成作为葡萄糖的聚合物的不溶性葡聚糖(Glucan)。在该过程中，因葡聚糖而口腔内的其他微生物粘贴在牙面上，形成牙面生物膜(biofilm)，即牙菌斑(Dental plaque)。在经形成的牙菌斑的内部因含有变异链球菌的乳酸菌而被积累的乳酸溶解牙齿表面的牙釉质，导致龋齿。另外，因该各种菌的繁殖产生的产物，牙槽骨被溶解，产生牙周病。

牙周病经常还被称为风齿，根据发病程度被分为牙龈炎(gingivitis)和牙周炎(periodontitis)。作为症状较轻且恢复快的形态的牙周病，仅局限在牙床，即软组织上的形态被称为牙龈炎，该炎症发展至牙床和牙槽骨周边时被称为牙周炎。

另外，牙龈(牙床)和牙齿之间有“V”字形的间隙，牙周病是指细菌攻击牙槽(sulcus)的牙龈线下面部分，使牙周韧带和相邻组织受损。发生炎症并使更多的组织受损，进而发展成牙周袋(periodontal pocket)，牙周炎越严重，牙周袋的深度越深。随着牙周袋的加深，在牙周韧带发生炎症，还会引起骨质流失。

为了抑制所述龋齿以及牙周病，使用了作为抗菌物质的碳酸氢钠(NaHCO3)、三氯生(Triclosan,C12H7Cl3O2)、氯化十六烷基吡啶、多磷酸盐(Polyphosphate)以及氟化钠(NaF)、万古霉素(Vancomycin)、洗必泰(Chlorhexidine)以及螺旋霉素(Spiramycin)等抗生物质、氯化钠(NaCl)、尿囊素氯羟基铝(Allantoine Chlorohydroxy Aluminum)、氨基己酸(Aminocaproic Acid)、生育酚醋酸酯(tocopherol acetate)等的合成原料、或者有机/无机氟。然而，上述方法虽然对预防龋齿有效，却有引起呕吐、腹泻等对抗生物质产生抗药性的缺点，因此使用受限。尤其，以往对龋齿、牙周炎等细菌感染疾病，通常使用了抗生剂，然而抗生剂不仅一同杀灭对人体有益的细菌，而且使用过量时，导致产生抗药细菌、降低患者的免疫力、由此导致的感染病的慢性化、二重感染等副作用。

不仅如此，作为牙膏的发泡剂，广泛使用月桂醇硫酸酯钠等表面活性剂，然而其被公知为是引起刺激以及炎症的成分。

因此，仍然需要有效抑制牙面上形成的生物膜，即牙菌斑的同时，安全性优秀的用于口腔的组合物。

【现有技术文献】

【专利文献】

1.美国授权专利第9,114,097号(2015年8月25日授权)

发明内容

为此，本发明人确认到可以提供一种含有植物油，从而通过牙齿涂层效果，即便不含有抗菌剂，也能有效抑制生物膜的形成，预防牙齿变色，而且缓和因表面活性剂引起的刺激，同时对唇部保湿也有效的用于口腔的组合物，具体提供一种牙膏组合物，由此完成了本发明。

因此，本发明的目的在于，提供一种抑制生物膜的形成，从而抑制龋齿以及牙周病的同时，安全性优秀的用于口腔的组合物。

为了达成所述目的，本发明提供一种抑制生物膜形成的组合物，其作为有效成分含有：选自由椰子油、橄榄油、葵花籽油、葡萄籽油以及蓖麻油而成的群中的一种以上的植物油；高级醇以及高级脂肪酸中的一种以上；以及阴离子表面活性剂以及非离子表面活性剂中的一种以上。

本发明的组合物不含有有安全隐患的抗菌剂而对身体安全的同时，能够有效抑制牙面上生物膜的形成，与此同时，防止因咖啡、茶等引起的牙齿变色，缓和因表面活性剂引起的刺激，对唇部保湿也有效。

具体实施方式

根据本发明的组合物，其作为有效成分含有植物油；高级醇以及高级脂肪酸中的一种以上；以及阴离子表面活性剂以及非离子表面活性剂中的一种以上。

本发明中使用的植物油在牙齿上形成涂层来抑制生物膜的形成，缓和因表面活性剂引起的刺激，对唇部保护也有效，所述植物油为选自椰子油、橄榄油、葵花籽油、葡萄籽油、蓖麻油等的一种以上。

在本发明中，植物油相对于组合物总重量，含有5至50重量％，优选为10至40重量％，更加优选为15至30重量％的量。当含量不足5重量％时，难以显示基于牙齿涂层的生物膜抑制以及预防牙齿变色效果，当含量超过50重量％时，不仅是剂型稳定性降低，而且发泡力以及清爽度等使用感会降低。

根据本发明的组合物为了体现具有如鲜奶油的柔和的使用感的剂型，作为剂型剂，使用高级醇以及高级脂肪酸中的一种以上。在本发明中，高级醇是选自十八烷醇、鲸蜡醇等中的一种以上，高级脂肪酸是选自硬脂酸、棕榈酸(cetylic acid)等中的一种以上。

在本发明中，高级醇以及高级脂肪酸中的一种以上相对于组合物总重量含有3至15重量％，优选为5至12重量％，更加优选为6至10重量％的量。当含量不足3重量％或者超过15重量％时，无法形成牙膏的糊状剂型，剂型稳定性降低或者引起口腔内刺激。

根据本发明的组合物为了形成细密的泡沫，使用阴离子表面活性剂以及非离子表面活性剂中的一种以上的表面活性剂，更加优选使用阴离子表面活性剂的一种以上和非离子表面活性剂中的一种以上的混合物。在本发明中，作为阴离子表面活性剂，可以使用月桂醇硫酸酯钠等，作为非离子表面活性剂，可以使用山梨坦硬脂酸酯、月桂基葡糖苷等。

在本发明中，表面活性剂相对于组合物总重量，含有0.5至5重量％，优选为1至4.5重量％，更加优选为1.5至4重量％的量。当含量不足0.5重量％或者超过5重量％时，无法形成牙膏的糊状剂型，剂型稳定性降低或者引起口腔内刺激。

根据本发明的组合物，如果目的是抑制牙齿表面生物膜的形成，对于其剂型不作特别限定。具体地，作为用于口腔清洁的产品，例如可以剂型化为牙膏、用于口腔的清洗剂、口腔喷雾、用于清洗口腔的纸巾、牙齿美白剂等产品，优选为，可以剂型化为牙膏。

根据本发明的组合物根据剂型以及使用目的，可以含有通常所使用的研磨剂、润湿剂、辅助发泡剂、结合剂、甜味剂、pH调节剂、防腐剂、药效成分、香料、增白剂、色素、溶剂等。

根据本发明的组合物作为有效成分含有如所述的植物油；高级醇或者高级脂肪酸；以及阴离子或者非离子表面活性剂，从而抑制牙齿表面形成生物膜的效果显著，对因咖啡、茶等引起的牙齿变色的预防也有效，而且有效缓和因使用表面活性剂引起的刺激。不仅如此，具有如鲜奶油的质感而柔和地涂抹在牙齿上，使用时泡沫细密，使用后不仅是牙齿，而且也使唇部具有保湿感，赋予柔和的感觉。

以下举出试验例以及制造例来更加具体说明本发明的结构以及效果。然而，其试验例以及制造例是为了理解本发明而作为示例的目的来提供的，本发明的范畴以及范围并不由以下例进行限定。

【参考例】实施例以及比较例的制造

按照以下表1至5的组分，通过本领域的通常的方法制造出比较例1至12以及实施例1至23的牙膏组合物。

【表1】

【表2】

【表3】

【表4】

【表5】

【试验例1】剂型稳定性评价

针对在所述参考例中制造的实施例1至23以及比较例1至12的组合物，通过糊状形态评价了其剂型程度、剂型稳定性。

通过评价稳定性，确认了在0℃、45℃、60℃、温度循环试验(-10℃～45℃，每次保持11小时)下4周期间有没有发生变色、变臭、分离等。

具体地，将完成糊状形态的剂型化的情况评价为O，将未完成剂型化的情况评价为X，将未完成剂型的分离而剂型稳定的情况评价为O，将完成分离的情况评价为X。

【表6】

如上述表6所示，当为高级醇和高级脂肪酸的含量超过适当范围的比较例4以及5的情况时，没有很好完成糊状形态的剂型化，当为表面活性剂的含量不足适当范围的比较例6的情况和油的含量超过适当范围的比较例9的情况时，发生了剂型的分离。

基于所述评价结果，在以下的试验例中，针对比较例1至3、7、8、10至12以及实施例1至23，进行了功效检验以及实验。

【试验例2】对抑制生物膜形成的效果的评价(In-vitro)

在所述参考例中制造的比较例1至3、7、8、10至12以及实施例1至23中，分别利用作为牙齿模拟物质的羟基磷灰石圆片(伯腾公司；Biotek)进行了用于评价生物膜形成抑制能力的离体实验(In-vitro test)。

a)在脑心浸液肉汤(Brain Heart infusion broth)(培养基，生物科学；Difco,BDBiosciences)接种变异链球菌(Streptococcus mutans,KCTC 3065)之后，在35℃的培养器(Imperiallll Incubator,Lab Line Instruments Inc.)内培养24小时。

b)将羟基磷灰石圆片浸在70％乙醇中30分钟进行灭菌之后，用灭菌离子水清洗3次。

c)在24孔板(伯昂兴业有限公司；BD Falcon)一片一片放入清洗后的羟基磷灰石圆片，完全干燥。

d)将比较例1至3、7、8、10至12以及实施例1至23的样品各自利用离子水稀释20％之后，取1mL分株到盛有羟基磷灰石圆片的孔板，处理3分钟。

e)利用灭菌离子水清洗羟基磷灰石圆片，去除残留的样品。

f)将羟基磷灰石圆片移至另外的24孔板之后，在各个孔板分别放入1mL的含有1％蔗糖的脑心浸液肉汤，接种1μL的菌培养液。

g)将接种菌的24孔板在35℃的培养器内培养3日，以形成生物膜。

h)3日后观察菌是否增殖，并利用灭菌离子水清洗羟基磷灰石圆片之后，分别分株1mL的0.1％的结晶紫(Crystal violet)溶液(西格玛；Sigma)，染色30分钟。

i)利用灭菌离子水清洗羟基磷灰石圆片之后，在常温下完全干燥。

j)放入1mL的70％乙醇，直到经染色的羟基磷灰石圆片脱色至白色再提取染料。

l)按照1/2步骤稀释提取液之后，利用分光光度计(酶标仪190，美谷分子仪器有限公司；Spectramax 190,Molecular Devices Corporation)检测吸光度(OD 590nm)。

m)在检测值上减去空白孔细胞(Blank well)的值，选择由2以下的数值检测的稀释比例值，计算出生物膜形成抑制能力。

在以下表7中显示该结果。

【表7】

如上述表7所示，不含有椰子油以及抗菌剂的比较例1、3、10至12以及椰子油的含量不足适当范围的比较例8的情况显示的生物膜抑制效果相当低。含有在现有产品中使用的抗菌剂氯化十六烷基吡啶的比较例2相比含有植物油15重量％以上的量的实施例，显示的生物膜抑制效果低。与此相反地，在本发明中含有作为牙齿涂层剂使用的椰子油、橄榄油等全部的植物油的比较例7和实施例相比比较例1以及3，全部显示生物膜抑制效果相当高。

一方面，比较含有作为抗菌剂的氯化十六烷基吡啶而不含有椰子油的比较例2和实施例时，显示当为含有5重量％的椰子油的实施例2的情况时，抗菌效果更低，然而在除了实施例2之外的含有15重量％以上的椰子油以及橄榄油的其他实施例中，可以确认到相比比较例2显示类似或者更加优秀的生物膜形成抑制效果。

【试验例3】针对预防牙齿变色效果的评价(In-vitro)

针对所述参考例中制造的比较例1、3以及实施例1、2、4、6、10、13样品，利用作为牙齿模拟物质的羟基磷灰石圆片(伯腾公司；Biotek)进行了用于评价牙齿变色抑制能力的离体实验(In-vitro test)。

a)利用ShadeEye-EX(松风齿科器材有限公司；Shofu Dental corporation)检测了羟基磷灰石圆片的亮度(Lightness)的初始値。

b)将比较例1、3以及实施例1、2、4、6、10、13样品分别利用刷光机适用在圆片3分钟之后，用流动水清洗30秒。

c)将清洗后的羟基磷灰石圆片浸在美式咖啡之后，经过4小时、8小时每次取出3个，检测亮度变化值。

在以下表8中示出了该检测结果。

【表8】

如上述表8所示，为了观察阴离子表面活性剂的种类是否对预防牙齿变色产生影响，将含有的表面活性剂的种类设置为不同而制造的比较例1以及3在预防变色方面没有显示大的差异。

与此相反地，当为含有椰子油等油的实施例时，相比不含有椰子油的比较例1以及3，显示高的预防牙齿变色效果。尤其，预防牙齿变色效果在适用变色物质并经过8小时左右之后，有明显差异。

【试验例4】针对口腔刺激性的评价(In-vitro)

在所述参考例中制造的比较例1、2、3、7和实施例1、2、4、6、10、13中，分别利用琼脂扩散法(Agar diffusion assay)试验法(ISO 10993-5:2009(E)Biological evaluationof medical device Part 5test for in vitro cytotoxicity:Agar diffusion assay)评价了口腔刺激程度。

a)将L929(小鼠成纤维细胞；Mouse fibroblast,ACTT,USA)细胞与含有10％胎牛血清(FBS)和1％青霉素-链霉素的RPMI-1640培养基(Gibco,USA)一同在6孔板上以每个孔1×105的密度分别分株2mL，然后将其在5％的CO₂、37℃条件下培养24小时。

b)24小时之后，如果细胞在孔内形成80％以上的单一细胞层，则收取培养液，分别分株2ml含有1.5％的琼脂糖(西格玛奥德里奇；Sigma-Aldrich)、10％的FBS(Gibco)以及0.0033％的中性红(Neutral red)(西格玛奥德里奇；Sigma-Aldrich)的50℃的不含苯酚的DMEM(Gibco)培养基，然后将其在5％的CO₂、37℃条件下凝固45分钟。

c)将比较例1、2、3、7和实施例1、2、4、6、10、13分别在RPMI-1640培养基中稀释为25％的试验物质分别以15μl分株到直径为8mm的纸盘(宏宜仪器有限公司；Advantec,Japan)上并浸湿，然后将浸湿的纸盘放在在b)中凝固的琼脂糖上面之后，在5％的CO₂、37℃条件下培养24小时。

d)利用15cm尺测定从纸盘到生成的环的边缘为止的距离。

在以下表9中示出了该测定结果。

【表9】

如上述表9所示，显示出含有谷氨酸盐系列的表面活性剂的比较例3其口腔刺激最少。

一方面，将比较例1和实施例1、2、4、6、10、13进行比较时，确认到其虽然全部含有相同含量的月桂醇硫酸酯钠，然而在口腔刺激程度上存在差异，尤其，可以确认到当为实施例时刺激较低。由此，可以预测到椰子油有助于缓和因硫酸盐系列的表面活性剂引起的刺激。

然而，观察比较例7则可以确认到当表面活性剂的含量超过5重量％时，因椰子油引起的缓和刺激的效果不明显。

【试验例5】感官评价

通过构成对牙膏产品的使用感进行评价训练的专业小组，进行了感官评价。针对在所述参考例中制造的比较例1、实施例1、2、4、6、10、13，10名专家小组将7种产品以每日3次，每周3日刷牙3周之后，满分为9分进行了评价。在以下表10中示出了该评价结果。

【表10】

如上述表10的评价结果可知，如果是发泡力，则不含油的比较例1高，在实施例1、2、4、6、10、13中，含较少量油的实施例2显示较高的发泡力，与此相反地，含较多量油的实施例4显示低的发泡力，由此可以确认到油含量与发泡力有相应的相关关系。

与此相反地，在柔和度方面，实施例1、2、4、6、10、13相比比较例1显著优秀。

另外，在唇部保湿方面，含油的实施例1、2、4、6、10、13皆显示优秀的保湿力。

通过上述评价结果，根据本发明的用于口腔的组合物在使用时泡沫细密而柔和地涂抹在牙齿上，使用后不仅是牙齿，唇部也能感受到柔和的感觉，由此，有效抑制生物膜生成的同时，因表面活性剂引起的刺激也少，对唇部保护也有效，在该点上相比现有用于口腔的产品有新的优点。

【剂型例1】用于口腔的清洗剂

【表11】

成分名	含量(重量％)
		净化水	至100
氟化钠	0.03
		椰子油	10
鲸蜡醇	3
		硬脂酸	3
山梨坦硬脂酸酯	0.6
		月桂醇硫酸酯钠	1
山梨糖醇液(70％)	10.00
		糖精钠	0.01
组合香料	0.10

【剂型例2】牙齿美白剂

【表12】

Claims (7)

1.一种用于抑制生物膜形成的组合物，其作为有效成分含有：选自由椰子油、葵花籽油、葡萄籽油以及蓖麻油而成的群中的一种以上的植物油；高级醇以及高级脂肪酸中的一种以上；以及阴离子表面活性剂以及非离子表面活性剂中的一种以上，

所述植物油相对于组合物总重量，含有5至50重量％的量，

所述高级醇以及高级脂肪酸中的一种以上相对于组合物总重量，含有3至15重量％的量，

所述表面活性剂相对于组合物总重量，含有0.5至5重量％的量。

2.根据权利要求1所述的用于抑制生物膜形成的组合物，其特征在于，所述高级醇为十八烷醇以及鲸蜡醇中的一种以上，所述高级脂肪酸为硬脂酸以及棕榈酸中的一种以上。

3.根据权利要求1所述的用于抑制生物膜形成的组合物，其特征在于，所述阴离子表面活性剂为月桂醇硫酸酯钠，所述非离子表面活性剂为山梨坦硬脂酸酯或者月桂基葡糖苷。

4.根据权利要求1所述的用于抑制生物膜形成的组合物，其特征在于，所述生物膜为形成在口腔内或者牙齿上的生物膜。

5.根据权利要求1所述的用于抑制生物膜形成的组合物，其特征在于，所述组合物预防牙齿变色。

6.一种将根据权利要求1至5中任一项所述的用于抑制生物膜形成的组合物进行剂型化而成的用于口腔清洁的产品。

7.根据权利要求6所述的用于口腔清洁的产品，其特征在于，其为牙膏、用于口腔的清洗剂、口腔喷雾、用于清洗口腔的纸巾或者牙齿美白剂。