CN110897069A - 一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料及其制备方法 - Google Patents
一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其组成成分及重量份数如下:海参皂苷5‑10份,麦麸纤维30‑40份,柠檬酸0.5‑1份,三氯蔗糖0.1‑0.2份,果胶2‑3份,β‑环状糊精3‑4份,果粉0.1‑0.2份,水补充至总质量份数为100份。本发明固体饮料具有增强免疫力的功效,是一种营养补充剂,既能促进肠道蠕动减缓有害物质的吸收,又可以提高人体免疫力。食用量一般为100‑300g/人/天。
Description
技术领域
本发明属于功能性食品技术领域,尤其是一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料及其制备方法。
背景技术
海参是高蛋白、低脂肪、低胆固醇的食物,具有很高的营养价值和食补作用。海参皂苷是海参的主要活性物质之一,由苷元和糖链通过β-糖苷键结合而成。海参皂苷具有多种多样的生理活性,包括:抗肿瘤作用、抗真菌作用、溶血作用及免疫调节作用等。目前市场上多直接销售生鲜海参或干海参,但从海参加工后残留的海参废渣中提取海参皂苷继续利用并未被广泛关注。同时随着国民健康饮食观念的转变,膳食纤维作为维持人体健康不可或缺的七大营养素之一,日渐引起人们关注。其中,麦麸纤维具有促进肠道蠕动,延缓和减少有害物质的吸收,预防癌症,抑制胆固醇的吸收,预防高血脂、高血压等功能。
前市场上现有的固体饮料不仅功能单一,且原料搭配没有科学合理性,其增强免疫力的功效大多效果不够明显,无法满足消费者对此类固体饮料的功能需求。
通过检索,尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术的不足之处,提供一种高耐性具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料及其制备方法,该饮料富含海参皂苷及麦麸纤维,是一种营养补充剂,既能促进肠道蠕动减缓有害物质的吸收,又可以提高人体免疫力。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其组成成分及重量份数如下:
海参皂苷5-10份,麦麸纤维30-40份,柠檬酸0.5-1份,三氯蔗糖0.1-0.2份,果胶2-3份,β-环状糊精3-4份,果粉0.1-0.2份,水补充至总质量份数为100份。
而且,所述海参皂苷的制备步骤如下:
首先将海参废渣干燥处理成粉末状,称取海参废渣粉末进行乙醇回流提取,提取所得经萃取去除脂质,提取所得浸膏再进行大孔吸附树脂纯化即得海参皂苷。
而且,所述干燥处理及乙醇回流提取的步骤具体为:
首先将海参废渣在30℃下进行烘干处理,用粉碎机粉碎至40目,将海参废渣粉末加入6倍质量的90%乙醇水溶液,置于回流装置中回流提取3次,每次1h,收集提取液,置于旋转蒸发器中,温度设置50℃,旋转蒸发制成浸膏,备用。
而且,所述萃取及大孔吸附树脂纯化的步骤具体为:
将乙醇回流提取产物分散于水溶液中,加入相同体积的二氯甲烷溶液,震荡,静置分层,弃去上层,保留下层,重复萃取3次,保留水层;在水层中加入相同体积的正丁醇溶液,震荡,静止分层,将水层重复萃取3次,合并3次萃取的上层溶液,利用旋转蒸发器蒸发制成浸膏,备用;
D101大孔吸附树脂以95%乙醇水溶液湿法装柱,用蒸馏水洗脱至无醇味;吸取供试品水溶液上样D101大孔柱,依次用蒸馏水、15%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液、90%乙醇水溶液洗脱,洗脱速度1BV/h,收集90%乙醇部分的洗脱液,用旋转蒸发器浓缩溶液,进行冷冻干燥,得到海参皂苷。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料的制备方法,步骤如下:
⑴原辅料处理:海参皂苷进行调配前进行脱苦处理,脱苦时间为20min,脱苦温度为20℃;
⑵将麦麸纤维、柠檬酸、三氯蔗糖、果胶、β-环状糊精、果粉分别过100目筛并添加;
⑶所有物料均匀混合,即得具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,使产品保持干燥,装袋。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料在制备增强免疫功能的产品方面中的应用。
而且,所述免疫功能为:
提高脾脏指数和胸腺指数;
和/或,提高碳廓清指数和吞噬指数;
和/或,提高脾细胞增殖活性;
和/或,提高肠道免疫球蛋白A含量;
和/或,提高血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料在制备提高脾脏指数和胸腺指数的产品,和/或在制备提高碳廓清指数和吞噬指数的产品,和/或在制备提高脾细胞增殖活性的产品,和/或在制备提高肠道免疫球蛋白A含量的产品,和/或在制备提高血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量的产品方面中的应用。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料的食用方法,所述食用方法为100-300g/人/天。
本发明取得的优点和积极效果为:
1、本发明固体饮料具有增强免疫力的功效,是一种营养补充剂,既能促进肠道蠕动减缓有害物质的吸收,又可以提高人体免疫力。食用量一般为100-300g/人/天。
2、经本发明的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料调配后对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的调节作用研究发现,本海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料可用于制备增强免疫功能的产品。
3、经本发明免疫功能调节作用研究表明,与模型组相比,不同海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃剂量组的脾脏指数与胸腺指数均出现增加趋势,且海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组和高剂量组小鼠的脾脏指数极显著增加(p<0.01);与模型组相比,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组、高剂量组差异极显著(p<0.01);与模型组相比海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量、高剂量组B细胞增殖能力均有提高,而且海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组B细胞增殖能力显著提高(p<0.05);与模型组相比,T细胞增殖能力均有提高,且海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组和高剂量组有显著提高(p<0.05);与模型组相比,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量、高剂量组的小鼠肠道免疫球蛋白A含量极显著升高(p<0.01);与模型组相比,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组、高剂量组的血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量均极显著升高(p<0.01)。本发明实验充分证明海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下具有较强的增强免疫功能的作用。
附图说明
图1为本发明中不同配比海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠脾细胞增殖活性的影响结果图其中,数据表示为平均值±SD,n=12,#p<0.05,##p<0.01模型组与正常组相比;*p<0.05,**p<0.01剂量组与模型组相比;
图2为本发明中海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠sIgA含量的影响图其中,数据表示为平均值±SD,n=12,#p<0.05,##p<0.01模型组与正常组相比;*p<0.05,**p<0.01剂量组与模型组相比;
图3为本发明中海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠血清细胞因子IL-1β含量的影响图其中,数据表示为平均值±SD,n=12,#p<0.05,##p<0.01模型组与正常组相比;*p<0.05,**p<0.01剂量组与模型组相比;
图4为本发明中海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠血清细胞因子IL-6含量的影响图其中,数据表示为平均值±SD,n=12,#p<0.05,##p<0.01模型组与正常组相比;*p<0.05,**p<0.01剂量组与模型组相比;
图5为本发明中海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠血清细胞因子IL-18含量的影响图其中,数据表示为平均值±SD,n=12,#p<0.05,##p<0.01模型组与正常组相比;*p<0.05,**p<0.01剂量组与模型组相比;
图6为本发明中海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠血清细胞因子TNF-α含量的影响图其中,数据表示为平均值±SD,n=12,#p<0.05,##p<0.01模型组与正常组相比;*p<0.05,**p<0.01剂量组与模型组相比。
具体实施方式
下面详细叙述本发明的实施例,需要说明的是,本实施例是叙述性的,不是限定性的,不能以此限定本发明的保护范围。
本发明中所使用的原料,如无特殊说明,均为常规的市售产品;本发明中所使用的方法,如无特殊说明,均为本领域的常规方法。
一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其组成成分及重量份数如下:
海参皂苷5-10份,麦麸纤维30-40份,柠檬酸0.5-1份,三氯蔗糖0.1-0.2份,果胶2-3份,β-环状糊精3-4份,果粉0.1-0.2份,水补充至总质量份数为100份。
较优地,所述海参皂苷的制备步骤如下:
首先将海参废渣干燥处理成粉末状,称取海参废渣粉末进行乙醇回流提取,提取所得经萃取去除脂质,提取所得浸膏再进行大孔吸附树脂纯化即得海参皂苷。
较优地,所述干燥处理及乙醇回流提取的步骤具体为:
首先将海参废渣在30℃下进行烘干处理,用粉碎机粉碎至40目,将海参废渣粉末加入6倍质量的90%乙醇水溶液,置于回流装置中回流提取3次,每次1h,收集提取液,置于旋转蒸发器中,温度设置50℃,旋转蒸发制成浸膏,备用。
较优地,所述萃取及大孔吸附树脂纯化的步骤具体为:
将乙醇回流提取产物分散于水溶液中,加入相同体积的二氯甲烷溶液,震荡,静置分层,弃去上层,保留下层,重复萃取3次,保留水层;在水层中加入相同体积的正丁醇溶液,震荡,静止分层,将水层重复萃取3次,合并3次萃取的上层溶液,利用旋转蒸发器蒸发制成浸膏,备用;
D101大孔吸附树脂以95%乙醇水溶液湿法装柱,用蒸馏水洗脱至无醇味;吸取供试品水溶液上样D101大孔柱,依次用蒸馏水、15%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液、90%乙醇水溶液洗脱,洗脱速度1BV/h,收集90%乙醇部分的洗脱液,用旋转蒸发器浓缩溶液,进行冷冻干燥,得到海参皂苷。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料的制备方法,步骤如下:
⑴原辅料处理:海参皂苷进行调配前进行脱苦处理,脱苦时间为20min,脱苦温度为20℃;
⑵将麦麸纤维、柠檬酸、三氯蔗糖、果胶、β-环状糊精、果粉分别过100目筛并添加;
⑶所有物料均匀混合,即得具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,使产品保持干燥,装袋。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料在制备增强免疫功能的产品方面中的应用。
较优地,所述免疫功能为:
提高脾脏指数和胸腺指数;
和/或,提高碳廓清指数和吞噬指数;
和/或,提高脾细胞增殖活性;
和/或,提高肠道免疫球蛋白A含量;
和/或,提高血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料在制备提高脾脏指数和胸腺指数的产品,和/或在制备提高碳廓清指数和吞噬指数的产品,和/或在制备提高脾细胞增殖活性的产品,和/或在制备提高肠道免疫球蛋白A含量的产品,和/或在制备提高血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量的产品方面中的应用。
如上所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料的食用方法,所述食用方法为100-300g/人/天。
本发明的制备及检测如下:
使用到的相关材料与方法可以为:
1、动物
C57小鼠60只,雄性,体重18±2g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司(许可证号:SCXK(京)2016-0002)。
2、药品与试剂
海参废渣(百德福生物科技有限公司),二氯甲烷(国药集团化学试剂有限公司),无水乙醇(天津市江天化工技术有限公司),正丁醇(国药集团化学试剂有限公司),环磷酰胺(北京Solarbio生物科技公司),PBS缓冲液(国药集团化学试剂有限公司),刀豆蛋白(北京Solarbio生物科技公司),脂多糖(北京Solarbio生物科技公司),RPMI-1640(美国Hyclone公司),MTT(美国Sigma公司),胎牛血清(美国Hyclone公司),红细胞裂解液(北京Solarbio生物科技公司),小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)、小鼠白细胞介素1β(IL-1β)、小鼠白细胞介素6(IL-6)、小鼠白细胞介素18(IL-18)ELISA试剂盒(上海恪敏生物科技有限公司),大孔吸附树脂(D101)。
3、主要仪器
TU-1810系列紫外可见分光光度计(北京普析通用有限责任公司),Rt2100c酶标检测仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司),DE-100g万能高速粉碎机(浙江红景天工贸有限公司),AB204-N电子分析天平(上海精科实业有限公司),DH-101电热恒温鼓风干燥箱(天津中环实验电炉公司),MODULYOD-203冷冻干燥机(美国Thermo fisher科技公司),ST40R冷冻离心机(德国Thermo fisher科技公司),RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
所使用的海参皂苷可以按照如下方法制备:
海参废渣30℃下进行烘干处理,用粉碎机粉碎至40目,称取部分海参废渣粉末加入6倍量(质量)的90%乙醇水溶液,置于回流装置中回流提取3次,每次1h,收集提取液,置于旋转蒸发器中,温度设置50℃,旋转蒸发制成浸膏,备用。
将浸膏分散于水溶液中,加入相同体积的二氯甲烷溶液,震荡,静置分层,弃去上层,保留下层,重复萃取3次,保留水层;在水层中加入相同体积的正丁醇溶液,震荡,静止分层,将水层重复萃取3次,合并3次萃取的上层溶液,利用旋转蒸发器蒸发制成浸膏,备用。
D101大孔吸附树脂以95%乙醇水溶液湿法装柱,用蒸馏水洗脱至无醇味;吸取供试品水溶液上样D101大孔柱,依次用蒸馏水、15%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液、90%乙醇水溶液洗脱,洗脱速度1BV/h,收集90%乙醇部分的洗脱液。用旋转蒸发器浓缩溶液,进行冷冻干燥,得到海参皂苷。
一、海参皂苷增强免疫功能作用的研究
将实验组分为空白组、模型组、海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料(配方所含海参皂苷份数分别为1、5、10份)剂量组,即分别为低剂量组、中剂量组、高剂量组。各组均每天灌胃一次,空白组及模型组灌以等量生理盐水,连续14天。在实验的第8、9、10天连续三天腹腔注射80mg·kg-1环磷酰胺溶液,建立免疫低下模型。每天记录一次小鼠的体重,并观察小鼠一般状态,活动程度等。
末次给药后。禁食脱水12h,称重,从颈部取出处死,切开胸腔和腹腔,剥去脾脏和胸腺称重。计算脾脏指数和胸腺指数。
末次给药24h后,在每只小鼠的尾部静脉处按0.1mL/10g的量注入浓度为10%的墨汁,在不同的时间两次眼眶取血20μL,分别加入2mL提前配制好的质量浓度0.1%NaCO3溶液中,摇匀,及时于680nm测定吸光度A。将小鼠脱颈处死,取免疫器官称重,计算碳廓清指数(K)和吞噬指数(α)。
将小鼠脱颈处死,于75%酒精浸泡30s,无菌条件下将小鼠胸腔剪开,取脾脏置于预冷PBS缓冲液中,去除结缔组织,剪下5-10mm3大小,200目细胞筛上挤压,利用PBS缓冲液将细胞筛冲洗干净,收集细胞悬液。于4℃下1000r/min离心5min,收集沉淀,加入1mL红细胞裂解液,室温裂解3min,加入1mL胎牛血清,4℃离心,1000r/min离心5min,此操作反复进行2-3次,加入RPMI-1640完全培养基重悬细胞,4℃下1000r/min离心5min,弃上清,该步骤重复两次,将脾细胞移入细胞培养瓶中,37℃,5%CO2培养箱中培养2h,弃贴壁细胞,取未贴壁细胞为分离出的脾淋巴细胞。脾淋巴细胞增殖活性用MTT实验进行测定。
小鼠处死后,从盲肠到肠的远端5cm收集肠样品,在1mLPBS中匀浆。匀浆的溶液于4℃,3000r/min离心15min,以去除颗粒物质。弃去沉淀,收集上清液,利用ELISA测定sIgA含量。
末次给药24h后,眼眶取血,离心取血清,采用ELISA法测定IL-1β,IL-6,IL-18,TNF-α的含量。
1、海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对免疫低下小鼠免疫器官指数的影响
如表1所示,与正常组相比,模型组的脾脏指数与胸腺指数均极显著低于正常组(p<0.01),由此可以说明,环磷酰胺的注射导致了免疫器官的萎缩。对免疫抑制小鼠灌胃海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料后,与模型组相比,不同配比海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃剂量组的脾脏指数与胸腺指数均出现增加趋势,且中剂量组和高剂量组小鼠的脾脏指数极显著增加(p<0.01)。由此可以推测海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下可有效缓解环磷酰胺引起的免疫抑制小鼠脏器指数的萎缩和损伤。
注:数据表示为平均值±SD,n=12,##p<0.01模型组与空白组相比;**p<0.01剂量组与模型组相比。
2、海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对免疫低下小鼠碳廓清指数和吞噬指数的影响
由表2可以看出,不同配比海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃剂量组的碳廓清指数和吞噬指数与模型组相比有所提高。与空白组相比,模型组差异极显著(p<0.01)。与模型组相比,海参皂苷中剂量组、高剂量组(所含海参皂苷份数为5份及10份)差异极显著(p<0.01)。结果显示海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下能显著提高廓清指数(K)和吞噬指数(α),增加免疫抑制小鼠吞噬细胞数量,提高吞噬细胞的活力,增强吞噬功能,对免疫抑制小鼠固有免疫有一定促进作用。
组别 | 剂量(mg·kg<sup>-1</sup>) | K | α |
空白组 | - | 0.281±0.015 | 2.131±0.11 |
模型组 | - | 0.071±0.012<sup>##</sup> | 0.620±0.108<sup>##</sup> |
低剂量组 | 2.5 | 0.100±0.004 | 0.736±0.032 |
中剂量组 | 5.0 | 0.171±0.015<sup>**</sup> | 1.465±0.129<sup>**</sup> |
高剂量组 | 10.0 | 0.193±0.007<sup>**</sup> | 1.822±0.059<sup>**</sup> |
注:数据表示为平均值±SD,n=12,##p<0.01模型组与空白组相比;**p<0.01剂量组与模型组相比。
图1为不同配比海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠脾细胞增殖活性的影响结果。经环磷酰胺诱导以后,小鼠T淋巴细胞和B淋巴细胞的增值能力与正常组对比极显著降低(p<0.01);与模型组相比海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组、高剂量组(所含海参皂苷份数为5份及10份)B细胞增殖能力均有提高,中剂量组B细胞增殖能力显著提高(p<0.05);与模型组相比,T细胞增殖能力均有提高,且海参皂苷中剂量组、高剂量组(所含海参皂苷份数为5份及10份)有显著提高(p<0.05)。由此说明海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下对环磷酰胺诱导后的免疫抑制小鼠B淋巴细胞、T淋巴细胞的增殖能力具有一定的恢复作用。
4、海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对免疫低下小鼠肠道免疫球蛋白A含量的影响
图2可见,与正常组相比,模型组小鼠肠道免疫球蛋白A(sIgA)含量极显著性降低(p<0.01)。与模型组相比,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料中剂量组、高剂量组(所含海参皂苷份数为5份及10份)的小鼠肠道免疫球蛋白A含量极显著升高(p<0.01)。由此可见,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下可通过肠道中的产IgA细胞提高肠粘膜sIgA含量,从而调节肠粘膜免疫,减少病原体感染。
5、海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对免疫抑制小鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量的影响
从图3-6的IL-1β测定结果可以看出,在环磷酰胺的诱导下,小鼠血清中的IL-1β含量极显著下降(p<0.01),且当灌胃海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份的情况下,小鼠血清中的IL-1β含量为最高值。由IL-6测定结果可以看出,由于环磷酰胺的诱导,小鼠血清中IL-6的含量出现极显著下降的趋势(p<0.01),经海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃后,与模型组相比,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃剂量组均出现增加趋势,且海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下极显著增加(p<0.01),由此可以说明,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下可诱导小鼠较高的产生IL-6。由IL-18测定结果可以看出,经环磷酰胺诱导后,模型组小鼠血清中的IL-18含量极显著下降(p<0.01)。经过海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃后小鼠血清中IL-18的含量增加,且海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃组在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下小鼠血清IL-18含量极显著增加(p<0.01)。由此说明,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下可较好的诱导小鼠产生IL-18。由TNF-α检测结果可以看出,与模型组相比,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料灌胃组在所含海参皂苷为10份的情况下小鼠血清的TNF-α含量极显著增加(p<0.01)。由此说明海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为10份的情况下对小鼠体内TNF-α表达量具有促进作用。由上述结果可以看出,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下可促进免疫抑制小鼠IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α的表达,增强小鼠体内免疫调节作用,从而影响机体的体液免疫与细胞免疫。
在整个免疫系统信号通路中,引起NOD1/NOD2的反应起着至关重要的作用,NOD1细胞分泌的RIP2、NFκB等细胞因子是通过激活效应细胞来街道细胞免疫应答,NOD2细胞则是通过分泌RIP2、TAK1等因子辅助细胞产生抗体为主要作用,并通过观察IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量来判断免疫功能的强弱,所以本实施例选用IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量作为评估海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠免疫调节的影响的两个指标。
结果表明,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料对小鼠胸腺指数、脾脏指数、碳廓清指数、吞噬指数、脾细胞增殖活性、肠道免疫球蛋白A含量以及IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α含量有一定的影响,从实验结果可以看出随着剂量改变,其影响程度也随之改变。但实例最终表明,海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料在所含海参皂苷份数为5份至10份的情况下增强免疫力的效果最佳,同时也可说明海参皂苷复合麦麸纤维固体饮料具有增强免疫力的功效。
尽管为说明目的公开了本发明的实施例,但是本领域的技术人员可以理解:在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内,各种替换、变化和修改都是可能的,因此,本发明的范围不局限于实施例和附图所公开的内容。
Claims (9)
1.一种具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其特征在于:其组成成分及重量份数如下:
海参皂苷5-10份,麦麸纤维30-40份,柠檬酸0.5-1份,三氯蔗糖0.1-0.2份,果胶2-3份,β-环状糊精3-4份,果粉0.1-0.2份,水补充至总质量份数为100份。
2.根据权利要求1所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其特征在于:所述海参皂苷的制备步骤如下:
首先将海参废渣干燥处理成粉末状,称取海参废渣粉末进行乙醇回流提取,提取所得经萃取去除脂质,提取所得浸膏再进行大孔吸附树脂纯化即得海参皂苷。
3.根据权利要求2所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其特征在于:所述干燥处理及乙醇回流提取的步骤具体为:
首先将海参废渣在30℃下进行烘干处理,用粉碎机粉碎至40目,将海参废渣粉末加入6倍质量的90%乙醇水溶液,置于回流装置中回流提取3次,每次1h,收集提取液,置于旋转蒸发器中,温度设置50℃,旋转蒸发制成浸膏,备用。
4.根据权利要求2或3所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,其特征在于:所述萃取及大孔吸附树脂纯化的步骤具体为:
将乙醇回流提取产物分散于水溶液中,加入相同体积的二氯甲烷溶液,震荡,静置分层,弃去上层,保留下层,重复萃取3次,保留水层;在水层中加入相同体积的正丁醇溶液,震荡,静止分层,将水层重复萃取3次,合并3次萃取的上层溶液,利用旋转蒸发器蒸发制成浸膏,备用;
D101大孔吸附树脂以95%乙醇水溶液湿法装柱,用蒸馏水洗脱至无醇味;吸取供试品水溶液上样D101大孔柱,依次用蒸馏水、15%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液、90%乙醇水溶液洗脱,洗脱速度1BV/h,收集90%乙醇部分的洗脱液,用旋转蒸发器浓缩溶液,进行冷冻干燥,得到海参皂苷。
5.如权利要求1至4任一项所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料的制备方法,其特征在于:步骤如下:
⑴原辅料处理:海参皂苷进行调配前进行脱苦处理,脱苦时间为20min,脱苦温度为20℃;
⑵将麦麸纤维、柠檬酸、三氯蔗糖、果胶、β-环状糊精、果粉分别过100目筛并添加;
⑶所有物料均匀混合,即得具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料,使产品保持干燥,装袋。
6.如权利要求1至4任一项所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料在制备增强免疫功能的产品方面中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述免疫功能为:
提高脾脏指数和胸腺指数;
和/或,提高碳廓清指数和吞噬指数;
和/或,提高脾细胞增殖活性;
和/或,提高肠道免疫球蛋白A含量;
和/或,提高血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量。
8.如权利要求1至4任一项所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料在制备提高脾脏指数和胸腺指数的产品,和/或在制备提高碳廓清指数和吞噬指数的产品,和/或在制备提高脾细胞增殖活性的产品,和/或在制备提高肠道免疫球蛋白A含量的产品,和/或在制备提高血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α含量的产品方面中的应用。
9.如权利要求1至4任一项所述的具有增强免疫力的海参皂苷复合麦麸纤维的固体饮料的食用方法,其特征在于:所述食用方法为100-300g/人/天。
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