CN110893172A - 一种榄香烯聚合物胶束制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种榄香烯聚合物胶束制剂及其制备方法和应用，涉及胶束领域。该制备方法包括：将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂；其中，嵌段共聚物包含亲水片段和疏水片段，亲水片段包括甲氧基聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚环氧乙烷中的一种或多种；疏水片段包括乳酸‑羟基乙酸共聚物、聚己内酯、聚D,L‑丙交酯、聚乙烯亚胺、聚苄基天冬氨酸、聚苄基谷氨酸、聚苯乙烯、聚异丙基丙烯酰胺和聚环氧丙烷中的一种或多种。本申请利用同时包含特定的亲水片段和疏水片段的嵌段共聚物对榄香烯药物进行负载形成载药胶束，具有包封率高、稳定性好且能够减轻药物毒性的优点，能广泛应用于制备用于治疗癌症的靶向药物。

Description

一种榄香烯聚合物胶束制剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及胶束领域，具体而言，涉及一种榄香烯聚合物胶束制剂及其制备方法和应用。
背景技术
抗癌新药榄香烯乳注射剂已于1993年取得良好的疗效和潜在的开发前景。但是，由于上市的乳剂本身的颗粒大，稳定性差，批准的适应症仅限于癌性胸腹水，极大的限制了临床应用范围。现有已研制的榄香烯注射液是对榄香烯乳注射液剂型的改进药物及方法，是将榄香烯及其异构体与丙二醇、Cremophor EL(聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯-35)混合经搅拌、加热、过滤、灌封、充氮、熔封、灭菌，制成注射液，具有制剂稳定，抗癌效果确切，可以静脉输注，扩大了适应症范围，使患者可以连续用药，降低榄香烯的毒副作用，保护机体免疫功能。对脑胶质瘤、脑膜瘤、乳腺癌、肺腺癌、胰腺癌、鼻咽癌等疗效显著。但是还是有部分人会因为榄香烯注射液中使用的辅料Cremophor EL而产生过敏反应，不得不中止使用榄香烯注射液。此外，也有一些临床不良反应的报道，如静脉炎、发热、疼痛、局部组织炎症或因药液外渗(渗漏)引起的坏死。榄香烯的上述剂型因存在种种弊端，极大的限制了临床应用，因此，研制新的剂型，使抗癌新药榄香烯造福于广大患者是当务之急。
利用高分子嵌段共聚物材料制备纳米胶束用于提高疏水性药物的水溶性和稳定性，降低药物的系统毒性有广泛的研究和应用。中国专利CN1524581、CN103768013等专利公开了多种以嵌段共聚物为载体材料的胶束系统，且具有良好的物理稳定性、较高的载药量及一定的肿瘤靶向作用。
鉴于此，特提出本申请。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，该制备方法简单，通过选择适宜的嵌段共聚物，能够实现对榄香烯药物的高效封装，无需额外的辅料助溶，降低了制剂的毒副作用。
本发明的第二目的在于提供一种榄香烯聚合物胶束制剂，其稳定性佳。
本发明的第三目的在于提供一种榄香烯聚合物胶束制剂在制备用于治疗癌症的靶向药物中的应用。
本发明是这样实现的：
第一方面，实施例提供一种榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其包括：将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂；
其中，所述嵌段共聚物包含亲水片段和疏水片段，
所述亲水片段包括甲氧基聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚环氧乙烷中的一种或多种；
所述疏水片段包括乳酸-羟基乙酸共聚物、聚己内酯、聚D,L-丙交酯、聚乙烯亚胺、聚苄基天冬氨酸、聚苄基谷氨酸、聚苯乙烯、聚异丙基丙烯酰胺和聚环氧丙烷中的一种或多种。
在可选的实施方式中，所述嵌段共聚物为双嵌段共聚物；
优选地，所述双嵌段共聚物为甲氧基聚乙二醇-聚D,L-丙交酯、甲氧基聚乙二醇-聚己内酯或甲氧基聚乙二醇-b-聚乙烯亚胺；
优选地，所述双嵌段共聚物为甲氧基聚乙二醇-聚己内酯。
在可选的实施方式中，所述双嵌段共聚物中所述亲水片段和所述疏水片段的质量比为0.1-10:1，优选地，所述双嵌段共聚物中所述亲水片段和所述疏水片段的质量比为1-4:1。
在可选的实施方式中，所述嵌段共聚物的制备方法包括：
将所述亲水片段、所述疏水片段以及辛酸亚锡置于油浴内熔融反应，反应结束后冷却，用二氯甲烷溶解熔融液，接着与无水乙醚混合以沉淀出产物，干燥；
或者；
将所述亲水片段、吡啶、硝基苯氧羰基氯和二氯甲烷混合反应，反应结束后于石油醚中进行沉淀，得到产物，将所述产物与所述疏水片段加入无水三氯甲烷中搅拌反应，接着透析并干燥。
在可选的实施方式中，所述嵌段共聚物与所述榄香烯药物的质量比为10-100：1；
优选地，所述嵌段共聚物与所述榄香烯药物的质量比为10-80：1；
优选地，所述嵌段共聚物与所述榄香烯药物的质量比为30-50：1。
在可选的实施方式中，将所述榄香烯药物负载于所述嵌段共聚物的方法包括：
将所述榄香烯药物和所述嵌段共聚物溶解于有机溶剂中，并向所述有机溶剂中加入水相以进行水化，在加入所述水相之前或之后去除所述有机溶剂；
优选地，所述水相的搅拌速度为100-3000rpm，优选地，所述搅拌速度为800-1500rpm；
优选地，所述水化时的温度为20-70℃，优选地，所述水化时的温度为30-50℃；
优选地，所述水化的时间为20-60min，优选地，所述水化的时间为20-40min；
优选地，所述水相包括水、缓冲水溶液、生理盐水、葡萄糖水溶液中的任一种。
在可选的实施方式中，去除所述有机溶剂的方法包括：将所述有机溶剂在加入水相之前或加入水相且水化完成后采用浓缩、旋转蒸发、挥发或透析中的任一种进行去除所述有机溶剂；
在可选的实施方式中，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、二氧六环、二甲基亚砜和N，N-二甲基甲酰胺中的一种或多种。
第二方面，实施例提供一种榄香烯聚合物胶束制剂，其采用如前述实施方式任一项所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法制备而成；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的载药量为4-6％；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的包封率为95-99％；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的分子量为4000-4500；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的粒径为15-30nm。
第三方面，实施例提供一种榄香烯聚合物胶束制剂在制备用于治疗癌症的靶向药物中的应用。
本发明具有以下有益效果：
本申请提供的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，利用同时包含特定的亲水片段和疏水片段的嵌段共聚物对榄香烯药物进行负载形成载药胶束，具有包封率高、稳定性好且能够减轻药物毒性的优点。本申请的制备方法简单，原料简单易得，适合大规模生产。本发明得到的榄香烯药物聚合物胶束具有小而均匀的粒径，并具有较长时间的稳定性，其能广泛应用于制备用于治疗癌症的纳米药物。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为实施例1提供的嵌段共聚物的1HNMR图谱；
图2为实施例1提供的嵌段共聚物的GPC图谱；
图3为实验例一中榄香烯聚合物胶束制剂(载药胶束)显微形貌表征图；
图4为实验例二的细胞毒性实验中C26结肠癌细胞于24h、48h、72h下的细胞毒性图；
图5为实验例三的肿瘤体积和重量变化实验中C26结肠癌荷瘤Balb/C小鼠抗肿瘤实验中肿瘤体积变化图；
图6为实验例三的肿瘤体积和重量变化实验中C26结肠癌荷瘤Balb/C小鼠抗肿瘤实验中肿瘤重量变化图；
图7为实验例三的局部刺激性实验中血管刺激性图，其中图7中A为对照组的血管刺激性图，B为100mg/kg的榄香烯注射液的血管刺激性图，C为100mg/kg的实施例1提供的榄香烯聚合物胶束制剂的血管刺激性图；
图8为实验例三的局部刺激性实验中肌肉刺激性图，其中图8中A为对照组的肌肉刺激性图，B为100mg/kg的榄香烯注射液的肌肉刺激性图，C为100mg/kg的实施例1提供的榄香烯聚合物胶束制剂的肌肉刺激性图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本申请提供了一种榄香烯聚合物胶束制剂，其制备方法包括如下步骤：
S1、制备嵌段共聚物。
制备嵌段共聚物的方法包括：
将亲水片段、疏水片段以及辛酸亚锡置于油浴内熔融反应，反应结束后冷却，用二氯甲烷溶解熔融液，接着与无水乙醚混合以沉淀出产物，干燥；或者；将亲水片段、吡啶、硝基苯氧羰基氯和二氯甲烷混合反应，反应结束后于石油醚中进行沉淀，得到产物，将产物与疏水片段加入无水三氯甲烷中搅拌反应，接着透析并干燥。
嵌段共聚物包含亲水片段和疏水片段，
亲水片段包括甲氧基聚乙二醇(mPEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和聚环氧乙烷(PEO)中的一种或多种；疏水片段包括乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚己内酯(PCL)、聚D,L-丙交酯(PDLLA)、聚乙烯亚胺(PEI)、聚苄基天冬氨酸(PBLA)、聚苄基谷氨酸(PBLG)、聚苯乙烯(Pst)、聚异丙基丙烯酰胺(PIAA)和聚环氧丙烷(PPO)中的一种或多种。
在本申请中的嵌段共聚物为双嵌段共聚物。具体来说：
双嵌段共聚物为甲氧基聚乙二醇-聚D,L-丙交酯(mPEG-PDLLA)、甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(mPEG-PCL)或甲氧基聚乙二醇-b-聚乙烯亚胺(mPEG-PEI)；
优选地，双嵌段共聚物为甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(mPEG-PCL)。优选地，双嵌段共聚物中亲水片段和疏水片段的质量比为0.1-10:1，优选地，双嵌段共聚物中亲水片段和所述疏水片段的质量比为1-4:1。
S2、将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂。
S201、将榄香烯药物和嵌段共聚物溶解于有机溶剂中。
嵌段共聚物与榄香烯药物的质量比为10-100：1；进一步优选地，嵌段共聚物与榄香烯药物的质量比为10-80：1；更进一步优选地，嵌段共聚物与榄香烯药物的质量比为30-50：1。经发明人研究发现，采用上述质量比的嵌段共聚物和榄香烯药物进行混合溶解，榄香烯药物的溶解程度高，且负载效果佳。
本申请中，有机溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、二氧六环、二甲基亚砜和N，N-二甲基甲酰胺中的一种或多种。
S202、并向有机溶剂中加入水相以进行水化。
具体地，在向有机溶剂中加入水相时，本申请中的水相以搅拌速度为100-3000rpm的搅拌状态存在，以便榄香烯药物和嵌段共聚物混合更均匀，此外，在进行水化时，水化时的温度为20-70℃，水化的时间为20-60min。优选地，水相的搅拌速度为800-1500rpm，水化时的温度为30-50℃，水化的时间为20-40min。
优选地，水相包括但不限于水、缓冲水溶液、生理盐水、葡萄糖水溶液中的任一种。其中，水包括但不限于去离子水、蒸馏水、纯水或超纯水中的一种或多种。
S203、在加入水相之前或之后去除有机溶剂。
去除有机溶剂的方法包括：将有机溶剂在加入水相之前或加入水相且水化完成后采用浓缩、旋转蒸发、挥发或透析中的任一种进行干燥。
具体来说，本申请提供的将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂可以采用如下方式中的任一种进行：
(1)将嵌段共聚物材料与药物共溶于有机溶剂；将有机溶剂浓缩至干；将浓缩后的残余物中加入水相，加热水化，而后得到载有榄香烯药物的胶束溶液。
(2)将嵌段共聚物材料与药物共溶于有机溶剂；将有机相加入搅拌中的水相中，待有机相于水相中因剪切力而分散；将混合两相溶液以旋转蒸发仪上将有机溶剂挥发完全，得到载有榄香烯药物的胶束溶液。
(3)将嵌段共聚物材料与药物共溶于有机溶剂，置于旋转蒸发仪上将有机溶剂挥发完全，得到薄膜，加入搅拌中的水相中，旋转水化得到载有榄香烯药物的胶束溶液。
(4)将嵌段共聚物材料与药物共溶于有机溶剂；将有机相加入搅拌中的水相中，待有机相于水相中因剪切力而分散；将混合两相溶液继续搅拌过夜，待有机溶剂挥发完全后，得到载有榄香烯药物的胶束溶液。
(5)将嵌段共聚物材料与药物共溶于有机溶剂；将有机相装入透析袋，而后放置于搅拌中的水相中，待其透析过夜得到载榄香烯药物的胶束溶液。
经发明人研究发现，最终选择了方式(3)作为具体实施的方法，采用该方法可以获得比溶剂挥发法粒径更均一、分散系数更优良、稳定性更好的胶束溶液。
制备获得的榄香烯聚合物胶束制剂，其载药量为4-6％；包封率为95-99％，分子量为4000-4500，平均粒径为15-30nm。
此外，本申请还提供了一种榄香烯聚合物胶束制剂在制备用于治疗癌症的靶向药物中的应用。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种榄香烯聚合物胶束制剂，其制备方法包括如下步骤：
S1、制备嵌段共聚物MPEG2k-PCL2k。
取mPEG2k、ε-CL(质量比为1：1.2)以及辛酸亚锡(0.5％wt％)，置于隔膜泵中避光抽真空2h，以期去除非结合水及瓶内氧气。取装置于双排管系统内，先抽除管内气体，而后连通氮气。反复抽真空、充氮气三次，大约半小时。油浴预热至110℃后将烧瓶浸入油介质中，待反应物基本熔融，打开旋转开关使反应，最终反应温度为160℃。3.5h后提起反应瓶，基本冷却后开始后处理。
以二氯甲烷溶解基本冷却的熔融液，抽滤去除少量未溶解反应物，再将抽滤液加入到不断搅拌中的无水乙醚中，以沉淀出产物。产物为白色絮状物质，分散性较好，无明显团聚现象。反复上述处理三次，产物在20℃真空干燥箱内干燥12h，得到样品待用。
其中，MPEG2k-PCL2k的化学式结构为：
Figure BDA0002302593650000091
其中，X和Y分别表示基团的个数，例如：X可以为42-45，Y可以为16-17。
其1HNMR图谱和GPC图谱请参阅图1和图2，从图1可以看出材料合成成功，从图2可以看出合成的材料分布较好，材料嵌段具有一定的均一性。
S2、将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂。
将榄香烯药物与MPEG2k-PCL2k按照质量比为1：10置于茄形瓶中，加入适量甲醇完全溶解，而后于旋转蒸发仪上以50℃水浴温度旋蒸除去全部有机溶剂，得到薄膜。加入注射用水。而后于50℃水浴加热，薄膜旋转水化30分钟，得到具有淡黄色乳光的胶束溶液。以0.22μm的滤膜过滤，按照每瓶2mL分装于西林瓶中，冻干，得到白色疏松针状粉末。
实施例2
本实施例提供了一种榄香烯聚合物胶束制剂，其制备方法包括如下步骤：
S1、制备嵌段共聚物MPEG2k-PDLLA2k。
取mPEG2k、D,L-LA(质量比为1：1.02)以及辛酸亚锡(0.5％wt％)，于130℃油浴中反应4h，而后将反应液提起自然冷却；将样品于50℃水浴条件下加热融化，而后往内加入约25mL二氯甲烷，转移至超声仪内超声至完全溶解；取一个500mL的烧杯，往内加入300mL无水乙醚，以保鲜膜封口，放置于-20℃环境下冷却30min，待用；取无水乙醚的烧杯置于磁力搅拌器上，加入2.5cm的聚四氟乙烯覆盖的磁力搅拌子，将转速设定为1000rpm，开启搅拌。往内倒入含有产物的二氯甲烷溶液，使其成细小的水流状，充分搅拌，记录现象；适量倒出上清液，而后将样品抽滤得到沉淀物，放置于真空干燥箱内，20℃干燥12h；
S2、将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂。
将榄香烯药物与MPEG2k-PDLLA2k按照质量比为1：30置于茄形瓶中，加入适量甲醇完全溶解，而后于旋转蒸发仪上以50℃水浴温度旋蒸除去全部有机溶剂，得到薄膜。加入注射用水。而后于30℃水浴加热，薄膜旋转水化30分钟，得到具有淡黄色乳光的胶束溶液。以0.22μm的滤膜过滤，按照每瓶2mL分装于西林瓶中，冻干，得到白色疏松针状粉末。
实施例3
本实施例提供了一种榄香烯聚合物胶束制剂，其制备方法包括如下步骤：
S1、制备嵌段共聚物MPEG2k-PEI2k。
mPEG2k 7.9克和1.6mL吡啶溶解在二氯甲烷中，硝基苯氧羰基氯(p-NPC)(3.2g)溶于二氯甲烷中。mPEG溶液一滴一滴地添加到p-NPC溶液中，在室温下持续搅拌24小时完成反应。然后混合物产品沉在石油醚中进行沉淀，冷冻，过滤，真空干燥.将上述产物1.03g和3.72g PEI(MW 2.5万)分别加入50ml无水三氯甲烷中，得到混合物在室温下连续搅拌48小时。样品随后在含蒸馏水的渗析管(MWCO,3500kDa)中进行3天的透析，并进行冻干以获mPEG-PEI。
S2、将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂。
将榄香烯药物与MPEG2k-PE2k按照质量比为1：20置于茄形瓶中，加入适量甲醇完全溶解，而后于旋转蒸发仪上以50℃水浴温度旋蒸除去全部有机溶剂，得到薄膜。加入注射用水。而后于30℃水浴加热，薄膜旋转水化30分钟，得到具有淡黄色乳光的胶束溶液。以0.22μm的滤膜过滤，按照每瓶2mL分装于西林瓶中，冻干，得到白色疏松针状粉末。
实施例4-5
本实施例提供了一种榄香烯聚合物胶束制剂，其制备方法基本与实施例1相同，区别在于：榄香烯药物与嵌段共聚物的质量比不同：
实施例4中，榄香烯药物与嵌段共聚物的质量比为1:8；
实施例5中，榄香烯药物与嵌段共聚物的质量比为1:40。
实验例一
取刚制备好空白胶束溶液和载药胶束溶液，以注射用水稀释至0.2mg/mL，而后于透射电子显微镜中测定载药胶束的显微形貌表征图(请参阅图3)。
从图3可以看出：纳米胶束粒子形态均一，且粒径与纳米粒度仪检测结果相近。进一步证明了胶束制剂的成功制备。
实验例二：细胞毒性实验
将现有的榄香烯注射液与本申请实施例1获得的榄香烯聚合物胶束制剂分别以不同浓度对C26结肠癌细胞毒性进行检测，分别记录24、48、72h的细胞活性。
具体检测方法为：肿瘤细胞以每孔5×103个细胞的密度接种于96孔板上。细胞生长24h后，分别置于不同浓度的载药胶束和游离药物中(2.5,5，10，20，40，80，160，320μg/mL)。未处理的细胞作为对照组。培养24/48、72小时后，在避光条件下每孔加入20μL MTT(5mg/mL)，继续放入恒温培养箱中培养3h，取出，吸去上清液，每孔加入150μL DMSO，置于摇床上室温振摇10min，待蓝色结晶充分溶解后，用酶标仪在570nm条件下测定吸光度。
检测结果请参阅图4，从图4可以看出：载药胶束与游离药物对C26细胞的生长均有剂量依赖性的抑制作用，且载药胶束对肿瘤细胞生长的抑制作用比游离药物略好。
实验例三：肿瘤的体积和重量变化实验
将对照组(生理盐水)、PTX(阳性药紫杉醇)、100mg/kg的榄香烯API(空白药物)以及50、75、100mg/kg的本申请实施例1提供的榄香烯聚合物胶束制剂分别进行C26结肠癌荷瘤Balb/C小鼠抗肿瘤实验，并测试肿瘤体积变化，随后解剖后测试肿瘤的重量变化。
具体检测方法为：使用游标卡尺进行肿瘤体积的长宽测量，肿瘤体积计算为V＝1/2(长*宽2)。
肿瘤体积变化的检测结果请参阅图5，从图5可以看出：载药胶束对肿瘤生长有较好的抑制作用，且具有剂量依赖性。同时将游离药物制备成纳米胶束后比游离药物具有更好的抗肿瘤效果。
测试肿瘤的重量变化的检测结果请参阅图6，从图6可以看出：相比于游离药物，载药胶束对肿瘤生长有更好的抑制效果。
实验例四：局部刺激性实验
将对照组、现有的榄香烯注射液与本申请实施例1获得的榄香烯聚合物胶束制剂分别对血管和肌肉进行刺激，以检测其刺激性。
具体检测方法为：采用H&E染色法评估静脉注射的刺激性。
对血管的刺激结果请参阅图7，从图7可以看出：在游离药物溶液静脉注射部位的周围组织观察到组织坏死，出血，血凝块和炎症细胞，而没有在生理盐水或载药胶束组发现上述现象。因此，载药胶束降低了药物对静脉注射部位的刺激性和毒副作用。
对肌肉的刺激结果请参阅图8，从图8可以看出：同生理盐水组一样，载药胶束的肌内注射后，注射部位肌肉纤维紧密围绕。然而，在游离药物组中可以观察到严重刺激，如肌细胞坏死，炎症细胞浸润等。这些结果进一步表明，载药胶束降低了药物对肌肉注射部位的刺激性和毒副作用。
对比例1
对比例1提供的嵌段共聚物为聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PLA)，其制备方法和实施例1基本相同。
将实施例1-5获得的榄香烯聚合物胶束制剂以及对比例1获得的榄香烯聚合物胶束制剂进行包封率、载药量、粒径、PDI(多分散系数)和稳定性的测试，测试结果如下：
示例 包封率 载药量 粒径 PDI 稳定性(h)
实施例1 99.02 4.71 20.9 0.099 >72h
实施例2 77.5 3.73 20.78 0.238 >8h
实施例3 76.05 3.66 20.18 0.247 >8h
实施例4 / / / / /
实施例5 98.5 3.14 23.2 0.12 >8h
对比例1 88.1 4.21 32.76 0.226 >8h
从上表可以看出：实施例1所示方法能产生具有相对狭窄的粒径分布和均一性，并且具有一定的稳定性，具有优良的载药量和包封率的纳米胶束。实施例4中改变了榄香烯药物与嵌段共聚物的质量比，此时无法合成胶束，而从对比例1可以看出，选用其他的亲水片段和疏水片段制成的聚合物胶束，其对药物的包封率明显低于实施例1，同时其载药量和稳定性也明显低于实施例1，且粒径和PDI远大于实施例1。而对比实施例1-3，可以看出，本申请实施例1提供的甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(mPEG-PCL)作为载体时，其效果最佳。
综上所述，本申请提供的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，利用同时包含特定的亲水片段和疏水片段的嵌段共聚物对榄香烯药物进行负载形成载药胶束，具有包封率高、稳定性好且能够减轻药物刺激性的优点。本申请的制备方法简单，原料简单易得，适合大规模生产。本发明得到的榄香烯药物聚合物胶束具有小而均匀的粒径分布，并具有较长时间的稳定性，其能广泛应用于制备用于治疗癌症的纳米药物。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，其包括：将榄香烯药物负载于嵌段共聚物形成榄香烯聚合物胶束制剂；
其中，所述嵌段共聚物包含亲水片段和疏水片段，
所述亲水片段包括甲氧基聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚环氧乙烷中的一种或多种；
所述疏水片段包括乳酸-羟基乙酸共聚物、聚己内酯、聚D,L-丙交酯、聚乙烯亚胺、聚苄基天冬氨酸、聚苄基谷氨酸、聚苯乙烯、聚异丙基丙烯酰胺和聚环氧丙烷中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，所述嵌段共聚物为双嵌段共聚物；
优选地，所述双嵌段共聚物为甲氧基聚乙二醇-聚D,L-丙交酯、甲氧基聚乙二醇-聚己内酯或甲氧基聚乙二醇-b-聚乙烯亚胺；
优选地，所述双嵌段共聚物为甲氧基聚乙二醇-聚己内酯。
3.根据权利要求2所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，所述双嵌段共聚物中所述亲水片段和所述疏水片段的质量比为0.1-10:1；优选地，所述双嵌段共聚物中所述亲水片段和所述疏水片段的质量比为1-4:1。
4.根据权利要求1所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，所述嵌段共聚物的制备方法包括：
将所述亲水片段、所述疏水片段以及辛酸亚锡置于油浴内熔融反应，反应结束后冷却，用二氯甲烷溶解熔融液，接着与无水乙醚混合以沉淀出产物，干燥；
或者；
将所述亲水片段、吡啶、硝基苯氧羰基氯和二氯甲烷混合反应，反应结束后于石油醚中进行沉淀，得到产物，将所述产物与所述疏水片段加入无水三氯甲烷中搅拌反应，接着透析并干燥。
5.根据权利要求1所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，所述嵌段共聚物与所述榄香烯药物的质量比为10-100：1；
优选地，所述嵌段共聚物与所述榄香烯药物的质量比为10-80：1；
优选地，所述嵌段共聚物与所述榄香烯药物的质量比为30-50：1。
6.根据权利要求1所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，将所述榄香烯药物负载于所述嵌段共聚物的方法包括：
将所述榄香烯药物和所述嵌段共聚物溶解于有机溶剂中，并向所述有机溶剂中加入水相以进行水化，在加入所述水相之前或之后去除所述有机溶剂；
优选地，所述水相的搅拌速度为100-3000rpm，优选地，所述搅拌速度为800-1500rpm；
优选地，所述水化时的温度为20-70℃，优选地，所述水化时的温度为30-50℃；
优选地，所述水化的时间为20-60min，优选地，所述水化的时间为20-40min；
优选地，所述水相包括水、缓冲水溶液、生理盐水、葡萄糖水溶液中的任一种。
7.根据权利要求6所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，去除所述有机溶剂的方法包括：将所述有机溶剂在加入水相之前或加入水相且水化完成后采用浓缩、旋转蒸发、挥发或透析中的任一种进行去除所述有机溶剂。
8.根据权利要求6所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、二氧六环、二甲基亚砜和N，N-二甲基甲酰胺中的一种或多种。
9.一种榄香烯聚合物胶束制剂，其特征在于，其采用如权利要求1-8任一项所述的榄香烯聚合物胶束制剂的制备方法制备而成；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的载药量为4-6％；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的包封率为95-99％；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的分子量为4000-4500；
优选地，所述榄香烯聚合物胶束制剂的平均粒径为15-30nm。
10.一种榄香烯聚合物胶束制剂在制备用于治疗癌症的靶向药物中的应用。
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