CN110891650A - 制导和导航控制蛋白及其制造和使用方法 - Google Patents
制导和导航控制蛋白及其制造和使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110891650A CN110891650A CN201880039397.1A CN201880039397A CN110891650A CN 110891650 A CN110891650 A CN 110891650A CN 201880039397 A CN201880039397 A CN 201880039397A CN 110891650 A CN110891650 A CN 110891650A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cells
- cell
- moiety
- gnc
- cancer cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 104
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 103
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 178
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 162
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 108
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 67
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 43
- -1 ICOS Proteins 0.000 claims abstract description 36
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims abstract description 16
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 101710083479 Hepatitis A virus cellular receptor 2 homolog Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000666896 Homo sapiens V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 229940126547 T-cell immunoglobulin mucin-3 Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 102100038282 V-type immunoglobulin domain-containing suppressor of T-cell activation Human genes 0.000 claims abstract description 9
- IJJVMEJXYNJXOJ-UHFFFAOYSA-N fluquinconazole Chemical compound C=1C=C(Cl)C=C(Cl)C=1N1C(=O)C2=CC(F)=CC=C2N=C1N1C=NC=N1 IJJVMEJXYNJXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101000831007 Homo sapiens T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 101150030213 Lag3 gene Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102100024834 T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 101000679903 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 102100022203 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 25 Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 102100024263 CD160 antigen Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 102100038077 CD226 antigen Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 101000761938 Homo sapiens CD160 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 101000884298 Homo sapiens CD226 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 101000596234 Homo sapiens T-cell surface protein tactile Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102100035268 T-cell surface protein tactile Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102100021396 Cell surface glycoprotein CD200 receptor 1 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 101000834898 Homo sapiens Alpha-synuclein Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000969553 Homo sapiens Cell surface glycoprotein CD200 receptor 1 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000652359 Homo sapiens Spermatogenesis-associated protein 2 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 101000884270 Homo sapiens Natural killer cell receptor 2B4 Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101000764622 Homo sapiens Transmembrane and immunoglobulin domain-containing protein 2 Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101001102797 Homo sapiens Transmembrane protein PVRIG Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 108010004222 Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 3 Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 102100032852 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 101100215487 Sus scrofa ADRA2A gene Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 102100026224 Transmembrane and immunoglobulin domain-containing protein 2 Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 102100039630 Transmembrane protein PVRIG Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 102100026882 Alpha-synuclein Human genes 0.000 claims abstract 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 25
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 24
- 101001103039 Homo sapiens Inactive tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR1 Proteins 0.000 claims description 23
- 101001103036 Homo sapiens Nuclear receptor ROR-alpha Proteins 0.000 claims description 22
- 102100039615 Inactive tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR1 Human genes 0.000 claims description 22
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 19
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 claims description 14
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 13
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 13
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 12
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 12
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 claims description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 11
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 8
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims description 7
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 claims description 7
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims description 7
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 7
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 claims description 6
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 claims description 6
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 claims description 6
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 claims description 6
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 claims description 5
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 claims description 5
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 claims description 5
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 claims description 4
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 claims description 4
- 101000863882 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 7 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000863883 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 9 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100020943 Leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 4
- 108091008877 NK cell receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 102100029946 Sialic acid-binding Ig-like lectin 7 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100029965 Sialic acid-binding Ig-like lectin 9 Human genes 0.000 claims description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 4
- 108010025001 leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 108091005446 macrophage receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims description 3
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100028667 C-type lectin domain family 4 member A Human genes 0.000 claims description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 3
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 claims description 3
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102000010956 Glypican Human genes 0.000 claims description 3
- 108050001154 Glypican Proteins 0.000 claims description 3
- 108050007237 Glypican-3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000766908 Homo sapiens C-type lectin domain family 4 member A Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914324 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000914321 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 7 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984192 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 3 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000984186 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000617725 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 claims description 3
- 101150113776 LMP1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100025582 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025578 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 101710150918 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 claims description 3
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 102000003735 Mesothelin Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000015 Mesothelin Proteins 0.000 claims description 3
- 102100021462 Natural killer cells antigen CD94 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025386 Oxidized low-density lipoprotein receptor 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710199789 Oxidized low-density lipoprotein receptor 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100022019 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 101150117918 Tacstd2 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100027212 Tumor-associated calcium signal transducer 2 Human genes 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 108010087914 epidermal growth factor receptor VIII Proteins 0.000 claims description 3
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920001481 poly(stearyl methacrylate) Polymers 0.000 claims description 3
- 102100026402 Adhesion G protein-coupled receptor E2 Human genes 0.000 claims description 2
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 102100037435 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Human genes 0.000 claims description 2
- 101710127675 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Proteins 0.000 claims description 2
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100040840 C-type lectin domain family 7 member A Human genes 0.000 claims description 2
- 102100039521 C-type lectin domain family 9 member A Human genes 0.000 claims description 2
- 102000049320 CD36 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 claims description 2
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 claims description 2
- 102100029390 CMRF35-like molecule 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 102100027816 Cytotoxic and regulatory T-cell molecule Human genes 0.000 claims description 2
- 108010037897 DC-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin Proteins 0.000 claims description 2
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 claims description 2
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 2
- 101000718211 Homo sapiens Adhesion G protein-coupled receptor E2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000888548 Homo sapiens C-type lectin domain family 9 member A Proteins 0.000 claims description 2
- 101000990055 Homo sapiens CMRF35-like molecule 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001027081 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945371 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945333 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL3 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945340 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945339 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945342 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS4 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945351 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945490 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945493 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL3 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000945492 Homo sapiens Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DS1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000971538 Homo sapiens Killer cell lectin-like receptor subfamily F member 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984197 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984199 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 4 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984206 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 6 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984190 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000984189 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000576894 Homo sapiens Macrophage mannose receptor 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001109503 Homo sapiens NKG2-C type II integral membrane protein Proteins 0.000 claims description 2
- 101001109501 Homo sapiens NKG2-D type II integral membrane protein Proteins 0.000 claims description 2
- 101000863900 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 5 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000868472 Homo sapiens Sialoadhesin Proteins 0.000 claims description 2
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 claims description 2
- 101150069255 KLRC1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101150074862 KLRC3 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 102100037363 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100033599 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100033634 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DL3 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100033631 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100033630 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100033624 Killer cell immunoglobulin-like receptor 2DS4 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100033627 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100034840 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100034834 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DL3 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100034833 Killer cell immunoglobulin-like receptor 3DS1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100021458 Killer cell lectin-like receptor subfamily F member 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025586 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025555 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 4 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025553 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 6 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025584 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025583 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 2
- 101100404845 Macaca mulatta NKG2A gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102100025354 Macrophage mannose receptor 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100022682 NKG2-A/NKG2-B type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 2
- 102100022683 NKG2-C type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 2
- 102100022680 NKG2-D type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 2
- 102100022701 NKG2-E type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 2
- 208000001894 Nasopharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 108010004217 Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100032870 Natural cytotoxicity triggering receptor 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 101150036449 SIRPA gene Proteins 0.000 claims description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 2
- 102100029957 Sialic acid-binding Ig-like lectin 5 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100032855 Sialoadhesin Human genes 0.000 claims description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 claims description 2
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010066451 Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100029681 Triggering receptor expressed on myeloid cells 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100029678 Triggering receptor expressed on myeloid cells 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710174937 Triggering receptor expressed on myeloid cells 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006593 Urologic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 2
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000026900 bile duct neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 108010072917 class-I restricted T cell-associated molecule Proteins 0.000 claims description 2
- 108010025838 dectin 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024519 eye neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 108040006870 interleukin-10 receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 108040006852 interleukin-4 receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000008106 ocular cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 102100031151 C-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 claims 1
- 101710149815 C-C chemokine receptor type 2 Proteins 0.000 claims 1
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 claims 1
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 claims 1
- 108040004564 crotonyl-CoA reductase activity proteins Proteins 0.000 claims 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 75
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 52
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 51
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 51
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 26
- 208000025324 B-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 21
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 17
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 15
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 15
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 14
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 13
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 12
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 12
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 10
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 9
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 9
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 9
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 9
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 9
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 8
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 7
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 7
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 5
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 5
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 5
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 5
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 102000048776 human CD274 Human genes 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 3
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 3
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 3
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 238000010396 two-hybrid screening Methods 0.000 description 3
- 229940055760 yervoy Drugs 0.000 description 3
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000028530 T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 2
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 2
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 2
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 102100022464 5'-nucleotidase Human genes 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 239000004261 Ascorbyl stearate Substances 0.000 description 1
- 101100463133 Caenorhabditis elegans pdl-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010050685 Cytokine storm Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102100029722 Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101000678236 Homo sapiens 5'-nucleotidase Proteins 0.000 description 1
- 101001012447 Homo sapiens Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000971533 Homo sapiens Killer cell lectin-like receptor subfamily G member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001039113 Homo sapiens Leucine-rich repeat-containing protein 15 Proteins 0.000 description 1
- 101001098352 Homo sapiens OX-2 membrane glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102100021457 Killer cell lectin-like receptor subfamily G member 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100040645 Leucine-rich repeat-containing protein 15 Human genes 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 102000027581 NK cell receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100037589 OX-2 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000011467 adoptive cell therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000049583 human ROR1 Human genes 0.000 description 1
- 229940126546 immune checkpoint molecule Drugs 0.000 description 1
- 230000008073 immune recognition Effects 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940043515 other immunoglobulins in atc Drugs 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 208000017426 precursor B-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6901—Conjugates being cells, cell fragments, viruses, ghosts, red blood cells or viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/35—Valency
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本申请提供了制导和导航控制(GNC)蛋白。在一个实施方案中，所述GNC蛋白包含T细胞结合部分和癌症靶向部分，其中所述T细胞结合部分对T细胞受体具有结合特异性，所述T细胞受体包含CD3、CD28、PDL1、PD1、OX40、4‑1BB、GITR、TIGIT、TIM‑3、LAG‑3、CTLA4、CD40、VISTA、ICOS、BTLA、Light、NKp30、CD28H、CD27、CD226、CD96、CD112R、A2AR、CD160、CD244、CECAM1、CD200R、TNFRSF25(DR3)或其组合，并且其中所述癌症靶向部分对癌细胞受体具有结合特异性。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求2018年3月27日提交的美国临时专利申请62/6488880，2018年3月27日提交的美国临时专利申请62/648888、2017年8月28日提交的美国临时专利申请62/551032、2017年6月25日提交的美国临时专利申请62/524553、2017年8月15日提交的美国临时专利申请NO.62/545603、2017年8月28日提交的美国临时专利申请NO.62551035、2017年8月28日提交的美国临时专利申请号62/551065、2017年6月25日提交的美国临时专利申请号62/524554、2017年6月25日提交的美国临时专利申请号62/524557、和2017年6月25日提交的美国临时专利申请62/524558的权益，其全部公开内容通过引用明确地并入本文。
技术领域
本申请总体上涉及具有针对免疫细胞和肿瘤细胞两者上的表面分子的多特异性结合活性的制导和导航控制(Guidance and Navigation Control,GNC)蛋白的技术领域，并且更具体地涉及GNC蛋白的制备和使用。
背景技术
癌细胞发展各种策略以逃避免疫系统。免疫逃逸的潜在机制之一是免疫系统对癌细胞的识别降低。癌症特异性抗原的缺陷呈递或其缺乏导致免疫耐受和癌症进展。在有效的免疫识别的存在下，肿瘤使用其它机制以避免被免疫系统消除。免疫活性肿瘤产生抑制性微环境以下调免疫应答。多个参与者参与形成抑制性肿瘤微环境，包括肿瘤细胞、调节性T细胞、髓样衍生的抑制性细胞、基质细胞和其它细胞类型。通过从局部环境中分泌免疫抑制性细胞因子或消除必需的存活因子，免疫应答的抑制可以以细胞接触依赖性形式以及以接触非依赖性方式进行。细胞接触依赖性抑制依赖于细胞表面上表达的分子，例如，程序性死亡配体1(PD-L1)、T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)等[Dunn等，2004，免疫(Immunity)，21(2)：137-48；Adachi&Tamada，2015，癌症科学(Cancer Sci.)，106(8)：945-50]。
随着肿瘤逃避免疫系统识别的机制继续被更好地了解，最近出现了靶向这些机制的新治疗方式。2011年3月25日美国食品和药品管理局(FDA)批准了用于治疗不可切除或转移性黑素瘤的易普利姆玛单抗(ipilimumab)注射剂(Yervoy，Bristol-Myers Squibb)。Yrevoy与活化T细胞上表达的细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)结合并阻断抗原呈递细胞上CTLA-4与CD80/86的相互作用，从而阻断通过CTLA-4递送到T细胞中的阴性或抑制性信号，导致抗原特异性T细胞的再活化，这在许多患者中导致肿瘤的根除。2014年几年后，FDA批准Keytruda(派姆单抗(Pembrolizumab)，默克公司)和Opdivo(纳武单抗(Nivolumab)，百时美施贵宝)用于治疗晚期黑素瘤。这些单克隆抗体结合在活化和/或耗尽的T细胞上表达的PD-1，并阻断PD-1与在肿瘤上表达的PD-L1的相互作用，从而消除通过PD-1进入T细胞的抑制信号，导致抗原特异性T细胞的再活化，这在许多患者中再次导致肿瘤的根除。从那时起，已经进行了另外的临床试验，将单一单克隆抗体Yervoy与单克隆抗体Yervoy和Opdivo的组合在晚期黑素瘤的治疗中进行比较，结果显示，在接受抗体组合治疗的患者中，其总生存期和无进展生存期均有改善。(Hodi等人，2016，柳叶刀·肿瘤学(Lancet Oncol).17(11):1558-1568，Hellman等人，2018，肿瘤细胞(Cancer Cell)33(5)：853-861)。然而，由于许多临床试验已经显示出使用对一种或多种免疫检查点分子具有特异性的单克隆抗体治疗癌症患者的极大益处，数据已经显示出只有那些具有产生被抗原特异性T细胞识别的新T细胞表位的高突变负荷的患者显示出临床应答(Snyder等人，2014，NEJM371：2189-2199)。具有低肿瘤突变负荷的那些患者大部分不显示客观的临床反应(Snyder等人，2014，NEJM371：2189-2199，Hellman等人，2018，肿瘤细胞(Cancer Cell)33(5)：853-861)。
近年来，其它团队已经开发了不需要存在通过抗原呈递细胞的新表位呈递来活化T细胞的替代方法。一个实例是双特异性抗体的开发，其中对肿瘤相关抗原如CD19特异的抗体的结合结构域与T细胞上CD3特异的抗体结合结构域连接，从而产生双特异性T细胞结合剂或咬合分子。在2014年，FDA批准了称为Blinatumumab的双特异性抗体用于治疗前体B细胞急性成淋巴细胞白血病。Blinatumumab将对白血病细胞上表达的CD19有特异性的scFv与对T细胞上表达的CD3有特异性的scFv连接起来(Bejnijamin和Stein 2016，Ther AdvHematol7(3)：142-146)。然而，尽管复发或顽固性急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的初始应答率>50％，但许多患者在用Blinatumumab成功治疗后对Blinatumumab治疗有耐药性或复发。有证据表明，对Blinatumumab的耐药性或Blinatumumab治疗后的复发归因于在肿瘤细胞上表达的免疫检查点抑制分子的表达，如PD-L1，其通过在活化的T细胞上表达的PD-1驱动抑制信号(Feucht等人，2016，肿瘤标靶(Oncotarget7)(47)：76902-76919)。在对耐受Blinatumumab治疗的患者的病例研究中，进行第二轮Blinatumumab治疗，但加入特异性地结合到PD-1并阻断T细胞表达的PD-1与肿瘤细胞表达的PD-L1的相互作用的单克隆抗体Pembrolizumab(Keytruda，默克公司)，导致在这位患者中骨髓中肿瘤细胞的显著应答和从45％减少到小于5％(Feucht等人，2016，Oncotarget(肿瘤标靶)7(47):76902-76919)。这些结果表明，与任一单独的试剂相比，将双特异性咬合分子与一种或多种单克隆抗体组合可显著增加临床活性。尽管有希望的结果，但由于多次临床试验和招募代表性群体的困难性，导致联合治疗的成本必然很高。
嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)的过继细胞疗法是治疗癌症的另一种有前途的免疫疗法。CAR-T治疗的临床成功表明，CD19阳性治疗-难治性B细胞恶性肿瘤患者可实现持久的完全缓解和延长的生存期(Gill&June.2015.ImmuNO.l Rev，263：68-89)。但是，与个性化和基因改造的CAR-T免疫疗法的制造相关的成本和复杂性已将其生产和使用限制在专门的中心以治疗相对少量的患者。细胞因子释放综合征(CRS)，也称为细胞因子风暴，是输注工程化CAR-T细胞后最显著的副作用(Bonifant等，201，Mol Ther Oncolytics.3:16011)。在许多情况下，CRS的发作和严重程度似乎是专门的个人事件。目前缓解CRS的选择主要集中于快速反应和管理护理，因为在T细胞输注之前控制CRS的选择是有限的。
尽管现在已经确定了对CD19阳性B细胞恶性肿瘤有特异性的CAR-T治疗的功效，但是迄今为止还没有明确地证明CAR-T治疗对实体瘤的功效。目前，许多临床试验正在进行，以探索用于CAR-T治疗的多种实体瘤相关抗原(TAA)。目前认为，进入肿瘤的低效T细胞运输，免疫抑制性肿瘤微环境，次优抗原识别特异性和缺乏对治疗相关不良事件的控制是实体肿瘤CAR-T治疗中的主要障碍(Li等人，2018，J Hematol Oncol.11(1):22-40)。管理治疗效果以及CAR-T细胞输注前后的任何副作用的选择是有限的。
发明内容
本申请提供了对T细胞和肿瘤细胞的表面分子具有多特异性抗原结合活性的制导和导航控制(GNC)蛋白。
在一个实施方案中，制导和导航控制(GNC)蛋白包含细胞毒性细胞结合部分和癌症靶向部分。任何细胞毒性细胞可能是所公开的GNC蛋白潜在的结合靶标。细胞毒性细胞的实例包括但不限于T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突细胞。
在一个实施方案中，GNC蛋白包括T细胞结合部分。T细胞结合部分对T细胞受体具有结合特异性。T细胞受体的实例包括但不限于CD3、CD28、PDL1、PD1、OX40、4-1BB、GITR、TIGIT、TIM-3、LAG-3、CTLA4、CD40L、VISTA、ICOS、BTLA、Light、CD30、NKp30、CD28H、CD27、CD226、CD96、CD112R、A2AR、CD160、CD244、CECAM1、CD200R、TNFRSF25(DR3)或其组合。
在一个实施方案中，GNC蛋白包括NK细胞结合部分。NK细胞结合部分对NK细胞受体具有结合特异性。NK细胞受体的实例包括但不限于活化NK细胞的受体，例如CD16、NKG2D、KIR2DS1、KIR2DS2、KIR2DS4、KIR3DS1、NKG2C、NKG2E、NKG2H；激动剂受体，如NKp30a、NKp30b、NKp46、NKp80、DNAM-1、CD96、CD160、4-1BB、GITR、CD27、OX-40、CRTAM；和拮抗剂受体，例如KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR3DL3、NKG2A、NKp30c、TIGIT、SIGLEC7、SIGLEC9、LILR、LAIR-1、KLRG1、PD-1、CTLA-4、CD161。
在一个实施方案中，GNC蛋白包括巨噬细胞结合部分。巨噬细胞结合部分对巨噬细胞受体具有结合特异性。巨噬细胞受体的实例包括但不限于，巨噬细胞上的激动剂受体，例如TLR2、TLR4、CD16、CD64、CD40、CD80、CD86、TREM-1、TREM-2、ILT-1、ILT-6a、ILT-7、ILT-8、EMR2、Dectin-1、CD69；拮抗剂受体，例如CD32b、SIRPα、LAIR-1、VISTA、TIM-3、CD200R、CD300a、CD300f、SIGLEC1、SIGLEC3、SIGLEC5,SIGLEC7、SIGLEC9、ILT-2、ILT-3、ILT-4、ILT-5、LILRB3、LILRB4、DCIR；和其它表面受体，例如CSF-1R、LOX-1、CCR2、FRβ、CD163、CR3、DC-SIGN、CD206、SR-A、CD36、MARCO。
在一个实施方案中，GNC蛋白包括树突细胞结合部分。树突细胞结合部分对树突细胞受体具有结合特异性。树突细胞受体的实例包括但不限于树突细胞上的激动剂受体，例如TLR、CD16、CD64、CD40、CD80、CD86、HVEM、CD70；拮抗剂受体，例如VISTA、TIM-3、LAG-3、BTLA；和其它表面受体，例如CSF-1R、LOX-1、CCR7、DC-SIGN、GM-CSF-R、IL-4R、IL-10R、CD36、CD206、DCIR、RIG-1、CLEC9A、CXCR4。
癌症靶向部分对癌细胞受体具有结合特异性。癌细胞受体的实例包括但不限于BCMA、CD19、CD20、CD33、CD123、CD22、CD30、ROR1、CEA、HER2、EGFR、EGFRvIII、LMP1、LMP2A、间皮素、PSMA、EpCAM、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、gpA33、GD2、TROP2或它们的组合。
在一个实施方案中，GNC蛋白包含至少一个T细胞结合部分和至少一个癌细胞结合部分，其中所述T细胞结合部分对T细胞受体具有结合特异性，所述T细胞受体包含CD3、CD28、PDL1、PD1、OX40、4-1BB、GITR、TIGIT、TIM-3、LAG-3、CTLA4、CD40、VISTA、ICOS、BTLA、Light、CD30、CD27或其组合，并且其中癌细胞结合部分对癌细胞受体具有结合特异性。
在一个实施方案中，所述癌症受体包括癌症细胞上的受体：肺癌细胞、肝癌细胞、乳腺癌细胞、结肠直肠癌细胞、肛门癌细胞、胰腺癌细胞、胆囊癌细胞、胆管癌细胞、头颈癌细胞、鼻咽癌细胞、皮肤癌细胞、黑素瘤细胞、卵巢癌细胞、前列腺癌细胞、尿道癌细胞、肺癌细胞；非小细胞肺癌细胞、小细胞肺癌细胞、脑肿瘤细胞、神经胶质瘤细胞、成神经细胞瘤细胞、食管癌细胞、胃癌细胞、肝癌细胞、肾癌细胞、膀胱癌细胞、宫颈癌细胞、子宫内膜癌细胞、甲状腺癌细胞、眼癌细胞、肉瘤细胞；骨癌细胞、白血病细胞、骨髓瘤细胞、淋巴瘤细胞或其组合。
在一个实施方案中，GNC蛋白能够通过将T细胞结合部分与T细胞上的T细胞受体结合而活化T细胞。在一个实施方案中，GNC蛋白包含双特异性抗体或抗体单体、三特异性抗体或抗体单体、四特异性抗体或抗体单体、其抗原结合片段或其组合。在一个实施方案中，GNC蛋白包含与SEQ ID NO.49-52具有百分比同源性的氨基酸序列，其中同源性百分比不小于70％、80％、90％、95％、98％或99％。
在一个实施方案中，GNC蛋白可以具有第一部分和第二部分。在一个实施方案中，第一部分可包括T细胞结合部分、NK细胞结合部分，巨噬细胞结合部分或树突细胞结合部分。第二部分包含癌症靶向部分。
在一个实施方案中，第一部分和第二部分可以具有彼此结合的特异性。在这些实施方案中，GNC蛋白通过第一部分和第二部分之间的结合作用形成。结合作用是非共价键合。在一个实施方案中，GNC蛋白包括通过高亲和力非共价键相互作用与第二部分结合的第一部分。高亲和力非共价键合相互作用的实例包括但不限于抗体-抗原相互作用，生物素-链霉亲和素相互作用，亮氨酸-拉链和来自双杂交筛选测定的任何蛋白质对，非免疫球蛋白蛋白质支架(Hosse等人，2006，Protein Sci.15(1):14-27)或aptamers(适体)(Likhin等人，2013，Acta Naturae.2013.5(4):34-43)或其组合。
在一个实施方案中，GNC蛋白可以进一步包括接头部分。在一个实施方案中，第一部分和第一部分通过接头部分连接以提供GNC蛋白。在一个实施方案中，接头部分可以将第一和第二部分共价连接在一起，以提供GNC蛋白。在一个实施方案中，接头部分可以包括两个互补分子或稳定的蛋白质-蛋白质相互作用。互补分子的实例包括但不限于DNA和RNA的互补链。稳定的蛋白质-蛋白质相互作用的实例包括但不限于生物素-抗生物素蛋白，亮氨酸-拉链和来自双杂交筛选测定的任何蛋白质对。
在一个实施方案中，接头部分可以包括免疫球蛋白G(IgG)的主链，其中GNC蛋白可以包括具有两条重链和两条轻链的免疫球蛋白G(IgG)部分，并且至少两个scFv部分共价连接到重链或轻链的C或N末端。IgG部分可以为scFv部分提供稳定性，且三特异性GNC蛋白可以具有两个部分用于结合T细胞上的表面分子。
在一个实施方案中，第一部分包含抗体或其片段、可溶性受体或其组合。在一个实施方案中，第二部分包含抗体或片段、可溶性受体或其组合。
本申请还提供了掺入本文公开的GNC蛋白的治疗复合物。在一个实施方案中，治疗复合物包括GNC蛋白和细胞毒性细胞。细胞毒性细胞可以是T细胞、NK细胞、巨噬细胞、树突细胞或其组合。在一个实施方案中，T细胞可以是自体T细胞、同种T细胞或通用供体T细胞。
在一个实施方案中，治疗复合物包括GNC蛋白和癌细胞。在一个实施方案中，治疗复合物可以包括本文公开的GNC蛋白，其具有与T细胞结合部分结合的T细胞和与癌症靶向部分结合的癌细胞。
本申请还提供了一种药物组合物。在一个实施方案中，该药物组合物包括本文公开的治疗复合物和药学上可接受的载体。在一个实施方案中，药物组合物包括本文公开的GNC蛋白和药学上可接受的载体。
在另一方面，本申请提供了制备和使用所公开的GNC蛋白的方法。
通过下面结合附图对优选实施例的详细描述，本申请的目的和优点将变得显而易见。
附图说明
结合附图，根据以下描述和所附权利要求书，本发明的前述和其它特征将变得更加完全显而易见。应理解，这些附图仅描绘了根据本公开安排的多个实施例，并且因此不应被认为是对其范围的限制，将通过使用附图以附加的特性和细节来描述本公开，在附图中：
图1显示了GNC蛋白的实施例，其特征在于其由多个抗原结合结构域(AgBD)和接头组成。
图2显示作为实施方案的四特异性GNC抗体的示例形式。
图3显示示例性四特异性GNC抗体通过多个AgBD结合T细胞和肿瘤细胞。
图4显示了与人ROR1转染的CHO细胞结合的四特异性GNC抗体实例。
图5显示了与人41BB转染的CHO细胞结合的四特异性GNC抗体的实例。
图6显示了与人PD-L1转染的CHO细胞结合的四特异性GNC抗体实例。
图7显示了以PBMC作为效应物、由具有对ROR1的Ig结构域有特异性的结合结构域323H7的四特异性GNC抗体介导的B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC。
图8显示了以CD8+、CD45RO+记忆T细胞作为效应物、由具有对ROR1的Ig结构域有特异性的结合结构域323H7的四特异性GNC抗体介导的B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC。
图9显示了以CD8+、CD45RA+初始T细胞(naive T cells)作为效应物、由具有对ROR1的Ig结构域有特异性的结合结构域323H7的四特异性GNC抗体介导的B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC。
图10显示了以PBMC作为效应物、由具有对ROR1的卷曲结构域有特异性的结合结构域338H4的四特异性GNC抗体介导的B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC。
图12显示了以CD8+、CD45RA+初始T细胞作为效应物、由具有对ROR1的卷曲结构域有特异性的结合结构域338H4的四特异性GNC抗体介导的B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC。
具体实施方式
在以下详细描述中，参考了构成本文一部分的附图。在附图中，除非上下文另有说明，否则类似的符号通常标识类似的成分。在具体实施方式、附图和权利要求中描述的说明性实施方式并不意味着是限制性的。可利用其他实施方案，且可作出其他改变，而不背离本文所呈现的标的物的精神或范围。将容易理解的是，如在此总体描述的并且在附图中示出的本公开的这些方面可以被安排、替代、组合、分开，并且被设计成多种不同的构型，所有这些在此明确地预期。
在一个实施方案中，指导导航对照(GNC)蛋白的特征在于它们的多个抗原特异性结合结构域(AgBD)的组成和它们通过T细胞和肿瘤细胞上的多个表面分子的结合将T细胞(或其它效应细胞)导向癌细胞(或其它靶细胞)的能力(图1)。根据该定义，GNC蛋白由用于结合T细胞上的至少一种表面分子的部分(Moiety)1和用于结合癌细胞上的至少一种表面抗原的部分2组成(表1A)。在T细胞治疗中，细胞毒性T细胞由T细胞增殖信号以及通过其表面上的激动剂受体或拮抗剂受体的共刺激信号调节。为了调节这些信号以及T细胞和癌症之间的相互作用，部分1(Moiety 1)和部分2(Moiety 2)可能分别需要多个AgBD。GNC蛋白必须具有至少一个连接部分1和部分2的接头。在概念GNC蛋白中，通过使用DNA/RNA或蛋白-蛋白相互作用的互补接头，包括但不限于生物素-抗生物素蛋白、亮氨酸-拉链和任何双杂交阳性蛋白的互补接头，任何接头分子可用于在体外或体内将两个或多个AgBD连接在一起。然而，在本申请中，所有接头或者是抗体骨架结构或者是抗体片段，从而GNC蛋白和GNC抗体可以具有相同的含义，例如图2中的四特异性GNC抗体结构的实施例。GNC蛋白或抗体能够在体内或离体指导T细胞与癌细胞的结合，由多个AgBD介导(图3)。T细胞可以来自相同患者或不同个体，并且癌细胞可以在体内、体外或离体存在。本申请中提供的实施例使得GNC蛋白能够作为T细胞疗法，即：GNC-T疗法，中的主要试剂，用于在过继转移之前先离体激活和控制细胞毒性T细胞。
表1A.在具有T细胞结合结构域的示例性GNC蛋白中，功能性部分(部分1和部分2)和抗原结合结构域的组成
除T细胞外，GNC蛋白也可利用其它细胞毒性细胞来杀死或预防癌症。表1B显示了GNC蛋白中具有NK细胞结合结构域的功能性部分(部分1和部分2)和抗原结合结构域的示例性组成。表1C显示了具有巨噬细胞结合结构域的GNC蛋白中的功能部分(部分1和部分2)和抗原结合结构域的示例性组成。表1D显示了具有树突细胞结合结构域的GNC蛋白中的功能部分(部分1和部分2)和抗原结合结构域的示例性组成。
表1b
表1c
表1d
本申请涉及制备和使用重组GNC蛋白的方法。由于多个AgBD分别与诸如T细胞的细胞毒性细胞和癌细胞的界面，它们可以分成部分1和部分2(表1A)。然而，多个AgBD的重排可以是随机的并且数量不相等(表2)。具有两个AgBD的GNC蛋白可以同时结合表面分子(例如T细胞上的CD3)，和肿瘤抗原(例如肿瘤细胞上的ROR1)，用于将T细胞重新定向或引导至肿瘤细胞。添加第三AgBD，例如特异性结合41BB，可以帮助增强抗CD3诱导的T细胞活化，因为41BB是共刺激因子并且该结合刺激其对活化T细胞的激动剂活性。向GNC蛋白添加第四AgBD，例如特异性结合肿瘤细胞上的PD-L1，可以阻断PD-L1对肿瘤细胞的抑制途径，所述抑制途径是通过PD-L1与T细胞上的PD-1的结合介导的。根据这些基本原理，可以设计和构建GNC蛋白以获得特异性结合不等数量的T细胞拮抗剂和激动剂的多个AgBD，不仅将活化的T细胞重定向至肿瘤细胞，而且控制其体内活性(表2)。因此，GNC蛋白的设计可以是任何多特异性蛋白。
在一个实施方案中，GNC蛋白可以是双特异性、三特异性、四特异性、五特异性、六特异性、七特异性或八特异性蛋白。在一个实施方案中，GNC蛋白可以是单克隆抗体。在一个实施方案中，GNC蛋白可以是双特异性、三特异性、四特异性、五特异性、六特异性、七特异性或八特异性抗体单体。在一个实施方案中，GNC蛋白可以是双特异性、三特异性、四特异性、五特异性、六特异性、七特异性或八特异性抗体。表3提供了具有对抗体结合结构域有特异性的GNC蛋白和抗体的一些实例。
表2.单个GNC蛋白中T细胞活化、T细胞激动剂、T细胞拮抗剂和肿瘤抗原结合结构域的可能组合的实例。
表3.用于GNC蛋白的抗体结合结构域的特异性。
在另一方面，本申请提供了制备和使用所重组的GNC蛋白的方法。GNC蛋白由特征在于以下两个官能团的多特异性抗原结合部分组成：部分1，包含多个抗原结合结构域(AgBD)，其特异性涉及T细胞活化，激动剂共刺激和/或抑制性拮抗剂活性；以及部分2，其包含至少一种癌细胞结合特异性。GNC蛋白可以同时结合诸如T细胞的CD3的表面分子，和诸如肿瘤细胞的ROR1的肿瘤抗原，从而将T细胞重新定向或引导至肿瘤细胞。在GNC蛋白中添加第三结合结构域可以通过其41BB的直接结合帮助增强CD3诱导的T细胞活化，即发挥激动剂活性的共刺激因子。此外，在GNC蛋白中添加第四结合结构域可以与肿瘤细胞上的PD-L1结合以阻断PD-L1对肿瘤细胞的抑制途径，所述抑制途径是通过其与T细胞上的PD-1的结合介导的。这样，GNC蛋白获得多种结合能力以将活化的T细胞重定向至肿瘤细胞，并且多种结合可以通过调节激动剂或拮抗剂活性或两者来帮助调节T细胞活化。一些结合能力可以类似于CAR-T细胞上的嵌合抗原受体或双特异性抗体(例如咬合抗体)的结合能力。尽管GNC蛋白是独特的，但它们引导和导航控制活化T细胞和肿瘤细胞之间相互作用的能力仍有待证实。
在一个实施方案中，公开了具有4个不同结合结构域的示例性GNC蛋白。该GNC蛋白是“四特异性抗体”，因为其接头和骨架包含抗体片段。在4种不同的抗原结合结构域中，一种特异性结合T细胞上的CD3；第二种结合针对肿瘤相关抗原有特异性的结构域，包括但不限于其它肿瘤抗原，诸如ROR1、CEA、HER2、EGFR、EGFRvIII、LMP1、LMP2A、Mesothelin、PSMA、EpCAM、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、gpA33、GD2、TROP2、BCMA、CD19、CD20、CD33、CD123、CD22、CD30；并且第三和第四结合结构域针对两种不同的下述免疫检查点调节剂有特异性，即PD-L1、PD-1、OX40、4-1BB、GITR、TIGIT、TIM-3、LAG-3、CTLA4、CD40、VISTA、ICOS、BTLA、Light、HVEM、CD73、CD39等。因为它们在功能和组成上的定义，GNC蛋白可被分类为用于治疗癌症的一类新的免疫调节剂。表4显示了示例性四特异性GNC抗体的列表。
表4.四特异性GNC抗体列表。
在一个实施方案中，GNC介导的免疫治疗可包括抗体疗法和细胞疗法的类型。在此，优点可以包括但不限于，包含IgG Fc结构域可以赋予与双特异性咬合分子相比在血清中更长半衰期的特征；第二，包含对免疫检查点调节剂特异性的两个结合结构域可以抑制抑制性途径并且同时参与共刺激途径；第三，T细胞上的CD3与肿瘤相关抗原的交联重新定向和引导T细胞杀死肿瘤细胞，而不需要从患者体内除去T细胞，并且在将它们重新引入患者体内之前将它们基因修饰为对肿瘤细胞具有特异性，这也称为嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法；第四，GNC蛋白介导的抗体疗法或T细胞疗法不涉及T细胞的基因修饰，后者可能具有将修饰的T细胞转化为克隆扩增的风险，即T细胞白血病。
通过结合能力的一个或多个增加，GNC蛋白介导的免疫治疗优于常规免疫治疗的优点包括，但不限于，首先，包含IgG Fc结构域可以赋予与双特异性咬合分子相比在血清中更长半衰期的特征；第二，包含对免疫检查点调节剂特异性的两个结合结构域可以抑制抑制性途径并且同时参与共刺激途径；第三，T细胞上的CD3与肿瘤相关抗原的交联重新定向和引导T细胞杀死肿瘤细胞，而不需要从患者体内除去T细胞，并且在将它们重新引入患者体内之前将它们基因修饰为对肿瘤细胞具有特异性，这也称为嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法；第四，GNC蛋白介导的抗体疗法或T细胞疗法不涉及T细胞的基因修饰，后者可能具有将修饰的T细胞转化为克隆扩增的风险，即T细胞白血病。
通过参考本文包括的特定实施方案和实施例的以下详细描述，可以更容易地理解本公开。尽管已经参考本发明的某些实施例的具体细节描述了本发明，但是并不意味着这些细节应当被认为是对本发明范围的限制。
实施例
尽管以下实施例仅作为说明而非限制提供。本领域技术人员将容易地认识到，可以改变或修改各种非关键参数以产生基本相同或相似的结果。
实施例1：与人ROR1转染的CHO细胞结合的四特异性抗体的FACS分析
测试表3和表4中所列的四特异性GNC抗体与稳定表达全长人ROR1的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞的结合。制备2X终浓度的抗体，在50μl PBS/2％FBS中的96孔板的3个孔中按1:5滴定，然后加入在50μl PBS/2％FBS中的5,000个ROR1-CHO细胞。将该混合物在冰上温育30分钟，用200μl PBS/2％FBS洗涤一次，然后加入储备液1:1000稀释度的第二抗体PE山羊抗人IgG Fc，并将该混合物在冰上温育30分钟。将细胞用2×200μl PBS/2％FBS洗涤，再悬浮于50μl PBS/2％FBS中，并在BD LSRFORTESSA上分析，结合谱如图4所示。具有对ROR1的Ig结构域有特异性的323H7结合结构域的四特异性抗体SI-35E18、19和20显示出比具有对ROR1的卷曲结构域有特异性的338H4结合结构域的四特异性GNC抗体SI-3521、22和23更高的结合，且四特异性GNC抗体SI-3524、25和26与对ROR1的卷曲结构域有特异性的330F11结合结构域不结合。
实施例2：与人41BB转染的CHO细胞结合的四特异性抗体的FACS分析
测试表3和表4中所列的四特异性GNC抗体与稳定表达全长人ROR1的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞的结合。制备2X终浓度的抗体，在50μl PBS/2％FBS中的96孔板的3个孔中按1:5滴定，然后加入在50μl PBS/2％FBS中的5,000个ROR1-CHO细胞。将该混合物在冰上温育30分钟，用200μl PBS/2％FBS洗涤一次，然后加入储备液1:1000稀释度的第二抗体PE山羊抗人IgG Fc，并将该混合物在冰上温育30分钟。将细胞用2×200μl PBS/2％FBS洗涤，再悬浮于50μl PBS/2％FBS中，并在BD LSRFORTESSA上分析，结合谱如图5所示。除对照SI-27E12外，所有四特异性GNC抗体都含有41BB结合结构域，460C3、420H5或466F6，并以不同强度与表达41BB的CHO细胞结合。
实施例3：与人PDL1转染的CHO细胞结合的四特异性抗体的FACS分析
测试表3和表4中所列的四特异性GNC抗体与稳定表达全长人ROR1的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞的结合。制备2X终浓度的抗体，在50μl PBS/2％FBS中的96孔板的3个孔中按1:5滴定，然后加入在50μl PBS/2％FBS中的5,000个ROR1-CHO细胞。将该混合物在冰上温育30分钟，用200μl PBS/2％FBS洗涤一次，然后加入储备液1:1000稀释度的第二抗体PE山羊抗人IgG Fc，并将该混合物在冰上温育30分钟。将细胞用2×200μl PBS/2％FBS洗涤，再悬浮于50μl PBS/2％FBS中，并在BD LSRFORTESSA上分析，结合谱如图6所示。除对照SI-27E15外的所有四特异性GNC抗体都含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，并且显示出与表达PDL1的CHO细胞非常相似的结合强度。
实施例4：以外周血单核细胞为效应物和B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞系
Kasumi-2为靶标的重定向T细胞细胞毒性(RTCC)测定
使用人外周血单核细胞(PBMC)作为效应物，测试表3和表4中所列的四特异性GNC抗体针对B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC活性。Kasumi2靶细胞，5×106个，用CFSE(Invitrogen，#C34554)以0.5μM在10ml培养基中于37℃标记20分钟。将细胞用50ml培养基洗涤3次，然后重悬浮于10ml中，然后再次计数。以2X终浓度制备抗体，并在200μl RPMI+10％FBS中在96孔板的10个孔中按1:3滴定。通过标准Ficoll密度梯度从“leukopak”纯化人PBMC，所述“leukopak”是从正常人外周血收集的富集白细胞单采产物。在最终目标96孔板中，通过向测定的各孔中加入100μl靶细胞(5,000)、50μl PBMC(25,000)和100μl每种抗体稀释液，合并靶细胞、PBMC和连续滴定的抗体。将测定板在37℃温育约72小时，然后收集每个测定孔的内容物并分析残留的CFSE标记的靶细胞的数目。如图7所示，四特异性GNC抗体均含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，相同的ROR1结合结构域323H7和相同的CD3结合结构域284A10，但具有41BB结合结构域460C3、420H5和466F6之一；且与除SI-27E12之外的对照相比显示出更高的RTCC活性，对照SI-27E12不具有41BB结合结构域但似乎具有与四特异性GNC抗体SI-35E18、19和20类似的效力。
实施例5：以CD8+、CD45RO+记忆T细胞为效应物，B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)细
胞系Kasumi-2为靶标的重定向T细胞毒性(RTCC)测定
使用人CD8+、CD45RO+记忆T细胞作为效应物，测试表3和4中所列的四特异性GNC抗体针对B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC活性。Kasumi2靶细胞，5×106个，用CFSE(Invitrogen，#C34554)以0.5μM在10ml培养基中于37℃标记20分钟。将细胞用50ml培养基洗涤3次，然后重悬浮于10ml培养基中，然后再次计数。以2X终浓度制备抗体，并在200μl RPMI+10％FBS中在96孔板的10个孔中按1:3滴定。根据制造商的方案，使用EasySepTM人记忆CD8+T细胞富集试剂盒(StemCell TechNO.logies，#19159)，从来自正常供体的外周血单核细胞(PBMC)富集人CD8+、CD45RO+记忆T细胞。通过FACS分析确定最终细胞群为98％CD8+、CD45RO+T细胞。在最终的目标96孔板中，通过向测定的每个孔中加入100μl靶细胞(5,000个)、50μl CD8+、CD45RO+记忆T细胞(25,000个)和100μl每种抗体稀释液，合并靶细胞、T细胞和连续滴定的抗体。将测定板在37℃温育约72小时，然后收集每个测定孔的内容物并分析残留的CFSE标记的靶细胞的数目。如图8所示，四特异性抗体都含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，相同的ROR1结合结构域323H7和相同的CD3结合结构域284A10，但是具有41BB结合结构域460C3、420H5和466F6之一，并且与不含有41BB、PDL1、ROR1或CD3结合结构域之一的对照相比显示出更高的RTCC活性。
实施例6：以CD8+、CD45RA+初始T细胞为效应物，B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)细
胞系Kasumi-2为靶标的重定向T细胞毒性(RTCC)测定
使用人CD8+、CD45RA+记忆T细胞作为效应物，测试表3和4中所列的四特异性-特异性-抗体针对B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC活性。Kasumi2靶细胞，5×10e6个，用CFSE(Invitrogen，#C34554)以0.5μM在10ml培养基中于37℃标记20分钟。将细胞用50ml培养基洗涤3次，然后重悬浮于10ml培养基中，然后再次计数。以2X终浓度制备抗体，并在200μlRPMI+10％FBS中在96孔板的10个孔中按1:3滴定。根据制造商的方案，使用EasySepTM人初始CD8+T细胞分离试剂盒(干细胞技术(StemCell TechNO.logies)，#19258)，从来自正常供体的外周血单核细胞富集人CD8+、CD45RA+记忆T细胞。通过FACS分析确定最终细胞群为98％CD8+、CD45RA+T细胞(数据未显示)。在最终的目标96孔板中，通过向测定的各孔中加入100μl靶细胞(5,000个)，50μl CD8+，CD45RO+T细胞(25,000个)和100μl每种抗体稀释液，合并靶细胞、T细胞和连续滴定的抗体。将测定板在37℃温育约72小时，然后收集每个测定孔的内容物并分析残留的CFSE标记的靶细胞的数目。如图9所示，四特异性抗体都含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，相同的ROR1结合结构域323H7和相同的CD3结合结构域284A10，但具有41BB结合结构域460C3、420H5和466F6之一，并且与不含有41BB、PDL1、ROR1或CD3结合结构域之一的对照相比显示出更高的RTCC活性。
实施例7：以外周血单核细胞为效应物和B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞系
Kasumi-2为靶标的重定向T细胞细胞毒性(RTCC)测定
使用人外周血单核细胞(PBMC)作为效应物，测试表3和表4中所列的四特异性-特异性抗体针对B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC活性。Kasumi2靶细胞，5×106个，用CFSE(Invitrogen，#C34554)以0.5μM在10ml培养基中于37℃标记20分钟。将细胞用50ml培养基洗涤3次，然后重悬浮于10ml培养基中，然后再次计数。以2X终浓度制备抗体，并在200μlRPMI+10％FBS中在96孔板的10个孔中按1:3滴定。通过标准Ficoll密度梯度从“leukopak”纯化人PBMC，所述“leukopak”是从正常人外周血收集的富集白细胞单采产物。在最终目标96孔板中，通过向测定的各孔中加入100μl靶细胞(5,000个)、50μl PBMC(25,000个)和100μl每种抗体稀释液，合并靶细胞、PBMC和连续滴定的抗体。将测定板在37℃温育约72小时，然后收集每个测定孔的内容物并分析残留的CFSE标记的靶细胞的数目。如图10所示，四特异性GNC抗体都含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，相同的ROR1结合结构域338H4和相同的CD3结合结构域284A10，但具有41BB结合结构域460C3、420H5和466F6之一，并且与除了对照SI-35E36之外的对照相比显示出更高的RTCC活性，对照SI-35E36不具有41BB结合结构域，但是似乎具有与四特异性抗体SI-35E18、19和20类似的效力。
实施例8：以CD8+、CD45RO+记忆T细胞为效应物，B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)细
胞系Kasumi-2为靶标的重定向T细胞毒性(RTCC)测定
使用人CD8+、CD45RO+记忆T细胞作为效应物，测试表3和4中所列的四特异性GNC抗体针对B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC活性。Kasumi2靶细胞，5×106个，用CFSE(Invitrogen，#C34554)以0.5μM在10ml培养基中于37℃标记20分钟。将细胞用50ml培养基洗涤3次，然后重悬浮于10ml培养基中，然后再次计数。以2X终浓度制备抗体，并在200μl RPMI+10％FBS中在96孔板的10个孔中按1:3滴定。根据制造商的方案，使用EasySepTM人记忆CD8+T细胞富集试剂盒(StemCell TechNO.logies，#19159)，从来自正常供体的外周血单核细胞(PBMC)富集人CD8+、CD45RO+记忆T细胞。通过FACS分析确定最终细胞群为98％CD8+、CD45RO+T细胞(数据未显示)。在最终的目标96孔板中，通过向测定的每个孔中加入100μl靶细胞(5,000个)、50μl CD8+、CD45RO+记忆T细胞(25,000个)和100μl每种抗体稀释液，合并靶细胞、T细胞和连续滴定的抗体。将测定板在37℃温育约72小时，然后收集每个测定孔的内容物并分析残留的CFSE标记的靶细胞的数目。如图11所示，四特异性GNC抗体都含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，相同的ROR1结合结构域338H4和相同的CD3结合结构域284A10，但是具有41BB结合结构域460C3、420H5和466F6之一，并且与不含有41BB、PDL1、ROR1或CD3结合结构域之一的对照相比显示出更高的RTCC活性。
实施例9：以CD8+，CD45RA+初始T细胞为效应物，B-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)细
胞系Kasumi-2为靶标的重定向T细胞毒性(RTCC)测定
使用人CD8+、CD45RA+记忆T细胞作为效应物，测试表3和4中所列的四特异性GNC抗体针对B-ALL细胞系Kasumi2的RTCC活性。Kasumi2靶细胞，5×106个，用CFSE(Invitrogen，#C34554)以0.5μM在10ml培养基中于37℃标记20分钟。将细胞用50ml培养基洗涤3次，然后重悬浮于10ml培养基中，然后再次计数。以2X终浓度制备抗体，并在200μl RPMI+10％FBS中在96孔板的10个孔中按1:3滴定。根据制造商的方案，使用EasySepTM人记忆CD8+T细胞分离试剂盒(StemCell TechNO.logies，#19258)，从来自正常供体的外周血单核细胞(PBMC)富集人CD8+、CD45RA+初始T细胞。通过FACS分析确定最终细胞群为98％CD8+、CD45RA+T细胞。在最终的目标96孔板中，通过向测定的各孔中加入100μl靶细胞(5,000个)，50μl CD8+，CD45RO+T细胞(25,000个)和100μl每种抗体稀释液，合并靶细胞、T细胞和连续滴定的抗体。将测定板在37℃温育约72小时，然后收集每个测定孔的内容物并分析残留的CFSE标记的靶细胞的数目。如图12所示，四特异性GNC抗体都含有相同的PDL1结合结构域PL230C6，相同的ROR1结合结构域338H4和相同的CD3结合结构域284A10，但是具有41BB结合结构域460C3、420H5和466F6之一，但是与不含有41BB、PDL1、ROR1或CD3结合结构域之一的对照相比，没有显示更大的RTCC活性。这与实施例6中描述的和图6中显示的对CD8+、CD45RA+初始T细胞确实显示RTCC活性的四特异性GNC抗体形成对比。
术语“抗体”以最广泛的意义使用，具体包括单一单克隆抗体(包括激动剂和拮抗剂抗体)、具有多表位特异性的抗体组合物、以及抗体片段(例如Fab、F(ab')2和Fv)，只要它们表现出所需的生物活性。在一些实施方案中，抗体可以是单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、双特异性抗体或双效抗体、猿抗体、人抗体和人源化抗体及其活性片段。与已知抗原结合的分子的活性片段的实例包括Fab、F(ab')2、scFv和Fv片段，以及Fab免疫球蛋白表达文库的产物和任何上述抗体和片段的表位结合片段。在一些实施方案中，抗体可以包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有免疫特异性结合抗原的结合位点的分子。免疫球蛋白可以是任何类型(IgG、IgM、IgD、IgE、IgA和IgY)或类(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或免疫球蛋白分子的亚类。在一个实施方案中，抗体可以是完整抗体和衍生自该完整抗体的任何抗原结合片段。典型抗体是指通常包含两条重(H)链和两条轻(L)链的异四聚体蛋白质。每条重链由重链可变区(缩写为VH)和重链恒定区组成。每条轻链由轻链可变区(缩写为VL)和轻链恒定区组成。VH和VL区可进一步细分为超变互补决定区(CDR)的结构域，和称为构架区(FR)的更保守区。每个可变区(VH或VL)通常由三个CDR和四个FR组成，按以下顺序排列：从氨基末端到羧基末端为FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在轻链和重链的可变区内存在与抗原相互作用的结合区。
如本文所用，术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体群体获得的抗体，即除了可能以少量存在的天然存在的突变之外，包含该群体的单个抗体是相同的。单克隆抗体针对单个抗原位点具有高度特异性。此外，与通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的常规(多克隆)抗体制剂相反，每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。除了它们的特异性之外，单克隆抗体的优点在于它们由杂交瘤培养物合成，不被其它免疫球蛋白污染。修饰语“单克隆”表示从基本上同质的抗体群体获得的抗体的特征，并且不应被解释为需要通过任何特定方法生产抗体。例如，根据本公开内容使用的单克隆抗体可以通过首先由Kohler和Milstein，自然，256：495(1975)描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组DNA方法制备(参见，例如，美国专利NO.4,816,567)。
单克隆抗体可包括“嵌合”抗体(免疫球蛋白)，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定种类或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而所述链的剩余部分与衍生自另一种类或属于另一抗体类别或亚类的抗体以及这些抗体的片段中的相应序列相同或同源，只要它们表现出所需的生物活性即可(美国专利NO.4,816,567；和Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sci.美国,81:6851-6855[1984])。
单克隆抗体可以使用各种方法产生，包括小鼠杂交瘤或噬菌体展示(参见Siegel.Transfus.Clin.Biol.9：15-22(2002)综述)或直接来自原代B细胞的抗体的分子克隆(参见Tiller.新型生物技术(New BiotechNO.l).28:453-7(2011))。在本发明中通过用人PD-L1蛋白和在细胞表面瞬时表达人PD-L1的细胞免疫兔来产生抗体。已知兔产生高亲和力、多样性和特异性的抗体(Weber等人Exp.Mol.Med.49:E305)。体外培养来自免疫动物的B细胞并筛选抗PD-L1抗体的产生。使用重组DNA技术分离抗体可变基因，重组表达所得抗体，并进一步筛选所需特征，例如抑制PD-L1与PD-1结合的能力，与非人灵长类PD-L1结合的能力和增强人T细胞活化的能力。这种抗体发现的一般方法类似于Seeber等PLOS One.9:E86184(2014)描述的方法。
术语“抗原或表位结合部分或片段”是指能够结合抗原(在这种情况下是PD-L1)的抗体片段。这些片段可以具有完整抗体的抗原结合功能和附加功能。结合片段的实例包括但不限于单链Fv片段(scFv)或Fab片段，所述单链Fv片段(scFv)由通过合成接头连接在单多肽链中的抗体的单臂的VL和VH结构域组成，所述Fab片段是由VL、恒定轻链(CL)、VH和恒定重链1(CH1)结构域组成的单价片段。抗体片段可以是甚至更小的亚片段并且可以由与单个CDR结构域一样小的结构域组成，特别是来自VL和/或VH结构域的CDR3区(例如参见Beiboer等人，J.Mol.Biol.296:833-49(2000))。使用本领域技术人员已知的常规方法制备抗体片段。可以使用与完整抗体相同的技术筛选抗体片段的效用。
“抗原或表位结合片段”可以通过许多本领域已知的技术衍生自本公开的抗体。例如，可以用酶如胃蛋白酶切割纯化的单克隆抗体，并进行HPLC凝胶过滤。然后可收集含有Fab片段的适当级分并通过膜过滤等浓缩。关于分离抗体活性片段的一般技术的进一步描述，参见例如Khaw,B.A.等.J.nucl.Med.23:1011-1019(1982)；Rousseaux等人，方法酶学(Methods Enzymology)，121：663-69，学术出版社(Academic Press)，1986。
抗体的木瓜蛋白酶消化产生两个相同的抗原结合片段，称为“Fab”片段，每个片段具有单个抗原结合位点，和残余的“Fc”片段，其名称反映其易于结晶的能力。胃蛋白酶处理产生具有两个抗原结合位点并且仍然能够交联抗原的F(ab')2片段。
Fab片段可含有轻链的恒定域和重链的第一恒定域(CH1)。Fab'片段与Fab片段的不同之处在于在重链CH1结构域的羧基末端添加了一些残基，包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab’-SH在本文中是指Fab’，其中恒定结构域的半胱氨酸残基带有游离巯基。F(ab’)2抗体片段最初产生为Fab’片段对，它们之间具有铰链半胱氨酸。另外，抗体片段的化学偶联也是已知的。
“Fv”是含有完整抗原识别和结合位点的最小抗体片段。该区域由紧密非共价结合的一个重链可变域和一个轻链可变域的二聚体组成。在这种构型中，每个可变域的三个CDR相互作用以限定VH-VL二聚体表面上的抗原结合位点。总起来说，六个CDR赋予抗体抗原结合特异性。然而，即使单个可变结构域(或只包含对抗原特异的三个CDR的Fv的一半)也具有识别和结合抗原的能力，尽管亲和力低于整个结合位点。
基于其恒定结构域的氨基酸序列，来自任何脊椎动物物种的抗体(免疫球蛋白)的“轻链”可以归属于两种明显不同的类型之一，称为kappa(κ)和lambda(λ)。
根据其重链恒定域的氨基酸序列，免疫球蛋白可分为不同的类别。免疫球蛋白有五大类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中一些可以进一步分为亚类(同种型)，例如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4；IgA-1和IgA-2。对应于不同类免疫球蛋白的重链恒定区分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同类免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。
“人源化抗体”是指一类工程化抗体，其CDR衍生自非人供体免疫球蛋白，分子的剩余免疫球蛋白衍生部分衍生自一种(或多种)人免疫球蛋白。此外，可以改变框架支持残基以保持结合亲和力。获得“人源化抗体”的方法是本领域技术人员熟知的。(参见例如Queen等，Proc.Natl Acad Sci USA，86：10029-10032(1989)，Hodgson等，Bio/TechNO.logy，9：421(1991))。在一个实施方案中，“人源化抗体”可以通过基因工程方法获得，该基因工程方法能够在例如兔的大型动物中产生亲和力成熟的人样多克隆抗体(参见，例如，美国专利NO.NO.7,129,084)。
如本文所用，术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”是可互换的，并且定义为意指由通过肽键连接的氨基酸组成的生物分子。
如本文所用的术语“一”、“一个”和“该”被定义为意指“一个或多个”并且包括复数，除非上下文不适当。
“分离的”是指不含其天然存在的至少一些组分的生物分子。“分离的”当用于描述本文公开的各种多肽时，是指已经从其表达的细胞或细胞培养物中鉴定和分离和/或回收的多肽。通常，通过至少一个纯化步骤制备分离的多肽。“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体。
“重组”是指使用重组核酸技术在外源宿主细胞中产生抗体。
术语“抗原”是指可以在生物体、特别是动物、更特别是包括人在内的哺乳动物中诱导免疫应答的实体或其片段。该术语包括免疫原及其负责抗原性或抗原决定簇的区域。
同样如本文所用，术语“免疫原性”是指引发或增强针对免疫原性剂的抗体，T细胞或其它反应性免疫细胞的产生并有助于人或动物中的免疫应答的物质。当个体针对本公开的施用的免疫原性组合物产生足够的抗体、T细胞和其它反应性免疫细胞以缓和或减轻待治疗的病症时，发生免疫应答。
“特异性结合”或“与…特异性结合”或“针对…有特异性”特定抗原或表位是指与非特异性相互作用可测量地不同的结合。特异性结合可以例如通过测定与对照分子的结合相比的分子的结合来测量，所述对照分子通常是不具有结合活性的类似结构的分子。例如，特异性结合可以通过与类似于靶的对照分子竞争来确定。
对特定抗原或表位的特异性结合可例如通过抗体对抗原或表位的KD来表示，所述KD至少约10-4M、至少约10-5M、至少约10-6M、至少约10-6M、至少约10-7M、至少约10-8M、至少约10-9M、或者至少约10-10M、至少约10-11M、至少约10-12M或更高，其中KD是指特定抗体-抗原相互作用的解离速率。在一些实施方案中，特异性结合抗原的抗体相对于抗原或表位对于对照分子可以具有20-、50-、100-、500-、1000-、5,000-、10,000-或更多倍的KD。
同样，对于特定抗原或表位的特异性结合可以例如通过抗体对于抗原或表位的KA或Ka来表示，该KA或Ka相对于对照对于所述表位的KA或Ka至少大20-、50-、100-、500-、1000-、5,000-、10,000-或更多倍，其中KA或Ka是指特定抗体-抗原相互作用的结合速率。
两个序列之间的“同源性”由序列同一性决定。如果待相互比较的两个序列长度不同，则序列同一性优选是指较短序列的核苷酸残基与较长序列的核苷酸残基相同的百分比。可以使用计算机程序常规地确定序列同一性。在给定序列与本公开的上述序列之间的比较中出现的偏差可以由例如添加、缺失、取代、插入或重组引起。
虽然已参考特定实施例或实例描述了本发明，但应了解，所述实施例是说明性的且本发明的范围不限于此。本公开的替代实施例对于本公开所属领域的普通技术人员来说是显而易见的。这些替代实施例被认为包含在本公开的范围内。因此，本发明的范围由所附权利要求书限定且由上文描述支持。本公开中引用或提及的所有参考文献在此全文引入作为参考。
序列表
氨基酸序列中CDR加下划线
>SEQ ID 01抗-CD3 284A10 VHv1 nt
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCATCAGTACCAATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGAGTCATTACTGGTCGTGATATCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCAGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGCGCGACGGTGGATCATCTGCTATTACTAGTAACAACATTTGGGGCCAAGGAACTCTGGTCACCGTTTCTTCA
>SEQ ID 02抗-CD3 284A10 VHv1 aa
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISTNAMSWVRQAPGKGLEWIGVITGRDITYYASWAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGGSSAITSNNIWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 03抗-CD3 284A10 VLv1 nt
GACGTCGTGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCAATTGCCAAGCCAGTGAGAGCATTAGCAGTTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGAAGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGGCTATTTTTATTTTATTAGTCGTACTTATGTAAATTCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 04抗-CD3 284A10 VLv1 aa
DVVMTQSPSTLSASVGDRVTINCQASESISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASKLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQGYFYFISRTYVNSFGGGTKVEIK
>SEQ ID 05抗-CD3 480C8 VHv1 nt
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAATCGACCTCAGTAGCAATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGAGTCATTACTGGTCGTGATATCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCAGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGCGCGACGGTGGATCATCTGCTATTAATAGTAAGAACATTTGGGGCCAAGGAACTCTGGTCACCGTTTCTTCA
>SEQ ID 06抗-CD3 480C8 VHv1 aa
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGIDLSSNAMSWVRQAPGKGLEWIGVITGRDITYYASWAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGGSSAINSKNIWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 07抗-CD3 480C8 VLv1 nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAAGCCAGTGAGAGCATTAGCAGTTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGAAGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGGCTATTTTTATTTTATTAGTCGTACTTATGTAAATGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 08抗-CD3 480C8 VLv1 aa
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQASESISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYEASKLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQGYFYFISRTYVNAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 09抗-PD-L1 PL230C6 VHv3 nt
CAGTCGGTGGAGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGGAATCGACCTTAATACCTACGACATGATCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTAGAGTGGGTTGGAATCATTACTTATAGTGGTAGTAGATACTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAGACAATACCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCCAGAGATTATATGAGTGGTTCCCACTTGTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCTAGT
>SEQ ID 10抗-PD-L1 PL230C6 VHv3 aa
QSVEESGGGLVQPGGSLRLSCTASGIDLNTYDMIWVRQAPGKGLEWVGIITYSGSRYYANWAKGRFTISKDNTKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYMSGSHLWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 11抗-PD-L1 PL230C6 VLv2 nt
GCCTATGATATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCAAGTGTCAGGCCAGTGAGGACATTTATAGCTTCTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCCATTCTGCATCCTCTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGGTTATGGTAAAAATAATGTTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 12抗-PD-L1 PL230C6 VLv2 aa
AYDMTQSPSSVSASVGDRVTIKCQASEDIYSFLAWYQQKPGKAPKLLIHSASSLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYGKNNVDNAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 13抗-4-1BB 420H5 VHv3 nt
CAGTCGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCAACTACTGGATATGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGCATTTATGTTGGTAGTAGTGGTGACACTTACTACGCGAGCTCCGCGAAAGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGAGATAGTAGTAGTTATTATATGTTTAACTTGTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC
>SEQ ID 14抗-4-1BB 420H5 VHv3 aa
QSLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSFSSNYWICWVRQAPGKGLEWIACIYVGSSGDTYYASSAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDSSSYYMFNLWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 15抗-4-1BB 420H5 VLv3 nt
GCCCTTGTGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGGACATTGATACCTATTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTTTTATGCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGGCGGTTACTATACTAGTAGTGCTGATACGAGGGGTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 16抗-4-1BB 420H5 VLv3 aa
ALVMTQSPSTLSASVGDRVTINCQASEDIDTYLAWYQQKPGKAPKLLIFYASDLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQGGYYTSSADTRGAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 17抗-4-1BB 466F6 VHv2 nt
CGGTCGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACCATCAGTAGCTACCACATGCAGTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTACATCGGAACCATTAGTAGTGGTGGTAATGTATACTACGCGAGCTCCGCGAGAGGCAGATTCACCATCTCCAGACCCTCGTCCAAGAACACGGTGGATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGACTCTGGTTATAGTGATCCTATGTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC
>SEQ ID 18抗-4-1BB 466F6 VHv2 aa
RSLVESGGGLVQPGGSLRLSCTASGFTISSYHMQWVRQAPGKGLEYIGTISSGGNVYYASSARGRFTISRPSSKNTVDLQMNSLRAEDTAVYYCARDSGYSDPMWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 19抗-4-1BB 466F6 VLv5 nt
GACGTTGTGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACCTGTCAGGCCAGTCAGAACATTAGGACTTACTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCAGCCAATCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGCCTGGCGATGCTGCAACTTACTATTGTCAGTCTACCTATCTTGGTACTGATTATGTTGGCGGTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 20抗-4-1BB 466F6 VLv5 aa
DVVMTQSPSSVSASVGDRVTITCQASQNIRTYLSWYQQKPGKAPKLLIYAAANLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISDLEPGDAATYYCQSTYLGTDYVGGAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 21抗-4-1BB 460C3 VHv1 nt
GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAATCGACTTCAGTAGGAGATACTACATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGCATATATACTGGTAGCCGCGATACTCCTCACTACGCGAGCTCCGCGAAAGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGAGAAGGTAGCCTGTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGC
>SEQ ID 22抗-4-1BB 460C3 VHv1 aa
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGIDFSRRYYMCWVRQAPGKGLEWIACIYTGSRDTPHYASSAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGSLWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 23抗-4-1BB 460C3 VLv1 nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAGTAACTGGTTCTCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCGCAGGCGGTTACAATACTGTTATTGATACTTTTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 24抗-4-1BB 460C3 VLv1 aa
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQSSQSVYSNWFSWYQQKPGKAPKLLIYSASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQP DDFATYYCAGGYNTVIDTFAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 25抗-ROR1 324C6 VHv2 nt
CAGTCGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACTGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGGTACTACATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGAACCATTTATACTAGTGGTAGTACATGGTACGCGAGCTGGACAAAAGGCAGATTCACCATCTCCAAAGACAATACCAAGAACACGGTGGATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGATCCTATTATGGCGGTGATAAGACTGGTTTAGGCATCTGGGGCCAGGGAACTCTGGTTACCGTCTCTTCA
>SEQ ID 26抗-ROR1 324C6 VHv2 nt
QSLVESGGGLVQPGGSLRLSCTASGFSLSRYYMTWVRQAPGKGLEWIGTIYTSGSTWYASWTKGRFTISKDNTKNTVDLQMNSLRAEDTAVYYCARSYYGGDKTGLGIWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 27抗-ROR1 324C6 VLv1 nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTGATAGTTGGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATCAGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAATCTGCTTATGGTGTTAGTGGTACTAGTAGTTATTTATATACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 28抗-ROR1 324C6 VLv1 aa
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQASQSIDSWLSWYQQKPGKAPKLLIYQASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQSAYGVSGTSSYLYTFGGGTKVEIK
>SEQ ID 29抗-ROR1 323H7 VHv4 nt
GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCATCAGTCGCTACCACATGACTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGACATATTTATGTTAATAATGATGACACAGACTACGCGAGCTCCGCGAAAGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGATTGGATGTTGGTGGTGGTGGTGCTTATATTGGGGACATCTGGGGCCAGGGAACTCTGGTTACCGTCTCTTCA
>SEQ ID 30抗-ROR1 323H7 VHv4 aa
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISRYHMTWVRQAPGKGLEWIGHIYVNNDDTDYASSAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTATYFCARLDVGGGGAYIGDIWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 31抗-ROR1 323H7 VLv1 nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAACAACAACGACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGTTCCTAAGCTCCTGATCTATTATGCTTCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCTCGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCAACTTATTACTGTGCAGGCGGTTATGATACGGATGGTCTTGATACGTTTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 32抗-ROR1 323H7 VLv1 aa
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSQSVYNNNDLAWYQQKPGKVPKLLIYYASTLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCAGGYDTDGLDTFAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 33抗-ROR1 338H4 VHv3 nt
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACTGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAGGGGGCTGGAGTGGATCGGAATCATTTATGCTAGTGGTAGCACATACTACGCGAGCTCGGCGAAAGGCAGATTCACCATCTCCAAAGACAATACCAAGAACACGGTGGATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAATTTATGACGGCATGGACCTCTGGGGCCAGGGAACTCTGGTTACCGTCTCTTCA
>SEQ ID 34抗-ROR1 338H4 VHv3 aa
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCTASGFSLSSYAMSWVRQAPGRGLEWIGIIYASGSTYYASSAKGRFTISKDNTKNTVDLQMNSLRAEDTAVYYCARIYDGMDLWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 35抗-ROR1 338H4 VLv4 nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTCAGAACATTTACAGCTACTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGTTCCTAAGCGCCTGATCTATCTGGCATCTACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCTCGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTACACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCAACTTATTACTGTCAAAGCAATTATAACGGTAATTATGGTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 36抗-ROR1 338H4 VLv4 aa
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTINCQASQNIYSYLSWYQQKPGKVPKRLIYLASTLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQSNYNGNYGFGGGTKVEIK
>SEQ ID 37抗-ROR1 330F11 VHv1 nt
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATAACTACTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGAACCATTAGTAGTGGTGCGTATACATGGTTCGCCACCTGGGCGACAGGCAGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGATATTCTTCTACTACTGATTGGACCTACTTTAACATCTGGGGCCAGGGAACTCTGGTTACCGTCTCTTCA
>SEQ ID 38抗-ROR1 330F11 VHv1 aa
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLNNYWMSWVRQAPGKGLEWIGTISSGAYTWFATWATGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYSSTTDWTYFNIWGQGTLVTVSS
>SEQ ID 39抗-ROR1 330F11 VLv1 nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAATAACTACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGAATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAAGCTATAATGGTGTTGGTAGGACTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 40抗-ROR1 330F11 VLv1 aa
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQASQSINNYLAWYQQKPGKAPKLLIYRASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQSYNGVGRTAFGGGTKVEIK
>SEQ ID 41抗-FITC 4-4-20 VH nt
GAGGTGAAGCTGGATGAGACTGGAGGAGGCTTGGTGCAACCTGGGAGGCCCATGAAACTCTCCTGTGTTGCCTCTGGATTCACTTTTAGTGACTACTGGATGAACTGGGTCCGCCAGTCTCCAGAGAAAGGACTGGAGTGGGTAGCACAAATTAGAAACAAACCTTATAATTATGAAACATATTATTCAGATTCTGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGTAGTGTCTACCTGCAAATGAACAACTTAAGAGTTGAAGACATGGGTATCTATTACTGTACGGGTTCTTACTATGGTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA
>SEQ ID 42抗-FITC 4-4-20 VH aa
EVKLDETGGGLVQPGRPMKLSCVASGFTFSDYWMNWVRQSPEKGLEWVAQIRNKPYNYETYYSDSVKGRFTISRDDSKSSVYLQMNNLRVEDMGIYYCTGSYYGMDYWGQGTSVTVSS
>SEQ ID 43抗-FITC 4-4-20 VL nt
GATGTCGTGATGACCCAAACTCCACTCTCCCTGCCTGTCAGTCTTGGAGATCAAGCCTCCATCTCTTGCAGATCTAGTCAGAGCCTTGTACACAGTAATGGAAACACCTATTTACGTTGGTACCTGCAGAAGCCAGGCCAGTCTCCAAAGGTCCTGATCTACAAAGTTTCCAACCGATTTTCTGGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGGACAGATTTCACACTCAAGATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATCTGGGAGTTTATTTCTGCTCTCAAAGTACACATGTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA
>SEQ ID 44抗-FITC 4-4-20 VL aa
DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHSNGNTYLRWYLQKPGQSPKVLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSTHVPWTFGGGTKLEIK
>SEQ ID 45人IgG1无效(具有ADCC/CDC无效突变的G1m-fa)nt
GCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTT
GGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAAGCCGCGGGGGCACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCGCGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGATGAGCTGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGT
>SEQ ID 46人IgG1无效(具有ADCC/CDC无效突变的G1m-fa)aa
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCAVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
>SEQ ID 47人Igκnt
CGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT
>SEQ ID 48人Igκaa
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
>SEQ ID 49 SI-35E18
(460C3-L1H1-scFv×PL230C6-Fab×323H7-H4L1-scFv×284A10-H1L1-scFv)重链nt
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAGTAACTGGTTCTCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCGCAGGCGGTTACAATACTGTTATTGATACTTTTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAAGGCGGTGGCGGTAGTGGGGGAGGCGGTTCTGGCGGCGGAGGGTCCGGCGGTGGAGGATCAGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAATCGACTTCAGTAGGAGATACTACATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGCATATATACTGGTAGCCGCGATACTCCTCACTACGCGAGCTCCGCGAAAGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGAGAAGGTAGCCTGTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGGCGGTGGAGGGTCCGGCGGTGGTGGATCCCAGTCGGTGGAGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGGAATCGACCTTAATACCTACGACATGATCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTAGAGTGGGTTGGAATCATTACTTATAGTGGTAGTAGATACTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAGACAATACCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCCAGAGATTATATGAGTGGTTCCCACTTGTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCTAGTGCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAAGCCGCGGGGGCACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCGCGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTATACCCTGCCCCCATCCCGGGATGAGCTGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTGGCGGTGGAGGGTCCGGCGGTGGTGGATCCGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCATCAGTCGCTACCACATGACTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGACATATTTATGTTAATAATGATGACACAGACTACGCGAGCTCCGCGAAAGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGATTGGATGTTGGTGGTGGTGGTGCTTATATTGGGGACATCTGGGGCCAGGGAACTCTGGTTACCGTCTCTTCAGGCGGTGGCGGTAGTGGGGGAGGCGGTTCTGGCGGCGGAGGGTCCGGCGGTGGAGGATCAGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAACAACAACGACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGTTCCTAAGCTCCTGATCTATTATGCTTCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCTCGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATGTTGCAACTTATTACTGTGCAGGCGGTTATGATACGGATGGTCTTGATACGTTTGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAAGGCGGTGGAGGGTCCGGCGGTGGTGGATCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCATCAGTACCAATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGAGTCATTACTGGTCGTGATATCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCAGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTTCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGCGCGACGGTGGATCATCTGCTATTACTAGTAACAACATTTGGGGCCAAGGAACTCTGGTCACCGTTTCTTCAGGCGGTGGCGGTAGTGGGGGAGGCGGTTCTGGCGGCGGAGGGTCCGGCGGTGGAGGATCAGACGTCGTGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCAATTGCCAAGCCAGTGAGAGCATTAGCAGTTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGAAGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGGCTATTTTTATTTTATTAGTCGTACTTATGTAAATTCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
>SEQ ID 50 SI-35E18
(460C3-L1H1-scFv×PL230C6-Fab×323H7-H4L1-scFv×284A10-H1L1-scFv)重链aa
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCQSSQSVYSNWFSWYQQKPGKAPKLLIYSASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCAGGYNTVIDTFAFGGGTKVEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGIDFSRRYYMCWVRQAPGKGLEWIACIYTGSRDTPHYASSAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGSLWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSQSVEESGGGLVQPGGSLRLSCTASGIDLNTYDMIWVRQAPGKGLEWVGIITYSGSRYYANWAKGRFTISKDNTKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYMSGSHLWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCAVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSEVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISRYHMTWVRQAPGKGLEWIGHIY VNNDDTDYASSAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTATYFCARLDVGGGGAYIGDIWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQSSQSVYNNNDLAWYQQKPGKVPKLLIYYASTLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCAGGYDTDGLDTFAFGGGTKVEIKGGGGSGGGGSEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISTNAMSWVRQAPGKGLEWIGVITGRDITYYASWAKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGGSSAITSNNIWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDVVMTQSPSTLSASVGDRVTINCQASESISSW LAWYQQKPGKAPKLLIYEASKLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQGYFYFISRTYVNSFGGGTKVEIK
>SEQ ID 51 SI-35E18
(460C3-L1H1-scFv×PL230C6-Fab×323H7-H4L1-scFv×284A10-H1L1-scFv)轻链nt
GCCTATGATATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCAAGTGTCAGGCCAGTGAGGACATTTATAGCTTCTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCCATTCTGCATCCTCTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGGTTATGGTAAAAATAATGTTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT
>SEQ ID 52 SI-35E18
(460C3-L1H1-scFv×PL230C6-Fab×323H7-H4L1-scFv×284A10-H1L1-scFv)轻链aa
AYDMTQSPSSVSASVGDRVTIKCQASEDIYSFLAWYQQKPGKAPKLLIHSASSLASGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGYGKNNVDNAFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Claims (22)
1.一种制导和导航控制(GNC)蛋白，其包含细胞毒性细胞结合部分和癌症靶向部分，其中所述细胞毒性细胞结合部分对T细胞受体、NK细胞受体、巨噬细胞受体、树突细胞受体或其组合具有结合特异性，并且其中所述癌症靶向部分对癌细胞受体具有结合特异性。
2.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述T细胞受体包括CD3、CD28、PDL1、PD1、OX40、4-1BB、GITR、TIGIT、TIM-3、LAG-3、CTLA4、CD40L、VISTA、ICOS、BTLA、Light、CD30、NKp30、CD28H、CD27、CD226、CD96、CD112R、A2AR、CD160、CD244、CECAM1、CD200R、TNFRSF25(DR3)或其组合。
3.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述NK细胞受体包括CD16、NKG2D、KIR2DS1、KIR2DS2、KIR2DS4、KIR3DS1、NKG2C、NKG2E、NKG2H、NKp30a、NKp30b、NKp46、NKp80、DNAM-1、CD96、CD160、4-1BB、GITR、CD27、OX-40、CRTAM、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR3DL3、NKG2A、NKp30c、TIGIT、SIGLEC7、SIGLEC9、LILR、LAIR-1、KLRG1、PD-1、CTLA-4或CD161。
4.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述巨噬细胞受体包括TLR2、TLR4、CD16、CD64、CD40、CD80、CD86、TREM-1、TREM-2、ILT-1、ILT-6a、ILT-7、ILT-8、EMR2、Dectin-1、CD69、CD32b、SIRPα、LAIR-1、VISTA、TIM-3、CD200R、CD300a、CD300f、SIGLEC1、SIGLEC3、SIGLEC5,SIGLEC7、SIGLEC9、ILT-2、ILT-3、ILT-4、ILT-5、LILRB3、LILRB4、DCIR、CSF-1R、LOX-1、CCR2、FRβ、CD163、CR3、DC-SIGN、CD206、SR-A、CD36、MARCO。
5.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述树突细胞受体包括TLR,CD16,CD64、CD40、CD80、CD86、HVEM,CD70、VISTA、TIM-3、LAG-3、BTLA、CSF-1R、LOX-1、CCR7、DC-SIGN、GM-CSF-R、IL-4R、IL-10R、CD36、CD206、DCIR、RIG-1、CLEC9A、CXCR4。
6.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述癌症受体是如下癌细胞上的受体：肺癌细胞、肝癌细胞、乳腺癌细胞、结肠直肠癌细胞、肛门癌细胞、胰腺癌细胞、胆囊癌细胞、胆管癌细胞、头颈癌细胞、鼻咽癌细胞、皮肤癌细胞、黑素瘤细胞、卵巢癌细胞、前列腺癌细胞、尿道癌细胞、肺癌细胞；非小细胞肺癌细胞、小细胞肺癌细胞、脑肿瘤细胞、神经胶质瘤细胞、成神经细胞瘤细胞、食管癌细胞、胃癌细胞、肝癌细胞、肾癌细胞、膀胱癌细胞、宫颈癌细胞、子宫内膜癌细胞、甲状腺癌细胞、眼癌细胞、肉瘤细胞；骨癌细胞、白血病细胞、骨髓瘤细胞、淋巴瘤细胞或其组合。
7.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述癌细胞受体包括BCMA、CD19、CD20、CD33、CD123、CD22、CD30、ROR1、CEA、HER2、EGFR、EGFRvIII、LMP1、LMP2A、间皮素、PSMA、EpCAM、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、gpA33、GD2、TROP2或其组合。
8.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其中所述GNC蛋白能够通过将所述细胞毒性细胞结合部分与所述T细胞受体结合而活化T细胞。
9.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其包含双特异性抗体或抗体单体、三特异性抗体或抗体单体、四特异性抗体或抗体单体、或其组合。
10.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其包含与SEQ ID NO.49-52具有百分比同源性的氨基酸序列，其中所述百分比同源性不小于98％。
11.根据权利要求1所述的GNC蛋白，其包含第一部分、第二部分和接头部分，其中所述第一部分包含所述细胞毒性细胞结合部分，其中第二部分包含所述癌症靶向部分，并且其中所述第一分子和所述第二分子通过所述接头部分结合在一起。
12.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述第一或第二部分包含抗体或其片段、可溶性受体或其组合。
13.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述第一部分和所述第一部分通过接头部分连接以提供所述GNC蛋白。
14.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述接头部分共价连接所述第一和所述第二部分以提供所述GNC蛋白。
15.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述接头部分包含一对互补分子或稳定的蛋白-蛋白相互作用。
16.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述互补分子对包含DNA或RNA的互补链。
17.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述稳定的蛋白-蛋白相互作用包括生物素-抗生物素蛋白相互作用。
18.根据权利要求11所述的GNC蛋白，其中所述第一部分和所述第二部分具有彼此结合特异性，其中所述接头部分是所述第一部分与所述第二部分之间的键合亲和力相互作用，且其中所述第一部分和所述第二部分键合在一起以通过非共价键合相互作用提供所述GNC蛋白。
19.一种治疗复合物，其包含根据权利要求1所述的GNC蛋白和细胞毒性细胞，其中所述细胞毒性细胞包含T细胞、NK细胞、巨噬细胞、树突细胞或其组合。
20.一种治疗复合物，其包含根据权利要求1所述的GNC蛋白和癌细胞。
21.一种治疗复合物，其包含根据权利要求1所述的GNC蛋白，与所述T细胞结合部分结合的T细胞和与所述癌症靶向部分结合的癌细胞。
22.一种药物组合物，其包含根据权利要求19所述的治疗复合物和药学上可接受的载体。
Applications Claiming Priority (21)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762524554P | 2017-06-25 | 2017-06-25 | |
| US201762524557P | 2017-06-25 | 2017-06-25 | |
| US201762524553P | 2017-06-25 | 2017-06-25 | |
| US201762524558P | 2017-06-25 | 2017-06-25 | |
| US62/524,553 | 2017-06-25 | ||
| US62/524,558 | 2017-06-25 | ||
| US62/524,557 | 2017-06-25 | ||
| US62/524,554 | 2017-06-25 | ||
| US201762545603P | 2017-08-15 | 2017-08-15 | |
| US62/545,603 | 2017-08-15 | ||
| US201762551032P | 2017-08-28 | 2017-08-28 | |
| US201762551035P | 2017-08-28 | 2017-08-28 | |
| US201762551065P | 2017-08-28 | 2017-08-28 | |
| US62/551,032 | 2017-08-28 | ||
| US62/551,065 | 2017-08-28 | ||
| US62/551,035 | 2017-08-28 | ||
| US201862648888P | 2018-03-27 | 2018-03-27 | |
| US201862648880P | 2018-03-27 | 2018-03-27 | |
| US62/648,888 | 2018-03-27 | ||
| US62/648,880 | 2018-03-27 | ||
| PCT/US2018/039160 WO2019005641A1 (en) | 2017-06-25 | 2018-06-22 | GUIDING AND NAVIGATION CONTROL PROTEINS AND METHODS OF PRODUCTION AND USE THEREOF |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110891650A true CN110891650A (zh) | 2020-03-17 |
Family
ID=64741863
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201880039397.1A Pending CN110891650A (zh) | 2017-06-25 | 2018-06-22 | 制导和导航控制蛋白及其制造和使用方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220002425A1 (zh) |
| CN (1) | CN110891650A (zh) |
| TW (2) | TW201904588A (zh) |
| WO (2) | WO2019005641A1 (zh) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20170151281A1 (en) | 2015-02-19 | 2017-06-01 | Batu Biologics, Inc. | Chimeric antigen receptor dendritic cell (car-dc) for treatment of cancer |
| CN110831973B (zh) * | 2017-06-25 | 2023-08-15 | 西雅图免疫公司 | 多特异性抗体及其制备和使用方法 |
| WO2019045856A1 (en) * | 2017-08-28 | 2019-03-07 | Systimmune, Inc. | ANTI-CD ANTIBODIES AND METHODS OF MAKING AND USING THEM |
| SG11202008474QA (en) * | 2018-03-27 | 2020-10-29 | Systimmune Inc | Guidance and navigation control proteins and method of making and using thereof |
| US11845797B2 (en) | 2018-07-03 | 2023-12-19 | Marengo Therapeutics, Inc. | Anti-TCR antibody molecules and uses thereof |
| WO2020097193A1 (en) | 2018-11-06 | 2020-05-14 | The Regents Of The University Of California | Chimeric antigen receptors for phagocytosis |
| CN114127112A (zh) * | 2019-02-21 | 2022-03-01 | 马伦戈治疗公司 | 与t细胞结合的多功能分子及其治疗自身免疫性病症的用途 |
| SG11202109061YA (en) * | 2019-02-21 | 2021-09-29 | Marengo Therapeutics Inc | Multifunctional molecules that bind to t cell related cancer cells and uses thereof |
| WO2020206354A1 (en) * | 2019-04-05 | 2020-10-08 | Dren Bio, Inc. | Methods of depleting disease causing agents via antibody targeted phagocytosis |
| US11026973B2 (en) | 2019-04-30 | 2021-06-08 | Myeloid Therapeutics, Inc. | Engineered phagocytic receptor compositions and methods of use thereof |
| WO2021046243A2 (en) | 2019-09-03 | 2021-03-11 | Myeloid Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for genomic integration |
| US10980836B1 (en) | 2019-12-11 | 2021-04-20 | Myeloid Therapeutics, Inc. | Therapeutic cell compositions and methods of manufacturing and use thereof |
| JP2023545057A (ja) * | 2020-10-07 | 2023-10-26 | ドレン バイオ， インコーポレイテッド | 抗デクチン－１抗体及びその使用方法 |
| JP2023549140A (ja) | 2020-11-04 | 2023-11-22 | マイエロイド・セラピューティクス，インコーポレーテッド | 操作されたキメラ融合タンパク質組成物およびその使用方法 |
| IL302874A (en) | 2020-11-18 | 2023-07-01 | Pionyr Immunotherapeutics Inc | Anti-Marco antibodies and their uses |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070036783A1 (en) * | 2005-06-16 | 2007-02-15 | Virxsys, Corporation | Antibody complexes |
| US20080299137A1 (en) * | 2005-10-28 | 2008-12-04 | Novo Nordisk A/S | Fusion Proteins That Bind Effector Lymphocytes And Target Cells |
| EP2789630A1 (en) * | 2013-04-09 | 2014-10-15 | EngMab AG | Bispecific antibodies against CD3e and ROR1 |
| CN105722859A (zh) * | 2013-07-25 | 2016-06-29 | 西托姆克斯治疗公司 | 多特异性抗体、多特异性可活化抗体及其使用方法 |
| WO2016115274A1 (en) * | 2015-01-14 | 2016-07-21 | Compass Therapeutics Llc | Multispecific immunomodulatory antigen-binding constructs |
| WO2017086367A1 (ja) * | 2015-11-18 | 2017-05-26 | 中外製薬株式会社 | 免疫抑制機能を有する細胞に対するｔ細胞リダイレクト抗原結合分子を用いた併用療法 |
| WO2017093408A1 (en) * | 2015-12-03 | 2017-06-08 | Ucb Biopharma Sprl | Method employing bispecific antibodies |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050048646A1 (en) * | 2003-08-25 | 2005-03-03 | Medinet Co., Ltd. | Method for inducing cytotoxic T lymphocyte |
| US9365644B2 (en) * | 2008-04-23 | 2016-06-14 | Epitomics, Inc. | Anti-TNFα antibody |
| US9783601B2 (en) * | 2010-12-01 | 2017-10-10 | Alderbio Holdings Llc | Methods of preventing inflammation and treating pain using anti-NGF compositions |
| EP2950808B1 (en) * | 2013-02-04 | 2019-08-21 | Ramot at Tel-Aviv University Ltd. | Generation of cytotoxic tumor specific cell lines and uses thereof |
| US9689875B2 (en) * | 2013-08-28 | 2017-06-27 | Ventana Medical Systems, Inc. | Immunohistochemical assay for detection of CD3 and CD16 |
| DE102014206881A1 (de) * | 2014-04-09 | 2015-10-15 | Biopharm Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung Von Pharmaka Mbh | Verfahren zur Reinigung natürlicher zytotoxischer IgM Antikörper |
| BR112016027912A2 (pt) * | 2014-05-29 | 2018-02-20 | Macrogenics, Inc. | molécula de ligação triespecífica capaz de se ligar de maneira imunoespecífica a três epítopos diferentes, composição farmacêutica, método de tratamento de câncer, método de tratamento de uma doença associada à presença de um patógeno, anticorpo anti-ror1, ou fragmento de ligação a ror1, fragmento de anticorpo biespecífico, bite ou anticorpo de cadeia simples, e método de tratamento de câncer |
| CA2977321A1 (en) * | 2015-04-29 | 2016-11-03 | Institute For Research In Biomedicine | Ultra-potent neutralization of cytokines by multispecific antibodies and uses thereof |
| CR20180365A (es) * | 2015-12-16 | 2018-09-28 | Amgen Inc | PROTEÍNAS DE UNIÓN AL ANTÍGENO BISPECÍFICO DE ANTI-TL1A/ANTI-TNF-a Y SUS USOS |
| CN110831973B (zh) * | 2017-06-25 | 2023-08-15 | 西雅图免疫公司 | 多特异性抗体及其制备和使用方法 |
| US11649286B2 (en) * | 2017-06-25 | 2023-05-16 | Systimmune Inc. | Tri-specific antibodies |
-
2018
- 2018-06-22 WO PCT/US2018/039160 patent/WO2019005641A1/en active Application Filing
- 2018-06-22 WO PCT/US2018/039161 patent/WO2019005642A1/en active Application Filing
- 2018-06-22 US US16/615,124 patent/US20220002425A1/en active Pending
- 2018-06-22 CN CN201880039397.1A patent/CN110891650A/zh active Pending
- 2018-06-22 TW TW107121559A patent/TW201904588A/zh unknown
- 2018-06-22 TW TW107121548A patent/TWI828625B/zh active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070036783A1 (en) * | 2005-06-16 | 2007-02-15 | Virxsys, Corporation | Antibody complexes |
| US20080299137A1 (en) * | 2005-10-28 | 2008-12-04 | Novo Nordisk A/S | Fusion Proteins That Bind Effector Lymphocytes And Target Cells |
| EP2789630A1 (en) * | 2013-04-09 | 2014-10-15 | EngMab AG | Bispecific antibodies against CD3e and ROR1 |
| CN105722859A (zh) * | 2013-07-25 | 2016-06-29 | 西托姆克斯治疗公司 | 多特异性抗体、多特异性可活化抗体及其使用方法 |
| WO2016115274A1 (en) * | 2015-01-14 | 2016-07-21 | Compass Therapeutics Llc | Multispecific immunomodulatory antigen-binding constructs |
| WO2017086367A1 (ja) * | 2015-11-18 | 2017-05-26 | 中外製薬株式会社 | 免疫抑制機能を有する細胞に対するｔ細胞リダイレクト抗原結合分子を用いた併用療法 |
| WO2017093408A1 (en) * | 2015-12-03 | 2017-06-08 | Ucb Biopharma Sprl | Method employing bispecific antibodies |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TWI828625B (zh) | 2024-01-11 |
| TW201904997A (zh) | 2019-02-01 |
| US20220002425A1 (en) | 2022-01-06 |
| WO2019005641A1 (en) | 2019-01-03 |
| WO2019005642A1 (en) | 2019-01-03 |
| TW201904588A (zh) | 2019-02-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110891650A (zh) | 制导和导航控制蛋白及其制造和使用方法 | |
| AU2019243448B2 (en) | Guidance and navigation control proteins and method of making and using thereof | |
| JP7082574B2 (ja) | 免疫療法用改変細胞 | |
| JP6650537B2 (ja) | 抗ｃｔｌａ−４抗体 | |
| JP7356970B2 (ja) | 多重特異性抗体とその作製及び使用方法 | |
| AU2018360800A1 (en) | Chimeric antigen receptors specific for B-cell maturation antigen (BCMA) | |
| AU2020215576A1 (en) | Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ROR1) | |
| JP7399852B2 (ja) | 多重特異性抗体とその作製及び使用方法 | |
| JP7474193B2 (ja) | 多重特異性抗体とその作製及び使用方法 | |
| AU2018370120C1 (en) | Methods for selective expansion of d3 yd T-cell populations and compositions thereof | |
| Fine et al. | Mechanism-Driven Design of Multispecific Antibodies for Targeted Disease Treatment | |
| RU2809160C2 (ru) | Виды комбинированной терапии с использованием химерных антигенных рецепторов и ингибиторов pd-1 | |
| Segués Cisteró | Antibody-based approaches to modulate immune response |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20220526 Address after: No. 15318, 95 Street northeast, Redmond, Washington, U. S. Applicant after: Seattle Immunization Co. Applicant after: Chengdu bailidote Biological Pharmaceutical Co., Ltd Address before: No. 15318, 95 Street northeast, Redmond, Washington, U. S. Applicant before: Seattle Immunization Co. Applicant before: Sichuan Baili Pharmaceutical Co., Ltd |
|
| TA01 | Transfer of patent application right |