CN110839531B - 一种观赏水草南极杉的组织培养方法 - Google Patents

一种观赏水草南极杉的组织培养方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种观赏水草南极杉的组织培养方法，包括以下步骤：(1)预处理；(2)将预处理的外植体切割成1‑1.5cm长的外植体，切割后的每个外植体至少带一个腋芽；将切割后的外植体接入初代培养基进行初代培养；(3)分离初代培养基中的初代不定芽，使初代不定芽长度控制在2cm以内；将分离后的初代不定芽转入增殖培养基中培养；(4)将增殖培养基中长度大于3‑4cm的植株转入生根培养基培养；(5)将带有完整根系的南极杉植株从生根培养基中取出，清水冲洗后移栽到生态缸中。该方法不受季节、温度、地域影响就能获得大量的新植株，快速建立南极杉无菌繁殖体系，为保持南极杉优良的种性提供技术支持，为广大的爱好者提供源源不断地无菌种苗。

Description

一种观赏水草南极杉的组织培养方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，更具体地，涉及一种观赏水草南极杉的组织培养方法。
背景技术
南极杉，是一种较常用的观赏水草。南极杉为沉水草本植物，车前科，双子叶植物，挺水性水草。野生情况下，每到花期，水面如花海般美丽，草缸培育也能看到它开花的情形。这种水草在水中颇能适应广泛的水质变化，在弱光下也能生长，但仍以较强光线培育为佳。南极杉在形态上比较像绿羽毛，区别在于前者是针状叶，后者是羽状叶。南极杉目前繁殖方式为插枝、侧芽繁殖。
但是，目前尚缺乏成熟的技术用于大规模繁殖优质的南极杉植株。
发明内容
针对现有技术存在的技术问题，本发明提出了一种观赏水草南极杉的组织培养方法，该方法是在无菌条件下，采取适宜培养环境、给予固定光照，诱导南极杉新的幼苗，逐步形成无菌苗体系，后期可常年提供大量无菌幼苗。该方法易行，操作方便，产量高，克服了南极杉在水族缸中不易繁殖、繁殖速度慢、植物种苗获得困难的问题。
为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：
一种观赏水草南极杉的组织培养方法，包括以下步骤：
(1)预处理：选择健康、无病虫害的南极杉植株经灭菌处理、清洗，得到消毒灭菌后的无菌外植体；
(2)初代培养：将消毒后的无菌外植体在无菌培养皿中切割成1-1.5cm长的外植体，切割后的每个外植体至少带一个腋芽；将切割后的外植体转接入初代培养基进行初代培养10-20天；
(3)增殖培养：分离初代培养基中的初代不定芽，使初代不定芽长度控制在2cm以内；将分离后的初代不定芽转入增殖培养基中进行增殖培养22-30天；
(4)生根培养：将增殖培养基中长度大于3-4cm的植株转入生根培养基，进行生根培养；
(5)移栽：将带有完整根系的南极杉植株从生根培养基中取出，清水冲洗后移栽到生态缸中。
进一步地，步骤(1)中外植体灭菌处理、清洗的具体方法为：流水冲洗外植体30min，75％酒精消毒15-30s，冲洗3次；1％次氯酸钠消毒10-20min，再用无菌水冲洗5次。
进一步地，所述初代培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.5-1.5mg/L激动素+0.05-0.5mg/L萘乙酸。
进一步地，所述增殖培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+1-2.5mg/L6-BA+0.5-1mg/L萘乙酸。
进一步地，所述生根培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.1-0.5mg/L生长素。
更进一步地，所述生根培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.1-0.5mg/L吲哚乙酸。
进一步地，所述初代培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。
进一步地，所述增殖培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。
进一步地，所述生根培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。
因此，与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
(1)本发明提出的一种观赏水草南极杉的组织培养方法，是在无菌条件下，采取适宜培养环境，给予固定光照，直接诱导南极杉幼芽的生长，可不受季节、温度、地域影响，获得大量的新植株，快速建立南极杉无菌繁殖体系，为保持南极杉优良的种性提供技术支持，为广大的爱好者提供源源不断地优质无菌种苗。
(2)本发明的组织培养方法中所采用的各组培配方协同配合，组织繁殖周期短，繁殖率高，且通过本发明的组织培养方法无菌培养的南极杉苗，在自然水体中生根率达100％，植物成活率高达98％以上，实现了南极杉有效快速的无性繁殖，对于促进观赏水草的生产和新品种的培育、加快水族观赏水草产业的快速发展具有重要作用。
(3)本发明的南极杉无菌苗的组织培养方法简单易行，操作方便，产量高，克服了水族缸中不易繁殖、繁殖速度较慢、植物种苗获得困难的问题。
具体实施方式
展示一下实例来具体说明本发明的某些实施例，且不应解释为限制本发明的范围。对本发明公开的内容可以同时从材料、方法和反应条件进行改进，所有这些改进，均应落入本发明的的精神和范围之内。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
步骤1：配制初代培养基、增殖培养基、生根培养基
1、本实施例中使用的初代培养基、增殖培养基和生根培养基均是采用的MS培养基作为基础培养基，MS培养基配方如下：mg/L
表1 MS培养基配方
序号 组分 含量(mg/L) 序号 组分 含量(mg/L)
1 KNO<sub>3</sub>： 1900 11 CuSO<sub>4</sub>.5H<sub>2</sub>O 0.025
2 NH<sub>4</sub>NO<sub>3</sub> 1650 12 CoCL<sub>2</sub>.6H<sub>2</sub>O 0.025
3 MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O 370 13 Na<sub>2</sub>-EDTA 37.3
4 KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub> 170 14 FeSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O 27.8
5 CaCl<sub>2</sub>·2H<sub>2</sub>O 440 15 甘氨酸 2.0
6 MnSO<sub>4</sub>·4H<sub>2</sub>O 22.3 16 盐酸吡哆醇 0.5
7 ZnSO4·7H<sub>2</sub>O 8.6 17 盐酸硫铵素 0.1
8 H<sub>3</sub>BO<sub>3</sub> 6.2 18 烟酸 0.5
9 KI 0.83 19 肌酸 100
10 Na<sub>2</sub>MoO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O 0.25
2、初代培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂7g、蔗糖30g、激动素(KT)0.5mg、萘乙酸(NAA)0.1mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
3、增殖培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂7g、蔗糖30g、6氨基嘌呤(6BA)1.0mg、萘乙酸(NAA)0.5mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
4、生根培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂7g、蔗糖30g、吲哚乙酸0.1mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
步骤2：外植体的清洗与消毒
从花鸟市场购买南极杉植株，带回实验室用洗涤剂简单清洗掉表面污渍和灰尘，在自来水下冲洗半小时；于超净工作台上，选用健康、无病虫害的植株作为外植体，用镊子剃掉大部分叶片后，经体积浓度为75％的酒精消毒15s，冲洗三次，然后用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液消毒15min，再用无菌水冲洗5次待用。
步骤3：初代培养
将消毒后的外植体用灭菌纸片吸掉表面水分，转接入步骤1制备的初代培养基，置于培养箱中诱导培养16天，诱导培养条件为：光照2500Lux，光照周期为14h/d，温度23℃。
步骤4：增殖培养
分离初代培养基中的不定芽，切割长度为2cm以内为宜，转入步骤1制备的增殖培养基中，增殖培养22天，增殖培养条件为：光照2500Lux，光照周期为14h/d，温度25℃。
步骤5：生根培养
经过22天增殖培养后，将长度大于3-4cm的南极杉新植株切割下来，转入生根培养基生根。生根培养条件为：光照2500Lux，光照周期为12h/d，温度25℃。
步骤6：
待长出根长超过2cm，取出，用清水冲洗后，移栽到生态缸中，植物全部成活，成活率达到100％。
本实施例可以由一个外植体直接诱导出新植株，通过不断的分离增殖培养供应源源不断的南极杉种苗，一棵南极杉经过30天可以诱导出6棵新的子代植株，转入水族箱后存活率为100％。
实施例2
步骤1：配制初代培养基和增殖培养基、生根培养基
1、本实施例中配制的初代、增殖、生根培养基是采用的MS培养基作为基础培养基，MS培养基配方同实施例1所示。
2、初代培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂6g、蔗糖20g、激动素(KT)1.0mg、萘乙酸(NAA)0.05mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
3、增殖培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂6g、蔗糖20g、6氨基嘌呤(6BA)2.5mg、萘乙酸(NAA)0.75mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
4、生根培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂6g、蔗糖20g、吲哚乙酸0.5mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
步骤2：外植体的清洗与消毒
从花鸟市场购买南极杉植株，带回实验室用洗涤剂简单清洗掉表面污渍和灰尘，在自来水下冲洗半小时；于超净工作台上，选用健康、无病虫害的植株作为外植体，用镊子剃掉大部分叶片后，经体积浓度为75％的酒精消毒30s，冲洗三次，然后用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液消毒12min，再用无菌水冲洗5次待用。
步骤3：初代培养
将消毒后的外植体用灭菌纸片吸掉表面水分，转接入步骤1制备的初代培养基，置于培养箱中诱导培养20天，诱导培养条件为：光照2500Lux，光照周期为14h/d，温度23℃。
步骤4：增殖培养
分离初代培养基中的不定芽，切割长度为2cm以内为宜，转入步骤1制备的增殖培养基中，增殖培养26天，增殖培养条件为：光照2500Lux，光照周期为14h/d，温度25℃。
步骤5：生根培养
经过4周培养后，将长度大于3-4cm的南极杉新植株切割下来，转入生根培养基生根。生根培养条件为：光照2500Lux，光照周期为12h/d，温度25℃。
步骤6：待长出根长超过2cm，取出，用清水冲洗后，移栽到生态缸中，植物全部成活，成活率达到98％。
本方法可以由一个外植体直接诱导出新植株，通过不断的分离增殖培养供应源源不断的南极杉种苗，一棵南极杉经过30天可以诱导出10棵新的子代植株，转入水族箱后存活率大于98％。
实施例3
步骤1：配制初代培养基和增殖培养基、生根培养基
1、本实施例中配制的初代、增殖、生根培养基是采用的MS培养基作为基础培养基，MS培养基配方同实施例1所示。
2、初代培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂10g、蔗糖10g、激动素(KT)1.5mg、萘乙酸(NAA)0.5mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
3、增殖培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂10g、蔗糖10g、6氨基嘌呤(6BA)1.75mg、萘乙酸(NAA)1.0mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
4、生根培养基配制
1L上述MS培养基中添加琼脂10g、蔗糖10g、吲哚乙酸0.3mg制备固体培养基，在98kPa、115-125℃条件下灭菌20min待用；分装入组培瓶中，培养基高度已1-1.5cm为最佳。
步骤2：外植体的清洗与消毒
从花鸟市场购买南极杉植株，带回实验室用洗涤剂简单清洗掉表面污渍和灰尘，在自来水下冲洗半小时；于超净工作台上，选用健康、无病虫害的植株作为外植体，用镊子剃掉大部分叶片后，经体积浓度为75％的酒精消毒30s，冲洗三次，然后用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液消毒20min，再用无菌水冲洗5次待用。
步骤3：初代培养
将消毒后的外植体用灭菌纸片吸掉表面水分，转接入步骤1制备的初代培养基，置于培养箱中诱导培养10天，诱导培养条件为：光照2500Lux，光照周期为14h/d，温度23℃。
步骤4：增殖培养
分离初代培养基中的不定芽，切割长度为2cm以内为宜，转入步骤1制备的增殖培养基中，增殖培养30天，增殖培养条件为：光照2500Lux，光照周期为14h/d，温度25℃。
步骤5：生根培养
经过30天培养后，将长度大于3-4cm的南极杉新植株切割下来，转入生根培养基生根。生根培养条件为：光照2500Lux，光照周期为12h/d，温度25℃。
步骤6：待长出根长超过2cm，取出，用清水冲洗后，移栽到生态缸中，植物全部成活，成活率达到95％。
本方法可以由一个外植体直接诱导出新植株，通过不断的分离增殖培养供应源源不断的南极杉种苗，一棵南极杉经过30天可以诱导出8棵新的子代植株，转入水族箱后存活率大于95％。
对比例
目前南极杉的培育主要集中在观赏植物培育基地或者商店，主要方法为在透明玻璃水缸中扦插入一定长度的植株，加水淹没植物至少5厘米，给予一定光照，通过水泵保持缸内水体的流动性，待植物长到一定长度后，通过打顶、截短的方式获得新的无形枝条，进行下一轮繁殖，经过一轮生长的时间范围在30-50天之间，植物约生长出3个新的侧芽，在扦插15天后开始生根，生根数4根左右，根长度不一，经过30天生长，根平均长度可以达到3厘米左右。将该方法培育的南极杉苗移栽到生态缸中后的成活率是90％。
实施例1-3的试验结果详见表2。
表2实施例1-3和对比例的试验结果
Figure BDA0002306711540000091
由表2可知，本发明的组织培养方法中所采用的各组培配方协同配合，组织繁殖周期短，繁殖率高，且通过本发明的组织培养方法无菌培养的南极杉苗，在自然水体中生根率达100％，植物成活率高达95％以上，实现了南极杉有效快速的无性繁殖。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种观赏水草南极杉的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）预处理：选择健康、无病虫害的南极杉植株经灭菌处理、清洗，得到消毒灭菌后的无菌外植体；
（2）初代培养：将消毒后的无菌外植体在无菌培养皿中切割成1-1.5 cm长的外植体，切割后的每个外植体至少带一个腋芽；将切割后的外植体转接入初代培养基进行初代培养10-20天；
（3）增殖培养：分离初代培养基中的初代不定芽，使初代不定芽长度控制在2cm以内；将分离后的初代不定芽转入增殖培养基中进行增殖培养22-30天；
（4）生根培养：将增殖培养基中长度大于3-4cm的植株转入生根培养基，进行生根培养；
（5）移栽：将带有完整根系的南极杉植株从生根培养基中取出，清水冲洗后移栽到生态缸中；
所述初代培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.5-1.5mg/L激动素+0.05-0.5mg/L萘乙酸；
所述增殖培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+1-2.5mg/L 6-BA+0.5-1mg/L萘乙酸；
所述生根培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.1-0.5mg/L生长素。
2.根据权利要求1所述的一种观赏水草南极杉的组织培养方法，其特征在于，步骤（1）中外植体灭菌处理、清洗的具体方法为：流水冲洗外植体30 min，75%酒精消毒15-30 s，冲洗3次；1% 次氯酸钠消毒10-20min，再用无菌水冲洗5次。
3.根据权利要求1所述的一种观赏水草南极杉的组织培养方法，其特征在于，所述生根培养基为：MS培养基+6-10g/L琼脂+10-30g/L蔗糖+0.1-0.5mg/L吲哚乙酸。
4.根据权利要求1所述的一种观赏水草南极杉的组织培养方法，其特征在于，所述初代培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。
5.根据权利要求1所述的一种观赏水草南极杉的组织培养方法，其特征在于，所述增殖培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。
6.根据权利要求1所述的一种观赏水草南极杉的组织培养方法，其特征在于，所述生根培养条件为：光照周期为14h/d，温度25±2℃，光照2500Lux。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113951119B (zh) * 2021-10-20 2023-06-02 广州市农业科学研究院 一种观赏水草无菌杯苗生产及栽培的方法
CN114431152B (zh) * 2022-03-10 2023-09-19 水生藻安生物科技（武汉）有限公司 一种水盾草无菌苗的快速培养方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008039450A2 (en) * 2006-09-25 2008-04-03 James Weifu Lee Designer organisms for photosynthetic production of ethanol from carbon dioxide and water
CN102124118A (zh) * 2008-02-23 2011-07-13 詹姆斯·伟甫·郦 从二氧化碳和水光生物生产丁醇的设计者生物体
CN102428188A (zh) * 2009-05-07 2012-04-25 泰克生物能源有限公司 刺激水生植物产生乙醇和水生植物生长的方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1303875C (zh) * 2004-07-23 2007-03-14 中国科学院武汉植物园 一种快速繁殖穗花狐尾藻的方法
US20060030489A1 (en) * 2004-08-09 2006-02-09 Northcott Donald O Aquatic plant product and method for making growth-sustaining plant matrix
US20110086401A1 (en) * 2009-05-07 2011-04-14 Aquatech Bioenergy LLC Method and System for Collecting Ethanol from Aquatic Plants
US9260730B2 (en) * 2009-05-07 2016-02-16 Aquatech Bioenergy LLC Method and system for collecting ethanol from aquatic plants
CN101617629A (zh) * 2009-08-04 2010-01-06 昆明市水产科学研究所 一种水生植物的组织培养培养基及其组培快繁方法
CN106954549B (zh) * 2017-02-27 2019-05-28 水生藻安生物科技（武汉）有限公司 一种篦齿眼子菜组织培养与快速繁殖方法
CN109287490B (zh) * 2018-11-29 2021-07-30 南京大学 一种快速繁殖水生植物水鳖优质种苗的方法和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008039450A2 (en) * 2006-09-25 2008-04-03 James Weifu Lee Designer organisms for photosynthetic production of ethanol from carbon dioxide and water
CN102124118A (zh) * 2008-02-23 2011-07-13 詹姆斯·伟甫·郦 从二氧化碳和水光生物生产丁醇的设计者生物体
CN102428188A (zh) * 2009-05-07 2012-04-25 泰克生物能源有限公司 刺激水生植物产生乙醇和水生植物生长的方法

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