CN110794128A - 一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，包括上外框、样品滴加孔、过滤/扩散/反射多功能层、试剂层、透光层、透光孔、下外框，其中，所述上外框与下外框相互粘合，所述上外框的中心位置开有样品滴加孔，下外框中心位置开有透光孔，所述过滤/扩散/反射多功能层、试剂层、透光层从上到下依次设置于样品滴加孔和透光孔处的上外框和下外框之间，通过涂布工艺粘合在一起。通过本发明，以解决现有技术存在的液体试剂保存时间短、试剂稳定性差，以及以滤纸作为待测样品的扩散材料，扩散的均一性和反应的均一性较差，测试的准确性和精密度均较差的问题。
Description
技术领域
本发明涉及体外临床诊断试剂技术领域，具体涉及一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂。
背景技术
体外诊断试剂是疾病预防、诊断、治疗中重要的辅助手段。其中，生化诊断试剂是通过各种生物化学反应或免疫反应测定体内生化指标的试剂，主要用于配合手工、半自动、全自动生化分析仪等仪器进行检测，测定酶类、糖类、脂类、蛋白和非蛋白氮类、无机元素类、肝功能等指标。现有的生化分析试剂主要是湿化学法的液体类试剂。液体试剂存在诸如保存时间短、试剂稳定性差、产生的大量废液易造成环境污染等弊端。而干化学法诊断试剂具有仪器操作简单，结果准确，复查率低，没有任何废液产生，后处理简便，不会污染水源或土壤，适用于诸如宇宙空间站、战场、野外或舰艇等场合、诊所或门诊部、手术台下、家庭监护、病人床头等场合的优点。
干化学法体外生化诊断试剂主要为国外公司的产品。第一类是以奥森多公司为代表的多层膜干片，利用胶片涂层技术将扩散层、反射层、试剂层等涂覆于透明的支撑层上，从支撑层的反面测定光密度的变化。第二类是日本京都公司的干化学技术，其组成为一个塑料支撑层，一端为反应区包括样品层和试剂层，试剂层采用织物作为试剂载体。加样和测试均在上部进行。第三类为瑞士罗氏公司的干化学试纸条，主要由磁带密码区、血清分离区、反应区构成，全血通过玻璃纤维横向过滤与试剂层接触反应。其中，奥森多公司的多层膜干片具有结果准确、复查率低、成本低廉等优点。
国内申请专利的干化学法体外生化诊断试，诸如上海科华生物工程公司申请的专利 200720072185.2、200720073442.4和200910054558.7，无锡申睿生物制品有限公司申请的专利200610161430.7。这些专利中应用的方法是将滤纸浸满或喷涂上配好的反应液试剂，干燥后粘合于塑料基材上进行测试。这种方法类似于pH试纸，以滤纸作为待测样品的扩散材料，扩散的均一性和反应的均一性较差，测试的准确性和精密度均较差，不适合临床检测使用。
发明内容
本发明提供一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，以解决现有技术存在的液体试剂保存时间短、试剂稳定性差，以及以滤纸作为待测样品的扩散材料，扩散的均一性和反应的均一性较差，测试的准确性和精密度均较差的问题。
为解决上述技术问题，本发明提供一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，包括上外框、样品滴加孔、过滤/扩散/反射多功能层、试剂层、透光层、透光孔、下外框，其中，所述上外框与下外框相互粘合，所述上外框的中心位置开有样品滴加孔，下外框中心位置开有透光孔，所述过滤/扩散/反射多功能层、试剂层、透光层从上到下依次设置于样品滴加孔和透光孔处的上外框和下外框之间，通过涂布工艺粘合在一起。
所述下外框上附有胶层，用以粘合上外框。
所述样品滴加孔和透光孔均为圆孔，圆孔直径为3～8mm。
所述过滤/扩散/反射多功能层是集全血过滤、血清扩散、以及光反射功能为一体的各向均性的多孔膜，所述多孔膜由亲水高分子材料及白色反光材料构成，湿膜厚度为100～400μm，干膜厚度为30～300μm，所述多孔膜的孔径范围为1～30μm。
所述亲水性高分子材料为醋酸纤维素，所述白色反光材料为二氧化钛、硫酸钡、氧化锌、氧化铅、硅藻土、微晶纤维素中的一种或以上反光材料的混合物。
所述试剂层由水溶性材料及参与反应的化学试剂构成，湿膜厚度50～400μm，干膜厚度为 30～300μm。
所述试剂层的水溶性物质包括明胶、亲水纤维素衍生物、葡聚糖、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺中的一种或多种，所述参与化学反应的试剂包括酶、反应底物、缓冲液、交联剂、表面活性剂、保护剂、稳定剂中的一种或多种。
所述透光层采用可见光范围透光率在80％以上的透明塑料或玻璃制备而成，所述透光层的厚度为30～300μm。
本发明带来的有益效果：提供一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，该试剂能够提高检测的准确性和精密度，检测方法具有溯源性，适用于临床检测，同时还可以提高试剂的保存时间。
附图说明
图1是根据本发明的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂的结构示意图。
其中，1-上外框、2-样品滴加孔、3-过滤/扩散/反射多功能层、4-试剂层、5-透光层、6- 透光孔、7-下外框。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，以下结合附图及具体实施例，对本发明作进一步地详细说明。
如图1所示，本发明提供一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，包括上外框1、上外框样品滴加孔2、过滤/扩散/反射多功能层3、试剂层4、透光层5、下外框透光孔6、下外框7。其中，上外框1与下外框7相互粘合。上外框1中心位置开有样品滴加的圆孔2，下外框7中心位置开有透光孔6。扩散及反射双功能层3、试剂层4、透光层5通过涂布工艺粘合在一起。
上述干化学法多层膜试剂，主要测试的样品是全血、血清、尿液。
进一步的，样品可以通过上外框样品滴加孔加于过滤/扩散/反射多功能层表面。所述过滤/扩散/反射多功能层的作用是过滤全血中的红细胞、白细胞等，均匀地将血清扩散并渗透到下一层，并起到反射光的作用。在某些干化学法多层膜试剂中，根据测试项目的不同，过滤/扩散/反射多功能层中也可以加入反应试剂，如反应的激活剂、去除干扰物质的试剂或酶等。扩过滤/扩散/反射多功能层由亲水性高分子材料，如醋酸纤维素，以及白色反光材料，如二氧化钛、硫酸钡、氧化锌、氧化铅、硅藻土、微晶纤维素、或以上反光材料的混合物。过滤/扩散/反射多功能层是一层均匀的各向均性的多孔膜，膜的孔径范围为1～30μm。湿膜厚度为 100～400μm，干膜厚度为30～300μm，如在50～200μm内则效果更佳。
进一步的，所述试剂层是待测物质发生化学反应的区域，试剂层可以是一层也可以是多层，根据待测物质的不同，在多层试剂层之间还可以加入半透膜，选择性地透过部分产物，进而与下层试剂层反应。各层试剂层由水溶性物质，如明胶、亲水纤维素衍生物、葡聚糖、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺及参与化学反应的试剂构成，如酶、反应底物、缓冲液、交联剂、表面活性剂、保护剂、稳定剂等。湿膜厚度50～400μm，干膜厚度为30～300μm，如在50～200μm内则效果更佳。
进一步的，所述透光层可以由各种玻璃或透明塑料，如聚乙烯PE、聚丙烯PP、聚酯甲基丙烯酸甲酯PMMA、聚苯乙烯PS、聚碳酸酯PC、聚对苯二甲酸乙二醇酯PET等，尤其以 PET为最佳。透光层的厚度为30～300μm，100～200μm为最佳。可见光范围的透光率80％以上，95％以上最佳。入射光源及反射光均可通过透光层。
进一步的，下外框7上附有胶层，用以粘合上外框1。上外框和下外框是为了便于固定多层膜结构，并防止试剂氧化，以延长试剂的保存时间。
进一步的，所述样品滴加孔2和透光孔6均为圆孔，直径3～8mm。
实例1：用于测试血糖的干化学法多层膜试剂
透光层5采用厚度为200μm的PET膜，在540nm透光率达到95％以上。试剂层4的配方如表1所示，将配置好的涂膜液均匀涂布于PET膜之上，涂膜厚度为150μm。干燥后在其上涂布过滤/扩散/反射多功能层3，厚度为300μm，过滤/扩散/反射多功能层3的配方如表2 所示。干燥后切成1cm2的小片，然后使用白色PET塑料片作为上外框1和下外框7。
表1试剂层配方：
| 试剂 | 浓度 |
| 明胶 | 300g/L |
| 葡萄糖氧化酶 | 77kU/L |
| 过氧化物酶 | 360kU/L |
| 1,7-二羟基萘 | 6.7g/L |
| 4-氨基安替吡啉 | 11g/L |
表2过滤/扩散/反射多功能层配方：
| 材料 | 浓度 |
| 醋酸纤维素 | 50g/L |
| 二氧化钛 | 660g/L |
| 表面活性剂 | 10g/L |
以上所述仅为本发明的实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的权利要求范围之内。
Claims (8)
1.一种用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，包括上外框(1)、样品滴加孔(2)、过滤/扩散/反射多功能层(3)、试剂层(4)、透光层(5)、透光孔(6)、下外框(7)，其中，所述上外框(1)与下外框(7)相互粘合，所述上外框(1)的中心位置开有样品滴加孔(2)，下外框(7)中心位置开有透光孔(6)，所述过滤/扩散/反射多功能层(3)、试剂层(4)、透光层(5)从上到下依次设置于样品滴加孔(2)和透光孔(6)处的上外框(1)和下外框(7)之间，通过涂布工艺粘合在一起。
2.如权利要求1所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述下外框(7)上附有胶层，用以粘合上外框(1)。
3.如权利要求1所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述样品滴加孔(2)和透光孔(6)均为圆孔，圆孔直径为3～8mm。
4.如权利要求1所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述过滤/扩散/反射多功能层(3)是集全血过滤、血清扩散、以及光反射功能为一体的各向均性的多孔膜，所述多孔膜由亲水高分子材料及白色反光材料构成，湿膜厚度为100～400μm，干膜厚度为30～300μm，所述多孔膜的孔径范围为1～30μm。
5.如权利要求4所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述亲水性高分子材料为醋酸纤维素，所述白色反光材料为二氧化钛、硫酸钡、氧化锌、氧化铅、硅藻土、微晶纤维素中的一种或以上反光材料的混合物。
6.如权利要求1所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述试剂层(4)由水溶性材料及参与反应的化学试剂构成，湿膜厚度50～400μm，干膜厚度为30～300μm。
7.如权利要求6所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述试剂层的水溶性物质包括明胶、亲水纤维素衍生物、葡聚糖、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺中的一种或多种，所述参与化学反应的试剂包括酶、反应底物、缓冲液、交联剂、表面活性剂、保护剂、稳定剂中的一种或多种。
8.如权利要求1所述的用于体外生化诊断的干化学法多层膜试剂，其特征在于，所述透光层(5)采用可见光范围透光率在80％以上的透明塑料或玻璃制备而成，所述透光层的厚度为30～300μm。
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