CN110779850B - 一种提高细胞分析仪参数准确度的方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种提高细胞分析仪参数准确度的方法及装置。装置由三部分组成:细胞分析仪﹑渗透压仪﹑校正算式转换器。将渗透压仪与细胞分析仪和校正算式转换器连接成一个装置。装置含有细胞分析仪和渗透压仪,可同时测定MCV等参数和血浆渗透压参数并将参数传输至校正算式转换器。渗透压仪可检测到血浆渗透压是否异常,当检测到血浆渗透压异常(过高或过低)的情况下,细胞分析仪MCV会出现假性升高或降低。校正算式转换器含有MCV与血浆渗透压相关系的数学算式,通过转换器的校正,能将有偏差的MCV转换成没偏差的MCV,然后输出校正后的MCV,从而提高了MCV的准确度,也提高了与MCV或血浆渗透压密切相关的参数如MCHC、HCT、MPV、PCT等参数的准确度,为临床医生提供准确的细胞分析仪参数。
Description
技术领域
本发明涉及一种医疗器械,特别涉及一种提高细胞分析仪参数准确度的方法及装置。
背景技术
以往的研究表明,当血浆渗透压升高或降低,例如高血糖症﹑高血钠症﹑高尿素血症等会引起血浆渗透压升高,溺水严重者即近乎溺死等会引起血浆渗透压降低。血浆渗透压异常会引起传统的细胞分析仪MCV等参数出现假性升高或降低。本发明的装置发现了血浆渗透压与MCV之关的数学关系式(即校正算式),将渗透压仪﹑细胞分析仪﹑校正算式转换器三者连接成一个装置,装置可同时测定MCV参数和血浆渗透压参数,当血浆渗透升高或降低引起细胞分析仪MCV假性升高或降低时,可以通过校正算式转换器自动校正MCV,将经过校正后的MCV作为最终结果输出,从而提高MCV的准确度。本装置能在传统的细胞分析仪参数的基础上多提供一个血浆渗透压参数,并能够提高传统的细胞分析仪MCV的准确度,从而提高与MCV或血浆渗透压密切相关的参数如MPV、HCT、PCT、MCHC等参数的准确度,为临床医生提供准确的细胞分析仪参数。
发明内容
本发明旨在解决传统细胞分析仪因血浆渗透压升高或降低引起MCV等参数出现假性升高或降低而无法自动校正的技术问题。为此,本发明一种提高细胞分析仪参数准确度的方法及装置。将细胞分析仪﹑渗透压仪﹑校正算式转换器三者连成一个整体,组成一个新型细胞分析仪(即所述的装置)。装置可同时测定样本MCV参数和血浆渗透压参数并把参数传输至校正算式转换器,通过校正算式转换器,校正MCV的偏差,再输出结果,从而消除了血浆渗透压异常时引起细胞分析仪MCV假性升高或降低的影响,提高了细胞分析仪MCV的准确度,也提高了与MCV或血浆渗透压密切相关的参数如MPV、HCT、PCT、MCHC等参数的准确度。
本发明的装置,包括以下步骤:
1.细胞分析仪提供MCV等参数,并传输至校正算式转换器;
2.渗透压仪提供血浆渗透压参数,并传输至校正算式转换器;
3.校正算式转换器提供校正算式,即可将细胞分析仪MCV出现的偏差进行校正,转换成没有偏差的MCV,再将校正后的MCV作为最终结果输出。
根据本发明的一些实施例,所述一种提高细胞分析仪参数准确度的方法及装置,装置主要由三部分组成:渗透压仪﹑细胞分析仪﹑校正算式转换器。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器,一端与所述渗透压仪连接,另一端与所述细胞分析仪连接。渗透压仪获取样本的血浆渗透压参数,细胞分析仪获取样本的红细胞平均体积(MCV)﹑血小板平均体积(MPV)﹑血红蛋白(HGB)﹑红细胞计数(RBC)﹑血小板计数(PLT)等参数。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器含有校正算式,用于MCV﹑MPV﹑MCHC、HCT、PCT等参数的校正或转换。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器通过公式〔MCVˊ=MCV×289.5/血浆渗透压〕对MCV参数进行校正,MCV来自细胞分析仪,血浆渗透压来自渗透压仪,289.5是取等于等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值),MCV经过校正后变成MCVˊ,可作为最终结果输出。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器通过公式〔MPVˊ=MPV×289.5/血浆渗透压〕对MPV参数进行校正,MPV来自细胞分析仪,血浆渗透压来自渗透压仪,289.5是取等于等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值),MPV经过校正后变成MPVˊ,可作为最终结果输出。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器通过公式
〔HCTˊ=MCVˊ×RBC(×/L)/10^15〕对HCT参数进行校正,HCT经过校正后变成HCTˊ,可作为最终结果输出。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器通过公式
〔PCTˊ=MPVˊ×PLT(×/L)/10^13〕对PCT参数进行校正,PCT经过校正后变成PCTˊ,可作为最终结果输出。
根据本发明的一些实施例,所述校正算式转换器通过公式
〔MCHCˊ=HGB(g/L)/HCTˊ〕对MCHC参数进行校正,MCHC经过校正后变成MCHCˊ,可作为最终结果输出。
本发明的有益效果是:能在传统的细胞分析仪参数的基础上多提供一个血浆渗透压参数,并能够提高传统的细胞分析仪MCV﹑MPV﹑MCHC、HCT、PCT等参数的准确度,为临床医生提供准确的细胞分析仪参数。
附图说明
图1为本发明的装置结构图。校正算式转换器一端连接细胞分析仪,另一端连接渗透压仪。
图2为本发明推导校正算式关于RBC与低渗稀释液混合前的参数示意图。
图3为本发明推导校正算式关于RBC与低渗稀释液混合后达到渗透平衡时的参数示意图。
图4为本发明的装置工作原理示意图。装置中的细胞分析仪测定样本的参数(MCV、MPV、RBC﹑PLT﹑HGB等)传输给校正算式转换器,渗透压仪测定样本的血浆渗透压参数传输给校正算式转换器,校正算式转换器根据相关校正算式运算,MCV、MPV﹑MCHC、HCT、PCT参数经过校正后变成MCVˊ、MPVˊ﹑MCHCˊ、HCTˊ、PCTˊ可作为最终结果输出。
具体实施方式
本发明的核心是校正算式转换器中的校正算式,校正算式需要推导和实验验证,推导过程中用到关于红细胞(RBC)的渗透平衡原理等理论,具体推导过程和实验验证如下:
1.渗透压
根据Vanˊt Hoff(范特荷甫)定律,渗透压的关系式如下:
π=CRT................................................(1)
π:渗透压(单位:大气压)
C:溶液总浓度(单位:mol/L)
R:为一常数,与气体常数(0.082/mol)相同
T:绝对温度(单位:K)
此式在医学上有一定的局限性。理由是:①只适合用于溶质颗粒间无相互作用的极稀溶液---“理想溶液”;②只适用于非电解质溶液,为此需作必要的修改。(1)式中的C虽代表溶液中溶质的颗粒浓度,但对于不是稀薄的实际溶液和电解质,以克渗透效应的克分子浓度Os(Osm/kg)来代替溶质总浓度C(mol/L)更合式,故(1)式可改为:
π=OsRT..............................................(2)
Os:渗透浓度(单位:Osm/kg或Osm/L)
以上内容是摘录刘俊杰、赵俊主编《现代麻醉学》(北京:人民卫生出版社,1987年)第1021-1023页有关内容。本文为了推理的需要,即与下文其他单位统一,故(2)式采用Osm/L为渗透浓度(Os)的单位。
2.溶液渗透浓度
细胞稀释液由溶质和溶剂组成。溶质溶于水会发生电离。溶质分强电解质和弱电解质。强电解质溶于水几乎完全电离,所以在稀释液中存在大部分离子和少量分子;弱电解质溶于水只有极少部分电离,所以在稀释液中存在大部分分子和少量离子。这些存在于稀释液中的离子和分子都能产生渗透压,所以我们把能产生渗透压的离子叫做渗透压离子;把能产生渗透压的分子叫做渗透压分子;把渗透压离子和渗透压分子统称为渗透压因子。稀释液的渗透压就是稀释液中各种已电离的离子产生的渗透压与未电离的分子产生的渗透压的总和。也就是说,稀释液渗透压是各种渗透压因子产生的渗透压之总和。
3.渗透浓度公式
渗透浓度:每升稀释液中所含渗透因子的摩尔数(即克分子数)叫做渗透浓度。用公式表示:
Os=M/V.................................................(3)
M:渗透因子的摩尔数(单位:mol或Osm,1mol=1Osm)
V:稀释液的体积(单位:L)
Os:渗透浓度(单位:mol/L或Osm/L)
4.RBC渗透平衡
红细胞(RBC)膜和血小板(PLT)膜都是属一种半透膜。所谓半透膜是指水分子可以自由通过而其他离子或分子不能自由通过的膜。RBC与稀释液未混和时,RBC在血液中的渗透压即RBC内液渗透压,称为RBC渗透压,显然在人血液中,RBC渗透压=血浆渗透压或血液渗透压。RBC与稀释液混和时,如果RBC渗透压大于稀释液渗透压,水会从稀释液进入RBC,RBC体积会不断增大,但达到渗透平衡时,RBC体积不再变化;如果RBC渗透压小于稀释液渗透压,水会从RBC进入稀释液,RBC体积会不断缩小,但达到渗透平衡时,RBC体积不再变化。即RBC与稀释液混和时并达到渗透平衡时有:
π0ˊ=πˊ............................................(A)
π0ˊ:渗透平衡时RBC渗透压
πˊ:渗透平衡时稀释液渗透压
细胞分析仪测定MCV参数时,是用细胞稀释液将血液进行N倍稀释(例如:日本希森美康SYSMEX F-800其测定过程是:第1次稀释:10ml稀释液+20ulEDTA.2K.2H2O抗凝血混匀,血液作1000倍稀释;第2次稀释:10ml稀释液+100ul第1次稀释血混匀,血液作50000倍稀释),然后于F-800进行测定的,因此为了推理的方便,把RBC的混合前温度与稀释液混合前的温度相同;稀释液中存在的RBC,RBC体积总和相对于稀释液的体积来说可忽略不计,即下面B、C、D三式成立:
混合前RBC温度=混合前稀释液温度=达到渗透平衡时RBC温度=达到渗透平衡时稀释液温度..........................................(B)
n个RBC的体积之和+稀释液的体积≈稀释液的体积..........(C)
渗透平衡时稀释液渗透压(πˊ)≈混和之前稀释液渗透压(π)...(D)
由(A)和(D)得:
π0ˊ=πˊ=π.......................................(4)
π0ˊ:渗透平衡时RBC渗透压
πˊ:渗透平衡时稀释液渗透压;
π:混和之前稀释液渗透压。
现在讨论,把n个RBC置于稀释液中,当RBC渗透压与稀释液渗透压不相等时,稀释液渗透压对RBC体积的影响。分三种情况:低渗稀释液、高渗稀释液、等渗稀释液分别对RBC体积的影响。
第一种情况:低渗稀释液对RBC体积的影响
现在假设有n个相同的理想RBC(所谓的理想RBC,指其大小、形态、功能都绝对相同,并且水可以自由通过而其他分子或离子不能通过膜),又设每个RBC的体积为V0(单位:升)、渗透压π0(单位:大气压)、温度T0(单位:K)、渗透浓度Os0(单位:mol/L或Osm/L)、渗透因子的摩尔数为M0(单位:mol或Osm);又设稀释液的体积为V(单位:升)、渗透压π(单位:大气压)、温度T(单位:K)、渗透浓度Os(单位:mol/L或Osm/L)、渗透因子的摩尔数为M(单位:mol或Osm)。以上即是RBC与低渗稀释液混合前的参数,见图2。
当n个相同的RBC与稀释液相混和,由于是低渗稀释液,所以水通过膜进入RBC,RBC的体积不断变大,但很快RBC与稀释液建立了渗透平衡。达到渗透平衡时,设进入每个RBC水的体积为ΔV(单位:升),又设达到渗透平衡后,RBC参数为:体积V0ˊ(单位:升)、渗透压π0ˊ(单位:大气压)、温度T0ˊ(单位:K)、渗透浓度Os0ˊ(单位:mol/L或Osm/L)、渗透因子的摩尔数M0ˊ(单位:mol或Osm);稀释液参数为:体积Vˊ(单位:升)、渗透压πˊ(单位:大气压)、温度Tˊ(单位:K)、渗透浓度Osˊ(单位:mol/L或Osm/L)、渗透因子的摩尔数Mˊ(单位:mol或Osm)。以上即是RBC与低渗稀释液混合后达到渗透平衡时的参数,见图3。
混合前:
对于RBC:
根据(2)有:π0=Os0R T0.............................(5)
根据(3)有:Os0=M0/V0.................................(6)
对于稀释液:
根据(2)有:π=Os R T.................................(7)
根据(3)有:Os=M/V................................(8)
混合后,RBC与稀释液很快达到渗透平衡,达到渗透平衡时有:
对于RBC:
根据(2)有:π0ˊ=Os0ˊR T0ˊ..........................(9)
根据(3)有:Os0ˊ=M0ˊ/V0ˊ............................(10)
V0ˊ=V0+ΔV...............................(11)
根据半透膜定义推理可得:M0ˊ=M0......................(12)
对于稀释液:
Vˊ=V-nΔV..................................(13)
因为达到渗透平衡,根据(4)有:π0ˊ=πˊ=π..........(14)
根据(B)有:T0ˊ=T0=Tˊ=T...........................(15)
将(6)代入(5)得:π0=M0R T0/V0....................(16)
将(10)代入(9)得:π0ˊ=M0ˊR T0ˊ/V0ˊ................(17)
将(15)代入(17)得:π0ˊ=M0ˊR T0/V0ˊ................(18)
将(12)代入(18)得:π0ˊ=M0R T0/V0ˊ.................(19)
将(14)代入(19)得:π=M0R T0/V0ˊ...................(20)
(16)/(20)得:π0/π=V0ˊ/V0
即:πV0ˊ=π0V0.....................................(21)
将(11)代入(21)得:π(V0+ΔV)=π0V0
整理得:ΔV=(π0/π-1)V0............................(22)
第二种情况:高渗稀释液对RBC体积的影响
当n个相同的RBC与稀释液相混和,由于是高渗稀释液,所以RBC里的水必然通过RBC膜进入稀释液,并建立新的渗透平衡,当达到渗透平衡时,这时(11)式变为V0ˊ=V0-ΔV,(13)式变为Vˊ=V+nΔV,其他与上面相同,推理与上面相同,可以推导下面公式成立:
πV0ˊ=π0V0
ΔV=(1-π0/π)V0
第三种情况:等渗稀释液对RBC体积的影响
由于是等渗,所以RBC在任何时间里,体积始终保持不变,即:V0ˊ=V0或ΔV=0。
综合以上三种情况,V0ˊ或ΔV可以表达为:
π0V0=πV0ˊ..........................................(23)
ΔV=(π0/π-1)V0..................................(24)
π0:RBC渗透压(即血浆渗透压,渗透压仪可获取这个参数)
π:稀释液渗透压
V0:RBC在血液中的体积(真值)
V0ˊ:RBC与稀释液达到渗透平衡时的体积
ΔV:RBC与稀释液达到渗透平衡时,1个RBC经过膜流入或流出水的总量。
并规定:
当ΔV>0时,即π0>π,血浆渗透压大于稀释液渗透压,或稀释液是低渗稀释液或血浆呈高渗状态;
当ΔV<0时,即π0<π,血浆渗透压小于稀释液渗透压,或稀释液是高渗稀释液或血浆呈低渗状态;
当ΔV=0时,即π0=π,血浆渗透压等于稀释液渗透压,或稀释液是等渗稀释液或血浆呈等渗状态。
在实际应用时(23)、(24)式中V0ˊ、V0两者单位应一致,可以是L,也可以是fl,1L=10^15fl。
(23)式是稀释液渗透压对RBC体积影响的数学关系式,简称RBC渗透平衡方程式。(23)式表明:血浆渗透压(注:RBC渗透压=血浆渗透压)与血液中RBC体积(真值)的乘积等于稀释液渗透压与RBC在稀释液渗透压作用下达到渗透平衡时体积的乘积。不难理解,(23)式扩展可表述为:将理想RBC加进不同渗透压的溶液,由于溶液渗透压大小不同,达到渗透平衡时RBC的体积不同,但溶液渗透压与渗透平衡时RBC的体积的乘积始终保持不变(等于一个常数)。用公式表示为:
π1V1=π2V2=......=πn Vn=π0V0=K..............(25)
π1:溶液1的渗透压
V1:RBC在溶液1的渗透平衡的体积
π2:溶液2的渗透压
V2:RBC在溶液2的渗透平衡的体积
πn:溶液n的渗透压
Vn:RBC在溶液n的渗透平衡的体积
π0:RBC渗透压(即血浆渗透压)
V0:RBC在血液中的体积(真值)
K:常数,同一样本K值相同,不同样本K值不相同
(25)式是(23)式的扩展式。
5.传统细胞分析仪电阻检测法的基本原理
传统细胞分析仪电阻检测法的基本原理:将待测血液用电解液(即细胞稀释液)充分稀释,使血细胞在电解液中成为游散状态,然后在待测电解液中置一微孔,在微孔的两端各加一定电压的电极,当液体中的血细胞通过微孔时,排开了等体积的电解液,使电解液的等效电阻瞬间变大,这个变大的电阻在恒流源的作用下引起一个等比例增大的电压。当细胞离开小孔后,电解液的等效阻值又恢复正常,直到下一个细胞到达小孔。这样血细胞连续地通过小孔,就在电极两端产生一连串电压脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞个数相当,脉冲的幅度与细胞体积成正比。也就是说,(23)或(25)式中的RBC与稀释液达到渗透平衡时的体积,细胞分析仪不能直接测定RBC体积,而只能测定RBC通过小孔产生的电压脉冲值,再将脉冲值换算成体积。经过以下2步即可实现将脉冲值换算成体积。
第1步:人们血浆渗透压正常范围280~320mOsm/kg.H2O,人们通常认为0.9%生理盐水(渗透压289.5mOsm/kg.H2O)称之为等渗溶液。RBC体积正常范围82~94fl(平均值为88fl)。现在取一个已知渗透压(π标)和已知体积(V标)的标准品RBC,显然这个标准品RBC要想最具有代表性,那么其RBC的渗透压必须等于人们血浆渗透压正常范围的平均值,有且只有这样,才尽可能代表大多数人的血浆渗透压与标准品RBC渗透压相等或接近相等,又因为人们习惯于0.9%NaCl溶液叫等渗溶液,故现在假设这个标准品RBC的渗透压等于生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O(π标=289.5),这个标准品RBC用渗透压为π的稀释液稀释,达到渗透平衡时体积为V标ˊ,根据(23)式,则(26)式成立:
289.5×V标=π×V标ˊ.................................(26)
即:V标ˊ=289.5×V标/π...............................(27)
289.5:标准品RBC渗透压,通常是取等于等渗的生理水渗透压
289.5mOsm/kg.H2O(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值)
V标:标准品RBC体积
π:稀释液渗透压
V标ˊ:标准品RBC在稀释液渗透压作用下达到渗透平衡时体积
设标准品RBC通过小孔在传统细胞分析仪必然会产生一个电压脉冲值(S标),根据(27)式可知,当π固定不变时,V标ˊ跟V标成正比例关系,而S标与V标ˊ成一一对应的关系。令标准品RBC电压脉冲值(S标)与标准品RBC在稀释液渗透压作用下达到渗透平衡时体积(V标ˊ)相等,即令S标=V标ˊ成立,则根据(27)式,可知(28)式成立:
S标=289.5×V标/π.......................................(28)
第2步:如果待测样本RBC的渗透压等于标准品RBC透压(289.5),那么待测样本RBC用渗透压为π的稀释液稀释,通过小孔,待测样本RBC在传统细胞分析仪产生一个电压脉冲值(S样),则(29)式成立:
S样=289.5×V样/π....................................(29)
S样:待测样本电压脉冲值
V样:待测样本的RBC体积
289.5:待测样本的RBC渗透压,根据假设可知,等于标准品RBC渗透压
π:稀释液渗透压
(29)/(28)得:
S样/S标=V样/V标...................................(30)
(28)式表明:当一个标准品RBC的体积(V标)确定,那么其相对应的电压脉冲值(S标)也确定,(30)式表明:当样本测定条件与标准品RBC相同时,那么可根据待测样本的电压脉冲值(S样),与标准品RBC电压脉冲值(S标)相比较,即可求出待测样本的RBC体积(V样)。(30)式是RBC电压脉冲值转化成RBC体积的公式。但(30)式成立的条件是:稀释液渗透压(π)与标准品RBC渗透压相对应,或者说稀释液渗透压(π)等价于标准品RBC渗透压(π标),而样本RBC渗透压(π样)等价标准品RBC渗透压(π标)。标准品RBC渗透压(π标)通常是取等于等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值),即π标=289.5,所以样本RBC渗透压=π标=289.5。也就是说:传统细胞计数仪测定样本的RBC体积(MCV)都是把样本的RBC渗透压当作标准品RBC渗透压(289.5mOsm/kg.H2O)去测定的。如果标准品RBC渗透压(π标)不是取等于等于人们血浆渗透压正常范围的平均值(这里取等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O),那么标准品RBC渗透压则没有代表性,会导致公司生产的细胞分析仪MCV准确度存在明显的偏差或出现不同公司的细胞分析仪,其MCV准确度没有可比性等现象。另外,如果全血质控物(溶液)的渗透压等于生理水渗透压,也可以以全血质控物的RBC当作标准品RBC。
经以上研究,得出一个结论:稀释液的配方是固定的,故稀释液的渗透压(π)只有一个固定值,它等价于标准品RBC渗透压(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值,通常是取等于等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O)。传统的细胞分析仪测定样本的MCV,是把样本RBC渗透压等价于289.5mOsm/kg.H2O(标准品RBC渗透压)去实现测定的。
因此(23)式等价于(32)式:
π样×V样=πV样ˊ=289.5×MCV............................(32)
π样:RBC渗透压(即血浆渗透压,渗透压仪可获取这个参数)
V样:RBC在血液中的体积(真值)
π:稀释液渗透压
V样ˊ:RBC与稀释液达到渗透平衡时的体积
289.5:是取等于等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值)
MCV:细胞分析仪测定红细胞平均体积
因此(25)式等价于(33)式:
π1×MCV1=π2×MCV2=......=πn×MCVn=π样×V样=K......(33)
π1:溶液1的渗透压
MCV1:细胞分析仪测定的红细胞平均体积(RBC在溶液1的渗透平衡的体积)
π2:溶液2的渗透压
MCV2:细胞分析仪测定的红细胞平均体积(RBC在溶液2的渗透平衡的体积)
πn:溶液n的渗透压
MCVn:细胞分析仪测定的红细胞平均体积(RBC在溶液n的渗透平衡的体积)
π样:RBC渗透压(即血浆渗透压)
V样:RBC在血液中的体积(真值)
K:常数,同一样本K值相同,不同样本K值不相同
将理想RBC加进不同渗透压的溶液,由于溶液渗透压大小不同,达到渗透平衡时RBC的体积不同,RBC渗透平衡的体积可由细胞分析仪测定,而且溶液渗透压与细胞分析仪测定的体积的乘积始终保持不变。(32)式是(23)式的等价式,(33)式是(25)式的等价式,(23)和(25)很难通过实验验证,但(32)和(33)可通过实验验证。
6.(32)和(33)式的实验验证
实验步骤:
配制不同浓度的NaCl溶液。(1)用分析天平准确称取10.00g分析纯NaCl放于1L干净溶量瓶,约加100ml双蒸馏水,于电炉加热溶解,放于室温约30分钟使溶液冷至室温后,再加双蒸馏水至1L刻度,混匀。(2)用直径是18cm的双圈牌双层定量滤纸过滤得滤液,即为10.00g/L NaCl溶液。用同样的方法配制并过滤得到9.50g/L、9.00g/L、8.50g/L、8.00g/L、7.50g/L的NaCl溶液。用渗透压仪测定NaCl溶液渗透压分别是321.5mOsm/kg、305.1mOsm/kg、289.5mOsm/kg、273.8mOsm/kg、261.9mOsm/kg、242.3mOsm/kg。
按常规操作,用EDTA.2K.2H2O作抗凝剂,抽取某人静脉血2ml混匀。把这些不同浓度的NaCl溶液当作细胞稀释液,用日本希森美康(SYSMEX F-800)细胞计数仪测定该静脉血,测定时先空白计数2次,使F-800管道充满该浓度的NaCl溶液再测定样本,测定样本2次取MCV的平均值作为F-800细胞计数仪测定的MCV,结果见下表。注:由于SYSMEX F-800细胞稀释液渗透压最接近生理盐水渗透压,所以用SYSMEX F-800﹑F-820做此试验效果最好,而用其他公司品牌的细胞计数仪做此试验效果可能不好。
从上表可以得出如下结论:
结论1:根据(32)式计算出的MCV(第5列),与F-800细胞计数仪测定的MCV(第3列)十分相近,即实验验证(32)式是正确的;(32)式是(23)式的等价式,故实验验证(23)式是正确的。
结论2:溶液渗透压与细胞分析仪测定的体积的乘积(即溶液渗透压×F-800MCV)始终保持不变,即实验验证(33)式是正确的。(33)式是(25)式的等价式,故实验验证(25)式是正确的。
结论3:由于RBC在稀释液渗透压作用下达到渗透平衡时瞬间即完成,这个瞬间可能是几分之一秒,可以看作是血液用细胞稀释液稀释立即完成。因此传统的细胞分析仪测定的MCV是RBC在稀释液渗透压作用下达到渗透平衡时脉冲值(RBC体积),这个RBC体积相当于把样本血浆渗透压=289.5mOsm/kg.H2O所对应的RBC体积,并不是样本真正血浆渗透压所对应的RBC的脉冲值(RBC体积真值或MCV真值)。由(32)式可知,只有样本RBC的渗透压(即样本血浆渗透压)等于289.5mOsm/kg.H2O时,传统的细胞分析仪测定的MCV才等于血液中RBC的脉冲值(RBC体积真值或MCV真值)。
根据(32)式,可以设计出一种新型细胞分析仪(装置)。装置由三部分组成:细胞分析仪﹑渗透压仪﹑校正算式转换器。当人的血浆渗透压出现偏差时,可通过(32)式进行校正,从而消除了传统的细胞分析仪MCV的误差!因此本装置测定的红细胞平均体积理论上等于真值,(32)式就是新型细胞分析仪(装置)MCV的校正算式。
7.血浆渗透压异常对细胞分析仪MCV等参数影响的有关论文
当人体的血浆渗透压异常(升高或降低)情况下,传统的细胞分析仪测定的MCV会引起假性升高或降低,这个问题是医务工作者在工作中经常发现的问题,国内国外都有报道,已经过去几十年了,一直困扰医学界,今摘录有关论文如下:
1.Hans L P,Duijnhoven,Marco Treskes.Marked interference ofhyperlycemia in measurements of mean(red)cell volume by Technicon Hanalyzers.Clinical Chemistry,1996,42∶76
2.Holt J T,Dewaanddler M J,Arvan D A.Spurious elevation of theelectronically determined mean corpuscular volume and hematocrit caused byhyperglycemia,Am J Clin Pathol,1982,77:561
3.张时民,李丽娜,稀释液渗透压影响MCV和HCT的测定《上海医学检验杂志》1998年第01期
4.刘海英,王雅茹,朱爱辛,高血糖症引起红细胞平均体积假性增高《临床检验杂志》1998年05期
5.林军,李勇,戈一峰,孟泽,高血糖对红细胞平均体积测定的影响《临床检验杂志》1998年05期
6.陈彤,史小波,刘培慧,曹兴建,血浆渗透压增高患者血细胞分析仪MCV的变化《临床检验杂志》2000年04期
7.李松森,郑源海,林庆友,高尿素血症引起平均血小板体积假性增高《上海医学检验杂志》2001年02期
8.丁小东,张克霞,曹兴建,两种方法测室高血糖患者红细胞平均体积的差异分析《中华医学写作杂志》2001年第6期
9.马双双,血尿素升高对红细胞平均体积测定的影响《重庆医学》2006年20期
10.胡青,郑霞,高血糖对血细胞分析仪测定MCV的影响《江西医学检验》2007年03期
11.张伟红,巫小莉,陈英姿,高血糖引起假性MCV和RDW增高的相关探讨《医技诊疗》2007年08期
12.杨云帆,张宪军,血细胞分析仪检测中MCHC假性增高的原因分析《医学检验与临床》2008,(5)
13.钟万芬,乐家新,血细胞分析仪检测中MCHC假性增高的原因及处理方法《现代检验医学杂志》2008年06期
14.郑源海,郑小梅,林元峰,周艺华,高渗状态引起平均血小板体积假性增高探讨《检验医学与临床》2010年01期
15.门帅,贾连玲,红细胞平均体积假性增大1例《国际检验医学杂志》2014年第A02期51-51
16.吴学忠,吕蓉,纪庆麟,吴君胜,魏家余,周学勇,不同渗透压NaCl溶液对红细胞的影响《临床输血与检验》2014年01期
17.牛丽凤,孙世忠,红细胞平均体积和分布宽度对血细胞分析仪血小板计数结果的影响《中国误诊学杂志》2011,11(31):7605.
18.初瑞雪,糖尿病血管性病变患者MCV、RDW及MPV、PDW变化的临床研究《中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编》2009年
8.新型细胞分析仪测定MCV等参数的校正算式
根据本发明的一些实施例,其中第1条校正算式是对血细胞分仪MCV的校正。红细胞平均体积(MCV):单位:飞升(fl)
根据(32)式,得:
血浆渗透压×MCVˊ=289.5×MCV,即:
MCV×289.5/血浆渗透压=MCVˊ..........................(34)
MCV:传统的细胞分析仪测定样本的红细胞平均体积
MCVˊ:样本RBC在血液中的体积,即新型血细胞分仪测定样本的红细胞平均体积
289.5:是取等于等渗的生理水渗透压289.5mOsm/kg.H2O(最理想是取等于人们血浆渗透压正常范围的平均值)
血浆渗透压:渗透压仪测定的样本血浆渗透压
根据本发明的一些实施例,其中第2条校正算式是对血细胞分仪MPV的校正。
血小板平均体积(MPV):
根据(34)式,同样推理得:
MPV×289.5/血浆渗透压=MPVˊ..........................(35)
MPV:传统的细胞分析仪测定样本的血小板平均体积
MPVˊ:新型血细胞分仪测定样本的血小板平均体积
根据本发明的一些实施例,其中第3条校正算式是对血细胞分仪HCT的校正。
红细胞压积(HCT):
HCT=MCV×RBC(×/L)/10^15
HCTˊ=MCVˊ×RBC(×/L)/10^15........................(36)
HCT:传统的细胞分析仪测定样本的红细胞压积
HCTˊ:新型血细胞分仪测定样本的红细胞压积
RBC:红细胞计数
根据本发明的一些实施例,其中第4条校正算式是对血细胞分仪PCT的校正。
血小板压积(PCT):
PCT=MPV×PLT(×/L)/10^13
PCTˊ=MPVˊ×PLT(×/L)/10^13.........................(37)
PCT:传统的细胞分析仪测定样本的血小板压积
PCTˊ:新型血细胞分仪测定样本的血小板压积
PLT:血小板计数
根据本发明的一些实施例,其中第5条校正算式是对血细胞分仪MCHC的校正。
平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):单位:g/L
MCHC=HGB(g/L)/HCT
MCHCˊ=HGB(g/L)/HCTˊ................................(38)
MCHC:传统的细胞分析仪测定样本的平均红细胞血红蛋白浓度
MCHCˊ:新型血细胞分仪测定样本的平均红细胞血红蛋白浓度
HGB:血红蛋白
另外,红细胞分布宽度(RDW-CV)﹑血小板分布宽度(PDW-CV)﹑大血小板比率(P-LCR)因为与MCV﹑MPV密切相关,故血浆渗透压出现偏差时,对这三个参数也产生影响。如果提高了细胞分析仪MCV﹑MPV的准确度,也会提高RDW-CV﹑PDW-CV﹑P-LCR等参数的准确度。
以上内容主要推导出血浆渗透压与细胞分析仪MCV两者关系公式(即MCV校正算式),MCV校正算式的推导非常复杂,但一旦有了校正算式,具体实施变得非常简单。本发明装置工作原理示意图,见图4。装置中的细胞分析仪测定样本的参数(MCV、MPV、RBC﹑PLT﹑HGB等)传输给校正算式转换器,渗透压仪测定样本的血浆渗透压参数传输给校正算式转换器,校正算式转换器根据相关校正算式运算,对MCV、MPV﹑MCHC、HCT、PCT参数进行校正,校正后变成MCVˊ、MPVˊ﹑MCHCˊ、HCTˊ、PCTˊ可作为最终结果输出。
具体实施方式举例1:
陈彤,史小波,刘培慧,曹兴建,血浆渗透压增高患者血细胞分析仪MCV的变化《临床检验杂志》2000年04期一文中报告:一高钠血症的血浆渗透压378mOsm/kg,细胞分析仪测定MCV 112.8fl,一高糖血症的血浆渗透压334mOsm/kg,细胞分析仪测定MCV 104.8fl,一高尿素血症的血浆渗透压338mOsm/kg,细胞分析仪测定MCV 106.9fl。
根据校正算式(34)校正细胞分析仪MCV参数,得出新型细胞分析仪MCVˊ参数,分别为:
新型细胞分析仪MCVˊ=112.8×289.5/378=86.4fl→112.8fl校正为86.4fl
新型细胞分析仪MCVˊ=104.8×289.5/334=90.8fl→104.8fl校正为90.8fl
新型细胞分析仪MCVˊ=106.9×289.5/338=91.6fl→106.9fl校正为91.6fl
患者血浆渗透压虽不在正常范围但其MCV本来是在正常范围的(84~92fl),是传统细胞分析仪测定MCV出现不准确(假性升高)所致,但新型细胞分析仪测定的结果没有出现这种现象。
具体实施方式举例2:
先用全血质控物校准细胞分析仪,用0.900%NaCl标准溶液校准渗透压仪。用EDTA.2K.2H2O作抗凝剂,抽取某高糖血症患者的静脉血2ml混匀,于细胞分析仪和透压仪测定,各参数校正前和校正后见下表:
传统细胞分析仪测定的红细胞平均体积(MCV)与新型细胞分析仪测定的红细胞平均体积(MCVˊ)对比,见下表:
总之,新型细胞分析仪消除了血浆渗透压异常时引起细胞分析仪MCV假性升高或降低的影响,从而提高了细胞分析仪MCV的准确度,也提高了与MCV或血浆渗透压密切相关的参数如MPV﹑MCHC、HCT、PCT等参数的准确度。
通过以上的实施方式的描述,本领域技术人员可以清楚地了解到本发明的装置可借助软件加通用硬件平台的方式来实现。本领域技术人员可以理解实现上述实施例方法中的全部或部分流程是可以通过计算机程序来指令相关的硬件来完成,所述的程序可存储于一计算机可读取存储介质中,该程序在执行时,可包括如上述方法的实施例的流程。其中,所述的存储介质可为磁碟、光盘、只读存储记忆体(ReadOnly Memory,ROM)或随机存储记忆体(Random Access Memory,RAM)等。
Claims (4)
1.一种提高细胞分析仪参数准确度的装置,其特征在于:所述装置包括渗透压仪﹑细胞分析仪﹑校正算式转换器;所述校正算式转换器的一端与所述渗透压仪连接,另一端与所述细胞分析仪连接;所述渗透压仪用于测定样本的血浆渗透压,所述细胞分析仪用于测定样本的红细胞平均体积(MCV)、血小板平均体积(MPV)、血红蛋白(HGB)、红细胞计数(RBC);所述校正算式转换器含有校正算式,用于所述细胞分析仪的MCV、MPV、MCHC(平均红细胞血红蛋白浓度)、HCT(红细胞压积)、PCT(血小板压积)的校正或转换;
校正算式转换器通过公式〔MCVˊ=MCV×K/血浆渗透压〕对MCV参数进行校正,其中血浆渗透压由渗透压仪测定,K是全血质控品渗透压,全血质控品是等渗溶液,其值以等渗的生理盐水渗透压289.5mOsmol/kg.H2O作参考,MCV是细胞分析仪测定的结果,MCVˊ是本装置测定的结果;
校正算式转换器通过公式〔MPVˊ=MPV×K/血浆渗透压〕对MPV参数进行校正,其中血浆渗透压由渗透压仪测定,K是全血质控品渗透压,全血质控品是等渗溶液,其值以等渗的生理盐水渗透压289.5mOsmol/kg.H2O作参考,MPV是细胞分析仪测定的结果,MPVˊ是本装置测定的结果。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于:校正算式转换器通过公式〔HCTˊ=MCVˊ×RBC/10^15,HCT=MCV×RBC/10^15〕对HCT参数进行校正,其中HCT经过校正后变成HCTˊ,HCT是细胞分析仪测定的结果,HCTˊ是本装置测定的结果,其中,RBC的单位是个/L。
3.根据权利要求1所述的装置,其特征在于:校正算式转换器通过公式〔PCTˊ=MPVˊ×PLT/10^13,PCT=MPV×PLT/10^13〕对PCT参数进行校正,其中PCT经过校正后变成PCTˊ,PCT是细胞分析仪测定的结果,PCTˊ是本装置测定的结果,其中,PLT的单位是个/L。
4.根据权利要求2所述的装置,其特征在于:校正算式转换器通过公式〔MCHCˊ=HGB/HCTˊ,MCHC=HGB/HCT〕对MCHC参数进行校正,其中MCHC经过校正后变成MCHCˊ,MCHC是细胞分析仪测定的结果,MCHCˊ是本装置测定的结果,HGB的单位为g/L。
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