CN110736789B - 一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用 - Google Patents

一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用 Download PDF

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Abstract

本公开提供了一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用，其判断方法为：检测制备泡沫硬化剂过程中的分贝值，泡沫硬化剂制备终点的分贝值不高于40dB。本公开利用制备过程中声音消失时的分贝值作为泡沫硬化剂达到最稳定状态的标志，通过实验表明，对于具有稳定性的泡沫硬化剂来说，泡沫硬化剂在制备过程中声音消失时达到最稳定状态，具有广泛的应用范围。

Description

一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用
技术领域
本公开属于生物医药技术领域，涉及泡沫硬化剂的制备，具体涉及一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
泡沫硬化疗法是一种治疗脉管畸形(vascular malformations,VMs)的有效方法，与液体硬化疗法相比，它的优点在于使用更低剂量的硬化剂即可达到更好的治疗效果。临床上制备泡沫最常用的方法是Tessari方法，它用一个医用三通阀连接两个注射器并来回推注，使两个注射器中的液体产生泡沫，例如Jan-Christoph G.R.Wollmann.The Historyof Sclerosing Foams.Dermatologic Surgery,2004；30:694-703。
稳定性是泡沫硬化剂的重要特征之一，它决定了泡沫硬化剂的治疗效果。根据制备十四烷基硫酸钠(STS)泡沫的实验结果，Tessari及其同事发现，快速推注20次后，再增加推注次数并不能使泡沫更稳定。因此，在临床实践和许多研究中，快速推注20次被广泛应用为泡沫制备终点的标志，应用于包括STS在内的所有类型的泡沫硬化剂的制备。然而，尚无研究证明快速推注20次是否足以使所有泡沫硬化剂都达到最稳定的状态。如果千篇一律地使用20次作为硬化泡沫的制备终点的标志,则不能够保证所制备的泡沫处于最稳定状态，可能影响泡沫硬化剂的治疗效果。
发明内容
为了研究快速推注20次是否可以作为所有泡沫硬化剂都达到最稳定的状态的标志，本公开发明人对博来霉素泡沫硬化剂进行研究，发现当推注次数在40次以下时，随着推注泡沫次数的增加，博来霉素泡沫稳定性逐渐增强。但推注50次与推注40次时稳定性没有明显的区别。也就是说，本公开发明人发现快速推注20次不能作为所有泡沫硬化剂都达到最稳定状态的标准。
为了解决现有技术的不足，本公开的目的是提供一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用，能够更为可靠地判断硬化泡沫的稳定性。
为了实现上述目的，本公开的技术方案为：
一方面，一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法，检测制备泡沫硬化剂过程中的分贝值，泡沫硬化剂制备终点的分贝值不高于40dB。
快速推注次数是一个简单、客观的指标，但是制备过程中的推注的速度因人而异。由于推注速度这一变量对泡沫稳定性有显著的影响，所以仅仅通过推注次数而不考虑推注速度来评估所制成泡沫的性能是不科学的。本公开经过实验发现，在泡沫硬化剂推注过程中声音与泡沫的稳定状态存在一定的关系，在推注过程中会出现声音消失的现象，经过分贝检测，声音消失时的分贝值不高于40dB，而声音消失时，泡沫达到最稳定的状态。
另一方面，一种上述泡沫硬化剂制备终点的判断方法在制备泡沫硬化剂的应用。
第三方面，一种泡沫硬化剂的制备方法，检测制备泡沫硬化剂过程中的分贝值，分贝值降低至不高于40dB时，或分贝值保持在不高于40dB时，停止制备即可。
本公开制备的泡沫硬化剂的稳定性最佳，从而大大提高泡沫硬化的治疗效果。
第四方面，一种泡沫硬化剂，采用上述制备方法获得。
本公开的有益效果为：
本公开利用泡沫制备过程中声音消失时的分贝值作为泡沫硬化剂达到最稳定状态的标志，通过实验表明，对于具有稳定性的泡沫硬化剂来说，硬化泡沫在声音消失时达到最稳定状态，具有广泛的应用范围。
附图说明
构成本公开的一部分的说明书附图用来提供对本公开的进一步理解，本公开的示意性实施例及其说明用于解释本公开，并不构成对本公开的不当限定。
图1为本公开实验1中制备的博来霉素泡沫的外观图，左上为实施例1-1，右上为实施例1-2，左下为实施例1-3，右下为实施例1-4；
图2为本公开实验2中制备的博来霉素泡沫的外观图，左为实施例2-1，中为实施例2-7，右为实施例2-13；
图3为本公开实验2中制备的聚多卡醇泡沫的外观图，左列上为实施例2-2，左列中为实施例2-3，左列下为实施例2-4，中间列上为实施例2-8，中间列中为实施例2-9，中间列下为实施例2-10，右列上为实施例2-14，右列中为实施例2-15，右列下为实施例2-16；
图4为本公开实验2中制备的十四烷基硫酸钠泡沫的外观图，左列上为实施例2-5，左列下为实施例2-6，中间列上为实施例2-11，中间列下为实施例2-12，右列上为实施例2-17，右列下为实施例2-18。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
鉴于快速推注20次不能准确作为泡沫硬化剂最稳定状态的标志，本公开提出了一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法及应用。
本公开的一种典型实施方式，提供了一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法，检测制备泡沫硬化剂过程中的分贝值，泡沫硬化剂制备终点的分贝值不高于40dB。
本公开经过实验发现，在泡沫硬化剂推注过程中声音与泡沫的稳定状态存在一定的关系，在推注过程中会出现声音消失的情况，经过分贝检测，声音消失时的分贝值不高于40dB，而声音消失时，泡沫达到最稳定的状态。
该实施方式的一种或多种实施例中，制备泡沫硬化剂的方法为Tessari方法。
该实施方式的一种或多种实施例中，检测泡沫硬化剂经过三通阀的分贝值。检测该处的分贝值更准确。
该系列实施例中，所述泡沫硬化剂为除1％聚多卡醇泡沫以外的泡沫硬化剂。由于1％聚多卡醇泡沫本身不够稳定，难以达到最稳定的状态。
该系列实施例中，所述泡沫硬化剂为博来霉素泡沫、十四烷基硫酸钠(STS)泡沫、添加透明质酸(HA)的1％聚多卡醇或3％聚多卡醇等。
本公开的另一种实施方式，提供了一种上述泡沫硬化剂制备终点的判断方法在制备泡沫硬化剂的应用。
本公开的第三种实施方式，提供了一种泡沫硬化剂的制备方法，检测制备泡沫硬化剂过程中的分贝值，分贝值降低至不高于40dB时，或分贝值保持在不高于40dB时，停止制备即得。
本公开制备的泡沫硬化剂的稳定性最佳，从而大大提高泡沫硬化疗法的治疗效果。
该实施方式的一种或多种实施例中，制备泡沫硬化剂的方法为Tessari方法。
该实施方式的一种或多种实施例中，所述泡沫硬化剂为博来霉素泡沫、十四烷基硫酸钠(STS)泡沫、添加透明质酸的1％聚多卡醇或3％聚多卡醇等。
该系列实施例中，博来霉素泡沫制备过程中的气液比为2～3:1。
该系列实施例中，十四烷基硫酸钠(STS)泡沫、添加透明质酸的1％聚多卡醇或3％聚多卡醇的制备过程中的气液比为3.5～4.5:1。
本公开的第四种实施方式，提供了一种泡沫硬化剂，采用上述制备方法获得。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本公开的技术方案。
实验1
实施例1-1
将6IU博来霉素溶解在1mL生理盐水(0.9％氯化钠溶液)和1mL人血白蛋白溶液(以下简称HSA，浓度为25％，本实验所用的是临床上广泛应用的静脉输液药物，生产企业：Grifols biological Inc.USA)中，采用Tessari方法以2：1的气液比，快速推注(尽操作者的最大可能，一般1秒钟两次)20次制备泡沫。
实施例1-2
将6IU博来霉素溶解在1mL生理盐水和1mLHSA中，采用Tessari方法以2:1的气液比(体积比，以下Tessari方法所有的比例都是体积比)，快速推注30次制备泡沫。
实施例1-3
将6IU博来霉素溶解在1mL生理盐水和1mL HSA中，采用Tessari方法以2：1的气液比，快速推注40次制备泡沫。
实施例1-4
将6IU博来霉素溶解在1mL生理盐水和1mL HSA中，采用Tessari方法以2：1的气液比，快速推注50次制备泡沫。
实验2
实施例2-1
6IU博来霉素溶解在2mL HSA中，采用Tessari方法以3：1的气液比，快速推注20次制备泡沫。
实施例2-2
1％聚多卡醇(本研究采用临床上硬化治疗应用的聚多卡醇注射液，商品名：安束喜，英文名称：PolidocanolInjection，化学名称：α-异十三烷基-ω-羟基-聚(氧-1,2-亚乙基)，分子式：C12H25(OCH2CH2)nOH，辅料：96％乙醇、硝酸二氢钾、磷酸氢二钠和注射用水)，采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注20次制备泡沫。
实施例2-3
向1％聚多卡醇添加0.1mL透明质酸，采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注20次制备泡沫。
实施例2-4
3％聚多卡醇采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注20次制备泡沫。
实施例2-5
1％STS(主要成分为十四烷基硫酸钠)采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注20次制备泡沫。
实施例2-6
3％STS采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注20次制备泡沫。
实施例2-7
6IU博来霉素溶解在2mL HSA中，采用Tessari方法以3：1的气液比，快速推注至声音消失(此时约40次左右)。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-8
1％聚多卡醇采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注40次制备泡沫。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-9
向1％聚多卡醇添加0.1mL透明质酸，采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-10
3％聚多卡醇采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-11
1％STS采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-12
3％STS采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-13
6IU博来霉素溶解在2mL HSA中，采用Tessari方法以3：1的气液比，快速推注至声音消失后，继续快速推注10次。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-14
1％聚多卡醇采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注50次。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-15
向1％聚多卡醇添加0.1mL透明质酸，采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失后，继续快速推注10次。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-16
3％聚多卡醇采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失后，继续快速推注10次。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-17
1％STS采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失后，继续快速推注10次。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实施例2-18
3％STS采用Tessari方法以4：1的气液比，快速推注至声音消失后，继续快速推注10次。在37分贝的实验环境中使用分贝仪(PM6708，深圳华谊峰仪技术有限公司，中国深圳)测量并记录泡沫最后一次通过三通的分贝值。
实验2
以实施例2-1～2-6作为第1组，以实施例2-7～2-12作为第2组，以实施例2-13～2-18作为第3组。
以上实施例由同一实验员在室温下使用新的硬化剂、10mL注射器和医用三通重复制备5次。使用SPSS 19.0软件(芝加哥，伊利诺伊州)分析实验数据。t检验用于检测2个独立样本差异。p值小于0.05时认为组间存在差异。各组间的最小p值记录为pmin。
结果
实验1：
实施例1-1～1-4表明在推注次数达到40次之前，推注次数越多，博来霉素泡沫的泡沫半衰期越长，见表1，泡沫越致密，如图1所示。快速推注40次和50次产生的泡沫在泡沫半衰期和致密程度上都没有显着差异。而且，快速推注40次之后，泡沫制备过程声音消失。
表1.不同推注次数制备出的泡沫的半衰期
Figure BDA0002293826670000071
半衰期的平均值表示为平均值±标准差。
实施例2-1、实施例2-6、实施例2-11的博来霉素的泡沫半衰期，如表2所示，表明实施例2-1制备的博来霉素的泡沫半衰期明显短于实施例2-6和实施例2-11制备的博来霉素泡沫。显微镜下观察到的泡沫致密程度也更低，如图2所示。实施例2-6和实施例2-11制备的博来霉素泡沫的泡沫半衰期之间没有统计学差异(0.766＝p>0.05)，显微镜下观察泡沫的致密程度也没有明显差异。
表2.不同分组中博来霉素的泡沫半衰期。
Figure BDA0002293826670000072
半衰期的平均值表示为平均值±标准差。
实施例2-2、实施例2-3、实施例2-4、实施例2-8、实施例2-9、实施例2-10、实施例2-14、实施例2-15、实施例2-16制备的聚多卡醇(POL)的泡沫半衰期，如表3所示，实施例2-8和实施例2-14的1％聚多卡醇的声音并没有降低到声音消失，泡沫每次通过三通的最低分贝为52Db,且显微镜下观察泡沫的外形较一致，如图3所示，记录的泡沫半衰期组间无统计学差异(0.192＝pmin>0.05；表3)。对于另外两种聚多卡醇泡沫，快速推注约40次后，泡沫制备过程声音消失，分贝约为40dB。实施例2-8、实施例2-9、实施例2-10、实施例2-14、实施例2-15、实施例2-16制备的的泡沫外观相似，泡沫半衰期无明显差异(0.526＝pmin>0.05)，都比实施例2-2、实施例2-3、实施例2-4中的泡沫更致密(图3)，泡沫半衰期也更长。
表3.不同浓度和不同分组的聚多卡醇(POL)的泡沫半衰期。
Figure BDA0002293826670000073
Figure BDA0002293826670000081
半衰期的平均值表示为平均值±标准差。
HA,透明质酸。
实施例2-5、实施例2-6、实施例2-11、实施例2-12、实施例2-17、实施例2-18制备的STS的泡沫半衰期，如表4所示，STS泡沫在快速推注约18次之后，制备过程声音消失(40dB)。泡沫的半衰期(0.450＝pmin>0.05)和外观在各组之间无显着差异。与1％STS泡沫相比，3％STS泡沫具有更长的半衰期和更致密的外观(表4，图4)。
表4.不同浓度和不同分组的十四烷基硫酸钠(STS)的泡沫半衰期。
Figure BDA0002293826670000082
半衰期的平均值表示为平均值±标准差。
结论
本公开发现泡沫制备过程中，应用制备过程中声音消失这一现象可以作为最稳定泡沫制备终点的标志。对于不同的泡沫硬化剂，制备过程中的声音消失与快速推注20次有不同的应用范围。
本公开比较了用不同推注次数制备的博来霉素泡沫，从而判断快速推注20次是否可以作为博来霉素泡沫达到最稳定状态的标志。本公开发现，增加推注次数后，博来霉素泡沫变得更致密，这说明通过快速推注20次制备最稳定的博来霉素泡沫是不合适的。快速推注40次后，本公开发现推注过程中声音消失。而且，快速推注50次产生的泡沫并没有比40次更长的半衰期和更致密的组成。因此，本公开提出推注过程中声音消失(分贝值约为40dB)标志着最稳定的博来霉素泡沫制备终点。在实验2中，该标志也被证明适用于制备改良的博来霉素泡沫。
为了确定快速推注20次和推注过程声音消失作为判断泡沫最稳定状态的标志的应用范围，本公开在实验2中测试了聚多卡醇和STS泡沫。在大多数欧洲国家，聚多卡醇和STS都被批准应用于硬化治疗，且根据《欧洲慢性静脉疾病硬化疗法指南》，它们用于治疗静脉畸形的浓度为1％–3％。因此，本公开的实验选择的聚多卡醇和STS的浓度分别为1％和3％。
结果表明，只有1％聚多卡醇在制备过程中不能变得声音消失，可能原因是1％聚多卡醇泡沫不够稳定。由于各组1％聚多卡醇泡沫的半衰期和外观都没有显着差异，本公开可以使用快速推注20次来判断1％聚多卡醇泡沫达到最稳定状态。与1％聚多卡醇不同，添加了0.1mL HA的1％聚多卡醇和3％聚多卡醇的泡沫都在推注到声音消失后变得更加稳定。第2组和第3组泡沫的半衰期和外观没有明显差异，表明推注过程声音消失可以用来判断这两种聚多卡醇泡沫达到最稳定状态。
而STS泡沫在快速推注约18次后，泡沫通过三通阀的声音分贝值变为40dB，略高于环境分贝，声音消失。由于快速18次或20次制备泡沫在临床实践中没有明显区别，快速推注20次或制备过程声音消失都可以用来判断STS泡沫达到了最稳定的状态。
总而言之，本公开提供了制备过程中声音几乎消失这一现象可以作为最稳定泡沫制备终点的标志，该标志具有广泛的应用范围。
以上所述仅为本公开的优选实施例而已，并不用于限制本公开，对于本领域的技术人员来说，本公开可以有各种更改和变化。凡在本公开的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。

Claims (12)

1.一种泡沫硬化剂制备终点的判断方法，其特征是，检测制备泡沫硬化剂过程中的分贝值，泡沫硬化剂制备终点的分贝值不高于40dB；
制备泡沫硬化剂的方法为Tessari方法；
检测泡沫硬化剂经过三通阀的分贝值。
2.如权利要求1所述的泡沫硬化剂制备终点的判断方法，其特征是，所述泡沫硬化剂为除1％聚多卡醇泡沫以外的泡沫硬化剂。
3.如权利要求1所述的泡沫硬化剂制备终点的判断方法，其特征是，所述泡沫硬化剂为博来霉素泡沫、十四烷基硫酸钠泡沫、添加透明质酸的1％聚多卡醇。
4.如权利要求1所述的泡沫硬化剂制备终点的判断方法，其特征是，所述泡沫硬化剂为博来霉素泡沫、十四烷基硫酸钠泡沫、3％聚多卡醇。
5.一种权利要求1～4任一所述的泡沫硬化剂制备终点的判断方法在制备泡沫硬化剂的应用。
6.一种泡沫硬化剂的制备方法，其特征是，检测制备泡沫硬化剂过程中泡沫最后一次通过三通阀的分贝值，分贝值降低至不高于40dB时，停止制备即可；制备泡沫硬化剂的方法为Tessari方法。
7.如权利要求6所述的泡沫硬化剂的制备方法，其特征是，所述泡沫硬化剂为博来霉素泡沫、十四烷基硫酸钠泡沫、添加透明质酸的1％聚多卡醇。
8.如权利要求6所述的泡沫硬化剂的制备方法，其特征是，所述泡沫硬化剂为博来霉素泡沫、十四烷基硫酸钠泡沫、3％聚多卡醇。
9.如权利要求7所述的泡沫硬化剂的制备方法，其特征是，博来霉素泡沫制备过程中的气液比为2～3:1。
10.如权利要求7所述的泡沫硬化剂的制备方法，其特征是，十四烷基硫酸钠泡沫、添加透明质酸的1％聚多卡醇中的气液比为3.5～4.5:1。
11.如权利要求8所述的泡沫硬化剂的制备方法，其特征是，十四烷基硫酸钠泡沫、3％聚多卡醇的制备过程中的气液比为3.5～4.5:1。
12.一种泡沫硬化剂，其特征是，采用权利要求6～11任一所述的制备方法获得。
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