CN110662533A

CN110662533A - 向非人哺乳动物递送霉酚酸活性剂的方法和组合物

Info

Publication number: CN110662533A
Application number: CN201880031161.3A
Authority: CN
Inventors: M·克洛茨曼; P·希瓦南德; W·H·安德森; G·萨斯延
Original assignee: Okawa Pharmaceutical
Current assignee: Okawa Pharmaceutical
Priority date: 2017-03-13
Filing date: 2018-03-13
Publication date: 2020-01-07
Also published as: BR112019019003A2; WO2018170022A3; CA3054817A1; US20200030285A1; MX2019010829A; US11633378B2; JP2020510691A; AU2018236225B2; US20190201375A1; US20240299343A1; AU2018236225A1; KR20190131036A; JP7385474B2; EP3595639A2; US11786505B2; WO2018170022A2

Abstract

本公开提供了用于在兽医对象中改善霉酚酸活性剂(包括霉酚酸钠)的递送的方法和组合物。目前所公开的方法和组合物用于例如治疗自身免疫性疾病、与IMPDH活性相关的血液病症以及与移植或植入手术相关的免疫排斥。

Description

向非人哺乳动物递送霉酚酸活性剂的方法和组合物

背景技术

技术领域

自身免疫性疾病代表了慢性疾病的一个异质性家族。此类疾病的标志包括淋巴细胞增殖，形成自身抗体以及导致慢性炎症和组织损伤的免疫系统失调。在兽医方面，自身免疫性疾病代表了几乎没有可行的治疗选择的一类疾病。

相关现有技术描述

霉酚酸酯已被公认为是人类和兽医对象自身免疫性疾病和其他病况的一种治疗。然而，目前用于递送霉酚酸酯和霉酚酸钠的方法和组合物会在兽医对象中产生显著的副作用，包括例如与粘膜溃疡相关的消化道不耐受，以及胃、小肠和大肠的糜烂和坏死。参见例如Arns,W.,“Noninfectious Gastrointestinal(GI)Complications of MycophenolicAcidTherapy:A Consequence of Local GI Toxicity？,”Transplantation Proceedings39:88-93(2007)。

发明内容

本公开提供了一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善的释放曲线(profile)将霉酚酸(MPA)活性剂递送至所述兽医对象的下消化道。

在一些实施方式中，一种方法包括以相对于向参照兽医对象施用的速释MPA制剂在兽医对象中以有效提供改善的MPA释放曲线的量向兽医对象施用改善释放的兽医组合物。在进一步的实施方式中，目前公开的方法和组合物提供了具有一种或多种所需PK特征的MPA释放曲线，如所需的[MPA]C_max，在所需的一段时间保持在、高于或低于某一阈值的血浆[MPA]或者与速释制剂的释放速率相比随着时间的推移更一致的释放速率等等。

例如，在一些实施方式中，施用后，兽医对象的血浆[MPA]C_max低于给予参照速释MPA制剂的兽医对象的血浆[MPA]C_max。在特定的实施方式中，一种方法包括向兽医对象施用本公开的改善释放的组合物，在施用后，兽医对象具有小于约2500ng/nL、小于约2000ng/mL或小于约1500ng/mL的血浆[MPA]C_max。在所述方法的某些此类实施方式中，向兽医对象施用本公开的改善释放的组合物，并且施用后，在T_max后至少约3小时、至少约4小时或至少约5小时保持超过约500ng/mL的血浆[MPA]。

本公开还提供了方法，所述方法包括向兽医对象施用改善释放的组合物，在施用后，在一段时间内所述兽医对象的[MPA]AUC是在同一段时间内施用速释制剂的参照兽医对象的[MPA]AUC的至少约1.5倍、至少约2倍、至少约2.5倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约10倍或更多。

在某些实施方式中，目前公开的方法和组合物还用于提供所需的药物:代谢产物(即，MPA:代谢产物)比率。例如，在特定的实施方式中，代谢产物包含MPAG且MPA:MPAG比率为约1:1至约10:1。在进一步的实施方式中，MPA:MPAG比率为约1.5:1至约5:1。在更进一步的实施方式中，MPA:MPAG比率为约2:1。在其他实施方式中，代谢产物包含AcMPAG且MPA:AcMPAG比率为约50:1至约250:1，或约100:1至约200:1。在一些此类实施方式中，MPA:AcMPAG比率为约150:1。

在一些实施方式中，在口服施用后，兽医对象的MPA:代谢产物比率与从施用速释参照口服剂量的霉酚酸酯(MMF)后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比是升高的。

本申请还提供了用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中达到了约1μg/mL至约10μg/mL的C_max血浆[MPA]。

本申请还提供了用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中在约4至约24小时达到了约1μg/mL至约10μg/mL的C_max血浆[MPA]。

本申请还提供了用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中在约8至约24小时达到了约3μg/mL至约5μg/mL的C_max血浆[MPA]。

本申请还提供了用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中达到了约5μg/mL至约6μg/mL的C_max血浆[MPA]并且在所述兽医对象中在约4至约10小时释放了约2.5μg/mL/h至约5μg/mL的所述MPA活性剂。

本申请还提供了用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中达到了约6μg/mL的C_max血浆[MPA]。

本申请还提供了改善释放的兽医组合物，包含；

直径小于约10mm的核心；

安置在所述核心的至少一部分之上并且包含MPA活性剂的活性层；

安置在所述活性层之上的任选的密封包衣；和

安置在所述密封包衣层之上并且占所述组合物的约5wt％至约50wt％的改善释放层，

其中所述MPA活性剂占所述组合物的约20wt％至约90wt％并且所述改善释放层占所述组合物的约5wt％至约50wt％，并且在将所述组合物向兽医对象施用后，兽医对象的MPA:代谢产物比率与从施用速释参照口服剂量的MMF后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比是升高的。

还提供了改善释放的兽医组合物，包含：

直径小于约10mm的挤出的核心；

至少部分地安置在所述核心内的MPA活性剂；

安置在所述MPA活性剂和所述核心之上的任选的密封包衣；和

安置在所述密封包衣层之上的改善释放层，

其中所述MPA活性剂占所述组合物的约20wt％至约90wt％并且所述改善释放层占所述组合物的约5wt％至约50wt％，并且在将所述组合物向兽医对象施用后，MPA:代谢产物比率与从施用速释口服剂量的MMF后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比是升高的。

在某些实施方式中，向兽医对象施用目前公开的改善释放的组合物后获得的MPA:代谢产物比率是MPA:MPAG比率。

在进一步的实施方式中，向兽医对象施用目前公开的改善释放的组合物后获得的MPA:MPAG比率是向参照兽医对象施用参照速释口服剂量的MMF后获得的MPA:MPAG比率的至少约1.5倍。

在某些实施方式中，使用目前公开的改善释放的组合物获得的MPA:代谢产物比率是MPA:AcMPAG的比率。

还提供了免疫抑制需要其的兽医对象的方法，其中所述方法包括向所述对象口服施用有效量的根据本公开的改善释放的兽医组合物。

还提供了用于在兽医对象中抑制肌苷一磷酸脱氢酶(IMPDH)活性的方法，其中所述方法包括向所述兽医对象口服施用有效量的根据本公开的改善释放的兽医组合物。

在所述方法的某些实施方式中，施用有效量的根据本申请所述任意实施方式的改善释放的兽医组合物将IMPDH活性抑制至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或更多。

本公开还提供了用于在需要其的兽医对象中减少淋巴细胞计数和/或活性的方法，其中所述方法包括向所述对象口服施用有效量的根据本公开的改善释放的兽医组合物。

本申请还提供了用于在兽医对象中调节炎症应答的方法，其中所述方法包括向所述对象口服施用有效量的根据本公开的改善释放的兽医组合物。

本公开还提供了优先通过兽医对象的下GI道递送MPA活性剂的方法，其中所述方法包括向所述对象口服施用根据本公开的改善释放的兽医组合物。

本申请还提供了用于降低MPA疗法中兽医对象的无活性MPA代谢产物暴露量的方法，其中所述方法包括向所述对象口服施用根据本公开的改善释放的兽医组合物。

本申请还提供了用于降低兽医对象的与不良效应相关的MPA代谢产物暴露量的方法，其中所述方法包括向所述对象口服施用根据本公开的改善释放的兽医组合物。

本公开进一步的方面、实施方式、特性和优点，以及某些实施方式的结构和操作将参照附图在下文中详细描述。

附图说明

图1显示了根据本文实施方式的改善释放的兽医组合物的一个实施方式的图示。

图2显示了根据本文实施方式的其他改善释放的兽医组合物的一个实施方式的图示。

图3显示了根据本公开的包含改善释放的兽医组合物的胶囊的一个实施方式的图示。

图4显示了从根据本公开的改善释放的兽医组合物的两个实施方式中霉酚酸钠的释放。

图5显示了从根据本说明书的改善释放的兽医组合物的其他实施方式中霉酚酸钠的释放。

图6显示了从根据本公开的改善释放的组合物的又一个实施方式中霉酚酸钠的释放，其中所述组合物暴露于酸性介质(pH 1.2)中孵育2小时，随后在pH 6.8的介质中孵育12小时。

图7显示了从根据本公开的改善释放的兽医组合物的另一个实施方式中霉酚酸钠的释放。

图8显示了从根据本公开的改善释放的兽医组合物的又一个实施方式中霉酚酸钠的释放，其中所述组合物暴露于酸性介质(pH 1.2)中孵育2小时，随后在pH 6.8的介质中孵育12小时。

图9显示了从根据本公开的改善释放的兽医组合物的一个实施方式中霉酚酸钠的释放，其中所述组合物包含基于溶剂的包衣，并且其中所述组合物暴露于酸性介质(pH1.2)中孵育2小时，随后在pH 6.8的介质中孵育12小时。

图10显示了给予禁食犬速释霉酚酸酯溶液(10mg/kg MMF；圆圈)或给予进食犬本公开的改善释放的兽医组合物(270mg MPA；方块)后，在所示时间点测量的血清霉酚酸的相对水平([MPA]＝ng/mL MPA)。

图11显示了图10所示数据的另一视图，并且进一步提供了在给予改善释放的兽医组合物后，禁食犬中MPA的平均血清水平(ng/mL)(“第4组”)。

图12显示了在所示的犬给药组中测量的MPA代谢产物酰基MPA葡糖醛酸苷(acylMPA glucoronide，AcMPAG)的平均血清水平(ng/mL)。

图13显示了在所示的犬给药组中测量的MPA代谢产物MPA葡糖醛酸苷(MPAglucoronide，MPAG)的平均血清水平(ng/mL)。

图14提供了显示由本公开的发明人设计的2-治疗、2-阶段、序贯的、自适应性的交叉研究的示意图。

图15显示了在图14中描述的犬“第1阶段”和“第2阶段”治疗组第1天的血清MPA浓度随时间的变化情况。

图16显示了在图14中描述的犬“第1阶段”和“第2阶段”治疗组第5天的血清MPA浓度随时间的变化情况。

具体实施方式

本公开提供了用于在兽医对象中改善霉酚酸活性剂(包括霉酚酸钠)递送的方法和组合物。除了其他应用以外，本申请公开的方法和组合物用于治疗自身免疫性疾病、与IMPDH活性相关的血液病症以及与移植或植入手术相关的免疫排斥。

本申请中提及的公开专利、专利申请、网页、公司名称和科学文献其全部内容均通过引用在此并入本申请，其程度与分别具体地和单独地指出通过引用并入的程度相同。本申请所引用的任何参考文献与本说明书的具体教导之间的任何冲突均应以后者为准。同样地，本领域技术人员所理解的单词或短语的定义与在本说明书中具体教导的单词或短语的定义之间的任何冲突都应通过本说明书来解决。

定义

在更详细地阐述本公开之前，提供其用于本申请的某些术语的定义可能有助于其理解。其他定义贯穿于本公开之中。

除非另有定义，否则本申请中使用的技术和科学术语具有本申请所属领域的技术人员通常理解的含义。本申请引用了本领域普通技术人员公知的各种方法和材料。

除非另有明示，否则在本说明书中，应将任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围理解为包括在所述范围内的任何整数，以及在适当时包括其分数(如整数的十分之一和百分之一)的值。而且，除非另有明示，否则应将本申请所述的与任何物理特征(如聚合物亚基、尺寸或厚度)相关的任何数值范围理解为包括所述范围内的任何整数。如在本申请中所使用的，除非另有明示，否则术语“约”指所示范围、值或结构的平均值±20％。应当理解的是，如在本申请中所使用的，术语“一个(a)”和“一种(an)”指所列举组分中的“一个或多个”。应将替代(例如，“或”)的使用理解为指替代的之一、两者或其任意组合。如在本申请中所使用的，术语“包括”、“具有”和“包含”同义地使用，这些术语及其变体旨在被解释为是非限制性的。

“任选的”或“任选地”指随后描述的元素、组分、事件或情况可以出现，也可以不出现，并且该描述包括其中元素、组分、事件或情况出现的情况和其不出现的情况。

术语“基本上由……组成”不等同于“包含”，并且指权利要求的指定材料或步骤，或者是指不会实质性地影响所要求保护主题的基本特征的材料或步骤。

术语“消化道”、“GI道”和“GI”在本申请中可以互换使用，并且指在兽医对象中摄取食物，消化食物以提取和吸收能量以及营养物质，和排除剩余废物的器官系统。通常认为GI道包括两个子部分：上GI道(在本申请中也称为“上GI”)包括口腔、咽、食道、胃和十二指肠，以及下GI道(在本申请中也称为“下GI”)包括小肠和大肠、空肠、回肠、结肠、盲肠、直肠、肛管和肛门。

术语“MPA活性剂”和“霉酚酸活性剂”在本申请中可以互换使用，并且指对对象产生生理或药效作用的MPA或基于MPA的成分(例如，本公开的兽医组合物的MPA或基于MPA的成分)。MPA活性剂包括MPA及其药学上可接受的盐、酯、前药、同系物、水合物或溶剂化物。在某些实施方式中，MPA活性剂包括霉酚酸钠。在某些实施方式中，MPA活性剂包括MMF。

如在本申请中所使用的，术语“代谢产物”指对象对药物完全或部分代谢的中间体或终产物。在药物部分或完全代谢后，“活性代谢产物”在机体中发挥生理作用(即，影响生理动态、过程或功能的变化，这些变化根据本领域公知的方法(如通过临床测定或通过临床或非临床观察)能够易于鉴定、确定或区分；生理作用的非限制性实例包括淋巴细胞计数减少、活性药剂或代谢产物在血清或尿液中的浓度增加或减少、腹泻、体重减轻或增加、皮疹、溃疡等)。“非活性代谢产物”几乎不产生或不产生生理作用。MPA主要通过尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)在消化道(GI)、肝脏和肾脏中通过葡萄糖醛酸结合反应(glucuronidation)代谢。通常认为主要代谢产物MPA葡糖醛酸苷(MPAG)是没有活性的。酰基MPAG(AcMPAG)是至少3种次要MPA代谢产物之一，其具有药理活性，并且还被认为引起GI中的不良副作用。可以根据本领域技术人员公知的方法和程序确定MPA及其代谢产物的水平，例如HPLC和EMIT(参见例如，Shipkova等，Clin.Chem.46(3):365-372(2000))。

如在本申请中所使用的，“生物利用度”指被吸收并因此可用于产生生理作用的药物的部分。可以通过对AUC进行定量测量生物利用度，例如通过使用标记的药物和质谱绘制血清浓度随时间变化的曲线。可以以“绝对生物利用度”或“相对生物利用度”来衡量生物利用度。

绝对生物利用度(F_abs)指当将以非静脉内剂型(例如，口服片剂)施用与相同药物静脉内施用比较时的生物利用度。可以通过比较非-i.v.和i.v.形式的AUC确定绝对生物利用度，并对各剂量进行校正：

F_abs＝(AUC_非静脉内/AUC_静脉内)*(剂量_静脉内/剂量_非静脉内)

相对生物利用度(F_rel)比较药物的两种不同剂型的生物利用度，比较各剂型的相对AUC并使用相对剂量将计算归一化：

F_rel＝(AUC_剂型A/AUC_剂型B)*(剂量_B/剂量_A)

如在本申请中所使用的，药效学(“PD”)指药物对对象的生化或生理作用。可以在剂量-应答关系或浓度-应答关系背景下描述PD，并且可以包括一系列所需的、不需要的或中性的作用，所述作用通过诸如以下机制产生：受体激动和下游作用产生的刺激或抑制作用，阻断或拮抗作用，稳定作用，交换、替代或累积物质(例如，糖原贮存)，赋予直接获益的化学反应或赋予直接有害的化学反应(例如，细胞毒性、诱变或刺激)。本申请针对MPA组合物及相关方法描述的PD值包括例如IMPDH的水平或活性(即，IMPDH的水平或活性降低，例如随着MPA水平的增加)，对给予MPA活性剂的兽医对象的毒性作用(例如，腹泻)，自身抗体水平或活性，细胞因子释放速率或水平，炎症以及B或T淋巴细胞计数或功能。

“自身免疫性疾病”和“自身免疫性病症”在本申请中可以互换使用，并且指对象的免疫系统异常识别对象自身的细胞或组织为抗原性并且产生针对对象的细胞或组织的炎症应答的病况。在某些实施方式中，根据本公开的组合物和方法用于治疗(即，一种或多种)自身免疫性疾病，例如乳糜泻、1型糖尿病、格雷夫氏病、炎性肠病、多发性硬化症、银屑病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、白塞氏病、寻常性天疱疮、难治性不完全系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎、免疫球蛋白A肾病、小血管炎、硬皮病(系统性硬化症或SSc)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、重症肌无力、银屑病、特应性皮炎、恶性贫血、白癜风、自身免疫性溶血性疾病、肾小球肾炎、免疫性细胞减少症、脑膜脑脊髓炎、表皮下水疱性自身免疫性疾病、免疫性大疱病、皮肤血管炎、复发性多形性红斑、结节性红斑、扁平苔藓、皮肤克罗恩病、肉样瘤病、与兽医移植或植入手术(例如，组织移植、移植物或装置植入物)相关的免疫反应，包括移植物抗宿主病(HvGD)和其他形式的植入排斥、肝炎和坏疽性脓皮病。根据本公开方法和组合物可以治疗的血液病症或疾病包括但不限于再生障碍性贫血、免疫介导的溶血性贫血和免疫介导的血小板减少症。

如在本申请中所使用的，“治疗”和“改善”指预防，减少兽医对象(即，具有消化道和具有一种或多种IMPDH或执行IMPDH活性的相关酶的非人哺乳动物。根据本公开的方法和组合物的兽医对象可以但不一定必须由兽医或其他兽医护理专业人员进行评估、诊断或治疗)疾病、病症或病况的可能性或医疗管理。在通常情况下，以足以激发治疗或预防获益的量给予兽医对象包含本公开的改善释放的兽医组合物的剂量或治疗方案。治疗性或预防性/预防获益包括但不限于：改善临床结局；减少或减轻与疾病相关的症状；降低症状的发生频率；改善生活质量；延长无疾病状态；减轻疾病程度；稳定疾病状态；延迟疾病发病、进展；缓解；存活；延长生存期；或其任意组合。

本公开的MPA活性剂或改善释放的兽医组合物的“治疗有效量”或“有效量”指以具有统计学显著性的方式足以产生治疗作用的量，所述治疗作用包括：改善临床结局；减少或减轻与疾病相关的症状；减少症状的出现；改善生活质量；延长无疾病状态；减轻疾病程度；稳定疾病状态；延迟疾病发病、进展；缓解；存活；延长生存期。例如，根据本公开的组合物和方法的MPA活性剂的治疗有效量可以是这样的量：该量足以降低或延迟(发病)酶IMPDH的血液水平或降低或延迟IMPDH的酶促活性，以降低B或T淋巴细胞的数量、增殖或活性，以预防、减少或改善兽医对象的炎症应答，以治疗自身免疫性疾病或病症，或者以预防、减轻在细胞、器官或组织移植或植入过程中出现的排斥的严重程度或延迟其发病。当涉及单独施用的单独的活性成分时，治疗有效量指该单独成分的作用。当涉及联用时，治疗有效量指产生治疗作用的联用的活性成分的量，无论是顺序、同时期(contemporaneously)或是同时(simultaneously)施用。

如在本申请中所使用的，“调节”指通过直接或间接的方式减少、提高、加快、延迟或阻止某件事发生，或增加或降低被调节事件发生的强度或效率。在调节IMPDH活性的特定背景下，调节指降低功能性IMPDH的水平，延迟或降低IMPDH介导的IMP向XMP转化的效能、效率或强度，或其任意组合。

术语“改善释放”用于描述给药后以不同于速释的方式改变药物释放时间和/或速率的产品。改善释放的剂型是选择药物释放的时程和/或位置特征以实现速释剂型(如速释片剂或混悬剂或者其他迅速溶解或释放的剂型)所不能提供的治疗性或便利性目的的剂型。改善释放的口服药物制剂包括例如延长释放制剂(与以速释(常规)剂型提供的相同药物相比，其能够降低给药频率，例如控释、持续释放和长效制剂)；延迟释放制剂(其在给药后某一时间而不是立即释放可检测量的药物，例如肠溶包衣阿司匹林和其他NSAID产品)；靶向释放制剂(在作用的预计生理部位或附近释放药物，并且可能具有速释或延长释放的特征)；和口蹦片(ODT)，其在口服施用后在唾液中迅速崩解。术语“改善释放”、“控释”、“持续释放”、“延长释放”、“长效”、“靶向释放”和“延迟释放”在本申请中可以互换使用，指以不同于施用后速释的方式释放所给予的MPA活性剂。如在本申请中所使用的，“速释”剂型是指配制为在施用后立即释放或使活性成分可用的任何剂型。在某些实施方式中，可以将根据本公开的改善释放的组合物制剂或施用以达到一种或多种以下特征：在施用后一定时间或施用后一定时间内释放MPA活性剂；在特定生理条件下(例如，pH，温度)释放MPA活性剂；基于已知的、估计的或预测的消化、循环或代谢速率在机体特定部分内释放MPA活性剂；与另一试剂一起、在其施用时、或在其施用后释放MPA活性剂；以预定的量；释放MPA活性剂持续预定的时间量；根据特定的释放曲线释放MPA活性剂；或其任意组合。

如在本申请中所使用的，“改善释放层”指施用后使MPA活性剂在预定时间或时间段，或以预定速率，或者以其他方式沿释放曲线(其不包括MPA活性剂的速释)释放的材料的层。适于形成改善释放层的材料的实例包括各种聚合物，如纤维素聚合物或丙烯酸酯聚合物、乙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素聚合物、用于改善释放的尤特奇聚合物、聚(丙烯酸乙烯酯)(PVA)聚合物(例如，

系列)。改善释放层可以以单层形式应用。在特定的实施方式中，改善释放层包括多层，其任选地彼此同心安置。

如在本申请中所使用的，“保护层”指当摄入的组合物通过胃部时提供保护以防止其降解或溶解的材料的层。

如在本申请中所使用的，术语“药学上可接受的赋形剂或载体”或“生理学上可接受的赋形剂或载体”指无活性生物相容性载剂，在本申请中对其进行了更加详细的描述，其适于向人类或非人哺乳动物对象施用并且通常认为是安全的或不会引起严重不良事件的。在某些实施方式中，药学上可接受的载体包括将给予对象的食物或液体。例如，改善释放的兽医组合物可以洒在、喷洒或以其他方式加入将被兽医对象消耗的食物、“乐趣物(treats)”或水，或者与这些组合。在某些其他实施方式中，可以由食物携带(即，包含在食物中，与食物组合或涂覆在食物上)本公开的MPA组合物。本申请描述了可用于实施此类实施方式的饲喂方案。

如在本申请中所使用的，“具有统计学意义”指当使用Students t-检验计算时p值小于等于0.050，表明从统计学上讲被测量的特定事件或结果为偶然发生的可能性不大。

MPA，MPA活性剂及其药理学

霉酚酸(C₁₇H₂₀O₆；“MPA”)是酶肌苷5’-一磷酸脱氢酶(IMPDH)的非核苷、非竞争性、可逆抑制剂，其催化肌苷5’-一磷酸(IMP)合成黄嘌呤一磷酸(XMP)。IMP→XMP是核酸合成、包括B和T淋巴细胞在内的细胞增殖和分化所需的鸟嘌呤核苷酸从头合成的限速步骤。通过抑制IMPDH活性，MPA起到免疫抑制剂的作用。参见例如，Arns,W.,TransplantationProceedings 39:88-93(2007)，其公开的内容和方法全部通过引用并入本申请。MPA具有式I所示的下述基本结构：

IMPDH具有两个同工酶IMPDH1和IMPDH2。前者在大多数细胞类型中表达，而后者在活化的淋巴细胞中占主导地位(参见例如，Winnicki et al.,Pharmacogenomics J.10(1):70-6(2009))。MPA对IMPDH2的抑制作用可达对IMPDH1的抑制作用的4至5倍，因此其对活化的淋巴细胞而非其他细胞具有更有效的细胞生长抑制作用。

已将MPA制备为霉酚酸酯(MMF；作为骁悉

在美国批准在人体内使用)和Na.MPA(米芙)在人体内作为免疫抑制辅助剂使用。

与霉酚酸酯治疗(即，涉及使用MPA或其活性剂的任何单次或多次治疗方案，如本申请中所定义的)相关的不良药物反应(≥1％的患者)包括腹泻、恶心、呕吐、关节痛、感染、白细胞减少症和贫血。霉酚酸钠通常还与疲乏、头痛、咳嗽和/或呼吸问题相关。静脉内(IV)施用MMF通常还与血栓性静脉炎和血栓形成相关。与MMF的使用相关的不良效应(0.1-1％的对象)包括食道炎、胃炎、消化道出血和/或侵袭性巨细胞病毒(CMV)感染。较不常见地，发生肺纤维化或出现各种肿瘤(例如黑色素瘤、淋巴瘤和其他恶性肿瘤)，MMF相关肿瘤可能发生的频率为1/20至1/200，其取决于肿瘤类型，在皮肤上的肿瘤是最常见的部位。还有纯红细胞发育不全(PRCA)病例的报道。

可以用药理学术语描述本公开的组合物和方法，包括药代动力学(“PK”)和药效学(“PD”)。如本领域中所理解的，药代动力学与向生物体施用的药物的命运相关，例如浓度、代谢、分布、吸收、半衰期或排泄。PK的非限制性指标包括C_max(在机体特定隔室或检测区域中药物的最大血清浓度)，T_max(观察到C_max的时间)，C_min(最小或谷浓度)，T_min(观察到C_min的时间)，T_1/2(药物或代谢产物的半衰期，即药物浓度降至其原始值一半所需的时间，可以使用消除终末相的一个或多个点计算)，消除速率常数“k”(使用终末相对数域的一个或多个浓度计算的斜率)和AUC(“曲线下面积”；血浆中药物浓度随时间变化的曲线图中的定积分)。AUC表示给定剂量或给药方案的随时间的总药物暴露量，并且可以在给药时开始计算以及当血浆浓度最小时结束，或者可以在选定的时间点进行测量并由此计算。

针对MPA组合物和相关方法，本申请所述的PK值包括例如[MPA](霉酚酸药物的浓度)、[MPAG]和[酰基-MPAG]。可以以任意适宜的单位报告血清或血浆药物浓度，如ng/mL、mg/kg、μg/mL、μg/L等等。可以以任意适宜的单位报告随时间的浓度变化，如μg*h/L或ng*h/mL。AUC可以用于报告随给定时间间隔(AUC_t)或未受特定时间间隔约束(AUC_inf)的浓度。

MPA PK的其他指标包括例如药物:代谢产物的比率，例如含有MPA的药剂(例如，速释剂型或本公开的改善释放的剂型)施用后获得的药物:代谢产物的比率。在某些实施方式中，并且如本申请所进一步讨论的，与来自给予速释参照剂量MMF的参照兽医对象的参照MPA:代谢产物比率相比，本公开的组合物和方法用于在兽医对象中产生更高(即，增加)的MPA:代谢产物比率，从而降低一种或多种MPA代谢产物在(非参照)兽医对象中的暴露量。此前在人类和大鼠中进行的研究表明MPA:代谢产物比率在IV或口服施用后是相似的。通过IV给药，绕过了肠和肝脏首过代谢。结果，预计基于IV施用的MPA:代谢产物比率更高。然而，不希望受到理论的束缚，肠肝循环可以使口服和IV给药方法之间的MPA:代谢产物比率相等。而且，随着时间的推移，肝脏和消化道内葡萄糖醛酸结合反应和外排的变化可能导致MPA代谢产物形成的差异。

而且，在一些实施方式中，目前公开的方法和组合物可以具有所需的MPA药效学。例如，在一些实施方式中，本公开目前公开的方法和组合物可以用于例如在兽医对象中调节IMPDH活性、减少淋巴细胞计数、免疫抑制或调节炎症应答。

治疗和施用方法

本申请公开的组合物和方法可以用于治疗自身免疫性疾病，包括淋巴细胞疾病在内的血液病症，或者(或通过)天然或转基因器官、组织或细胞的移植或植入排斥，如在组织或细胞同种异体或异种移植物中。例如，在某些实施方式中，目前公开的方法和组合物用于治疗乳糜泻、1型糖尿病、格雷夫氏病、炎性肠病、多发性硬化症、银屑病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、白塞氏病、寻常性天疱疮、难治性不完全系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎、免疫球蛋白A肾病、小血管炎、硬皮病(系统性硬化症或SSc)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、重症肌无力、银屑病、特应性皮炎、恶性贫血、白癜风、自身免疫性溶血性疾病、肾小球肾炎、免疫性细胞减少症、脑膜脑脊髓炎、表皮下水疱性自身免疫性疾病、免疫性大疱病、皮肤血管炎、复发性多形性红斑、结节性红斑、扁平苔藓、皮肤克罗恩病、肉样瘤病、与兽医移植或植入手术(例如，组织移植、移植物或装置植入物)相关的免疫反应，包括移植物抗宿主病(HvGD)和其他形式的植入排斥、肝炎和坏疽性脓皮病。根据本公开方法和组合物可以治疗的血液病症或疾病包括但不限于再生障碍性贫血、免疫介导的溶血性贫血和免疫介导的血小板减少症。

在本申请公开的任意实施方式中，一种方法可以包括施用治疗有效量的本公开的改善释放的兽医组合物。

MPA活性剂的改善释放

在实施方式中，目前公开的方法和组合物提供了MPA活性剂在兽医对象中的改善释放。在本申请所述方法的某些实施方式中，与不偏向下GI道的递送相比，MPA活性剂向兽医对象下GI道的递送或偏向递送增加了MPA:代谢产物比率。在此类实施方式的实例中，与口服施用MMF或肠溶包衣Na.MPA相比，发现结肠内施用Na.MPA和口服施用延长释放肠溶包衣Na.MPA制剂产生更高的MPA:代谢产物比率。此类实施方式可以在剂量效率(通过增加可生物利用的MPA的量)、持续有效性(减缓MPA活性剂随着时间的推移的释放，靶向MPA吸收较高的区域并降低MPA代谢(即，下GI))以及降低与不需要的副作用相关的活性代谢产物(例如，AcMPAG)的暴露量方面提供优势。此外，并且不希望受到理论的束缚，施用速释剂型后，血浆中[MPA]突然达到“尖峰(spike)”后通常是[MPA]的急剧下降；即C_max和C_min在时间上接近。这样的释放曲线可能导致毒性，MPA的生物吸收效率低，或者无法将MPA递送到目标位点(例如，下GI)。

因而，获得更一致的MPA释放曲线(例如，T_max和T_min在时间上进一步分离，[MPA]逐渐变化，AUC增加或其任意组合)可能是更有利的。因此，在一些实施方式中，以相对于速释MPA剂型在兽医对象中有效提供改善的MPA释放曲线的量施用改善释放的兽医组合物(例如，通过与参照速释剂型相比在更长的时间段内提供MPA活性剂的持续释放，或通过提供MPA改善的生物利用度)。在某些实施方式中，本申请公开的组合物包括延迟释放特征。例如，在一些实施方式中，可以通过在与给予参照速释剂型后出现的C_max相比更晚的时间点出现的C_max表征延迟释放型的改善释放剂型。在进一步的实施方式中，所施用的MPA活性剂可以以这样的速率释放，即在延长的时间段内(例如，约4至约24小时或甚至更长时间)，MPA活性剂的总血清或血液水平保持或高于给药前的水平。在某些实施方式中，根据本公开的组合物在兽医对象的GI道中具有MPA活性剂的改善的释放，例如优先或主要在下GI道中释放。

在一些实施方式中，一种方法包括通过口服施用以改善释放形式将霉酚酸(MPA)活性剂递送至兽医对象的下消化道。在某些实施方式中，将根据本公开的改善释放的兽医组合物制成将其口服施用后优先在兽医对象的消化道中释放MPA活性剂。优选地，包含在改善释放的兽医组合物中的至少一部分(例如，大部分)MPA活性剂被递送至下GI道(例如，大肠)并在其中释放。例如，在一些实施方式中，与上GI道相比，包含在改善释放的兽医组合物中的更多(例如，更大比例)MPA活性剂在下GI道中释放。在治疗犬兽医对象的某些实施方式中，例如，大部分MPA活性剂(即，从至少约50.1％至100％)在下GI道中释放。在某些实施方式中，将改善释放的兽医组合物制成提供至少一些MPA活性剂在上GI道中释放。

在目前公开方法的一些实施方式中，MPA活性剂根据诸如以下示例性时间表的时间表在兽医对象中释放：

施用后的小时数(单次给药)	释放的MPA活性剂％
		0.5	约0.0至约1.0
2	约3.0至约10.0
		2.5	约10.0至约30.0
3	约15.0至约40.0
		4	约25.0至约55.0
6	约40.0至约75.0
		7	约50.0至约80.0
10	约60.0至约90.0
		14	约70.0至约100

在某些实施方式中，MPA活性剂根据诸如以下示例性时间表的时间表释放：

施用后的小时数(单次给药)	释放的％NaMPA
		0.5	高达0.9
1	高达3.2
		2	高达7.9
2.5	高达25.1
		3	高达35.8
4	高达51.3
		5	高达61.4
6	高达67.9
		7	高达72.8
8	高达76.2
		10	高达81.5
14	高达86.9

施用后的小时数(单次给药)	释放的％NaMPA
		0.5	高达0.0
1	高达1.5
		2	高达4.9
2.5	高达13.2
		3	高达21.4
4	高达31.7
		5	高达40.7
6	高达48.0
		7	高达54.0
8	高达59.1
		10	高达66.1
14	高达76.1

可以根据标准技术确定释放速率或时间表，例如，溶出法，包括将改善释放的兽医组合物暴露于pH 1.2的介质中2小时，随后将改善释放的兽医组合物转移至pH 6.8的介质中，并在周期性间隔(例如，在0.5、1、2、2.5、3、4、5、6、7、8、10和14小时)分析介质等分试样中MPA活性剂的存在情况，如在实施例1中所进行的。此外，可以将已知的HPLC和RP-HPLC法用于分析MPA活性剂的存在情况；参见例如在Renner等，Analytical Chemistry 73(1):41-6(2001)或Reddy等，Asian Journal of Chemistry 25(9):4788(2013)中所述的RP-HPLC法，其方法通过引用并入本申请。还可以根据Scheubel等，Dissolution Technologies,2012年2月,pp.52-58(可以在dissolutiontech.com/DTresour/201202Articles/DT201202_A06.pdf在线获取)中教导的技术确定溶出速率，该技术的全部内容也通过引用并入本申请。

还可以通过建立体外-体内相关性(IVIVC)将体外和体内PK参数建立起关联。可以使用例如体外溶出和体内吸收建立IVIVC(通过比较给药量与血清中存在的药物浓度来测量)。IVIVC相关性(例如，水平A、水平B、水平C)及其相关方法学是本领域公知的，并且例如在Gonzalez等，Dissolution Technologies,2015年5月,pp.35-41中对其进行了教导(可以在dissolutiontech.com/DTresour/201505Articles/DT201505_A05.pdf在线获得，并且通过引用并入本申请)。

可以使用市售软件(例如，WinNonlin v.6.4)确定PK参数。

用于实现某些MPA药代动力学的方法

在一些实施方式中，一种方法包括向兽医对象施用改善释放的组合物，施用后，在一段时间内兽医对象的[MPA]AUC与在相同时间段内施用速释制剂的参照兽医对象的[MPA]AUC相比增加至少约1.5倍、至少约2倍、至少约2.5倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约10倍或者更多。

在某些实施方式中，一种方法包括向兽医对象施用含有MPA活性剂的改善释放的兽医制剂，施用后，兽医对象的血浆[MPA]C_max低于施用参照速释MPA制剂的参照兽医对象的C_max血浆[MPA](例如，低于约90％、低于约80％、低于约70％、低于约60％、低于约50％、低于约40％或更低)。在特定的实施方式中，一种方法包括向兽医对象(例如，进食对象，如本申请所述的)施用本公开的改善释放的组合物，施用后，兽医对象的C_max血浆[MPA]低于约2500ng/nL、低于约2000ng/mL或低于约1500ng/mL。在所述方法的某些此类实施方式中，向兽医对象施用本公开的改善释放的组合物，并且在施用后的T_max后至少约3小时、至少约4小时或至少约5小时保持血浆[MPA]高于约500ng/mL。

此外，本公开提供了用于增加MPA活性剂在兽医对象中的暴露量的方法，其中所述方法包括向对象口服施用根据本公开的改善释放的兽医组合物。作为背景，认为MPA的体内有效性受到在肝脏中酚羟基上的氧的葡糖醛酸结合反应的限制。不希望受到理论的束缚，据信本公开的改善释放的兽医组合物的实施方式在给予本申请所述的改善释放的兽医组合物的兽医对象(例如，犬或猫)中避免了至少一些首过肠代谢，从而降低了MPA的葡糖醛酸结合反应的比率。在某些实施方式中，因此，所述组合物改善了MPA活性剂在体内的有效性，并且在特定的实施方式中，降低了实现治疗获益所需的剂量或给药频率。

在所述方法的某些实施方式中，兽医对象具有与从给予霉酚酸酯(MMF)速释参照口服剂量后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比升高的MPA:代谢产物比。在实施方式中，代谢产物包括MPAG、AcMPAG或者这两者。在某些实施方式中，MPA:代谢产物比率包括MPA:MPAG、MPA:AcMPAG或者这两者。在一些实施方式中，代谢产物包含MPAG，并且MPA:MPAG比率(即，在对象中的绝对比率)为约1:1至约10:1。在特定的实施方式中，MPA:MPAG比率为约1.5:1至约5:1，例如约2:1。在其他实施方式中，代谢产物包含AcMPAG，并且MPA:AcMPAG比率为约50:1至约250:1。在特定的实施方式中，MPA:AcMPAG比率为约100:1至约200:1，例如约150:1。在一些实施方式中，MPA:MPAG比率为约1:1至约10:1且MPA:AcMPAG比率为约50:1至约200:2。在特定的实施方式中，MPA:MPAG比率为约1.5:1至约5:1，例如约2:1，并且MPA:AcMPAG比率为约100:1至约200:1，例如约150:1。

在任何公开的实施方式中，一种方法包括施用本公开的改善释放的兽医组合物。

用于递送MPA活性剂的方法

对于兽医对象的疾病管理而言，各种药物施用途径均是可能的，包括例如静脉内、口服、结肠内和皮下递送方法。然而，注射和结肠内方法可能很耗时，需要兽医护理专业人员的指导或帮助，并且重要的是，可能使兽医对象非常不舒服和紧张。因而，在某些实施方式中，本公开的方法和改善释放的兽医组合物涉及口服施用MPA活性剂。在某些实施方式中，当对象处于禁食状态或进食状态时，可以通过灌胃、喷雾或饮用水给予改善释放的兽医组合物，或者与食物一起提供给对象。例如，在某些实施方式中，禁食状态可以包括其中兽医对象在不晚于给药前约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、14、16、18、20、24小时或更长时间进食，然后任选地不进食直至给药后约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、14、16、18或24小时的状态。进食状态可以包括其中兽医对象在临给药前进食或给药前不超过1小时进食的状态。在某些实施方式中，改善释放的兽医组合物混合在食物中，洒在食物上或以其他方式与食物一起提供，以使得所述组合物被兽医对象摄入。

在一些实施方式中，采用多剂量方案(例如，采用NID、TID、QID或PRN方案)向对象施用组合物。将理解的是，可以根据例如对象的健康状态，对MPA需求的严重程度或进展，体型、体重、年龄、代谢、活性(activity)水平或可以决定对象对MPA活性剂需求的其他因素确定所施用的总剂量、释放的MPA活性剂的量和施用频率。

改善释放的兽医组合物

根据本公开的方法的任意实施方式可以涉及向兽医对象施用一种或多种本申请所述的组合物。在某些实施方式中，本公开的改善释放的兽医组合物可以单独地或以任意组合形式被包含在片剂、胶囊、浆液(slurry)、糖锭剂、混悬剂、咀嚼片或适于口服施用的其他形式中。例如，如图3中所示，胶囊300包含在胶囊300中分散或混合的多种改善释放的药物组合物100和200。

向兽医对象递送MPA活性剂可以包括施用单一类型的改善释放的兽医组合物或者可以替代地包括施用多种类型的改善释放的兽医组合物。例如，可以施用具有不同释放特征的改善释放的兽医组合物的混合物，以达到所需的释放曲线。因而，在某些实施方式中，可以施用具有不同尺寸的核心，或者存在或不存在保护层，或者其他特征的多种改善释放的兽医组合物，以满足兽医对象的需求。这种灵活性有利地允许选择或校正针对特定兽医对象(例如，个体动物)或针对兽医对象亚群(例如，犬品种)的方法，因为根据诸如特定体型、活性、水平、应答性、总体健康状况的特征以及兽医对象的其他特定特征可能是必要的。

在某些实施方式中，改善释放的药物组合物(图1，100)包含核心和MPA活性剂。在某些此类实施方式中，改善释放的组合物100的核心102包含固体支持核心(例如，糖小珠、糖球、Nonpareil小珠、微晶纤维素小珠、二氧化硅小珠、碳酸钙小珠、酒石酸小珠、甘露醇小珠、乳糖小珠、淀粉小珠或其他药学上可接受的核心)，在其上可以安置MPA活性剂和本申请所述的其他层。在一些实施方式中，核心102包含安置在核心102的至少一部分之上(例如，安置在核心102的一部分或全部之上)的活性剂层104。可以使用本领域公知的方法将MPA活性剂安置在核心102之上，例如喷涂、挤出、悬浮成层、干粉成层、喷雾造粒、直接制粒、浸涂、成层、喷涂、沉积方法等(参见例如，由Glatt GmbH,Binzen,Germany,www.glatt.com概述的方法)。

在替代实施方式中，如图2中所示，核心202是挤出的核心，其中将MPA活性剂分散或以其他方式与核心202结合。可以根据例如美国专利号4,808,413和5,049,394中所述制备挤出的核心(其各自公开的内容均通过引用整体并入本申请)，并且可以包括粘合剂-增塑剂(例如，非亲脂性粘合剂-增塑剂(如微晶纤维素))、赋形剂(例如，基于淀粉的赋形剂)或粘合剂。可以如Missaghi等“Investigation of Venlafaxine HCl Release fromExtruded and Spheronized Beads Coated with Ethylcellulose Using Organic orAqueous Coating Systems,”Controlled Release Society Annual Meeting July 2008中所述制备其他示例性挤出的核心，出于所有目的其公开的内容通过引用整体并入本申请。

例如，在某些实施方式中，挤出的核心202包含约50wt％至约90wt％的MPA活性剂(例如，霉酚酸钠)，约10wt％至约30wt％或约15wt％至20wt％的挤出/滚圆助剂(如微晶纤维素)。如在本申请中所使用的，可以将组合物中物质的量描述为“以重量计”、“以重量百分比计”或“wt％”，其指物质的重量相对于改善释放的兽医组合物中单个组合物(例如，单个包衣核心)的重量，而非相对于组合形式的改善释放的兽医组合物(例如，含有多个包衣核心的胶囊、片剂、浆液或糖锭剂)的总重量。在某些实施方式中，挤出的核心202还包含以下的一种或多种：约1wt％至约10wt％，优选地约2wt％至约5wt％的粘合剂(例如，羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、预胶化淀粉、乙基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮)；改善释放的赋形剂，例如，羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、丙烯酸聚合物、羟乙基纤维素(HEC)、乙基纤维素(EC)，可以将其掺入小珠中或作为包衣应用；填充剂，例如，乳糖、麦芽糊精、甘露醇、山梨醇、磷酸氢钙等；以及超级崩解剂，例如，交联聚(乙烯基吡咯烷酮)(PVP)、羧甲基淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠等。

在具有挤出的核心202的实施方式中，至少一部分MPA活性剂可以分散、溶解、混合或以其他方式分布在整个核心202中。例如，MPA活性剂可以与用于生产挤出核心的各种聚合物和其他赋形剂共同溶解，然后通过挤出机以形成所需尺寸的小珠，随后进行干燥。例如在美国专利号5,049,394中描述了适于制备根据目前公开的组合物的挤出核心的方法，其方法通过引用并入本申请。

核心102、202的尺寸对于确保将MPA活性剂充分递送至兽医对象可能是重要的。例如，在某些情况下，据报道犬科动物在下GI中不易通过某些尺寸以上的物体。因此，在某些实施方式中，核心102、202具有约0.5mm至约10mm的直径。例如，在一些实施方式中，核心102、202的直径可以选自直径约0.5mm至约9mm、约1mm至约8mm、约1mm至约7mm、约1mm至约6mm、约1mm至约5mm、约2mm至约5mm、约2mm至约4mm,或约1mm、约2mm、约3mm、约4mm、约5mm、约6mm、约7mm、约8mm、约9mm或者约10mm。在某些实施方式中，核心102、202的直径小于约5mm，或者是约2mm至约4mm。例如，在一些兽医对象中，小于约5mm的核心直径使得组合物易于通过兽医对象的胃部，特别是通过犬的胃部并且进入上消化道然后进入下消化道以进行递送。对于一些兽医对象而言，具有直径大于约5mm核心的组合物可能在胃中保留不希望的较长时间，从而影响MPA活性剂的靶向递送。

此外，某些兽医对象(如犬)胃部的压碎强度可能显著高于人胃的压碎强度(约1.5N(人)对比约3.2N(犬))；(参见例如，Kamba等，Int.J.Pharmaceutics 228(1-2):209-217(2001))。因而，在特定的实施方式中，较小尺寸的核心(如直径小于约5mm的核心)可能防止改善释放的兽医组合物在胃中被压碎，被压碎可能导致MPA活性剂在兽医对象的胃中提前(并且因此是无效的和可能是有害的)释放。

在某些实施方式中，MPA活性剂以约20wt％至约90wt％存在于改善释放的兽医组合物中。在某些实施方式中，MPA活性剂的量可以选自占组合物的约20wt％至约80wt％、约30wt％至约80wt％、约30wt％至约70wt％、约30wt％至约60wt％、约30wt％至约50wt％、或约20wt％、约25wt％、约30wt％、约35wt％、约40wt％、约45wt％、约50wt％、约55wt％、约60wt％、约65wt％、约70wt％、约75wt％、约80wt％、约85wt％或者约90wt％。

在特定的实施方式中，本公开的改善释放的兽医组合物100、200还包含安置在核心102或202的至少一部分之上的改善释放层108、208。在其中活性剂安置在核心102的至少一部分之上作为活性剂层104的实施方式中，改善释放层108可以安置在活性剂层104的至少一部分之上。在其中核心202是包含至少一部分活性剂的挤出核心的实施方式中，改善释放层208安置在核心202的至少一部分之上。

因此，在某些实施方式中，改善释放层108、208包含约5wt％至约50wt％、或约10wt％至约40wt％、或约20wt％至约30wt％、或约5wt％、约10wt％、约15wt％、约20wt％、约21wt％、约22wt％、约23wt％、约24wt％、约25wt％、约26wt％、约27wt％、约28wt％、约29wt％、约30wt％、约31wt％、约32wt％、约33wt％、约34wt％、约35wt％、约36wt％、约37wt％、约38wt％、约39wt％或者约40wt％的本申请所述的聚合物。在某些实施方式中，聚合物可以是乙基纤维素聚合物。在更进一步的实施方式中，改善释放层108、208可以包含可溶性组分以改善其渗透性。可以通过改变用于形成改善释放层的一个或多个聚合物层的厚度(即，通过改变聚合物层的重量)或者通过加入孔形成剂以影响改善释放层的渗透性进一步调节MPA活性剂的释放。

在本申请所述的任意实施方式中，改善释放的兽医组合物100、200可以进一步包含安置在改善释放层108、208的至少一部分之上的保护层110、210。在某些实施方式中，对保护层110、210进行选择或设计以延迟MPA活性剂的至少一部分的释放直至组合物到达下GI道。

当使用时，保护层110、210可以是pH敏感层，其在胃酸pH下(例如，在犬中pH大约为1.2至4.5)能够保持完整性，但是一旦到达小肠或大肠则至少部分降解(在犬中pH大约为4至8)。在某些实施方式中，保护层110、210在pH高于约6.0时溶解。应当理解的是，保护层的pH敏感性，以及组合物的总体规格和释放特征可以根据待治疗的兽医对象的生理特征而改变(例如，大型犬对比小型犬、犬对比猫、牛等)。用于形成保护层110、210的适宜材料的实例包括肠溶性聚合物，如基于甲基丙烯酸酯的聚合物如

L或

S聚合物、邻苯二甲酸乙酸纤维素、琥珀酸乙酸纤维素、HPMC邻苯二甲酸酯、HPMC乙酸琥珀酸酯、海藻酸钠、玉米朊、聚乙烯醋酸邻苯二甲酸酯(PVAP)、虫胶、甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物(Kollicoat MAE)及其混合物。在进一步的实施方式中，可以对改善释放层108、208和保护层110、210进行设计，以提供MPA活性剂的定时释放而不是pH依赖性释放，从而其能够使组合物完整地通过胃部并根据需要在小肠和/或大肠释放(至少一部分)MPA活性剂。

在进一步的实施方式中，本公开的改善释放的兽医组合物可以包含密封包衣106、206。如图1的示例性实施方式中所示的，在改善释放的兽医组合物100中，密封包衣106将核心102和活性剂层104与改善释放层108分隔开。在图2所示的示例性实施方式中，改善释放的兽医组合物200包含密封层206，其将改善释放层208与核心202分隔开，所述核心202是含有至少一些(即，全部或少于全部)MPA活性剂的挤出核心。在某些实施方式中，密封层106、206可以用于将MPA活性剂与改善释放层108、208部分或完全分隔开，从而减少或消除改善释放层或活性剂的相互作用和降解。然而，在其中施用非水性包衣方法将活性剂层104施加到核心102上的实施方式中，降解可能不再是问题，并且因此可去除密封层106或降低其厚度。在密封层106、206中使用的示例性组分包括各种纤维素聚合物，包括羟丙基甲基纤维素、聚(乙烯醇)(Opadry AMB,Kollicoat)、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟乙基纤维素、欧巴代(Opadry)系列等。

在本申请所述的任意实施方式中，改善释放的兽医组合物可以进一步包含缓冲性试剂(buffering agent)或缓冲剂(buffer)以保护MPA活性剂使其免于被胃酸降解。因此，可以将缓冲剂加入核心102、202或核心102周围的活性剂层104。在挤出核心202的情况下，可以将缓冲剂加入核心202或加入核心202周围的层206、208、210，以提供缓冲并维持MPA活性剂的完整性和活性。在本申请所述的组合物中使用的示例性缓冲剂包括但不限于磷酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂和乙酸盐缓冲剂。

因此，在某些实施方式中，MPA活性剂在改善释放的组合物中被施用给兽医对象，所述改善释放的组合物包括：(a)直径小于约10mm的核心；(b)安置在所述核心的至少一部分之上并且包含所述MPA活性剂的活性层；(c)安置在所述活性层之上的密封包衣；和(d)安置在密封包衣层之上并且包含所述改善释放的兽医组合物的约5wt％至约50wt％的改善释放层，其中所述MPA活性剂占所述改善释放的兽医组合物的约20wt％至约90wt％并且所述改善释放层占所述改善释放的兽医组合物的约5wt％至约50wt％。在替代实施方式中，MPA活性剂在改善释放的组合物中被施用给兽医对象，所述改善释放的组合物包括：(a)直径小于约10mm的挤出的核心；(b)至少部分地安置在所述核心内的所述MPA活性剂；(c)安置在所述MPA活性剂和所述核心之上的密封层；和(d)安置在所述密封包衣层之上的改善释放层，其中所述MPA活性剂占所述改善释放的兽医组合物的约20wt％至约90wt％并且所述改善释放层占所述改善释放的兽医组合物的约5wt％至约50wt％。

在本申请公开的任意实施方式中，改善释放层可以包含纤维素聚合物、丙烯酸酯聚合物、乙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素聚合物、聚(丙烯酸乙烯酯)(PVA)聚合物或其任意组合。在某些实施方式中，改善释放层占组合物的约15wt％至约35wt％。在某些实施方式中，改善释放层可以包含乙基纤维素，如以水性乙基纤维素速率控制聚合物的形式。可以以提供合适的速率控制膜的任何方式应用改善释放层。例如，粉末包衣可用作改善释放层的沉积载剂。可以使用任意适宜的分散产品，例如Surelease(Colorcon,Harleysville,PA,USA)，或者本领域公知的其他产品和材料。

在某些实施方式中，改善释放层可以包含乙基纤维素，其可以包含水性乙基纤维素速率控制聚合物。在某些实施方式中，改善释放层包含约10wt％至约30wt％的甲基丙烯酸酯聚合物，其可以是尤特奇聚合物。在某些实施方式中，甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇RS100和RL100的一种或两种。当存在尤特奇RS100和RL100两者时，在特定的实施方式中，它们可以以约90:10的比例组合。或者，通过使用任何聚合物共混物，可以使用任何所需的聚合物比率，使用公知技术来产生具有所需的释放曲线的组合物。

在本申请公开的任意实施方式中，改善释放的兽医组合物可以进一步包含安置在改善释放层之上的保护层。例如，可以使用一种或多种尤特奇L系列(Evonik,Essen,DE)的聚合物(如L100)，以形成保护层。在某些实施方式中，保护层占组合物的约8wt％至约15wt％。在其中组合物包含挤出核心的某些实施方式中，组合物可以包含约50wt％至约90wt％的MPA活性剂，以及可以任选地进一步包含以下的一种或多种：约10wt％至约30wt％的挤出助剂；约1wt％至约10wt％的粘合剂；释放赋形剂；填充剂和超级崩解剂。

在本申请所述的任意实施方式中，改善释放的兽医组合物可以进一步包含缓冲剂以便影响MPA活性剂在某些pH条件下的稳定性或释放。

在本申请公开的任意实施方式中，MPA活性剂可以包含霉酚酸钠。

在某些实施方式中，改善释放的兽医组合物被包含在可溶性片剂、小型片剂、可溶性小型片剂、胶囊、糖锭剂、浆液(slurry)、小药囊(sachet)、咀嚼片、口腔或舌下可溶性薄膜或条带、混悬剂或其任意组合中。

应当理解的是，可以根据例如兽医对象的生理特征(例如，体型、GI长度、消化率、消化pH、胃压碎强度)，兽医对象的健康状态(例如，需要治疗的紧迫性和强度)和其他因素向兽医对象施用各种剂量。例如，在某些实施方式中，剂量方案包括单次施用单剂量的MPA组合物(例如，如本申请所述的改善释放的兽医组合物)。在某些实施方式中，剂量方案包括在例如一天内多次施用单剂量。或者，剂量方案可以包括单次或多次施用多剂量的MPA组合物。在包含多剂量的实施方式中，可以同时、同时期或顺序施用剂量。

在某些实施方式中，根据目前公开的方法施用后，在兽医对象中达到约1μg/mL至约10μg/mL的Cmax血浆[MPA]。在某些实施方式中，施用后，约4至约24小时在兽医对象中达到约1μg/mL至约10μg/mL的Cmax血浆[MPA]。在某些实施方式中，施用后，约8至约24小时在兽医对象中达到约3μg/mL至约5μg/mL的Cmax血浆[MPA]。

在某些实施方式中，施用后，在兽医对象中达到约5至约6μg/mL的Cmax血浆[MPA]和约4至约10小时在兽医对象中释放约2.5μg/mL/h至约5μg/mL的MPA活性剂。在某些实施方式中，施用后，在兽医对象中达到约6μg/mL的Cmax血浆[MPA]。

在本申请公开的任意实施方式中，兽医对象患有或疑似患有自身免疫性疾病或病症，与IMPDH活性相关的血液病症或者正在接受、即将接受或最近接受了移植或植入手术。在某些实施方式中，对象患有或疑似患有选自下述的自身免疫性疾病或病症：肝炎、系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎、银屑病、重症肌无力、IMHA和特应性皮炎。

在本申请公开的任意实施方式中，当兽医对象处于进食状态、禁食状态或进食过程中(在这种情况下，MPA活性剂或改善释放的兽医组合物可以洒在食物上或与食物混合)时，可以施用MPA活性剂。在本申请公开的任意实施方式中，兽医对象可以是犬、猫或灵长类。在某些实施方式中，兽医对象是犬或猫。

在某些实施方式中，每日一次、每日两次或者以更高频率(例如，每日3-4次)或更低频率(例如，每26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46或48小时或更长时间一次)施用MPA活性剂(例如，通过本申请所述的改善释放的兽医组合物)，并且可以根据例如兽医对象的应答性、活性水平、总体健康状态和需求对其进行调整。

实施例

实施例1：

一些根据本公开的霉酚酸酯改善释放的兽医组合物的制备和检测

活性剂包衣小珠的制备：

材料

糖球(#25/30；

Harleysville,PA)

Clear(

Clear)，基于羟丙基甲基纤维素的包衣(

Harleysville,PA)

纯化水

霉酚酸钠

设备

机械搅拌器

流化床包衣机

热风烘箱

表1：药物包衣溶液的组成

1.将

Clear分散于纯化水中并且进行搅拌直至获得澄清溶液。

2.将霉酚酸钠加入该溶液并搅拌1小时。

3.将500g糖珠装载到流化床室。

4.使流化床流化，加热糖珠并将如表1中所示制备的包衣溶液喷雾到流化的小珠上。

5.持续进行包衣，定期干燥并称重包衣小珠。

6.持续进行包衣直至小珠增重约40％。

7.在热风烘箱中于40℃下将小珠干燥过夜(15小时)。

具有活性剂的挤出小珠的示例性制备：

材料

原料药：霉酚酸钠：50至90％

挤出/滚圆助剂：微晶纤维素：15至20％

粘合剂：羟丙基纤维素或羟丙基甲基纤维素或预胶化淀粉或乙基纤维素或聚(乙烯吡咯烷酮)(2至5％)

改善释放赋形剂：HPMC、HPC、丙烯酸聚合物、HEC、EC——可以将这些掺入小珠中或作为包衣应用

其他填充剂：乳糖、麦芽糊精、甘露醇、山梨醇、磷酸氢钙/(根据需要)

超级崩解剂：交联PVP、羟乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠(根据需要％)

生产

在行星式混合器或高剪切混合器中将原料药与微晶纤维素、粘合剂和崩解剂混合10分钟；

将所需量的水加入混合器并继续再混合5至10分钟；

使所得到的湿物料通过挤出机以获得挤出物(示例设备：Caleva,LCI,Glatt等)；

然后将挤出物在配有交叉线板的滚圆机中滚圆，以形成滚圆的小珠(示例设备：Caleva,LCI,Glatt)

然后将滚圆的小珠在流化床干燥器中干燥，直至达到所需的水分含量(<1％)；

然后使干燥的小珠通过筛网以除去细珠(<500μm)和粗珠(>2500μm)；

然后将干燥的小珠装载到流化床包衣机中并使用适量的速率控制聚合物(范围为15％至30％)进行包衣；

然后将另外的肠溶性包衣(可选的)应用到包衣小珠上；

在所有包衣步骤完成之后，干燥小珠。

密封包衣小珠的制备：

材料

包衣药物或挤出小珠(来自上述章节)

Clear

滑石粉

纯化水

设备

机械搅拌器

流化床包衣机

热风烘箱

1.将

Clear分散于纯化水中并且进行搅拌直至获得澄清溶液。

2.将滑石粉分散到该溶液中并且进行搅拌以获得均匀分散体。

3.将约300g药物包衣小珠(来自上述章节)装载到流化床包衣机中。

4.使流化床流化，加热药物包衣小珠并将如表2中所示制备的包衣溶液喷雾到流化的小珠上。

5.持续进行包衣，定期干燥并称重包衣小珠。

6.持续进行包衣直至小珠增重约8至10％。

7.在热风烘箱中于40℃下将小珠干燥过夜(15小时)。

表2：密封包衣溶液的组成

改善释放层的制备：

包衣–选项1

材料

密封包衣小珠(来自上述章节)

E-7 19040，水性乙基纤维素速率控制聚合物(

Harleysville,PA)(如有需要，可以使用其他等级的)

设备

机械搅拌器

流化床包衣机

热风烘箱

表3：

包衣溶液的组成

1.将

分散于纯化水中并且进行搅拌以获得均匀分散体。

2.将约300g密封包衣小珠装载到流化床包衣机中。

3.使流化床流化，加热密封包衣小珠并将如表3中所示制备的包衣溶液喷雾到流化的小珠上。

4.持续进行包衣，定期干燥并称重包衣小珠。

5.持续进行包衣直至小珠获得所需的包衣重量。

6.取出增重了所需重量(例如，15％、22％、30％)的包衣小珠样品。

7.包衣结束时，在60℃/75％相对湿度条件下将小珠在烘箱中干燥过夜。

包衣–选项2

材料

密封包衣小珠(来自上述章节)

RS(丙烯酸改善释放的聚合物，粉末或预制分散体-RS 30D)

RL(丙烯酸改善释放的聚合物，粉末或预制分散体-RL 30D)

滑石粉

柠檬酸三乙酯(TEC)

设备

机械搅拌器

流化床包衣机

热风烘箱

表4：

包衣的样品组成

*将该组成称为RS(90):RL(10)或

RS/RL:90/10。可以在任意组成中改变该比例，增加RS 100的量将降低膜渗透性，同时降低小珠的释放速率。

1.将滑石粉和TEC分散于纯化水中并均质化，直至获得均匀分散体。

2.将来自步骤(1)的分散体混合直至获得均匀的分散体。

3.将分散体通过80目筛网过滤以除去任何粗颗粒。

4.将约300g密封包衣小珠装载到流化床包衣机中。

5.使流化床流化，加热密封包衣小珠并将如表4中所示制备的包衣溶液喷雾到流化的小珠上。

6.持续进行包衣，定期干燥并称重包衣小珠，直至获得了所需的增重(通常为15％至30％)。

7.在热风烘箱中于40℃下将包衣小珠干燥过夜(15小时)。

E.R.包衣–选项3

材料

乙基纤维素10

Klucel EF(羟丙基纤维素(HPC))

滑石粉

癸二酸二丁酯

DI水

乙醇

设备

机械搅拌器

流化床包衣机

热风烘箱

喷雾机

表5：增重30wt％的样品组成

组分	Wt％
		乙基纤维素10	4.15
Klucel EF(HPC)	0.46
		滑石粉	0.92
癸二酸二丁酯	0.46
		DI水	9.40
乙醇190pf	84.61

1.将癸二酸二丁酯溶于乙醇和去离子水的混合物中。

2.将所需量的HPC分散在水醇混合物中并搅拌以获得溶液。

3.将所需量的乙基纤维素分散在上述混合物中并搅拌直至获得溶液。

4.将滑石粉分散在上述溶液中并搅拌以获得均匀分散体。

5.将药物包衣小珠装载到流化床包衣机中。

6.使流化床流化，加热小珠并将步骤4中所示制备的包衣溶液喷雾到流化的小珠上。

7.持续进行包衣，定期干燥并称重包衣小珠。

8.持续进行包衣直至小珠获得所需的包衣重量。

9.取出增重了所需重量(例如，15％、22％或30％)的包衣小珠样品。

保护层的制备：

材料

控释层包衣小珠(来自上述章节)

L30D 55(也可以使用具有肠溶性保护作用的其他等级的

聚合物或

聚合物)

柠檬酸三乙酯(TEC)

滑石粉

设备

机械搅拌器

流化床包衣机

热风烘箱

表6:肠溶性包衣溶液的组成

2.将来自步骤(1)的分散体分散于

L30D 55混悬液中并且混合直至获得均匀分散体。

3.将分散体通过80目筛网过滤以除去任何粗颗粒。

4.将约300g包衣小珠装载到流化床包衣机中，或者，可以使用约300g来自上述章节的尤特奇

包衣小珠。

5.使流化床流化，加热改善释放包衣小珠并将如表6中所示制备的包衣溶液喷雾到流化的小珠上。

6.持续进行包衣，定期干燥并称重包衣小珠，直至获得所需的

L 30 D55增重(通常为8％至15％)。

7.在热风烘箱中于40℃下将包衣小珠干燥过夜(15小时)。

释放速率的确定

对使用改善释放层和任选地保护层包衣后获得的小珠进行释放速率测定。按照如下所示进行释放速率测定：

溶出度仪：USP 1型

溶出介质体积和速度：900mL，100rpm

将已知量的小珠称重(基于包衣小珠的测定)并置于USP 1型篮中。对于双相溶出曲线(双相介质)，将小珠暴露于pH 1.2的介质中2小时。2小时后，将篮子移入pH 6.8的缓冲介质中，并根据需要再继续溶出10小时、12小时、14小时或24小时。以周期性间隔取出等分试样，并使用UV检测法分析霉酚酸钠。来自代表性实验的数据如图6-9和下表7中所示。

图4显示了如上所示在双相介质中霉酚酸钠从改善释放小珠中的释放。小珠构建体是糖球/药物层/HPMC密封包衣/乙基纤维素

数据来自仅具有改善释放层的小珠。不包括保护层。如图所示，使用以重量计22％的乙基纤维素改善释放层包衣小珠的释放高于使用以重量计30％的乙基纤维素层包衣小珠。这两种组合物在pH 1.2下均保持其完整性(0-2小时)，并在过渡至pH 6.8时迅速释放(>2小时)。

图5显示了在pH 6.8的介质中霉酚酸钠从改善释放小珠中的释放。小珠构建体是糖球/药物层/HPMC密封包衣/丙烯酸聚合物(

RS 100)。不包括保护层。

图6显示了如上所述在双相介质中霉酚酸钠从改善释放小珠中的释放。小珠构建体是糖球/药物层/HMPC密封包衣/RS 100/

L30D 55。

RS 100层提供了改善释放特性，而

L30D 55提供了保护性、肠溶包衣。如示，在pH 1.2下几乎没有发生释放(0-2小时)，一旦pH升高到6.8则发生释放(>2小时)。

图7显示了在pH 6.8的介质中霉酚酸钠从改善释放小珠中的释放。小珠构建体是糖球/药物层/

RS 100:RL 100(90:10)。不包括密封包衣和保护层。注意到快速释放发生在2-6小时左右。

图8显示了霉酚酸钠从包含30wt％Surelease聚合物包衣和保护性肠溶包衣的改善释放组合物中的释放。孵育2小时后，将pH从1.2转换为6.8。

图9显示了霉酚酸钠从包含基于溶剂的包衣的改善释放组合物中的释放。孵育2小时后，将pH从1.2转换为6.8。

下表7提供了MPA活性剂从根据本公开的两个示例性组合物中的释放数据。如上所述制备两组延长释放肠溶包衣包覆的Na.MPA小珠(22wt％Surelease包衣和30wt％包衣)，并置于酸中(2小时，pH 1.2)，随后置于pH升高至约6.8的缓冲液中。

表7：

实施例2：

霉酚酸酯改善释放小型片剂的制备

材料

将所需量的霉酚酸钠和微晶纤维素在高剪切混合器中混合约5分钟。

将所需量的PVP溶于水中，以形成10％w/w的PVP溶液。

将PVP溶液逐渐加入到高剪切混合器中，并且将混合物混合直至形成湿物料。

将湿物料转移至流化床干燥器中并干燥。

使干燥颗粒通过筛网，以除去非常粗和非常细的颗粒。

将筛分颗粒转移至V型混合器中，并与硬脂酸镁混合约3分钟。

使用2mm圆形标准凹面多头工具在压缩压力机上将经润滑的颗粒压成小型片剂。

如本文中所述，使用密封包衣、改善释放层和保护层将小型片剂包衣。

可以向兽医对象施用适量的小型片剂，将其填入胶囊中，以浆液、小药囊、糖锭剂等形式。

实施例3：

在兽医模型中MPA的体内药代动力学

使用犬模型(雄性比格犬)进行了两项单次给药交叉研究，以评价肠溶包衣延长释放霉酚酸钠制剂(“EC-ER-Na.MP”)的潜力。在第一项交叉研究中，将口服给予180mg EC-Na.MPA后的MPA及其代谢产物(MPAG和AcMPAG)的药代动力学参数与结肠内(IC)施用Na.MPA的进行了比较。在第二项交叉研究中，在进食和禁食状态下施用270mg EC-ER-Na.MPA制剂，并与在禁食状态下口服施用10mg/kg MMF的药代动力学进行比较。这两项研究均由Absorption Systems(San Diego,CA)进行。

研究1：在IC给药前3天，向犬(n＝5)提供由罐装湿粮(

Choice Cuts)组成的软食。除此之外，向犬提供其标准饮食(LabDiet 5006 laboratory canine diet)。在每个给药事件之前，将犬在给药前禁食12小时，直至给药后4小时，再给予食物。在整个研究过程中，犬可以自由饮水。在IC给药前，于给药前约1小时时对每只犬进行无刺激灌肠，以便从结肠中清除粪便。PO给药前，于给药前约30分钟时对每只犬(n＝5)进行预处理，肌肉注射五肽胃泌素(6μg/kg)。通过将胶囊置于喉咙后部而给予，再用10mL水冲下。

每次给药，每只犬接受总剂量180mg MPA。对于IC给药，以溶液形式通过内窥镜递送MPA，对于PO给药，每只犬接受单次

180mg肠溶包衣胶囊。施用后，在给药后长达24小时内收集血液样品。使用定量LC-MS/MS法确定MPA、MPAG和AcMPAG的血浆浓度，使用WinNonlin v.6.4软件确定药代动力学参数。

IC给药MPA后，在给药后5至30分钟观察到了最大血浆浓度(平均C_max为29460±12587ng/mL)。平均半衰期为5.55±1.77小时，基于剂量归一化AUC_终末的平均暴露量为1817±925hr*kg*ng/mL/mg。MPA给药后，MPAG的平均C_max为4826±1156ng/mL。MPAG的t_max为给药后15分钟至1小时，平均AUC_终末为11702±4794hr*ng/mL。MPA给药后，AcMPAG的平均C_max为303±87.8ng/mL。MPAG的t_max为给药后5至15分钟，平均AUC_终末为233±160hr*ng/mL。

PO给药MPA后，在给药后30分钟至2小时之间观察到了最大血浆浓度(平均C_max为27320±12037ng/mL)。在2只犬中确定的平均半衰期为4.49小时，基于剂量归一化AUC_终末的平均暴露量为2234±799hr*kg*ng/mL/mg。MPA给药后，MPAG的平均C_max为14316±5033ng/mL。MPAG的t_max为给药后1至2小时，平均AUC_终末为28882±8313hr*ng/mL。MPA给药后，AcMPAG的平均C_max为426±113ng/mL。MPAG的t_max为给药后30分钟至2小时，平均AUC_终末为529±217hr*ng/mL。

基于平均值，IC和PO给药后，MPA的全身暴露量相似。IC和PO给药后的平均C_max分别为29460和27320ng/mL，平均剂量归一化AUC_终末值分别为1817和2234hr*kg*ng/mL/mg。然而，与PO给药相比，IC给药后MPA确实吸收得更加迅速。MPAG在血浆中存在的浓度比AcMPAG高得多。IC给药后，这些葡糖醛酸代谢产物的每一种的全身暴露量均为PO给药后的约40％。PO给药后和IC给药后的MPAG的平均AUC_终末分别为28882hr*ng/mL和11702hr*ng/mL。PO给药后和IC给药后的AcMPAG的平均AUC_终末分别为529hr*ng/mL和233hr*ng/mL。

在表8中总结了平均药代动力学参数和药物与代谢产物的比率。与口服施用的MPA/MPAG比率和MPA/AcMPAG比率相比，在IC给药后，观察到MPA/MPAG比率和MPA/AcMPAG比率分别几乎是其2倍。

研究2：在这项治疗交叉研究中，将在进食和禁食状态下给予270mg EC-ER-Na.MP(“OKV-1001”)后的MPA及其代谢产物(MPAG和AcMPAG)的药代动力学与在禁食状态下口服给予速释10mg/kg MMF后的相应指标进行比较(每个剂量组n＝5只；每种治疗使用同一组犬)。

对于在禁食状态下给予EC-ER-Na.MP和MMF而言，给犬喂食经认证的实验室饮食(来自LabDiet的5006实验室犬类饮食)，然后在给药前禁食至少12小时。给药后约4小时提供食物。动物可自由饮水。

对于在进食状态下给予EC-ER-Na.MP而言，给犬喂食经认证的实验室饮食(来自LabDiet的5006实验室犬类饮食)，禁食至少12小时，然后在给药前喂食(爱宝罐头食品)，之后在吃完后不超过30分钟内服药。记录每只动物提供和消耗的食物量。给药后约4小时提供常规实验室饮食。动物可自由饮水。

对于给予MMF而言，根据

的说明书制备MMF口服混悬液。将剩余给药溶液在室温下保存。

对于给予两种EC-ER-Na.MP而言，在给药前，然后在30分钟、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8、9、12和24小时时(处理以获得血浆)；或者1、2、3、4、6、8、12和24小时时(处理以获得PBMC)采血。对于给予MMF而言，在给药前、15分钟、30分钟、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、9、12和18小时(处理以获得血浆)；或在给药前、1、2、3、4、6、8、12和18小时(处理以获得PBMC)采血。

使用定量LC-MS/MS法确定MPA、MPAG和AcMPAG的血浆浓度，使用WinNonlin v.6.4软件确定药代动力学参数。血浆浓度曲线如图10-13所示。平均药代动力学参数和药物与代谢产物比率总结在表9中。在禁食条件下，施用EC-ER-Na.MP的MPA/MPAG比率是参照口服给药的1.5至2.0倍(表9)。MPA/AcMPAG比率也趋向于更高，尽管程度较小。

研究3：进行另一项交叉研究，以确定MPA及其代谢产物(MPAG和AcMPAG)单次给药和稳态药代动力学。研究设计如图14中所示。具体来说，三(3)组健康雄性比格犬(每组n＝7只，共计21只犬；Marshall BioResources,North Rose,NY,USA)参与了两种治疗、两阶段、序贯的、自适应性的交叉研究。两个为期5天的重复给药研究阶段之间间隔16天的清洗期。在入组时，犬至少2岁。

在第一个5天阶段中，对三组犬(每组n＝7只)进行随机分组，以接受OKV-1001(270mg)特征1QD(A组)、OKV-1001(270mg)特征2QD(B组)或MMF(10mg/kg)口服混悬液BID(C组)。将特征1制成与特征2相比MPA活性剂释放更迅速的剂型。将以10mg/kg B.I.D给药的MMF口服混悬液(

口服混悬液，Genentech USA Inc.,South San Francisco,CA)作为参照组。在第一个5天阶段后是为期16天的清洗期，并检查第1阶段的结果。然后在第2阶段将犬交叉，以接受OKV-1001(365mg)特征1QD(A组)或OKV-1001(365mg)特征2QD(B组)或OKV-1001(270mg)特征1QD(C组)。在各组和各阶段中犬接受的治疗总结在表10中。

表10：在研究3中各组接受的治疗

这两个研究阶段具有相同的饲养和采用程序。在第1天，禁食12小时后收集PK样品，且在第5天喂食动物后1小时收集样品。给药时，将所有未食用的食物收走，并且记录每只动物提供和消耗的食物量。在第2-5天，每日清晨喂食动物一次，在早晨给药前1小时进行。

在第1天和第5天，给药前(0min)以及MMF给药后15和30min，之后是1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、9和12小时时通过颈静脉采集一系列血液样品。对于OKV-1001，给药前(0min)以及30min，之后是1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8、9、12和24小时时采集样品。使用合格且经验证的可用于GLP的LC-MS/MS法来对血浆MPA、MPAG、AcMPAG的血浆浓度进行定量。

在研究过程中的每个采血时间点评估每只动物的总体健康状况。在不进行采血或仅有一个采血时间点的研究日，至少每日两次(AM和PM)评估总体健康状况。

针对MPA、MPAG和AcMPAG，使用Phoenix Winnonlin software 64(Build7.0.0.2535)评价标准非房室药代动力学参数(第1天给药后的C_max、T_max、t_1/2、AUC_终末和AUC_inf；第5天给药后的C_max、T_max和AUC_τau，其中，针对MMF，τau是12小时，而针对OKV-1001，τau是24小时)。第1天(禁食；单次给药)的每个治疗组的MPA血浆浓度水平如图15中所示。第5天(进食；稳态)的每个治疗组的MPA血浆浓度水平如图16中所示。针对C组、A组和B组计算获得的药物:代谢产物(D:M)比率分别如表11、12和13中所示。还列出了来自研究2的参照比率值。所有治疗组的非房室PK参数估计值如表14中所示。应该注意的是，B组/第2阶段/第5天的数据没有从7只犬中的5只获得到。

表11：研究3的C组和研究2：平均D:M比率总结

表12：研究3的A组和研究2：平均D:M比率总结

表13：研究3的B组和研究2：平均D:M比率总结

对于相关领域的普通技术人员而言显而易见的是，在不脱离任何实施方式的范围的前提下，可以对本申请所述的方法和应用进行其他适宜的修订和改编。此外，应当理解的是，尽管在本申请中已经用图阐示和描述了某些实施方式，但是权利要求不限于所描述和示出部分的特定形式或排布。在说明书中，已经公开了说明性实施方式，并且尽管采用了特定术语，但是其仅在一般和描述性意义上使用，而不是出于限制目的。根据上述教导，可以对实施方式进行修订和变化。因此，应当理解的是，可以以不同于具体描述的方式来实施这些实施方式。

可以将上述各种实施方式组合以提供进一步的实施方式。在本说明书中提及的和/或在申请数据表中列出的所有美国专利、美国专利申请公开文件、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利出版物，包括但不限于美国临时专利申请序列号62/470,806和美国临时专利申请序列号62/503,270，其全部内容通过引用并入本申请。如果需要，可以使用各种专利、专利申请和出版物的概念对实施方式的各方面进行修改，以提供进一步的实施方式。

本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请的全部内容都通过引用并入本申请，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体地和单独地指出通过引用并入本申请。

Claims

1.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将霉酚酸(MPA)活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得所述MPA活性剂按照下述方案在所述兽医对象中释放：

给药后小时数释放的MPA活性剂％ 0.5 约0.0至约1.0 2 约3.0至约10.0 2.5 约10.0至约30.0 3 约15.0至约40.0 4 约25.0至约55.0 6 约40.0至约75.0 7 约50.0至约80.0 10 约60.0至约90.0 14 约70.0至约100

2.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后所述兽医对象具有与从施用了参照速释MPA制剂的参照兽医对象获得的血浆[MPA]C_max相比更低的血浆[MPA]C_max。

3.根据权利要求2所述的方法，其中以改善释放形式施用所述MPA活性剂的所述兽医对象的血浆[MPA]C_max小于施用所述速释MPA制剂的参照兽医对象的血浆[MPA]C_max的约90％、约80％、约70％、约60％、约50％或约40％。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其中以改善释放施用所述MPA活性剂的所述兽医对象的血浆[MPA]C_max小于施用所述速释MPA制剂的参照兽医对象的血浆[MPA]C_max的约80％。

5.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，以改善释放形式被递送所述MPA活性剂的所述兽医对象具有小于约2500ng/nL、小于约2000ng/mL或小于约1500ng/mL的C_max血浆[MPA]。

6.根据权利要求5所述的方法，其中施用后，以改善释放形式被递送所述MPA活性剂的所述兽医对象具有小于约1500ng/mL的C_max血浆[MPA]。

7.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在一段时间内所述兽医对象的[MPA]AUC是在同一段时间内施用速释制剂的参照兽医对象的[MPA]AUC的至少约1.5倍、至少约2倍、至少约2.5倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍或至少约10倍。

8.根据权利要求7所述的方法，其中施用后，在一段时间内所述兽医对象的[MPA]AUC是在同一段时间内施用所述速释制剂的参照兽医对象的[MPA]AUC的至少约2倍。

9.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中达到了约1μg/mL至约10μg/mL的C_max血浆[MPA]。

10.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中在约4至约24小时达到了约1μg/mL至约10μg/mL的C_max血浆[MPA]。

11.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中在约8至约24小时达到了约3μg/mL至约5μg/mL的C_max血浆[MPA]。

12.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中达到了约5μg/mL至约6μg/mL的C_max血浆[MPA]并且在所述兽医对象中在约4至约10小时释放了约2.5μg/mL/h至约5μg/mL的所述MPA活性剂。

13.一种用于在兽医对象中递送MPA活性剂的方法，所述方法包括通过口服施用以改善释放形式将MPA活性剂递送至所述兽医对象的下消化道，以使得施用后，在所述兽医对象中达到了约6μg/mL的C_max血浆[MPA]。

14.根据权利要求1-13中任意一项所述的方法，其中施用后，所述兽医对象的MPA:代谢产物比率与从施用参照速释口服剂量的霉酚酸酯(MMF)后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比是升高的。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述代谢物包含MPAG、AcMPAG或者这两者。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述代谢产物包含MPAG且MPA:MPAG比率为约1:1至约10:1。

17.根据权利要求16所述的方法，其中MPA:MPAG比率为约1.5:1至约5:1。

18.根据权利要求16或17所述的方法，其中MPA:MPAG比率为约2:1。

19.根据权利要求14-18中任意一项所述的方法，其中所述代谢产物包含AcMPAG且MPA:AcMPAG比率为约50:1至约250:1。

20.根据权利要求19所述的方法，其中MPA:AcMPAG比率为约100:1至约200:1。

21.根据权利要求19或20所述的方法，其中MPA:AcMPAG比率为约150:1。

22.根据权利要求1-21中任意一项所述的方法，其中所述MPA活性剂在改善释放的组合物中被施用给所述兽医对象，所述改善释放的组合物包括：

a.直径小于约10mm的核心；

b.安置在所述核心的至少一部分之上并且包含所述MPA活性剂的活性层；和

c.安置在密封包衣层之上并且占所述组合物的约5wt％至约50wt％的改善释放层，

其中所述MPA活性剂占所述组合物的约20wt％至约90wt％并且所述改善释放层占所述组合物的约5wt％至约50wt％。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述改善释放的兽医组合物还包含占约5wt％至约10wt％的安置在所述活性层之上的密封包衣。

24.根据权利要求1-23中任意一项所述的方法，其中所述MPA活性剂在改善释放的兽医组合物中被施用给所述兽医对象，所述改善释放的兽医组合物包括：

a.直径小于约10mm的挤出的核心；

b.至少部分地安置在所述核心内的所述MPA活性剂；和

c.安置在密封包衣层之上的改善释放层，

25.根据权利要求24所述的方法，其中所述改善释放的兽医组合物还包含占约5wt％至约10wt％的安置在所述活性层之上的密封包衣。

26.根据权利要求24或25所述的方法，其中所述改善释放层包含纤维素聚合物、丙烯酸酯聚合物、乙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素聚合物、聚(丙烯酸乙烯酯)(PVA)聚合物或其任意组合。

27.根据权利要求24-26中任意一项所述的方法，其中所述改善释放层占所述组合物的约15wt％至约35wt％。

28.根据权利要求24-27中任意一项所述的方法，其中所述改善释放层包含乙基纤维素。

29.根据权利要求24-28中任意一项所述的方法，其中所述乙基纤维素包含水性或溶剂沉积的乙基纤维素速率控制聚合物。

30.根据权利要求24-29中任意一项所述的方法，其中所述改善释放层包含甲基丙烯酸酯聚合物。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述改善释放层包含约10wt％至约30wt％的甲基丙烯酸酯聚合物。

32.根据权利要求30或31所述的方法，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇(EUDRAGIT)聚合物。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇RS100和RL100中的一种或两者。

34.根据权利要求32所述的方法，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含约90:10比率的尤特奇RS100:RL100。

35.根据权利要求22-34中任意一项所述的方法，其中所述改善释放的兽医组合物还包含安置在所述改善释放层之上的保护层。

36.根据权利要求35所述的方法，其中所述保护层包含甲基丙烯酸酯聚合物。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇L100。

38.根据权利要求35-37中任意一项所述的方法，其中所述保护层占所述组合物的约8wt％至约15wt％。

39.根据权利要求1-38中任意一项所述的方法，其中所述MPA活性剂包含霉酚酸钠。

40.根据权利要求24-39中任意一项所述的方法，其中所述核心是挤出的并且所述组合物包含约50wt％至约90wt％的所述MPA活性剂，和任选地还包含下述中的一种或多种：约10wt％至约30wt％的挤出助剂；约1wt％至约10wt％的粘合剂；释放赋形剂；填充剂和超级崩解剂。

41.根据权利要求22-40中任意一项所述的方法，其中所述改善释放的兽医组合物还包含缓冲剂。

42.根据权利要求22-41中任意一项所述的方法，其中所述核心具有小于约5mm、小于约4mm、小于约3mm的直径，或者具有约2mm的直径。

43.根据权利要求22-42中任意一项所述的方法，其中所述改善释放的兽医组合物包含在可溶性片剂、胶囊、糖锭剂、浆液(slurry)、小药囊(sachet)、咀嚼片、口腔或舌下可溶性薄膜或条带、混悬剂或其任意组合中。

44.根据权利要求1-43中任意一项所述的方法，其中所述兽医对象已经或疑似患有自身免疫性疾病或病症、与IMPDH活性相关的血液病症，或者正在、将要或最近已经进行了移植或植入手术，或者其任意组合。

45.根据权利要求44所述的方法，其中所述自身免疫性疾病或病症是肝炎、系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎、银屑病、IMHA或特应性皮炎。

46.根据权利要求1-45中任意一项所述的方法，其中当所述兽医对象处于进食状态时，施用所述改善释放的兽医组合物。

47.根据权利要求1-45中任意一项所述的方法，其中当所述兽医对象处于禁食状态时，施用所述改善释放的兽医组合物。

48.根据权利要求1-45中任意一项所述的方法，其中在喂食期间向所述兽医对象施用所述改善释放的兽医组合物。

49.根据权利要求48所述的方法，其中将所述改善释放的兽医组合物撒在食物上或与食物混合。

50.根据权利要求1-49中任意一项所述的方法，其中所述兽医对象是犬、猫或灵长类动物。

51.根据权利要求50所述的方法，其中所述兽医对象是犬。

52.根据权利要求50所述的方法，其中所述兽医对象是猫。

53.根据权利要求50所述的方法，其中所述兽医对象是灵长类动物。

54.一种改善释放的兽医组合物，所述兽医组合物包含：

a.直径小于约10mm的核心；

b.安置在所述核心的至少一部分之上并且包含MPA活性剂的活性层；

其中所述MPA活性剂占所述组合物的约20wt％至约90wt％，并且所述改善释放层占所述组合物的约5wt％至约50wt％，并且在将所述组合物向兽医对象施用后，所述兽医对象的MPA:代谢产物比率与从施用参照口服剂量的MMF后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比是升高的。

55.根据权利要求54所述的改善释放的兽医组合物，还包含约5wt％至约10wt％的安置在所述活性层之上的密封包衣。

56.一种改善释放的兽医组合物，所述兽医组合物包含：

a.直径小于约10mm的挤出的核心；

b.至少部分地安置在所述核心内的MPA活性剂；

c.安置在所述MPA活性剂和所述核心之上的密封包衣；和

d.安置在所述密封包衣层之上的改善释放层，

其中所述MPA活性剂占所述组合物的约20wt％至约90wt％，并且所述改善释放层占所述组合物的约5wt％至约50wt％，并且在将所述组合物向兽医对象施用后，所述兽医对象的MPA:代谢产物比率与从施用口服剂量的MMF后的参照兽医对象获得的相应MPA:代谢产物比率相比是升高的。

57.根据权利要求56所述的改善释放的兽医组合物，还包含约5wt％至约10wt％的安置在所述活性层之上的密封包衣。

58.根据权利要求54-57中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述MPA:代谢产物比率是MPA:MPAG。

59.根据权利要求57所述的改善释放的兽医组合物，其中所述MPA:MPAG比率至少是从施用参照口服剂量的MMF后的参照兽医对象获得的MPA:MPAG比率的约1.5倍高。

60.根据权利要求54-59中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述MPA:代谢产物比率是MPA:AcMPAG。

61.根据权利要求54-60中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述改善释放层包含纤维素聚合物、丙烯酸酯聚合物、乙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素聚合物、聚(丙烯酸乙烯酯)(PVA)聚合物或其任意组合。

62.根据权利要求54-61中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述改善释放层占所述组合物的约15wt％至约30wt％。

63.根据权利要求61或62所述的改善释放的兽医组合物，其中所述改善释放层包含乙基纤维素。

64.根据权利要求63所述的改善释放的兽医组合物，其中所述乙基纤维素包含水性乙基纤维素速率控制聚合物。

65.根据权利要求61或62所述的改善释放的兽医组合物，其中所述改善释放层包含甲基丙烯酸酯聚合物。

66.根据权利要求65所述的改善释放的兽医组合物，包含约10wt％至约30wt％的甲基丙烯酸酯聚合物。

67.根据权利要求65或66所述的改善释放的兽医组合物，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇聚合物。

68.根据权利要求67所述的改善释放的兽医组合物，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇RS100和RL100中的一种或两者。

69.根据权利要求68所述的改善释放的兽医组合物，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含约90:10比率的尤特奇RS100:RL100。

70.根据权利要求54-69中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，还包含安置在所述改善释放层之上的保护层。

71.根据权利要求70所述的改善释放的兽医组合物，其中所述保护层包含甲基丙烯酸酯聚合物。

72.根据权利要求71所述的改善释放的兽医组合物，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含尤特奇RS 30D和RL 30D中的一种或两者。

73.根据权利要求72所述的改善释放的兽医组合物，其中所述甲基丙烯酸酯聚合物包含约90:10比率的RS30D:RL30D。

74.根据权利要求70-73中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述保护层占所述组合物的约8wt％至约15wt％。

75.根据权利要求54-74中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述MPA活性剂包含霉酚酸钠。

76.根据权利要求56-75中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述核心是挤出的并且包含约50wt％至约90wt％的所述MPA活性剂，和任选地还包含下述中的一种或多种：约10wt％至约30wt％的挤出助剂；约1wt％至约10wt％的粘合剂；释放赋形剂；填充剂和超级崩解剂。

77.根据权利要求54-76中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，还包含缓冲剂。

78.根据权利要求54-77中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述组合物被构造成在将其向所述兽医对象口服施用后至少大部分所述MPA活性剂在兽医对象的下消化道中释放。

79.根据权利要求54-78中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述组合物被构造成在将其向所述兽医对象单次施用后在兽医对象中释放的所述MPA活性剂达到约1μg/mL至约10μg/mL的C_max血浆[MPA]。

80.根据权利要求54-79中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述组合物被构造成在将其向所述兽医对象口服施用后在兽医对象中的所述活性剂在约4至约24小时达到约1μg/mL至约10μg/mL的血浆[MPA]。

81.根据权利要求54-80中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述组合物被构造成在将其向所述兽医对象口服施用后在兽医对象中在约8至约24小时达到约3μg/mL至约5μg/mL的血浆[MPA]。

82.根据权利要求54-81中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述组合物被构造成在将其向所述兽医对象口服施用后在兽医对象中释放所述活性剂达到约5至约6μg/mL的C_max血浆[MPA]并且在约4至约10小时递送约2.5至约5μg/mL。

83.根据权利要求82所述的改善释放的兽医组合物，其中所述组合物被构造成在将所述组合物施用给所述兽医对象后在所述兽医对象中达到约6μg/mL的C_max血浆[MPA]。

84.根据权利要求54-83中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，其中所述核心具有小于约5mm、小于约4mm、小于约3mm的直径，或者具有约2mm的直径。

85.根据权利要求54-84中任意一项所述的改善释放的兽医组合物，或其任意组合，包含在可溶性片剂、胶囊、糖锭剂、浆液、小药囊、咀嚼片、口腔或舌下可溶性薄膜或条带、混悬剂或其任意组合中。

86.一种免疫抑制需要其的兽医对象的方法，所述方法包括向所述兽医对象口服施用有效量的根据权利要求54-85中任意一项所述的改善释放的兽医组合物或其任意组合，以免疫抑制所述兽医对象。

87.一种在兽医对象中抑制肌苷一磷酸脱氢酶(IMPDH)活性的方法，所述方法包括向所述兽医对象口服施用有效量的根据权利要求54-85中任意一项所述的改善释放的兽医组合物或其任意组合。

88.根据权利要求87所述的方法，其中所述IMPDH活性被抑制至少约20％、约30％、约40％、约50％、约60％或约70％。

89.一种用于在需要其的兽医对象中降低淋巴细胞计数和/或活性的方法，所述方法包括向所述对象口服施用治疗有效量的根据权利要求54-85中任意一项所述的改善释放的兽医组合物或其任意组合。

90.一种用于在兽医对象中调节炎症应答的方法，所述方法包括向所述对象口服施用治疗有效量的根据权利要求54-85中任意一项所述的改善释放的兽医组合物。

91.一种优先通过兽医对象的下消化道递送MPA活性剂的方法，所述方法包括向所述对象口服施用根据权利要求54-85中任意一项所述的改善释放的兽医组合物或其任意组合。

92.一种用于降低MPA疗法中兽医对象的MPA代谢产物暴露量的方法，所述方法包括向所述对象口服施用根据权利要求54-85中任意一项所述的改善释放的兽医组合物或其任意组合。

93.根据权利要求86-92中任意一项所述的方法，其中所述兽医对象是犬、猫或灵长类动物。

94.根据权利要求86-93中任意一项所述的方法，其中当所述兽医对象处于进食状态时，施用所述组合物。

95.根据权利要求86-94中任意一项所述的方法，其中当所述兽医对象处于禁食状态时，施用所述组合物。

96.根据权利要求86-95中任意一项所述的方法，其中所述组合物与食物一起施用。

97.根据权利要求96所述的方法，其中将所述组合物撒在食物上或与食物混合。

98.根据权利要求86-97中任意一项所述的方法，其中所述组合物与水一起或作为溶液施用。

99.根据权利要求1-53或86-98中任意一项所述的方法，其中所述组合物每日施用一次。

100.根据权利要求1-53或86-98中任意一项所述的方法，其中所述组合物每日施用两次、每日施用三次、每日施用四次或更多。

101.根据权利要求1-53或86-98中任意一项所述的方法，其中所述组合物的施用少于每日一次。

102.根据权利要求1-53或86-98中任意一项所述的方法，其中与施用参照剂量的速释MPA制剂的参照兽医对象相比，在所述兽医对象中MPA活性剂的浓度是增加的。