CN1106611A

CN1106611A - 取代的膦酸酯类化合物、其制备方法及含有它们的药物组合物

Info

Publication number: CN1106611A
Application number: CN94190122A
Authority: CN
Inventors: L·阮; V·V·狄; H·范; S·弗罗雷特; R·阿祖雷; Y·古扬-盖林; P·梅赫勒; E·尼索; C·L·本特津
Original assignee: Symphar SA
Current assignee: Symphar SA
Priority date: 1993-02-19
Filing date: 1994-02-21
Publication date: 1995-08-09
Also published as: WO1994019358A1; MX9401295A; CA2118409A1; JPH07506121A; ZA941088B; EP0638084A1; AU6205294A

Abstract

本发明涉及新的式(I)的被二烷基苯酚基团取代的膦酸酯类化合物，以及其制备和含有它们的药物组合物，式(I)中G，X¹，X²，D，Y，Z¹和Z²如权利要求1中所定义。

Description

本发明涉及用二烷基苯酚部分取代的新的膦酸酯类化合物及其制备方法。本发明还涉及含有这些化合物的药物组合物，和其在涉及活性氧自由基的疾病并且更具体地讲在治疗动脉粥样硬化方面的治疗用途。

活性氧基涉及许多病理学，在下列病例中已经牢固地确立了药理及临床证据（Halliwell，B.等人，“Role of Free Radicals and Catalytic Metal Ions in Human Disease：an Overview”，Methods Enzymol.186，1-85，1990）：

-炎性和免疫损伤（自体免疫疾病、类风湿性关节炎），

-局部缺血/再灌注损伤，

-放射损伤，

-早熟老化，

-帕金森病和早老性痴呆，

-癌症和抗癌治疗，

-与损伤的血液循环有关的病症，如间歇性跛行、过量血小板凝聚、心肌梗塞形成和动脉粥样硬化。

在这些病理情况中抗氧化剂产品可用作治疗剂。由本发明人所进行的试验表明，式（Ⅰ）膦酸酯类化合物通过其二烷基苯酚和膦酸酯部分表现出有效的抗氧化剂活性，因此具备了这种治疗潜能。

在动脉粥样硬化的特殊病例中，现已清楚地证明在LDL中含有的胆固醇是血浆胆固醇最能致动脉粥样化的形式。另一方面，目前的研究表明巨噬细胞对氧化的LDL的吸收会导致充脂类泡沫细胞（lipidladen foam cell）的形成，这是动脉粥样硬化形成的第一步。许多流行病学研究现已经牢固地确定高血胆固醇是冠心病的主要危险因素。基于上述，可以假定降低胆固醇疗法与抗氧化剂治疗的结合可能比两者之一更为有效。因此，具有血胆固醇过少和抗氧化剂双重性能的药物能够极有效地治疗动脉粥样硬化。

本发明的膦酸酯化合物（Ⅰ）类似于HMGCoA还原酶抑制剂（lovastatin，simvastatin）即用于人的有效的血胆固醇过少药物，能够明显地抑制在人细胞系中胆固醇的合成。其抗氧化剂和血胆固醇过少的活性的结合赋予本发明的膦酸酯类化合物治疗与升高的胆固醇含量和病理学上脂类氧化作用有关的疾病的潜能。此外，这些化合物的亲脂性预示着它们将结合到LDL中，并保护这些粒子免受氧化性基团的损害。

本发明化合物及其盐、溶剂化物和水合物的一般结构由式（Ⅰ）表示：

其中

-X¹、X²可相同或不同，是直链或支链C₁-C₆烷基，

-Y是O或S，

-Z¹、Z²可相同或不同，是：

-OR，其中R是H、直链或支链C₁-C₆烷基，

-NR¹R²，其中R¹、R²可相同或不同，是H或直链或支链C₁-C₆烷基，

-Z¹、Z²可一起形成C₂-C₈亚烷基二氧基，

-G是OH或其生物前体;

D是饱和或不饱和的C₁-C₁₁亚烷基链，其中一个或多个亚甲基可以被硫原子、氧原子、羰基代替;任意一个或多个亚甲基可以被一个或多个卤原子（F、Cl或Br）、C_1-6烷基、苯基、羟基或酰氧基取代。

优选X¹和X²相同，且为丁基，特别是叔丁基。

优选Y是氧。

优选Z¹和Z²是相同的，特别是OR，其中R是H，或为直链或支链C_1-6烷基。较优选Z¹和Z²是相同的OR基，其中R是C_1-6烷基，特别是甲基、乙基或异丙基。

优选G是OH。

对G所定义的基团OH的适宜的生物前体包括，例如：OR³基，其中R³是直链或支链C₁-C₆烷基、全氟代C₁-C₆烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的苄基，适宜的生物前体还可以是R³-C（O）O-基、R³O-C（O）O-基、R³NH-C（O）O-基、R³C（O）OCH₂O-基、R³-SO₂O-基、其中R³如上所定义。

优选的，D是A-C（O）-B，A-CH（OH）-B，A-CH₂-B，（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-（CH₂）_t或S-（CH₂）_t，其中

-A是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n，S-CX⁴X⁵，

（CH＝CH）_n-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_p-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_t-

C（O）-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-C（O）-CHX³，S-CX⁴X⁵-C（O）-CHX³，

-（CH＝CH）_n-CH＝CH-CH（OH）-CHX³，（CH₂）_p-CH＝CH-CH（OH）-CHX³，

（CH₂）_t-CH（OH）-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-CH（OH）-CHX³，

S-CX⁴X⁵-CH（OH）-CHX³，

其中n是0、1或2，t是0至4的数字，p是1至3的数字，

-X³是H、直链或支链C₁-C₆烷基、取代或未取代的苯基，

-X⁴、X⁵可相同或不同，是H、直链或支链C₁-C₄烷基，

-B是CH₂、CH-X⁶、X⁶-C-X⁷，其中X⁶和X⁷可相同或不同，是卤原子（F、Cl、Br）、直链或支链C₁-C₆烷基、取代或未取代的苯基;

当A是（CH₂）_t、（CH＝CH）_n-CH＝CX³、（CH₂）_t-CHX³、S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n、S-CX⁴X⁵时，则B还是CH＝CH-（CH₂）_p，CH＝CH-CHX⁶、CH＝CH＝CX⁶X⁷，其中p和X⁶、X⁷如上所定义。

优选D还可以是A′-CH（O-CO-X⁸）-B′，其中A′是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n，S-CX⁴X⁵，B′是CH₂，CH-X⁶，X⁶-C-X⁷，CH＝CH-（CH₂）_p，CH＝CH-CHX⁶，CH＝CH-CX⁶X⁷，其中t，n，p，X³，X⁴，X⁵，X⁶和X⁷如上所定义，X⁸是饱和或不饱和C₁-C₆烷基或链烯基链。

包括在式（Ⅰ）范围内的适宜的盐包括，例如，基团OR（在Z¹/Z²中）的相应的盐，例如与碱金属原子如钠或钾形成的盐。

式（Ⅰ）化合物的制备方法

本发明还涉及用于制备取代的膦酸酯类化合物（Ⅰ）的方法。

D是A-C（O）-B

A是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX₃，S（CH₂）_t-（CH＝CH）_n或S-CX⁴X⁵

B是CH₂，CH-X⁶或C-X⁶X⁷

在图1中所描述的方法在于使市场上可买到的烷基膦酸酯Ⅲ与适当的碱如正丁基锂或二异丙基氨基锂反应。然后使如此形成的化合物Ⅲ的锂盐就地与适当的酯Ⅱ反应，生成取代的膦酸酯类化合物（Ⅰ）。该反应在醚溶剂如二甲氧基乙烷或四氢呋喃（THF），优选在THF中，在-78℃至室温（25℃）的温度下进行。

在图2中所描述的另一方法在于使不饱和醛Ⅳ与起始化合物酮基膦酸酯Ⅴ缩合，用四氯化钛和N-甲基吗啉作缩合剂。该反应在醚溶剂如四氢呋喃、二噁烷或二甲氧基乙烷，优选THF中，在-30℃至溶剂沸点（对于THF为66℃）的温度下进行。得到其中A为（CH＝CH）_n-CH＝CX³的式（Ⅰ）化合物。可以通过使起始化合物酮基膦酸酯Ⅴ与过量碱或碱混合物反应来制备其中A为（CH₂）_t-CHX³的式（Ⅰ）化合物。所述碱是氢化钠、醇钠、正丁基锂或二异丙基氨基锂。然后使如此形成的酮基膦酸酯Ⅴ的阴离子与卤化物Ⅵ（其中Hal＝Br或Cl）反应。该反应在四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二噁烷、苯或甲苯中进行。反应温度在0℃至所述溶剂沸点之间变化。

实施例1、2、3和4进一步说明图2中描述的方法的实验情况。

关于缩合反应，在B为CH₂基团的情况下，即当位于膦酸酯官能团α位的碳原子具有两个质子时，除了通过γ位的单缩合反应形成的主反应产物外，通过在α和γ位与二烷基苯酚基团的双缩合反应还形成了副产物（参见实施例1和2）。在B＝CHX⁶或X⁶-C-X⁷的情况下，例如当在α位没有两个质子时，通过在γ位的单缩合反应形成的化合物是唯一的反应产物（参见实施例4和10）。

同样，当α位是完全未取代的（B＝CH₂）时，除了通过单加成形成的主反应化合物外，通过在α和γ位的双加成还形成了副产物（参见实施例3）。

A是（CH＝CH）_n-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_p-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_t-C（O）-CHX³，S（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-C（O）-CHX³或S-CX⁴X⁵-C（O）-CHX³

B是CH₂，CH-X⁶或C-X⁶X⁷

在图3中所描述的方法在于使式Ⅶ酯与酮基膦酸酯Ⅴ的二价阴离子在γ位缩合。该二价阴离子是通过Ⅴ与一当量氢化钠和过量较强的碱，例如正丁基锂或二异丙基氨基锂（LDA）在四氢呋喃中在-30℃至30℃温度下的分步反应而产生的。然后使过量二价阴离子与酯Ⅶ在-70℃至30℃的温度下反应，生成图3所示的酮基膦酸酯（Ⅰ）。

在其结构中具有两个酮基的化合物（Ⅰ）在溶液中可处于与烯醇式的互变异构平衡中。化合物（Ⅰ）的二酮和烯醇式是本发明的组成部分。

A是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³或S（CH₂）_t-（CH＝CH）_n或S-CX⁴X⁵

B是CH＝CH-CX⁶X⁷或CH＝CH-（CH₂）_p

其中D是A-C（O）-B，其中A是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S（CH₂）_t-（CH＝CH）_n或S-CX⁴X⁵，B是CH＝CX⁶X⁷或CH＝CH-（CH₂）_p的式（Ⅰ）化合物的制备方法在于使式Ⅷa或Ⅷb的醛与磷试剂反应，磷试剂可以是式Ⅸ膦酸酯化合物或式Ⅹ鏻盐：

该反应在醚溶剂，如二甲氧基乙烷或四氢呋喃中，在碱如氢化钠或二异丙基氨基锂的存在下进行。

D是A-CH（OH）-B

上述式（Ⅰ）的酮基膦酸酯类化合物可被还原为相应的羟基膦酸酯衍生物。所述还原反应可以用复合氢化物试剂如硼氢化钠、硼氢化锂、双（2-甲氧基乙氧基）氢化铝钠、三甲氧基硼氢化钠、氰基硼氢钠进行。

适宜的溶剂包括醚、四氢呋喃、甲苯、甲醇、乙醇、异丙醇。优选的还原反应条件是在甲醇中的硼氢化钠，在-20℃至65℃的温度下。

D是A′-CH（O-CO-X⁸）-B′

可以用已知方法将上述羟基膦酸酯类化合物酯化为相应的酰氧基-膦酸酯衍生物。适宜的反应条件包括在叔胺如三乙胺或吡啶存在下将羟基膦酸酯类化合物与适当的酸酐（X⁸-CO）₂O或适当的酰氯X⁸-CO-Cl加热。所述反应温度可以在0℃至所述酰化剂沸点之间变化。

D是A-CH₂-B，（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-（CH₂）_t，S-（CH₂）_t

通过对甲苯磺酰腙衍生物与硼氢化钠、氰基硼氢钠或儿茶酚硼烷的还原反应，可以将酮基膦酸酯类化合物（Ⅰ）还原为相应的烷基膦酸酯类化合物和链烯基膦酸酯类化合物。

其中Z¹＝Z²＝OH的结构式（Ⅰ）的膦酸类的制备可以通过相应的膦酸酯类与溴三甲基硅烷反应，生成双（三甲基甲硅烷基）膦酸酯类化合物，使其就地与水或甲醇反应。

起始化合物烷基膦酸酯类化合物Ⅲ是市场上可买到的。起始化合物酮基膦酸酯类化合物Ⅴ是根据已知的文献方法制备的：E.J.Corey和G.T.Kwiatkowski，J.Am.Chem.Soc.90，p.6816-6821（1968）和F.Mathey和P.Savignac，Tetrahedron 34，p.649-654（1978）。

L＝Cl或OEt M＝Li或Cu

新的式（Ⅰ）化合物的结构通过红外（IR）、质谱（MS）和核磁共振（NMR）光谱学来测定。化合物的纯度由元素分析和常规的色谱法来确证：薄层色谱法、气液色谱法或高性能液相色谱法。

该专利申请中所用的缩写如下：

表中n-为正，i-为异-，sec为仲-，t为叔。在NMR光谱中，s为单峰，d为双重峰，t为三重峰，m为多重峰。温度按摄氏度计，熔点未经校正。

通过所用的典型的合成方法实施例1至22进一步描述本发明。

实施例1

1，5-双（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-氧代-1，4-戊二烯-2-基膦酸二甲酯和

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯

在搅拌下将四氯化钛（114.5g，0.6mol）滴加到保持在-20℃氮气氛下的300ml无水四氢呋喃（THF）中。加入固体3，5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛（58.7g，0.25mol），然后加入200ml THF，再加入2-氧代丙基膦酸二甲酯（50g，0.3mol）。最后缓慢加入N-甲基吗啉（121.7g，1.2mol），将反应混合物在室温下搅拌1小时。加入冷水（200ml）并用1000ml乙醚萃取混合物。醚部分用水洗涤至达到中性pH，经硫酸镁干燥并真空蒸发。用98/2氯仿/甲醇混合物通过硅胶色谱法进行纯化。

从柱上洗脱的第一个化合物（5.5g，4%）鉴定为1，5-双（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-氧代-1，4-戊二烯-2-基膦酸二甲酯。

C₃₅H₅₁O₆P 理论值 %C70.21 %H8.59 %P5.17

实测值 %C69.96 %H8.55 %P5.31

mp＝190-191℃.

IR（KBr）：3620cm^-1∶OH，1610∶C＝O，1580∶C＝C，1430和1420∶t-Bu，1240∶P＝O，1020∶P-O-C

MS∶m/e＝599∶M⁺+1，598∶M⁺，488∶M⁺-H-PO₃Me₂，367（100%）

NMR（CDCl₃）

δ＝7.75（d，J＝26Hz，1H）：Ph-CH＝C-P

7.57（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH-

7.3和7.23（2s，各为2H）：芳 H

6.60（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.55和5.51（2s，各为1H）：OH

3.82（d，J＝11Hz，6H）：P-O-CH₃

1.40和1.34（2s，各为18H）：t-C₄H₉

通过IR、MS和NMR鉴定第二个化合物（36g，38%产率）为4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯

mp＝107-109°（石油醚，80-95 馏分）

IR（KBr）：3420cm^-1∶OH，1650∶C＝O，1590∶C＝C，1420∶t-Bu，1260∶P＝O和1030∶P-O-C

MS（m/e）：382M⁺，367：M⁺-Me，272：M⁺-HPO₃Me₂，259：M⁺-CH₂PO₃Me₂，151：M⁺-CO-CH₂-PO₃Me₂

NMR（CDCl₃）

δ＝7.61（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.42（s，2H）：芳 H

6.73（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.62（s，1H）：OH

3.81（d，J＝11Hz，6H）：P-O-CH₃

3.35（d，J＝22Hz，2H）CH₂-P

1.40（s，18H）：t-C₄H₉

C₂₀H₃₁O₅P 理论值 %C62.81 %H8.17 %P8.10

实测值 %C62.63 %H7.97 %P8.24

实施例2

1，5-双（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-氧代-1，4-戊二烯-2-基膦酸二乙酯和

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯

在-15℃将四氯化钛（137.1g，0.72mol）滴加到300ml无水THF中。加入3，5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛（70.4g，0.30mol），然后加入2-氧代丙基膦酸二乙酯（70g，0.36mol）。加入N-甲基吗啉（145.8g，1.44mol），并将反应混合物在室温搅拌2小时。加入200ml水和800ml乙醚进行处理。醚相用水洗涤至中性pH，经MgSO₄干燥并蒸发。残余物用98/2 CHCl₃/MeOH作洗脱剂通过硅胶色谱法纯化。

洗脱的第一个产物（15g，8%产率）被鉴定为1，5-双（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-氧代-1，4-戊二烯-2-基膦酸二乙酯。

C₃₇H₅₅O₆P 理论值 %C70.90 %H8.84 %P4.94

实测值 %C71.18 %H8.67 %P4.75

mp＝174-175℃

IR：（KBr）：3620cm^-1：OH，1640：C＝O，1585：C＝C，1430和1415：t-Bu，1230：P＝O和1030：P-O-C

MS：m/e＝626：M⁺，488：M⁺-HPO₃Et₂，395（100%）

NMR（CDCl₃）

δ＝7.7（d，J＝26Hz，2H）：Ph-CH＝C-P

7.59（d，J＝16Hz，2H）：Ph-CH＝CH

7.30和7.25（2s，各为2H）：芳 H

6.63（d，J＝16Hz，2H）：Ph-CH＝CH

5.54和5.48（2s，各为1H）：OH

4.18（五重峰，J＝7Hz，4H）：P-O-CH₂-CH₃

1.40和1.34（2s，各为18H）：t-C₄H₉

1.34（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

第二个产物被鉴定为4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯（44g，36%产率）。

mp＝110-111℃（用80-95馏分的石油醚重结晶）。

IR（KBr）：3620cm^-1：OH，1680：C＝O，1590：C＝C，1430和1415：tBu，1240：P＝O和1230：P-O-C

MS（m/e）：411：M⁺1，410：M⁺，272：M⁺-H-PO₃Et₂，259：M⁺-CH₂PO₃Et₂，57（100%）：tBu⁺

NMR（CDCl₃）

δ＝7.61（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.40（s，2H）：芳 H

6.74（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.6（s，1H）：OH

4.16（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

3.33（d，J＝23Hz，2H）：CH₂-P

1.45（s，18H）：t-C₄H₉

1.34（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

C₂₂H₃₅O₅P 理论值 %C64.37 %H8.59 %P7.55

实测值 %C64.52 %H8.65 %P7.36

实施例3

1，5-双（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-氧代-2-戊基膦酸二乙酯和

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-丁基膦酸二乙酯

在氮气氛下将氢化钠（1.45g 60%矿物油分散体，36.25mmol）悬浮在己烷中，将己烷吸移出来并代之以60ml无水THF。加入2-氧代丙基膦酸二乙酯（7.0g，36mmol）。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后冷却到0℃，再加入正丁基锂（37.5ml 1.6M溶液，60mmol）。最后加入3，5-二叔丁基-4-羟基苄基溴（9.0g，30.1mmol）的40ml THF溶液，将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过在150ml 15% HCl与两份150ml乙醚之间的分配进行处理。醚相用碳酸氢钠和饱和氯化钠洗涤至中性pH。干燥并蒸发溶剂后，粗混合物用柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化。

洗脱的第一个化合物（1.5g，8%产率）是1，5-双（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-氧代-2-戊基膦酸二乙酯，

mp＝60-61℃。

IR（KBr）：3620cm^-1：OH，1710：C＝O，1430：t-Bu，1230：P＝O和1010：P-O-C

MS：m/e＝630：M⁺，493：M⁺-HPO₃Et₂

NMR（CDCl₃）

δ＝6.89（2s，各为2H）：芳 H

5.09和5.03（2s）：OH

4.1（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

3.5和3.25（2m，2H）：Ph-CH₂-CH-P

3.04（txd，1H）：Ph-CH₂-CH（P）-CO

2.9-2.4（2m，4H）：Ph-CH₂-CH₂-CO-

1.14和1.39（2s，各为18H）：t-C₄H₉

1.32（2t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

第二个化合物是4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-丁基膦酸二乙酯：得到2.2g（18%产率）油状物，其放置时缓慢固化。

IR（液膜）：3620cm^-1：OH，1710：C＝O，1430：t-Bu，1250：P＝O，1010：P-O-C

MSm/e＝412：M⁺，274：M-HPO₃Et₂

NMR：（CDCl₃）

δ＝6.89（s，2H）：芳 H

5.1（s，1H）：OH

4.14（m，4H）：P-O-CH₂CH₃

3.05（d，J＝25Hz，2H）：CH₂-P

2.94（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂

2.83（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂

1.42（s，18H）：t-C₄H₉

1.32（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

实施例4

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯

根据V.Roussis和D.F.Wiemer，J.Org.Chem，54，p.627-631（1989）的方法，合成1，1-二甲基-2-氧代-丙基膦酸二乙酯（bp＝60°/0.2mbar）。

向保持在0℃的20ml无水THF中依次加入TiCl₄（1.72g，9mmol）、3，5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛（0.9g，3.8mmol）、1，1-二甲基-2-氧代丙基膦酸二乙酯（1.0g，4.5mmol）、N-甲基吗啉（1.82g，18mmol），然后将反应混合物在室温下搅拌1小时。按常规方式进行处理，得到的油状物通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化。得到1.1g（68%产率）标题化合物。Mp＝91-92℃（石油醚40-60）。

IR：（KBr）：3440cm^-1：OH，1670：C＝O，1590：C＝C，1430和1410：t-Bu，1210：P＝O和1030：P-O-C

MS：m/e＝439：M⁺+1，259：M⁺-C（CH₃）₂-PO₃Et₂，57（100%）：tBu

NMR：（CDCl₃）

δ＝7.66（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.43（s，2H）：芳 H

7.26（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.55（s，1H）：OH

4.15（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

1.50（d，J＝17Hz，6H）：-C（CH₃）₂-P

1.46（s，18H）：t-C₄H₉

1.32（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

C₂₄H₃₉O₅P 计算值 %C65.73 %H8.96 %P7.06

实测值 %C66.00 %H8.98 %P6.82

实施例5

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯

根据F.Mathey和P.Savignac，Tetrahedron 34，p.649-654（1978）的方法，制备2-氧代丁基膦酸二乙酯（bp＝90°/0.6mbar）。

向保持在0℃的20ml无水THF中依次加入TiCl₄（1.82g，9.6mmol）、3，5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛（0.94g，4mmol）、2-氧代丁基膦酸二乙酯（1g，4.8mmol）和N-甲基吗啉（1.86g，18.4mmol）。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后加热回流1小时。经常规处理和萃取后，粗反应混合物通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化。首先收集到少量未反应的苯甲醛，然后得到0.35g（21%）标题化合物。Mp＝97-101℃（石油醚40-60）。

IR（KBr）：3400cm^-1：OH，1680：C＝O，1610和1590：C＝C，1440：t-Bu，1250：P＝O和1020：PO-C

MS：m/e＝424：M⁺，409：M⁺-CH₃，367：M⁺-tBu，286：M⁺-HPO₃Et₂，57（100%）：tBu⁺

NMR（CDCl₃）：

δ＝7.56（s，1H）：Ph-CH＝C

7.33（s，2H）：芳 H

5.5（s，1H）：OH

4.16（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

3.51（d，J＝22Hz，2H）：CH₂-P

2.1（s，3H）：CH₃

1.46（s，18H）：t-C₄H₉

1.32（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

C₂₃H₃₇O₅P 计算值 %C65.07 %H8.79 %P7.30

实测值 %C65.35 %H8.58 %P7.51

实施例6

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-（正丁基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯

如实施例7中所述，将3，5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛（3.65g，15mmol）、2-氧代庚基膦酸二甲酯（4.0g，18mmol）、TiCl₄（6.84g，36mmol）和N-甲基吗啉（7.27g，72mmol）的混合物在80ml无水THF中回流。经柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化得到1.2g（20%产率）标题化合物。Mp＝82-85°（石油醚40-60）。

MS：m/e439M⁺+1，438M⁺，381M⁺-C₄H₉，57（100%）：tBu

NMR（CDCl₃）

δ＝7.48（s，1H）：Ph-CH＝C（C₄H₉）

7.32（s，2H）：芳 H

5.5（s，1H）：OH

3.81（d，J＝11Hz，6H）：P-O-CH₃

3.52（d，J＝22Hz，2H）：CH₂-P

2.57（m，2H）：CH₂-C₃H₇

1.5-1.4（m，4H）CH₂-（CH₂）₂-CH₃

1.5（s，18H）：t-C₄H₉

0.94（t，J＝7Hz，3H）：（CH₂）₃-CH₃

实施例7

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-苯基-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯

用实施例5所述方法，以2-氧代-3-苯基丙基膦酸二乙酯（bp＝150°/0.5mbar）作膦酸酯试剂。在常规条件下通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）分离出标题化合物，产率约18%。

mp＝139-143℃

IR（KBr）：3500：OH，1640：C＝O，1610和1590：C＝C，1430：t-Bu，1230：P＝O，1020：P-O-C.

MS：m/e＝486（100%）M⁺，348：M⁺-HPO₃Et₂，335：M⁺-CH₂PO₃Et₂

NMR：（CDCl₃）

δ＝7.70（s，1H）：Ph-CH＝C

7.45-7.25（m，5H）：C₆H₅

-6.97（s，2H）：芳 H

5.46（s，1H）：OH

4.15（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

3.33（d，J＝22Hz，2H）：CH₂-P

1.32（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

1.23（s，18H）：C₄H₉

C₂₈H₃₉O₅P 计算值 %C69.11 %H8.08 %P6.37

实测值 %C69.37 %H8.11 %P6.61

实施例8

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1-甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯

如实施例5所述根据Mathey和Savignac方法，制备1-甲基-2-氧代丙基膦酸二乙酯。

使3，5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛（7.19g，29mmol）、1-甲基-2-氧代丙基膦酸二乙酯（8.20g，35mmol）、TiCl₄（13.47g，71mmol）、N-甲基吗啉（14.34g，140mmol）的混合物在150ml无水THF中，在室温反应1小时，然后在回流温度下反应18小时。处理后，经柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化，得到4.7g（38%）标题化合物。

mp＝92-94℃

NMR（CDCl₃）

δ＝7.63（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.42（s，2H）：芳 H

6.87（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.6（s，1H）：OH

4.15（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

3.53和3.46（两组q，J＝24Hz和7Hz，1H）：CH-P

1.50-1.43（两组d，J＝7Hz）：CH-（P）-CH₃

1.46（s，18H）：C₄H₉

1.32（两组t，J＝7Hz）：P-O-CH₂CH₃

实施例9

在氮气氛-60℃下，将甲基膦酸二甲酯（3.17g，25.6mmol）加到正丁基锂（16ml 1.6M己烷溶液，25.6mmol）的15ml无水THF溶液中。将反应混合物在-50℃搅拌30分钟，使完全形成锂阴离子（微混浊）。将混合物再冷却至-60℃，并加入3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸乙酯（2.6g，8.5mmol）的20ml无水THF溶液。使所得橙色混合物在室温（25℃）搅拌18小时。加入10ml10% HCl溶液进行水解，并将产物萃取到乙醚中。经MgSO₄干燥后，蒸发乙醚得到黄色固体。用40-60石油醚重结晶，得到3.0g（92%产率）4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯。

mp＝107-109℃

也可以通过使用正丁基锂和LDA（二异丙基氨基锂）的混合物作为碱来制得标题化合物。在-60℃下向正丁基锂（16ml 1.6M溶液，25.6mmol）的20ml无水THF溶液中加入二异丙胺（0.86g，8.5mmol）。所得混合物在-40℃搅拌15分钟，然后加入甲基膦酸二甲酯（2.11g，17mmol）。15分钟后，加入3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸乙酯（2.6g，8.5mmol），将反应混合物在室温（25℃）搅拌15小时。加入10% HCl处理并萃取到乙醚中，得到3.10g（95%）4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯。

mp＝107-109℃

由这两种方法之一所制备的化合物具有与实施例1所述同一产品相同的光谱数据。

C₂₀H₃₁O₅P 理论值 %C62.81 %H8.17 %P8.10

实测值 %C62.56 %H8.21 %P8.24

实施例10

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3，5-己二烯-1-基膦酸二乙酯

向保持在0℃的15ml无水THF中加入TiCl₄（1.23g，6.47mmol）、3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂醛（0.7g，2.67mmol）、1，1-二甲基-2-氧代丙基膦酸二乙酯（0.72g，3.24mmol）和N-甲基吗啉（1.31g，12.97mmol）。将反应混合物在20℃搅拌1小时，然后在30℃搅拌1小时。处理后得到暗色油状物，将其通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化。得到650mg（52%）黄色结晶，mp＝130-133℃。

NMR（CDCl₃）

δ＝7.40（dxd，J＝11和15Hz，1H）：Ph-CH＝CH-CH＝CH

7.2（s，2H）：芳 H

6.87和6.85（2d，J＝15Hz，2H）：Ph-CH＝CH-CH＝CH

6.75（dxd，J＝11.5和16Hz，1H）：Ph-CH＝CH-CH＝CH

5.4（s，1H）：OH

4.1（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

1.40（d，J＝16Hz，6H）：C（CH₃）₂

1.39（s，18H）：t-C₄H₉

1.24（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

MS：m/e＝464：M⁺，326：M⁺-HPO₃Et₂，285（100%）：M⁺-CMe₂-PO₃Et₂

C₂₆H₄₁O₅P 计算值 %C67.22 %H8.90 %P6.67

实测值 %C66.68 %H8.56 %P6.21

实施例11

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-丁基膦酸二甲酯

在氮气氛-60℃下，向正丁基锂（16ml 1.6M己烷溶液，25.6mmol）的15ml无水THF溶液中加入甲基膦酸二甲酯（3.2g，25.6mmol），以制备锂甲基膦酸二甲酯溶液。在-60℃向此溶液中加入3，5-二叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸乙酯（2.6g，8.5mmol）的20ml THF溶液。所得溶液在-60℃搅拌30分钟，然后使其达到室温（25℃）过夜。加入25ml 10% HCl，混合物用乙醚萃取。醚相的残余物通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化，得到白色固体。在石油醚中重结晶，得到2.1g（64%产率）标题化合物。

mp＝78-79℃

MS：m/e＝384：M⁺，284：M⁺-HPO₃Me₂，57（100%）：tBu⁺

NMR（CDCl₃）

δ＝6.98（s，2H）：芳 H

5.06（s，1H）：OH

3.75（d，J＝11.5Hz，6H）：P-O-CH₃

3.08（d，J＝22.5Hz，2H）：CH₂-P

2.90（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂

2.81（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂

1.41（s，18H）：t-C₄H₉

实施例12

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-5-己烯-1-基膦酸二乙酯

在氮气氛室温下，将2-氧代丙基膦酸二乙酯（3.4g，17mmol）加入氢化钠（0.82g 60%分散体，20mmol）在35ml无水THF中的悬浮液中。混合物在室温搅拌60分钟，然后在0℃加入二异丙胺（1.71g，17mmol），再加入正丁基锂（21ml 1.6M溶液，34mmol）。在0℃保持30分钟后，将混合物冷却到-60℃并滴加3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸乙酯（2.6g，8.5mmol）的25ml THF溶液。所得混合物在0℃搅拌2小时，在25℃搅拌1小时，用60ml H₂O水解，使其分成两相。水相用10% HCl酸化，并用两份100ml乙醚萃取。将乙醚萃取液与THF相合并，干燥并蒸发。残余物通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化，得到粘稠橙色油状物。在石油醚中重结晶，得到2.25g（60%产率）标题化合物，mp＝109-110℃。

NMR（CDCl₃）

δ＝7.60（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.37（s，2H）：芳 H

6.35（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.83（s，1H）：CO-CH＝C-OH

5.54（s，1H）：苯酚 OH

4.17（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

3.02（d，J＝22Hz，2H）：CH₂-P

1.46（s，18H）：t-C₄H₉

1.34（t，J＝7Hz，3H）：P-O-CH₂-CH₃

MS：m/e452M⁺，314M⁺-HPO₃Et₂，57（100%）tBu

实施例13

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-1-己基膦酸二乙酯

在室温下将2-氧代丙基膦酸二乙酯（2.02g，10mmol）加入到悬浮于30ml THF中的氢化钠（0.48g 60%分散体，12mmol）中。30分钟后将混合物冷却到0℃并加入二异丙胺（1.01g，10mmol）和正丁基锂（13ml 1.6M溶液，21mmol）。30分钟后将混合物冷却到-60℃，并加入溶于15ml THF中的3，5-二叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸乙酯（1.6g，5.2mmol）。使混合物在-60℃反应15分钟，然后在0℃反应2小时，在25℃反应1小时，并用10% HCl水解，用乙醚萃取。用柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化得到1.0g（42%）标题化合物，为无色混合物。

NMR（CDCl₃）

δ＝6.98（m，2H）：芳 H

5.70（s，1H）：CO-CH＝C-OH

5.09（s，1H）：苯酚 OH

4.15（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

2.92（d，J＝22.5Hz，2H）：CH₂-P

2.85（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂

2.59（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂

1.43（s，18H）：t-C₄H₉

1.33（t，J＝7Hz，6H）：P-O-CH₂-CH₃

MS：455M⁺+1，454M⁺，436M⁺-H₂O，57（100%）tBu

实施例14

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-5-己烯-1-基膦酸二甲酯

按照实施例12所述方法，用2-氧代丙基膦酸二甲酯，得到标题化合物，产率79%，为黄色固体，mp＝145-146℃。

实施例15

2-[4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基]（2-氧代-1，3，2-二氧杂磷杂环己烷（dioxaphosphorinan））

在氮气氛下，将溶于THF/二噁烷（各30ml）中的2-甲基-2-氧代-1，3，2-二氧杂磷杂环己烷（2.62g，19.2mmol）加入到在-60℃下在35ml THF中的等摩尔量的正丁基锂中。将混合物在-60℃搅拌30分钟，然后加入3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸乙酯（2g，6.4mmol）的20ml THF溶液。所得混合物在-60℃下搅拌30分钟，使之达到室温（25℃）历经16小时。常规处理后，经柱色谱法（硅胶，98/2 CHCl₃/MeOH）纯化得到0.76g标题化合物（30%）。

mp＝158-161℃

MS：m/e＝394M⁺，57（100%）：tBu

NMR（CDCl₃）：

δ＝7.65（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.42（s，2H）：芳 H

6.74（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.7（s，1H）：OH

4.5-4.4（大 m，2H）：P-O-CH₂

3.45（d，J＝22Hz）：CH₂-P

2.1和2.0（2m，2H）：P-O-CH₂-CH₂

1.45（s，18H）：t-C₄H₉

实施例16

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基）-4-氧代-2-丁烯-1-基膦酸二乙酯

向730mg 60%氢化钠（18mmol）在20ml THF中的悬浮液中加入在25ml THF中的3.0g（8.4mmol）2-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-乙基膦酸二甲酯。将混合物搅拌30分钟，然后使其冷却到0℃并加入3.1g（18mmol）甲酰基甲基膦酸二乙酯。将所得混合物在0℃搅拌1小时，然后在25℃搅拌16小时，使其分配进入乙醚和水中，将有机相蒸发。通过柱色谱法（硅胶，98/2二氯甲烷/甲基叔丁基醚）纯化，得到550mg（16%）标题化合物。

mp＝68-70℃

MS＝m/e：410M⁺，395：M⁺-CH₃，272：M⁺-HPO₃Et₂，

233（100%）M⁺-CH＝CH-CH₂PO₃Et₂

NMR：CDCl₃

δ＝7.83（m，2H）：芳 H，

7.1（dd，J＝15和4.5Hz，1H），Ph-CO-CH＝CH

6.9（m，2H）：Ph-CO-CH＝CH

5.7（s，1H）：OH

4.15（m，4H）：P-O-CH₂-CH₃

2.86（dd，J＝23和7Hz）：CH₂-P

1.48（s，18H）：t-C₄H₉

1.34（t，6H）：P-O-CH₂-CH₃

实施例17

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-羟基-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯

向冷却到-10℃的4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯（1.9g，5mmol）的100ml甲醇溶液中加入0.75g硼氢化钠。将反应混合物在-10℃搅拌1小时，然后在室温（25℃）搅拌2小时。加入100ml乙醚和60ml碳酸氢钠溶液进行处理。乙醚相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并蒸发，得到1.6g（85%）标题化合物。

mp＝122-123℃

MS（m/e）＝384：M⁺，366：M⁺-H₂O，256：M⁺-H₂O-HPO₃Me₂

NMR（CDCl₃）：

δ＝7.21（s，2H）：芳 H

6.59（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH，

6.08（dd，J＝16和6Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.26（s，1H）：OH（苯酚）

4.7（m，1H）：CH-OH

3.78（2xd，6H）：PO₃Me₂

3.4（巅峰值1H）：CH-OH

2.15（畸变的dd，2H）：CH₂-P

1.44（t，18H）：t-C₄H₉

实施例18

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基硫羰膦酸二甲酯

在氮气氛-60℃下，将甲基硫羰膦酸二甲酯（3.1g，25mmol）加入到正丁基锂（16ml 1.6M溶液，25.6mmol）的50ml THF溶液中。混合物在-60℃搅拌15分钟，然后加入3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸乙酯（2.5g，8.2mmol）的20ml THF溶液。将所得混合物在-60℃下搅拌30分钟，在室温（25℃）搅拌2小时。经常规水解并处理后，通过柱色谱法（SiO₂，9/1 CHCl₃/AcOEt）纯化化合物，并在CHCl₃/石油醚中重结晶，得到1.7g（52%）黄色固体，mp＝88-90℃。

MS：m/e＝398：M⁺，259：M⁺-CH₂P（S）（OMe）₂，125：P（S）（OMe）₂，57（100%）

NMR（CDCl₃）

δ＝7.60（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

7.42（s，2H）：芳 H

6.75（d，J＝16Hz，1H）：Ph-CH＝CH

5.6（s，1H）：OH

3.78（d，J＝14Hz，6H）：P（S）-OCH₃

3.56（d，J＝20Hz，2H）：CH₂-P

1.46（s，18H）：t-C₄H₉

C₂₀H₃₁O₄PS 理论值 %C60.28 %H7.84 %P7.77 %S8.04

实测值 %C60.58 %H8.04 %P8.05 %S8.30

实施例19

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2-氧代-1-丙基膦酸二甲酯

向保持在-60℃的锂甲基膦酸二甲酯（24.6mmol）的THF溶液中加入3，5-二叔丁基-4-羟基苯基硫代乙酸乙酯（2g，6.2mmol）的15ml THF溶液。将所得混合物在-60℃搅拌30分钟，使其达到室温（25℃）历经4小时。加入15ml 10% HCl后，将反应混合物在乙醚和水之间分配。蒸发有机相后，残余物通过柱色谱法（SiO₂，8/2，CHCl₃/AcOEt）纯化，在石油醚中重结晶，得到0.95g标题化合物（38%）。

mp＝63-65℃

MS：m/e402：M⁺，251：M⁺-（CO-CH₂-PO₃Me₂），57

NMR（CDCl₃）

δ＝7.21（s，2H）：芳 H

5.3（s，1H）：OH

3.75（d，J＝11Hz，6H）：P-O-CH₃

3.72（s，2H）：S-CH₂-CO

3.33（d，J＝22Hz，2H）：CH₂-P

1.41（s，18H）：t-C₄H₉

实施例20

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-3，3-二甲基-2-氧代-1-丙基膦酸二甲酯

向保持在-60℃的锂甲基膦酸二甲酯（68.2mmol）的10ml THF溶液中加入2-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基-2-甲基丙酸乙酯（6g，17.1mmol）的15ml THF溶液。将所得混合物在-60℃搅拌30分钟，使其达到室温（25℃）历经4小时。加入15ml 10%HCl后，使反应混合物在乙醚和水之间分配。蒸发有机相后的残余物通过柱色谱法（SiO₂，8/2 CHCl₃/AcOEt）纯化。在石油醚中重结晶得到4.16g标题化合物（57%）。

mp＝105-106℃

MS：m/e430：M⁺，279：M⁺-（CO-CH₂-PO₃Me₂），194（100%），57

NMR（CDCl₃）

δ＝7.15（s，2H）：芳 H

5.38（s，1H）：OH

3.80（d，J＝11Hz，6H）：P-O-CH₃

3.46（d，J＝22Hz，2H）：CH₂-P

1.41（m，24H）：t-C₄H₉+C（CH₃）₂

实施例21

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，3-丁二烯-1-基膦酸二甲酯

将4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-羟基-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯（2.3g，6mmol）的混合物在1.70ml乙酐和1.26ml三乙胺中在60℃搅拌3小时。用10ml H₂O水解后，反应混合物用20ml乙醚萃取。乙醚相用10% HCl萃取并经MgSO₄干燥。蒸发后的残余物通过柱色谱法纯化，得到1.0g（46%）标题化合物。

mp＝113-115℃

MS：m/e：366M⁺，351M⁺-Me，57（tBu）

NMR（CDCl₃）

δ＝7.32-7.20（m，3H）：芳 H+CH＝CH-CH＝CH-P

6.82（1H，d）：-CH＝CH-CH＝CH-P

6.74-6.66（1H，m）CH＝CH-CH＝CH-P

5.67（1H，dd，J＝16.6和19.5Hz）：CH＝CH-CH＝CH-P

3.75（d，6H）：PO-CH₃

1.46（19H，s）：t-C₄H₉

实施例22

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-（4-戊烯酰氧基）-1-丁基膦酸二甲酯

向乙酰基-4-戊烯酸酯（0.66g，4.6mmol）和三乙胺（0.24ml，1.7mmol）的混合物中加入0.50g（1.37mmol）4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-羟基-1-丁基膦酸二甲酯。反应混合物在60℃保持6小时，冷却并萃取进入乙醚和水中。干燥过的有机相之残余物通过柱色谱法（SiO₂，7/3 CHCl₃/甲基叔丁基醚）纯化，得到0.4g无色油状物（62%）。

MS：m/e：468：M⁺，368：M⁺-CH₂＝CH-CH₂-COOH，258：368-HPO₃Me₂

NMR（CDCl₃）

δ＝6.94（s，2H）：芳 H

5.85（m，1H）：CH₂＝CH-CH₂-CH₂-COO

5.18（m，1H）：Ph-CH₂-CH₂-CH-CH₂-P

5.0-5.1（m，2H）：CH₂＝CH-CH₂-CH₂-COO

5.15（s，1H）：OH（苯酚）

3.72（2xd，6H）：PO₃Me₂

2.55（m，2H）：Ph-CH₂-CH₂-CH-CH₂-P

2.41（m，4H）：CH₂＝CH-CH₂-CH₂-COO-

1.43（s，18H）：t-C₄H₉

表1：式（Ⅰ）膦酸酯类化合物

表1：式（Ⅰ）膦酸酯类化合物（续）

生物活性

A.抗氧化剂活性

1）在大鼠肝组织匀浆中铁诱导的过氧化物形成

通过醚吸入法使Wistar大鼠安死。解剖出肝脏，并用陶制匀浆器将肝脏在4体积磷酸盐缓冲液（4℃，pH7.4）中匀化。以2000rpm离心10分钟后，所得上清液保存在4℃下。

按照A.T.Quintanilha等人在Ann.N.Y.Acad.Sci.，393，32-47，1982中所述的方法，将含有0.2ml肝组织匀浆、1.7ml磷酸盐缓冲液的混合物用0.1ml 2mM FeSO₄溶液培养，以诱导过氧化物的形成。

将待试验抗氧化剂活性的化合物溶于DMSO或乙醇中，并以5ml体积加入到培养混合物中。将化合物储液依次稀释得到最终浓度为0.5、1、2、5和5μM。在37℃进行氧化作用2小时，并通过加入20μl 2% BHT的乙醇溶液使氧化作用停止。按照Yagi的方法（“Lipid Peroxides in Biology and Medicine”p.223-242，1982，Ed.K.Yagi，Academic Press Inc.），用硫巴比土酸反应并用1，1，3，3-四甲氧基丙烷作标准物，定量测定产生的过氧化物，即测定丙二醛的形成。结果以抑制50%丙二醛形成的浓度（IC₅₀）形式给出，单位为μmol/l。

所有试验化合物的IC₅₀均在0.5至5μM之间，它们比普罗布考、维生素E和维生素C的活性更大。在该测定中丁基羟基甲苯（BHT）的IC₅₀为3.3μM。因此式（Ⅰ）化合物可用于治疗有氧活性基团参与的疾病状态。

表2

对铁诱导的大鼠肝组织匀浆氧化作用

的抑制作用

2）对人低密度脂蛋白（LDL）的铜氧化作用

将供血者的血液低速离心后得到血浆。通过在盐溶液（NaBr，KBr）中的制备性超速离心法分离得到LDL（d＝1.006-1.063g/ml）。使分离的LDL部分经磷酸盐缓冲液渗析。

根据Esterbauer等人的方法（Continuous Monitoring of in Vitro Oxidation of Human Low Density Lipoprotein，Free Rad.Res.Commun.6，67-75，1989）进行LDL氧化作用。简短地说，将LDL悬浮液（50-200μg蛋白/ml）分配在小石英杯中并保持在37℃，然后以5μM最终浓度加入CuCl₂溶液。用紫外可见光分光光度计记录在235nm处光密度的增加。以10分钟为间隔记录8小时期间内的氧化作用之时间曲线。将试验化合物溶于乙醇中，并以0.1μM最终浓度加入。对照样只接受乙醇。由于抗氧化剂的存在使迟滞期延长。用普罗布考和维生素E作对照抗氧化剂来证实该方法。

迟滞期的延长被用来定量测定试验化合物的抗氧化剂活性。这种延长作用以不存在外源抗氧化剂（对照样）时的测定值的百分比表示。

与对照样相比表3中所示的式（Ⅰ）膦酸酯类化合物延长了迟滞期。因此这便证实了对LDL氧化作用的抑制活性，它明显地优于普罗布考和维生素E的抑制活性。由于在动物模型中已表明这两种抗氧化剂是抗动脉粥样硬化的，因此式（Ⅰ）膦酸酯类化合物的治疗潜能是显而易见的。

表3

对铜诱导的LDL氧化作用的抑制作用

B.对胆固醇和胆固醇酯类合成的抑制作用

将人肠细胞系CaCo₂细胞（ATCC HTB37）用于研究式（Ⅰ）化合物对胆固醇合成的作用。在6井皿（Falcon）中使所述细胞在加有20%胎儿腓肠血清（Flow）的2ml Dulbecco′s改性伊格尔培养基（DMEM）中生长。将细胞保持在37℃及5% CO₂气氛中，在细胞培养后8天进行标记实验。向培养物中加入10μl试验化合物的乙醇溶液。对照井只接受10μl乙醇。1小时以后加入0.7μCi的14-C-乙酸酯53.4mCi/mmol，继续标记4小时，通过用冷冻的PBS洗涤细胞层使标记停止。将细胞收集在2ml 0.01N NaOH和1ml PBS中。用Folch方法萃取类脂类并在硅胶TLC平板上分离，用石油醚∶乙醚∶乙酸（70∶30∶0.5）展开。暴露于碘蒸气之后，刮掉对应于胆固醇和胆固醇酯类的谱带，在液体闪烁计数器中测定放射性。

将在试验化合物存在下结合在胆固醇和胆固醇酯类中的放射性的量与对照样细胞的放射性量比较。HMGCoA还原酶抑制剂如simvastatin（1μM）用于确证结合在胆固醇和胆固醇酯类中的¹⁴C-乙酸酯的测定。所有试验化合物均抑制胆固醇和胆固醇酯类的合成。大多数化合物对胆固醇酯类合成的抑制率大于50%（表4）。式（Ⅰ）膦酸酯类表现出对胆固醇和胆固醇酯类的抑制活性，并可以作为治疗血脂过多和动脉粥样硬化的治疗剂。

表 4

对胆固醇和胆固醇酯类合成的抑制作用

C.酮基膦酸酯类化合物的钙通道阻断活性

将雄性Sprague-Dawley大鼠（体重280-350g）通过打晕并放血而处死，对其主动脉环进行实验。清除掉鼠胸主动脉的结缔组织，并将该主动脉切成长约2mm的环。将每个环于2g静止张力下置于载片上，使其在37℃下在10ml器官浴中平衡1小时，所述器官浴含有用95%O₂：5%CO₂充气的HEPES缓冲林格溶液（缓冲液组成（mM）：NaCl 139.0，KCl 5.0，MgCl₂3.7，D-葡萄糖11.0，HEPES 5.0，pH7.4）。

在暴露于10μM脱羟肾上腺素5-10分钟之内产生最大收缩。然后将组织用无Ca⁺²HEPES缓冲液洗涤。30分钟后用KCl（60mM）使组织去极化。5分钟以后加入100μl载体（10% DMSO）或化合物溶液（1μM）。DMSO的最终浓度是1%。在累积加入Ca⁺²（0.1-30mM）之前将组织（每个化合物n＝2）在化合物存在下再平衡15分钟。用第二次脱羟肾上腺素收缩的百分比来计算对每个钙浓度的收缩，并计算EC₃₀（产生脱羟肾上腺素收缩的30%收缩的Ca²⁺浓度）。每一化合物的效能指数以浓度比表示（钙药EC₃₀/载体EC₃₀），其中效能指数＞1表明化合物有效。

因此，式（Ⅰ）化合物通过其钙通道阻断活性可有效地用于治疗心血管疾病。这些化合物的主要适应征是治疗动脉粥样硬化、心绞痛、充血性心力衰竭和高血压。

表 5

化合物（Ⅰ）对Ca⁺²诱导的K⁺

去极化的大鼠主动脉收缩的作用

Claims

1、式(Ⅰ)化合物及其盐、溶剂化物和水合物：

其中

-X¹、X²，可相同或不同，是直链或支链C₁-C₅烷基，

-Y是O或S，

-Z¹、Z²，可相同或不同，是：

-OR，其中R是H、直链或支链C₁-C₆烷基，

-NR¹R²，其中R¹、R²可相同或不同，是H或直链或支链C₁-C₅烷基，

-Z¹、Z²可一起形成C₂-C₈亚烷基二氧基，

-G是OH或其生物前体；

D是饱和或不饱和的C₁-C₁₁亚烷基链，其中一个或多个亚甲基可以被硫原子、氧原子、羰基代替；任意一个或多个亚甲基可以被一个或多个卤原子(F、Cl或Br)、C_1-6烷基、苯基、羟基或酰氧基取代。

2、根据权利要求1的式（Ⅰ）化合物，其中：

D是A-C（O）-B，A-CH（OH）-B，A-CH₂-B，（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-（CH₂）_t或S-（CH₂）_t，其中

（CH＝CH）_n-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_p-CH＝CH-C（O）-CHX³，

（CH₂）_t-C（O）-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-C（O）-CHX³，S-CX⁴X⁵-C（O）-CHX³，

（CH＝CH）_n-CH＝CH-CH（OH）-CHX³，（CH₂）_p-CH＝CH-CH（OH）-CHX³，

S-CX⁴X⁵-CH（OH）-CHX³，

其中n是0、1或2，t是0至4的数字，p是1至3的数字，

-X³是H、直链或支链C₁-C₅烷基、取代或未取代的苯基，

-X⁴、X⁵可相同或不同，是H、直链或支链C₁-C₄烷基，

当A是（CH₂）_t、（CH＝CH）_n-CH＝CX³、（CH₂）_t-CHX³、S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n、S-CX⁴X⁵时，则B还是CH＝CH-（CH₂）_p，CH＝CH-CHX⁶、CH＝CH-CX⁶X⁷，其中p和X⁶、X⁷如上所定义。

3、根据权利要求1的式（Ⅰ）化合物，其中D是A-C（O）-B，其中

A是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n，S-CX⁴X⁵，

S-CX⁴X⁵-CH（OH）-CHX³，和

其中n是0、1或2，t是0至4的数字，p是1至3的数字，

-X³是H、直链或支链C₁-C₆烷基、取代或未取代的苯基，

-X⁴、X⁵可相同或不同，是H、直链或支链C₁-C₄烷基，和

B是CH₂、CH-X⁶、X⁶-C-X⁷，其中X⁶和X⁷可相同或不同，是卤原子（F、Cl、Br）、直链或支链C₁-C₆烷基、取代或未取代的苯基;

当A是（CH₂）_t、（CH＝CH）_n-CH＝CX³、（CH₂）_t-CHX³、S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n、S-CX⁴X⁵时，则B还是CH＝CH-（CH₂）_p，CH＝CH-CHX⁶、CH＝CH-CX⁶X⁷，其中p和X⁶、X⁷如权利要求1中所定义。

4、根据权利要求1的式（Ⅰ）化合物，其中D是-ACH（OH）-B-，其中A和B如权利要求2所述。

5、根据权利要求1的式（Ⅰ）化合物，其中D是A′-CH（O-CO-X⁸）-B′，其中

A′是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n，S-CX⁴X⁵，和

B′是CH₂、CH-X⁶、X⁶-C-X⁷、CH＝CH-（CH₂）_p、CH＝CH-CHX⁶，CH＝CH-CX⁶X⁷，

其中t、n、p、X³、X⁴、X⁵、X⁶和X⁷如权利要求2所述，且X⁸是饱和或不饱和C₁-C₆烷基或链烯基链。

6、根据权利要求1的式（Ⅰ）化合物，它们选自：

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二异丙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二丁酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二异丙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1-甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1-甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-甲基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-（正丁基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-（正戊基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-苯基-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-苯基-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-丁基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-丁基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-1-丁基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-1-丁基膦酸二乙酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3，5-己二烯-1-基膦酸二乙酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3，5-己二烯-1-基膦酸二甲酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，1-二甲基-2-氧代-3，5-己二烯-1-基膦酸二乙酯，

2-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-乙基膦酸二甲酯，

N，N，N′，N′-四甲基4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酰胺，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-1-丁基膦酸二甲酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-5-己烯-1-基膦酸二甲酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-5-己烯-1-基膦酸二乙酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-1-己基膦酸二乙酯，

6-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二氧代-己基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-3-乙基-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二仲丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二仲丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-甲氧基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基硫羰膦酸二甲酯，

2-[4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-3-丁烯-1-基]（2-氧代-1，3，2-二氧杂磷杂环己烷），

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-4-氧代-2-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-4-氧代-2-丁烯-1-基膦酸二乙酯，

2-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-乙基膦酸二乙酯，

2-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-氧代-1-乙基膦酸二异丙酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2-氧代-1-丙基膦酸二甲酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2-氧代-1-丙基膦酸二乙酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-3，3-二甲基-2-氧代-1-丙基膦酸二甲酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-3，3-二甲基-2-氧代-1-丙基膦酸二乙酯，

5-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2，4-二氧代-1-戊基膦酸二甲酯，

5-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2，4-二氧代-1-戊基膦酸二乙酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-羟基-3-丁烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-羟基-1-丁基膦酸二甲酯，

2-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-羟基-1-乙基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2，4-二羟基-1-丁基膦酸二甲酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2-羟基-1-丙基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-1，3-丁二烯-1-基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-（乙酰氧基）-1-丁基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-（己酰氧基）-1-丁基膦酸二甲酯，

4-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯基）-2-（4-戊烯酰氧基）-1-丁基膦酸二甲酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2-（乙酰氧基）-1-丙基膦酸二甲酯，

3-（3，5-二叔丁基-4-羟基苯硫基）-2-（己酰氧基）-1-丙基膦酸二甲酯。

7、制备根据权利要求3的式（Ⅰ）化合物的方法，其中A是

（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n，S-CX⁴X⁵，其中n，t，X³，X⁴和X⁵如权利要求1中所述，该方法在于在-78℃至-40℃的温度下使烷基膦酸酯类化合物Ⅲ与正丁基锂或二异丙基氨基锂反应，然后在四氢呋喃中在-78℃至25℃的温度下，使如此形成的Ⅲ的锂盐就地与酯Ⅱ反应，

其中B是CH₂，CHX⁶，CX⁶X⁷，且X⁶、X⁷，Y，Z¹和Z²如权利要求1中所述，

其中X¹、X²、G如权利要求1中所述，且A是（CH₂）_t，（CH＝CH）_n-CH＝CX³，（CH₂）_t-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n或S-CX⁴X⁵。

8、制备根据权利要求3的式（Ⅰ）化合物的方法，其中A是（CH＝CH）_n-CH＝CX³，该方法在于在四氢呋喃中在四氯化钛和N-甲基吗啉存在下，在-20℃至66℃的温度下使式Ⅳ的醛与式Ⅴ的酮基膦酸酯反应，

其中G，X¹，X²，n如权利要求1中所述，

其中X³，B，Y，Z¹，Z²如权利要求1中所述。

9、制备根据权利要求3的式（Ⅰ）化合物的方法，其中A是（CH₂）_t-CHX³，该方法在于使化合物Ⅴ先与氢化钠和正丁基锂反应，然后与式Ⅵ的卤化物反应，

其中X³，B，Y，Z¹和Z²如权利要求1中所述，

其中G，X¹，X²，t如权利要求1中所述，

反应在四氢呋喃中在-30℃至四氢呋喃的沸点（66℃）的温度下进行。

10、制备根据权利要求3的式（Ⅰ）化合物的方法，其中A是（CH＝CH）_n-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_p-CH＝CH-C（O）-CHX³，（CH₂）_t-C（O）-CHX³，S-（CH₂）_t-（CH＝CH）_n-C（O）-CHX³或S-CX⁴X⁵-C（O）-CHX³，其中n，p，t，X³，X⁴和X⁵如权利要求1中所述，该方法在于在-78℃至0℃的温度下，使化合物Ⅴ先与氢化钠再与正丁基锂或二异丙基氨基锂反应，然后在四氢呋喃中在-60℃至25℃的温度下，与酯Ⅶ反应，

其中X³，B，Y，Z¹，Z²如权利要求1中所述，

其中E是（CH＝CH）_n-CH＝CH、（CH₂）_p-CH＝CH、（CH₂）_t或S（CH₂）_t-（CH＝CH）_n、S-CX⁴X⁵，n，p，t，X⁴，X⁵如权利要求1中所述。

11、制备根据权利要求4的式（Ⅰ）化合物的方法，该方法在于在甲醇、乙醇或异丙醇中在-20℃至所述溶剂沸点的温度下，用复合氢化物硼氢化钠或硼氢化锂还原酮官能基团。

12、制备根据权利要求5的式（Ⅰ）化合物的方法，该方法在于用适当的酸酐（X⁸CO）₂O或酰氯X⁸-CO′-Cl酯化相应的酰氧基-膦酸酯化合物。

13、一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的根据权利要求1的式（Ⅰ）化合物及与之混合的可药用载体。

14、用于治疗的权利要求1中要求保护的式（Ⅰ）化合物。

15、用于治疗动脉粥样硬化的权利要求1中要求保护的式（Ⅰ）化合物。