CN110567948A - 一种碘离子检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
一种基于在酸性条件下的碘催化砷铈反应,用Ferrion溶液作氧化还原指示剂的碘离子检测试剂盒。该试剂盒包括:消解液,为过硫酸铵或酸性高锰酸钾溶液;还原剂,为亚砷酸溶液;氧化剂,为四价铈溶液;指示剂,为Ferroin试剂溶液。本发明配有碘标准系列溶液且利用过硫酸铵或酸性高锰酸钾溶液作为消解液克服了氯酸消化的浓烟和易爆缺点。本发明具有简便、快速、特异、灵敏、准确等优点,可在需对样品碘含量检测的相关领域得到广泛的应用,特别是在卫生检验与医学检验领域的尿碘、水碘检测中应用。
Description
技术领域
本发明属于碘离子检测技术领域,涉及卫生检验与医学检验领域中检测尿碘、水碘的试剂及检测方法,具体涉及一种基于在酸性条件下,碘催化砷铈反应,用Ferrion溶液作氧化还原指示剂的碘离子检测试剂盒。
背景技术
在卫生与医学领域中对碘离子的检验主要是尿碘、水碘的检测。尿碘是碘缺乏病防治监测和人群碘营养水平评价的重要指标,已被国内外广泛采用。人群尿碘水平可反映人群的碘摄入是碘缺乏、碘适宜或碘过量,人群的尿碘水平监测是指导人群科学补碘的重要依据,具有重要的公共卫生意义。而对于妊娠期的妇女,碘缺乏可导致母亲和胎儿甲状腺激素合成减少,影响胎儿脑发育,导致智力降低。尿碘是控制孕妇碘缺乏的生物化学标志物,对评估孕妇碘营养状况具有重要意义。目前,尿碘测定的“过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度”在世界各国普遍采用,大批量尿碘检测时非常简便易行,但对于临床样本尿碘检测就显得操作复杂烦琐,试剂用量大,分析时间长,有害物质排放较多。本碘离子检测试剂盒采用的是一种简单、微量、快速和准确的尿碘定量测定方法,提高了测定微量碘的准确度和精密度,减轻检验人员操作强度负担,是目前对微量碘的卫生检验及医学检验技术发展的趋势。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处,提供了一种基于在酸性条件下,碘催化砷铈反应,用Ferrion溶液作氧化还原指示剂的碘离子检测试剂盒,克服了氯酸消化的浓烟和易爆缺点,具有灵敏、特异、测定准确度与精密度优良、操作简单快速的优点。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是一种碘离子检测试剂盒,包括:
消解液,为过硫酸铵〔(NH4)2S2O8〕溶液,过硫酸铵的浓度范围为0.5~2.0 mol/L;指示剂,为Ferroin试剂溶液,其中亚铁浓度范围为0.0001~1mol/L,邻菲啰啉浓度范围为0.0001~1mol/L;还原剂,为亚砷酸溶液,亚砷酸的浓度范围为0.020~0.065 mol/L;氧化剂,为硫酸铈铵溶液,硫酸铈铵的浓度范围为0.0001~0.01mol/L。
优选地,本发明的碘离子检测试剂和方法,应用于尿碘检测的具体过程详述如下:
1. 检测试剂:
试剂R1:过硫酸铵溶液,浓度范围为0.5~2.0 mol/L,优选浓度1.0mol/L;
试剂R2:Ferroin试剂溶液,其中亚铁浓度范围为0.0001~1mol/L,优选浓度0.025mol/L,邻菲啰啉浓度范围为0.0001~1mol/L,优选浓度0.020mol/L;
试剂R3:亚砷酸溶液,亚砷酸的浓度范围为0.020~0.065 mol/L,优选浓度0.040mol/L;
试剂R4:硫酸铈铵溶液,硫酸铈铵的浓度范围为0.0001~0.01mol/L,优选浓度0.008mol/L;
碘标准系列溶液:碘酸钾溶液,碘浓度分别为:50,100,200,300,400,500μg/L。
2. 检测方法:
(1)使用上述检测试剂。
(2)样品前处理:使用加样器准确移取碘标准系列溶液及尿样各 10~50μl 于 1mL 尖底离心管中,加消解液 50~250μL漩涡混合后置于干式恒温器90~110℃压盖消化15~20 min,冷却至 45℃后取下冷却至室温。于高速台式离心机10 000转离心2~4 s,打开盖子至反应产生的气体排尽为止。
(3)条件为:进样体积10~50μL、控温温度室温~45℃。
(4)测定:分别逐次向碘标准系列溶液待测液、待测液各加试剂R2和试剂R3,混匀后迅速加入试剂R4,同时启动专用检测仪计时。当溶液刚变为蓝紫色时,记录反应时间(s)。碘浓度 C(μg/L)与反应时间 s 之间呈如下线性关系,二者的关系式为:LnC=a+bLns 或LogC=a+bLogs 使用计算器以反应时间 s(秒)的对数值(Lns 或 Logs)对应标准浓度 C(μg/L)的对数值(LnC 或 LogC)作回归曲线,计算 a、b值,确定标准曲线的回归方程及相关系数。将样品管的反应时间 s 代入标准曲线的回归方程,求出样品碘含量(μg/L)。对超出碘标准系列溶液浓度范围的水样加纯水稀释后取稀释样测定,结果乘此稀释倍数。
3.专用检测仪
(1) 结构包括:光源、离心管放置装置、感光器和计时器,其中光源为氘灯或钨灯。
(2) 原理:在检测方法步骤中迅速加入试剂R4,同时启动专用检测仪计时,过程原理为光源发出的光透过离心管传递给感应器,感应器接收到光源信息的同时,连接感应器的计时器开始计时。当测定波长的吸光度发生明显且陡直的变化时,即溶液变为蓝紫色时,计时器自动停止计时。测定波长为460~550nm。
本技术方案与背景技术相比,它具有如下优点:
本发明公开了基于在酸性条件下,碘催化砷铈反应,用Ferrion溶液作氧化还原指示剂的碘离子检测试剂盒,在酸性介质在酸性条件下,碘催化砷铈反应,反应速度与碘的浓度有正相关关系,用硫酸三邻菲罗啉合铁(II)(Ferrion)溶液作氧化还原指示剂,用专用检测仪记录氧化还原进行到终点即当溶液刚变为蓝紫色时所用时间(s),则时间 s 与碘浓度 C有对数线性关系,由碘标准曲线可计算得样品碘含量。
本技术方法建立的优点在于以下几个方面:
1.过硫酸铵消化测定尿碘克服了氯酸消化的浓烟和易爆缺点;
2.采用的一次性塑料微量离心管,消化体积控制在 200μL 消化系统密闭,防止了蒸气泄露;
3.使所有样品的消化体积一致,从而保证了结果的准确性;
4.由于采用了密闭小体积加样,提高了消化效率,因此探讨了消化时间对结果的影响,确定了消化时间范围;
5. 配有碘标准系列溶液,保证每一次结果的可靠性。
本发明的检测试剂盒具有简便、快速、特异、灵敏、准确等优点,可望在需对样品碘含量检测的相关领域得到广泛的应用,特别是在卫生检验与医学检验领域的尿碘、水碘检测中应用。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1为实施例1中标准曲线的回归曲线。
图2为专用检测仪示意图。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容:
实施例:检测尿中碘含量
应用本发明的碘离子检测方法和试剂进行测定。
(1) 试剂
(1.1)试剂R1:过硫酸铵溶液,浓度为1.0mol/L;
(1.2)试剂R2:Ferroin溶液,其中硫酸亚铁铵浓度0.025mol/L、邻菲啰啉浓度0.020mol/L;
(1.3)试剂R3:亚砷酸溶液,浓度0.040mol/L;
(1.4)试剂R4:硫酸铈铵溶液浓度0.008 mol/L;
(1.5)碘标准系列溶液:碘酸钾溶液,碘浓度分别为:50,100,200,300,400,500μg/L。
(2)待测液:取碘标准系列溶液及尿样各25μL分别置于 1 mL 尖底离心管中,加试剂R1 125μL漩涡混合后置于干式恒温器100℃压盖消化 15 min,冷却至 45℃后取下冷却至室温。于高速台式离心机10 000转离心2 s,打开盖子至反应产生的气体排尽为止。
以下操作在专用检测仪上进行:
(2) 测定:分别逐次向碘标准系列溶液待测液、待测液各加试剂R2和试剂R3,混匀后迅速加入试剂R4,同时启动专用检测仪计时。当溶液刚变为蓝紫色时,记录反应时间(s)。碘浓度 C(μg/L)与反应时间 s 之间呈如下线性关系,二者的关系式为:LnC=a+bLns 或 LogC=a+bLogs 使用计算器以反应时间 s(秒)的对数值(Lns 或 Logs)对应标准浓度 C(μg/L)的对数值(LnC 或 LogC)作回归曲线,计算 a、b值,确定标准曲线的回归方程及相关系数。将样品管的反应时间 s 代入标准曲线的回归方程,求出样品碘含量(μg/L)。对超出碘标准系列溶液浓度范围的水样加纯水稀释后取稀释样测定,结果乘此稀释倍数。
(3) 结果计算:碘浓度 C(μg/L)与反应时间 s 之间呈如下线性关系,二者的关系式为:LnC=a+bLns 或 LogC=a+bLogs。计算碘标准曲线回归方程,尿样待测液测定吸光度代入此式计算尿样碘含量。
(4) 测定50~500μg/L碘典型的标准曲线反应时间见表1,碘标准曲线回归方程:LnC=13.5-2.28Lns,相关系数为0.9999。
表1测定0~500μg/L碘标准曲线反应时间
碘浓度(μg/L) | 50 | 100 | 200 | 300 | 400 | 500 |
反应时间(s) | 68.58 | 50.72 | 37.36 | 31.51 | 27.46 | 25.09 |
(5)测定尿碘的精密度:取中浓度尿样,分别加入到不同浓度的碘标准作回收实验,每次平行测定,重复测定 3 次,结果见表 2。回收率范围为 80.0% ~106.0%,平均为 97.8%。取一尿样分成 10 份,每天测定一份,连测 11 天,日间变异系数为 4.4%。
表 2标准加入回收实验标准浓度回收率(% )
加标碘浓度(μg/L) | 50 | 100 | 200 | 300 | 400 | 500 |
回收率(%) | 80 | 102 | 97 | 100 | 106 | 102 |
Claims (8)
1.一种碘离子检测试剂盒,其特征在于,试剂包括:
消解液,为过硫酸铵或酸性高锰酸钾溶液;还原剂,为亚砷酸溶液;氧化剂,为四价铈溶液;指示剂,为Ferroin试剂溶液。
2.根据权利要求1所述的碘离子检测试剂盒,其特征在于:所述的消解液过硫酸铵或酸性高锰酸钾溶液,其浓度范围为0.5~2.0 mol/L;还原剂亚砷酸溶液,其浓度范围为0.020~0.065mol/L;氧化剂四价铈溶液,其浓度范围为0.0001~0.01mol/L;指示剂Ferroin试剂溶液,其中亚铁为硫酸亚铁或硫酸亚铁铵,浓度范围为0.0001~1mol/L,邻菲啰啉浓度范围为0.0001~1mol/L。
3.根据权利要求1所述的碘离子检测试剂盒,其特征在于:含有碘标准系列溶液,浓度为50、100、200、300 、 400和500μg/L。
4.原理:在酸性条件下,碘催化砷铈反应,反应速度与碘的浓度有正相关关系,用硫酸三邻菲罗啉合铁(II)(Ferrion)溶液作氧化还原指示剂,记录氧化还原进行到终点所用时间(s),则时间 s 与碘浓度 C 有对数线性关系。
5.尿碘含量的计算:碘浓度 C(μg/L)与反应时间 s 之间的关系为:LnC=a+bLns 或LogC=a+bLogs,根据关系式求出样品碘含量(μg/L)。
6.根据权利要求1所述的碘离子检测试剂盒,其特征在于:试剂盒内包含有200μL的塑料微量离心管。
7.根据权利要求3所述的碘离子检测试剂盒,其特征在于:所述的记录氧化还原进行到终点所用时间(s)的工具包括但不限于秒表、手机以及专用检测仪等。
8.根据权利要求5所述的碘离子检测试剂盒,其特征在于:所述的专用检测仪的结构包括:光源、离心管放置装置、感光器和计时器,其中光源为氘灯或钨灯。
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