CN110548865A - 一种荧光丝胶金纳米簇及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明利用微波辐射法成功制备了一种以丝胶蛋白为模板合成的金纳米簇，其制备方法为：先制备丝胶蛋白的水溶液，再向其中加入HAuCl4水溶液并混匀，其中丝胶蛋白和HAuCl4的质量比为25:1‑25:10；然后添加NaOH调节溶液pH后将混合溶液置于微波反应器中反应，微波功率为500‑900W，反应时间1‑20min。本发明制得的丝胶金纳米簇平均粒径为2.5nm，最大激发波长为360nm，最大发射波长为480nm。其稳定性高，生物相容性好，光稳定性强，荧光性强，灵敏度高，可作为探针检测水环境或血清中Fe3+离子的含量以及作为荧光探针应用于生物成像方面的研究。

Description

一种荧光丝胶金纳米簇及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于功能纳米荧光材料的制备和应用领域，具体涉及一种荧光丝胶金纳米簇及其制备方法和应用。
背景技术
近年来，过渡离子的特殊重要性越来越受到人们的关注，因为一些微量的重金属离子对人体健康有益。铁作为一种重要的微量元素，在人体中对所有生物都起着至关重要的作用，铁的不足和超标都会造成严重的问题。近年来，人们对生物、临床和环境样品中铁离子定量测定的选择性技术的发展产生了极大的兴趣。目前Fe3+常用的检测方法有火焰原子吸收光谱法、石墨炉原子吸收光谱法、分光光度法流动注射分析、能量色散X射线荧光光谱法、电感耦合等离子体原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱仪。其中一些鉴定技术需要样品制备、训练有素的使用者或精密仪器。作为一种替代方法，荧光分光光度计为Fe3+的检测提供了更简单、更便宜的选择。
金属纳米簇由于其具有较好的生物相容性、光稳定性等功能，得到了越来越多科研工作者的关注，尽管金属纳米簇的研究目前已取得了一些进展，但是针对金属纳米簇的简便、高效的合成方法还有待提高。微波辐射法合成金属纳米簇具有快捷、高效、易获得等优点，本发明利用微波合成法成功制备了一种发青色荧光的金纳米簇。
丝胶蛋白(Sericin)是由包括甘氨酸、丝氨酸、天门冬氨酸等18种氨基酸组成，其中包括大量的氨基、羟基、羧基等极性基团。丝胶蛋白具有良好的抗氧化性、生物相容性、生物降解性等性能。一直以来，由于人们对丝胶蛋白认识不足，导致其每年被大量浪费，对环境也造成了严重污染。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种高稳定的丝胶蛋白包裹的金纳米簇(Sericin-Au NCs)，本发明还提供了此丝胶蛋白包裹的金纳米簇的制备方法，本发明是利用微波辐射法进行制备，制备方法快速、绿色、高效。本发明还提供了丝胶蛋白包裹的金纳米簇的应用，其可以用于Fe3+的检测以及细胞成像。
本发明的一种荧光丝胶金纳米簇，其以丝胶蛋白作为模板和还原剂。
优选本发明所述的荧光丝胶金纳米簇，其平均粒径为2.5nm，其荧光最大激发波长为360nm，最大发射波长为480nm。
本发明所述的荧光丝胶金纳米簇的制备方法，其所述方法包括如下步骤：
(1)制备25-50mg/mL的丝胶蛋白水溶液；
(2)制备浓度为25-100mM的HAuCl4的水溶液；
(3)将HAuCl4溶液加入丝胶蛋白水溶液中，使其中丝胶蛋白与HAuCl4两者的质量比为25:1-25:10，充分混匀；
(4)向步骤(3)得到的混合溶液中添加NaOH调节溶液pH值至8-12，涡旋器充分混匀5-10min；
(5)将步骤(4)得到的混合溶液微波反应1-20min后即得，微波功率为500-900W。
需要说明的是步骤(3)中所述的“丝胶蛋白与HAuCl4两者的质量比”指的是丝胶蛋白纯品和HAuCl4纯品的质量比，而不是配置好的两种溶液的质量比。
作为优选，步骤(1)中丝胶蛋白水溶液的浓度为50mg/mL，步骤(2)中HAuCl4浓度为25mM，此时合成的效果最好，化学反应最完全，产率最高。
优选步骤(4)中调节后的溶液pH值为9，此时荧光效果最明显。
优选步骤(5)的反应时间为3min，此时化学反应最完全。
优选步骤(5)中微波功率为700W，此时丝胶蛋白和金结合的效果最佳。
优选所述的荧光丝胶金纳米簇的制备方法为经过如下步骤：
(1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液；
(2)将HAuCl4加水配置成浓度为25mM的HAuCl4溶液；
(3)将1mL的HAuCl4溶液加入到5mL的丝胶蛋白溶液中，涡旋器充分混匀5min；
(4)加入1M NaOH于步骤(3)得到的溶液中调节pH为9，涡旋器再次混匀5min；
(5)将所制备的样品微波反应3min，微波功率为700W，得到金纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min置于4℃冰箱避光保存备用。
优选上述步骤(5)中微波反应采取间歇式微波多次处理的方式，即单次微波15s，间隔20s后再进行下一循环的微波处理15s，共进行12个循环。采取这种方式可以避免持续加热。
本发明还提供了所述的荧光丝胶金纳米簇在Fe3+离子检测中的应用。
优选其在Fe3+离子检测中的应用时，其应用范围包括环境水或血清中Fe3+离子浓度的检测。
本发明还提供了所述的荧光丝胶金纳米簇在细胞成像中的应用。
优选其在细胞成像中的应用时,其所述细胞包括宫颈癌细胞或者乳腺癌细胞。
有益效果
本发明的荧光丝胶金纳米簇具有高纯度、高荧光强度、高选择性等优点。制备方法绿色、高效、简单易行，适用于大规模工业化生产。现有的纳米材料在制备过程中主要通过水热法，而该法由外及里的加热方式会导致反应体系受热不均匀，使得制备的纳米材料粒径较大且不均一。本发明的微波辐射法则是将微波电磁能转化为热能引起由里及外的“体加热”或“内加热”，极大的缩短了成核时间，使颗粒成核更均匀，无滞后效应，生成物产率更高，使纳米材料的合成方法更为绿色、高效，利用该法合成的纳米胶体颗粒，具有粒径小、分散性好等特点。本发明的荧光丝胶金纳米簇对Fe3+离子敏感，可以应用于水环境样品中Fe3+离子的检测；又由于本发明所用原料丝胶蛋白具良好的生物相容性，故可以应用于血清中铁离子含量的检测；另外本发明制备的荧光丝胶金纳米簇在360nm激发光下，在480nm处可发出青色荧光，且可进入细胞质，因此可用于细胞成像方面的研究。
附图说明
图1为实施例1所制的Sericin-Au NCs的透射电镜图。
图2为实施例1所制的Sericin-Au NCs的粒径分布图。
图3为实施例1所制的Sericin-Au NCs的荧光光谱图。
图4为实施例1所制的Sericin-Au NCs的紫外-可见吸收光谱图。
图5为实施例1所制的Sericin-Au NCs的红外-可见吸收光谱图。
图6为实施例1所制的Sericin-Au NCs应用于金属离子检测的柱状图。
图7为实施例1所制的Sericin-Au NCs应用于检测Fe3+的荧光光谱图。
图8为实施例1所制的Sericin-AuNCs应用于检测Fe3+的线性关系图。
图9为实施例1所制的Sericin-AuNCs对Hela细胞毒性检测的MTT图。
图10为实施例1所制的Sericin-Au NCs对MCF-7细胞毒性检测的MTT图。
图11为实施例1所制的Sericin-AuNCs的Hela细胞和MCF-7细胞成像标记结果图。
具体实施方式
下面结合说明书附图介绍本发明的较佳实施例，举例证明本发明可以实施，通过向本领域中的技术人员完整介绍本发明，使其技术内容更加清楚和便于理解。本发明可以通过许多不同形式的实施例来得以体现，其保护范围并非仅限于文中提到的实施例，本文的附图和说明本质上是举例说明而不是限制本发明。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中的丝胶蛋白购自上海源叶生物科技有限公司。其它所用的原材料、试剂和设备等，如无特殊说明，均可从商业途径得到或已公开。
下面结合实施例对本发明做详细的说明。
实施例1：Sericin-AuNCs的制备
制备方法为：
(1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液。
(2)将HAuCl4加水配置成浓度为25mM的HAuCl4溶液。
(3)取5mL丝胶蛋白溶液置于EP管中，在其中加入1mL的HAuCl4溶液，涡旋器充分混匀5min。
(4)加入1M NaOH于步骤(3)混匀的溶液中调节pH为9，涡旋器再次混匀5min。
(5)将步骤(4)所制备的样品进行微波反应，微波功率为700W，为避免持续加热，本实施例采取间歇式微波多次处理的方式，即将样品采用多次短时微波处理，每两次微波之间间隔一定的时间。本实施例是单次微波15s，间隔20s后再进行下一循环的微波处理15s，共进行12个循环，即总的纯微波反应时间为3min，得到金纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min置于4℃冰箱避光保存备用。
实施例2：Sericin-AuNCs的制备
制备方法为：
(1)取125mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成25mg/mL的丝胶蛋白溶液。
(2)将HAuCl4加水配置成浓度为25mM的HAuCl4溶液。
(3)取5mL丝胶蛋白溶液置于EP管中，在其中加入1mL的HAuCl4溶液，涡旋器充分混匀5min。
(4)加入1MNaOH于步骤(3)混匀的溶液中调节pH为10，溶液由淡黄色变为棕色，涡旋器再次混匀10min。
(5)将步骤(4)所制备的样品进行微波反应，微波功率为500W，为避免持续加热，本实施例采取间歇式微波多次处理的方式，即将样品采用多次短时微波处理，每两次微波之间间隔一定的时间。本实施例是单次微波15s，间隔20s后再进行下一循环的微波处理15s，共进行60个循环，即总的纯微波反应时间为15min，得到金纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min置于4℃冰箱避光保存备用。
实施例3：Sericin-AuNCs的制备
制备方法为：
(1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液。
(2)将HAuCl4加水配置成浓度为50mM的HAuCl4溶液。
(3)取5mL丝胶蛋白溶液置于EP管中，在其中加入1mL的HAuCl4溶液，涡旋器充分混匀5min。
(4)加入1M NaOH于步骤(3)混匀的溶液中调节pH为11，涡旋器再次混匀5min。
(5)将步骤(4)所制备的样品进行微波反应，微波功率为600W，为避免持续加热，本实施例采取间歇式微波多次处理的方式，即将样品采用多次短时微波处理，每两次微波之间间隔一定的时间。本实施例是单次微波15s，间隔20s后再进行下一循环的微波处理15s，共进行40个循环，即总的纯微波反应时间为10min，得到金纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min置于4℃冰箱避光保存备用。
实施例4：Sericin-AuNCs的制备
制备方法为：
(1)制备25mg/mL的丝胶蛋白水溶液。
(2)将HAuCl4加水配置成浓度为100mM的HAuCl4溶液。
(3)取5mL丝胶蛋白溶液置于EP管中，在其中加入1mL的HAuCl4溶液，涡旋器充分混匀5min。
(4)加入1MNaOH于步骤(3)混匀的溶液中调节pH为12，涡旋器再次混匀5min。
(5)将步骤(4)所制备的样品进行微波反应，微波功率为900W，为避免持续加热，本实施例采取间歇式微波多次处理的方式，即将样品采用多次短时微波处理，每两次微波之间间隔一定的时间。本实施例是单次微波15s，间隔20s后再进行下一循环的微波处理15s，共进行40个循环，即总的纯微波反应时间为10min，得到金纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min置于4℃冰箱避光保存备用。
实施例5：Sericin-AuNCs样品形貌表征
取实施例1所制的Sericin-Au NCs用去离子水稀释20倍后，取10μL滴于铜网，采用美国FEI Tecnai G-20型透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)进行观察，加速电压100kV。结果显示金纳米簇分布均匀(图1)，平均粒径为2.5nm(图2)，该金纳米簇在水溶液中具有良好的分散性，没有大的金纳米簇的团聚。
实施例6：Sericin-AuNCs荧光光谱的表征
分别取实施例1制得的丝胶蛋白溶液及实施例1所制的Sericin-AuNCs置于EP管中，采用暗箱式四用紫外分析仪，观察它们的的荧光特性，结果表明在365nm紫外灯照射下，实施例1所制的Sericin-Au NCs溶液发射出强烈的青色荧光，可见光下Sericin-AuNCs溶液为浅紫色。
取实施例1所制的Sericin-AuNCs放入比色皿中，使用RF-5301荧光分光光度计测量Sericin-AuNCs的最大激发光谱和最大发射光谱，结果表明该物质最大激发光谱和最大发射光谱分别为360nm和480nm(图3)。
实施例7：Sericin、Sericin-AuNCs紫外光谱的表征
分别取实施例1制得的丝胶蛋白溶液、实施例1所制的Sericin-AuNCs放入比色皿中，使用紫外分光光度仪UV-1700检测紫外光谱，结果表明实施例1所制的Sericin-Au NCs在400-500nm范围具有较宽的吸收图谱，而Sericin在此处没有最大吸收(图4)，证明实施例1所制的Sericin-AuNCs和Sericin本身不是同一种物质。
实施例8：Sericin、Sericin-AuNCs红外光谱的表征
分别取Sericin、实施例1所制的Sericin-AuNCs放入溴化钾窗片中，使用红外分析光谱检测红外光谱，结果表明Sericin和实施例1所制的Sericin-AuNCs在多处有明显不同(图5)，证明实施例1所制的Sericin-AuNCs和Sericin本身不是同一种物质。
实施例9：Sericin-AuNCs的离子检测
对实施例1所制备的Sericin-AuNCs进行离子选择性实验。使用RF-5301荧光分光光度计检测不同的金属离子对Sericin-AuNCs纳米簇的荧光强度的影响。所用的18种金属离子分别为Mg2+，Bi3+，Al3+，Zr4+，In3+，Ni+，Li+，Cr3+，Zn2+，Na+，Cu2+，Ca2+，Mn2+，K+，Pb2+，Fe3+，Sb5+，Sb3+。
检测标准体系为1mL，其中浓度均为1mM的不同金属离子100μL，Sericin-Au NCs100μL，加水补足至1mL，25℃水浴5min后，在激发光波长为360nm的条件下，检测溶液在480nm的发射光的峰高。结果显示Fe3+具有明显的荧光淬灭效应(图6)。
实施例10：实施例1所制的Sericin-AuNCs应用于Fe3+离子的检测
向金纳米簇体系中加入一系列不同浓度的Fe3+溶液，检测标准体系为1mL，其中不同浓度Fe3+离子100μL，Sericin-AuNCs 100μL，加水补足至1mL，25℃水浴5min后，使用RF-5301荧光分光光度计，在激发光波长为360nm的条件下，检测溶液在480nm的发射光的峰高。结果显示，Sericin-AuNCs荧光淬灭程度随Fe3+离子浓度的增大而增强(图7)，其相对荧光强度线性检测线为y＝0.00388x+1.05554(R2＝0.98695)，所构建的检测Fe3+离子的线性范围为5μM-500μM，其检测限为0.43μM(图8)。此研究结果表明，所制备的金纳米簇对Fe3+离子具有高度选择性，因此本发明所制的金纳米簇荧光探针可用于分析检测实际样品中Fe3+的含量。
实施例11：实施例1所制的Sericin-AuNCs对实际水样的检测
为了更清楚的说明本发明实施例的应用方案，证实Sericin-AuNCs作为探针检测Fe3+的实用性，下面将详细介绍Fe3+对实际水样检测过程。分别从芜湖市采集了长江水、镜湖水和自来水样本。将取自不同环境中的水样10,000rpm离心10min，0.22μm滤膜抽滤，并储存在4℃冰箱中备用。
(1)实际水样的检测：
检测体系为1mL，其中100μL Sericin-AuNCs溶液，900μL待测的环境水样；将此体系于25℃水浴5min，在激发光波长为360nm的条件下，检测溶液在480nm的发射光的峰高；将测试结果带入实施例10绘制的标准曲线中计算。
将芜湖市长江水，镜湖水，自来水分别按照上述方法进行检测，实验独立重复3次。三种水样的检测结果均为0μM。
(2)检测加标回收率：
分别在10μM、20μM、50μM和100μM的Fe3+浓度下，对三种实际水样样品进行加标样中Fe3+的回收率检测。检测标准体系为1mL，100μL Sericin-AuNCs，800μL环境水样，100μL不同浓度的Fe3+，25℃水浴5min，在激发光波长为360nm的条件下，检测溶液在480nm的发射光的峰高，实验独立重复3次。表1是标准加入不同浓度系列的Fe3+后的结果，可以看出，回收率可以达到95％以上。说明该方法在实际水样中的应用效果良好。
表1 Sericin-AuNCs对各水样中Fe3+的检测
实施例12：实施例1所制的Sericin-AuNCs对血清样品的检测
为了验证该方法在实际应用中的可行性，将其应用于实际血清样品中Fe3+离子的测定。分别采集了5位志愿者血样，4℃冰箱静置20-30min后，上层即为血清，取上层血清稀释10倍后转移至新的EP管中并储存在4℃冰箱备用。
(1)实际血清样品的检测：
检测体系为1mL，其中100μL Sericin-AuNCs溶液，900μL待测的稀释10倍的血清样品；将此体系于25℃水浴5min，在激发光波长为360nm的条件下，检测溶液在480nm的发射光的峰高，将测试结果带入实施例10绘制的标准曲线中计算。
将5种血清样品分别按照上述方法进行检测，实验独立重复3次。5种样品的检测结果均为0μM。
(2)检测加标回收率：
检测标准体系为1mL，100μL Sericin-AuNCs，800μL稀释10倍的血清样品，100μL不同浓度的Fe3+离子，25℃水浴5min，在激发光波长为360nm的条件下，检测溶液在480nm的发射光的峰高，实验独立重复3次。将测试结果带入实施例10绘制的标准曲线中计算，同时对血清样品中Fe3+离子的回收率进行计算。从表2可以看出，回收率在90％以上的可接受范围内。说明该方法是有效的，可应用于实际血清样品中Fe3+离子的检测。
表2 Sericin-AuNCs对各血清样品中Fe3+离子的检测
实施例13：Sericin-AuNCs对Hela细胞的毒性检测
将100μL Hela细胞悬浊液接种于96孔板上，接种密度为每孔6,000个细胞，在5％CO2，37℃MCO-15AC细胞培养箱中进行过夜培养。弃去旧的培养基，避光添加不同浓度的(10-80μg/mL)Sericin-Au NCs和新鲜DMEM完全培养基继续共培养24h。每孔更换为100μL含MTT的DMEM培养基(避光)，其中MTT的终浓度为0.5mg/mL，在培养箱中继续培养4h。避光条件下弃去孔内MTT和培养基的混合液，每孔加入100μL二甲亚砜，置于摇床低速振荡10min，在TACAN酶标仪570nm处测定并记录吸光度。结果显示，随着Sericin-AuNCs浓度(10μg/mL，20μg/mL，30μg/mL，40μg/mL，50μg/mL，60μg/mL，70μg/mL，80μg/mL)的逐渐增加，Hela细胞活性并没有受到影响(图9)。由此可见，实施例1所制的Sericin-AuNCs具有良好的生物相容性。
实施例14：Sericin-AuNCs对MCF-7细胞的毒性检测
将100μL MCF-7细胞悬浊液接种于96孔板上，接种密度为每孔10,000个细胞，在5％CO2，37℃MCO-15AC培养箱中进行过夜培养。弃去旧的培养基，避光添加不同浓度的(10-80μg/mL)Sericin-Au NCs和新鲜DMEM完全培养基继续共培养24h。每孔更换为100μL含MTT的DMEM培养基(避光)，其中MTT的终浓度为0.5mg/mL，在培养箱中继续培养4h。在避光条件下弃去孔内MTT和培养基的混合液，每孔加入100μL二甲亚砜，置于摇床低速振荡10min，在TACAN酶标仪570nm处测定并记录吸光度。结果显示，随着Sericin-AuNCs浓度(10μg/mL，20μg/mL，30μg/mL，40μg/mL，50μg/mL，60μg/mL，70μg/mL，80μg/mL)的逐渐增加，MCF-7细胞活性没有受到影响(图10)。由此可见，实施例1所制的Sericin-AuNCs具有良好的生物相容性。
实施例15：Sericin-AuNCs应用于Hela细胞成像
将Hela细胞接种到激光共聚焦培养皿中过夜培养，然后加入实施例1制备的纳米探针Sericin-AuNCs，在37℃、5％CO2培养箱中培养2h后，弃去培养皿中的混合液，PBS缓冲液洗涤3次，每次2min。4％多聚甲醛固定10min，再次用PBS缓冲液洗涤3次，每次2min。使用DAPI染液对细胞核进行染色15min。染色结束后PBS缓冲液洗涤3次，每次2min。使用OLYMOUS激光共聚焦显微镜在365nm和405nm激发光波长下观察细胞的荧光信号，显示Hela细胞质内出现青色荧光而细胞核内呈现DAPI特异染色的蓝色荧光(图11)。该结果表明Sericin-AuNCs可以穿过细胞膜进入细胞质内，在365nm激发光下可产生特异的青色荧光，因此该物质可以作为荧光探针应用于生物成像方面的研究。
实施例16：Sericin-AuNCs应用于MCF-7细胞成像
将MCF-7细胞在接种到激光共聚焦培养皿中过夜培养，然后添加实施例1制备的纳米探针Sericin-AuNCs，在37℃、5％CO2培养箱中培养2h后，弃去培养皿中的混合液，PBS缓冲液洗涤3次，每次2min。4％多聚甲醛固定10min，PBS缓冲液洗涤3次，每次2min。使用DAPI染液对细胞核进行染色15min。染色结束后PBS缓冲液洗涤3次，每次2min。使用OLYMOUS激光共聚焦显微镜观察细胞的荧光信号。结果显示，在365nm激发波长下MCF-7细胞质内有青色的荧光，在405nm激发波长下MCF-7细胞核内有蓝色荧光(图11)。该结果表明Sericin-AuNCs可以穿过细胞膜进入细胞质并滞留在细胞质内，可以作为荧光探针应用于生物成像方面的研究。

Claims (10)

1.一种荧光丝胶金纳米簇，其特征在于所述纳米簇以丝胶蛋白作为模板和还原剂。
2.根据权利要求1所述的荧光丝胶金纳米簇，其特征在于其平均粒径为2.5nm，其荧光最大激发波长为360nm，最大发射波长为480nm。
3.根据权利要求1所述的荧光丝胶金纳米簇的制备方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：
(1)制备25-50mg/mL的丝胶蛋白水溶液；
(2)制备浓度为25-100mM的HAuCl4的水溶液；
(3)将HAuCl4溶液加入丝胶蛋白水溶液中，使其中丝胶蛋白与HAuCl4两者的质量比为25:1-25:10，充分混匀；
(4)向步骤(3)得到的混合溶液中添加NaOH调节溶液pH值至8-12，涡旋器充分混匀5-10min；
(5)将步骤(4)得到的混合溶液微波反应1-20min后即得，微波功率为500-900W。
4.根据权利要求3所述的荧光丝胶金纳米簇的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中丝胶蛋白水溶液的浓度为50mg/mL；步骤(2)中HAuCl4溶液浓度为25mM；步骤(4)中调节后的溶液pH值为9；所述步骤(5)的反应时间为3min，微波功率为700W。
5.根据权利要求3所述的荧光丝胶金纳米簇的制备方法，其特征在于所述制备方法为：
(1)取250mg丝胶蛋白加入5mL纯水中制备成50mg/mL的丝胶蛋白溶液；
(2)将HAuCl4加水配置成浓度为25mM的HAuCl4溶液；
(3)将1mL的HAuCl4溶液加入到5mL的丝胶蛋白溶液中，涡旋器充分混匀5min；
(4)加入1M NaOH于步骤(3)得到的溶液中调节pH为9，涡旋器再次混匀5min；
(5)将所制备的样品微波反应3min，微波功率为700W，得到金纳米簇的聚合物，5,000rpm离心10min置于4℃冰箱避光保存备用。
6.根据权利要求5所述的荧光丝胶金纳米簇的制备方法，其特征在于所述步骤(5)中微波反应采取间歇式微波多次处理的方式。
7.根据权利要求1所述的荧光丝胶金纳米簇在Fe3+离子检测中的应用。
8.根据权利要求7所述的荧光丝胶金纳米簇在Fe3+离子检测中的应用，其应用范围包括环境水或血清中Fe3+离子浓度的检测。
9.根据权利要求1所述的荧光丝胶金纳米簇在细胞成像中的应用。
10.根据权利要求9所述的荧光丝胶金纳米簇在细胞成像中的应用，其特征在于其所述细胞包括宫颈癌细胞或者乳腺癌细胞。
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