CN110520114B - 包含银和抗生素的纳米体系及其用于治疗细菌感染的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种包含担载在载体上的金属银纳米颗粒的组合物，所述载体为颗粒的形式，其中所述载体选自惰性载体或抗生素，在所述载体为惰性载体的情况下所述组合物进一步包含至少一种抗生素。本发明还公开了一种包含所述组合物或银纳米颗粒和至少一种抗生素的混合物的纳米体系，所述纳米体系用于治疗由对至少一种抗生素耐药的至少一个细菌菌株引起的感染。本发明进一步公开了药物组合物和用于制备所述组合物和纳米体系的方法。

Description

包含银和抗生素的纳米体系及其用于治疗细菌感染的用途

技术领域

本发明涉及银纳米颗粒与抗生素组合用于治疗由耐药细菌引起的感染的用途，以及包含担载的银纳米颗粒和抗生素的组合物。

背景技术

抗生素和抗生素耐药性

抗生素是用来预防和治疗细菌感染的药物。它们可以杀死细菌(杀菌的)或抑制细菌的生长(抑菌的)并且基于它们的作用机制、化学结构或活性谱进行分类。

当细菌响应于这些药物的使用而发生改变时发生抗生素耐药性。细菌，不是人或动物，成为对抗生素耐药的。这些细菌可以感染人和动物，并且它们导致的感染比由不耐药的细菌引起的感染更难治疗。这导致药物诸如抗生素治愈疾病或病况的有效性降低。一些细菌天然地对某些抗生素耐药，而另一些细菌当它们暴露于抗生素时可以通过其一些基因的突变来获得耐药性。这些天然或获得性耐药性可以传播给其他细菌种属，因为细菌可以很容易地彼此交换遗传物质，即使它们来自不同的种属。

在全世界抗生素耐药性正在上升至高度危险的水平。正在出现新的耐药机制并全球性播散，威胁我们治疗常见的感染性疾病的能力。名单不断增加的感染–诸如肺炎、结核、败血症和淋病–变得越来越难以治疗，并且有时不可能治疗，因为目前使用的抗生素变得不太有效。

当在没有处方的情况下抗生素可以被人或动物使用时，则耐药性的出现和播散变得更坏。类似地，在没有标准治疗指南的国家，抗生素经常被卫生工作者和兽医过度开处方并被公众滥用。

我们可能正在进入后抗生素时代，其中常见的感染和微小损害可以再次被消灭。抗生素耐药性导致更高的医疗成本，延长的住院时间和增加的死亡率。

在一个方面，存在着改变对抗生素开处方和使用的方式的需求。

另一方面，需要开发能够治疗由抗生素耐药菌引起的感染的新治疗方法。

银的抗微生物用途

在引入现代抗生素之前，胶体银用作杀菌剂和消毒剂：例如，在二十世纪二十年代，Searle,A.B.于“Chapter VIII:Germicides and Disinfectants(第8章：杀菌剂和消毒剂)”.The Use of Colloids in Health and Disease(胶体在健康和疾病中的用途).Gerstein–University of Toronto:Toronto Collection:London Constable&Co.”中公开了银溶胶溶液与营养肉汤以各种稀释度混合，接种以伤寒沙门氏菌并孵育，显示了杀菌力。在同一出版物中提及了类似性质的其他试验，证明了银溶胶作为具有强力杀菌作用的杀菌剂的价值，与没有或仅有轻微的杀菌作用的其他金属胶体相反。此外，使用担载在惰性载体上的银用于这些杀菌目的(西班牙专利135,695或FR 784 959)。

随着在二十世纪四十年代中开发出现代抗生素，银作为抗微生物剂的用途消失了。

近年来，鉴于许多细菌菌株的抗生素耐药性，胶体银的使用再次被开发出来，特别是应用纳米技术领域中的发展，纳米尺寸能够改变金属的化学、物理和光学特性。在几个出版物中利用银纳米颗粒和胶体银本身用于治疗细菌感染的抗微生物剂(参见，例如Rai,M.等人“Silver Nanoparticles as A New Generation of Antimicrobials”Biotechnol.Adv.2009,27,76-83；Rizzello,L.等人“Nanosilver-Based AntibacterialDrugs and Devices:Mechanisms,Methodological Drawbacks,and Guidelines.”Chem.Soc.Rev.2014,43,1501-1518；和US2009148484)。

银和抗生素的组合

银不仅已经被尝试单独用作抗微生物剂，而且还已经用于与抗生素组合使用。

例如，在1968年，开发了含有银和抗生素磺胺嘧啶钠、磺胺嘧啶银(SSD)的化合物(参见例如Chopra I(2007)."The increasing use of silver-based products asantimicrobial agents:a useful development or a cause for concern？".J.Antimicrob.Chemother.59(4):587–90)。尽管如此，其使用限于局部应用，并且发现其他抗生素更为有效，因此其使用几乎不被推荐。事实上，其有效性在综述“CochraneDatabase Syst Rev.2010Mar 17；(3):CD006478”中受到质疑，其中该文称“没有足够证据表明含银敷料或局部药剂是否促进创面愈合或防止创面感染”。

已经出现了在新一类无机抗微生物剂中使用银，命名为银纳米簇构造，其与达托霉素一起包装。每个纳米簇构造处于超小颗粒范围，其含有16个银原子和9个谷胱甘肽保护配体。这些纳米簇与处于相同大小范围的达托霉素通过强共价键均一地缀合(参见Zheng等人“Antimicrobial Cluster Bombs:Silver Nanoclusters Packed with Daptomycin”,ACS Nano(2016),10(8),7934–7942)。据称更庞大的银纳米颗粒代替银纳米簇与达托霉素缀合将会降低杂交体的抗微生物效率。

还开发了胶体银与几种抗生素的物理混合物。银(元素银和被氧化银包覆的元素银两者)的纳米颗粒与几种抗生素混合，并测试其活性。发现一些加成的抗微生物活性(参见WO2006074117)。

最近，在体外和体内均测试了银离子与抗生素组合的作用。发现溶解离子形式的银以两种主要的方式攻击细菌细胞：其使细胞膜更通透，并且其干扰细胞的代谢，导致反应性，且经常是毒性的氧化合物的过度产生。(参见“Science Translational Medicine19Jun 2013:Vol.5,Issue 190,pp.190ra81”和同一作者的WO 2013/063405 A1)。在这些文件中提示了将银离子与抗生素组合的更多研究。然而，没有公开金属银的结果。鉴于离子银和金属银(且具体是纳米颗粒)之间的行为和物理化学特性的差异，这些文件没有阐明金属银作为抗生素的可用性。另一方面，离子银的缺点是其被认为当施用于哺乳动物(包括人类)时显示出毒性效应，并且可能由于在活体内发生的还原过程而导致蓝色着色。

在医药领域中对抗生素的耐药性以及因此寻找新的抗生素是迫切的需求，其甚至已经成为由世界卫生组织于2014年起草并发表的具体报告的目标。其甚至成为在2016年9月联合国内讨论的问题。

附图说明

图1(a)示出了其上沉积有银纳米颗粒的高岭土微粒(×8870)。

图1(b)示出了在×20380下图1(a)中突出显示的区域。

图1(c.1)示出了在×66000下图1(b)中突出显示的区域(c)。在高岭土的层状结构的表面上可以清晰地识别到银纳米颗粒。

图1(c.2)示出了当在反散射电子下观察时的银纳米颗粒(白色)，与没有银纳米颗粒的区域相对比。

图1(d)示出了在×66000下图1(b)中突出显示的区域(d)。可以在高岭土的层状结构的边缘上清晰地识别到银纳米颗粒。

发明内容

因此由于细菌对抗生素的耐药性的不断增加，存在着对提供新的抗微生物治疗的需求。本发明提供了针对细菌感染的新组合物和治疗方法，即涉及使用金属银纳米颗粒与抗生素组合用于治疗由耐药细菌引起的感染，以及包含金属银纳米颗粒和抗生素的组合物。

本发明的第一个方面涉及包含担载在载体上的金属银纳米颗粒的组合物，所述载体为颗粒的形式；所述载体选自惰性载体或抗生素；在所述载体为惰性载体的情况下，所述组合物进一步包含至少一种抗生素。

本发明的第二个方面涉及纳米体系用于治疗由对至少一种抗生素耐药的至少一个细菌菌株引起的感染的用途，所述纳米体系包含根据上面所定义的第一个方面所述的组合物或银纳米颗粒和至少一种抗生素的混合物。

此外，本发明涉及根据如上所定义的发明的第一个方面所述的组合物的制备方法。

本发明还涉及一种药物组合物，其包含至少一种药学上可接受的赋形剂和根据本发明的第一个方面所述的包含担载在载体上的金属银纳米颗粒的组合物；所述药物组合物用于治疗感染；以及用于口服治疗感染。

具体实施方式

本发明的第一个方面涉及包含担载在载体上的银纳米颗粒的组合物，所述载体为颗粒的形式；所述载体选自惰性载体或抗生素；在所述载体为惰性载体的情况下，所述组合物进一步包含至少一种抗生素。

惰性载体优选地选自，但不限于，粘土、沸石、二氧化硅、氧化铝、高岭土和金属氧化物(例如，MgO)。根据优选的实施方案，惰性载体是高岭土，富含高岭石的岩石，其是化学组成为Al₂Si₂O₅(OH)₄的粘土材料。

在本发明的框架中，“担载”意指吸附在粉末状载体的表面上、渗透在粉末状载体的表面上、包埋在粉末状载体的表面上等中的任意一种。即，由于表面能，银纳米颗粒粘附于粉末状载体的表面上。载体(在本发明的框架下，为惰性载体或抗生素)表面上的原子可以吸引并结合其他原子(在本例中为银原子)，结合的性质是弱的范德华力、共价键接或静电吸引。因此，本发明的组合物的制备简单，并且载体，无论是惰性载体或是抗生素，都不需要额外的配体来有效地与金属银纳米颗粒缔合。

在本发明的框架下，“惰性载体”是指其上担载有金属银纳米颗粒的载体，其不具有药物活性，并且具体地不具有任何抗生素活性。

载体优选地被粉化成微粒，其尺寸允许与金属银纳米颗粒的有效相互作用，同时允许其药学应用。惰性载体的典型平均粒径为0.1μm(微米)或更大，优选0.25μm或更大，且更优选地0.5μm或更大。惰性载体的典型平均粒径为200μm或更小，优选地100μm或更小，更优选地50μm或更小。最优选地，平均粒径为0.5-50μm。

当用作载体时抗生素的典型平均粒径为0.1μm(微米)或更大。抗生素载体的典型平均粒径为200μm或更低，优选100μm或更低，更优选50μm或更低。最优选地，平均粒径为0.1-50μm。

本发明的组合物中的金属银纳米颗粒典型地具有1-100纳米的直径。优选地，直径为大于大约5纳米，更优选地大于大约10纳米，甚至更优选地大于大约15纳米，且最优选地大于大约20纳米。最优选地，直径为大约20纳米-大约50纳米。

根据本发明的任一个方面(例如，第一个方面或第二个方面)所述的组合物的抗生素，无论用作组分(例如与担载在惰性载体上的金属银纳米颗粒混合)或其本身充当金属银纳米颗粒的粉末状载体，优选地选自，但不限于，青霉素(包括氨基青霉素、抗假单胞菌青霉素、β-内酰胺酶抑制剂、天然青霉素和耐青霉素酶青霉素)、头孢菌素、单环内酰胺、β内酰胺酶抑制剂、碳青霉烯、氨基葡萄糖苷、喹诺酮、四环素、糖肽、林可霉素、大环内酯类、酮内酯类、磺胺类、氨基糖甙类、噁唑烷酮类或选自包括下列的组：多粘菌素、磺胺甲基异噁唑/甲氧苄氨嘧啶、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、克林霉素、夫西地酸、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素和利福平。

氨基青霉素包括，但不限于，阿莫西林(例如

)和氨苄青霉素

抗假单胞菌青霉素包括，但不限于，羧苄青霉素(例如

)、哌拉西林(例如

)和替卡西林(例如

)。

β-内酰胺酶抑制剂包括，但不限于，阿莫西林/克拉维酸(例如

)、氨苄青霉素/舒巴坦(例如

)、哌拉西林/他唑巴坦(例如

)和克拉维酸/替卡西林(例如

)的组合。

天然青霉素包括，但不限于，青霉素V钾(例如Beepen-VK、PC Pen VK、Veetids)、苄星青霉素G(例如Bicillin

Isoject

)、青霉素G钾盐(例如

)、普鲁卡因青霉素(例如

)和苄星青霉素G/普鲁卡因青霉素(例如Bicillin

)的组合。

耐青霉素酶青霉素包括，但不限于，苯唑西林(例如

)、双氯西林(例如

)和萘夫西林(例如

)。

四环素包括，但不限于，强力霉素(例如

Adoxa

Adoxa

Adoxa

Doxy

Doxy

Mondoxyne

)、四环素(例如

)和米诺环素(例如

)。

有5代头孢菌素；它们通常分类为头孢菌素/β-内酰胺酶抑制剂、第一代头孢菌素、第四代头孢菌素、新一代头孢菌素、第二代头孢菌素和第三代头孢菌素。

头孢菌素/β-内酰胺酶抑制剂包括，但不限于，阿维巴坦/头孢他啶(例如

)和头孢洛扎/他唑巴坦(例如

)。

第一代头孢菌素包括，但不限于，头孢羟氨苄(例如

)、头孢拉定(例如

)、头孢克洛(例如

)、头孢地尼(例如

)、头孢唑林(例如

)、头孢妥仑(例如

)、头孢泊肟(例如

)、头孢丙烯(例如

)、头孢布烯(例如

)、头孢呋辛例如

和头孢氨苄(例如

)。

第四代头孢菌素包括，但不限于，头孢吡肟(例如

)。

新一代头孢菌素包括，但不限于，头孢洛林(例如

)。

第二代头孢菌素包括，但不限于，氯碳头孢(例如

)、头孢替坦(例如Cefotan)、头孢呋辛

头孢丙烯(例如

)、头孢西丁(例如

)和头孢克洛(例如

)。

第三代头孢菌素包括，但不限于，头孢布烯(例如

)、头孢曲松钠(例如

)、头孢噻肟(例如

)、头孢泊肟(例如

)、头孢地尼(例如

)、头孢克肟(例如

)、头孢妥仑(例如

)、头孢唑肟(例如Cefizox)、头孢哌酮(例如

)和头孢他啶(例如

)。

喹诺酮包括，但不限于，洛美沙星(例如

)、氧氟沙星(例如

)、诺氟沙星(例如

)、加替沙星(例如Tequin)、环丙沙星(例如

)、莫西沙星(例如

)、左氧氟沙星(例如

)、吉米沙星(例如

)、西诺沙星(例如

)、萘啶酮酸(例如

)、曲氟沙星(例如

)和司氟沙星(例如

)。

林可霉素包括，但不限于，林可霉素(例如

)和克林霉素(例如

)。

酮内酯类包括，但不限于，泰利霉素(例如

)。

大环内酯类包括，但不限于，红霉素(例如

)、阿奇霉素(例如

克拉霉素(例如

)和非达霉素(例如

)。

磺胺类包括，但不限于，磺胺乙酰异噁唑(例如

)、柳氮磺胺吡啶(例如Azulfidine)以及磺胺甲基异噁唑/甲氧苄氨嘧啶的组合(例如

)。

糖肽抗生素包括，但不限于，万古霉素(例如

)、达巴万星(例如

)、奥利万星(例如

)和特拉万星(例如

)。

氨基糖甙类包括，但不限于，巴龙霉素(例如，

)、妥布霉素(例如

TOBI

)、庆大霉素(例如

)、阿米卡星(例如

)、卡那霉素(例如

)和新霉素

碳青霉烯包括，但不限于，多尼培南(例如

)、美罗培南(例如

)、厄他培南(例如

)以及亚胺培南/西司他丁的组合(例如

)。

例如，抗生素选自青霉素、头孢菌素、单环内酰胺、β-内酰胺酶抑制剂、碳青霉烯、氨基糖甙类、喹诺酮、四环素、糖肽或选自包括下列的组：多粘菌素、磺胺甲基异噁唑/甲氧苄氨嘧啶、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、克林霉素、夫西地酸、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素和利福平。

在抗生素为青霉素的情况下，其优选地选自氨苄青霉素、哌拉西林、美洛西林、苯唑西林、青霉素、青霉素G。甚至更优选地，其是青霉素G。

在抗生素为头孢菌素的情况下，其优选地选自头孢唑林、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁和头孢吡肟。

在抗生素为单环内酰胺的情况下，其优选地是氨曲南。

在抗生素为β-内酰胺酶抑制剂的情况下，其优选地选自阿莫西林/克拉维酸、氨苄青霉素/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶/克拉维酸。

在抗生素是碳青霉烯的情况下，其优选地选自厄他培南、美罗培南和亚胺培南。

在抗生素为氨基糖甙类的情况下，其优选地选自阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素。

在抗生素为喹诺酮的情况下，其优选地选自左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星和诺氟沙星。

在抗生素为四环素的情况下，其优选地选自四环素、替加环素、阿奇霉素和红霉素。

在抗生素为糖肽的情况下，其优选地选自万古霉素和替考拉宁。优选地，抗生素是万古霉素。

其他优选的抗生素是多粘菌素、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素、利福平和夫西地酸。优选地，抗生素选自利奈唑胺和达托霉素。甚至更优选地，抗生素是利奈唑胺。

因此，最优选地，抗生素选自氨苄青霉素、哌拉西林、美洛西林、苯唑西林、青霉素、青霉素G、头孢唑林、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、头孢吡肟、氨曲南、阿莫西林/克拉维酸、氨苄青霉素/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶/克拉维酸、厄他培南、美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、诺氟沙星、四环素、替加环素、阿奇霉素、红霉素、万古霉素、替考拉宁、多粘菌素、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素、利福平和夫西地酸。

在根据本发明的第一个方面所述的组合物中的载体为惰性载体的情况下，上面列举的具体惰性载体(即，粘土、沸石、二氧化硅、氧化铝、高岭土和金属氧化物(例如MgO))中的任一种可以与上面列举的具体抗生素中的任一种组合。更进一步，所述组合物可以包含选自上面列举的抗生素中的一种或多种具体的抗生素，与任一种惰性载体组合。

在所述组合物内，金属银相对于抗生素的总量的重量比为10:100-0,1:100。

所述组合物可以进一步包含任意种类的本领域中已知的至少一种药学上可接受的赋形剂；根据所选择的施用途径选择赋形剂对于本领域技术人员来说是显而易见的。赋形剂可以是选自下列中的一种或多种的一种或多种赋形剂：防粘剂、粘合剂、涂料、着色剂、崩解剂、调味剂、助流剂、润滑剂、防腐剂、吸附剂、甜味剂或载体，如本领域中所已知的。

施用途径可以是任何已知的施用途径，例如，选自，但不限于下列的施用途径：经口、局部、舌下、胃肠外、直肠施用，通过吸入，或通过静脉内、皮下注射。

本发明的第二个方面涉及纳米体系，所述纳米体系包含根据如上所定义的本发明的第一个方面所述的组合物，或银纳米颗粒和至少一种抗生素的混合物，所述纳米体系用于治疗由对至少一种抗生素耐药的至少一个细菌菌株引起的感染。就此而言，银纳米颗粒可以选自处于混悬液中的银纳米颗粒或胶体银。

在本发明的框架中的胶体银是胶体银溶液，即，银的微观分散的不溶性颗粒在液体(典型地，在水)中的混悬液，所述混悬液不沉降或需要很长时间才发生显著的沉降。分散相颗粒的直径为大约1至1000纳米。胶体银可商购获得，例如，商标为Collargol的纳米银(可获自Laboratorios Argenol)。

根据本发明的第二个方面所述的纳米体系的抗生素优选地选自，但不限于，青霉素(包括氨基青霉素、抗假单胞菌青霉素、β-内酰胺酶抑制剂、天然青霉素和耐青霉素酶青霉素)、头孢菌素、单环内酰胺类、β内酰胺酶抑制剂、碳青霉烯、氨基葡萄糖苷、喹诺酮、四环素、糖肽、林可霉素、大环内酯类、酮内酯类、磺胺类、氨基糖甙类、噁唑烷酮类或选自包括下列的组：多粘菌素、磺胺甲基异噁唑/甲氧苄氨嘧啶、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、克林霉素、夫西地酸、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素和利福平。上面关于本发明的第一个方面所定义的定义、实例和优选的抗生素在所有其范围和细节方面也适用于本发明的第二个方面，并且被考虑并入本文中。

耐药细菌菌株可以是革兰氏阴性或革兰氏阳性菌株。革兰氏阴性菌株优选地选自铜绿假单胞菌(Ps.aeruginosa)、大肠杆菌(E.coli)、费氏柠檬酸杆菌(C.freundii)、产酸克雷伯菌(K.oxitocca)和肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)。革兰氏阳性菌株优选地选自金黄色葡萄球菌(S.aureus)和表皮葡萄球菌(S.epidermidis)。

术语“对至少一种抗生素耐药”意指与野生型菌株相比，细菌菌株对一种抗生素的敏感性减小，或甚至缺少敏感性。在本发明的框架中，减小的敏感性是指MIC为野生型菌株的MIC的15％以上，优选MIC为野生型菌株的MIC的25％以上，并且最优选MIC为野生型菌株的MIC的50％以上。

发明人已经证实本发明的组合物在治疗不同的细菌菌株中的有效性。例如，感染由对至少一种抗生素耐药的至少一株革兰氏阴性细菌引起。优选地，使用的抗生素对应于该细菌菌株所耐药的相同抗生素。

例如，根据本发明的第一个方面所述的组合物，其中所述载体是惰性载体，优选地高岭土，与抗生素组合，所述抗生素优选地是青霉素，甚至更优选地是青霉素G，所述组合物用于治疗由革兰氏阴性细菌菌株引起的感染，所述菌株优选地是选自大肠杆菌、费氏枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌或铜绿假单胞菌的菌株，甚至更优选大肠杆菌ATCC 8739、大肠杆菌非BLEE、大肠杆菌H24 BLEE+、大肠杆菌C93 BLEE+、大肠杆菌W207 BLEE+、费氏柠檬酸杆菌H44 BLEE+、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、肺炎克雷伯菌(BLEE+)、铜绿假单胞菌PAO1、铜绿假单胞菌OPRD、铜绿假单胞菌MEXR或铜绿假单胞菌VIM2，其中BLEE+意指产生超广谱β-内酰胺酶的菌株。

例如，根据本发明的第一个方面所述的组合物，其中所述载体是抗生素，优选地青霉素，甚至更优选地青霉素G，所述组合物用于治疗由革兰氏阴性细菌菌株引起的感染，所述菌株优选地是选自大肠杆菌、费氏枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌或铜绿假单胞菌的菌株，甚至更优选大肠杆菌AC8 BLEE+、大肠杆菌H24 BLEE+、大肠杆菌C93 BLEE+、大肠杆菌W207BLEE+、费氏柠檬酸杆菌BLEE+、肺炎克雷伯菌ATCC 700603BLEE+、肺炎克雷伯菌BLEE+、铜绿假单胞菌PAO1、铜绿假单胞菌OPRD、铜绿假单胞菌MEXR、铜绿假单胞菌DACB或铜绿假单胞菌VIM2，其中BLEE+意指产生超广谱β-内酰胺酶的菌株。

例如，当本发明的纳米体系包含银纳米颗粒(处于混悬液中或以胶体银的形式)与抗生素的组合时，所述抗生素优选地选自：氨苄青霉素、哌拉西林、美洛西林、苯唑西林、青霉素、青霉素G、头孢唑林、头孢呋辛、头孢泊肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、头孢吡肟、氨曲南、阿莫西林/克拉维酸、氨苄青霉素/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶/克拉维酸、厄他培南、美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、诺氟沙星、四环素、替加环素、阿奇霉素、红霉素、万古霉素、替考拉宁、多粘菌素、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素、利福平和夫西地酸，其用于治疗由对至少一种抗生素耐药的细菌菌株所引起的感染，所述细菌菌株为革兰氏阴性菌株(选自铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌或产酸克雷伯菌)或革兰氏阳性菌株(金黄色葡萄球菌或表皮葡萄球菌)；优选地，由对至少一种抗生素耐药的革兰氏阴性菌株所引起的感染，所述革兰氏阴性菌株甚至更优选地是选自下列的革兰氏阴性细菌菌株：假单胞菌VIM2突变体(产生金属-β-内酰胺酶)、假单胞菌OrpD突变体(缺少孔蛋白)、假单胞菌MexR突变体(流出泵过表达)、假单胞菌DacB突变体(大量产生AMPC)、大肠杆菌BLEE+和克雷伯氏菌BLEE+。

此外，发明人已经证实了本发明的组合物在治疗由非耐药细菌引起的感染中的有效性，使得能够用比通常开方或推荐的剂量更低的剂量的抗生素来治疗所述感染；当治疗感染时使用较低剂量的抗生素由于对抗生素的较少暴露，将减少细菌的抗生素耐药性的发生，并且因此使用比通常开方或推荐的剂量更低剂量的抗生素与银纳米颗粒组合(担载在抗生素上或与抗生素混合)，也预期包括在本发明的范围内。

另外，本发明涉及根据如上面所定义的本发明的第一个方面所述的组合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

a)制备银离子的溶解液；

b)将所述银离子溶解液加入到颗粒形式的载体；

c)将还原剂加入到b)中获得的混合物，以获得担载在所述载体上的金属银；以及

d)在所述载体为惰性载体的情况下，与至少一种抗生素混合。

特别地，当在本发明的第一个方面中所述载体是惰性载体时，所述制备方法包括以下步骤：

a)制备银离子的溶解液；

b)将所述银离子溶解液加入到颗粒形式的惰性载体；

c)将还原剂加入到b)中获得的混合物，以获得担载在所述惰性载体上的金属银；以及

d)将担载在惰性载体上的金属银与至少一种抗生素混合以获得其中载体是惰性载体的组合物。

本发明的其中金属银纳米颗粒担载在惰性载体上的组合物因此可以通过上述方法获得。

特别地，当在本发明的第一个方面中所述载体是抗生素时，制备方法包括以下步骤：

a)制备银离子的溶解液；

b)将所述银离子溶解液加入到颗粒形式的抗生素；

c)将还原剂加入到b)中获得的混合物，以获得担载在所述抗生素颗粒上的金属银。

本发明的其中金属银纳米颗粒担载在抗生素上的组合物可以由此通过上述方法获得。

在本发明的框架中，银离子可以通过溶解任意的无机盐获得，所述无机盐例如是选自由下列各项组成的组的盐：氯化银、硫化银、碳酸银或硝酸银。银离子还可以通过使用氧化银来获得。优选地，银离子通过使用氧化银或硝酸银来获得。氧化银是最优选的。

在本发明中使用的还原剂可以选自，但不限于，由下列各项组成的组：氢醌、甲醛、硫酸肼、抗坏血酸和还原糖。优选的还原剂为硫酸肼和抗坏血酸。

上面提到的方法包括实施本发明的必要步骤；下文中，描述更详细的方法，包括更多的，非必要的中间步骤，并且在任何情况下都不意在限制本发明的范围。在步骤(a)中，使用获得在终产物中具有目标浓度的银所需要的量来溶解银离子。一旦溶解，以技术人员确定的合适量，通过加入合适的碱化剂来沉淀氧化银，直至观察不到更多沉淀为止，所述碱化剂诸如，例如，氢氧化钠。所述沉淀物通过加入氨水再溶解，以便获得含氨银配合物的清亮溶液。然后在步骤b)中，将此溶液加入至处于反应器中的粉末状惰性载体,在室温下搅拌，并持续搅拌几小时。惰性载体的量基于被担载的银的量来计算。然后在步骤a中，加入还原剂，以便将离子银(沉积在惰性载体上)还原为金属银。所述还原剂可以是还原化合物，或还原化合物的混合物，依照现有技术来定。最后，例如通过离心或过滤，从获得的固体移除尽可能多的水。随后，产物在稍稍高于室温的温度下在适当的干燥装置中进行干燥。

下面，将基于实施例更详细地描述本发明；然而，在任何情况本发明的范围都不限于这些实施例。

实施例

实施例1:单独青霉素G以及青霉素G与担载在高岭土上的银纳米颗粒组合的抗菌谱

在实施例1中，借助于抗菌谱测试单独青霉素G和青霉素G与担载在高岭土上的银纳米颗粒组合针对革兰氏阴性细菌的抗微生物活性。多个革兰氏阴性细菌种属的大量菌株用于所述测试。选择参照菌株(ATCC)和具有一些耐药性或突变的菌株(例如，β-内酰胺酶生产菌，万古霉素耐药菌)。使用的菌株列在下面的表1中：

表1.革兰氏阴性菌株的清单和特性

BLEE+:产生超广谱β-内酰胺酶的菌株

从保持在-80±5℃的贮存培养物，进行菌株的复苏(TSB,TSA和血液琼脂培养物，在37℃孵育，24h)并制备工作培养物(保持在5℃±3℃)。

通过琼脂扩散法(抗菌谱)对产物进行微生物活性的研究。进行初步实验以调整每个菌株的浓度从而获得均一视野，并且选择适当的培养基(在此例中，为M-H琼脂)。只要可能，使用大的陪替氏平皿(135mm直径)，但当晕圈太大时，使用几个90mm直径的平皿以测试所有产物。程序如下：

-在琼脂上制备每个菌株的新鲜培养物(37℃,24h)。

-转移到BHI肉汤(37℃,24h)并调整接种体，并在MH肉汤中进行连续稀释。向无菌陪替氏平皿中添加1-2ml相应的稀释液(依照尺寸)，然后倒入MH琼脂，升温至45℃。使琼脂在室温固化，然后测试其中要放置待测产物的孔。

-制备合适浓度的测试底物(在无菌水中1mg/ml的混悬液和连续稀释液)。将50μl的所选浓度置于每孔中(完成前期研究以确定在每个菌株中哪个浓度提供最适宜的晕圈)。作为阳性对照，使用青霉素G(处于相同浓度)。

-平皿在37±1℃孵育24小时。然后，测量每孔中观察到的抑菌圈，并总结在下表2中。

下表2显示了对每个菌株观察到的抑菌圈(使用的产物浓度在括号内指示，因为在耐药菌株的情况下不得不使用较高的浓度)。

表2.测试产物对革兰氏阴性细菌菌株的抑菌圈(mm)

*粗体字：带有一些耐药性的菌株

PG:青霉素G PG+纳米Ag(高岭土)青霉素G+担载在高岭土上的银纳米颗粒

实施例2:单独青霉素G以及具有担载在其上的银纳米颗粒的青霉素G的抗菌谱

在实施例2中，借助于抗菌谱测试单独青霉素G和其上担载有银纳米颗粒的青霉素G针对革兰氏阴性细菌的抗微生物活性。使用多个革兰氏阴性细菌种属的大量菌株。选择参照菌株(ATCC)和具有一些耐药性或突变的菌株(例如，β-内酰胺酶生产菌，万古霉素耐药菌)。参见下表3：

表3.在实施例中使用的革兰氏阴性菌株的清单和特性

BLEE+:产生超广谱β-内酰胺酶的菌株

从保持在-80±5℃的贮存培养物，进行菌株的复苏(TSB,TSA和血液琼脂培养物，在37℃孵育，24h)并制备工作培养物(保持在5℃±3℃)。

通过琼脂扩散法(抗菌谱)对产物进行微生物活性的研究。进行初步实验以调整每个菌株的浓度从而获得均一视野，并且选择适当的培养基(在此例中，为M-H琼脂)。只要可能，使用大的陪替氏平皿(135mm直径)，但当晕圈太大时，使用几个90mm直径的平皿以测试所有产物。程序如下：

-在琼脂上制备每个菌株的新鲜培养物(37℃,24h)。

-转移到BHI肉汤(37℃,24h)并调整接种体，并在MH肉汤中进行连续稀释。向无菌陪替氏平皿中添加1-2ml相应的稀释液(依照尺寸)，然后倒入MH琼脂，升温至45℃。使琼脂在室温固化，然后测试其中要放置待测产物的孔。

-制备合适浓度的测试底物(在无菌水中1mg/ml的混悬液和连续稀释液)。将50μl的所选浓度置于每孔中(完成前期研究以确定在每个菌株中哪个浓度提供最适宜的晕圈)。作为阳性对照，使用青霉素G(处于相同浓度)。

-平皿在37±1℃孵育24小时。然后，测量每孔中观察到的抑菌圈，并总结在下表4中。

表4显示了对每个菌株观察到的抑菌圈(使用的产物浓度在括号内指示，因为在耐药菌株的情况下不得不使用较高的浓度)。

表4.测试产物对革兰氏阴性细菌菌株的抑菌圈(mm)

PG:青霉素G

7A:担载在青霉素G上的银纳米颗粒(银的来源：氧化银；还原剂：硫酸肼)

7B:担载在青霉素G上的银纳米颗粒(银的来源：氧化银；还原剂：抗坏血酸)

实施例3:确定Colargol(胶体银)的MIC和MBC

在实施例3中，使用微量稀释板技术确定Colargol(胶体银)对革兰氏阳性和革兰氏阴性菌株两者的MIC(最小抑菌浓度)值和MBC(最小杀菌浓度)值。

MIC:抑制微生物生长的最小浓度(不浑浊)

MBC:破坏99.9％的初始微生物群的最小浓度(需要对存活的群体计数并与初始浓度的微生物比较)

使用革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物两者的菌株，它们呈现出各种类型的耐药性，以及使用具有不耐药表型的参照菌株(ATCC)。测试中所包括的种属示于下表5中：

表5.研究中使用的革兰氏阴性菌株的清单和特性

下面提供了关于菌株的一些更多细节：

-对β-内酰胺类抗生素耐药的铜绿假单胞菌：

使用5株铜绿假单胞菌，包括具有野生型表型的参照菌株(不耐药)和由其衍生的4株突变体，所述突变体通过不同的机制对β-内酰胺类抗生素耐药(流出泵过表达、孔蛋白缺陷、产生金属β-内酰胺酶，等)。

通过Vitek法进行抗生素敏感性研究，获得下列情况：

PAO1:对测试的大多数抗生素敏感

PAOD1:碳青霉烯耐药(不渗透)

PAOΔmexZ:Gm:获得性青霉素酶耐药+碳青霉烯耐药

PAO1ΔDacB:对高水平β-内酰胺类抗生素耐药

PAO1pUCP24/VIM2:碳青霉烯酶生产菌(金属-U OXA)

-对头孢菌素耐药的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌：

使用2株产生β-内酰胺酶的超广谱肠杆菌(BLEE)。

-耐甲氧西林金黄色葡萄球菌：

使用2株耐甲氧西林的参照金黄色葡萄球菌(ATCC)。一株还对万古霉素中等耐药。

对菌株进行复苏(在TSB和TSA中培养,在37℃孵育24h)，检查它们的特性(通过自动化Vitek法进行生物化学和抗生素敏感性测试)，并制备工作培养物(保持在±3℃-5℃)和贮存培养物(保持在-80±5℃)。

确定Colargol(胶体银)的MIC和MBC的程序如下：

-制备每个菌株在TSA琼脂上的新鲜培养物(37℃,24h)。

-转移到BHI(脑心浸出液)肉汤(37℃,24h)并在分光光度计中在600nm调整接种物以获得大约1.0x10⁸CFU/ml的浓度。从经调整的接种物，制备1/100稀释液，并通过平板计数来确定每种微生物的初始浓度(连续稀释并一式两份地接种在TSA琼脂中)。

-制备含有每个菌株的96孔无菌微量滴定板(对于每个测试条件测定一式三份；当从三次重复测定结果中获得一个孔以上的差异时，则重复该测定)。向每孔(除了阴性对照以外)中加入0.1ml已制备的接种物(每孔中的初始浓度为大约1.0x10⁵CFU/ml)：

·Colargol 70％:在MH肉汤中的两倍稀释液(490ppm-0.12ppm或mg/ml)+微生物

·阳性对照：MH肉汤+微生物

·阴性对照：仅MH肉汤

-孵育平板(37℃,24h)并通过观察浊度来确定MIC(观察不到生长的最低浓度)。

-为了确定MBC，在来自每个孔(5-6个稀释度)的TSA琼脂上进行接种。在37℃孵育24h并计数UFC(以CFU/ml表示)后，确定破坏99.9％群体的浓度(与每种微生物的初始计数比较)。

下表6显示了每个菌株和每个条件三次重复获得的平均值。

表6.研究中使用的革兰氏阴性菌株的清单和特征

实施例4:银-抗生素相互作用研究

测试在不同类型抗生素的存在下胶体银的亚抑菌浓度(即，实施例3中获得的MIC的1/2和1/10稀释液)的作用。

为此，使用自动化装置MicroScan AutoScan 4(Siemens)，使用革兰氏阴性(Becman Coulter NM37)和革兰氏阳性(Becman Coulter PM28)卡。测试的抗生素显示在表7中。

程序如下：

以不同的方式制备的接种物进行一式三份的测试：

-制备每个菌株在TSA琼脂上的新鲜培养物(37℃,24h)。

-对每个菌株制备3个便携系统(prompt system)-D瓶(Beckman Coulter)：

·没有银的对照

·处于1/2MIC的银

·处于1/10MIC的银

-利用无菌接种刀接种小瓶以获得等价于0.5McFarland的浓度。这些肉汤中的每一个用作具有抗生素的卡的接种物(因此对于每个菌株，准备3个卡)。

-将平板与抗生素在37℃孵育24h(存在和缺少银的情况下)。

-使用LabPro软件读卡，并判读所获得的MIC值(确定银是否降低每种抗生素的初始MIC)。

表7.MicroScan装置中使用的抗生素的清单

针对革兰氏阴性细菌的效应

总体上观察到在参考ATCC株的情况下，银的作用是中度的，仅一些MCI提高了1或2个稀释度。然而，观察到银对具有耐药表型的菌株有正性效应，实现了从耐药谱(或中度)改变为针对一些抗生素的敏感谱。在最高的银浓度(1/2MIC的稀释度)观察到该效应，尽管在一些情况下也在1/10MIC浓度时观察到该效应。

获得的结果进一步详述在下面：

-假单胞菌VIM2突变体(产生金属-β-内酰胺酶):

对青霉素(哌拉西林和美洛西林)、头孢菌素(头孢吡肟)、β-内酰胺酶抑制剂(氨苄青霉素/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦)、碳青霉烯(美罗培南和亚胺培南)以及磷霉素敏感。

-假单胞菌OrpD突变体(孔蛋白缺陷):

在此例中，1/10MIC银浓度实现了对青霉素(美洛西林和哌拉西林)和β-内酰胺酶抑制剂(哌拉西林/他唑巴坦)敏感。另一方面，在1/2CIM的银浓度存在下，实现了对头孢菌素(头孢他啶、头孢吡肟)、单环内酰胺类(氨曲南)和磷霉素敏感。

-假单胞菌MexR突变体(流出泵过表达)：

在1/2CMI的银浓度存在下，观察到对磷霉素敏感，并观察到头孢噻肟、氨苄青霉素/舒巴坦和多粘菌素的MIC的改善。

-假单胞菌DacB突变体(大量产生AMPC):

银具有正性效应，实现了向对磷霉素和氨曲南敏感的改变，以及改善对哌拉西林、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦和多粘菌素的MIC值的中等作用。

-大肠杆菌BLEE+:

该菌株变得对青霉素和头孢菌素、β-内酰胺酶抑制剂(氨苄青霉素/舒巴坦)、氨基糖甙类(庆大霉素和妥布霉素)、喹诺酮类、四环素和甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑敏感。

-克雷伯菌BLEE+:

该菌株变得对青霉素、大部分头孢菌素、氨曲南、氨苄青霉素/舒巴坦、喹诺酮、四环素和甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑敏感。

因此，银提高了与其组合的抗生素对存在抗生素耐药性的细菌的作用。

针对革兰氏阳性细菌的效应

观察到对喹诺酮类(包括万古霉素)的提高的敏感性。在例如菌株SA700698的情况下，观察到银还有助于碳青霉烯类的作用。

实施例5:使用epsilometry E-测试评价Collargol与抗生素组合的加性效应或协同效应

进行epsilometry E-测试来确定Collargol与抗生素组合存在加性效应或协同效应。使用临床来源的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的菌株，表现出对万古霉素的升高的MIC(≥1,5μg/ml)。

(表1)。

表8.研究中使用的革兰氏阴性菌株的清单和特性

为了评价collargol-抗生素的协同性，进行epsilometry E-测试。所述测试基于琼脂扩散法并且在于使用具有被测试抗生素的15个浓度的预定稳定梯度的测试条。在菌株生长后，椭圆形抑菌圈，对应于分割点的抗生素浓度是MIC。

在缺少和存在银(1/2和1/10MIC)的情况下，对抗生素万古霉素、利奈唑胺和特地唑胺进行测试。程序如下：

-制备每个菌株在血液琼脂上的新鲜培养物(37℃,24h)。

-制备MH琼脂平板，不含银以及补充以在前面试验中对每个菌株确定的1/2和1/10MIC银(MH-1/2；MH-1/10)(每个菌株每种类型3个平板)。

-对每个菌株制备0.5McFarland混悬液(便携系统(Promp system)-D接种瓶)并将接种物铺展在MH琼脂平板的表面上。

-放置E-测试条并在37℃孵育24h。

-依照所获得的椭圆形抑菌圈中的分割点，确定在存在和缺少银的情况下每种抗生素的MIC。

下表9显示了每个菌株和抗生素三个MH平板中获得的MIC值(分割点)。

表9.在缺少和存在银(1/2和1/10MIC的colargol)的情况下在E-测试测定中获得的MIC值

NP:未进行

以灰色为背景的区域显示在银的存在下观察到MIC减小的菌株。在大多数菌株中，在银(1/2MIC)的存在下观察到MIC的降低。

选择显示对万古霉素的MIC显著降低以及与其他抗生素相比有些中度降低的那些菌株。因此，选择菌株3、9、10、11和14(以粗体标记)用于棋盘滴定法(Checkerboard synergy study)。

为了确定collargol和万古霉素之间存在协同活性，使用棋盘滴定测试，该测试使用具有“U”形底的平板(TPP)。制备两种抗菌剂的双重亚抑菌系列稀释液，使得collargol的浓度垂直地减小(上-下)，万古霉素的浓度水平减小(左-右)。见下表10。

表10.每孔的Collargol和万古霉素浓度

为了量化两种组合的化合物的协同活性，使用分数抑菌浓度指数(IFIC)参数。依照下面的公式，此指数涉及抗菌剂1与抗菌剂2单独以及组合的MIC：

考虑如果IFIC值<0.5，则存在协同效应。其他可能的结果为：

0.5<IFIC<1:加性效应

IFIC＝1:无效果

IFIC>1:拮抗

程序如下：

-制备每个菌株在血液琼脂上的新鲜培养物(37℃,24h)。制备接种物，将菌落悬浮在MH肉汤中，直至获得0.085的OD600nm(混悬液的1/50稀释度)。

-制备collargol和万古霉素的溶液，考虑对每个评价菌株获得的MIC。

-如下准备孔：

·行AF：制备collargol在MH中的双倍稀释液,从CMI开始(直到并包括列10)。

·列1-10:加入制备好的万古霉素的双倍稀释液，从CMI开始(直到并包括列F)。

·对照：列G，仅collargol(MIC对照)；列H，仅万古霉素(MIC对照)；列11，阳性生长对照(MH+接种物)；列12，阴性对照(MH)；

-将制备好的接种物加入到各孔(除了阴性对照列以外)并将平板在37℃孵育20-24h。

-确定单独的或组合的每种产物的MIC(没有观察到生长的最低浓度)并计算每行的IFIC(其中没有观察到生长的最后一个孔)。选择其中获得最小IFIC值的孔。

在上面的表10中，带阴影的格子表示其中观察到生长的孔。

对每个菌株获得的结果显示在下表11中。在大多数格子中观察到加性效应，一些在协同效应的范围内(IIFIC＝0.5)。

表11.在棋盘测试中获得的IFIC值

实施例6:担载有银纳米颗粒的高岭土的结构特征

关于担载在高岭土上的银的特征，通过X-线吸收对其粒径进行了分析，并通过场发射扫描电子显微镜(FESEM)获得了图像，以便了解高岭土的形态，以及银在其上沉积的方式。

图1包括其中可以观察到在高岭土微粒的层状结构上的球状银纳米颗粒的图像。

通过EDX分析，在尺寸为约30nm的所述纳米颗粒中鉴定到银。

图1代表高岭土的FESEM图像：

图1(a)示出了其上沉积有银纳米颗粒的高岭土微粒(x8870)。

图1(b)示出了在x20380下图1(a)中突出显示的区域。

图1(c.1)示出了在x66000下图1(b)中突出显示的区域(c)。可以在高岭土的层状结构的表面上清晰地识别到银纳米颗粒。

当在反散射电子下观察时在图1(c.2)中可以进一步识别银纳米颗粒(白色)，与没有银纳米颗粒的区域相比。

图1(d)示出了在x66000下图1(b)中突出显示的区域(d)。可以在高岭土的层状结构的边缘上清晰地识别到银纳米颗粒。

通过EDX谱证实在图1(c.2)中的白色区域的银纳米颗粒的存在。

Claims (15)

1.一种组合物，包含担载在载体上的金属银纳米颗粒，所述载体为颗粒的形式，其中所述载体为抗生素。

2.根据权利要求1所述的组合物，所述颗粒的平均直径为0.1-200微米。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述抗生素选自青霉素、头孢菌素、单环内酰胺、β内酰胺酶抑制剂、碳青霉烯、氨基葡萄糖苷、喹诺酮、四环素、糖肽或选自包括下列的组：多粘菌素、磺胺甲基异噁唑/甲氧苄氨嘧啶、磷霉素、呋喃妥因、氯霉素、克林霉素、夫西地酸、利奈唑胺、莫匹罗星、达托霉素、克林霉素和利福平。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中银相对于抗生素的总量的重量比为10:100-0.1:100。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，其中所述金属银纳米颗粒的平均粒度包括在1-100纳米的范围内。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述金属银纳米颗粒的平均粒度包括在10-90纳米的范围内。

7.根据权利要求5所述的组合物，其中所述金属银纳米颗粒的平均粒度包括在10-70纳米的范围内。

8.根据权利要求5所述的组合物，其中所述金属银纳米颗粒的平均粒度包括在10-50纳米的范围内。

9.根据权利要求5所述的组合物，其中所述金属银纳米颗粒的平均粒度包括在20-30纳米的范围内。

10.一种纳米体系，包括根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，所述纳米体系用于治疗由对至少一种抗生素耐药的至少一个细菌菌株引起的感染。

11.根据权利要求10所述的纳米体系，其中所述感染由对至少一种抗生素耐药的至少一个革兰氏阴性细菌菌株引起。

12.根据权利要求1-9中任一项所述的组合物的制备方法，包括以下步骤：

a)制备银离子的溶解液；

b)将所述银离子的溶解液加入到颗粒形式的抗生素；

c)将还原剂加入到b)中获得的混合物，以获得在所述抗生素上担载的金属银。

13.一种药物组合物，包含至少一种药学上可接受的赋形剂以及根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，所述药物组合物用作药物。

14.一种药物组合物，包含至少一种药学上可接受的赋形剂以及根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中所述药物组合物用于治疗感染。

15.一种药物组合物，包含至少一种药学上可接受的赋形剂以及根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，所述药物组合物用于口服治疗感染。

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