CN110494134A - 用于缺血相关损伤的预防/减少的他汀 - Google Patents

用于缺血相关损伤的预防/减少的他汀 Download PDF

Info

Publication number
CN110494134A
CN110494134A CN201880023430.1A CN201880023430A CN110494134A CN 110494134 A CN110494134 A CN 110494134A CN 201880023430 A CN201880023430 A CN 201880023430A CN 110494134 A CN110494134 A CN 110494134A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ischemic
compound
sion
minutes
reperfu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201880023430.1A
Other languages
English (en)
Inventor
莉娜·巴迪蒙·马埃斯特罗
吉玛·维拉胡尔·加西亚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guiniager Ltd
St Paul's Hospital Church Foundation
Original Assignee
Guiniager Ltd
St Paul's Hospital Church Foundation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from EP17164137.6A external-priority patent/EP3381452A1/en
Application filed by Guiniager Ltd, St Paul's Hospital Church Foundation filed Critical Guiniager Ltd
Publication of CN110494134A publication Critical patent/CN110494134A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4418—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cyproheptadine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本公开一般地涉及缺血相关损伤的预防和/或减少。更具体地，本公开涉及用于缺血相关损伤的预防和/或减少的化合物。所述化合物为他汀。

Description

用于缺血相关损伤的预防/减少的他汀
技术领域
本公开一般涉及缺血相关损伤的预防和/或减少。更具体地，本公开涉及一种化合物，其用于缺血相关损伤的预防和/或减少。
背景技术
当细胞区域的血流不足以支持细胞的常规代谢活动时，缺血就会发生。因此，受影响的组织或器官可能遭受严重损伤。受限制的血流导致代谢废物产物的积累和细胞能量的不足，这导致细胞功能的故障，并最终导致细胞坏死。此外，缺血诱发细胞凋亡以及局部和全身性炎症，从而导致额外的组织损伤。
再灌注(即，缺血一段时间后对受影响的器官或组织的血液供应的恢复)导致由于炎症和氧化应激引起的其他损伤(所谓的再灌注损伤)。因此，尽管再灌注挽救了缺血组织，否则缺血组织会因积累缺血损伤而死亡，但是与再灌注开始时的损伤相比，恢复受影响组织的血流加剧了伤害，因而增加了最终梗塞面积(梗塞范围(size of infarction))。最终梗塞面积是由缺血期间诱发的损伤和反过来与缺血相关联的再灌注期间产生的损伤这两者决定的。然而，为了限制在血流受限期间的缺血损伤，立即干预和测量以确保缺血器官或组织的再灌注是必要的。
缺血的一个示例是心脏组织的灌注受损。这导致了心脏正常运作的能力丧失，因为组织变得缺氧和缺乏能量。心脏损伤与缺血期的持续时间直接相关。目前，用于改善受损心脏组织的血流的干预措施大多是侵入性的，包括有或没有支架置入的经皮冠状动脉介入治疗、冠状动脉旁路手术、血管成形术和动脉内膜切除术。然而，存在与这些侵入性手术相关的高风险。
在分子水平上，缺血期间的持续缺氧将心脏代谢转向产生细胞pH降低的无氧糖酵解。为了缓冲氢离子的这种积累，Na+/H+交换器排出过量的氢离子，其产生钠离子的大量内流和Ca2+超载。缺血还耗尽细胞ATP，其使得ATP酶(例如，Na+/K+ATP酶)失活、减少活性Ca2+外流、并限制内质网(endoplasmic reticulum,ER)对钙的再摄取，因而产生细胞中钙超载。这些变化伴随着线粒体通透性转换(mitochondrial permeability transition,MPT)孔的开放，MPT孔的开放消散线粒体膜电位并进一步损害ATP产生并且还引发细胞死亡。因此，在心脏中，这些细胞变化伴随着细胞内蛋白酶(例如，钙蛋白酶)的活化，其损伤肌原纤维并产生过度挛缩和挛缩带坏死。这些改变以及组织损伤程度在一定程度上根据缺血期的大小和持续时间而变化。
缺血损伤和再灌注损伤之间存在相互作用。缺血损伤越大，对再灌注损伤的影响越大。例如，在缺血期间，细胞内pH降低，这活化了Na+/H+交换系统，从细胞挤出H+来交换Na+。这导致细胞内钠的增加，再灌注期间细胞内钠的增加持续。挤出钠的正常Na+/K+ATP酶系统在该酸性介质中是被抑制的。这导致Na+/Ca2+交换器的活化，从而导致细胞内钙的积累并最终导致细胞死亡。在缺血期间发生且促成缺血/再灌注损伤的其他生物化学事件是诱导全身性和局部炎症反应以及对血小板活化的易感性(susceptibility)增加。再灌注时发生的炎症反应是循环白细胞(主要是中性粒细胞)和血管内皮之间以及心脏驻留巨噬细胞和肥大细胞之间的协调相互作用。重新引入O2导致呼吸爆发(respiratory burst)现象，产生有毒的氧衍生自由基，如超氧阴离子(O2 -)、H2O2和羟基自由基(OH·)。这种超出内源性清除系统能力的氧化剂的生成导致补体活化、白三烯(leukotriene,LT)B4和血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)的产生、P-选择素从怀布尔-帕拉得小体(Weibel-Palade bodies)的转移、以及通过核转录因子(例如，NF-κB)的活化合成E-选择蛋白和细胞间粘附分子(intracellular adhesion molecule,ICAM)-1。随着钙的增加，还存在细胞质的粒子组成的变化。例如，在心肌细胞中由于能量浪费机制存在氧化磷酸化解偶联和张力生成，该能量浪费机制例如，线粒体内膜和肌质网处钙转运的活化增加。这造成了恶性循环，在该恶性循环中钙引起黄嘌呤氧化酶增加、促进氧自由基的产生、导致进一步的钙内流。细胞因子、PAF3和LTB4的流出促进白细胞募集，导致局部炎症并最终导致全身炎症。
尽管对缺血期间发生的分子事件的病理生理学的理解有所提高，但是仍然没有有效的治疗方法来预防缺血相关损伤或使其最小化。因此，对于预防或减少缺血相关损伤的改进方法存在未满足的需求，特别是在缺血相关损伤是缺血损伤的范围内。此外，需要对患者风险较小、成本集约较低的预防/降低缺血相关损伤和/或导致较少缺血相关损伤的方法，特别是关于缺血引起的梗塞面积、由缺血引发的细胞死亡(坏死和/或凋亡)引起的组织损伤、由缺血期间在缺血组织/器官内发生的炎症反应引起的组织损伤、由缺血引发的全身炎症反应引起的损伤、和/或缺血后组织中的瘢痕形成。此外，需要对患者风险较小、成本集约较低的预防/降低缺血相关损伤和/或导致较少缺血相关损伤的方法，特别是关于由细胞内蛋白酶引起的肌原纤维的损伤。特别地，需要允许通过单次治疗同时实现这些目标中的若干目标的手段。
本公开满足以上这些需求，并通过以下描述的不同方面和实施方案解决上述问题。
发明内容
在下面更详细地描述本发明之前，应当理解的是，本发明不限于本文中描述的特定方法论、方案和试剂，因为这些都可以改变。也应理解的是，本文中使用的术语仅为了描述特定实施方案的目的，而不旨在限定本发明的范围，本发明的范围将仅由所附权利要求来限制。除非另外定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员的通常理解相同的含义。处于本发明的目的，本文中引用的所有文献通过引用整体并入。
此外，以下实施方案可以在任何不导致逻辑矛盾的情况下无限制地彼此组合。因此，即使下文中没有明确说明，本公开也还应包括以下描述的实施方案的任何可行组合。此外，关于本发明的一个方面的实施方案可以在任何不导致逻辑矛盾的情况下无限制地与本发明的另一方面组合。
本公开的作者发现，在缺血发作后他汀(statin)的静脉内给药(例如，阿托伐他汀或辛伐他汀的β-羟基酸形式)减少了缺血相关损伤。特别是，他们发现在小型和大型动物模型(啮齿动物和猪)中，心肌缺血后早期这种治疗方案早期给药通过限制缺血相关损伤而诱发心脏保护。
从所附的实施例可以看出，在闭胸冠状动脉球囊闭塞的猪模型中，在缺血发作后早期静脉输注他汀阿托伐他汀限制了缺血诱发的心肌损伤、减少了缺血心肌中细胞死亡的进行并且限制了梗塞心肌组织中的炎症反应。尽管本发明人不希望受任何理论的束缚，但本发明人的观察结果表明，该保护作用可能涉及RhoA抑制和AMP-活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)活化。在与人体生理学非常相似的猪模型中的这些观察结果具有在人类患者中实施的高转化潜力，目的是为了通过在缺血发作后早期静脉内他汀给药来预防/减少缺血相关损伤。
优选地，本公开定义如下：
[1]一种化合物，其用于受试者中缺血相关损伤的预防和/或减少，其中，所述化合物为他汀，其中，所述化合物在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药向所述受试者给药，其中，所述化合物在缺血发作后尽早给药。
[2]根据[1]所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注之前的缺血期间由缺血导致的损伤。
[3]根据[1]或[2]所述的所使用的化合物，其中，所述化合物以单剂量给药。
[4]根据[1]至[3]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物在缺血发作后不超过60分钟、优选地在缺血发作后不超过45分钟、更优选地在缺血发作后不超过30分钟、更优选地在缺血发作后不超过20分钟、更优选地在缺血发作后不超过15分钟给药。
[5]根据[1]至[4]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物在再灌注之前至少15分钟、优选地在再灌注之前至少20分钟、更优选地在再灌注之前至少30分钟、更优选地在再灌注之前至少45分钟给药。
[6]根据[1]至[5]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物选自表1所列的化合物，其中优选地，所述化合物选自由阿托伐他汀(atorvastatin)、辛伐他汀的β(simvastatin)-羟基酸形式、辛伐他汀、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、美伐他汀(mevastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)和瑞舒伐他汀(rosuvastatin)所组成的组，其中更优选地，所述化合物为阿托伐他汀(式I)或式II的辛伐他汀的β-羟基酸形式，其中，最优选地，所述化合物为阿托伐他汀(式I)或式III的辛伐他汀的β-羟基酸形式：
[7]根据[1]至[6]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物以范围在0.1至1mg/kg体重、优选0.2至0.8mg/kg体重的剂量给药。
[8]根据[1]至[7]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血在组织或器官中产生，所述组织或器官选自由心脏、脑、肾、肠、胰腺、肝、肺、骨骼肌及其组合所组成的组，其中优选地，所述缺血在心脏中产生。
[9]根据[1]至[8]中任一项所述的所使用的化合物，其中，缺血相关损伤是由于动脉粥样硬化、血栓形成、血栓栓塞、脂质栓塞、出血、支架、手术、血管成形术、旁路手术、器官移植、应激性心肌病(塔库苏博综合征(Takotsubo syndrome，也称心碎综合征))、血管收缩、ST段抬高的心肌梗塞、非ST段抬高的心肌梗塞、不稳定性心绞痛、或这些两者或两者以上的组合引起的缺血而导致的，其中，优选地，所述缺血与ST段抬高的心肌梗塞、非ST段抬高的心肌梗塞或不稳定性心绞痛有关。
[10]根据[1]至[9]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤包括选自由肌细胞细胞死亡(优选地通过坏死和凋亡，更优选地通过坏死)、由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤和/或因缺血导致的炎症反应引起的损伤所组成的组的至少一种损伤或由其组成(优选地，由其组成)，所述因缺血导致的炎症反应优选地由缺血引发(且优选地在再灌注期间被进一步放大)，其中，更优选地，所述缺血相关损伤由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤组成。
[11]根据[1]至[10]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤包括由细胞内蛋白酶引起的对肌原纤维的损伤(所述损伤引起过度挛缩和/或挛缩带坏死)或由其组成(优选地，由其组成)。
[12]根据[1]至[11]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括由缺血引起的梗塞面积的减少、优选地心肌损伤的减少，或由其组成。
[13]根据[1]至[12]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少导致由于缺血/再灌注引发的细胞死亡、优选地由于缺血引发的细胞死亡引起的组织损伤的减少。
[14]根据[1]至[13]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括由缺血的组织/器官中炎症反应的预防或减少，或由其组成。
[15]根据[1]至[14]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括由缺血和/或再灌注引发、优选由缺血引发的血细胞、优选白细胞中的炎症反应的减少，或由其组成。
[16]根据[1]至[15]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括缺血后组织中、优选缺血后心脏组织中的瘢痕大小的减少，或由其组成。
[17]根据[1]至[16]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述受试者为人。
[18]根据[1]至[17]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述受试者患有血脂异常，其中，优选地，所述血脂异常为高胆固醇血症。
[19]根据[1]至[18]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述他汀不是在再灌注时和/或再灌注之后给药。
[20]根据[1]至[19]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述他汀不是在再灌注期间给药。
[21]根据[1]至[20]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物是在再灌注之前至少15、优选地至少20分钟、更优选地至少30分钟、甚至更优选地至少45分钟给药。
[22]根据[1]至[21]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述给药降低至少一种心脏损伤相关标志物的水平，所述标志物选自由IMA(缺血修饰白蛋白)、CFABP(心脏脂肪酸结合蛋白)和肌红蛋白所组成的组的，其中，优选地，所述给药降低心脏损伤相关标志物IMA(缺血修饰白蛋白)、CFABP(心脏脂肪酸结合蛋白)和肌红蛋白的水平。
[23]根据[1]至[22]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述给药导致心肌梗塞面积减少。
[24]根据[1]至[23]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述他汀抑制RhoA活化。
[25]根据[1]至[24]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述给药活化AMPK(通过AMP活化的蛋白激酶的磷酸化)。
[26]根据[1]至[25]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述给药导致磷酸化(活性)p53的细胞水平降低。
[27]根据[1]至[26]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述给药导致裂解(活性)半胱天冬酶-3的细胞水平降低。
[28]根据[1]至[27]中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述给药导致mRNA和/或蛋白水平的MCP-1/CCL2的细胞水平降低。
[29]一种药物组合物，其包括：
-根据[1]至[28]中任一项所述的所使用的化合物；和
-药学可接受赋形剂或载体，
所述药物组合物用于受试者中缺血相关损伤的预防/减少。
在所述药物组合物的优选实施方案中，所述化合物、所述预防/减少、所述缺血相关损伤和/或所述受试者如[2]至[28]中任一项所定义。
[30]一种化合物在制备用于预防/减少受试者中缺血相关损伤的药物中的用途，
其中，所述化合物为他汀，
其中，所述化合物在缺血发作之后、但在再灌注之前通过静脉内给药向所述受试者给药，
且其中，所述化合物在缺血发作之后尽早给药。
在所述用途的优选实施方案中，所述化合物如[2]至[28]中任一项所定义。
[31]一种治疗方法，其包括给患有缺血相关损伤的受试者施用药学有效量的化合物的步骤，
其中，所述化合物为他汀，
其中，所述化合物在缺血发作之后、但在再灌注之前通过静脉内给药向所述受试者给药，
且其中，所述化合物在缺血发作之后尽早施用。
在所述治疗方法的优选实施方案中，所述化合物如[2]至[28]中任一项所定义。
附图说明
图1为示出了实施例1基础上的实验方案的流程图。MI：心肌梗塞。Sac：牺牲；PBMC：外周血单核细胞(一种白细胞)；atorva：阿托伐他汀。
图2示出了从实验中获得的数据，该实验通过研究90min缺血期内对心脏损伤相关标志物的影响，解决了冠状动脉闭塞发作后早期静脉内给药阿托伐他汀是否预防缺血相关损伤的问题。A.IMA：缺血修饰白蛋白；B.CFABP：心脏脂肪酸结合蛋白；C.肌红蛋白。D.与对照组相比的减少总百分比。结果表示为相对于基线水平的增加。与对照组相比*p<0.05，并随时间变化；与对照组相比N＝7只动物/组。
图3为示出了阿托伐他汀抑制缺血心肌中的RhoA活化(向细胞膜易位(translocation))的数据。A.总RhoA表达。B.表达为细胞质中检测到的RhoA(cyt；非活性形式)与膜中检测到的RhoA(mb；活性形式)之间的比例的RhoA抑制。与对照组相比*p<0.05；isch：缺血心肌。
图4是来自冠状动脉结扎小鼠模型的数据，其示出了不同类型的他汀(阿托伐他汀和β-OH-辛伐他汀)和特定的RhoA抑制剂(CCG1423)所表现的心脏保护作用。(A)通过EGC评估的冠状动脉结扎和缺血诱导。(B)梗塞面积的组织学分析。(C)通过8-羟基鸟苷染色的氧化损伤的组织学分析(DNA氧化损伤标志物)。与对照组相比*p<0.05。LV：左心室；Atorva：阿托伐他汀；β-OH-simva：辛伐他汀的β-羟基酸形式；RhoA inh：RhoA抑制剂。
图5示出了阿托伐他汀对(A)心脏保护分子AMPK和eNOS(内皮型一氧化氮合酶)的心肌转录水平和(B)凋亡相关标志物p53和半胱天冬酶-3的影响。Isch：缺血心肌；Non-Isch：非缺血/远端心肌。
图6示出了阿托伐他汀对蛋白质表达/活化的影响，并且从图中可以看出，阿托伐他汀活化(磷酸化)AMPK(A)而阿托伐他汀未进一步增强缺血诱导的eNOS活化(B)。与非缺血相比*p<0.05；与对照组相比Atorva：阿托伐他汀。Isch：缺血心肌；Non-Isch：非缺血/远端心肌。
图7是来自实验的数据，其示出了在阿托伐他汀给药前AMPK-抑制剂(即，C-化合物)的给药消除了与阿托伐他汀相关的心脏保护作用。(A)对梗塞面积的影响。(B)对氧化损伤的影响。与对照组和AMPK inh+阿托伐他汀相比*p<0.05；IS：梗塞面积；atorva：阿托伐他汀。
图8示出了以下数据：阿托伐他汀的静脉内给药降低了通过缺血心肌中p53(P-p53；图8A)和半胱天冬酶3(裂解的半胱天冬酶3；图8b)的活化而评估的凋亡的进行。与对照组-Isch组相比*p<0.05；n＝7只动物/组。Atorva：阿托伐他汀；Isch：缺血心肌；Non-Isch：非缺血心肌。Casp3：半胱天冬酶3；T-Casp3：总半胱天冬酶3。
图9示出了阿托伐他汀的静脉内给药减弱了心肌MCP-1/CCL2表达。与对照组-Isch组*p<0.05；n＝7只动物/组。Atorva：阿托伐他汀；Isch：缺血心肌；Non-isch：非缺血心肌。
图10示出了提供阿托伐他汀抗炎症作用的证据的数据，该阿托伐他汀的抗炎作用通过防止PBMC中的缺血相关MCP-1/CCL2诱导而扩展至全身循环。与Isch前相比*p<0.05；与对照组Isch后Atorva：阿托伐他汀治疗的动物；Isch：缺血。
图11示出了来自通过持续性冠状动脉结扎心肌梗塞的大鼠模型(图11A)的数据，该数据解决了缺血后早期阿托伐他汀的单剂量静脉注射是否减少诱导缺血后30天评估的心肌瘢痕形成的问题(图11B)。
图12示出了从高胆固醇血症猪的实验中获得的数据，该实验通过研究90min缺血期内对心脏损伤相关标记物的影响，解决了即使在高胆固醇血症存在的情况下在冠状动脉闭塞后早期阿托伐他汀的静脉内给药是否预防缺血损伤的问题。(A)IMA：缺血修饰白蛋白；(B)CFABP：心脏脂肪酸结合蛋白；(C)肌红蛋白；(D)与对照组相比量化减少。与对照组相比*p<0.05，并随时间变化；与对照组相比
图13示出了在冠状动脉闭塞(缺血)发作后早期向高胆固醇血症猪的阿托伐他汀静脉内给药减少了缺血心肌中的中性粒细胞浸润。与对照组相比*p<0.05。
图14示出了在缺血和再灌注的猪模型中，缺血期间他汀的静脉内给药(β-OH-辛伐他汀)保护心脏免受与缺血损伤相关的再灌注损伤，导致梗塞面积尺寸的总体减小(A)，和缺血心肌中的半胱天冬酶-3活化减少(B)、中心粒细胞浸润(C)、氧化应激相关损伤(D)以及线粒体膜电位的更高保留(JC-1活性；E)。
具体实施方式
1.定义
为了便于理解本专利申请，本公开文本中的一些术语和表达的含义将在下文解释。
如本文中所用，术语“缺血”涉及可能发生在缺乏氧供应和/或代谢物供应的任何器官或组织中的病症。缺血发生在由于灌注(即，供血)不足，氧的供应与需求之间存在失衡的时候。供氧不足可能是由血栓的形成、狭窄动脉粥样硬化的存在、再狭窄、贫血、中风、动脉凝结、血管收缩和/或微血管系统的内皮功能障碍(塔库苏博综合征)所引起的。
术语“缺血损伤”和“缺血性损伤”在本文中用作同义词。这些术语涉及由于在再灌注开始之前缺血期间对器官或组织的供血不足而引起的器官或组织损伤(即，缺血损伤是在缺血发作和再灌注开始之间的时间期间由缺血引起的损伤)。缺血损伤的典型和病理学表现是缺血区变得苍白。相反，在再灌注中，非坏死缺血组织恢复其生理颜色。
从生化角度看，缺血损伤的特征在于，缺血组织中局部性的和血液(白细胞，优选PBMC)中全身性的pH(酸化)变化、ATP浓度变化、血小板被活化的易感性增加、缺血组织局部和血液系统两者中的炎症反应增强。
缺血损伤可以例如由动脉粥样硬化、血栓形成、血栓栓塞、脂质栓塞、出血、支架、手术、血管成形术、手术中旁路桥术(bypass during surgery)、器官移植、总缺血、心肌梗塞、血管收缩、微血管功能障碍和/或其中两种或多种的组合引起。优选地，缺血是由于动脉粥样硬化斑块破裂和血栓叠加(即心肌梗塞)导致的。
所述缺血损伤可能涉及肌细胞的细胞死亡(优选通过坏死和/或凋亡，更优选地通过坏死)，因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤，和/或缺血引发的、并在再灌注期间进一步放大的炎症反应而引起的损伤。优选地，所述缺血损伤由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤组成。例如，所述细胞内pH酸化可能是低于pH6.7的酸中毒，其对心肌造成损伤作用(例如，收缩衰竭)。优选地，因缺血导致的所述细胞内pH酸化对心肌具有损伤作用，引起收缩衰竭。
缺血期间，厌氧代谢占优势，产生了细胞pH的降低。为了缓冲氢离子的这一积累，Na+/H+交换器排出过量的氢离子，这产生大量的钠离子内流(参见例如以下公开物的图6.1：卡洛格里斯(Kalogeris)等，Int Rev Cell Mol Biol.2012；298:229-317，其总结了促成组织损伤的缺血和再灌注成分的主要病理事件)。缺血还耗尽细胞ATP，使得ATP酶(例如，Na+/K+ATP酶)失活、降低了活性Ca2+外流、并限制了内质网(ER)对钙的再摄取，从而产生细胞内钙超载。这些变化伴随着线粒体通透性转换(mitochondrial permeability transition,MPT)孔的开放，MPT孔的开放消散线粒体膜电位并进一步削弱ATP的产生。在心脏中，这些细胞变化伴随着细胞内蛋白酶(例如，钙蛋白酶)的活化，其损伤肌原纤维并产生过度挛缩和挛缩带坏死。这些改变以及因此组织伤害程度在一定程度上随供血减少幅度和缺血期持续时间而变化(Kalogeris et al.,Int Rev Cell Mol Biol.2012；298:229-317)。
缺血损伤可能涉及以下症状：胸部不适、呼吸急促、上身其他区域不适、感到恶心和/或焦虑。
如本文中所用，术语“再灌注”涉及到缺血组织的血流的恢复。尽管向缺血组织的血液再灌注有明确的益处，但是众所周知，再灌注本身会引出一系列自相矛盾地伤害组织的不良反应。
急性心肌缺血期间，细胞内pH降低至低于7.0，而在再灌注时，通过乳酸冲洗和Na+-H+交换器以及Na+-HCO–同向转运体的活化，生理pH迅速恢复。这种突然的pH改变通过在再灌注的前几分钟内允许MPTP(线粒体通透性转换孔)开放和心肌细胞严格过度挛缩，促使致命性心肌再灌注伤害的心肌细胞死亡。用酸性缓冲剂再灌注缺血动物心脏可以减少MI(心肌梗塞)面积实施例(Hausenloy DJ and Yellon DM,J Clin Invest.2013Jan 2；123(1):92-100)。
如本文中所用，术语“再灌注损伤”涉及在缺血期后当供血返回到器官或组织时引起的器官或组织损伤。因此，再灌注损伤是在再灌注开始和再灌注结束之间的时间期间引起的损伤(通常，该损伤的主要部分将在再灌注的最初几分钟内引起)。再灌注伤害的潜在机制是复杂的、多因素的，且涉及(1)血流重建时分子氧的再引入促使活性氧(reactiveoxygen species,ROS)的生成，(2)钙超载，(3)MPT孔的开放，(4)内皮功能障碍，(5)血栓前表型的出现，以及(6)明显的炎症反应(Yellon and Hausenloy,New England Journal ofMedicine(2007),Sep.13；357(11):1121-35)。缺血期内血液中氧和营养物质的缺乏造成了在其中循环的恢复通过诱导氧化应激而非恢复正常功能而导致炎症和氧化损伤的情况。与再灌注相关联的氧化应激可能引起对受影响组织或器官的损伤。再灌注损伤的生物化学特征在于，缺血事件期间氧损耗，然后是再灌注期间的再充氧并伴随产生活性氧。与再灌注一起发生的损伤是缺血期间积累的物质与再灌注时传递的物质之间相互作用的结果。这些事件的基础是氧化应激，其被定义为氧自由基和内源清除系统之间的失衡。结果是细胞损伤和死亡，细胞损伤和死亡最初是局部的，但如果不检查炎症反应，则最终变成全身性的。
主要特征在于氧爆发和炎症反应的再灌注损伤以及随之发生的组织损伤可能在在梗塞(缺血)组织(例如，心脏)的血运重建后发生。这与线粒体膜电位受损相关联，进一步地与细胞凋亡的进行、与再灌注相关的心律失常(arrhythmias)、心脏顿抑(cardiacstunning)和由缺血引起的梗塞面积的总体增加有关。因此，最终梗塞面积(组织损伤)取决于缺血损伤(缺血期间本身引起的组织损伤)和较小程度的由再灌注引起的组织损伤。
再灌注损伤可以由例如机械事件(例如，心肌梗塞后血流的恢复)而引起，或者由一种或多种外科手术程序或恢复向已经经历了血流供应减少的组织或器官的血流的其他治疗性干预(例如，在移植期间)而引起。这类外科手术程序包括例如冠状动脉旁路移植手术、冠状动脉成形术和器官移植手术等(例如，心肺旁路手术)。在具体实施方案中，再灌注损伤是由于缺血过程的治疗而导致的，该缺血过程是由于动脉粥样硬化斑块破裂/侵蚀并和血栓叠加(心肌梗塞)、血栓栓塞、脂质栓塞、出血、支架、手术、血管成形术、手术期间旁路结束、器官移植、总缺血、血管收缩或微血管功能障碍或其结合而导致的。
再灌注损伤可能涉及氧化损伤、和由于炎症反应的损伤和/或心肌细胞死亡，所述炎症反应在缺血期间引发的所述炎症反应虽然较弱，但是在再灌注时变得明显。优选地，再灌注损伤涉及氧化损伤、由于炎症反应的损伤和心肌细胞死亡。更优选地，再灌注损伤涉及氧化损伤、由于炎症反应的损伤和心肌细胞死亡，而不是由于细胞内pH酸化。
再灌注损伤可能涉及心悸、急性呼吸窘迫、疲劳和/或水肿的症状。
如本文中所用，术语“缺血相关损伤”指的是在缺血期间诱导的损伤(缺血损伤)和与该缺血损伤相关联的再灌注期间产生的损伤(再灌注损伤)的总和。因此，缺血相关损伤是缺血发作和再灌注结束之间的时间期间引起的损伤。在本公开的最优选实施方案中，“缺血相关损伤”限于缺血损伤，即，在缺血发作和再灌注开始之间的时间期间由缺血引起的损伤(即，缺血相关损伤是在缺血发作之后、但在再灌注之前的缺血期内引起的损伤，并因此包括“缺血损伤”，而不包括“再灌注损伤”)。
在优选实施方案中，所述缺血相关损伤由选自由肌细胞死亡(优选地通过坏死和/或凋亡，更优选地通过坏死)、由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤和/或由因缺血导致的炎症反应引起的损伤所组成的组的至少一种损伤组成，所述因缺血导致的炎症反应优选由缺血引发、并在再灌注期间被进一步放大。在更优选的实施方案中，所述缺血相关损伤由肌细胞死亡(优选地通过坏死和/或凋亡，更优选地通过坏死)、由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤和由因缺血导致的炎症反应引起的损伤组成，所述因缺血导致的炎症反应优选地由缺血引发、并在再灌注期间被进一步放大。在更为优选的实施方案中，所述缺血相关损伤由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤组成。
可以通过凋亡/坏死标志物的分子分析检测肌细胞死亡。可以通过NMR光谱评估pH酸化。可以通过炎症标志物(例如，IL6，肿瘤坏死因子(TNFalpha))的血清评估检测炎症。
在特别优选的实施方案中，所述缺血相关损伤由细胞内蛋白酶(例如钙蛋白酶)引起的对肌原纤维的损伤组成，所述对肌原纤维的损伤优选地引起过度挛缩和/或挛缩带坏死。在最优选的实施方案中，所述缺血相关损伤由细胞内蛋白酶(例如钙蛋白酶)引起的对肌原纤维的损伤组成，所述对肌原纤维的损伤引起过度挛缩和/或挛缩带坏死。
肌细胞超微结构变化可以通过心肌活检的电子显微镜进行评估。
如本文中、例如在缺血相关损伤的预防的上下文中所用，术语“预防”涉及在疾病或病症发作前预防、最小化或阻碍疾病或病症发作或发展的能力。
如本文中在缺血相关损伤的减少的上下文中所用，术语“减少”涉及限制和/或减少已经发展的疾病或病症的能力。
如本文中所用，术语“给药”或将化合物“施用”给受试者的表述涉及将药品向受试者递送。根据本公开使用的他汀的适当给药途径是通过向有此需要的受试者静脉内给药。
如果本申请表述了化合物“在缺血发作后尽早”给药，则这优选地意味着化合物在缺血发作后不超过60分钟给药。在优选实施方案中，其意味着化合物在缺血发作后不超过45分钟给药。在更优选实施方案中，其意味着化合物在缺血发作后不超过30分钟给药。在更优选实施方案中，其意味着化合物在缺血发作后不超过20分钟给药。在更加优选实施方案中，其意味着化合物在缺血发作后不超过15分钟给药。
在一些实施方案中，化合物在再灌注之前至少15分钟、优选地在再灌注之前至少20分钟、更加优选地在再灌注之前至少30分钟、最优选地在再灌注之前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过60分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少15分钟施用。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过60分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少20分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过60分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少30分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过60分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过45分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少15分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过45分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少20分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过45分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少30分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过45分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过30分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少15分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过30分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少20分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过30分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少30分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过30分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”施用的表述意味着化合物在缺血发作后不超过20分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少15分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过20分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少20分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过20分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少30分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过20分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过15分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少15分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过15分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少20分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过15分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少30分钟给药。在一些实施方案中，化合物“在缺血发作后尽早”给药的表述意味着化合物在缺血发作后不超过15分钟给药，并且化合物在再灌注之前至少45分钟给药。
如本文中所用，术语“他汀”涉及3-羟基-3-甲基-戊二酰-辅酶A(CoA)还原酶抑制剂，即HMG-CoA还原酶的抑制剂，其催化胆固醇生物合成的限制步骤，例如，HMG-CoA向甲羟戊酸酯的转化。该术语包括任何天然的、合成的或半合成的他汀。他汀对HMG-CoA还原酶的抑制降低了肝和肝外组织中的细胞内胆固醇的生物合成。
最近，随着以下证据的出现，他汀治疗的范围得到了扩展：由于他汀的多效性作用与其胆固醇水平的调节不直接相关联，他汀可能被证明有益于治疗多种疾病。可能影响疾病病理生理的与他汀相关联的多效性作用包括其对免疫应答的调节、其对抗炎症过程的增强、以及其对包含胆固醇中间体的信号通路的改变。迄今为止，与他汀的多效性作用相关联的多种疾病包括多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)、炎症性肠病(inflammatorybowel diseases,IBDs)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)、慢性阻塞性肺病(chronic obstructivepulmonary disease,COPD)、癌症、中风、帕金森病和阿尔茨海默病、细菌感染、HIV和程序性经皮冠状动脉介入。经过慢性或亚慢性给药他汀(例如，在接受经皮冠状动脉介入的患者中，用阿托伐他汀7天预处理后程序性心肌损伤减少的同时，伴随有胞间细胞粘附分子-1(ICAM-1)和E-选择素水平的程序后增加的衰减)已经观察到了这些效用。
一些他汀可以是闭合形式(内酯)或开放形式(羟基酸)。羟基酸(开放形式)可以通过常规水解由相应的内酯制备，例如，使用甲醇中的氢氧化钠、和四氢呋喃-水中的氢氧化钠等。在开放形式(羟基酸)中，他汀与药学可接受金属和由有机碱或无机碱形成的胺阳离子反应以形成盐。他汀的药学可接受盐可以与相应的游离酸在一些物理特征、例如溶解度和熔点方面不同。如果需要，他汀的游离开放形式(羟基酸)可以通过将该盐与例如盐酸等的酸的稀释水溶液接触，从盐形式中再生。他汀的闭合形式(内酯)可以通过在包括在约0℃和约溶剂沸点之间的温度下将开放形式(羟基酸)溶解在例如甲苯、苯和乙酸乙酯等惰性溶剂中来再生他汀的封闭形式(内酯)，通常(尽管非必须)还同时分离产生的水并用强酸催化，该强酸例如，盐酸等。
如技术人员将意识到的，HMG-CoA还原酶的反应也是导致形成香叶基香叶基-PP(geranylgeranyl-PP)的形成的途径的步骤。香叶基香叶基-PP是RhoA的香叶基香叶基化—活化RhoA中的步骤—所必需的。因此，他汀通常还对RhoA蛋白从细胞质基质到细胞膜的易位具有抑制活性，因此对RhoA活化也具有抑制活性。根据本公开的他汀优选地是HMG-CoA还原酶和RhoA活化的抑制剂。
其他他汀可以通过形成例如如US 7563909 B2中公开的已知他汀硝基衍生物来获得，或者通过在已知他汀中包括乳糖基团(其在水存在的情况下迅速水解)获得。此外，其他他汀也可能因已知他汀通过细胞酶的代谢而获得，优选地形成他汀或他汀代谢物的活化形式。在具体实施方案中，他汀代谢物涉及根据本公开的他汀的羟基酸形式。优选地，他汀代谢物是他汀的活化形式，也就是说，表现出从他汀获得的该他汀的HMG-CoA还原酶活性的至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％的他汀形式。如技术人员所知，以内酯形式的他汀通常是无活性的。通常，其活性形式是它们的代谢物他汀-β-羟基酸，该代谢物他汀-β-羟基酸是通过血浆/肝和肠粘膜二者中的羧基酯酶活性通过水解而形成的。特别是，细胞色素P450酶(CYP3A4)参与大多数他汀的代谢。
如本文中所用，术语“辛伐他汀”指的是(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-羟基-6-氧四氢-2H-吡喃-2-基]乙基}-3,7-二甲基-1,2,3,7,8,8a六氢萘-1-基2,2-二甲基丁酸，是一种降低胆固醇的化合物，其被广泛用作HMG-CoA还原酶的有效抑制剂以治疗高胆固醇血症。HMG-CoA还原酶催化HMG-CoA转化为甲羟戊酸酯，这是胆固醇生物合成中的一个早期以及限速的步骤。化学上，辛伐他汀是惰性内酯，其在口服后由细胞色素P-450(CYP)3A在肝中转化为3’,5'-二氢二醇辛伐他汀。
如果本申请表述化合物“抑制RhoA活化”、化合物为“RhoA抑制剂”或化合物为“抑制RhoA向细胞膜易位的试剂”，则这涉及一种情况，在该情况中所述化合物抑制或阻断RhoA蛋白从细胞质基质(RhoA的非活性形式)到细胞膜(RhoA的活性形式)的易位。如本文中所用，术语“RhoA”也被称为Ras同源基因家族成员A，涉及在应力纤维的形成中调节肌动蛋白细胞骨架的小GTP酶蛋白。术语“RhoA”包括任何受试者(例如，哺乳动物)的任何RhoA。人RhoA蛋白由RHOA基因编码(根据截至2014年4月27日的NCBI核苷酸数据库，基因ID：387，mRNA核苷酸序列为1,926bp，登录号(accession number)为NM 001664)。与其他GTP酶类似，RhoA包含非活性GDP-绑定状态和活性GTP-绑定状态，这些状态通过GDP与GTP的交换在活性状态和非活性态之间交替变化。主要存在于细胞质中的RhoA主要参与肌动蛋白的组织、细胞周期维持、细胞发育和转录控制。抑制RhoA易位到细胞膜的试剂，除其自身活性外，还可能对RhoA蛋白从细胞质基质到细胞膜的易位具有活性。
术语“受试者”或“个体”或“动物”或“患者”或“哺乳动物”指的是需要治疗的任何受试者，特别是哺乳动物受试者。哺乳动物受试者包括人、家畜、农场动物，以及动物园动物、运动动物或宠物，例如狗、猫、豚鼠、兔子、大鼠、小鼠、马、牛和奶牛等。在本公开的优选实施方案中，受试者是哺乳动物。在本公开的最优选实施方案中，受试者是人。
如本文中所用，术语“治疗”指的是治疗措施以及预防或防范措施，其中目的是预防或减缓(减轻)不期望的生理变化或失调，例如缺血损伤。有益或理想的临床结果包括但不限于症状的缓解、疾病程度的缩减、疾病状态稳定(即不恶化)、疾病进展的延迟或减慢、疾病状态的改善或减轻以及缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。与未接受治疗的预期生存期相比，“治疗”还可以意味着延长生存期。需要治疗的对象包括已经患有该疾病或失调的那些、以及易患该疾病或失调的那些或要预防该疾病或失调的那些。
2.他汀在缺血相关损伤的预防和/或减少中的用途
一方面，本公开涉及一种化合物，其用于受试者中缺血相关损伤的预防和/或减少，其中，所述化合物为他汀(即，3-羟基-3-甲基-戊二酰-CoA还原酶抑制剂)，其中所述化合物将在缺血发展后但在再灌注前通过静脉内给药向所述受试者给药，其中，所述化合物在缺血发展后尽早给药。
因此，根据本公开，用于受试者中缺血相关损伤的预防和/或减少的化合物的所述化合物为他汀。
他汀是抑制HMG-CoA还原酶的化合物，HMG-CoA还原酶是催化HMG-CoA向甲羟戊酸酯转化的酶。确定化合物的HMG-CoA还原酶活性的测定是技术人员已知的，并且包括但不限于Liu(Liu L et al.2003J Pharm Biomed Anal 32(1):107-123)、Fang(Fang W etal.2002J Clin Lab Anal 16(5):209-215)、或Mozzicafreddo(Mozzicafreddo M etal.2010J Lipid Res 51(8):2460-2463)描述的那些，以及借助于通过但不限于西格玛奥德里(Sigma-Aldrich)(目录号CS1090)可商购的试剂盒。他汀主要发挥作为酶HMG-CoA还原酶抑制剂的作用。众所周知，他汀典型地也对RhoA蛋白从细胞质基质到细胞膜的易位具有抑制活性。
第一组他汀包括具有取代的萘烷环结构的他汀，并包括洛伐他汀、普伐他汀和辛伐他汀。洛伐他汀、普伐他汀和辛伐他汀是非活性内酯，为了抑制HMG-CoA还原酶，它们必须代谢成活性羟基酸形式。因此，第一组中的他汀在转化为它们的他汀羟基酸形式时发挥其功能。第二组他汀包括第一组他汀中的丁酰基被氟苯基取代的他汀，氟苯基负责额外的极性相互作用，该极性相互作用产生与酶的更紧密结合。该第二组他汀包括氟伐他汀、西立伐他汀、阿托伐他汀和瑞舒伐他汀，它们是活性羟基酸形式的他汀。
他汀是技术人员可以通过本领域已知方法获得的化合物，所述方法包括但不限于US 201 10223640 A1、US 8471045 B2、WO 2009133089 A1和EP 1015600 A1中描述的方法。他汀也可从许多供应商商购获得，该许多供应商包括但不限于辉瑞(Pfizer)和拜耳(Bayer)。
下面公开了可在本公开中使用的他汀的实施例(表1)。
表1(续)：
优选地，根据本发明的他汀选自由阿托伐他汀西立伐他汀氟伐他汀洛伐他汀 美伐他汀匹伐他汀普伐他汀瑞舒伐他汀辛伐他汀和辛伐他汀的β-羟基酸形式组成的组(括号中是销售他汀的商品名称的示例)。
更加优选地，他汀选自由阿托伐他汀(见式I)和辛伐他汀的β-羟基酸形式(见式II)组成的组。最优选的是他汀阿托伐他汀。
他汀的药代动力学性能受几种因素影响，包括其活性或内酯形式、其亲脂率/亲水率及其吸收和代谢。他汀的药理性能，包括作为开放酸和内酯形式给药的剂量，是技术人员已知的，并且例如在表1中如Gazerro P.Et al,2012Pharmacol Rev 64(1):102-146中所示。
术语“药学可接受盐”或“生理可接受盐”指的是以生理可耐受酸形成的盐，也就是说，化合物与生理上可以耐受的无机或有机酸形成的盐—特别是如果用于哺乳动物，优选在人类中—或与至少一种生理耐受—特别地，如果用于哺乳动物，则优选在人类中—的阳离子，优选无机阳离子。因此，药学可接受盐是当向于哺乳动物、优选向人类给药时，在生理耐受的分子实体并且通常不引起变态反应或类似的不良反应的分子实体，该变态反应或类似的不良反应例如胃部不适、头晕等。优选地，如本说明书中所使用的，术语“药学可接受的”是指由政府监管机构或者在美国药典或另一种普遍认可的药典中列出的批准用于哺乳动物，更特别是在人类中的。具体酸的药学可接受盐的说明性、非限制性实施例包括盐酸、氢溴酸、硫酸、氢溴化物、一氢溴化物、一氢氯化物或盐酸化物、甲碘化物、甲磺酸、甲酸、乙酸、草酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、扁桃酸、富马酸、乳酸、柠檬酸、谷氨酸、马尿酸、苦味酸和/或天冬氨酸的盐。特定碱的生理可耐受盐的实施例是碱金属和碱土金属以及具有NH4的盐。式(I)或(II)的化合物的溶剂化物、盐和前药可以通过现有技术状态中已知的方法制备。
在本公开的具体实施方案中，根据本公开用于受试者中缺血相关损伤的预防和/或减少的他汀是辛伐他汀或与辛伐他汀有关的他汀，例如显示出增加的水溶性的辛伐他汀的肟衍生物(Gupta Aet al.2011Asian J Pharmac Clin Res 5(1):50-52)、3'，5'-二氢二醇辛伐他汀、6'β-羟甲基辛伐他汀、6'β-羧基辛伐他汀、6'β-羟基辛伐他汀、6'-外亚甲基辛伐他汀、辛伐他汀酸泰瑞伐他汀(terivastatin)、辛伐他汀酸葡糖苷酸和3'-羟基辛伐他汀。在更具体的实施方案中，辛伐他汀衍生物是式(III)的辛伐他汀的β-羟基衍生物：
特别是，辛伐他汀衍生物是式(III)的辛伐他汀的β-羟基衍生物：
根据一些实施方案，他汀抑制RoA活化。Keller已经在本领域中描述了测量RhoA的细胞质-膜易位的分子方法(Keller Jet al.1997FEBS Lett 403(3):299-302)，所述RhoA的细胞质-膜易位是RhoA活化的标志。一些作者已经描述了根据本公开的RhoA的总和与细胞质-膜分数的测定(例如，Vilahur G et al.2009Atherosclerosis 206:95-101)。
如本文中所用，与根据本公开使用的化合物相关的术语“治疗有效量”涉及提供预期效果的所述化合物的量，该效果例如，从缺血相关损伤衍生的一种或多种症状的显著预防、治愈、推迟、严重程度的降低、或改善。通常，通过采用对不同特征的考虑来确定化合物的治疗有效量，例如产品自身的特性和要达到的治疗效果、待治疗的受试者的具体情况、所述受试者所受伤害的严重程度、以及所选择的剂型等。为此，本文中提及的剂量应仅被认为是给本领域技术人员的指导，本领域技术人员必须根据上述变量来调整剂量。在实施方案中，化合物的治疗有效量是预防、减少、改善、减轻或消除治疗受试者中缺血损伤的一种或多种症状的量。
即使个体的需要变化，根据本公开使用的化合物的治疗有效量的最佳范围的确定也属于本领域专家的通用经验。通常，可以通过本领域专家调整提供有效治疗所需的剂量，该有效治疗所需的剂量将根据年龄，健康状况，适应度(fitness)，性别，饮食，体重，受体改变程度，治疗频率，损伤的性质和状况，损伤或疾病的性质和程度，受试者的医疗状况，给药途径，所用具体化合物的药理学考虑因素如活性、功效、药代动力学和毒理学特征，是否使用全身性药物递送，以及化合物是否作为药物组合的一部分给药。在受试者的再灌注损伤的预防和/或治疗中治疗有效的根据本公开使用的化合物的量可以通过常规临床技术来确定(参见例如The Physician's Desk Reference,Medical Economics Company,Inc.,Oradell,NJ,1995，和Drug Facts and Comparisons,Inc.,St.Louis,MO,1993)。
根据本公开使用的化合物的剂型方案可以变化。在具体实施方案中，根据本公开使用的化合物以灌注的方式在缺血发作后尽快启动并在再灌注前停止给药。在最优选实施方案中，根据本公开使用的化合物以单剂量给药(即，通过推注(bolus)给药)。
优选地，所述化合物的剂量在0.1至1mg/kg体重、更优选0.2至0.8mg/kg体重、最优选0.3至0.6mg/kg体重的范围内。
在具体实施方案中，使用的所述化合物是阿托伐他汀或式(II)的辛伐他汀的β-羟基酸形式，并且该化合物以单剂量向所述受试者给药。在另一实施方案中，使用的所述化合物是阿托伐他汀或式(II)的辛伐他汀的β-羟基酸形式，并且该化合物以单剂量向所述受试者给药，其中，所述化合物的剂量在0.1至1mg/kg体重、更优选0.2至0.8mg/kg体重、最优选0.3至0.6mg/kg体重的范围内。
术语“药学可接受赋形剂”或“药学上可接受的载体”指的是在所采用的剂量和浓度下对受试者基本无毒且与药物组合物的其他组分相容的任何化合物或化合物的组合。因此，赋形剂是与药物组合物的活性成分(即，根据本公开使用的化合物，所述化合物为他汀)一起配制的非活性物质，其目的在于填充含有所述活性成分的组合物。当生产剂型时，膨胀允许药物的方便和准确的分配。赋形剂还可用于各种增强治疗的目的，例如促进化合物(药物)吸收或溶解、或其他药代动力学考虑因素。赋形剂除了可以辅助体外稳定性如防止预期保质期内的变性，还可用在制造工艺中以帮助处理有关活性成分，例如通过促进粉末流动性或不粘性。合适赋形剂的选择取决于给药途径和剂型、以及活性成分和其他因素。赋形剂可以是无毒的固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、囊材或任何常规类型的制剂辅助剂。赋形剂或载体的说明性、非限制性实施例包括水、盐(盐水)溶液、酒精、右旋糖、植物油、聚乙二醇、明胶、乳糖、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、表面活性剂、硅酸、粘性石蜡、芳香油、脂肪酸的单甘酯和双甘酯、脂肪酸酯、石油酯(petroetrals)、羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮等。
根据本公开使用的化合物在缺血发作后尽快、但在再灌注前给药。技术人员知道如何识别缺血。例如，心肌缺血通过以下特征性症状的猝发来识别：心前区的剧烈胸痛、身体活动时的呼吸急促、心跳加快、全身不适、疲劳、头晕、恶心和出汗。疼痛可能会延伸到左臂、下颌、肩膀、背部或颈部。随后，可以通过如心电图(electrocardiogram,ECG)、超声心动图的方法确认心肌缺血。
通过在缺血发作后尽早给药化合物，可以确保将化合物给药前的缺血期最小化，而将化合物给药后的缺血期相对于缺血总时间(即相对于从缺血发作到再灌注开始的总时间)的比例最大化。
在一些优选实施方案中，他汀不在再灌注时和/或再灌注后给药。
在一些优选实施方案中，他汀不在再灌注期间给药。
他汀通过静脉内给药施用。这可以通过本领域技术人员已知的标准程序来实现。本发明人已经观察到，出于本公开的目的，他汀在缺血发作后尽快到达缺血组织是重要的，并且与例如口服给药相比，静脉内给药已证明在这方面是有利的。
在具体实施方案中，含有本公开使用的化合物的药物组合物是用于静脉内给药的药物组合物。通常，用于静脉内给药的药物组合物为无菌等渗水性缓冲液中的溶液。通常，将成分以单位剂型单独地或混合在一起供应，例如，作为密闭密封容器中的干燥冻干粉或无水浓缩物供应，所述密闭密封容器例如示出活性成分的量的安瓿或药囊)。在药物组合物通过输液给药的情况下，可以用含有无菌药物级水或盐水的输液瓶将其分配。
本领域技术人员熟悉如雷明顿的医药科学(Remington's PharmaceuticalScience)(17th Ed.,Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1985)、古德曼和吉尔曼的治疗学药学基础(Goodman and Gilman's The Pharmaceutical Basis of Therapeutics)(8thEd.,Pergamon Press,Elmsford,N.Y.,1990)和"Tratado de Farmacia Galenica",C.Fauli和Trillo,Luzan 5,S.A.de Ediciones,1993and in Remington<'>sPharmaceutical Sciences(A.R.Gennaro,Ed.),20th edition,Williams&Wilkins PA,USA(2000)中讨论的众所周知的原理和程序和可用资源，这些原理和程序通过引用并入本文。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后尽早给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后尽早给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后尽早给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药给药，其中，该化合物在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少15分钟施用。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过60分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过45分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过30分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过20分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少15分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少20分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少30分钟给药。
在一些实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.1至1mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.2至0.8mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少45分钟给药。在更优选实施方案中，缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注前产生的损伤，根据本公开使用的化合物为阿托伐他汀(式I)或辛伐他汀的β-羟基酸形式(式II)，且在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用，其中，该化合物以范围在0.3至0.6mg/kg体重的剂量在缺血发作后不超过15分钟且在再灌注前至少45分钟给药。
根据本公开使用的化合物可单独给药或与其他药物组合施用，条件是至少一种药物是根据本公开使用的化合物。
“梗塞”涉及缺血性细胞死亡的局部区域，该缺血性细胞死亡的局部区域由组织或器官的动脉血供(arterial supply)或静脉回流的闭塞后发生的缺氧产生。更具体地，通常被称为心脏病发作的心肌梗塞(MI)与血液停止适当流向心脏的一部分，并且心脏肌肉因未获得足够的氧和营养物质供应而受到损伤的事件有关。通常，梗塞是由于动脉粥样硬化斑块的破碎或侵蚀以及血栓的叠加而导致冠状动脉之一阻塞或闭塞的结果。可能促使心肌梗塞显现的重要危险因素包括先前的心血管事件、总胆固醇水平高、低密度脂蛋白胆固醇(LDL cholesterol)和甘油三酯的血液水平高、高密度脂蛋白胆固醇(HDL cholesterol)的水平低、老龄、吸烟、糖尿病、高血压、缺乏运动、肥胖、慢性肾病、过量饮酒以及可卡因和苯丙胺的使用。确定受试者是否已经患有梗塞的方法是本领域中已知的，并且该方法包括但不限于通过心电图(ECG)追踪心脏中的电信号、和测试血液样本中与心肌损伤相关的物质，与心肌损伤相关的物质包括肌酸激酶(CK-MB)和肌钙蛋白。ECG测试用于基于描记线(tracing)的形状来区分两种类型的心肌梗塞。比基线高的描记线的ST段被称为ST段抬高性MI(STEMI)，其通常需要更强烈的治疗。确定梗塞面积的方法是本领域技术人员已知的，并且包括血清标志物的测量，所述血清标志物的测量包括血清样品中的肌酸激酶(CK)-MB水平的测量(Grande Pet al.1982Circulation 65:756-764)；用氯化三苯四唑对组织染色(Fishbein Mc et al.1981Am Heart J 101(5):593-600)；锝(Tc)-99m司他比锝单光子发射计算机断层扫描(SPECT)心肌灌注显像；以及磁共振成像(MRI)(Gibbons Rj etal.2004J Amer Coll Cardiol 44(8):1533-1542)。心脏损伤的那些生物标志物在几个小时后升高，而已知诸如IMA、CFABP和肌红蛋白的标志物在缺血后早期增加。
“炎症”或“炎症反应”涉及在经受炎症的组织中发生的一系列变化。具体地，炎症涉及对有害刺激的生物反应，该有害刺激包括病原体、受损或溶解的细胞或刺激物。确定炎症的方法在本领域中是已知的，并且包括但不限于：红细胞沉降率(erythrocytesedimentation rate,ESR)的测量，其中较高的ESR表示炎症；C-反应蛋白(C reactionprotein,CRP)的测量，其中较高水平的CRP表示炎症；以及包细胞计数(在炎症中增加)。
例如缺血心肌的缺血组织的局部炎症可以通过与先天和后天免疫二者有关的炎症标志物的分子分析(基因和蛋白质表达)来确定。具体地，测量涉及受损区域的白细胞活化和募集的趋化因子和细胞因子是有意义的。
因缺血导致的全身性炎症可能影响所有器官。通过使用ELISA试剂盒的炎症标志物(细胞因子和趋化因子)的血液分析可以提供全身性炎症的程度/水平的快速分析。
“氧化损伤”涉及生物分子损伤，该生物分子损伤可以由复氧期间活性氧的直接攻击引起。氧化损伤可能涉及脂质过氧化、DNA氧化损伤和对蛋白质的氧化损伤。测定脂质过氧化的方法包括但不限于：通过HPLC进行的MDA(丙二醛)-TBA(硫代巴比妥酸)测定，以及通过质谱分析进行的异前列腺素(其为多不饱和脂肪酸过氧化的特定终产物)的定量测定。测定DNA氧化损伤的方法包括但不限于8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OH-dG)的测量。测定对蛋白质的氧化损伤的方法包括但不限于：单个氨基酸氧化产物的定量，所述氨基酸氧化产物包括犬尿氨酸(来自色氨酸)、双酪氨酸(bityrosine)(呈现为代谢稳定并可在尿液中检测到)、缬氨酸和亮氨酸氢氧化物、L-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)、邻位酪氨酸、2-氧-组氨酸、谷氨酸半醛和己二酸半醛；以及羰基试验(涉及蛋白质羰基基团的测定)。线粒体膜电位(Δψιη)涉及横跨线粒体内膜的质子梯度形式的膜电位。用于评估线粒体膜电位损伤的方法是技术人员已知的，并且包括使用包括JC1染料(细胞技术)的用于监测膜电位的荧光探针，以及在激发和发射波长下对整体荧光的测量，允许绿色(485nm和535nm)和红色(550nm和600nm)荧光的定量。已知任何组织或器官的长时间缺血都会诱导线粒体膜电位损伤。
“凋亡”与导致细胞自杀的选择性形式的生物化学事件的调控网络有关，且特征在于其易于观察到的形态和生物化学现象，例如脱氧核糖核酸(DNA)的片段化、可能与核酸内切酶活性有关或者无关的染色质的缩合(condensation)、染色体迁移、细胞核边缘化、凋亡小体形成、线粒体肿胀、线粒体嵴变宽、线粒体通透性转换孔的开放和/或线粒体质子梯度的耗散。测定细胞凋亡的方法是技术人员已知的，并且包括但不限于测量DNA片段化的试验(包括细胞通透化后染色体DNA的染色)、测量半胱天冬酶、例如半胱天冬酶3(caspase3)的活化的试验(包括蛋白酶活性测定法)、测量半胱天冬酶裂解产物的试验(包括PARP和细胞角蛋白18降解的检测)、检测染色质色谱的试验(包括染色体DNA染色)、测量DNA链断裂(缺口)和DNA片段化(交错的DNA末端)的试验(包括细胞缺口平移或ISNT的活性标记以及通过末端标记或TUNEL的细胞活性标记)、检测凋亡细胞表面上的磷脂酰丝氨酸的试验(包括易位膜成分的检测)、检测质膜损伤/渗漏的试验(包括台盼蓝排除试验和碘化丙啶排除试验)。示例性试验包括通过流式细胞仪分析凋亡细胞的散射参数、通过流式细胞仪分析DNA含量(包括在例如碘化丙啶的荧光染料溶液中的DNA染色)、通过末端脱氧核苷酸转移酶或TdT试验对DNA链断裂进行荧光染料标记、通过流式细胞仪和TUNEL试验分析膜联蛋白-V结合。
“瘢痕”涉及伤口或损伤愈合后留在组织上的任何标记。特别地，该术语与留在缺血组织中的标记有关。在本公开的上下文中，瘢痕形成衍生自缺血相关损伤。
根据本发明，引起根据本公开的要预防/减少的缺血相关损伤的缺血发生在器官或组织中，所述器官或组织选自由脑、心脏、肾、肝、大肠、肺、胰腺、小肠、胃、肌肉、膀胱、脾脏、卵巢和睾丸组成的组。在特定的实施方案中，所述器官/组织选自包括心脏、脑、肾、肠、胰腺、肝、肺和骨骼肌的组。在更特定的实施方案中，所述器官是心脏。
要预防/减少的缺血相关损伤通常发生于在有或没有再灌注的情况下发生缺血的组织中。另外，如由缺血引发的全身性炎症反应所暗示的，缺血损伤可能导致其他组织中进一步缺血相关损伤。
根据本公开，根据本公开的要预防/减少的缺血相关损伤发生在器官和组织中，该器官和组织选自由脑、心脏、肾、肝、大肠、肺、胰腺、小肠、胃、肌肉、膀胱、脾、卵巢、睾丸和血细胞组成的组的器官或组织中。在特定的实施方案中，器官/组织选自包括心脏、脑、肾、肠、胰腺、肝、肺、骨骼肌和血细胞的组。在更更特定的实施方案中，根据本公开的要预防和/或减少的缺血损伤发生在心脏中。
在一些实施方案中，根据本公开的要预防/减少的缺血相关损伤发生在心脏中和血细胞中(例如，通过全身性炎症作用)。在一些实施方案中，根据本公开的要预防/减少的缺血相关损伤发生在心肌和PBMC(外周血单核细胞)中。
如本领域技术人员所承认的，存在多种可能引起缺血并因此引起缺血相关损伤的原因。在一些实施方案中，缺血损伤是由于动脉粥样硬化、血栓形成、血栓栓塞、脂质栓塞、出血、支架、手术、血管成形术、旁路手术、器官移植、总缺血、肿瘤引起的血管压迫、心肌梗塞、血管收缩、微血管功能障碍或其组合导致的。在一些实施方案中，缺血相关损伤在受影响血管的再灌注期间产生。
“动脉粥样硬化”涉及继发于动脉粥样化的任何硬化，或者脂质、炎症细胞(主要是巨噬细胞/泡沫细胞)和负载有脂质的细胞碎片、以及已经从介质中迁移的血管平滑肌细胞在动脉壁的内膜中的积累。由于钙和脂肪物质如胆固醇和甘油三酯的积累，动脉壁变厚。动脉壁的弹性降低，并且它可能向血管腔突出，从而减少血液流动。它还可能变得容易破裂并引发血栓形成(缺血事件)。
“血栓形成”涉及由于凝血级联反应的活化和血小板活化/聚集而在血管内形成血栓。因此，血栓阻塞了通过循环系统的血液流动。“血栓栓塞”涉及凝块(血栓)在血管中的形成，该凝块(血栓)松散破碎并由血流携带堵塞其他血管。凝块可能堵塞肺血管(肺栓塞)、脑血管(中风)、胃肠道血管、肾血管或腿部血管。
“脂质栓塞”或“脂肪栓塞”是指在长骨或其他严重创伤后，肺实质和周围循环中经常无症状地出现脂肪球。
“出血”涉及失血或具有止血缺陷的过程，尤其是在手术中。特别是，当动脉或静脉受到损伤时，使得血液逸出循环系统并积聚在体内，就会发生内部出血。内部出血可能发生在组织、器官或体腔中。
“支架”涉及插入到体内天然通道/管道中的诸如管的处置物(dispositive)，以预防或抵消疾病诱导的局部血流狭窄。
通过“外科手术”或“外科手术治疗”意味着在人或其他哺乳动物的身体上进行的、手部有条理动作或使用仪器的手部有条理动作以产生治愈或补救的任何治疗程序。
“血管成形术”涉及机械地拓宽狭窄或阻塞动脉的技术，通常后者是动脉粥样硬化的结果。将位于导丝上的、被称为球囊导管的、空的且收缩的球囊穿进狭窄位置，然后使用正常血压的约75至500倍的水压(6至20个大气压)使其扩张到固定尺寸。球囊迫使内部白色血细胞/凝块斑块沉积物以及周围的肌壁扩张，从而打开血管以改善流动，然后将球囊放气并收回。在球囊膨胀时可以插入支架或者不插入支架，以确保血管保持开放。
“旁路手术”涉及一类关于使管状身体部位改变路线的手术，并包括心肺旁路手术、部分回肠旁路手术、空肠回肠旁路手术、胃旁路手术和血管旁路术如冠状动脉旁路手术。心肺旁路(CBP)在手术期间暂时接管了心脏和肺的功能，从而维持血液循环和身体的氧含量。部分回肠旁路手术是包含缩短回肠的手术程序以缩短总小肠长度。空肠回肠旁路手术是设计为用于病态肥胖的治疗的手术。血管旁路手术是针对到身体区域的血流不足或损失而执行的手术程序。尤其是，冠状动脉旁路手术，也称为冠状动脉旁路移植(CABG)手术，是为减轻心绞痛和降低因冠状动脉疾病死亡的风险而执行的手术程序。
“移植”是指将细胞、组织或器官从供体受试者转移到受体受试者或者从身体的一个部位转移到同一受试者的另一部位的手术程序。“供体受试者”是通过输血或器官移植向另一受试者给予血液、细胞、组织或器官的受试者。供体受试者是人或其他哺乳动物。“受体受试者”是通过输血或器官移植从另一受试者接受血液、细胞、组织或器官的受试者。受体受试者是人或其他哺乳动物。移植的组织包括但不限于骨组织、肌腱、角膜组织、心脏瓣膜、静脉和骨髓。移植的器官包括但不限于心脏、肺、肝、肾、胰腺和肠。其中供体受试者和受体受试者是同物种的基因不同的成员的特定移植手术程序称为同种异体移植。因此，术语异体移植(也称为同种异体移植、异基因移植或同种移植)与源自作为受体的同物种基因不同的成员的细胞、组织或器官的移植有关。术语“可同种异体移植的”是指相对经常或常规移植的器官或组织。可同种异体移植的器官的示例包括心脏、肺、肝、胰腺、肾和肠。其中供体受试者和受体受试者是不同物种的成员的特定移植手术程序被称为异种移植。因此，术语异种移植(xenotransplant)(也称为异种移植(xenograft)、异种移植(xenogeneictransplant)或异种移植(heterograft))与源自供体的细胞、组织或器官向受体的移植有关，其中供体和受体是不同物种的成员。
“总缺血”涉及在其中动脉和/或静脉供血被完全阻塞(无流动)的缺血。在更特定的实施方案中，缺血相关损伤是由于冠状动脉阻塞(心肌梗塞)导致的。在另一实施方案中，缺血相关损伤是由于与缺血损伤有关的再灌注导致的。
“心肌梗塞”(MI)涉及由于一个或几个冠状动脉或其分支的阻塞而导致的部分心肌的缺血性坏死。心肌梗塞的特征在于功能性心肌细胞的损耗/死亡，心肌组织被不可逆转地损伤。当晚期冠状动脉疾病存在时，心肌或心脏肌肉会患有梗塞，在位于冠状动脉内部的动脉粥样溃疡或破裂的特定情况下，梗塞发生，引发血栓形成以及该血管的急性阻塞，从而导致缺血。
根据本公开的受试者是要预防和/或减少与缺血相关的对器官或组织的损害的任何受试者。在特定实施方案中，受试者是哺乳动物，包括人、家畜、农场动物以及动物园动物、运动动物或宠物，例如狗、猫、豚鼠、兔子、大鼠、小鼠、马、牛、奶牛等。在本公开的更优选实施方案中，受试者是人。
在特定实施方案中，受试者患有脂质异常。在本发明的最优选实施方案(关于患者组)中，受试者患有高胆固醇血症。高胆固醇血症涉及特征在于存在高的血胆固醇水平、特别是总胆固醇和LDL水平的病理状况。如本文中所用，术语总胆固醇指的是LDL(低密度脂蛋白)、HDL(高密度脂蛋白)和VLDL(极低密度脂蛋白)胆固醇的亚部分的总和。本领域技术人员知道血液总胆固醇和LDL水平的参考值，其将根据如年龄、性别等的不同情况而变化，并且将知道在各情况下如何确定受试者患有高胆固醇血症。
根据本公开，当受试者在血液中具有异常量的脂质(例如，甘油三酯、胆固醇和/或脂肪磷脂)时，受试者被认为患有血脂异常。在发达国家中，大多数血脂异常是高脂血症；即血液中的脂质升高。高脂血症分为原发性和继发性亚型。原发性高脂血症通常是由于遗传因素(例如受体蛋白的突变)导致的，而继发性高脂血症由于其他潜在因素，如糖尿病、涉及遗传学和生活方式问题交叉的病症。
根据本公开，如果发现总胆固醇水平高于200mg/dL和/或低密度脂蛋白胆固醇高于100mg/dL，则受试者被认为患有高胆固醇血症。
3.用于药物的制造
在另一方面中，本公开涉及化合物在制造用于受试者的缺血相关损伤的预防/减少的药物中的用途，其中，所述化合物为他汀，其中，所述化合物在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药向所述受试者给药，且其中，所述化合物在缺血发作后尽早给药。
在一些实施方案中，所述化合物、所述预防/减少、所述缺血、所述缺血损伤、所述再灌注损伤、所述缺血相关损伤、所述受试者、所述他汀和/或所述给药如上文定义。
4.治疗方法
在又一方面中，本公开涉及一种治疗方法，所述治疗方法包括向患有缺血的受试者施用药学有效量的化合物的步骤，其中，所述化合物为他汀，其中，所述化合物在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药施用给所述受试者，且其中，所述化合物在缺血发作后尽早施用。
在一些实施方案中，所述化合物、所述缺血、所述缺血损伤、所述再灌注损伤、所述缺血相关损伤、所述药学有效量、所述受试者、所述他汀和/或所述给药如上文定义。
下面通过以下实施例详述本发明，所述实施例仅为示例性的且不限制本公开的范围。
实施例
所有研究方案均已获得机构伦理委员会(CSIC-ICCC)的批准，并且所有动物程序均严格按照欧洲议会关于保护用于科学目的的动物的2010/63/EU指令的指南或国立卫生研究院(NIH)指南(NIH 85-23号出版物，1996年修订)进行。此外，我们遵循了ARRIVE指南，并致力于实验室动物研究的3R原则。
实施例1
猪缺血模型
如图1所示，进行了利用猪心肌缺血模型模拟心肌梗塞的实验。
通过闭胸式心肌梗塞诱发，在常规饲料喂养的猪(≈40kg)中用实验方法诱导缺血。为此，将动物镇静并在整个实验程序期间用异氟烷保持麻醉。在程序期间，持续监测心律、动脉血氧定量和动脉压。在开始程序之前，就开始灌注胺碘酮和利多卡因，作为对恶性左心室心律失常的预防。研究的所有动物都接受相同的抗心律失常药理方法，从而允许组之间的直接比较。通过经皮入路(percutaneous approach)和荧光透视引导，缺血由冠状动脉中左前降支(mid-left anterior descendings)的完全冠状动脉球囊闭塞诱导的。进行对比血管造影术以确保总冠状动脉闭塞。
缺血15min后，动物接受阿托伐他汀静脉输注(0.3mg/kg)或载体。药物剂量已经基于急性冠状动脉综合征和/或先前的PCI(经皮冠状动脉介入治疗)的情况中的负荷剂量(80mg)而确定，并已经根据体表面积转换成了猪的剂量。对照动物在缺血15min后被静脉注射安慰剂(盐水)。
在基线(即，MI诱导前或在时间＝0min时)处、并在MI诱导(缺血)后30min、60min和90min时提取用于心脏损伤的生物标志物的进一步评估的血液样本(血清)。
还在基线处(缺血前)和股动脉缺血90min后，从股动脉在EDTA中采集了血液样本，以通过Ficoll方法进行PBMC分离。
一经提取90min血液样本，就在不进行再灌注的情况下处死猪，以获得用于分子研究和组织学的心肌组织。
实施例2
在该实施例中，测试了冠状动脉闭塞发作后静脉内给药单剂量阿托伐他汀是否可以预防缺血相关损伤(实施例1中的设计)。在每组7只动物中进行实验(阿托伐他汀治疗组对比载体-对照组)。
在MI诱导后30min、60min和90min提取的血液样本中，通过各自的猪ELISA试剂盒，确定了IMA(缺血修饰白蛋白)、CFABP(心脏脂肪酸结合蛋白)和肌红蛋白的浓度，并且与它们的基线值(缺血诱导前)进行了比较。选择这些蛋白质是基于这些蛋白质是用于因缺血导致的心脏损伤评估的早期标志物的基本原理。
如实施例中所示，与对照组相比，在检查的所有三个时间点处，静脉内给药阿托伐他汀均显著降低了IMA(图2A)、CFABP(图2B)和肌红蛋白(图2C)血液水平。当组合三个时间点时，左边的图清楚地反映了与对照组相比，阿托伐他汀治疗的动物中的三种心脏损伤标志物总体减少。最后，从图2D中可见，与未进行治疗的动物相比，阿托伐他汀治疗的动物中的IMA水平总体减少超过50％，并且CFABP和肌红蛋白水平总体减少超过75％。
因此，该实施例说明了与未用他汀治疗的个体相比，缺血诱导后早期静脉内给药他汀阿托伐他汀显著地降低了缺血损伤标志物的水平。
实施例3
在该实施例中，测试了静脉内给药他汀阿托伐他汀是否对实施例1和
实施例2中所述的猪缺血心肌中的RhoA活化有影响。
缺血期后，用氯化钾使动物心脏停跳并迅速将其切除。将从所有动物的缺血心肌中获得的组织样品粉碎，并在裂解缓冲液中匀浆，用于蛋白质分离和总RhoA评估。此外，通过裂解缓冲液方案的修改，进行膜和胞质部分的分离。简而言之，将组织粉末匀浆(1mol/LNaCl，20mmol/L Tris pH 7.4，1mmol/L DTT和蛋白酶抑制剂)并离心。收集上清液(称为胞质部分)并将细胞沉淀(pellet)重悬，并通过在500mmol/L Tris-HCl pH 7.4、20％十二烷基硫酸钠、100mmol/L原钒酸钠和蛋白酶抑制剂中的培育提取膜蛋白。将提取物离心，并将上清液收集作为膜部分。
通过皮尔斯(Pierce)方法定量蛋白质浓度(总心肌组织中、胞质部分中和膜部分中的浓度)。通过免疫印迹分析(Western Blot analysis)，确定所有动物的缺血心脏组织的总的以及胞质部分和膜部分中的RhoA(圣克鲁兹(Santa Cruz))。用Chemi-Doc(Bio-Rad)检测Western印迹带的强度，并用凝胶成像分析系统(Quantity one)软件(Bio-Rad)将其定量。强度以任意单位(arbitrary units,AU)表示。
从图3中可以看出，缺血心肌中的RhoA蛋白质总量未受到缺血发作后的他汀治疗的影响(图3A)。然而，他汀治疗显著地影响了RhoA活化。因此，未治疗的对照动物示出了较低的RhoAcyt/mb比，表明结合到膜的RhoA较高(活化形式)(图3B)。相反，在他汀治疗的动物中，RhoA主要位于胞质中(非活化)。
因此，该实施例表明，缺血发作后的单剂量他汀(例如，阿托伐他汀)抑制了梗塞猪的缺血心肌中的RhoA活化。
实施例4
在该实施例中，测试了与他汀治疗相关的心脏保护作用是否涉及RhoA抑制。
用小鼠心肌缺血模型进行实验，其中，缺血由冠状动脉结扎引起(图4A)。
完整的LAD冠状动脉结扎如下进行：对雄性CH3小鼠(8-10周龄，体重25-30g)进行插管并用O2/异氟烷的混合物麻醉，并进行机械通气(速率90呼吸/分钟，潮气量0.1mL)。在整个手术过程中连续监测直肠温度，并使用加热垫和加热灯将直肠温度保持在37-38℃内。进行前胸廓切开术；暴露心脏，将LAD冠状动脉壁内缝合(7-0缝合丝线；当左冠状动脉从左心房下方出现时，左冠状动脉一致结扎)持续45分钟。通过来自Visualsonics的Vevo2100由高频超声监测的ST抬高-MI模式的心电图可视化、以及通过闭塞部位远端的苍白、运动功能减退的心室的可视化，验证完全冠状动脉结扎的成功。
冠状动脉结扎后15分钟(即缺血发作后15min)，腹腔内给药单剂量的阿托伐他汀(0.3mg/kg；n＝6)、β-OH-辛伐他汀(0.3mg/kg；n＝6)、特异性RhoA抑制剂CCG1423(Sigma；0.15mg/kg；n＝6)或载体/对照组(n＝6)的PBS体积。单剂量给药后，缺血再持续30min(即，总共45min的缺血)，然后将小鼠处死并小心切除心脏以进行梗塞面积分析。
通过形态测定分析测定梗塞面积。为此，将所有小鼠心脏浸入定影液(fixativesolution)(4％低聚甲醛)中，包埋在OCT化合物中并从尖端到根部进行剖切(10μm厚的切片，间距200μm)。用苏木精和曙红对切片染色，并使用图像分析软件(ImageJ，NIH)确定形态学梗塞面积分析。梗塞面积通过切片间心肌梗塞面积的总和来计算，并表示为总LV壁的百分比。测定各切片的三个测量值。
此外，还评估了心肌氧化损伤。为此，缺血心肌组织被切成5μ外厚的薄片，以进行8-OH-dG(Abcam ab48508)染色、测量表明了氧化应激诱导的DNA损伤。从5个视野(fields)的平均值/动物作为染色面积的百分比由单盲观察者计算染色。图像由Nikon Eclipse 80i显微镜捕获，并由Retiga1300i快速相机数字化。
在图4B的组织学图片中可以看出，与载体-对照组相比，他汀(阿托伐他汀和β-OH-辛伐他汀)以及RhoA抑制剂CCG1423明显减少梗塞面积约50％。
他汀和CCG1423给药还与缺血心肌中较低的氧化损伤(减少70％)相关联(图4C)。
因此，该实施例表明他汀的心脏保护作用部分地通过RhoA抑制来介导。
实施例5
在该实施例中，确定了缺血期间他汀的静脉内给药对缺血和非缺血心肌二者中的心脏保护细胞蛋白[AMPK(AMP活化的蛋白激酶)和eNOS(内皮型一氧化氮合酶)]以及凋亡相关标志物p53和半胱天冬酶-3的mRNA水平的影响。该研究在如实施例1和2所述的猪获得的心肌样品中进行。
为此，将从所有动物的缺血心肌和非缺血心肌获得的组织样品粉碎并在Tripure(Roche)中匀浆，用于RNA分离。我们进行了转录组学分析，以通过实时PCR评估AMPK、eNOS、P53和含半胱天冬酶-3的基因表达。确定阈值循环值，并将其标准化为管家基因(housekeeping gene)18SrRNA。
如图5所示，与对照组相比，阿托伐他汀均未使缺血和非缺血心肌中的AMPK、eNOS、p53和半胱天冬酶-3的mRNA水平产生任何变化。
因此，缺血损伤后早期的阿托伐他汀治疗不会对在缺血后90min时评估的心脏保护相关标志物和凋亡相关标志物的mRNA水平进行修饰。
实施例6
在该实施例中，检测了缺血发作后早期静脉内给药他汀对AMPK和eNOS(已知发挥心脏保护作用的蛋白质)活化的影响。
该研究在来自如实施例1和2所述的猪的心肌样品中进行。
为此，将从所有动物的缺血心肌和非缺血心肌获得的组织样品粉碎并在裂解缓冲液中匀浆。我们评估了AMPK、Thr172处磷酸化的AMPK(P-AMPK)或活化的AMPK、eNOS、和Ser1177处磷酸化的eNOS(P-eNOS)或活化的eNOS。分别通过评估P-AMPK与总AMPK的比例和P-eNOS与总eNOS的比例，评价了AMPK和eNOS活化的程度。带的强度通过光密度法计算并表示为任意单位(AU)。
从图6A中可以看出，与对照组相比，P-AMPK的水平在阿托伐他汀治疗的动物的缺血心肌中显著增加。在阿托伐他汀治疗的动物和对照组之间，未观察到非缺血心脏组织中的P-AMPK变化，对照组显示出与在阿托伐他汀治疗的动物的缺血心肌中发现的蛋白质水平相当的蛋白质水平。两个动物组中未检测到整个心脏中AMPK的总蛋白质含量的变化。因此，在阿托伐他汀治疗的动物中，P-AMPK/AMPK比例显著增加。这些观察结果显示于各自的免疫印迹带中。
从图6B中可以看出，阿托伐他汀治疗不会进一步增强缺血诱导的eNOS活化。再次，提供了免疫印迹带的代表性图像。
因此，已经在缺血发作后早期给药单剂量他汀阿托伐他汀保护了心脏保护蛋白AMPK的活化，而对eNOS的活化状态没有影响。
实施例7
为了确定阿托伐他汀相关的AMPK活化是否参与他汀所提供的心脏保护作用，我们在小鼠心肌缺血模型中进行了实验。实施例4和图4详述了冠状动脉结扎的动物模型。
在该情况下，在阿托伐他汀给药(0.3mg/kg)前，腹腔内给予AMPK抑制剂(化合物C；30mg/kg；溶解在DMSO中)，以便阻止他汀对AMPK活化的任何潜在作用。缺血15min时给药阿托伐他汀，30min后(总缺血期45min)处死小鼠，并处理心脏，用于如实施例4所述的心肌梗塞面积和氧化评估。
梗塞面积的组织学分析(图7A)显示，化合物C对AMPK活化的阻断消除了诱导缺血后不久的阿托伐他汀给药所实现的梗塞面积减少的特性。此外，图7B表明，由于化合物C的给药消除了这些保护作用，因此AMPK活化还防止了氧化损伤[由8-羟基鸟苷染色(8-OHdG)评估]。
因此，阿托伐他汀对缺血损伤(包括较小的梗塞面积和氧化损伤)的心脏保护作用是通过AMPK活化部分介导的。
实施例8
进行该实施例以解决缺血期间阿托伐他汀给药是否防止猪缺血心肌中的凋亡进行的问题。
获得了包括于实施例1和实施例2中的所有猪的心肌组织，将其粉碎并用裂解缓冲液处理，以进行如实施例6中所述的蛋白质分离。通过Pierce方法量化蛋白质，并执行免疫印迹分析以评估磷酸化的p53(Ser15)、总p53、裂解的半胱天冬酶-3和总半胱天冬酶-3的水平。计算磷酸化的p53/总p53的比例和裂解的半胱天冬酶-3/总半胱天冬酶-3的比例，以确定有多少蛋白质被活化。
从图8A的数据中可以看出，缺血后早期的阿托伐他汀给药减少了缺血心肌中p53的活化，而没有发挥对非缺血心肌中的p53活化没有作用。未观察到整个心肌中总p53水平的变化。因此，在阿托伐他汀治疗的猪的缺血心肌中，P-p53/p53的比例显著降低。
关于阿托伐他汀治疗对半胱天冬酶-3活化的影响，如在图8B中所观察到的，阿托伐他汀给药降低了缺血心肌中裂解的(活化)半胱天冬酶-3水平。由于没有报告总半胱天冬酶-3的变化，因此阿托伐他汀降低了裂解的半胱天冬酶-3/总半胱天冬酶-3的比例，可以从图8B的代表性Western印迹带中看出。
因此，缺血后早期的阿托伐他汀给药降低了通过降低的磷酸化p53和裂解半胱天冬酶-3二者的水平所评估的缺血心肌中凋亡执行的水平。
实施例9
该实施例研究了缺血诱导后早期的阿托伐他汀给药是否对心肌发挥抗炎作用。为此，由于MCP-1是调节白细胞(特别是单核细胞)迁移和渗透的关键趋化因子之一，因此，在mRNA水平和蛋白质水平上评估了阿托伐他汀对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2)的表达的影响。单核细胞从血流横跨血管内皮的迁移发生在缺血损害后早期。
获得了包括于实施例1和实施例2中的猪的心肌，将其粉碎并用Tripure或裂解缓冲液处理，已进行分别如实施例5和实施例6中所述的mRNA分离和蛋白质分离。对MCP-1的mRNA水平和蛋白质表达都进行了评估。测定阈值循环(Ct)值，并将其标准化至管家基因18SrRNA以调节等量的RNA，而β-肌动蛋白用作蛋白质负载对照物。
从图9中可以看出，与未治疗的猪相比，阿托伐他汀治疗显著地降低了缺血心肌中MCP-1的mRNA和蛋白质表达。
在非缺血心肌组织中未检测到MCP-1表达的变化。
因此，诱导缺血后不久静脉内给药阿托伐他汀对缺血心肌组织具有抗炎作用。
实施例10
在该实施例中，所解决的问题是阿托伐他汀的心肌抗炎作用是否也全身性地扩展到循环白细胞，特别是外周血单核细胞(PBMC)。
为此，在所有动物中，在三个测试时间点(0、30和90min)将20mL的血液收集到EDTA管中。所有血液样本立即进行淋巴细胞分离液(Ficoll-paque Plus)(安玛西亚生物科学(Amersham Biosciences))密度梯度离心以分离PBMC。计数样品，然后将样品直接冷冻在液氮中并在-80℃下储存，直至如实施例5和实施例6中所述的mRNA和蛋白质分离。通过实时PCR分析测定与先天免疫TLR4(Toll样受体4)和MCP-1相关的炎症标记物以及TF(组织因子)的mRNA表达水平，还评估了MCP-1的蛋白质表达。测定阈值循环(Ct)值，并将其标准化至管家基因18SrRNA以调节等量的RNA，而丽春红(Ponceau)用于蛋白质负载对照物。
如图10A所示，阿托伐他汀治疗在缺血诱导前(时间0min)或缺血诱导后(时间90min)均未对TLR4或TF PBMC表达进行修饰。相反，阿托伐他汀在基因和蛋白质水平上均显著地减弱了缺血引发的MCP-1表达的增加。
因此，该实施例表明阿托伐他汀的抗炎作用扩展超出了缺血组织，并且还通过防止循环性PBMC中的缺血相关的MCP-1/CCL2诱导，而扩展至全身循环。
实施例11
在该实施例中，所解决的问题是缺血后早期静脉内单剂量的阿托伐他汀是否减少缺血诱导后30天评估的心肌瘢痕形成。用大鼠缺血模型进行实验，其中，心肌缺血由持续性冠状动脉结扎引起(图11A)。
该研究在雄性SD大鼠(8-10周大，体重250-300g；杰克逊实验室)中进行。通过LAD冠状动脉结扎45min来诱导MI。15min的缺血后，大鼠被随机地给予腹腔内注射0.3mg/kg的阿托伐他汀或等量PBS体积(用于载体/对照组(n＝6))。阿托伐他汀给药后30分钟(缺血45min)，使动物恢复并继续饲养30天，然后处死。之后，小心地切除心脏，以进行梗塞面积的形态测量评估。
该实验的结果显示在图11B中。从数据中可以看出，与载体-对照组相比，缺血发作后15min的单剂量阿托伐他汀导致缺血诱导后30天评估的瘢痕面积显著减少60％。
因此，缺血诱导后早期的阿托伐他汀给药发挥了保护作用，该保护作用在缺血诱导后一个月被转化成较低的心肌瘢痕。
实施例12
在该实施例中，要解决的问题是缺血诱导后早期静脉内的单剂量阿托伐他汀是否在合并病症(co-morbid conditions)的情况下减少心肌损伤，该合并病症例如高胆固醇血症、患有心肌梗塞的患者中最常见的心血管危险因素。
为此，向14头猪喂食西式高胆固醇血脂饮食[20％饱和脂肪(牛脂)、2％-胆固醇、1％-胆酸]10天。该高血脂饮食包含24.82％的蛋白质、64.20％的碳水化合物、10.98％的脂肪和16,834.7kJ。摄入这种富含脂肪的饮食10天使胆固醇升高到与血脂异常的人相当的水平，并诱发内皮功能障碍。
在这10天的饮食期后，对动物进行闭胸90min冠状动脉左中前降支(LAD)球囊闭塞和与实施例1中描述的相同的实验设计。简而言之，缺血诱导后15min，动物(n＝7只动物/组)被静脉内给药阿托伐他汀(0.3mg/kg)，然后在缺血的30、60、90min时抽取血液以确定心脏损伤的早期标志物(IMA、MFABP、肌红蛋白)。
从数据中可以看出，缺血发作后15min的单剂量阿托伐他汀导致所有三种心肌损伤相关标志物显著减少。同样地，阿托伐他汀静脉内给药导致已经在缺血诱导后30min时观察到的IMA(图12A)、CFABP(图12B)和肌红蛋白(图12C)显著减少(阿托伐他汀给药后15min)。对于所有三种标志物，减少的百分比约为60-75％(图12D)。
因此，该实验提供了以下证据：即使是在高胆固醇水平存在的情况下，缺血诱导后早期静脉内给药阿托伐他汀也可以保护心肌免受缺血损伤。
实施例13
在该实施例中，要解决的问题是缺血后早期静脉内单剂量的阿托伐他汀是否减少中性粒细胞向高胆固醇血症猪中的缺血受损区域的募集。
为此，获得了包括于实施例12中的所有高胆固醇血症猪的缺血心肌组织，包埋在OCT中，并染色，用于中心粒细胞检测(抗中心粒细胞弹性蛋白酶；Abcam)。从5个视野的平均值/动物作为染色面积的百分比由单盲观察者计算染色。图像由Nikon Eclipse 80i显微镜捕获，并由Retiga 1300i快速相机数字化。
从数据(图13)中可以看出，与对照组相比，缺血发作后15min单剂量的阿托伐他汀导致中性粒细胞心肌浸润显著减少(减少57％)。
因此，在血脂异常存在的情况下，缺血诱导后早期对猪静脉内给药阿托伐他汀限制了中性粒细胞向缺血受损心肌的募集。
实施例14
在该实施例中，要解决的问题是缺血损害期间他汀的给药是否限制与缺血相关的再灌注损伤，因此减少整体心脏损伤。
如实施例11中，给猪饲喂食高胆固醇饮食。在这10天的饮食期后，对动物进行闭胸90min冠状动脉中左前降支(LAD)球囊闭塞。缺血75min后，动物被随机静脉内输注(股静脉)辛伐他汀的活性β-羟基酸衍生物(β-OH-S；0.3mg/kg；n＝12)或载体(0.9％NaCl；n＝12)。在90分钟时，对球囊放气以实现冠状动脉再灌注。动物被再灌注2.5小时。通过伊文斯兰(Evan’s Blue)染色在形态上确定梗塞面积。为此，再灌注后2.5h，通过左心房将伊文斯兰染料注入麻醉的猪中以勾勒出危险区域(area-at-risk,AAR)，其后用氯化钾使动物心脏停跳，并迅速切除。将心脏切割成平行于房室环的6个横向切片。交替收集连续切片，用于梗塞面积分析(氯化三苯四唑)以及缺血和非缺血心肌的分子研究。将从所有动物的缺血和非缺血心肌获得的组织样品粉碎并在或裂解缓冲液中匀浆，以分别用于RNA分离和蛋白质分离。评估凋亡标志物(截短的-半胱天冬酶-3)的蛋白水平。将所有动物的石蜡包埋的缺血心肌组织切成5μm厚的切片，用于8-羟基鸟苷染色(Abcam ab48508)、表明氧化应激诱导的DNA损伤的测试，并且将所有动物的OCT包埋的缺血心肌组织染色，用于中性粒细胞检测(抗中性粒细胞弹性蛋白酶；Abcam)。从5个视野的平均值/动物作为染色面积的百分比由单盲观察者计算染色。图像由Nikon Eclipse 80i显微镜捕获，并由Retiga 1300i快速相机数字化。此外，通过流式细胞仪使用参比染料5,5’,6,6’-四氯-1,1’,3,3’-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物(JC-1；分子探针)，在所有动物的缺血心肌中测量线粒体膜电位(ΔΨ所)。值表示为红色荧光活性。将降低ΔΨ值的用缬氨霉素(Sigma)处理的分离的线粒体用作对照(数据未示出)。
如图14中所示，缺血期间的β-OH-S输注导致再灌注后2.5h评估的心肌损伤(缺血损伤+再灌注损伤)的面积减小(图14A)。此外，在所有阿托伐他汀治疗的动物的缺血心肌组织中，缺血期间的β-OH-S输注显著地降低了裂解的半胱天冬酶-3的表达(图14B)、限制了中性粒细胞的募集(图14C)、降低了氧化应激(图14D)并保护了线粒体电位(图14E)。
因此，在缺血期间输注β-OH-S减少了与缺血相关的再灌注损伤，整体上限制了心肌损伤。

Claims (15)

1.一种化合物，其用于受试者中缺血相关损伤的预防和/或减少，其中，所述化合物为他汀，其中，所述化合物在缺血发作后、但在再灌注前通过静脉内给药向所述受试者给药，其中，所述化合物在缺血发作后尽早给药。
2.根据权利要求1所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤是在缺血发作后、但在再灌注之前的缺血期间由缺血引起的损伤。
3.根据权利要求1或2所述的所使用的化合物，其中，所述化合物以单剂量给药。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物在缺血发作后不超过60分钟、优选地在缺血发作后不超过45分钟、更优选地在缺血发作后不超过30分钟、更优选地在缺血发作后不超过20分钟、更优选地在缺血发作后不超过15分钟给药。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物在再灌注之前至少15分钟、优选地在再灌注之前至少20分钟、更优选地在再灌注之前至少30分钟、更优选地在再灌注之前至少45分钟给药。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物选自表1所列的化合物，其中优选地，所述化合物选自由阿托伐他汀、辛伐他汀的β-羟基酸形式、辛伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀和瑞舒伐他汀所组成的组，其中更优选地，所述化合物为阿托伐他汀(式I)或式II的辛伐他汀的β-羟基酸形式，其中，最优选地，所述化合物为阿托伐他汀(式I)或式III的辛伐他汀的β-羟基酸形式：
7.根据权利要求1至6中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述化合物以范围在0.1至1mg/kg体重、优选0.2至0.8mg/kg体重的剂量给药。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血在组织或器官中产生，所述组织或器官选自由心脏、脑、肾、肠、胰腺、肝、肺、骨骼肌及其组合所组成的组，其中，优选地，所述缺血在心脏中产生。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的所使用的化合物，其中，缺血相关损伤是由于动脉粥样硬化、血栓形成、血栓栓塞、脂质栓塞、出血、支架、手术、血管成形术、旁路手术、器官移植、应激性心肌病(塔库苏博综合征)、血管收缩、ST段抬高的心肌梗塞、非ST段抬高的心肌梗塞、不稳定性心绞痛、或这些两者或两者以上的组合引起的缺血而导致的，其中，优选地，所述缺血与ST段抬高的心肌梗塞、非ST段抬高的心肌梗塞或不稳定性心绞痛有关。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤由选自由肌细胞死亡(优选地通过坏死和/或凋亡，更优选地通过坏死)、由因缺血导致的细胞内pH酸化引起的损伤和/或由因缺血导致的炎症反应引起的损伤所组成的组的至少一种损伤组成，所述因缺血导致的炎症反应由缺血引发、并在再灌注期间被进一步放大。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤包括由细胞内蛋白酶引起的对肌原纤维的损伤或由其组成，所述损伤引起过度挛缩和/或挛缩带坏死。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括由缺血引起的梗塞面积的减少、优选地心肌损伤的减少，或由其组成，
和/或其中，所述缺血相关损伤的预防/减少导致由于缺血/再灌注引发的细胞死亡、优选地由于缺血引发的细胞死亡引起的组织损伤的减少，
和/或其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括缺血的组织/器官中炎症反应的预防或减少，或由其组成，
和/或其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括由缺血和/或再灌注引发、优选由缺血引发的血细胞、优选白细胞中的炎症反应的减少，或由其组成。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述缺血相关损伤的预防/减少包括缺血后组织中、优选缺血后心脏组织中的瘢痕大小的减少，或由其组成。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述受试者为人。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的所使用的化合物，其中，所述受试者患有血脂异常，其中，优选地，所述血脂异常为高胆固醇血症。
CN201880023430.1A 2017-03-31 2018-03-29 用于缺血相关损伤的预防/减少的他汀 Pending CN110494134A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17164137.6A EP3381452A1 (en) 2017-03-31 2017-03-31 Statin for prevention/reduction of ischemia-related damage
EP17164137.6 2017-03-31
ES201730736 2017-05-26
ESP201730736 2017-05-26
PCT/EP2018/058158 WO2018178275A1 (en) 2017-03-31 2018-03-29 Statin for prevention/reduction of ischemia-related damage

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110494134A true CN110494134A (zh) 2019-11-22

Family

ID=61899251

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880023430.1A Pending CN110494134A (zh) 2017-03-31 2018-03-29 用于缺血相关损伤的预防/减少的他汀

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20200030288A1 (zh)
EP (1) EP3600278B1 (zh)
CN (1) CN110494134A (zh)
BR (1) BR112019020353A2 (zh)
CA (1) CA3058250A1 (zh)
DK (1) DK3600278T3 (zh)
ES (1) ES2877646T3 (zh)
MX (1) MX2019011567A (zh)
PL (1) PL3600278T3 (zh)
RU (1) RU2768889C2 (zh)
WO (1) WO2018178275A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112516126A (zh) * 2020-11-20 2021-03-19 南方医科大学南方医院 普伐他汀的新用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1891219A (zh) * 2005-07-07 2007-01-10 安徽省现代中药研究中心 含有瑞舒伐他汀或匹伐他汀和b族维生素的药物组合物
CN101374553A (zh) * 2006-01-30 2009-02-25 本·戴维·布里翁·伊斯拉埃尔 治疗患心血管病、脑血管病和其它血管病的患者的组合物和方法
WO2015181216A1 (en) * 2014-05-27 2015-12-03 Consorci Institut Català De Ciències Cardiovasculars Prevention and/or treatment of ischemia/reperfusion injury

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1015600A1 (en) 1997-08-22 2000-07-05 Dsm N.V. Statin production by fermentation
CN1668645A (zh) * 2002-05-17 2005-09-14 埃斯佩里安医疗公司 治疗缺血再灌注的方法和组合物
US7166638B2 (en) 2003-05-27 2007-01-23 Nicox S.A. Statin derivatives
US8183397B2 (en) 2007-04-03 2012-05-22 Lek Pharmaceuticals D.D. Synthesis of statins
CN102014894A (zh) 2008-04-29 2011-04-13 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 经改进的斯达汀生产
CN102171328A (zh) 2008-09-24 2011-08-31 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 经改进的斯达汀生产
US10028975B2 (en) * 2010-10-19 2018-07-24 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Methods for treating ischemia-reperfusion injury

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1891219A (zh) * 2005-07-07 2007-01-10 安徽省现代中药研究中心 含有瑞舒伐他汀或匹伐他汀和b族维生素的药物组合物
CN101374553A (zh) * 2006-01-30 2009-02-25 本·戴维·布里翁·伊斯拉埃尔 治疗患心血管病、脑血管病和其它血管病的患者的组合物和方法
WO2015181216A1 (en) * 2014-05-27 2015-12-03 Consorci Institut Català De Ciències Cardiovasculars Prevention and/or treatment of ischemia/reperfusion injury

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOEL A. LARDIZABAL等: "The Anti-Ischemic and Anti-Anginal Properties of Statins" *
KEFEI WU等: "Atorvastatin treatment attenuates renal injury in an experimental model of ischemia-reperfusion in rats", 《BMC NEPHROLOGY》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112516126A (zh) * 2020-11-20 2021-03-19 南方医科大学南方医院 普伐他汀的新用途

Also Published As

Publication number Publication date
PL3600278T3 (pl) 2021-08-02
MX2019011567A (es) 2020-01-21
EP3600278B1 (en) 2021-01-27
RU2019134491A3 (zh) 2021-07-16
CA3058250A1 (en) 2018-10-04
ES2877646T3 (es) 2021-11-17
RU2019134491A (ru) 2021-04-30
EP3600278A1 (en) 2020-02-05
WO2018178275A1 (en) 2018-10-04
DK3600278T3 (da) 2021-04-26
US20200030288A1 (en) 2020-01-30
BR112019020353A2 (pt) 2020-04-28
RU2768889C2 (ru) 2022-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20180073597A (ko) 혼합 이상지질혈증의 치료
JP2005535665A (ja) 虚血および再灌流損傷を防止する方法
Li et al. Ginkgo biloba pretreatment attenuates myocardial ischemia-reperfusion injury via mitoBKCa
Ling et al. Effects of a Chinese herbal preparation on vascular cells in culture: mechanisms of cardiovascular protection
RU2615767C2 (ru) Способ лечения сердечной недостаточности и поражения нервных клеток
CN110494134A (zh) 用于缺血相关损伤的预防/减少的他汀
Zhang et al. Baicalin promotes random‐pattern skin flap survival by inducing autophagy via AMPK‐regulated TFEB nuclear transcription
Jiang et al. Neutrophil membrane camouflaged nanoprobes for NIR-II fluorescence imaging of inflamed, high-risk atherosclerotic plaques in mouse and rabbit models
KR20200140277A (ko) 허혈 재관류 손상 예방 및/또는 치료용 한약 조성물
Michel et al. Comparison of vascular α1-adrenoceptor antagonism of tamsulosin in oral controlled absorption system (OCAS) and modified release (MR) formulations
EP3381452A1 (en) Statin for prevention/reduction of ischemia-related damage
EP2949324A1 (en) Prevention and/or treatment of ischemia/reperfusion injury
Yaliniz et al. A rare presentation of cardiac hydatid cyst: stroke and acute aortic occlusion
Takahashi et al. Computed tomography (CT) observation of pulmonary emboli caused by long-term administration of ivermectin in dogs experimentally infected with heartworms
Hashemzaei et al. Effect of umbelliprenin on blood pressure in high-fat diet hypertensive rats
EP3747430A1 (en) Application of 5-hydroxytryptamine receptor 1a in preparing drug for portal hypertension
Abdelmageed et al. Vinpocetine protects against chloroquine-induced cardiotoxicity by mitigating oxidative stress
Tu et al. Catheter‐Based Radiofrequency Renal Sympathetic Denervation Decreases Left Ventricular Hypertrophy in Hypertensive Dogs
Pei et al. The Role of NAD+ in Myocardial Ischemia-induced Heart Failure in Sprague-Dawley Rats and Beagles
JP5870369B2 (ja) 血液脳関門障害改善剤
CN108114282A (zh) 他汀类化合物治疗缺血性疾病的用途
Zhang et al. Rhizoma Alismatis Decoction improved mitochondrial dysfunction to alleviate SASP by enhancing autophagy flux and apoptosis in hyperlipidemia acute pancreatitis
Poole-Wilson Implications of recent heart failure trials for patients with hypertension
JP2022510403A (ja) 虚血傷害および虚血再灌流傷害の予防および／または治療のための方法および組成物
Bhatt et al. β-Blocking activity of PP-34, a newly synthesized aryloxypropanolamine derivative, and its cardioprotective effect against ischaemia/reperfusion injury in laboratory animals

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination