CN110452825A - 以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法 - Google Patents
以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110452825A CN110452825A CN201910721170.1A CN201910721170A CN110452825A CN 110452825 A CN110452825 A CN 110452825A CN 201910721170 A CN201910721170 A CN 201910721170A CN 110452825 A CN110452825 A CN 110452825A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- waste oil
- palm waste
- single cell
- cell protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 188
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 188
- 239000002699 waste material Substances 0.000 title claims abstract description 84
- 108010027322 single cell proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 40
- 239000002994 raw material Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 85
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 38
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 34
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 25
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 21
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 9
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 22
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 22
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 18
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 14
- 230000003519 ventilatory effect Effects 0.000 claims description 14
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 12
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 12
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 12
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 12
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical group N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 8
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 7
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M iron chloride Chemical compound [Cl-].[Fe] FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 claims description 6
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 claims description 6
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 5
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 5
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 5
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000190932 Rhodopseudomonas Species 0.000 claims description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000004519 grease Substances 0.000 claims description 3
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 2
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 claims description 2
- 241000459479 Capsula Species 0.000 claims description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000235646 Cyberlindnera jadinii Species 0.000 claims description 2
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 claims description 2
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 claims description 2
- 241000190950 Rhodopseudomonas palustris Species 0.000 claims description 2
- 241000605008 Spirillum Species 0.000 claims description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229940063746 oxygen 20 % Drugs 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 6
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 abstract description 3
- 241001133760 Acoelorraphe Species 0.000 description 64
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 62
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 62
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 9
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 8
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 8
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 7
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 7
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 5
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 5
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 5
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 4
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 4
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000003133 Elaeis guineensis Species 0.000 description 1
- 235000001950 Elaeis guineensis Nutrition 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000191043 Rhodobacter sphaeroides Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005864 Sulphur Substances 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000002154 agricultural waste Substances 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000004332 deodorization Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002440 industrial waste Substances 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000002366 lipolytic effect Effects 0.000 description 1
- KNLQKHUBPCXPQD-UHFFFAOYSA-N manganese;sulfuric acid Chemical compound [Mn].OS(O)(=O)=O KNLQKHUBPCXPQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- -1 nitrogenous compound Chemical class 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
- C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，所述的发酵方法为：在无菌发酵培养基中接入微生物种子液和无菌棕榈废油后，以棕榈废油为碳源在好氧条件下进行发酵；发酵期间往发酵液中流加无菌棕榈废油。本发明以棕榈废油替换发酵培养基中的传统碳源，不仅降低原料成本，而且还能利用棕榈废油、开拓棕榈废油的应用领域；另外，还能提高微生物的转化率，生产出具有高附加值的单细胞蛋白，极大地降低了生产成本、简化了生产工艺。除此之外，以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法相比传统对酸值过高的棕榈废油进行精炼的方法，大大减少了环境污染，对环境友好。
Description
技术领域
本发明涉及生物发酵技术领域，特别涉及一种以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法。
背景技术
棕榈油是一种热带木本植物油，由油棕树上的棕榈果压榨而成，是目前世界上生产量、消费量和国际贸易量最大的植物油品种。由于棕榈果中含有较多的解脂酶，所以对收获的棕榈果必须及时进行加工或杀酵处理。初级压榨之后的棕榈毛油容易自行水解而生成较多的游离脂肪酸，导致棕榈油的酸值增长很快。一般情况下，酸值略有升高的棕榈油不会对人体的健康产生损害，但棕榈油酸值过高（即发生严重的变质），所产生的醛、酮、酸会泡坏脂溶性维生素，可能对人体健康产生不利影响，因此要对初级压榨之后的棕榈毛油及时进行精炼或分提。酸值是衡量油品质量的重要参数，目前对酸值过高的棕榈废油进行精炼的方法有化学精炼和物理精炼二种，化学精炼的中和工艺会产生大量皂脚，这不仅会导致中性油的大量损失，还会产生严峻的环保压力；而物理精炼虽能提高得率，减轻环保压力，但存在能耗高、脱臭时间长、油品颜色深等缺点。此外，棕榈油生产工艺脱酸、脱臭过程中会产生大量颜色深、酸值高的馏出物，其成分中含有游离脂肪酸、甘油酯、甾醇等，成分复杂，处理繁琐。
单细胞蛋白，也叫微生物蛋白，是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。单细胞蛋白是一类凝缩的蛋白类产品，含粗蛋白50%~85%，其中氨基酸组分齐全，可利用率高，还含维生素、无机盐、脂肪和糖类等，其营养价值高、用途广泛。尽管单细胞蛋白具有上述优点，但目前单细胞的生产成本中，原料成本仍占总生产成本的60%以上，其中原料中的碳源成本最高，且单细胞蛋白产出率也不是很理想。
发明内容
本发明所需解决的技术问题是：提供一种能有效利用棕榈废油、降低生产成本、并高效产出单细胞蛋白的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法。
为解决上述问题，本发明所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，具体为：在无菌发酵培养基中接入微生物种子液和无菌棕榈废油后，以棕榈废油为碳源在好氧条件下进行发酵；发酵期间往发酵液中流加无菌棕榈废油。批次发酵培养周期通常为24～96小时。
无菌棕榈废油可通过对棕榈废油进行高温高压灭菌获得。所述的棕榈废油可以采用以下（1）、（2）、（3）、（4）、（5）中的一种或多种混合：
（1）有酸值或酸值过高的棕榈毛油；
（2）不符合国家质量标准的棕榈毛油；
（3）用于油炸食品后废弃的棕榈油；
（4）工业棕榈废油及棕榈油生产工艺经脱酸、脱臭过程中产生的馏出物；
（5）棕榈油脂、棕榈油渣。
好氧条件是指微生物发酵环境中存在氧气，可以用本领域常规的方法获得好氧条件，例如可在发酵过程中通过设置搅拌转速和通气量保证一定的溶氧。
本发明用棕榈废油替换碳源，不仅降低原料成本，而且还能利用棕榈废油、开拓棕榈废油的应用领域。这里发酵培养基可以采用含碳源的发酵培养基，也可以采用完全不含碳源的发酵培养基。除用棕榈废油替代碳源外，本发明中的发酵培养基中除碳源（这里碳源含量可以为零）以外的其他成分可与常规的用于微生物发酵的发酵培养基中除碳源以外的其他成分相同。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，当发酵培养基中不含碳源时，棕榈废油的初始添加量为5～100g/L。发酵培养基中棕榈废油的初始添加量还可以是5～20g/L 、10～20g/L、5～10g/L、5～15g/L，其中发酵培养基中棕榈废油的初始添加量优选10g/L。
微生物种子液是通过将微生物接入种子培养基中进行发酵制备得到，微生物接入种子培养基中的接种量为种子培养基体积的1%～10%。种子培养基是本领域技术人员根据待接种的微生物可常规选择，例如葡萄糖酵母蛋白胨培养基。微生物种子液的发酵条件可以是本领域常规的适合种子液的发酵条件。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，所述的微生物种子液中的微生物包括：酵母、微藻、紫色非硫光合细菌、青霉菌中的一种或多种。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，所述的酵母包括：产朊假丝酵母、热带假丝酵母、园拟酵母、球拟酵母、毕赤酵母、酿酒酵母、解脂耶罗酵母、产油油酯酵母中的一种或多种；所述的微藻包括：沼泽红假单胞菌、类球红假单胞菌、嗜酸红假单胞菌、荚膜红假单胞菌、红螺菌中的一种或多种。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，所述的发酵培养基为酵母发酵培养基，所述的酵母发酵培养基的组成成分包括：酵母抽提物0.5～2.5g/L、硫酸镁1～3g/L、氮源5～20g/L、磷酸二氢钾2～5g/L、磷酸氢二钾2～5g/L、微量元素0.002～0.08g/L中的一种或多种。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，所述的氮源为硫酸铵；所述的微量元素包括：铁、锰、锌、铜、钼元素中的一种或多种。微量元素中各元素的含量可以参照本领域常规的适合微生物发酵的微量元素的含量。通常微量元素以化合物的形式提供，如微量元素的组成成分及各组成成分占发酵培养基的克数为：包括：氯化铁0.01～0.02g/L、硫酸锰0.01～0.02g/L、硫酸锌0.01～0.02g/L、硫酸铜2～4mg/L、钼酸钠2～4mg/L中的一种或多种。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，微生物种子液的接种浓度为发酵培养基体积的1%～10%。其中，微生物种子液的接种浓度优选为发酵培养基体积的3%～5%。
进一步地，前述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其中，发酵期间发酵液的发酵温度为25～35℃；发酵期间的通气量为0.5～2.5vvm，发酵期间的通气量还可以是1.0～1.5vvm、1.5～2vvm、1.8～2.5vvm。发酵期间通过通气量和搅拌发酵液配合保证发酵液中的溶解氧为20%～60%；发酵期间往发酵液中流加无菌棕榈废油和氨水。
发酵期间往发酵液中流加无菌棕榈废油，从而使发酵液中的脂肪酸总量控制在0.1～0.5%。发酵液中的脂肪酸总量范围还可以是0.1%～0.4%或0.2%～0.5%。
发酵期间往发酵液中流加氨水，氨水可以选择浓度为20%～30%的浓氨水，氨水既可用作氮源，又可用以调节发酵液的pH值，从而使发酵液的pH值控制在7.2～8。0。发酵液的pH值的更优选范围为7.4～7.8。
本发明的有益效果是：①该方法以棕榈废油替换发酵培养基中的传统碳源，不仅降低原料成本，而且还能利用棕榈废油、开拓棕榈废油的应用领域；此外还能提高微生物的转化率，生产出具有高附加值的单细胞蛋白，极大地降低了生产成本、简化了生产工艺；②以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法相比传统对酸值过高的棕榈废油进行精炼的方法，大大减少了环境污染，对环境友好。
具体实施方式
下面结合优选实施例对本发明所述的技术方案作进一步详细的说明。
实施例一
本发明所述的发酵方法可以应用于分批发酵场合，也可以应用于连续发酵场合。本实施例以在5L发酵罐中分批发酵生产单细胞蛋白为例进行说明。
首先，将解脂耶罗酵母接入100ml的种子培养基中进行发酵、制备微生物种子液。种子培养基通常采用葡萄糖酵母蛋白胨培养基，其组成成分通常包括：20%的葡萄糖、10%的酵母抽提物、20%的蛋白胨。发酵过程可在摇床中进行，摇床的转速通常在100～200rpm，微生物种子液发酵温度控制在28℃。
在5L发酵罐内投入2L经121℃高压灭菌的无碳源的无菌发酵培养基，高压灭菌时间为30分钟，发酵培养基的pH值为7.5。本实施例中所述的发酵培养基的组成成分包括：酵母抽提物1g/L、硫酸镁1g/L、硫酸铵20g/L、磷酸二氢钾3g/L、磷酸氢二钾3g/L、氯化铁0.01g/L、硫酸锰0.02g/L、硫酸锌0.02g/L、硫酸铜2mg/L、钼酸钠2mg/L。
无菌棕榈废油可以在接种前加入发酵培养基中，也可以与微生物种子液一起加入发酵培养基中。本实施例以无菌棕榈废油在接种前加入发酵培养基中为例进行说明，无菌棕榈废油的初始添加量为10g/L。
通常微生物种子液中含有一定的碳源，因而当将微生物种子接种到发酵培养基中时，发酵液中就含有非常低浓度的碳源，但这些碳源随着发酵的进行会被迅速消耗掉。但作为初始发酵培养基，即接种前的发酵培养基，以棕榈废油取代常规发酵碳源，因此该初始发酵培养基中基本不含有任何碳源。
获得微生物种子液后，按照5%的接种浓度将微生物种子液接入发酵培养基进行发酵培养，培养周期为72小时。其中，发酵罐内发酵液温度控制在28℃，发酵罐中的搅拌设备的初始搅拌转速为200rpm，发酵罐内初始通气量为1vvm，整个发酵培养过程中通过设置搅拌转速和通气量保证发酵液中溶解氧在20%～60%。
发酵培养开始后，往发酵液中流加氨水，本申请使用浓度为25%的浓氨水流加调控，使发酵液的pH值保持在7.5。当发酵液中的脂肪酸总量低于0.1%时，往发酵液中流加无菌棕榈废油，通过添加棕榈废油来调整发酵液中的脂肪酸总量，使发酵液中的脂肪酸总量维持在0.1%～0.5%。
发酵完成后进行细胞干重测定：将发酵液称重后，以4000rpm的转速离心5分钟，所得沉淀加水洗一次，再以4000rpm的转速离心5分钟，所得沉淀在80℃过滤烘干后称重，测得发酵液中细胞干重为68g/kg。
在发酵过程中，一共使用棕榈废油为56g/kg，得到细胞干重为68g/kg，转化率高达121.4%。
对发酵液进行粗蛋白测定，得到如下结果：1克细胞干重中可以得到56.8%的粗蛋白。粗蛋白测定是一种常规测定方法，因而这里不再赘述具体粗蛋白测定的步骤。
对比实施例一
以市场上常见碳源作为发酵原料进行发酵培养对比，其中碳源采用葡萄糖：
首先，将解脂耶罗酵母接入100ml的种子培养基中进行发酵、制备微生物种子液。种子培养基通常采用葡萄糖酵母蛋白胨培养基，其组成成分通常包括：20%的葡萄糖、10%的酵母抽提物、20%的蛋白胨。发酵过程可在摇床中进行，摇瓶的转速通常在100～200rpm，微生物种子液发酵温度控制在28℃。
在5L发酵罐内投入2L经121℃高压灭菌的无菌发酵培养基，高压灭菌时间为30分钟，发酵培养基的pH值为7.5。本实施例中所述的发酵培养基的组成成分包括：酵母抽提物1g/L、硫酸镁1g/L、硫酸铵20g/L、磷酸二氢钾3g/L、磷酸氢二钾3g/L、氯化铁0.01g/L、硫酸锰0.02g/L、硫酸锌0.02g/L、硫酸铜2mg/L、钼酸钠2mg/L。
获得微生物种子液后，按照5%的接种浓度将微生物种子液接入发酵培养基进行发酵培养，培养周期为72小时，初始向发酵罐内按照10g/L投入浓度为20%的无菌葡萄糖溶液。发酵罐内发酵液温度控制在28℃，发酵罐中的搅拌设备的初始搅拌转速为200rpm，发酵罐内初始通气量为1vvm，整个发酵培养过程中通过设置搅拌转速和通气量保证发酵液中溶解氧在20%～60%。
发酵培养开始后，往发酵液中流加氨水，这里使用浓度为25%的浓氨水流加调控，使酵液的pH值保持在7.5。当发酵液中的葡萄糖浓度低于1g/L时，往发酵液中补充无菌葡萄糖溶液，控制发酵液中的葡萄糖浓度在1～5g/L。
发酵完成后进行细胞干重测定：将发酵液称重后，以4000rpm的转速离心5分钟，所得沉淀加水洗一次，再以4000rpm的转速离心5分钟，所得沉淀在80℃过滤烘干后称重，测得发酵液中细胞干重为35.2g/kg。
在发酵过程中，一共使用葡萄糖为66.3g/kg，得到细胞干重为35.2g/kg，转化率为53.09%。
对发酵液进行粗蛋白测定，得到如下结果：1克细胞干重中可以得到54.6%的粗蛋白。
由上述实施例一和对比实施例一可知：本发明以棕榈废油替换发酵培养基中的传统碳源，不仅降低原料成本，而且还能利用棕榈废油、开拓棕榈废油的应用领域；此外还能提高微生物的转化率，生产出具有高附加值的单细胞蛋白，极大地降低了生产成本、简化了生产工艺。
以上所述仅是本发明的较佳实施例，并非是对本发明作任何其他形式的限制，而依据本发明的技术实质所作的任何修改或等同变化，仍属于本发明要求保护的范围。
实施例二
本发明所述的发酵方法可以应用于分批发酵场合，也可以应用于连续发酵场合。本实施例以二级连续发酵生产单细胞蛋白为例进行说明，在实际生产中可根据实际需求进行多级连续发酵生产单细胞蛋白。
首先，将解脂耶罗酵母接入1L的种子培养基中进行发酵、制备微生物种子液。种子培养基的组成成分通常包括：葡萄糖10g/L、酵母抽提物1g/L、硫酸镁1g/L、硫酸铵20g/L、硫酸二氢钾3g/L和磷酸氢二钾3g/L。发酵过程可在摇瓶中进行，摇床的转速为200rpm，微生物种子液发酵温度控制在28℃、发酵培养时间为16小时。
在10L发酵罐内投入7L经121℃高压灭菌的无碳源的无菌发酵培养基，发酵培养基的pH值为7。本实施例中所述的发酵培养基的组成成分包括：酵母抽提物1g/L、硫酸镁1g/L、硫酸铵20g/L、磷酸二氢钾3g/L、磷酸氢二钾3g/L、氯化铁0.01g/L、硫酸锰0.02g/L、硫酸锌0.02g/L、硫酸铜2mg/L、钼酸钠2mg/L。
一级发酵：获得微生物种子液后，按照10%的接种浓度将微生物种子液接入发酵培养基进行发酵培养，培养时间为24小时。发酵罐内发酵液温度控制在28℃，发酵罐中的搅拌设备的搅拌转速为300rpm，发酵罐内初始通气量为1vvm，整个发酵培养过程中通过设置搅拌转速和通气量保证发酵液中溶解氧在20%～60%。发酵罐内发酵液的pH值为7.0。
发酵培养开始后，往发酵液中流加氨水，本申请使用浓度为25%的浓氨水流加调控，使酵液的pH值保持在7.5。初始向发酵罐内按照10g/L投入无菌棕榈废油，当发酵液中的脂肪酸总量低于0.1%时，往发酵液中流加无菌棕榈废油，通过添加棕榈废油来调整发酵液中的脂肪酸总量，使发酵液中的脂肪酸总量维持在0.1%～0.5%。
二级发酵：将一级发酵中的发酵液作为二级发酵中的微生物种子液，按照10%的接种浓度将一级发酵中的发酵液投入100L发酵罐的发酵培养基中进行发酵培育，培养时间为72小时。发酵罐内发酵液温度控制在28℃，发酵罐中的搅拌设备的搅拌转速为200rpm，发酵罐内初始通气量为1.5vvm，整个发酵培养过程中通过设置搅拌转速和通气量保证发酵液中溶解氧在20%～60%。发酵罐内发酵液的pH值为7.5。
其中，100L发酵罐内装有70L的发酵培养基。本实施例中所述的发酵培养基的组成成分包括：酵母抽提物1g/L、硫酸镁1g/L、硫酸铵20g/L、磷酸二氢钾3g/L、磷酸氢二钾3g/L、氯化铁0.01g/L、硫酸锰0.02g/L、硫酸锌0.02g/L、硫酸铜2mg/L、钼酸钠2mg/L。
发酵培养开始后，往发酵液中流加氨水，本申请使用浓度为25%的浓氨水流加调控，使酵液的pH值保持在7.5。初始向发酵罐内按照10g/L投入无菌棕榈废油，当发酵液中的脂肪酸总量低于0.1%时，往发酵液中流加无菌棕榈废油，通过添加棕榈废油来调整发酵液中的脂肪酸总量，使发酵液中的脂肪酸总量维持在0.1%～0.5%。在流加氨水和棕榈废油的过程中，当发酵罐内的发酵液超过80L时需要对发酵罐内的发酵液进行泄放作业，以控制发酵罐内的发酵液不超过80L。
发酵完成后进行细胞干重测定：将发酵液称重后，以4000rpm的转速离心5分钟，所得沉淀加水洗一次，再以4000rpm的转速离心5分钟，所得沉淀在80℃过滤烘干后称重，测得发酵液中细胞干重为60.8g/kg。
在发酵过程中，一共使用棕榈废油为51.2g/kg，得到细胞干重为60.8g/kg，转化率高达118.75%。
对发酵液进行粗蛋白测定，粗蛋白测定是一种常规测定方法，得到如下结果：1克细胞干重中可以得到58.1%的粗蛋白。
以上所述仅是本发明的较佳实施例，并非是对本发明作任何其他形式的限制，而依据本发明的技术实质所作的任何修改或等同变化，仍属于本发明要求保护的范围。
本发明的优点是：①该方法以棕榈废油替换发酵培养基中的传统碳源，不仅降低原料成本，而且还能利用棕榈废油、开拓棕榈废油的应用领域；此外还能提高微生物的转化率，生产出具有高附加值的单细胞蛋白，极大地降低了生产成本、简化了生产工艺；②以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法相比传统对酸值过高的棕榈废油进行精炼的方法，大大减少了环境污染，对环境友好。
Claims (11)
1.以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：所述的发酵方法为：在无菌发酵培养基中接入微生物种子液和无菌棕榈废油后，以棕榈废油为碳源在好氧条件下进行发酵；发酵期间往发酵液中流加无菌棕榈废油。
2.根据权利要求1所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：当发酵培养基中不含碳源时，棕榈废油的初始添加量为5～100g/L。
3.根据权利要求1所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：微生物种子液中的微生物包括：酵母、微藻、紫色非硫光合细菌、青霉菌中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：所述的酵母包括：产朊假丝酵母、热带假丝酵母、园拟酵母、球拟酵母、毕赤酵母、酿酒酵母、解脂耶罗酵母、产油油酯酵母中的一种或多种；所述的微藻包括：沼泽红假单胞菌、类球红假单胞菌、嗜酸红假单胞菌、荚膜红假单胞菌、红螺菌中的一种或多种。
5.根据权利要求1、2或3所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：微生物种子液的接种浓度为发酵培养基体积的1%～10%。
6.根据权利要求5所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：微生物种子液的接种浓度为发酵培养基体积的3%～5%。
7.根据权利要求1、2或3所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：所述的发酵培养基为酵母发酵培养基，所述的酵母发酵培养基的组成成分包括：酵母抽提物0.5～2.5g/L、硫酸镁1～3g/L、氮源5～20g/L、磷酸二氢钾2～5g/L、磷酸氢二钾2～5g/L、微量元素0.002～0.08g/L中的一种或多种。
8.根据权利要求7所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：所述的氮源为硫酸铵；所述的微量元素包括：铁、锰、锌、铜、钼元素中的一种或多种。
9.根据权利要求7所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：所述的氮源为硫酸铵；所述的微量元素的组成成分及各组成成分占发酵培养基的克数为：包括：氯化铁0.01～0.02g/L、硫酸锰0.01～0.02g/L、硫酸锌0.01～0.02g/L、硫酸铜2～4mg/L、钼酸钠2～4mg/L中的一种或多种。
10.根据权利要求1所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：发酵期间发酵液的发酵温度为25～35℃；发酵期间的通气量为0.5～2.5vvm；发酵期间通过通气量和搅拌发酵液配合使发酵液中的溶解氧为20%～60%；发酵期间往发酵液中流加无菌棕榈废油和氨水、从而使发酵液的pH值维持在7.2～8.0、脂肪酸总量维持在0.1%～0.5%。
11.根据权利要求10所述的以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法，其特征在于：氨水是浓度为20%～30%的浓氨水；发酵期间往发酵液中流加氨水、从而使发酵液的pH值维持在7.4～7.8。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910721170.1A CN110452825A (zh) | 2019-08-06 | 2019-08-06 | 以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910721170.1A CN110452825A (zh) | 2019-08-06 | 2019-08-06 | 以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110452825A true CN110452825A (zh) | 2019-11-15 |
Family
ID=68485027
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910721170.1A Pending CN110452825A (zh) | 2019-08-06 | 2019-08-06 | 以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110452825A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112143661A (zh) * | 2020-10-13 | 2020-12-29 | 苏州吉态来胺生物科技有限公司 | 以植物油为原料生产微生物蛋白胨的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107557309A (zh) * | 2016-06-30 | 2018-01-09 | 上海吉态来生物技术有限公司 | 微生物发酵生产单细胞蛋白和单细胞油脂的方法 |
| US20190174809A1 (en) * | 2016-08-11 | 2019-06-13 | Wim De Laat Consultancy B.V. | Single cell protein from thermophilic fungi |
-
2019
- 2019-08-06 CN CN201910721170.1A patent/CN110452825A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107557309A (zh) * | 2016-06-30 | 2018-01-09 | 上海吉态来生物技术有限公司 | 微生物发酵生产单细胞蛋白和单细胞油脂的方法 |
| US20190174809A1 (en) * | 2016-08-11 | 2019-06-13 | Wim De Laat Consultancy B.V. | Single cell protein from thermophilic fungi |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 于纪姗，等: "用大豆油和大豆废油生产单细胞蛋白", 《四川粮油科技》 * |
| 张飞: "S5和Y2菌对石油烃和废弃食用油脂的分解与同化作用研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库工程科技I辑》 * |
| 张飞等: "废弃食用油脂生产单细胞蛋白的研究", 《环保科技》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112143661A (zh) * | 2020-10-13 | 2020-12-29 | 苏州吉态来胺生物科技有限公司 | 以植物油为原料生产微生物蛋白胨的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105018539B (zh) | 一种培养裂殖壶菌高产dha的方法 | |
| CN101519676B (zh) | 用裂殖壶菌发酵生产二十二碳六烯酸的方法 | |
| CN1931004B (zh) | 一种利用构树叶和酒糟混合发酵制备高蛋白饲料的方法 | |
| CN101611767B (zh) | 一种海参用微生物发酵饵料的生产方法 | |
| CN102318737B (zh) | 一种无毒棉粕动物饲料的制备方法 | |
| CN106235306A (zh) | 液态发酵法果蔬生物酵素及其生产方法和用途 | |
| CN102168115A (zh) | 一种辅酶q10工业化生产方法 | |
| CN105506048B (zh) | 一种利用三孢布拉霉菌制备β-胡萝卜素的发酵方法 | |
| CN104087474A (zh) | 一种浓香型白酒的新型酿造方法及其所用的微生态制剂 | |
| CN107557309A (zh) | 微生物发酵生产单细胞蛋白和单细胞油脂的方法 | |
| CN102823725A (zh) | 固态发酵纤维皮渣生产生物蛋白饲料的方法 | |
| CN106306361A (zh) | 一种生物发酵饲料的制备方法 | |
| CN105132301A (zh) | 一株同时生产甲醇蛋白和脂肪酶的毕赤酵母及其应用 | |
| CN103421642A (zh) | 一种酯类物质含量高的苹果酒加工方法 | |
| CN109429911A (zh) | 一种用菊芋制备的发酵冬虫夏草培养液及其制备方法 | |
| CN101538592B (zh) | 用寇氏隐甲藻工业化发酵生产二十二碳六烯酸的方法 | |
| CN110106048A (zh) | 发酵白酒用小曲和应用以及清香型小曲白酒和制备方法 | |
| CN109699812A (zh) | 固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 | |
| CN105349588A (zh) | 利用裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸的方法 | |
| CN110452825A (zh) | 以棕榈废油为原料生产单细胞蛋白的发酵方法 | |
| CN102987063A (zh) | 一种有机酸动物生长调节剂及其制备方法 | |
| CN100535103C (zh) | 以提取木糖后的玉米皮水解糖液为原料制备饲料酵母的方法 | |
| CN108034687A (zh) | 一种含类胡萝卜素的组合物及含类胡萝卜素的组合物的制备方法 | |
| CN105368885B (zh) | 一种强化圆红冬孢酵母产α-亚麻酸的方法 | |
| CN106035985A (zh) | 一种混菌液态发酵黄酒加工废弃物生产单细胞蛋白的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191115 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |