CN110438190B - 一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽 - Google Patents

一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽，包括以下步骤：将瓜尔豆粕粉碎，得到瓜尔豆粕浆料；向瓜尔豆粕浆料中加入半纤维素酶进行酶解，得到初步酶解液；向初步酶解液中加入中性蛋白酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种的混合物进行酶解，得到瓜尔豆粕酶解液；对瓜尔豆粕酶解液进行固液分离，将分离出的液体浓缩、干燥，得到瓜尔活性肽。本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法以瓜尔豆粕为原料直接提取，无需再提取瓜尔豆蛋白，大大简化工艺，且通过多个酶种的分次、复合酶解获得了优异的活性肽得率。

Description

一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活 性肽
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽。
背景技术
瓜尔豆是印度干旱地区重要的豆科作物，该植物是以其高浓度的半乳糖甘露聚糖为基础生长的，被广泛应用于纺织、造纸、医药、矿业等行业。瓜尔粕是从瓜尔豆中提取的含有皂苷的半乳甘露聚糖的副产品，瓜尔豆粕作为动物饲料营养价值极高，其中含有大量的蛋白质，氨基酸分析表明，瓜尔豆粕中赖氨酸含量为3.22％，胱氨酸含量为0.79％，苏氨酸含量为1.94％，精氨酸含量为3.62％，精氨酸含量为3.7％。亮氨酸，0.73％蛋氨酸，1.51％甲基胱氨酸，色氨酸0.68％，色氨酸2.31％异亮氨酸和2.35％的缬氨酸。但瓜尔豆粕中还存在皂素、甘露聚糖和胰蛋白酶抑制剂等抗营养因素，将瓜尔豆粕直接加入饲料中，会影响肉仔鸡的饲料转化率和生长性能。为此，目前大量研究集中于采用各种加工工艺处理瓜尔豆粕以改善瓜尔豆粕中抗营养因素的抑制生长作用。
功能性蛋白肽又被称为生物活性肽，是指天然氨基酸以不同组成和排列方式构成、分子质量一般小于6000KDa、在构想上比较松散，对生物机体的生命活动有益或具有特定生理作用的多肽或者寡肽类的总称。中国专利文献CN107723328公开了一种瓜尔豆活性肽及其制备方法，通过对瓜尔豆进行处理提取其中的瓜尔活性肽，将提取出的瓜尔活性肽加入饲料中，可避免皂素、甘露聚糖和胰蛋白酶抑制剂等抗营养因素对动物的抑制生长的作用。但该技术中，需要对瓜尔豆粕进行处理，提取其中的瓜尔豆蛋白然后进行瓜尔活性肽的提取，一方面瓜尔蛋白提取方法复杂，不便于工业化生产，另一方面复杂的工艺造成大量的蛋白损失，且活性肽得率低。
发明内容
本发明解决的技术问题是提供一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽，使用瓜尔豆粕直接提取，无需再提取瓜尔豆蛋白，且活性肽得率高。
为了解决上述问题，本发明提供一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，包括以下步骤：
S1.将瓜尔豆粕粉碎，得到瓜尔豆粕浆料；
S2.向步骤S1得到的所述瓜尔豆粕浆料中加入半纤维素酶进行酶解，得到初步酶解液；
S3.向步骤S2得到的所述初步酶解液中加入中性蛋白酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种的混合物进行酶解，得到瓜尔豆粕酶解液；
S4.对步骤S3得到的所述瓜尔豆粕酶解液进行固液分离，将分离出的液体浓缩、干燥，得到瓜尔活性肽。
其中，瓜尔豆粕是瓜尔豆通过一定的加工工艺提取其中的瓜尔豆胶后的副产品。半纤维素酶指可以将半纤维素分解为小分子多糖或单糖的酶，半纤维素酶可以是甘露聚糖酶、木聚糖酶、葡聚糖酶等；中性蛋白酶指能够在中性或弱酸、弱碱环境中水解蛋白质的肽键，释放氨基酸或多肽的酶，中性蛋白酶根据其作用的活性中心蛋白酶功能基团可分为丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶，依据其来源可选木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶等；酸性蛋白酶指能够在酸性环境中水解蛋白质的肽键，释放氨基酸或多肽的酶，酸性蛋白酶可选胃蛋白酶等；碱性蛋白酶指能够在碱性环境中水解蛋白质的肽键，释放氨基酸或多肽的酶。
本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法直接以瓜尔豆粕为原料，先使用半纤维素酶对瓜尔豆粕进行酶解，半纤维素酶作用于植物细胞壁、细胞膜中的多糖，使瓜尔豆粕中的植物细胞壁破裂，释放出植物细胞内的大量糖类、脂肪、蛋白质，然后对初步酶解液进行蛋白质酶的酶解，各类蛋白质酶作用于释放出的蛋白质，使蛋白质水解，产生大量氨基酸或多肽，经固液分离出未水解的成分和杂质，并进行浓缩、干燥，可得瓜尔活性肽。本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法直接对瓜尔豆粕进行处理，无需先行提取瓜尔豆粕中的瓜尔豆蛋白，大大简化了工艺，适用于工业生产，且对瓜尔豆粕的酶解处理彻底，可显著提高制备方法的活性肽得率。
优选地，步骤S2中，所述半纤维素酶为甘露聚糖酶。
优选地，步骤S2中所述半纤维素酶的添加量为酶底比10-200U/g；进一步优选地，酶底比为50-130U/g；进一步优选地，酶底比为100U/g。
酶底比指酶解反应时添加的酶的量与底物量的比，即每g底物添加10-200U的酶，U为酶的活性单位。
优选地，步骤S2中进行酶解时底物瓜尔豆粕的质量浓度为10％。
优选地，步骤S2中，酶解时温度为30-70℃，pH为6-8，酶解时间为2-6h；进一步优选地，酶解温度为50-55℃；进一步优选地，酶解温度为50℃。
优选地，步骤S3中，使用木瓜蛋白酶与中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或多种进行复合酶解。木瓜蛋白酶属于中性蛋白酶，简称木瓜酶，即步骤S3中，优选的方法是采用木瓜蛋白酶与另外一种中性蛋白酶或与碱性蛋白酶进行复合酶解。
进一步优选地，步骤S3中，使用木瓜蛋白酶与中性蛋白酶进行复合酶解。
优选地，步骤S3中酶的添加总量为酶底比2000-6000U/g。
优选地，步骤S3中木瓜蛋白酶与中性蛋白酶或碱性蛋白酶的质量比为(0.5-2)：1。
优选地，步骤S3中进行酶解时底物的质量浓度为5％-20％。
优选地，步骤S3中，总酶解时间为8-24h，酶解温度为30-70℃，使用木瓜蛋白酶酶解时pH为6-8；使用中性蛋白酶酶解时pH为6-8；使用碱性蛋白酶酶解时pH为9-11；进一步优选地，酶解温度为45-55℃。
进一步优选地，酶解时使用5％的氢氧化钠与5％的柠檬酸调节pH。
优选地，步骤S3中还包括在酶解后加热至80-100℃使酶失活。
优选地，步骤S4中的干燥方法为喷雾干燥；
进一步优选地，喷雾干燥的进样温度为120-180℃，出样温度大于85℃。
优选地，步骤S4固液分离采取先将酶解液过滤，然后将滤液离心分离，取上清液进行抽滤、浓缩；
优选地，步骤S4固液分离采取先将酶解液经板框过滤，收集滤液，然后进行浓缩、离心、抽滤；
本发明的另一目的是提供利用上述的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法制备得到的瓜尔活性肽。
本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：
1.本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法以瓜尔豆粕为原料，先使用半纤维素酶对瓜尔豆粕进行酶解，半纤维素酶作用于植物细胞壁、细胞膜中的多糖，使瓜尔豆粕中的植物细胞壁破裂，释放出植物细胞内的大量糖类、脂肪、蛋白质，然后对初步酶解液进行蛋白质酶的酶解，各类蛋白质酶作用于释放出的蛋白质，使蛋白质水解，产生大量氨基酸或多肽，经固液分离出未水解的成分和杂质，并进行浓缩、干燥，可得瓜尔活性肽；
2.本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，以瓜尔豆粕为原料，直接对瓜尔豆粕进行处理，无需先行提取瓜尔豆粕中的瓜尔豆蛋白，省去了蛋白质的提取工艺，大大简化了工艺，适用于工业生产，且使用多种酶分次、复合对瓜尔豆粕进行酶解，处理更彻底，显著提高了制备方法的活性肽得率；
3.本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，通过大量研究得出适于瓜尔豆粕活性肽的提取工艺参数、酶解酶种、复合比例，得到了最佳的瓜尔活性肽制备工艺，获得了优异的瓜尔活性多肽得率，且得到的瓜尔活性肽中富含丰富的氨基酸，具有很高的营养价值；
4.本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法制备得到的瓜尔活性肽，样品不仅富含高蛋白，还富含5-20％膳食纤维(半乳甘露聚糖)(AOAC法)。添加甘露聚糖酶酶解产生的甘露寡糖，可以被动物肠道中有益菌吸收，改善菌群组成，减少大肠杆菌、沙门氏菌的感染、减少肉鸡球虫菌病的危害、提高肉鸡均匀度、降低肠道粘度、促进能量、蛋白、纤维素的消化吸收，符合国家卫生健康卫生委员会国家市场监督管理总局2018年6月21号发布，2018年12月21号正式实施的《食品添加剂半乳甘露聚糖食品安全国家标准GB1886.301-2018》。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下各实施例中，瓜尔豆粕购自于北京瓜尔润科技股份有限公司；甘露聚糖酶购自于北京索莱宝科技有限公司和北京瓜尔润科技股份有限公司；木聚糖酶购自于北京索莱宝科技有限公司；葡聚糖酶购自于北京索莱宝科技有限公司；木瓜蛋白酶购自于南宁东恒华道生物科技公司；胰蛋白酶购自于生工生物工程(上海)公司；菠萝蛋白酶购自于上海源叶生物科技有限公司；1398中性蛋白酶购自南宁东恒华道生物科技公司；D6430中性蛋白酶购自北京索莱宝科技有限公司；S10013中性蛋白酶购自上海源叶生物科技有限公司；2709碱性蛋白酶购自南宁东恒华道生物科技公司；537酸性蛋白酶购自南宁东恒华道生物科技公司。需要说明的是，上述记载的原料来源仅为举例，其实际选择并不唯一，本领域技术人员还可根据实际情况购买其他厂家、规格型号的产品，不同厂家、型号的产品并不影响本发明技术效果的实现。
实施例一
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，包括以下步骤：
S1.取瓜尔豆粕原料，将瓜尔豆粕粉碎，过60目筛，加一定量的水搅拌均匀，使瓜尔豆粕浆料中底物瓜尔豆粕的质量浓度为10％，得到瓜尔豆粕浆料；
S2.向瓜尔豆粕浆料中加入适量浓度为5％的氢氧化钠和5％的柠檬酸调节浆料的pH为7，加入甘露聚糖酶，酶底比为100U/g，在50℃下酶解4h，得到初步酶解液；
S3.向步骤S2得到的初步酶解液中加入木瓜蛋白酶和1398中性蛋白酶，木瓜蛋白酶与1398中性蛋白酶的质量比为1:1，总酶底比为4000U/g，在50℃下酶解24h，然后升温至90℃使酶失活，得到瓜尔豆粕酶解液；
S4.对步骤S3得到的瓜尔豆粕酶解液进行过滤，取滤液，然后进行离心分离，取上清液进行抽滤，将滤液浓缩，然后进行喷雾干燥，喷雾干燥的进样温度为160℃，出料温度大于85℃，得到瓜尔活性肽。
实施例二
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，包括以下步骤：
S1.取瓜尔豆粕原料，将瓜尔豆粕粉碎，过60目筛，加一定量的水搅拌均匀，使瓜尔豆粕浆料中底物瓜尔豆粕的质量浓度为10％，得到瓜尔豆粕浆料；
S2.向瓜尔豆粕浆料中加入适量浓度为5％的氢氧化钠和5％的柠檬酸调节浆料的pH为6，加入甘露聚糖酶，酶底比为50U/g，在30℃下酶解4h，得到初步酶解液；
S3.向步骤S2得到的初步酶解液中加入木瓜蛋白酶和D6430中性蛋白酶，木瓜蛋白酶与D6430中性蛋白酶的质量比为1:2，总酶底比为2000U/g，在30℃下酶解24h，然后升温至90℃使酶失活，得到瓜尔豆粕酶解液；
S4.对步骤S3得到的瓜尔豆粕酶解液进行过滤，取滤液，然后进行离心分离，取上清液进行抽滤，将滤液浓缩，然后进行喷雾干燥，喷雾干燥的进样温度为160℃，出料温度大于85℃，得到瓜尔活性肽。
实施例三
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，包括以下步骤：
S1.取瓜尔豆粕原料，将瓜尔豆粕粉碎，过60目筛，加一定量的水搅拌均匀，使瓜尔豆粕浆料中底物瓜尔豆粕的质量浓度为8％，得到瓜尔豆粕浆料；
S2.向瓜尔豆粕浆料中加入适量浓度为5％的氢氧化钠和5％的柠檬酸调节浆料的pH为8，加入甘露聚糖酶，酶底比为130U/g，在70℃下酶解6h，得到初步酶解液；
S3.向步骤S2得到的初步酶解液中加入木瓜蛋白酶和S10013中性蛋白酶，木瓜蛋白酶与S10013中性蛋白酶的质量比为2:1，总酶底比为6000U/g，在70℃下酶解24h，然后升温至90℃使酶失活，得到瓜尔豆粕酶解液；
S4.对步骤S3得到的瓜尔豆粕酶解液进行过滤，取滤液，然后进行离心分离，取上清液进行抽滤，将滤液浓缩，然后进行喷雾干燥，喷雾干燥的进样温度为160℃，出料温度大于85℃，得到瓜尔活性肽。
实施例四
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，包括以下步骤：
S1.取瓜尔豆粕原料，将瓜尔豆粕粉碎，过60目筛，加一定量的水搅拌均匀，使瓜尔豆粕浆料中底物瓜尔豆粕的质量浓度为12％，得到瓜尔豆粕浆料；
S2.向瓜尔豆粕浆料中加入适量浓度为5％的氢氧化钠和5％的柠檬酸调节浆料的pH为7，加入甘露聚糖酶，酶底比为80U/g，在60℃下酶解4h，得到初步酶解液；
S3.向步骤S2得到的初步酶解液中加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶，木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为1:2，总酶底比为3000U/g，在60℃下酶解24h，然后升温至90℃使酶失活，得到瓜尔豆粕酶解液；
S4.对步骤S3得到的瓜尔豆粕酶解液进行过滤，取滤液，然后进行离心分离，取上清液进行抽滤，将滤液浓缩，然后进行喷雾干燥，喷雾干燥的进样温度为160℃，出料温度大于85℃，得到瓜尔活性肽。
实施例五
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例二中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S2中甘露聚糖酶的酶底比为10U/g。
实施例六
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S2中甘露聚糖酶的酶底比为200U/g。
实施例七
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S2中酶解时调节pH为5。
实施例八
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S2中酶解时调节pH为9。
实施例九
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S2中酶解时温度为80℃。
实施例十
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S2中酶解时温度为20℃。
实施例十一
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中酶解时，木瓜蛋白酶与S10013中性蛋白酶的质量比为3:1。
实施例十二
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中酶解时，木瓜蛋白酶与S10013中性蛋白酶的质量比为1:3。
实施例十三
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中酶解时温度为80℃。
实施例十四
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中酶解时pH为9。
实施例十五
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中酶解时pH为5。
实施例十六
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中使用胰蛋白酶与S10013中性蛋白酶进行酶解，胰蛋白酶与S10013中性蛋白酶的质量比为2:1。
实施例十七
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中使用胰蛋白酶与菠萝蛋白酶进行酶解，胰蛋白酶与菠萝蛋白酶的质量比为1:2。
实施例十八
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中使用木瓜蛋白酶与2709碱性蛋白酶进行酶解，木瓜蛋白酶与2709碱性蛋白酶的质量比为1:1。
实施例十九
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例中步骤S3中使用537酸性蛋白酶进行酶解。
实施例二十
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例不进行步骤S2，即不使用甘露聚糖酶对瓜尔豆粕浆料进行处理，直接进行步骤S3。
实施例二十一
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例步骤S2中使用木聚糖进行酶解。
实施例二十二
本实施例的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其余步骤均与实施例三中相同，不同之处仅在于本实施例步骤S2中使用葡聚糖进行酶解。
产物中蛋白质、氨基酸、活性肽含量及活性肽得率测定
对上述各实施例的制备方法得到的产物进行蛋白质、氨基酸、多肽含量的测定，测定方法依据国标GBT22492-2008，测定结果如下表1。
由以下测试结果可以看出，本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，不需要对瓜尔豆粕进行蛋白质的提取，直接进行酶解，即可获得瓜尔活性肽，且瓜尔活性肽的得率很高。
实施例五、六与实施例二、三相比，区别在于步骤S2中添加的酶的量不同，但其活性肽得率显然没有实施例二、三高，因此，本申请的制备方法步骤S2添加酶量优选酶底比为50-130U/g。
实施例七、八与实施例三相比，区别在于步骤S2中酶解时的pH不同，实施例三的活性肽得率显著高于实施例七、八，因此，本申请的制备方法步骤S2中酶解的优选pH为6-8。
实施例九、十与实施例三相比，区别在于步骤S2中酶解时的温度不同，酶解温度为20℃时，酶活性不高，而酶解温度为80℃时可能使部分酶失活，因此，本申请的制备方法步骤S2中酶解的优选温度为30-70℃。
实施例十一、十二与实施例三相比，区别在于木瓜蛋白酶与另一中性蛋白酶的比例不同，而实施例三的活性肽得率显著高于实施例十一和十二，因此，本申请的制备方法步骤S3中木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的优选比例为(0.5-2)：1。
实施例十三与实施例三相比，区别在于步骤S3中酶解时的温度不同，酶解温度为80℃时，可能使部分酶失活，因此，本申请的制备方法步骤S3中酶解的优选温度为30-70℃。
实施例十四、十五与实施例三相比，区别在于步骤S3中酶解时的pH不同，实施例三的活性肽得率显著高于实施例十四、十五，因此，本申请的制备方法步骤S3中酶解的优选pH为6-8。
实施例十六、十七中未使用木瓜蛋白酶与其他中性蛋白酶复合酶解，而是使用另外两种中性蛋白酶进行复合酶解，实施例三的活性肽得率显著高于实施例十六、十七，因此，本申请的制备方法中，步骤S3中优选采用木瓜蛋白酶与另外一种中性蛋白酶配合复合酶解。
实施例十八中步骤S3采用木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解，其活性肽得率显然低于实施例三，因此，本申请的制备方法中，步骤S3中优选采用木瓜蛋白酶与中性蛋白酶配合复合酶解。
实施例十九中步骤S3采用酸性蛋白酶酶解，其活性肽得率显然低于采用中性蛋白酶或碱性蛋白酶的实施例，因此，本申请的制备方法中，步骤S3中优选采用中性蛋白酶或碱性蛋白酶。
实施例二十中不采用甘露聚糖酶对瓜尔豆粕浆料进行初步酶解，其肽得率显然低于任一采用了甘露聚糖酶初步酶解的实施例。
实施例二十一、二十二采用了木聚糖或葡聚糖对瓜尔豆粕浆料进行初步酶解，其肽得率显然低于采用甘露聚糖初步酶解的实施例，因此，本申请的制备方法中，步骤S2优选甘露聚糖进行酶解。
表1
Figure BDA0002200592830000111
Figure BDA0002200592830000121
表2为实施例一所得的瓜尔活性肽中氨基酸含量数据，由以下数据可以看出，本申请制备得到的瓜尔活性多肽中含有非常丰富的氨基酸，营养价值极高。
表2
Figure BDA0002200592830000122
Figure BDA0002200592830000131
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (2)

1.一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.取瓜尔豆粕原料，将瓜尔豆粕粉碎，过60目筛，加一定量的水搅拌均匀，使瓜尔豆粕浆料中底物瓜尔豆粕的质量浓度为10%，得到瓜尔豆粕浆料；
S2.向瓜尔豆粕浆料中加入适量浓度为5%的氢氧化钠和5%的柠檬酸调节浆料的pH为7，加入甘露聚糖酶，酶底比为100U/g，在50℃下酶解4h，得到初步酶解液；
S3.向步骤S2得到的初步酶解液中加入木瓜蛋白酶和1398中性蛋白酶，木瓜蛋白酶与1398中性蛋白酶的质量比为1:1，总酶底比为4000 U/g，在50℃下酶解24h，然后升温至90℃使酶失活，得到瓜尔豆粕酶解液；
S4.对步骤S3得到的瓜尔豆粕酶解液进行过滤，取滤液，然后进行离心分离，取上清液进行抽滤，将滤液浓缩，然后进行喷雾干燥，喷雾干燥的进样温度为160℃，出料温度大于85℃，得到瓜尔活性肽。
2.利用如权利要求1所述的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法制备得到的瓜尔活性肽。
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