CN110433187A - 一种萝卜提取物在制备治疗、预防或改善治疗帕金森综合症中的应用及其制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种萝卜提取物在制备治疗、预防或改善治疗帕金森综合症中的应用及其制备工艺，提供了一种用于防治帕金森综合症的药物组合物，所述药物组合物包括萝卜提取物；所述萝卜提取物为水提物、醇提物混合物；所述萝卜提取物从胭脂萝卜、白萝卜、长羽裂萝卜、红心萝卜、绿皮红心萝卜、大红缨萝卜、蓝花子中的一种或多种提取得到；本发明还公开了所述用于防治帕金森综合症的药物的剂型及制备方法。本发明用于防治帕金森综合症的萝卜提取物成分天然，安全，经动物实验证明有显著的治疗作用，制备方法方便、环保，可广泛用于帕金森综合症的防治中，为帕金森综合症的防治提供更佳的选择。

Description

一种萝卜提取物在制备治疗、预防或改善治疗帕金森综合症 中的应用及其制备工艺

技术领域

本发明涉一种萝卜提取物的应用，尤其涉及一种萝卜提取物在防治帕金森综合症的应用，具体涉及含有该萝卜提取物的药品及其制备方法。

背景技术

帕金森综合症(PD)是一种以黑质纹状体通路神经退行性病变为主要特症的神经系统变性疾病，也是仅次于阿尔兹海默症的第二大神经退行性疾病。主要病理特症为中脑多巴胺能神经元进行性变性死亡以及细胞内路易氏小体的形成，最终导致黑质-纹状体多巴胺能系统功能衰退，从而产生运动障碍，其临床特症主要表现为禁止性震颤、姿势平衡障碍、运动迟缓、肌肉僵直，也常伴有认知功能障碍。流行病学显示，PD的发病率随年龄的增长而增加，65岁以上人群发病率约为1％～2％，严重影响老年人的身体健康和生活质量。

随着社会的发展和人口老龄化的增加，我国PD患者会呈现出明显的上升趋势，目前，临床上对PD均采用对症治疗，尚无有效的治疗手段能够恢复变性神经元。西药治疗PD主要通过外源补充多巴、增加多巴胺受体功能及阻止多巴胺的降解的方式改善患者运动症状的对症治疗。但目前的药物治疗不能阻止病情的发展，更无法治愈。特别是长期服药患者会对各种西药产生耐受作用，易出现症状波动及运动异常等并发症，以致于西药在后期治疗改善PD症状疗效差。所以，一种天然、健康、副作用小的，用于治疗或改善治疗帕金森综合症的药物/保健品的研发具有非常广阔的市场前景和深远的社会意义。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术的不足之处而提供一种天然、健康、副作用小的，用于治疗或改善治疗帕金森综合症的药物组合物。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：用于防治帕金森综合症的药品，包括萝卜提取物。

优选地，所述药物组合物含有所述萝卜提取物的质量百分含量为50％～85％。

优选地，所述萝卜提取物为水提物、醇提物混合物。

作为本发明的优选实施方式，所述萝卜提取物可经以下提取工艺步骤得到：

1)粉碎：将原料萝卜清洗干净后，粉碎切成小薄片、或小块状、或机器粉碎；

2)浸提：将步骤1粉碎的所得物使用溶剂并利用微波或超声波进行辅助浸提，所述的溶剂为水、或乙醇或甲醇；

3)过滤：将上述步骤2浸提所得的浸提液采用离心或压榨进行初过滤，初滤液经絮凝沉降后再进行砂滤或管式离心；

4)精制：将步骤3过滤所得的萝卜粗提液加入DM130、AB-8、X-5或NKA-9大孔树脂柱中进行静态过滤吸附，然后依次采用纯化水涤剂、并采用乙醇进行洗脱；

5)浓缩：对上述步骤4精制所得的精制液进行减压浓缩所得萝卜提取浓缩液；

6)干燥：将步骤5得到的萝卜提取浓缩液进行喷雾干燥或真空冷冻干燥，手机干燥粉末，得到萝卜提取物。

为保证萝卜提取物的有效成分，提供了上述制备工艺。该工艺在制备过程中不会导致提取物的有效成分降解，得到的提取物能有效应用于后续药品的制备过程中。

优选地，所述萝卜提取物从胭脂萝卜、白萝卜、长羽裂萝卜、红心萝卜、绿皮红心萝卜、大红缨萝卜、蓝花子中的一种或多种提取得到。

更优选地，所述萝卜提取物为胭脂萝卜提取物。

可根据采用的原料成分不同对提取过程进行相应的优化，保证有效成分的提取率。

进一步地，所述用于防治帕金森综合症的药物组合物还包括辅料，所述辅料包括填充剂、崩解剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、润滑剂、助流剂、防腐剂中的一种或多种。

优选地，所述的填充剂为稳定性、可压性良好的辅料，具体包括微晶纤维素、硅化微晶纤维素、微晶纤维素和甘露醇复合物、微晶纤维素和磷酸氢钙复合物、蔗糖、乳糖、预胶化淀粉、甘露糖醇、赤藓糖醇、木糖醇、山梨糖醇、玉米淀粉、糊精、麦芽糊精、磷酸氢钙、淀粉水解寡糖中的一种或多种；更优选为微晶纤维素、硅化微晶纤维素、微晶纤维素和甘露醇复合物、蔗糖、乳糖的一种或多种。

优选地，所述粘合剂具有高粘度、稳定性良好聚合物，具体包括羟丙基甲基纤维素、糊精、环糊精、西黄蓍胶、黄原胶、明胶、阿拉伯胶、麦芽糊精、聚维酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种；更优选为羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶、海藻酸钠中的一种或多种。

优选地，所述甜味剂具有稳定性、可压性和甜度良好甜味添加剂，具体包括蔗糖、阿斯巴甜、甘露糖醇、赤藓糖醇、山梨糖醇、木糖醇、甜菊素、糖精钠、麦芽糖、葡萄糖、甜蜜素、甜菊糖苷中的一种或多种；更优选为蔗糖、甘露糖醇、赤藓糖醇、木糖醇和甜菊糖苷中的一种或多种。

优选地，所述的润滑助流剂具有安全性、稳定性良好的辅料，具体包括滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂富马酸钠、十八烷基富马酸钠、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇类、二氧化硅中的一种或多种。

在制备防治帕金森综合症的药物组合物，应根据最终用途相应地选择适用于制备药学上可接受的辅料，及各辅料的含量范围。

进一步地，所述用于防治帕金森综合症的药物组合物的剂型包括片剂、胶囊剂、软胶囊、口服液、颗粒剂、冲剂。

进一步地，所述用于防治帕金森综合症的药物组合物的制备方法包括流化床一步制粒、干法制粒，或粉末直接压片或填充胶囊。

具体地，所述流化床一步制粒为：将部分高分子粘合剂溶解于乙醇溶液中，制备成醇溶液；将萝卜提取物与填充剂、剩下的粘合剂、崩解剂置于流化床中充分混合，加入上述的粘合剂的醇溶液，充分混合一步制粒，并干燥所得干颗粒；干燥后加入润滑助流剂、甜味剂、香精得到混合粉，加入多向运动混合机中混合均匀，压片得到素片，或填充胶囊或分装；

所述干法制粒为：将萝卜提取物与填充剂、粘合剂、崩解剂、甜味剂等置于干法制粒机混合槽进行混合，并经输送、碾压、破碎所得颗粒粉末，干颗粒加入润滑助流剂、或香精得到混合粉，加入多向运动混合机中混合均匀，进行压片得到素片，或填充胶囊、或分装；

所述粉末直接压片或填充胶囊为：将萝卜提取物与填充剂、粘合剂、崩解剂、甜味剂等置于多向运动混合机中进行预混合，预混合后加入润滑助流剂、或香精等，在混合机中继续进行充分混合均匀，所得混合物进行压片得到素片，或填充胶囊。

优选地，所述的药物组合物的制备方法还包括以下步骤：

a)包衣液的配制：将润滑助流剂过筛后混合均匀，加入至含高分子粘合剂的薄膜包衣粉的水溶液中，持续搅拌均匀，制得透明薄膜包衣液；

b)将步骤制得的素片加入到高效包衣锅中，调节好进风温度、进风量，素片进行预热后，将片床温度控制在30℃～55℃，加入上述的透明薄膜包衣液进行包衣，制得包衣片。

该方法更有效的隔绝萝卜提取物带来的异味影响、同时起到防潮、隔绝氧气等效果，在有效保护活性、延长保质期的同时，还能改善口感。

本发明还要求保护所述萝卜提取物和/或含有所述萝卜提取物的组合物在制备用于防治帕金森综合症的药物中的应用。

与现有技术相比，本发明的有益效果包括以下几个方面：

(1)发明人研究发现，从植物(例如胭脂萝卜)中提取得到的萝卜提取物具有抗帕金森症(PD)的作用，能够改善帕金森症多种症状。动物实验中，采用经典的MPTP所致亚急性PD模型对萝卜提取物的抗PD作用进行评价，通过平衡疲劳转动棒实验(Rotarod test)、爬杆实验(Pole test)，发现高剂量的萝卜提取物可以显著的改善小鼠的行为学异常症状，对小鼠的旋转行为有明显的抑制，并且呈一定的剂量依赖性。由此说明，该萝卜提取物对MPTP所致的PD模型小鼠有显著的治疗作用。

(2)本发明的萝卜提取物成分天然、安全，可从多种不同的植物中获取，来源丰富，可有效降低成本，能够广泛应用于制备用于治疗或改善帕金森症的药物，为帕金森综合症的研究、预防和治疗提供新的选择。

(3)通过本发明提供制备技术，萝卜提取物的组合物经制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂后，提高了患者的依从性、有利于患者服用。同时通过本发明提供的制备技术能有效地保证萝卜提取物的有效成分不因高温造成降解，使用硬胶囊填充有利于隔绝提取物的异味、防潮及遮光。传统的湿法造粒工艺，因高温干燥，容易导致萝卜提取物的有效成分降解，失去萝卜提取物的对治疗和改善帕金森应用意义。本发明的组合物制备工艺，所用的辅料中有机溶剂用量少，有利于环境保护。

(4)通过发明提供的包衣技术，含萝卜提取物的片剂进行包衣后，有效隔绝提取物的异味，提高了片剂的防潮性、及抗氧化性能，同时若在包衣液中加入遮光剂，能有效的起到遮光作用，大大提高了片剂的稳定性，从而延长产品的货架期。

具体实施方式

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

本实施例为每片含有50％萝卜提取物的片剂的处方和工艺：

表1 1000片含萝卜提取物的片剂的处方表

上述的片剂的制备工艺，包括以下步骤：

1、将上述表格中的萝卜提取物250克、甘露糖醇120克、山梨糖醇97.5克、羟丙基甲基纤维素25克置于多向运动混合机中进行充分混合均匀，制得预混物料。

2、将上述所得的预混物料投入干法制粒机中，进行混合、输送、挤压、破碎、18目筛网过筛，制得干颗粒。

3、将上述制得的干颗粒，加入硬脂酸镁7.5克，得到混合粉，混合粉置于多向运动混合机进行充分混合，使用旋转式压片机压片，获得所述素片。

4、将薄膜包衣粉溶解于水溶液中，制得包衣液。

5、将素片加入置高效包衣机包衣锅中，调节好进风风量、进风温度，启动包衣机素片预热后，将温度控制在30℃～55℃范围内进行包衣；最后将制得的包衣片进行包装。

实施例2

本实施例为每粒含有50％萝卜提取物的硬胶囊的处方和工艺：

表2 2000粒含萝卜提取物的胶囊剂的处方表

上述的胶囊的制备工艺，包括以下步骤：

1、将上述表中的萝卜提取物300克、硅化微晶纤维素165克、乳糖120克置于多向运动混合机中，进行充分混合均匀，制得预混物料。

2、将上述的预混物料，加入硬脂酸镁6克、滑石粉9克，得到混合粉，混合粉置于多向运动混合机中进行充分混合均匀，获得混合物使用硬胶囊自动填充机填充胶囊，获得所述的胶囊剂；最后将所制得的胶囊进行包装。

实施例3

本实施例为每粒胶囊含有75％萝卜提取物的硬胶囊的处方和工艺：

表3 2000粒含萝卜提取物的胶囊剂的处方表

上述的硬胶囊剂的制备工艺，包括以下步骤：

1、将上述表3中部分聚维酮溶解于160mL的乙醇溶液中，制成醇溶液，作为粘合剂使用，备用。

2、将上述表中的萝卜提取物300克、微晶纤维素70克、剩余的聚维酮置于流化床充分混合均匀，按一定的流速加入上述的粘合剂的醇溶液，充分沸腾混合、干燥一步制粒，并干燥所得干颗粒。

3、干颗粒加入硬脂酸镁4克、滑石粉6克得到混合粉，混合粉置于多向运动混合机中进行充分混合均匀，使用硬胶囊自动填充机填充胶囊，制得所述的胶囊；最后将胶囊进行包装。

实施例4

本实施例为每单包装含有50％萝卜提取物的颗粒剂的处方和工艺：

表4 1000袋含萝卜提取物的颗粒剂的处方表

上述的颗粒剂的制备工艺(一步制粒机)，包括以下步骤：

1、将上述表3中的蔗糖使用高速粉碎机粉碎，并过六号筛(100目)预处理，得到蔗糖粉；或使用粒径大于100目的蔗糖粉。

2、将上述表3中的羟丙基甲基纤维素部分溶解于500mL乙醇溶液中，制成醇溶液，作为粘合剂使用，备用。

3、将萝卜提取物500克、蔗糖粉348克、赤藓糖醇80克、剩下的羟丙基甲基纤维素置于流化床中充分混合，按一定的流速加入上述的粘合剂的醇溶液，充分沸腾混合、干燥一步制粒，并干燥所得干颗粒；干燥后加入橘子粉末香精1克、香兰素1克、富马酸钠10克、二氧化硅10克得到混合粉，混合粉置于多向运动混合机中进行充分混合均匀，使用颗粒分装机分装，所得萝卜提取物颗粒剂。最后将所制得的颗粒剂进行包装。

实施例5

本实施例为每片含60％萝卜提取物的片剂的处方和工艺：

表5 1000片含萝卜提取物的片剂处方表

上述的片剂的制备工艺，包括以下步骤：

1、将上述表中的部分羟丙基甲基纤维素溶解于200mL乙醇溶液中，制成醇溶液，作为粘合剂使用，备用。

2、将上述表中的萝卜提取物300克、微晶纤维素100克、赤藓糖醇70克、剩余的羟丙基甲基纤维素置于流化床充分混合均匀，按一定的流速加入上述的粘合剂的醇溶液，充分沸腾混合、干燥一步制粒，并干燥所得干颗粒。

3、干颗粒加入橘子粉末香精2.5克、硬脂酸镁2.5克得到混合粉，混合粉置于多向运动混合机中进行充分混合均匀，使用旋转式压片机压片，获得所述的素片。

4、将薄膜包衣粉溶解于水溶液中，制得包衣液。

5、将素片加入置高效包衣机包衣锅中，调节好进风风量、进风温度，启动包衣机素片预热后，将温度控制在30℃～55℃范围内进行包衣；最后将制得的包衣片进行包装。

实施例6

本实例为每片含85％萝卜提取物的片剂的处方和工艺：

表6 1000片含萝卜提取物的片剂处方表

上述的片剂的制备工艺，包括以下步骤：

1、将上述表中的部分羟丙基甲基纤维素溶解于200mL纯化水中，搅拌溶解，制成水溶液，作为粘合剂使用，备用。

2、将上述表中的萝卜提取物425克、微晶纤维素50克、剩余的羟丙基甲基纤维素置于流化床中，调节好进风风量、进风温度、蠕动泵转速，充分混合均匀，按一定的流速加入上述的粘合剂的水溶液，充分沸腾混合、一步制粒，并干燥所得干颗粒。

3、干颗粒加入硬脂酸镁7.5克、二氧化硅7.5克得到混合粉，混合粉置于多向运动混合机中进行充分混合均匀，使用旋转式压片机压片，获得所述的素片。

4、将薄膜包衣粉溶解于水溶液中，搅拌，制得包衣液。

5、将素片加入置高效包衣机包衣锅中，调节好进风风量、进风温度，启动包衣机素片预热后，将温度控制在30℃～55℃范围内进行包衣；最后将制得的包衣片进行包装。

实施例7动物实验

C57/BL6J小鼠，雄性，4～5周龄，体重18-22g，70只，分7组，每组10只，各组分别是空白对照组、模型组(MPTP)、阳性药左旋多巴(20mg/kg)组和阳性药司来吉兰组(10mg/kg)，萝卜提取物低剂量组(50mg/kg)、萝卜提取物中剂量组(150mg/kg)、萝卜提取物高剂量组(450mg/kg)。(空白对照组及模型组灌胃给予同样剂量的0.5％CMC-Na)。腹腔注射MPTP30mg/kg，30min后灌胃给药，每天一次，连续7天，第7天给药注射MPTP 2h后，进行Rotarodtest和Pole test。动物分组造模及给药详情见下表：

表7动物分组造模及给药

注：i.q.为腹腔注射给药，i.g.为灌胃给药。

(一)Rotarod test

各组小鼠在造模前接受3次转棍训练。经过训练后，小鼠在棍上的表现达到稳定水平。转棍仪为直径4cm，长约为60cm，用隔板分为5段的水平杆，保证动物彼此不受影响。转棍仪转速设定为30转/min。将小鼠置于杆上，打开开关，开始计时，最长时限设置为120秒，记录从开始转棍到小鼠从杆上掉下的时间，记为潜伏期(即第一次从杆上掉落的时间)。结果见下表：

表8 Rotarod test试验结果表

注：P*<0.05，P**<0.01，P***<0.001。

实验结果表明，与空白对照组相比，模型组小鼠在转棍上停留的时间显著减少(P<0.01)，提示其行为学出现障碍，而萝卜提取物各剂量组均可提高小鼠在转棍仪上的停留时间，且剂量上显示线性关系。阳性药左旋多巴和司来吉兰也可显著延长小鼠在转棍上停留的时间。小鼠在转棍仪上的停留时间长短比较为：空白对照组>阳性药左旋多巴组>萝卜提取物高剂量组>阳性药司来吉兰组>萝卜提取物中剂量组>萝卜提取物高剂量组>模型组。

(二)Pole test

将一直径为25cm软木球固定于一根长50cm粗1cm的木杆顶端，木杆上缠上纱布以防止打滑，然后将被测小鼠放到小球上，并观察小鼠从球上下来的表现，给出不同的评分。

评分标准如下：5分：四肢并用，一步一步协调向下爬行；4分：一步一步向下爬行但兼有后肢滑行行为；3分：爬过一半距离后向下滑行，但可抱紧杆；2分：未爬过一半距离即出现滑行行为；1分：爬过一半距离后不能抓杆，从杆上掉落；0分：未爬过一半距离即不能抓杆，从杆上掉落。每只小鼠测试2次，按照上述标准进行评分，取平均值。结果见下表：

表9 Pole test试验结果表

注：P*<0.05，P**<0.01，P***<0.001。

实验结果表明，与空白对照组相比，模型组小鼠爬杆评分明显减少，提示其行为学上出现障碍，而萝卜提取物各剂量组爬杆评分明显提高，且剂量上显示线性关系，阳性药左旋多巴和司来吉兰也可显著提高小鼠爬杆得分，其中萝卜提取物高剂量组与阳性药相当。小鼠爬杆评分比较为：空白对照组>阳性药左旋多巴组>萝卜提取物高剂量组＝阳性药司来吉兰组>萝卜提取物中剂量组>萝卜提取物低剂量组>模型组。

实验小鼠一般状态观察结果显示，实验期间小鼠无死亡，体表皮肤粉红有光泽，体重变化正常。各组小鼠精神状态比较为：空白对照组>阳性药左旋多巴组>阳性药司来吉兰组>萝卜提取物高剂量组>萝卜提取物中剂量组>萝卜提取物低剂量组>模型组。

综上所述，本发明采用经典的MPTP所致亚急性PD模型对萝卜提取物的抗PD作用进行评价，通过转棍实验、爬杆实验测试，发现萝卜提取物可以显著改善小鼠的运动障碍，且作用效果与使用剂量呈线性关系。说明萝卜提取物对MPTP所致的PD模型小鼠有显著的治疗作用，表明该组合物具有一定的抗PD活性；实验期间小鼠的一般状态观察结果显示，萝卜提取物对MPTP所致的PD模型小鼠无明显毒性；萝卜提取物作为抗PD药物的研究与开发具有广阔的应用前景。

最后所应当说明的是，如本文所使用的，术语“治疗”指任何在治疗或改善损伤、病状、病症或症状(例如，疼痛)上的成功指标，包括任何主观和客观的参数，诸如使患者更能忍受症状、损伤、病状或病症或减少症状，或好转治愈；降低症状或病症频率或持续时间；或者，在一些情况下，预防症状或病症的发作。症状的治疗或改善可以基于任何客观或主观参数，包括，例如身体检查的结果。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.用于防治帕金森综合症的药物组合物，其特征在于，包括萝卜提取物。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，含有重量百分含量为50％～85％的所述萝卜提取物。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述萝卜提取物为水提物、醇提物混合物。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述萝卜提取物从胭脂萝卜、白萝卜、长羽裂萝卜、红心萝卜、绿皮红心萝卜、大红缨萝卜、蓝花子中的一种或多种提取得到。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，还包括辅料，所述辅料包括填充剂、崩解剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、润滑剂、助流剂、防腐剂中的一种或多种。

6.根据权利要求1～5任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药品的剂型包括片剂、胶囊剂、软胶囊、口服液、颗粒剂、冲剂。

7.根据权利要求1～5任一项所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括流化床一步制粒、干法制粒，或粉末直接压片或填充胶囊。

8.根据权利要求7所述药物组合物的制备方法，其特征在于，所述流化床一步制粒为：将部分高分子粘合剂溶解于乙醇溶液中，制备成醇溶液；将萝卜提取物与填充剂、剩下的粘合剂、崩解剂置于流化床中充分混合，加入上述的粘合剂的醇溶液，充分混合一步制粒，并干燥所得干颗粒；干燥后加入润滑助流剂、甜味剂、香精得到混合粉，加入多向运动混合机中混合均匀，压片得到素片，或填充胶囊，或分装；所述干法制粒为：将萝卜提取物与填充剂、粘合剂、崩解剂、甜味剂等置于干法制粒机混合槽进行混合，并经输送、碾压、破碎所得颗粒粉末，干颗粒加入润滑助流剂、或香精得到混合粉，加入多向运动混合机中混合均匀，进行压片得到素片，或填充胶囊，或分装；所述粉末直接压片或填充胶囊为：将萝卜提取物与填充剂、粘合剂、崩解剂、甜味剂等置于多向运动混合机中进行预混合，预混合后加入润滑助流剂、或香精等，在混合机中继续进行充分混合均匀，所得混合物进行压片得到素片，或填充胶囊。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：

a)包衣液的配制：将润滑助流剂过筛后混合均匀，加入至含高分子粘合剂的薄膜包衣粉的水溶液中，持续搅拌均匀，制得透明薄膜包衣液；

b)将制得的素片加入到高效包衣锅中，调节好进风温度、进风量，素片进行预热后，将片床温度控制在30℃～55℃，加入上述的透明薄膜包衣液进行包衣，制得包衣片。

10.萝卜提取物和/或含有萝卜提取物的组合物在制备用于防治帕金森综合症的药品中的应用。