CN110433172A - 一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物治疗领域，公开了一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物及其用途。该药物的活性成分为考来替泊。本发明首次提出考来替泊用于治疗非小细胞肺癌的方法及其在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用，考来替泊应用于治疗非小细胞肺癌将是一个很有前景的老药新用途临床策略，将使更多的非小细胞肺癌患者获益。

Description

一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物及其用途

技术领域

本发明属于药物治疗领域，特别涉及一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物及其用途。

背景技术

癌症是严重危害人类健康的一大顽症，现已成为仅次于心血管病的第二大杀手。肺癌是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之首，其中非小细胞肺癌(Non-small cell lungcancer，简称NSCLC)占肺癌的80％。目前，非小细胞肺癌的主要治疗方法仍然是化疗。对于存在EGFR ^L858R突变或者EGFR19号外显子存在不同缺失突变的患者(常见亚洲、女性、非吸烟、非小细胞肺癌患者)应用吉非替尼(Gefitinib,Gef；又名易瑞沙)靶向治疗效果较好。

肿瘤化疗普遍存在副作用较大的困扰，因为其在杀死肿瘤细胞的同时也对正常细胞具有较强的杀伤作用，很多肿瘤患者无法耐受较大剂量的化疗而导致治疗无法继续而死亡。虽然靶向药物吉非替尼对部分EGFR存在突变的患者具有一定的治疗作用，在临床上也取得了显著的疗效，但使用几个疗程后，也会产生一定的耐药性和副作用，患者一般在1～2年内会发生复发或者转移，或产生新的突变而对吉非替尼产生耐药，所以，即使使用吉非替尼(酪氨酸激酶抑制剂)治疗仍然不能非常有效地提高非小细胞肺癌患者的五年总生存期。有研究表明某些中药分子可降低抗癌药物在使用过程中产生的耐药性和副作用，从而提高其治疗效用。

考来替泊(Colestipol hydrochloride，简称CTP)，用于II型高脂血症治疗的降胆固醇药物。以烷基苯磺酸钠及四乙烯戊胺为原料制得，为阴离子交换树脂，阻断胆酸的肠肝循环，与肠内胆酸一起排出体外而使血胆固醇下降；与考来烯胺相似，是一种吸附并排除胆酸的降胆固醇药，可使血胆固醇下降20％左右。因无异味，而为病人接受。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物。

本发明的另一目的在于提供一种上述药物的用途。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物，该药物的活性成分为考来替泊。

所述药物还含有药学上可接受的载体。

所述药物由常规制备工艺制备得到。

上述的药物在制备治疗非小细胞肺癌药物中的用途。

所述药物可用于包括人在内的哺乳动物的药物治疗。

本发明与现有技术相比具有如下突出的优点及有益效果：

本发明人分别对三种不同类型的非小细胞肺癌细胞株NCI-H1975(EGFR ^{L858R /T790M})，HCC827(EGFR ^E746-A750del)以及A549(EGFR ^WT)为模型进行体外MTT筛选，发现其具有很强的抗增殖活性并呈良好的时效与量效关系，具有良好的临床用药再次开发前景；同时，等效应剂量评价表明，复合药物对正常肝细胞L-O2的毒性尚未增加。

附图说明

图1为考来替泊与吉非替尼共作用对EGFR蛋白质表达降解比较图。

图2为考来替泊与吉非替尼单用及联用对H1975耐药细胞移植瘤抑制情况图。

图3为考来替泊与吉非替尼单用及联用对H1975细胞移植瘤裸鼠体重改变图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1NCI-H1975(EGFR ^L858R/T790M)，HCC827(EGFR ^E746-A750del)以及A549(EGFR ^WT)细胞筛选优化吉非替尼Gef和考来替泊CTP组合物取对数生长期的细胞，分别接种3×10⁴个细胞/孔于96孔板上，待生长6小时后，离心弃上清，然后按以下分组给药：肿瘤细胞设不加药组和加药组，其中加药组设Gef和CTP单药组、Gef和CTP联合用药不同摩尔比例组，每组设4-6个复孔，培养24小时，弃上清，加入100μl含0.5mg/ml的MTT(四氮唑盐)无血清培养液培养4小时，加入100μl DMSO(二甲亚砜)，放置于微型振荡仪上振荡10min，再置于酶标仪上570nm处检测OD值。结果按照以下抑制率公式计算每种情况下肿瘤细胞生长的抑制率，具体结果见表1。

抑制率＝(1-加药组OD值/对照组OD值)

表1为CTP作用三种不同肺癌细胞72小时后的IC₅₀抑制情况。我们可以发现随着浓度的增加，其抑制率呈显著浓度依赖性，其中发现考来替泊对吉非替尼耐药的细胞H1975同样敏感，进一步提示CTP药物对三组非小细胞肺癌细胞株均具有显著的治疗效应。

表1 CTP作用72小时IC₅₀(μM)

实施例2EGFR的表达及Western blot检测

免疫Western blot抗体，购买于Abcam公司的anti-EGFR(ab52894)(Abcam)。三种细胞(NCI-H1975(EGFR ^L858R/T790M)，HCC827(EGFR^E746-A750del)以及A549(EGFR ^WT)细胞)分别应用吉非替尼(Gef)或考来替泊(CTP)处理48小时后，收集5×10⁶细胞应用200μl的RIPA(50mMTris pH 8.0，150mM NaCl，0.1％SDS，0.5％sodium deoxycholate，1％NP-40)添加蛋白酶抑制剂冰上裂解30分钟后，12000rpm离心10分钟，收集上清，BCA法测定蛋白浓度，加入2×SDS loading buffer于100℃煮10分钟。总蛋白(100μg)上样，根据蛋白的分子量大小应用8-15％SDS-PAGE凝胶电泳，然后转移到PVDF膜上(GE healthcare)，分别应用相应的抗体孵育，化学发光酶底物HRP Substrate(Millipore公司)，应用LAS-4000成像系统成像(富士)。Western blot实验结果如图1所示，我们在蛋白水平检测了EGFR蛋白的表达水平。对三种不同的非小细胞肺癌细胞，CTP药物比Gef组都可以更好诱导EGFR降解。

实施例3 CTP药物抑制非小细胞肺癌荷瘤小鼠的肿瘤增长

为了检测CTP对活体非小细胞肺癌的疗效，我们使用NCI-H1975细胞在裸鼠中建立了非小细胞肺癌小鼠肿瘤模型。包括对照组(Control)(生理盐水)；CTP(250mg/kg/d，灌胃)和Gef(25mg/kg/d，灌胃)组及与单用剂量等同的Gef/CTP合用组，各组10只，裸鼠皮下接种肿瘤后，当皮下肿瘤体积大于100mm³时将小鼠随机分成四组，第6天后开始灌胃给药，每天灌胃给药一次，隔天称量体重变化和肿瘤体积，用生理盐水稀释配制悬液。每天用游标卡尺测量肿瘤的长径和短径，并按长×宽×宽/2计算其肿瘤皮下体积，实际肿瘤体积的变化曲线如图2(##，p<0.01)。各组的肿瘤起始体积相接近。12天后，对照组的肿瘤增长率明显比其它三组快，到第15天(灌胃给药9天)，Gef组和CTP组的肿瘤体积比对照组小，并且CTP组的下降特别显著(图2，其中##，p<0.01)；体重变化跟踪显示，CTP药物组裸鼠体重降低较小(图3，其中##，p<0.01)，提示CTP药物组合具有非常好的治疗效果和低毒副作用。

实施例4

制备工艺：

将药物和辅料分别过80目筛，将考来替泊200克与48克微晶纤维素和12克羧甲基淀粉钠充分混合，10％淀粉浆制软材，18目筛制粒，60℃下干燥，得颗粒1。将考来替泊175克与24克微晶纤维素、15克淀粉和8克羧甲基淀粉钠充分混合，10％淀粉浆制软材，18目筛制粒，60℃下干燥，得颗粒2。按等量递增原则，将颗粒1和颗粒2充分混合，16目筛整粒，加入硬脂酸镁，混匀，压片，片重500mg。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (3)

1.一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物，其特征在于：该药物的活性成分为考来替泊。

2.根据权利要求1所述的一种具有治疗非小细胞肺癌功效的药物，其特征在于：所述药物还含有药学上可接受的载体。

3.根据权利要求1所述的药物在制备治疗非小细胞肺癌药物中的用途。