CN110373352B - 高效苯胺降解菌及其在含苯胺废水处理中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种高效苯胺降解菌，其分类学命名为代尔夫特菌属(Delftia sp.)AD1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M 2019285。本发明同时公开了该高效苯胺降解菌在含苯胺废水处理中的应用。本发明为化工污泥等含苯胺废水的处理提供了一种高去除率、低成本且无二次污染的高效苯胺降解菌，其在废水处理中的应用具有较强的实用价值。

Description

高效苯胺降解菌及其在含苯胺废水处理中的应用
技术领域
本发明涉及含苯胺废水处理，特别是指一株高效苯胺降解菌及其在含苯胺废水处理中的应用。
背景技术
苯胺，又名氨基苯，属于芳香胺类化合物，广泛应用于印染等化工领域。苯胺是一种能够“致癌、致畸、致突变”的三致物质，对人类和其他生物的健康有很大影响，可经皮肤吸收或经呼吸道吸收，当进入人体血液时，它可以将血红蛋白转化成甲基血红蛋白，阻碍氧气摄取，同时也会对环境造成严重污染。因此，没有适当处理的苯胺工业废水可能对人类健康和生态系统的平衡构成重大威胁。同时由于苯胺类化合物中含有芳香环的原因导致该分子的生物降解性差，被美国EPA和中国环境保护部门列入“优先污染物的黑名单”。因此，水环境中的苯胺降解得到了越来越多的关注。
目前处理苯胺废水的方法主要有物理法、化学法和生物法。
物理法包括吸附法、萃取法和膜分离法，是利用吸附、萃取和渗透等物理过程将苯胺从废水中分离出来的方法，不会改变苯胺的结构和性质。吸附法是一种利用多孔吸附材料处理苯胺废水的方法，吸附法虽然操作简单，但是吸附法存在吸附容量，当吸附苯胺的量达到平衡时，就要更换吸附剂，需要一定的成本。萃取法是利用与水不混溶但能够溶解苯胺的萃取剂，以便与含苯胺废水进行充分混合，利用苯胺在水和溶剂中的溶解度不同来分离和提取苯胺。萃取法的工艺设备相对简单，但是在萃取过程中使用的有机溶剂会对环境造成二次污染。膜分离法是使用特殊的半透膜将苯胺渗透以达到分离的目的，该方法对苯胺废水有很好的处理效果，但由于需要定期清洗，成本高且产生的浓缩废水处理难度较大。
化学法包括光催化氧化法、电催化氧化法、超临界氧化法和超声波法等，都是利用强氧化剂或者某些途径将苯胺氧化，生成小分子物质或者无机物达到对苯胺的去除。光催化氧化法是利用光催化剂如二氧化钛通过光催化氧化苯胺生成二氧化碳，水和一些简单无毒的小分子无机物。光催化氧化只需要光，催化剂和空气，其加工成本相对较低。电催化氧化分为直接氧化和间接氧化，直接氧化是直接通过阳极反应降解苯胺，间接氧化则是通过阳极反应产生羟基自由基和臭氧，并利用阳极反应产物的高氧化活性使苯胺部分矿化，生成小分子有机或无机物。电催化氧化法具有较强的氧化能力，苯胺降解的更加彻底。超临界氧化法是以水为介质，在超临界的条件(T>374℃，P>22.1MPa)下将苯胺完全氧化，由于在超临界条件下气-液界面没有传质阻力，所以超临界氧化法具有反应速度快，反应时间短的特点，但其不足之处是反应需要在高温高压条件下进行，对于设备的要求很高，造价高。超声波法降解水中的苯胺是一种新型深度氧化技术，利用声空化能量加速和控制化学反应提高反应速率，具有降解效果高、反应时间短等优点，但是其能耗相对较大，经济性不够理想。
微生物法主要是利用微生物的生长代谢作用来降解废水中的苯胺。与物理、化学法相比，生物法成本更低、操作相对简单并且对环境不会造成二次污染。目前，国内外的学者对用微生物方法降解苯胺类化合物展开了大量研究，已筛选得到多株高效降解菌，但依然存在研究开发新菌种的必要，为丰富微生物菌种资源，探究降解机制提供理论基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一株苯胺降解效率高的高效苯胺降解菌及其在含苯胺废水处理中的应用。
为实现上述目的，本发明首先提供了一株高效苯胺降解菌，其命名为：代尔夫特菌属(Delftia sp.)AD1(以下简称高效苯胺降解菌AD1或AD1)，保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号为：CCTCC NO：M2019285。
上述高效苯胺降解菌AD1是从自控SBR反应器稳定运行期活性污泥中分离筛选得到的，其颜色为白色，不透明，易挑起，边缘低凹。在空气中的固体培养基表面上生长良好；最适生长温度约为33℃，在18℃以下菌株生长受到抑制，超过38℃时不生长。
上述高效苯胺降解菌AD1的16SrRNA基因序列如SEQ ID NO:1所示。基因序列长度为1441bp，通过程序进行同源性比较，表明其与代尔夫特菌属(Delftia sp.)的亲缘关系最为接近，具有99％的相似性。
优选地，该高效苯胺降解菌的苯胺耐受浓度在1200mg/L以下，耐受盐度在10000mg/L以下，耐受pH范围为5～9(最适宜pH为7)。上述条件下，高效苯胺降解菌AD1能够较好生长并降解苯胺。
优选地，所述高效苯胺降解菌的培养温度为28～33℃，培养时间为72小时。
本发明同时提供了上述高效苯胺降解菌AD1在含苯胺废水处理中的应用。
优选地，上述高效苯胺降解菌AD1应用于SBR反应器对含苯胺废水进行处理，即将所述高效苯胺降解菌投加至SBR反应器中，并采用SBR法(序批式活性污泥法)对苯胺废水进行处理。
优选地，所述SBR反应器的启动分为至少三个启动阶段，每个启动阶段包括多个周期，每个周期由进水、曝气、沉淀、排水四个阶段构成；在第一个启动阶段的第一个周期，进水后投加高效苯胺降解菌AD1(OD600优选为0.5～0.6)，每1L水中投加量按高效苯胺降解菌AD1干重计为0.15～0.3g；每个周期的曝气量为300～500mL/min，使系统中的溶解氧浓度控制在2.5～4mg/L；在进水中添加苯胺和外加碳源(如柠檬酸钠、蔗糖、乙酸钠、腐殖酸等以保证高效苯胺降解菌AD1生长所需)，同时对各启动阶段的进水中的苯胺浓度和外加碳源浓度进行控制，使苯胺浓度逐级递增至待处理废水中苯胺实际浓度，并使外加碳源的加入量逐级递减直至零，此时高效苯胺降解菌AD1完全适应含有苯胺的生长环境，实现SBR反应器的启动。
优选地，在所述启动阶段之前投加污水厂活性污泥进SBR反应器后先闷曝12h以上，静置分层后排出40％～60％上清液，以除去活性污泥原来所携带的有机物质。
优选地，启动期间SBR反应器每天运行3个周期，并且包括3个启动阶段，依次记为：第Ⅰ阶段、第Ⅱ阶段和第Ⅲ阶段；第1～2天即前6个周期为第Ⅰ阶段，苯胺浓度200mg/L，添加400mg/L的葡萄糖作为外加碳源；第3～4天即第7～12周期为第Ⅱ阶段，苯胺浓度400mg/L，添加200mg/L的葡萄糖作为外加碳源；第5～15天为第Ⅲ阶段，苯胺浓度600mg/L，不添加外加碳源。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1)该高效苯胺降解菌AD1能够在含较高浓度苯胺环境中利用苯胺作为唯一碳源进行生长繁殖，耐受苯胺浓度范围广，在苯胺浓度1200mg/L的废水中仍然有一定的降解效率；
2)耐受盐度和pH范围广，在NaCl浓度10000mg/L时菌株仍能进行生长，在NaCl浓度为2000mg/L时对苯胺的降解率达到92％；在pH＝5～9范围内能进行生长，在pH＝6～8范围内可获得最佳苯胺降解效率。
3)苯胺降解效率高，将高效苯胺降解菌AD1投加至苯胺浓度分别为400mg/L、600mg/L的培养基中，运行72h后苯胺降解效率可分别达到100％、71％。在结合SBR法后，降解效率可进一步提高，苯胺浓度600mg/L的72h降解效率也能达到100％。
4)本发明为化工污泥等含苯胺废水的处理提供了一种高去除率、低成本且无二次污染的高效苯胺降解菌，具有较强的实用价值。
附图说明
图1是实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1的扫描电镜照片；
图2是实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1的16SrRNA系统发育树；
图3是实施例2测定的高效苯胺降解菌AD1对不同浓度苯胺的降解效率曲线；
图4是实施例3测定的高效苯胺降解菌AD1在不同pH下的苯胺降解效率曲线；
图5是实施例4测定的高效苯胺降解菌AD1的生长变化曲线；
图6是实施例5测定的高效苯胺降解菌AD1在不同盐度下的苯胺浓度变化曲线；
图7是实施例6测定的高效苯胺降解菌AD1对苯胺、苯酚、硝基苯的降解效率曲线；
图8是实施例7测定的高效苯胺降解菌AD1在SBR强化系统中苯胺浓度变化曲线；
图9是实施例7测定的高效苯胺降解菌AD1在SBR强化系统中COD浓度变化曲线；
图10是实施例7测定的高效苯胺降解菌AD1在SBR强化系统中苯胺、NH4 +-N、NO3 --N和NO2 --N浓度变化曲线。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1：菌株的分离、筛选和鉴定
本实施例所提供的高效苯胺降解菌AD1是从实验室自控SBR反应器稳定运行期活性污泥中分离筛选得到的，该自控SBR反应器有效容积1.5L，运行周期8h，每天运行三个周期，每个周期分为5个阶段：进水、曝气、沉淀、排水、静置。反应器进水由人工配制，成分为添加200mg/L苯胺作为碳源的无机盐培养基，具体的分离筛选方法为：
1)菌株的分离、纯化
将10mL从含有200mg/L苯胺的自控SBR反应器中取得的活性污泥装入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，放入数粒玻璃珠，在摇床中振荡24h，将絮状活性污泥充分打碎。从中取10mL加入90mL苯胺浓度为200mg/L的无机盐培养基中，在28℃，180r/min的摇床中振荡培养72h；再从中取10mL加入90mL苯胺浓度为400mg/L的无机盐培养基中，在28℃，180r/min的摇床中振荡培养72h。如此循环操作，无机盐培养基中的苯胺浓度梯度依次为200mg/L、400mg/L、600mg/L、800mg/L、1000mg/L。取最后一次富集培养的菌液梯度稀释至10-4～10-7，取这4个梯度分别涂布于含600mg/L苯胺的分离培养基平板上，在28℃的生化培养箱内培养72h。发现稀释梯度为10-6的分离培养基平板上的菌落生长情况是最好的，从中挑取合适的单菌落在含600mg/L苯胺的无机盐培养基平板上进行平板划线纯化，共纯化5代得到14株苯胺降解菌，将纯化得到的菌株用传代培养基做斜面保存，所有操作均在无菌条件下进行。
2)菌株的筛选
将步骤1)已纯化得到的14株菌接种于苯胺浓度为600mg/L的无机盐培养基中，于28℃、180r/min的摇床中振荡培养72h。在72h时进行苯胺降解率和细菌生长密度OD600的测定，发现高效苯胺降解菌AD1的苯胺降解效率最高，为85％。高效苯胺降解菌AD1在72h时的OD600为0.643，经过72h生长到达对数生长期，生长情况较好，故筛选得到本发明所述的高效苯胺降解菌。
在菌株的分离和筛选过程中所用到的培养基有：
无机盐培养基成分为：NaH2PO4，0.26g/L；Na2HPO4，1.0079g/L；(NH4)2SO4，2.0g/L；MgSO4，0.2046g/L；KCl，0.2g/L；Fe(NO3)3，0.0134g/L；pH，7.0。
分离培养基为：每1000mL无机盐培养基中添加葡萄糖0.5g，蛋白胨0.3g，酵母膏0.3g。
传代培养基为：无机盐培养基在121℃条件下灭菌20min，在超净工作台中冷却后加入600mg/L苯胺。
上述培养基如制成琼脂培养基，则需添加琼脂1.8％(w/v)，使用前均要在121℃下灭菌20min。
3)菌种的生理生化特征
筛选得到的高效苯胺降解菌AD1属于代尔夫特菌属(Delftiasp.)，其扫描电镜照片见图1，其颜色为白色，不透明，易挑起，边缘低凹。参照《伯杰细菌鉴定手册》第八版和《常见细菌系统鉴定手册》对高效苯胺降解菌AD1进行生理生化鉴定，鉴定结果如下表所示。
表1高效苯胺降解菌AD1的生理生化鉴定
Figure GDA0004133361850000071
4)菌株的16SrRNA序列测定及发育分析
将筛选得到的高效苯胺降解菌AD1接种至苯胺浓度为600mg/L的无机盐培养基中振荡培养72h，取适量菌液进行基因组总DNA的抽取。
PCR所用引物为：27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'和1492R：
5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'；PCR反应体系(20μL)：2.0μL 10×Ex Taq buffer，0.2μL Ex Taq(5U/μL)，1.6μL dNTPs(2.5mmol/L)，2种引物各1μL，0.5μLDNA模板，无菌去离子水13.7μL；PCR扩增程序：95℃预变性5min；95℃变性30s，56℃复性30s，72℃延伸90s，共25个循环；最后72℃修复和延伸10min。PCR扩增产物在1％的琼脂糖凝胶，120V电压条件下电泳30min进行检测，扩增出来的16SrRNA序列由上海美吉生物医药科技有限公司进行测定。
测定结果显示，该高效苯胺降解菌AD1的16SrRNA序列长度为1441bp，与Delftiasp.的亲缘关系最接近，具有99％以上的相似性，使用MEGA5和ClustalX2程序对该菌株进行了系统发育进化分析，并绘制系统发育树，如图2所示，可以看出参考菌种为tsuruhatensis。
该高效苯胺降解菌AD1已于2019年4月22日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉大学保藏中心)，地址：中国武汉武汉大学，分类命名为代尔夫特菌属(Delftia sp.)AD1，保藏编号为：CCTCCNO：M 2019285。
实施例2：不同苯胺浓度下的降解效果实验
本实施例对实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1在不同苯胺浓度下的苯胺降解效果进行实验，具体步骤为：将AD1种子液以5％(V/V)接种量接种到pH 7.0，苯胺浓度分别为400、600、800、1000、1200mg/L的无机盐培养基中，在温度28℃、转速180r/min的摇床中振荡培养72h，测定72h时的OD600和剩余苯胺浓度。
测定结果如图3所示，从图中可以看出，在培养液苯胺浓度从400mg/L增加到1200mg/L的过程中，苯胺降解率和OD600值都呈逐渐减少的趋势。苯胺浓度为400mg/L时，72h的苯胺降解率为100％，OD600值为0.552；苯胺浓度为600mg/L时，72h的苯胺降解率为71％，OD600值为0.526；苯胺浓度为1200mg/L时，72h的苯胺降解率只有21％，OD600值为0.326。因为苯胺对微生物具有毒害作用，随着苯胺浓度的增大，其毒性作用也明显增强，对菌体生长的抑制作用也明显增强。
实施例3：不同pH值下的降解效果实验
本实施例对实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1在不同pH值下的苯胺降解效果进行实验，具体步骤为：将培养至对数生长期的AD1种子液以5％(V/V)接种量接种到pH值分别为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0，苯胺浓度为600mg/L的无机盐培养基中，在温度28℃、转速180r/min的摇床中振荡培养72h，测定72h时菌株的生长情况OD600和剩余苯胺浓度。
测定结果如图4所示，从图中可以看出，pH为7.0时，菌株AD1生长最好，此时的OD600值是0.806；pH为7.0时菌株对苯胺的降解效果也是最好的，苯胺降解率为99.8％。菌株AD1也能在偏酸性或偏碱性的环境中生长并降解苯胺，pH小于6.0或大于8.0时，OD600和苯胺降解率都大幅降低。整个过程中菌株AD1的生长趋势和降解苯胺的趋势是一致的。
实施例4：测定高效苯胺降解菌AD1的生长曲线
将实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1用苯胺浓度为600mg/L的无机盐培养液培养到对数生长期作为种子液，种子液的OD600值为0.615。将种子液以5％(V/V)接种量接种到苯胺浓度为600mg/L的无机盐培养基中培养，每隔2h取样测其OD600，高效苯胺降解菌AD1的生长曲线如图5所示。从图中可以看出，高效苯胺降解菌AD1的生长曲线延迟期较短，只有4h左右，可能是因为接种前后的培养条件相似且高效苯胺降解菌AD1的活性较强，接入后能在较短时间内适应新的环境。菌株的对数生长期约为8～36h，之后进入稳定期和衰亡期。
实施例5：不同盐度下的驯化实验
本实施例对实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1进行不同盐度的驯化实验，具体步骤为：从培养至对数生长期的AD1种子液中取10mL加入90mL苯胺浓度为600mg/L，NaCl浓度为200mg/L的无机盐培养基中，在28℃，180r/min的摇床中振荡培养72h，再从中取10mL加入90mL苯胺浓度为600mg/L，NaCl浓度为500mg/L的无机盐培养基中，在28℃，180r/min的摇床中振荡培养72h。如此循环操作，NaCl浓度梯度依次是200mg/L、500mg/L、1000mg/L、2000mg/L、5000mg/L、8000mg/L、10000mg/L，取最后一次驯化的AD1涂布在NaCl浓度为5000mg/L的无机盐培养基上，倒置在恒温培养箱中培养72h。
将已驯化好的耐盐AD1按5％(V/V)接种量接种于苯胺浓度为600mg/L，NaCl浓度分别为200mg/L、500mg/L、1000mg/L、2000mg/L、5000mg/L、8000mg/L、10000mg/L的无机盐培养基中，待培养至72h时测定OD600值以及剩余苯胺浓度，测定结果如图6所示，从图中可以看出，随着NaCl浓度逐渐提高，高效苯胺降解菌AD1逐渐适应高盐度环境，当NaCl浓度为2000mg/L时，菌株AD1生长最好，此时的OD600值是0.606；NaCl浓度为2000mg/L时菌株对苯胺的降解效果也是最好的，苯胺降解率为92％。但当NaCl浓度超过2000mg/L时，菌株AD1的生长逐渐受到抑制，对苯胺的降解效率也逐渐降低，当NaCl浓度达到10000mg/L时，高效苯胺降解菌依然有一定的生长，但苯胺降解效率大幅度降低，整个过程中菌株AD1的生长趋势和降解苯胺的趋势是一致的。
实施例6：多种混合有机污染物下的降解效果实验
本实施例对实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1进行多种混合有机污染物的降解效果进行实验，具体步骤为：将培养至对数生长期的AD1种子液以5％(V/V)接种量接种到苯胺浓度为200mg/L、苯酚浓度为202mg/L、硝基苯浓度为264.3mg/L的无机盐培养基中，满足三种有机物的含碳量为1：1：1，同时总的含碳量与600mg/L苯胺的含碳量相等，保证高效苯胺降解菌AD1能够获得足够的碳源。将该培养基放置在温度28℃、转速180r/min的摇床中振荡培养12h，24h，36h，48h，60h，72h，84h，96h，108h以此每隔12h测定剩余苯胺，苯酚，硝基苯的浓度。
测定结果如图7所示，从图中可以看出，经过96h的培养，高效苯胺降解菌AD1对苯胺的降解效率达到了100％。后经108h的培养，高效苯胺降解菌AD1对苯酚、硝基苯的降解率分别维持在73％、60％左右。这在一定程度上说明该高效苯胺降解菌AD1除了能够利用苯胺作为碳源，同样可以利用一定浓度的苯酚与硝基苯。
实施例7：应用于SBR强化系统
本实施例对将实施例1筛选的高效苯胺降解菌AD1在SBR强化系统(本发明中特指投加了高效苯胺降解菌AD1的SBR反应器)中的降解性能进行研究：
1)SBR强化系统的快速启动：SBR反应器有效容积为1L，采用人工配制的苯胺废水。投加污水厂活性污泥进反应器后先闷曝12h，静置1.5h后排出50％上清液，以除去活性污泥原来所携带的有机物质。反应器每天运行3个周期，每个周期由进水、曝气、沉淀、排水4个阶段构成。开始进水至有效容积后投加干重约为0.2g的高效苯胺降解菌AD1，曝气量为400mL/min左右，使系统中的溶解氧浓度控制在2.5～4mg/L。为使活性污泥快速适应含有苯胺的生长环境，分为3个启动阶段进水。1～2d即前6个周期为第Ⅰ阶段，苯胺浓度200mg/L，添加400mg/L的葡萄糖，总COD为858mg/L；3～4d即第7～12周期为第Ⅱ阶段，苯胺浓度400mg/L，添加200mg/L的葡萄糖，总COD为1164mg/L；5～15d为第Ⅲ阶段，苯胺浓度600mg/L，COD为1435mg/L。经过15d的运行，SBR强化系统对苯胺的降解率达到100％，出水各项指标趋于稳定，即SBR强化系统快速启动成功。
2)SBR强化系统中苯胺的去除效果：第1d和第2d进水苯胺浓度为200mg/L，第2d强化系统出水苯胺浓度下降至45.3mg/L，是高效苯胺降解菌AD1在发挥作用，利用并且降解了苯胺。第3d和第4d进水苯胺浓度上升为400mg/L，出水苯胺的变化规律与第1～2d相同。从第5d开始，进水苯胺浓度为600mg/L，第6d到第8d，SBR强化系统出水苯胺浓度急剧下降，第8d时苯胺去除率达到100％，之后每天苯胺去除率都为100％。从图8可以看出强化系统对含有苯胺的环境迅速适应，并完全具备降解能力，高效苯胺降解菌AD1在其中发挥着显著作用。
3)SBR强化系统中COD的去除效果：由图9可知，COD的变化规律与苯胺的变化相一致，SBR强化系统能够有效去除COD。在前4d，SBR强化系统中COD的下降包括对葡萄糖和苯胺的利用，从第5d开始，强化系统开始完全利用苯胺，体系中无其他碳源。强化系统中的COD浓度在第6d到第8d大幅下降，从第8d开始系统中的苯胺被彻底降解时，出水COD浓度为83.8mg/L，COD去除率达到94.16％。
4)SBR强化系统中氮在苯胺降解过程中的转化：氮元素在SBR强化系统中的存在形式主要有苯胺、NH4 +-N、NO3 --N和NO2 --N 4种，在15d的启动过程中随着苯胺的降解氮元素的转化如图10所示。在进水的3个阶段，进水中的苯胺浓度和COD浓度在发生变化，NH4 +-N、NO3 --N和NO2 --N的浓度保持不变，进水NH4 +-N 371.7mg/L，NO3 --N 1.13mg/L，NO2 --N 1.58mg/L。随着苯胺被降解，会释NH4 +-N，如图10中，1～14d系统中的NH4 +-N浓度始终低于进水值。分析可能原因如下：①NH4 +-N可作为微生物细胞生长繁殖所需的氮源，被系统中的微生物利用转化为自身有机质；②NO3 --N和NO2 --N浓度变化并不明显，但是系统中可能存在硝化细菌和好氧反硝化菌发生反硝化作用脱氮；③第1～7d，SBR强化系统中的pH值在6.8～7.2之间，第8～15d，系统中的pH值上升为7.6～7.7之间，会有极少量的游离氨逸出系统。
序列表
<110> 武汉理工大学
<120> 高效苯胺降解菌及其在含苯胺废水处理中的应用
<130> none
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1441
<212> DNA
<213> 代尔夫特菌(Delftia sp.)
<400> 1
gggcatggcg catgccttac catgcagtcg aacggtaaca ggtcttcgga cgctgacgag 60
tggcgaacgg gtgagtaata catcggaacg tgcccagtcg tgggggataa ctactcgaaa 120
gagtagctaa taccgcatac gatctgagga tgaaagcggg ggaccttcgg gcctcgcgcg 180
attggagcgg ccgatggcag attaggtagt tggtgggata aaagcttacc aagccgacga 240
tctgtagctg gtctgagagg acgaccagcc acactgggac tgagacacgg cccagactcc 300
tacgggaggc agcagtgggg aattttggac aatgggcgaa agcctgatcc agcaatgccg 360
cgtgcaggat gaaggccttc gggttgtaaa ctgcttttgt acggaacgaa aaagctcctt 420
ctaatacagg gggcccatga cggtaccgta agaataagca ccggctaact acgtgccagc 480
agccgcggta atacgtaggg tgcgagcgtt aatcggaatt actgggcgta aagcgtgcgc 540
aggcggttat gtaagacaga tgtgaaatcc ccgggctcaa cctgggaact gcatttgtga 600
ctgcatggct agagtacggt agagggggat ggaattccgc gtgtagcagt gaaatgcgta 660
gatatgcgga ggaacaccga tggcgaaggc aatcccctgg acctgtactg acgctcatgc 720
acgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta gtccacgccc taaacgatgt 780
caactggttg ttgggaatta gttttctcag taacgaagct aacgcgtgaa gttgaccgcc 840
tggggagtac ggccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cggggacccg cacaagcggt 900
ggatgatgtg gtttaattcg atgcaacgcg aaaaacctta cccacctttg acatggcagg 960
aagtttccag agatggattc gtgctcgaaa gagaacctgc acacaggtgc tgcatggctg 1020
tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccttgtcat 1080
tagttgctac attcagttga gcactctaat gagactgccg gtgacaaacc ggaggaaggt 1140
ggggatgacg tcaagtcctc atggccctta taggtggggc tacacacgtc atacaatggc 1200
tggtacagag ggttgccaac ccgcgagggg gagctaatcc cataaaacca gtcgtagtcc 1260
ggatcgcagt ctgcaactcg actgcgtgaa gtcggaatcg ctagtaatcg cggatcagca 1320
tgccgcggtg aatacgttcc cgggtcttgt acacaccgcc cgtcacacca tgggagcggg 1380
tctcgccaga agtaggtagc ctaaccgcaa ggagggcgct accacggcag ggtccgaagg 1440
g 1441

Claims (8)

1.一株高效苯胺降解菌，其特征在于：命名为代尔夫特菌属(Delftiasp.)AD1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO：M2019285；该高效苯胺降解菌的耐受盐度达到10000mg/L。
2.根据权利要求1所述的高效苯胺降解菌，其特征在于：该高效苯胺降解菌的16SrRNA基因序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1或2所述的高效苯胺降解菌，该高效苯胺降解菌的苯胺耐受浓度在1200mg/L以下，耐受pH范围为5～9。
4.如权利要求1或2所述的高效苯胺降解菌在含苯胺废水处理中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：将所述高效苯胺降解菌AD1应用于SBR反应器对含苯胺废水进行处理。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述SBR反应器的启动分为至少三个启动阶段，每个启动阶段包括多个周期，每个周期由进水、曝气、沉淀、排水四个阶段构成；在第一个启动阶段的第一个周期，进水后投加高效苯胺降解菌AD1，每1L水中投加量按高效苯胺降解菌AD1干重计为0.15～0.3g；每个周期的曝气量为300～500mL/min，使系统中的溶解氧浓度控制在2.5～4mg/L；在进水中添加苯胺和外加碳源，同时对各启动阶段的进水中的苯胺浓度和外加碳源进行控制，使苯胺浓度逐级递增至待处理废水中苯胺实际浓度，并使外加碳源的加入量逐级递减直至零，此时高效苯胺降解菌AD1完全适应含有苯胺的生长环境，实现SBR反应器的启动。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：在所述启动阶段之前投加污水厂活性污泥进SBR反应器后先闷曝12h以上，静置分层后排出40％～60％上清液，以除去活性污泥原来所携带的有机物质。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：启动期间SBR反应器每天运行3个周期，并且包括3个启动阶段，依次记为：第Ⅰ阶段、第Ⅱ阶段和第Ⅲ阶段；第1～2天即前6个周期为第Ⅰ阶段，苯胺浓度200mg/L，添加400mg/L的葡萄糖作为外加碳源；第3～4天即第7～12周期为第Ⅱ阶段，苯胺浓度400mg/L，添加200mg/L的葡萄糖作为外加碳源；第5～15天为第Ⅲ阶段，苯胺浓度600mg/L，不添加外加碳源。
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