CN110352062A - 免疫调节性大环内酯类的稳定制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及液体组合物,其包含至少一种免疫调节性大环内酯化合物和基本上无细胞的血液溶血物。本发明进一步涉及用于制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液的方法,其包括a)制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液,b)将预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液中,且,由此c)制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液。此外,本发明涉及试剂盒、用途、设备、方法和与其相关的免疫调节性大环内酯化合物校准溶液。
Description
本发明涉及液体组合物,其包含至少一种免疫调节性大环内酯化合物和基本上无细胞的血液溶血物。本发明进一步涉及用于制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液的方法,其包括a)制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液,b)将预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液中,且,由此c)制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液。此外,本发明涉及试剂盒、用途、设备、方法和与其相关的免疫调节性大环内酯化合物校准溶液。
依维莫司(Eve)、西罗莫司(Sir)和他克莫司(Tac)是大环内酯化合物,其在医药中用作器官移植后的免疫抑制药物(ISD)。这些药物具有狭窄的治疗范围,其中较低水平与治疗不足相关并最终导致器官的排斥,并且另一方面,其中较高水平与对某些器官如肝脏和肾脏的毒性相关。此外,药代动力学和药效动力学参数的患者内和患者间可变性使ISD的平衡剂量复杂。因此,这些药物的治疗药物监测(TDM)已变为通过基于体内浓度控制疗法而不是通过单独的剂量来有效治疗移植患者的必不可少的辅助手段。由于依维莫司、西罗莫司和他克莫司与血流中的红细胞高度结合,推荐的定量基质是全血。
为了测定全血中的Eve、Sir和Tac,广泛范围的TDM测试是商业可得的,通常作为自动化分析仪的免疫测定,而且也作为LC-MS/MS测试。在自动化体外诊断(IVD)平台上运行的测试的一个重要方面在于,在LC-MS/MS情况下的所有所需的试剂,诸如免疫试剂、对照、校准物和内部标准品,理想地作为稳定和即用的溶液提供。这些溶液可以放置在仪器的板上更长的时间段,其提供不需要用户交互的工作流程。然而,当涉及化学不稳定的试剂时,使用作为冻干物的试剂是必要的,但这通过需要手动处理步骤用于重构而妨碍工作流程。手动处理步骤生成额外成本,并且还提供误差的来源。此外,重构的试剂通常显示短保质期并且必须由新鲜制备的溶液代替。
用于基于免疫化学的IVD平台的测定试剂的典型溶剂是水。溶解于基于水的溶剂(即缓冲液)中的试剂确保与测定中涉及的生物分子(诸如抗体或其他蛋白)完全相容,确保其完整的三维结构。另一方面,有机溶剂可以根据其量引起生物分子的部分或全部解折叠和失活,因此干扰免疫测定。用于IVD的LC-MS/MS方法中的一些还需要用于预分析的基于水的溶液和试剂(例如,如EP 2 003 455 A1中所教导的具有富集工作流程的MS方法的内部标准品)。在LC-MS/MS预分析中,在其中分析物的释放和/或基质组分的除去是必需的情况下,用释放试剂处理样品(血清、血浆或全血)。
然而,与有机溶剂(例如甲醇、乙腈)中的溶液相比,Eve、Sir和Tac的水性制剂在实验室冰箱中(2-8℃)和分析仪的板上(4-12℃)使用的储存温度下通常不能长时间段稳定。从文献(例如EP 2 402 350 A1)已知,大环内酯类Eve、Sir和Tac具有差的水溶性并且由于其酯键的溶剂分解而在溶液中不稳定,导致生物活性的丧失。因此,无有机溶剂的Eve、Sir和Tac的水性制剂,包括基于血液的样品,通常在范围为-20至-80℃的非常低温度下储存,以保持它们稳定并可用于IVD中更长的时间段;否则溶液只能稳定短时间段(2-8℃下1-6周)。现有技术的储存建议概述于表1中。
表 1:文献提供的含有依维莫司、西罗莫司和他克莫司的血液样品的稳定性(h:小时,d:天,w:周,m:月,a:年,RT:室温,作为索引提及的文献为:(1) Capone等人 (2007),Int J. Immunopath Pharmacol 21(2):297; (2) Streit等人 (1996), Clin Chem 42:9,(3) Kiss等人 (2006), Farmacia Vol. LIV, 5: 103; (4) Salm等人 (2002) JChromatogr B 772:283; (5) Salm等人 (2000), Ther Drug Monit 22(4):423; (6)Baldelli等人 (2005), J Chromatogr B 816:99; (7) Ingels等人 (1995), Clin Chem41(9):1320; (8) Freeman等人 (1995), Ther Drug Monit 17(3):266; (9) Kaplan等人(2015, Int J Anal Chem, Article ID 956389; doi:10.1155/2015/956389; (10)Upadhyay等人 (2014), J Adv Med Life Sci 1(3):1; (11) Khoschsorur (2005), ClinChem 51(9):1721)。
因此,本领域中需要用于测定免疫调节性大环内酯的改进手段和方法,特别是用于提供可靠且可储存的校准溶液的改进手段和方法。该问题通过本文公开的手段和方法解决。
因此,本发明涉及液体组合物,其包含至少一种免疫调节性大环内酯和基本上无细胞的血液溶血物。
如以下中所用,术语“具有”、“包含”或“包括”或其任意语法变体以非排他性的方式使用。因此,这些术语既可以是指其中除了这些术语引入的特征之外在该上下文中描述的实体中没有另外特征存在的情况,而且可以是指其中存在一个或多个另外特征的情况。作为实例,表述“A具有B”、“A包含B”和“A包括B”既可以是指其中除了B之外在A中没有另外要素存在的情况(即其中A单独且仅由B组成的情况),而且可以是指其中除了B之外在实体A中存在一种或多种另外要素诸如要素C、要素C和D或甚至另外要素的情况。
此外,如以下中所用,术语“优选”、“更优选”、“最优选”、“具体地”、“更具体地”、“特别地”、“更特别地”或类似术语与任选的特征结合使用,而不限制另外的可能性。因此,这些术语引入的特征是任选的特征,并且不意图以任何方式限制权利要求的范围。如技术人员将认识到,可以通过使用替代特征来执行本发明。类似地,通过“在本发明的一个实施方案中”或类似表述引入的特征意图是任选的特征,关于本发明的另外的实施方案没有任何限制,关于本发明的范围没有任何限制,并且关于将以这样的方式引入的特征与本发明的其他任选或非任选特征组合的可能性没有任何限制。此外,如果没有另外说明,术语“约”涉及具有相关领域中普遍接受的技术精度的指示值,优选地涉及指示值±20%,更优选地±10%,最优选地±5%。
技术人员理解术语“液体组合物”与固体或糊状组合物相反。在一个实施方案中,所述液体组合物是牛顿流体。在一个进一步实施方案中,所述液体组合物具有低粘度,在一个实施方案中类似于水。因此,在一个实施方案中,所述液体组合物的粘度小于100 mPas,在一个实施方案中小于50 mPas,在一个进一步实施方案中小于15 mPas。在一个实施方案中,粘度根据芯片上的粘度计-流变仪(Viscometer-Rheometer-on-a-Chip, VROC®)方法(Sharma等人(2011), Soft Matters 7:5150)在20℃下测定。在一个进一步实施方案中,粘度测定在RheoSense m-VROC™ (Collotec)设备上在20℃下进行,在一个实施方案中根据制造商提供的说明书进行。在一个实施方案中,所述液体组合物是水性组合物,在一个实施方案中包含比例为至少50% (w/w)的水,在一个实施方案中包含比例为至少70% (w/w)的水,在一个进一步实施方案中包含比例为至少80% (w/w)的水,在一个进一步实施方案中包含比例为至少90% (w/w)的水。在一个实施方案中,所述液体组合物可以包含少量有机溶剂,例如,其来自添加免疫调节性大环内酯的储备溶液。然而,在一个实施方案中,所述液体组合物包含小于10%有机溶剂,在一个实施方案中小于5%有机溶剂,在一个进一步实施方案中小于2%有机溶剂,在一个进一步实施方案中小于1%有机溶剂。在一个实施方案中,所述液体组合物基本上无可检测的有机溶剂,其中术语“基本上无”涉及小于0.1%的比例,在一个进一步实施方案中涉及不可检测的量。在一个实施方案中,在这种情况下使用的检测方法是气相色谱法。在一个实施方案中,所述液体组合物包含依维莫司、西罗莫司或他克莫司,在一个实施方案中包含依维莫司和西罗莫司,在一个实施方案中包含西罗莫司和他克莫司,在一个实施方案中包含依维莫司和他克莫司,在一个进一步实施方案中包含依维莫司、西罗莫司和他克莫司。在一个实施方案中,所述液体组合物基本上无细胞;因此,在一个实施方案中,所述液体组合物包含小于10个活细胞/ml,在一个实施方案中,小于1个活细胞/ml。在一个进一步实施方案中,所述液体组合物包含小于10个细胞/ml,在一个实施方案中,小于1个细胞/ml。在制备物无细胞的情况下,在一个实施方案中,术语“细胞”是指真核细胞,即特别是在用于溶血的制备物中包含的细胞。在一个实施方案中,所述液体组合物具有7.5至4的pH,在一个进一步实施方案中具有7至5的pH。在一个实施方案中,在液体组合物中,所述免疫调节性大环内酯在6℃的温度下稳定至少12个月,术语“稳定”涉及浓度降低至多10%,在一个实施方案中至多5%,在一个进一步实施方案中,在测定方法的标准偏差内。
在一个实施方案中,所述液体组合物由至少一种免疫调节性大环内酯和基本上无细胞的血液溶血物组成。在一个进一步实施方案中,所述液体组合物由至少一种免疫调节性大环内酯、基本上无细胞的血液溶血物和一种或多种另外的免疫调节性化合物组成。在一个进一步实施方案中,所述液体组合物由至少一种免疫调节性大环内酯、基本上无细胞的血液溶血物、至少一种防腐剂和任选一种或多种另外的免疫调节性化合物组成。
在一个进一步实施方案中,所述液体组合物是校准溶液,其包含预定量的一种或多种免疫调节性大环内酯和任选至少一种非大环内酯免疫调节性化合物。在一个实施方案中,所述液体组合物包含本文别处指定浓度的免疫调节性大环内酯,在这种情况下,在一个实施方案中,所示浓度范围是指一种特定免疫调节性大环内酯的浓度。因此,如将理解,制备物中免疫调节性大环内酯的总和可以超过参考浓度范围。在一个实施方案中,所述液体组合物是免疫调节剂校准溶液,其包含预定量的免疫调节性大环内酯,在一个实施方案中预定量的依维莫司、西罗莫司和/或他克莫司。所述液体组合物也可以是本文别处指定的参考溶液。
如本文所用,术语“大环内酯”涉及一类包含大环内酯结构的化合物,在一个实施方案中,其为化合物的聚酮化合物类的成员。在一个实施方案中,大环内酯环包含8至50个环原子,在一个实施方案中包含12至40个环原子,在一个进一步实施方案中包含15至35个环原子。在一个实施方案中,所述大环内酯包含23个环原子,诸如在他克莫司和吡美莫司中,或所述大环内酯包含31个环原子,诸如在西罗莫司、依维莫司和替西罗莫司中。如技术人员所理解,所述大环内酯可以包含直接或间接连接至大环内酯环和/或内酯环的另外的环结构,并且除了至少一个氧杂原子之外,可能的另外的环还可以包含另外的杂原子,特别是氮。此外,所述大环内酯可以进一步包含有机和/或无机侧链,尤其包括甲基基团、乙基基团、亚乙基基团、酮基基团、羟基基团、环状烷基基团、糖残基等。
如本文所用的术语“免疫调节性大环内酯”涉及如上文指定的大环内酯,其具有调节受试者、在一个实施方案中哺乳动物、特别是人的免疫应答的特性。在一个实施方案中,所述调节是抑制;因此,在一个实施方案中,所述免疫调节性大环内酯是大环内酯类化合物的免疫抑制化合物,即为大环内酯免疫抑制剂。在一个实施方案中,所述免疫调节性大环内酯是抑制T淋巴细胞活化的化合物;用于测定这种活性的手段和方法是技术人员已知的。如技术人员将理解,免疫调节性大环内酯的免疫调节作用可以是直接的,即通过调节免疫系统的组分的活性的化合物本身,或者可以是间接的,例如通过调节免疫系统的组分的活性的免疫调节性大环内酯的代谢物。在一个实施方案中,所述免疫调节性大环内酯以以下浓度包含在液体组合物中:1 ng/ml至15 μg/ml,在一个实施方案中5 ng/ml至1 μg/ml,在一个进一步实施方案中,7.5 ng/ml至500 ng/ml,在一个进一步实施方案中,10 ng/ml至250ng/ml。
在一个实施方案中,所述免疫调节性大环内酯是依维莫司((1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-二羟基-12-[(2R)-1-[(1S,3R,4R)-4-(2-羟基乙氧基)-3-甲氧基环己基]丙-2-基]-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-11,36-二氧杂-4-氮杂三环[30.3.1.04,9]三十六碳-16,24,26,28-四烯-2,3,10,14,20-戊酮, CAS-编号159351-69-6),西罗莫司((1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E, 30S,32S,35R)-1,18-二羟基-12-{(2R)-1-[(1S,3R,4R)-4-羟基-3-甲氧基环己基]-2-丙基}-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-11,36-二氧杂-4-氮杂三环[30.3.1.04,9]三十六碳-16,24,26,28-四烯-2,3,10,14,20-戊酮,CAS编号,他克莫司((1R,9S,12S,13R,14S,17R,18E,21S,23S,24R,25S,27R)-1,14-二羟基-12-[(1E)-1-[(1R,3R,4R)-4-羟基-3-甲氧基环己基]丙-1-烯-2-基]-23,25-二甲氧基-13,19,21,27-四甲基-17-(丙-2-烯-1-基)-11,28-二氧杂-4-氮杂三环[22.3.1.04,9]二十八碳-18-烯-2,3,10,16-四酮, CAS编号104987-11-3),吡美莫司((1R,9S,12S,13R,14S,17R,18E,21S,23S,24R,25S,27R)-12-[(1E)-1-[(1R,3R,4S)-4-氯-3-甲氧基环己基]丙-1-烯-2-基]-17-乙基-1,14-二羟基-23,25-二甲氧基-13,19,21,27-四甲基-11,28-二氧杂-4-氮杂三环[22.3.1.04 ,9]二十八碳-18-烯-2,3,10,16-四酮, CAS 编号137071-32-0),或替西罗莫司((1R,2R,4S)-4-[(2R)-2-[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-二羟基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-五氧代-11,36-二氧杂-4-氮杂三环[30.3.1.04,9]三十六碳-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基环己基 3-羟基-2-(羟基甲基)-2-甲基丙酸酯, CAS编号162635-04-3)。在一个实施方案中,所述免疫调节性大环内酯是至少一种选自依维莫司、西罗莫司、他克莫司、吡美莫司和替西罗莫司的免疫调节性大环内酯,在一个实施方案中是至少一种选自依维莫司、西罗莫司和他克莫司的免疫调节性大环内酯,在一个进一步实施方案中包含依维莫司,在一个实施方案中包含西罗莫司,在一个实施方案中包含他克莫司。
根据技术人员的理解,术语“溶血物”在本文中用于涉及包含裂解的红细胞的制备物。用于裂解红细胞的手段和方法是本领域中已知的,并且尤其包括冷冻和解冻包含红细胞的制备物,将氯化铵或氯化铵和钾的混合物添加至包含红细胞的制备物中,或用低渗性稀释剂、例如用去离子水或蒸馏水稀释包含红细胞的制备物。在一个实施方案中,通过向血液,即,在一个实施方案中向全血,应用红细胞裂解处理来获得溶血物。在一个实施方案中,通过冷冻和解冻全血的制备物来获得溶血物,在一个实施方案中,可以重复该过程。在一个进一步实施方案中,通过冷冻和解冻全血,在一个实施方案中来自至少两个受试者的全血的合并物、在一个实施方案中来自至少五个受试者的全血的合并物,来获得血液溶血物。在一个实施方案中,根据如下文所指定的本发明的方法获得溶血物。
根据本发明的溶血物基本上无细胞。如技术人员所理解,溶血物,特别是如果从全血获得,可以仍然包含大量未裂解的红细胞,但也包含大量其他未裂解的细胞,尤其是淋巴细胞。根据本发明,为了产生基本上无细胞的溶血物,通过适当的措施,包括例如离心、过滤、倾析等,可以从溶血物主动除去未裂解的细胞。然而,此类除去未裂解细胞的主动步骤可能并不总是完全有效的。因此,在一个实施方案中,基本上无细胞的血液溶血物是包含小于10个活细胞/ml、在一个实施方案中小于1个活细胞/ml的数目的溶血物。在一个进一步实施方案中,基本上无细胞的血液溶血物是包含小于10个细胞/ml、在一个实施方案中小于1个细胞/ml的数目的溶血物。
在一个实施方案中,所述液体组合物进一步包含至少一种非大环内酯免疫调节性化合物,在一个实施方案中进一步包含环孢菌素(环-(L-丙氨酰-D-丙氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-3-羟基-N,4-二甲基-L-2-氨基-6-辛烯酰基-L-a-氨基-丁酰基-N-甲基甘氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-亮氨酰);CAS编号59865-13-3)。
当储存组合物时,尤其是如果设想在非冷冻状态下长期储存,包括防止微生物生长的防腐剂(防腐试剂)可能是有益的。因此,本发明的一个方面涵盖对于有效保存,例如,长期储存组合物的需求。适合于控制细菌和真菌生长并且使得能够长期储存和使用该组合物的防腐剂原则上是技术人员已知的,例如,从McDonnell和Russell (1999), ClinMicrobiol Rev 12(1):147和从EP 0 878 714 A1已知。此外,许多防腐剂及其混合物以各种商品名销售。因此,在一个实施方案中,所述液体组合物进一步包含至少一种防腐剂,即一种或多种防腐剂。合适的防腐剂对液体组合物、尤其是对其中包含的免疫调节性大环内酯及其稳定作用没有影响或没有负面影响。因此,在一个实施方案中,避免具有或释放反应性基团的防腐剂(如例如醛类、卤素释放剂、重金属类、过氧化物类和环氧乙烷),属于与免疫调节性大环内酯类相同或相似类别的化学化合物的防腐剂,例如大环内酯抗生素如红霉素和聚酮化合物-抗生素如四环素。在一个实施方案中,所述防腐剂是不干扰免疫调节性大环内酯测定的防腐剂。因此,例如,可以使用防腐剂,其包含以下或由以下组成:3-碘-2-丙炔基丁基氨基甲酸酯、2-羟基吡啶-N-氧化物、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和/或2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、邻苯基苯酚(碱性或醇性,在一个实施方案中是醇性)、甲基异噻唑酮、叠氮化物和双-双胍。在一个实施方案中,所述防腐剂是叠氮化物,在一个进一步实施方案中是叠氮化钠。在一个进一步实施方案中,所述防腐剂是双-双胍,在一个实施方案中是抗细菌双-双胍,在一个进一步实施方案中是阿立西定(1,1'-(1,6-己二基)双{2-[N'-(2-乙基己基)甲脒基(carbamimidoyl)]胍,CAS编号22573-93-9)或氯己定(N,N''-双(4-氯苯基)-3,12-二亚氨基-2,4,11,13-四氮杂十四烷二亚氨酰胺(diimidamide),CAS编号55-56-1),在一个实施方案中是氯己定。
在一个实施方案中,所述防腐剂以以下浓度存在于液体组合物中:0.005% (w/v)至0.5% (w/v),在一个实施方案中0.0075% (w/v)至0.25% (w/v)。在一个实施方案中,所述防腐剂是叠氮化钠并且以以下浓度存在:0.005% (w/v)至0.25% (w/v),在一个实施方案中0.0075% (w/v)至0.05% (w/v),在一个进一步实施方案中约0.009%。在一个进一步实施方案中,所述防腐剂是双-双胍,在一个实施方案中是阿立西定和/或氯己定,并且以以下浓度存在:0.005% (w/v)至0.5% (w/v),在一个实施方案中0.01% (w/v)至0.25% (w/v),在一个进一步实施方案中约0.25%。
在一个实施方案中,所述液体组合物进一步包含抗凝血剂。术语“抗凝血剂”原则上是技术人员已知的。在一个实施方案中,所述抗凝血剂是抑制至少一种凝血途径、在一个实施方案中抑制两种凝血途径(内在和外在)的化合物。在一个实施方案中,所述抗凝血剂是低分子量化合物,在一个实施方案中具有小于1000 Da、在一个实施方案中小于500 Da的分子量。在一个实施方案中,所述抗凝血剂是二价阳离子的螯合剂,在一个实施方案中是钙离子螯合剂。在一个实施方案中,所述抗凝血剂是柠檬酸盐和/或乙二胺四乙酸(2,2',2'',2'''-(乙烷-1,2-二基二次氮基)四乙酸,EDTA)。在一个实施方案中,所述抗凝血剂是不可被微生物降解的抗凝血剂;在一个实施方案中,所述抗凝血剂是EDTA。因此,在一个实施方案中,所述溶血物由EDTA血液产生。抗凝血剂的合适浓度是本领域中已知的;例如,在所述抗凝血剂是EDTA的情况下,液体组合物中的最终浓度在一个实施方案中是0.01% (w/v)至5% (w/v),在一个进一步实施方案中是0.02% (w/v)至1% (w/v),在一个进一步实施方案中是0.025% (w/v)至0.5% (w/v),在一个进一步实施方案中是约0.1% (w/v)。
有利地,在本发明的基础工作中发现,通过添加溶血物,可以稳定免疫调节性大环内酯类的溶液。这样,通常相当不稳定的溶液可以不冷冻地储存延长时间段。
上面作出的定义加上必要的变更适用于以下内容。下面进一步作出的额外的定义和解释加上必要的变更也适用于本说明书中描述的所有实施方案。本发明进一步涉及:
本发明还涉及用于制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液的方法,其包括:
a) 制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液,
b) 将预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液中,且,由此
c) 制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液。
为了避免疑问,本发明的方法是体外方法。此外,其可以包括除了上面明确提及的步骤之外的步骤。例如,另外的步骤可以涉及例如提供一种或多种血液样品用于步骤a)的溶血,或者在步骤b)之前或之后添加另外的化合物,尤其是一种或多种防腐剂。而且,所述步骤中的一个或多个可以通过自动化设备进行。如技术人员将理解,本文描述的方法还可用于制造稳定的免疫调节性大环内酯参考溶液。
在一个实施方案中,步骤a)的包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液由所述基本上无细胞的血液溶血物组成。在一个进一步实施方案中,包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液由来自一个或多个受试者(在一个实施方案中明显健康的受试者)的EDTA全血、例如全血样品的合并物制备。因此,在一个实施方案中,所述方法包括获得来自至少两个、在一个实施方案中至少五个不同的受试者、在一个实施方案中人的全血样品的合并物。
用于将红细胞溶血的方法在上文中指定。在一个实施方案中,制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括冷冻和解冻包含红细胞的液体、尤其是全血,由此提供血液溶血物。在一个实施方案中,这种冷冻是在以下温度下冷冻:-1℃至-190℃、在一个实施方案中-10℃至-100℃、在一个进一步实施方案中-50℃至-90℃、在一个进一步实施方案中约-80℃、在一个进一步实施方案中-80℃。如技术人员已知,冷冻可以在空气中在所示温度下进行,例如通过将样品置于冰箱中;然而,通过已知方法,包括在干冰中或在干冰/酒精浴中、在液态空气中等冷冻,可以加速冷冻。在一个进一步实施方案中,解冻是在以下温度下解冻:0℃至50℃、在一个实施方案中4℃至45℃、在一个进一步实施方案中10℃至40℃、在一个进一步实施方案20℃至30℃、在一个进一步实施方案中约25℃、在一个进一步实施方案中25℃。如技术人员已知,解冻可以在空气中在所示温度下进行;然而,通过已知方法,包括在水浴中、在热块中等解冻,可以加速解冻。在一个实施方案中,解冻是在空气中解冻。
在一个实施方案中,制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括将溶血物、尤其是血液溶血物、在一个实施方案中如上所指示获得的溶血物、尤其是血液溶血物搅拌至少5分钟,在一个实施方案中至少10分钟,在一个进一步实施方案中至少20分钟。在一个实施方案中,所述方法包括将血液溶血物搅拌5分钟至600分钟,在一个实施方案中100分钟至300分钟,在一个实施方案中15分钟至180分钟,在一个进一步实施方案中20分钟至120分钟,在一个进一步实施方案中30分钟至90分钟,在一个进一步实施方案中约60分钟,在一个进一步实施方案中60分钟。
如上文所指定,本发明的液体组合物包含基本上无细胞的溶血物。因此,在本发明的方法中,在一个实施方案中,根据已知方法、尤其是如上文所述从粗溶血物除去细胞。在一个实施方案中,通过离心粗溶血物来除去细胞。在一个实施方案中,进一步应用离心以除去粗溶血物的其他不期望的成分,例如,沉淀的蛋白。技术人员知道如何相应地调整离心条件。因此,在一个实施方案中,离心以500g至25000g,在一个实施方案中1000g至20000g,在一个进一步实施方案中5000g至15000g,在一个进一步实施方案中10000g至14000g进行;在一个实施方案中,前述离心进行至少2分钟,在一个实施方案中至少5分钟,在一个进一步实施方案中至少15分钟。在一个实施方案中,所述离心进行2分钟至60分钟,在一个实施方案中5分钟至30分钟,在一个进一步实施方案中10分钟至20分钟,在一个进一步实施方案中约15分钟。在一个实施方案中,所述方法进一步包括将预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入离心的血液溶血物的上清液中。
如上文所指定,所述液体组合物可以进一步包含防腐剂。因此,在一个实施方案中,所述方法进一步包括将防腐剂、在一个实施方案中如上文所指定的防腐剂、在一个进一步实施方案中双-双胍、在一个进一步实施方案中抗细菌双-双胍混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液的步骤。所述混合防腐剂步骤的步骤可以在混合至少一种免疫调节性大环内酯之前、同时或之后进行。在一个实施方案中,混合防腐剂的步骤可以甚至在溶血之前进行。
本发明进一步涉及包含根据本发明的液体组合物和免疫调节剂检测剂的试剂盒。
如本文所用,术语“试剂盒”是指可以包装在一起或可以不包装在一起的本发明的前述化合物、装置或试剂的集合。试剂盒的组分可以由分开的壳体(即,作为分开部分的试剂盒)包含,或两种或更多种组分可以提供在单个壳体中。此外,应理解,在一个实施方案中,本发明的试剂盒用于实施下文提及的用于测定免疫调节性大环内酯化合物的方法。在一个实施方案中,设想为了实施本文提及的方法,组分以即用方式提供。在一个实施方案中,所述化合物中的所有或一些以浓缩液体形式提供,其中浓缩组分使用液体、诸如水性缓冲溶液或本文别处指定的包含溶血物的溶液稀释。此外,在一个实施方案中,试剂盒含有用于实施所述方法的说明书。说明书可以由用户手册以纸张或电子形式提供。此外,所述手册可以包含用于解释当使用本发明的试剂盒实施上面提及的方法时获得的结果的说明书。在一个实施方案中,所述试剂盒进一步包含水、缓冲液和/或用于实施该方法的合适容器。
如本文所用,术语“检测剂”涉及帮助检测免疫调节剂、在一个实施方案中免疫调节性大环内酯的任何试剂。因此,所述检测剂可以是裂解缓冲液,从样品释放至少一种免疫调节性大环内酯的释放剂,蛋白沉淀剂(诸如例如乙腈或任何其他合适的有机溶剂),一种或多种液体色谱缓冲液,用于质谱法的离子对生成剂等。在一个实施方案中,所述检测剂是直接或间接结合如上文所指定的本发明的免疫调节性大环内酯的化学分子。如技术人员将理解,所述检测剂也可以是间接检测剂化合物,即不直接接触免疫调节性大环内酯、但通过本身结合免疫调节性大环内酯的另外的化合物的方式接触的检测剂。在一个实施方案中,所述检测剂是直接检测剂,即是直接结合免疫调节性大环内酯的试剂。在一个实施方案中,所述检测剂是抗体,在一个实施方案中是IgG。在一个实施方案中,所述检测剂是单克隆抗体。在一个进一步实施方案中,所述检测剂是与指示剂化合物(即可以通过技术人员已知的方式检测其在样品中的存在的化合物)结合的抗体。已知的指示剂化合物包括染料,电化学活性基团,或珠粒如乳胶珠粒。
如本文所用,术语“样品”是指怀疑或已知包含至少一种免疫调节性大环内酯的任何物质组合物。在一个实施方案中,所述样品是受试者、在一个实施方案中患者的样品;在一个实施方案中,所述样品是来自受试者的分离的样品。因此,在一个实施方案中,样品是体液的样品,在一个实施方案中,血液、血浆、血清、唾液或尿液的样品,或通过灌洗从组织或器官、例如从呼吸道得到的样品。在一个进一步实施方案中,所述样品是血液、血浆、血清或尿液样品。在一个进一步实施方案中,所述样品是血液或血浆样品或者是血清或血浆样品,在一个进一步实施方案中是血液样品。在一个实施方案中,在样品是血液样品的情况下,本发明的方法包括从所述血液样品获得血清或血浆样品的另外的步骤,包括用释放剂处理所述样品,或包括将所述样品溶血。在一个实施方案中,所述样品是柠檬酸盐血液样品、肝素血液样品或EDTA血液样品。在一个进一步实施方案中,所述样品是EDTA血液样品。生物样品可以源自如本文别处指定的受试者。用于获得上述不同类型的生物样品的技术是本领域中众所周知的。例如,血液样品可以通过采血、例如通过刺穿动脉和/或静脉血管来获得。在一个实施方案中,所述样品是从受试者获得的细胞、组织或器官的样品。在一个实施方案中,在所述器官是对生命至关重要的情况下,所述受试者不是人。此类样品可以通过众所周知的技术获得,在一个实施方案中,所述技术包括身体的适当区域的刮擦、拭子或活检。如技术人员已知,可以通过使用刷子、(棉花)拭子、刮刀、漂洗/洗涤液、穿孔活检设备、用针穿刺腔或通过外科手术仪器来获得此类样品。
在一个实施方案中,上述样品在它们用于本发明的方法之前进行预处理。所述预处理可以包括释放或分离样品中包含的化合物或除去过量材料或废物所需的处理。合适的技术包括离心,提取,分级分离,超滤,蛋白沉淀,随后过滤和纯化和/或富集化合物。如上文所示,预处理可以是,例如,用释放剂处理血液样品。此外,可以实施其他预处理以提供适合于分析的形式或浓度的化合物。如前所述的预处理样品也由如根据本发明使用的术语“样品”包含。
如本文所用,术语“受试者”涉及动物,在一个实施方案中哺乳动物,在一个进一步实施方案中灵长类动物,在一个进一步实施方案中人。在一个实施方案中,所述受试者是实验动物,尤其是小鼠、大鼠、豚鼠、猪或狗。在一个进一步实施方案中,所述受试者是家畜或伴侣动物,尤其是猫、狗、山羊、绵羊、牛、马或猪。在一个实施方案中,所述受试者是已知或怀疑用至少一种免疫调节性化合物、尤其是至少一种免疫调节性大环内酯治疗的受试者。因此,在一个实施方案中,所述受试者是在免疫抑制治疗下、尤其是在免疫调节性大环内酯治疗下的移植受体、尤其是人移植受体。
本发明进一步涉及包含基本上无细胞的血液溶血物和任选防腐剂的溶液用于稳定至少一种免疫调节性大环内酯、在一个实施方案中用于稳定免疫调节剂校准溶液、在一个进一步实施方案中用于稳定包含至少一种免疫调节性大环内酯的免疫调节剂校准溶液的用途。在一个实施方案中,包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液是如本文别处描述的包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液,和/或是根据本发明的方法制备的包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液。
进一步,本发明涉及包含根据本发明的组合物和/或根据本发明的试剂盒的设备。
在一个实施方案中,所述设备是药物监测设备。所述设备可以进一步包括分析单元,其配置为测定受试者的样品中的至少一种免疫调节性大环内酯的量。所述设备可以进一步包括评估单元,其配置为计算受试者的样品中的至少一种免疫调节性大环内酯的量,在一个实施方案中基于由所述分析单元获得的数据,计算受试者的样品中的至少一种免疫调节性大环内酯的量。在一个进一步实施方案中,所述设备进一步包括冷藏单元。在一个进一步实施方案中,所述设备进一步包括输出单元,其至少可操作地连接至评估单元,所述输出单元可以是例如显示单元和/或打印机。
如本文所用,术语“设备”涉及包含至少所述可操作地相互连接以允许测定的装置的装置系统。如何以操作方式连接设备的装置将取决于包括在设备中的装置的类型。在一个实施方案中,所述装置由单个设备包含。然而,也可以考虑本发明的装置,例如,分析单元和评估单元,在一个实施方案中,可以作为分开的设备出现,并且在一个进一步实施方案中,作为试剂盒包装在一起。本领域技术人员将意识到如何连接所述装置而无需再费周折。优选的设备是可以在没有专业技术人员的特定知识的情况下应用的那些。在一个实施方案中,所述设备适于包括如本文所述的额外特征。
此外,本发明涉及用于测定受试者的样品中的免疫调节性大环内酯化合物的方法,其包括使用至少一种根据本发明的组合物作为校准样品和/或作为参考样品。
用于测定免疫调节性大环内酯化合物的方法是体外方法。用于测定样品中的免疫调节性大环内酯化合物的方法原则上是技术人员已知的。根据本发明,在一个实施方案中,根据本发明的组合物用作校准样品,即用于比较由测试下的设备递送的测量值与已知准确度的校准标准品的测量值。在一个进一步实施方案中,根据本发明的组合物用作参考样品,即用作已知浓度的样品用于比较实验室间结果。
此外,本发明涉及免疫调节性大环内酯校准溶液,其包含本发明的液体组合物,在一个实施方案中由本发明的液体组合物组成。
鉴于上述内容,特别设想了以下实施方案:
1. 液体组合物,其包含至少一种免疫调节性大环内酯化合物和基本上无细胞的血液溶血物。
2. 实施方案1的液体组合物,其中基本上无细胞是数目为小于10个活细胞/ml、在一个实施方案中小于1个活细胞/ml。
3. 实施方案1或2的液体组合物,其中基本上无细胞是数目为小于10个细胞/ml、在一个实施方案中小于1个细胞/ml。
4. 实施方案1至3中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物基本上无细胞。
5. 实施方案1至4中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物是水溶液。
6. 实施方案1至5中任一项的液体组合物,其中所述免疫调节性大环内酯是至少一种选自依维莫司、西罗莫司、他克莫司、吡美莫司和替西罗莫司的免疫调节性大环内酯,在一个实施方案中是至少一种选自依维莫司、西罗莫司和他克莫司的免疫调节性大环内酯,在一个进一步实施方案中包含依维莫司,在一个实施方案中包含西罗莫司,在一个实施方案中包含他克莫司。
7. 实施方案1至6中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物包含依维莫司和西罗莫司,在一个实施方案中包含西罗莫司和他克莫司,在一个实施方案中包含依维莫司和他克莫司,在一个实施方案中包含依维莫司、西罗莫司和他克莫司。
8. 实施方案1至7中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物进一步包含至少一种非大环内酯免疫调节性化合物,在一个实施方案中进一步包含环孢菌素(环-(L-丙氨酰-D-丙氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-3-羟基-N,4-二甲基-L-2-氨基-6-辛烯酰基-L-a-氨基-丁酰基-N-甲基甘氨酰-N-甲基-L-亮氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-亮氨酰);CAS编号59865-13-3)。
9. 实施方案1至8中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物进一步包含防腐剂,在一个实施方案中包含不干扰免疫调节性大环内酯测定的防腐剂。
10. 实施方案9的液体组合物,其中所述防腐剂的浓度为0.005% (w/v)至0.5%(w/v),优选0.0075% (w/v)至0.25% (w/v)。
11. 实施方案9或10的液体组合物,其中所述防腐剂是至少一种选自以下的防腐剂:3-碘-2-丙炔基丁基氨基甲酸酯、2-羟基吡啶-N-氧化物、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和/或2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、邻苯基苯酚(碱性或醇性)、甲基异噻唑酮、叠氮化物和双-双胍,在一个实施方案中是双-双胍。
12. 实施方案1至11中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物进一步包含抗细菌双-双胍。
13. 实施方案12的液体组合物,其中所述双-双胍是阿立西定(1,1'-(1,6-己二基)双{2-[N'-(2-乙基己基)甲脒基]胍,CAS编号22573-93-9)或氯己定(N,N''-双(4-氯苯基)-3,12-二亚氨基-2,4,11,13-四氮杂十四烷二亚氨酰胺,CAS编号55-56-1),在一个实施方案中是氯己定。
14. 实施方案1至13中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物具有7.5至4的pH,在一个实施方案中具有7至5的pH。
15. 实施方案1至14中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物包含小于10%有机溶剂,在一个实施方案中小于5%有机溶剂,在一个进一步实施方案中小于2%有机溶剂,在一个进一步实施方案中小于1%有机溶剂。
16. 实施方案1至15中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物基本上无可检测的有机溶剂。
17. 实施方案1至16中任一项的液体组合物,其中所述免疫调节性大环内酯以如下浓度包含在所述液体组合物中:1 ng/ml至15 μg/ml,在一个实施方案中5 ng/ml至1 μg/ml,在一个进一步实施方案中,7.5 ng/ml至500 ng/ml,在一个进一步实施方案中,10 ng/ml至250 ng/ml。
18. 实施方案10至17中任一项的液体组合物,其中所述双-双胍,在一个实施方案中所述抗细菌双-双胍,以以下浓度存在于所述组合物中:0.005% (w/v)至0.5% (w/v)、在一个实施方案中0.01% (w/v)至0.25% (w/v)、在一个进一步实施方案中约0.25%。
19. 实施方案1至18中任一项的液体组合物,其中通过冷冻和解冻全血,在一个实施方案中来自至少两个受试者的全血的合并物,在一个实施方案中来自至少五个受试者的全血的合并物,来获得所述基本上无细胞的血液溶血物。
20. 实施方案1至19中任一项的液体组合物,其中所述基本上无细胞的血液溶血物根据实施方案28至43中任一项的方法获得。
21. 实施方案1至20中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物由所述免疫调节性大环内酯和所述基本上无细胞的血液溶血物组成。
22. 实施方案8至20中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物由所述免疫调节性大环内酯、所述基本上无细胞的血液溶血物和一种或多种另外的免疫调节性化合物组成。
23. 实施方案9至20中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物由所述免疫调节性大环内酯、所述基本上无细胞的血液溶血物、所述防腐剂和任选一种或多种另外的免疫调节性化合物组成。
24. 实施方案1至23中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物是校准溶液,其包含预定量的一种或多种所述免疫调节性大环内酯和任选所述至少一种非大环内酯免疫调节性化合物。
25. 实施方案1至24中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物是免疫调节剂校准溶液,其包含预定量的免疫调节性大环内酯,在一个实施方案中预定量的依维莫司、西罗莫司和/或他克莫司。
26. 实施方案1至25中任一项的液体组合物,其中在所述液体组合物中,所述免疫调节性大环内酯在6℃的温度下稳定至少12个月。
27. 实施方案26的液体组合物,其中稳定涉及浓度降低至多10%,在一个实施方案中至多5%,在一个进一步实施方案中在测定方法的标准偏差内。
28. 用于制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液的方法,其包括:
a) 制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液;
b) 将预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液中,且,由此
c) 制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液。
29. 实施方案28的方法,其中所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液由所述基本上无细胞的血液溶血物组成。
30. 实施方案28或29的方法,其中所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包含抗凝血剂,在一个实施方案中包含EDTA,在一个进一步实施方案中由EDTA全血制备。
31. 实施方案28至30中任一项的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括冷冻和解冻所述全血,由此提供血液溶血物。
32. 实施方案31的方法,其中所述冷冻是在-1℃至-190℃、在一个实施方案中-10℃至-100℃、在一个进一步实施方案中-50℃至-90℃、在一个进一步实施方案中约-80℃、在一个进一步实施方案中-80℃的温度下冷冻。
33. 实施方案31或32的方法,其中所述解冻是在0℃至50℃、在一个实施方案中4℃至45℃、在一个进一步实施方案中10℃至40℃、在一个进一步实施方案为20℃至30℃、在一个进一步实施方案中约25℃、在一个进一步实施方案中25℃的温度下解冻。
34. 实施方案28至33中任一项的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括将血液溶血物搅拌至少5分钟,在一个实施方案中至少10分钟,在一个进一步实施方案中至少20分钟。
35. 实施方案28至34中任一项的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括将血液溶血物搅拌5分钟至600分钟,在一个实施方案中100分钟至300分钟,在一个实施方案中15分钟至180分钟,在一个进一步实施方案中20分钟至120分钟,在一个进一步实施方案中30分钟至90分钟,在一个进一步实施方案中约60分钟,在一个进一步实施方案中60分钟。
36. 实施方案28至35中任一项的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括将血液溶血物离心。
37. 实施方案36的方法,其中所述离心以500g至25000g,在一个实施方案中1000g至20000g,在一个进一步实施方案中5000g至15000g,在一个进一步实施方案中10000g至14000g进行。
38. 实施方案36或37的方法,其中所述离心进行至少2分钟,在一个实施方案中至少5分钟,在一个进一步实施方案中至少15分钟。
39. 实施方案36至38中任一项的方法,其中所述离心进行2分钟至60分钟,在一个实施方案中5分钟至30分钟,在一个进一步实施方案中10分钟至20分钟,在一个进一步实施方案中约15分钟。
40. 实施方案28至39中任一项的方法,其中步骤b)包括将所述预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入离心的血液溶血物的上清液中。
41. 实施方案28至34中任一项的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括获得来自至少两个、在一个实施方案中至少五个不同的受试者、在一个实施方案中人的全血样品的合并物。
42. 实施方案28至41中任一项的方法,其中所述方法进一步包括将防腐剂、在一个实施方案中双-双胍、在一个进一步实施方案中抗细菌双-双胍混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液的步骤。
43. 实施方案42的方法,其中所述防腐剂是阿立西定(1,1'-(1,6-己二基)双{2-[N'-(2-乙基己基)甲脒基]胍,CAS编号22573-93-9)或氯己定(N,N''-双(4-氯苯基)-3,12-二亚氨基-2,4,11,13-四氮杂十四烷二亚氨酰胺,CAS编号55-56-1),在一个实施方案中是氯己定。
44. 包含根据实施方案1至27中任一项的液体组合物和免疫调节剂检测剂的试剂盒。
45. 包含基本上无细胞的血液溶血物和任选防腐剂的溶液用于稳定至少一种免疫调节性大环内酯、在一个实施方案中用于稳定免疫调节剂校准溶液、在一个进一步实施方案中用于稳定包含至少一种免疫调节性大环内酯的免疫调节剂校准溶液的用途。
46. 实施方案45的用途,其中所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液是如实施方案1至4中任一项中所述的包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液,和/或是根据实施方案28至42中任一项的方法制备的包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液。
47. 设备,其包含根据实施方案1至27中任一项的组合物和/或根据实施方案44的试剂盒。
48. 实施方案47的设备,其中所述设备是药物监测设备。
49. 实施方案47或48的设备,其中所述设备进一步包括分析单元,其配置为测定受试者的样品中的至少一种免疫调节性大环内酯的量。
50. 实施方案47至49中任一项的设备,其中所述设备进一步包括冷藏单元。
51. 用于测定受试者的样品中的免疫调节性大环内酯化合物的方法,其包括使用至少一种根据实施方案1至27中任一项的组合物作为校准样品和/或作为参考样品。
52. 免疫调节性大环内酯化合物校准溶液,其包含实施方案1至27中任一项的液体组合物,在一个实施方案中由实施方案1至27中任一项的液体组合物组成。
本说明书中引用的所有参考文献就其全部公开内容和本说明书中具体提及的公开内容而言在此通过引用并入。
以下实施例应当仅举例说明本发明。它们无论如何不应被解释为限制本发明的范围。
实施例1:依维莫司稳定性的评价-实时稳定性(RTS):
通过首先将人全血溶血来制备制剂:通过冷冻和解冻循环使5个供体的人EDTA全血溶血。在-80℃下分别冷冻来自每个供体的全血样品并在室温下解冻后,将所有样品合并,在滚转机上混合至少1小时,且然后在22℃和12000g下离心15分钟以便除去可能存在的溶血血细胞的碎片。离心后,将溶血的血液的上部(整个体积的近似4/5)用作溶血物。最后,将氯己定添加至溶血物中至0.024%的浓度。
为了检查RTS,将依维莫司的高度浓缩的储备溶液掺入含有氯己定的溶血物至近似100 ng/ml,并且将其等分试样在6℃下在棕色LC-MS小瓶中分别应激3、6、9、12和15个月。通过LC-MS/MS测量分析应激的样品和对应的非应激的样品(T0样品)。
LC-MS/MS方法:在进行LC-MS/MS分析之前,通过如下处理样品:将10 μL同位素标记的内部标准品(d4/2xC13-依维莫司)添加至100 μL待分析的样品,随后通过添加150 μL乙腈进行蛋白沉淀。将混合物在4℃下孵育60分钟,且然后离心(18000 g,4℃,30分钟)。将上清液用30%乙腈和70%水的溶剂混合物1:4稀释,且然后注入LC-MS/MS中。通过外部校准曲线定量样品。校准物是一组具有不同浓度的分析物的溶液,并且它们通过相同的制备工作流程运行,其具有与样品相同的内部标准品。为了计算样品中的浓度,用校准曲线的线性函数(浓度比)参考样品的响应系数(分析物峰面积和内部标准品峰面积的比率)。回收率值是在时间点(Ti)测量的浓度与作为参考的在开始时间点(T0)的非应激浓度相比的比值(参见表3)。回收率> 90%的制剂被归类为稳定的。
LC-MS/MS条件为:
•溶剂:A:0.5 mM NH4乙酸/H2O / B:甲醇
•梯度:根据表2。
•AB Sciex 6500 QTRAP / Agilent HPLC 1290-Infinity
•APCI源负模式
•柱:Phenomenex – Kinetex F5, 2.6 µm颗粒,150 mm x 2.1 mm
•温度:50℃(柱)和8℃(自动进样器)
•注入体积 20μL
•校准:外部,具有6个浓度水平,范围为0 - 500 ng/mL
•在如下条件下的MRM转换:DP:-76 V EP:-10 V CE:-30 V CXP:-24 V
•检测:依维莫司:Q1:956,6 Da Q3:590,2 Da;依维莫司d4,2xC13:Q1:962,2 Da Q3:590,2 Da。
表2:LC梯度:
为了检查同位素标记的依维莫司(d4/2xC13)的同位素稳定性,将化合物与等摩尔量的作为内部标准品的非同位素标记的依维莫司一起应激。在制备工作流程和通过LC-MS/MS测量之后,在同位素标记的化合物稳定的情况下,所得比率应当为约1,并且获得的值没有单位。回收率值是在时间点(Ti)测定的比率与作为参考的在开始时间点(T0)的非应激比率相比的比值(参见表3)。该实验仅参考同位素标记物的稳定性而不是化合物的稳定性。对于化合物稳定性的陈述,仅仅前面描述的实验是合适的。
结果:在所述制剂中,对于Eve可以成功地证明15个月的实时稳定性。3、6、9、12和15个月后的回收率的数据显示于下表中。同位素标记的化合物的数据(12个月)也表明同位素标记的Eve是稳定的。
表3:在6℃下应激的依维莫司和d4/2xC13-依维莫司的回收率值
T0 | 3个月 | 6个月 | 9个月 | 12个月 | 15个月 | |
Eve | 74.8 ng/mL | 71.1 ng/mL | 81.8 ng/mL | 74.6 ng/mL | 92.0 ng/mL | 77.8 ng/mL |
100 % | 95 % | 109 % | 100 % | 123 % | 104% | |
d4/2xC13 Eve | 0.946 | 0.955 | 0.931 | 0.952 | 0.955 | n.d. |
100 % | 101 % | 98 % | 101 % | 101% | n.d. |
实施例2:西罗莫司和他克莫司稳定性的评价-实时稳定性(RTS):
通过首先将人全血溶血来制备制剂:通过冷冻和解冻循环使5个供体的人EDTA全血溶血。在-80℃下分别冷冻来自每个供体的全血样品并在室温下解冻后,将所有样品合并,在滚转机上混合至少1小时,且然后在22℃和12000g下离心15分钟以便除去可能存在的溶血血细胞的碎片。离心后,将溶血的血液的上部(整个体积的近似4/5)用作溶血物。最后,将氯己定添加至溶血物中至0.024%的浓度。
为了检查RTS,将西罗莫司的高度浓缩的储备溶液掺入含有氯己定的溶血物至近似100 ng/mL或将他克莫司的高度浓缩的储备溶液掺入含有氯己定的溶血物至近似135ng/mL,并且将其等分试样在6℃下在棕色LC-MS小瓶中分别应激3个月。将应激的样品和对应的非应激的样品(T0样品)在6℃下储存几天,直至其LC-MS/MS分析。
LC-MS/MS方法:在进行LC-MS/MS分析之前,通过如下制备样品:将10 μL结构相似的内部标准品(对于西罗莫司,依维莫司D4 2xC13,和对于他克莫司,未标记的子囊霉素)添加至100 μL待分析的样品,随后通过添加150 μL乙腈进行蛋白沉淀。将混合物在4℃下孵育60分钟,且然后离心(18000 g,4℃,30分钟)。将上清液用30%乙腈和70%去离子水的溶剂混合物1:4稀释,且然后注入LC-MS/MS中。回收率值是在时间点(Ti)发现的面积比与作为参考的在开始时间点(T0)的非应激的面积比相比的比值(参见表5)。回收率≥ 90%的制剂被归类为稳定的并且80-90%被归类为可接受的。
LC-MS/MS条件为:
•溶剂:A:5 mM NH4乙酸/H2O + 0.1%甲酸/
B:甲醇 + 0.1%甲酸
•梯度:根据表4。
•AB Sciex Triple Quad 6500+ / Agilent HPLC 1290-Infinity II
•ESI源
•柱:Phenomenex – Kinetex F5, 2.6 µm颗粒,50 mm x 2.1 mm
•温度:40℃(柱)和8℃(自动进样器)
•注入体积 20μL
•在如下条件下的MRM转换:DP:70 V EP:10 V CXP:12 V
•检测:依维莫司: Q1:975.7 Da Q3:908.7 Da CE 25 V
依维莫司d4,2xC13: Q1:981.7 Da Q3:914.7 Da CE 25 V
西罗莫司: Q1:931.7 Da Q3:864.6 Da CE 25 V
他克莫司: Q1:821.5 Da Q3:576.4 Da CE 33 V
子囊霉素: Q1:809.5 Da Q3:564.4 Da CE 33 V。
表4:LC梯度:
结果:在所述制剂中,对于西罗莫司和他克莫司可以成功地证明3个月的实时稳定性。3个月后的回收率的数据显示于下表5中。
表5:在6℃下应激的未标记的西罗莫司和他克莫司的回收率值。
T0 | 3个月 | |
西罗莫司 | 0.745 | 0.606 |
100% | 81% | |
他克莫司 | 0.99 | 0.972 |
100% | 98% |
实施例3:实时稳定性研究
在短短3个月实时稳定性研究中,还检查NaN3是否可以作为保护添加剂应用。该程序如上述实施例1中所述,但添加0.009%叠氮化钠代替氯己定。表6中显示的结果在此也表明稳定的制剂。
表6:以NaN3作为添加剂的在6℃下应激的依维莫司的回收率值
Claims (15)
1.液体组合物,其包含至少一种免疫调节性大环内酯化合物和基本上无细胞的血液溶血物,其中所述免疫调节性大环内酯是至少一种选自依维莫司、西罗莫司、他克莫司、吡美莫司和替西罗莫司的免疫调节性大环内酯,且其中基本上无细胞为数目小于10个活细胞/ml。
2.权利要求1的液体组合物,其中基本上无细胞为数目小于1个活细胞/ml。
3.权利要求1或2的液体组合物,其中所述液体组合物是水溶液。
4.权利要求1至3中任一项的液体组合物,其中所述免疫调节性大环内酯是至少一种选自依维莫司、西罗莫司和他克莫司的免疫调节性大环内酯,在一个进一步实施方案中包含依维莫司,在一个实施方案中包含西罗莫司,在一个实施方案中包含他克莫司。
5.权利要求1至4中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物进一步包含防腐剂,在一个实施方案中包含不干扰免疫调节性大环内酯测定的防腐剂,在一个实施方案中包含双-双胍。
6.权利要求5的液体组合物,其中所述双-双胍是阿立西定(1,1'-(1,6-己二基)双{2-[N'-(2-乙基己基)甲脒基]胍,CAS编号22573-93-9)或氯己定(N,N''-双(4-氯苯基)-3,12-二亚氨基-2,4,11,13-四氮杂十四烷二亚氨酰胺,CAS编号55-56-1),在一个实施方案中是氯己定。
7.权利要求1至13中任一项的液体组合物,其中所述液体组合物具有7.5至4的pH,在一个实施方案中具有7至5的pH。
8.用于制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液的方法,其包括:
a) 制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液,
b) 将预定量的至少一种免疫调节性大环内酯混入所述包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液中,且,由此
c) 制造稳定的免疫调节性大环内酯校准溶液,
其中所述免疫调节性大环内酯是至少一种选自依维莫司、西罗莫司、他克莫司、吡美莫司和替西罗莫司的免疫调节性大环内酯,且其中基本上无细胞为数目小于10个活细胞/ml。
9.权利要求8的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括冷冻和解冻所述全血,由此提供血液溶血物;和/或其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括将所述血液溶血物搅拌至少5分钟,在一个实施方案中至少10分钟,在一个进一步实施方案中至少20分钟。
10.权利要求8或9的方法,其中所述制备包含基本上无细胞的血液溶血物的溶液包括将所述血液溶血物离心,在一个实施方案中,其中所述离心以500g至25000g,在一个实施方案中1000g至20000g,在一个进一步实施方案中5000g至15000g,在一个进一步实施方案中10000g至14000g进行。
11.包含根据权利要求1至7中任一项的液体组合物和免疫调节剂检测剂的试剂盒。
12.包含基本上无细胞的血液溶血物和任选防腐剂的溶液用于稳定其中包含的至少一种免疫调节性大环内酯、在一个实施方案中用于稳定免疫调节剂校准溶液、在一个进一步实施方案中用于稳定包含至少一种免疫调节性大环内酯的免疫调节剂校准溶液的用途,
其中所述免疫调节性大环内酯是至少一种选自依维莫司、西罗莫司、他克莫司、吡美莫司和替西罗莫司的免疫调节性大环内酯,且其中基本上无细胞为数目小于10个活细胞/ml。
13.设备,其包含根据权利要求1至7中任一项的组合物和/或根据权利要求11的试剂盒。
14.用于测定受试者的样品中的免疫调节性大环内酯化合物的方法,其包括使用至少一种根据权利要求1至7中任一项的组合物作为校准样品和/或作为参考样品。
15.免疫调节性大环内酯化合物校准溶液,其包含权利要求1至7中任一项的液体组合物,在一个实施方案中由权利要求1至7中任一项的液体组合物组成。
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070087396A1 (en) * | 2005-10-13 | 2007-04-19 | Konrath John G | Method of tacrolimus extraction and quantification using aqueous detergents |
US20080181947A1 (en) * | 2006-09-26 | 2008-07-31 | Astellas Pharma Inc. | Controlled release dosage form of tacrolimus |
US20120053198A1 (en) * | 2010-07-01 | 2012-03-01 | Euticals Spa | Water-soluble solid pharmaceutical inclusion complexes and their aqueous solutions for oral, ophthalmic, topical or parenteral use containing a macrolide and certain cyclodextrins |
CN105378480A (zh) * | 2013-07-04 | 2016-03-02 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 检测血清样品中抗药物抗体的干扰抑制性免疫测定 |
CN106456780A (zh) * | 2014-02-14 | 2017-02-22 | 成药技术Ip控股有限公司 | 西罗莫司及其衍生物的络合物、其制备方法以及含有其的药物组合物 |
CN110494753A (zh) * | 2017-03-28 | 2019-11-22 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于分析物测定的通用预处理试剂 |
CN111512154A (zh) * | 2017-12-25 | 2020-08-07 | 富士瑞必欧株式会社 | 针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测方法 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19719465A1 (de) | 1997-05-07 | 1998-11-12 | Boehringer Mannheim Gmbh | Konservierung von Aequorin-Reagenzien |
CN101467036B (zh) * | 2006-06-06 | 2013-06-19 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 全血样品的差异溶血 |
ATE483974T1 (de) * | 2007-06-06 | 2010-10-15 | Hoffmann La Roche | Detektion eines analyten in einer hämolysierten vollblutprobe |
US7815803B2 (en) | 2007-06-14 | 2010-10-19 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Preparation of samples for LC-MS/MS using magnetic particles |
US7790401B2 (en) * | 2007-08-06 | 2010-09-07 | Siemens Healthcare Diagnostics | Methods for detection of immunosuppressant drugs |
-
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070087396A1 (en) * | 2005-10-13 | 2007-04-19 | Konrath John G | Method of tacrolimus extraction and quantification using aqueous detergents |
US20080181947A1 (en) * | 2006-09-26 | 2008-07-31 | Astellas Pharma Inc. | Controlled release dosage form of tacrolimus |
US20120053198A1 (en) * | 2010-07-01 | 2012-03-01 | Euticals Spa | Water-soluble solid pharmaceutical inclusion complexes and their aqueous solutions for oral, ophthalmic, topical or parenteral use containing a macrolide and certain cyclodextrins |
CN105378480A (zh) * | 2013-07-04 | 2016-03-02 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 检测血清样品中抗药物抗体的干扰抑制性免疫测定 |
CN106456780A (zh) * | 2014-02-14 | 2017-02-22 | 成药技术Ip控股有限公司 | 西罗莫司及其衍生物的络合物、其制备方法以及含有其的药物组合物 |
CN110494753A (zh) * | 2017-03-28 | 2019-11-22 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于分析物测定的通用预处理试剂 |
CN111512154A (zh) * | 2017-12-25 | 2020-08-07 | 富士瑞必欧株式会社 | 针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
D. CAPONE等: "Stability of sirolimus and everolimus measured by immunoassay techniques in whole blood samples from kidney transplant patients", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF IMMUNOPATHOLOGY AND PHARMACOLOGY》 * |
KAZUNARI YAMASHITA等: "Establishment of new preparation method for solid dispersion formulation of tacrolimus", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS》 * |
洪顺福等: "在线固相萃取LC-MS/MS法测定健康人体全血中依维莫司浓度及在药代动力学研究中的应用", 《药物分析杂志》 * |
Also Published As
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