CN110326785A - 可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖‑花色苷聚电解质复合物的制备方法，包括步骤：取越橘花色苷溶解在体积分数1％～2％的乙酸水溶液中，得越橘花色苷浓度为0.2～2mg/ml的溶液A；将壁材加入所述溶液A中，经过超声分散和匀浆得溶液B；所述壁材由壳聚糖和果胶按重量比1:1～1:3组成；所述溶液A中越橘花色苷和所述壁材的重量比为2:1～2:4；将所述溶液B进行真空冷冻干燥，得阳离子海洋多糖‑花色苷聚电解质复合物。本发明制备的阳离子海洋多糖‑花色苷聚电解质复合物可延长秀丽隐杆线虫的寿命、增强生殖能力；可用于制备食品、保健品及药物负载与缓释等。
Description
技术领域
本发明属于食品、保健品及动物模型技术领域，具体涉及一种可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法及其应用。
背景技术
秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans，C.elegans)作为模式生物，简称线虫，因为这是一种无毒无害、可以独立生存的线虫。其个体小，成虫仅1.2mm长，0.08mm宽，通身透明，身体各处器官的位置形态均相同，便于观察。N2野生型秀丽线虫是实验室比较常用种类，正常生命周期仅为3周左右，分为6个阶段，胚胎期、L1期、L2期、L3期、L4期、成虫期，L4时期经过一次蜕皮即进入成虫期进行产卵。以尿嘧啶缺陷型大肠杆菌(E.coli)OP50为食，结构简单、生命周期短、线虫的部分分子通路与基因与人类相同。
运动行为学与脂褐素含量可判断机体健康衰老与否，脂褐素是一种随时间不断积累的内生荧光复合物，它是衰老的保守特征之一。从线虫到人类脂褐素都随年龄增加不断积累。脂褐素在生物的神经系统中几乎呈线性积累，成为检测年龄的可靠标准。脂褐素存在于多种细胞类型中，包括心脏、肝肾神经组织和皮肤组织，它与有丝分裂后细胞的寿命有关，也与整个有机体的寿命相关。
花色苷属于黄酮类天然植物色素，不仅资源丰富，而且具有抗氧化、清除自由基、延缓衰老等良好的生理功能特性。但是，由于花色苷的稳定性差，使其利用度受到限制。花色苷的稳定性主要受到自身结构以及外界环境两方面的影响。目前，提高花色苷的稳定性的方法主要包括有辅色作用、结构修饰、微胶囊化等。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺点，提供一种可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法，制备的可食性花色苷聚电解质复合物作为保健品及食品中营养功能因子可促进机体健康。利用模式生物秀丽隐杆线虫评价花色苷聚电解质复合物对于寿命，繁殖力，头部摆动，身体弯曲，爬行频率，体长体宽以及脂褐素含量的功效变化。本发明利用海洋阳离子多糖壳聚糖与阴离子多糖果胶静电互作用于封装花色苷，以提高花色苷的功能特性，对于提高其利用度、扩大应用范围、高效开发富含花色苷的农产品有着重要的意义。
为了达到上述目的，本发明提供一种可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法，包括如下步骤：
S1：称取越橘花色苷固体粉末溶解在体积分数1％～2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得越橘花色苷的浓度为0.2～2mg/ml的溶液A；
S2：将壁材加入步骤S1所述溶液A中，经超声分散处理，超声频率在20～60KHz、时间10～30min，在转速800～4000rpm条件下匀浆12～30min，得到溶液B；所述壁材由壳聚糖和果胶按重量比1:1～1:3组成；以所述溶液A中越橘花色苷的总量计，所述溶液A中越橘花色苷和所述壁材的重量比为2:1～2:4；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
优选方式下，步骤S3所述真空冷冻干燥具体为：温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24～72h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
优选方式下，所述可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法，包括如下步骤：
S1：称取越橘花色苷固体粉末40mg，溶解于100mL体积分数为2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得溶液A；
S2：将壳聚糖固体粉末30mg、果胶固体粉末30mg加入步骤S1所述溶液A中，经超声分散处理，超声频率在20KHz、时间30min，在转速4000rpm条件下匀浆30min，得到溶液B；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
本发明的另一个目的是提供所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的应用，用于延长秀丽隐杆线虫的寿命、抵抗衰老、增强生殖能力；一种用于抵抗衰老的保健品或食品，在制备时加入阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物；一种增强生殖能力的保健品或食品，在制备时加入阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
本发明具有如下的优点及有益效果：
1、以海洋多糖壳聚糖-果胶为壁材形成阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物，避免因花色苷的不稳定结构破坏造成功能活性的损失。本发明所使用的壳聚糖和果胶作为天然的生物多糖，相对于其它封装材料，具有良好的生物相容性和可降解性，所形成的复合物可随环境pH、离子强度变化，其结构出现相应的响应，可用于食品、保健品、药物负载与缓释等方面。
2、本发明的模式生物秀丽隐杆线虫具有生命周期短，抗衰老效果在数周内可迅速观察，实验周期短，操作简便，易于培养，成本低的特点。
3、本发明主要通过检测待测物质对秀丽隐杆线虫的寿命的影响，就能够在短期内评价待测物质是否具有抗衰老活性。其准确性，快速性是现有评价方法无法比拟的，该抗衰老模型可广泛应用于筛选抗衰老药物及保健品中。
附图说明
图1是越橘花色苷(未封装)的原子力显微镜图片。
图2是本发明实施例1制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；
图3是本发明实施例2制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；
图4是本发明实施例3制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；
图5是本发明对比例1制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；
图6是本发明制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的红外图谱；
图7是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫头部摆动的影响；
图8是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫身体弯曲的影响；
图9是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫爬行频率的影响；
图10是越橘花色苷(未封装)对秀丽隐杆线虫平均子代数目的影响；
图11是阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫平均子代数目的影响；
图12是线虫经过喂食浓度为0μg/mL越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的共聚焦显微镜的荧光成像图片；
图13是线虫经过喂食浓度为320μg/mL越橘花色苷(未封装)的共聚焦显微镜的荧光成像图片；
图14是线虫经过喂食浓度为320μg/mL阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的共聚焦显微镜的荧光成像图片；
图15是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫脂褐素积累总量的影响。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好的理解本发明，下面结合具体实施方式对本发明进一步说明。
可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物，对于花色苷分子进行封装，制备形成阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物，避免因花色苷的不稳定结构破坏造成功能活性的损失，利用模式生物秀丽隐杆线虫评价阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的功效性能，包括延长寿命，影响运动行为变化，体长体宽及抗衰老等。包括如下步骤：
阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备，称取越橘花色苷固体粉末0.2％-2％(W花色苷固体粉末/V水)溶解在体积分数1％～2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得溶液A；再分别将壳聚糖与果胶加入溶液A中，壳聚糖和果胶按重量比为1:1～1:4，经超声分散处理，超声频率在20-60KHz，在转速800～4000rpm条件下匀浆12～30min，得到溶液B；其中，越橘花色苷占壳聚糖和果胶总和的重量为2:1-2:4。最后进行真空冷冻干燥处理，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24～72h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的性质分析:分析阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的形貌，官能团组成等。
所述可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物，优化比例结果为越橘花色苷占壳聚糖和果胶总和的重量为2:3，在此比例条件下，花色苷和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物作用浓度选用0、40、80、160、320μg/mL。
所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对于秀丽隐杆线虫的运动行为变化，具体包括头部摆动，身体弯曲，爬行频率，线虫培养温度为20℃。
所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对于秀丽隐杆线虫的抗衰老作用，包括繁殖能力，体长体宽以及脂褐素含量来进行评价。
下述各例使用的越橘花色苷，生产厂家：天津市尖峰天然产物研究开发有限公司，CAS号：84082-34-8；壳聚糖，生产厂家：aladdin阿拉丁，货号：C105799-100g，CAS号：9012-76-4；果胶，生产厂家：aladdin阿拉丁，货号：P112756-100g，CAS号：900-69-5。
实施例1：阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备
S1：称取越橘花色苷固体粉末40mg，溶解于100mL体积分数为2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得溶液A；
S2：将壳聚糖固体粉末10mg、果胶固体粉末10mg加入步骤S1所述溶液A中，经超声分散处理，超声频率在20KHz、时间30min，在转速4000rpm条件下匀浆30min，得到溶液B；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
实施例2：阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备
S1：称取越橘花色苷固体粉末40mg，溶解于100mL体积分数为2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得溶液A；
S2：将壳聚糖固体粉末20mg、果胶固体粉末20mg加入步骤S1所述溶液A中，经超声分散处理，超声频率在20KHz、时间30min，在转速4000rpm条件下匀浆30min，得到溶液B；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
实施例3：阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备
S1：称取越橘花色苷固体粉末40mg，溶解于100mL体积分数为2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得溶液A；
S2：将壳聚糖固体粉末30mg、果胶固体粉末30mg加入步骤S1所述溶液A中，经超声分散处理，超声频率在20KHz、时间30min，在转速4000rpm条件下匀浆30min，得到溶液B；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
对比例1：阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备
S1：称取越橘花色苷固体粉末40mg，溶解于100mL体积分数为2％(V乙酸/V水)的乙酸水溶液中，得溶液A；
S2：将壳聚糖固体粉末40mg、果胶固体粉末40mg加入步骤S1所述溶液A中，经超声分散处理，超声频率在20KHz、时间30min，在转速4000rpm条件下匀浆30min，得到溶液B；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
实施例4：阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的形貌表征
称取施例1中的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的冻干粉末配制成水溶液C，终浓度为15g/L，取100μL溶液C滴在表面干净的云母片上，待其自然晾干后，进行表面形貌及尺寸大小测定。
图1是越橘花色苷(未封装)的原子力显微镜图片；图2是本发明实施例1制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；图3是本发明实施例2制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；图4是本发明实施例3制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片；图5是本发明对比例1制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的原子力显微镜图片。由图1～图5可知，随着封装壁材含量的增加，能够观察到阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物从无到有，有少至多的形成过程，根据此结果，可优化出实施例3越橘花色苷和壁材的重量比为2:3为最佳比例，所述壁材为壳聚糖和果胶按重量比1:1组成；以下若无特殊说明，所提到的聚电解质复合物均为此比例。
图6阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的红外图谱，图6中a为越橘花色苷固体粉末，b为果胶固体粉末，c为壳聚糖固体粉末，d为壳聚糖与果胶按重量比1:1混合而成的固体粉末，e为本发明实施例1制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物，f为本发明实施例2制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物，g为本发明实施例3制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物；由图6可知，红外光谱在1500～1700cm-1处的变化揭示了一个壳聚糖与果胶之间的相互作用，并且1727cm-1和1631cm-1的峰值分别与果胶中的羧基(COO-)和壳聚糖中的酰胺-I和酰胺-II基团的振动有关，这些结果表明壳聚糖的电离氨基(NH3+)与果胶的电离羧基(COO-)之间存在静电相互作用，花色苷被封装，壳聚糖与果胶包裹在花色苷表面。
实施例5：越橘花色苷及其聚电解质复合物延长秀丽隐杆线虫寿命的作用
将同步化后的L4期野生型N2线虫分别置于终浓度为0、40、80、160、320μg/mL的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的OP50中喂食24h，每个浓度大约20条线虫为一组，分三组平行实验；其中，所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物为本发明实施例3制备的。喂食结束后，将线虫转移至涂有大肠杆菌OP50的NGM培养基上，置于20℃条件下培养，在显微镜下对其活性进行观察评估，此时记录为0d，每24h观察一次线虫的存活率。对线虫死亡判断标准：无移动及吞咽动作，铂金丝轻触后仍无任何反应。
表1是越橘花色苷(未封装)延长秀丽隐杆线虫寿命的作用；表2是本发明实施例3制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物延长秀丽隐杆线虫寿命的作用。结果显示，1～10天，各实验组线虫生长状态良好，0μg/mL空白组死亡数量较多，12天后，各组线虫均开始死亡。最终结果显示，不同浓度的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物均对线虫平均寿命有延长效果，且阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物比花色苷效果更好，终浓度160和320μg/mL时效果显著，平均寿命分别提高了37.07％和51.42％，最长寿命均提高了68.75％。
表1越橘花色苷对秀丽隐杆线虫寿命的影响
表2阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫寿命的影响
实施例6：越橘花色苷及其聚电解质复合物作用于秀丽隐杆线虫的运动行为变化
(1)头部摆动频率
将同步化后的L4期野生型N2线虫在终浓度为0、40、80、160、320μg/mL的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的OP50中喂食24h，每个浓度大约20条线虫为一组，分三组平行实验；所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物为本发明实施例3制备的。挑取喂食后的线虫于M9缓冲液液滴中，在体式显微镜下观察，记录1min内线虫头部摆动的频率。头部摆动频率评估的标准为每分钟内当线虫身体弯曲程度为体长的一半时，头部从一侧摆到另一侧再摆回来记为1次头部摆动。
(2)身体弯曲频率
将同步化后的L4期野生型N2线虫分别在终浓度为0、40、80、160、320μg/mL的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的OP50中喂食24h，每个浓度大约20条线虫为一组，分三组平行实验；所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物为本发明实施例3制备的。挑起放入未涂布大肠杆菌OP50的NGM培养基上，在体式显微镜下观察，记录1min内其身体弯曲的次数，身体弯曲的评估标准为每分钟内线虫身体沿着前进端的垂直方向改变的次数记为1次身体弯曲。
(3)爬行频率
将同步化后的L4期野生型N2线虫分别在终浓度为0、40、80、160、320μg/mL的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的OP50中喂食24h，每个浓度大约20条线虫为一组，分三组平行实验；所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物为本发明实施例3制备的。挑取喂食后的线虫转移至涂有大肠杆菌OP50的NGM培养基上，记线虫身体向前走过一个S形波长为一次爬行，记录1min内线虫的爬行次数。
图7是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫头部摆动的影响；图8是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫身体弯曲的影响；图9是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫爬行频率的影响。由图7～图9可知，经过喂食花色苷和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的线虫，其头部摆动、身体弯曲、爬行频率均显示出了浓度依赖性，与喂食越橘花色苷(未封装)的线虫相比，喂食阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的线虫的头部摆动、身体弯曲、爬行频率的整体运动行为表现的更加敏捷健康。
实施例7：花色苷及其聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫繁殖能力的影响
秀丽隐杆线虫的繁殖能力可通过繁殖卵的数量进行评估。将同步化后的L4期野生型N2线虫分别在终浓度为0、40、80、160、320μg/mL的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的OP50中喂食24h，每个浓度大约20条线虫为一组，分三组平行实验，所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物为本发明实施例3制备的。喂食结束后，在产卵期内每天将线虫转移到新的涂有大肠杆菌OP50的NGM培养基上，含有虫卵的旧平板继续放置20℃培养箱内培养24h，然后对每个平板内的线虫的数目进行统计、相加。等到线虫的排卵期结束后，计算每条线虫总的子代数目。
图10是越橘花色苷(未封装)对秀丽隐杆线虫平均子代数目的影响；图11是阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫平均子代数目的影响。由图10和图11可知：越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物均对线虫的繁殖有促进作用，且随着越橘花色苷浓度的提高，线虫的繁殖能力稳定提升，因此，实验证明，越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物不仅能延长线虫的寿命，而且能提高其生殖能力。
实施例8：花色苷及其聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫的脂褐素含量的影响
将同步化后的L4期野生型N2线虫分别在终浓度为0、40、80、160、320μg/mL的越橘花色苷及阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的OP50中喂食24h，每个浓度大约20条线虫为一组，分三组平行实验，所述阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物为本发明实施例3制备的。喂食结束后，利用激光共聚焦显微镜对线虫体内分布进行成像：将培养皿置于激光共聚焦显微镜下，在紫外蓝色激发光488nm/520nm处，观察线虫体内脂褐素的自体荧光分布情况，并使用ImageJ软件进行荧光定量，以此测定脂褐素含量。
图12是线虫经过喂食浓度为0μg/mL越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的共聚焦显微镜的荧光成像图片；图13线虫经过喂食浓度为320μg/mL越橘花色苷(未封装)的共聚焦显微镜的荧光成像图片；图14是线虫经过喂食浓度为终浓度320μg/mL阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的共聚焦显微镜的荧光成像图片；由图12～图14，可观察到线虫体内脂褐素的自体荧光分布情况，荧光强度越小，代表线虫体内的脂褐素含量少，其中图14中线虫体内脂褐素含量最少，表明经过喂食浓度为320μg/mL阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对于线虫具有一定的抗衰老作用。图15是越橘花色苷(未封装)和阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物对秀丽隐杆线虫脂褐素积累总量的影响，结果表明：经过荧光定量，经过喂食浓度为320μg/mL阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的线虫体内荧光含量最少，与上述结论相一致。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：称取越橘花色苷溶解在体积分数1％～2％的乙酸水溶液中，得越橘花色苷浓度为0.2～2mg/ml的溶液A；
S2：将壁材加入步骤S1所述溶液A中，20～60KHz超声10～30min，800～4000rpm匀浆12～30min，得溶液B；所述壁材由壳聚糖和果胶按重量比1:1～1:3组成；以所述溶液A中越橘花色苷的总量计，所述溶液A中越橘花色苷和所述壁材的重量比为2:1～2:4；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
2.根据权利要求1所述可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法，其特征在于，步骤S3所述真空冷冻干燥具体为：温度-50℃、抽真空压力40Pa、干燥24～72h。
3.根据权利要求1所述可延长秀丽隐杆线虫寿命的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：称取越橘花色苷40mg，溶解于100mL体积分数为2％的乙酸水溶液中，得溶液A；
S2：将壳聚糖30mg、果胶30mg加入步骤S1所述溶液A中，20KHz超声30min，4000rpm匀浆30min，得到溶液B；
S3：将步骤S2所述溶液B进行真空冷冻干燥，温度为-50℃、抽真空压力为40Pa、干燥24h，得阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
4.一种用于抵抗衰老的保健品或食品，其特征在于，在制备时加入权利要求1或2任一方法制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
5.一种增强生殖能力的保健品或食品，其特征在于，在制备时加入权利要求1或2任一方法制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物。
6.一种权利要求1-2任一方法制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的应用，其特征在于，用于延长秀丽隐杆线虫的寿命。
7.一种权利要求1-2任一方法制备的阳离子海洋多糖-花色苷聚电解质复合物的应用，其特征在于，用于增强秀丽隐杆线虫的生殖能力。
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