CN110269013A - 红螯螯虾胚胎的离体孵化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于水产养殖技术领域，公开一种红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用消毒剂进行消毒，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29‑30℃，2‑3天换一次水，及时去除死胚或死虾；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始喂食，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。本发明大大提高红螯螯虾亲虾抱卵孵化效果，孵化同步率较高，为今后摸索建立红螯螯虾SPF苗种培育技术提供参考。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，尤其涉及红螯螯虾的养殖，具体说是红螯螯虾胚胎的离体孵化方法。
背景技术
红螯螯虾（Cherax quadricariratus），又名澳洲淡水龙虾，原产于澳大利亚等地区，隶属于甲壳纲（Crustaoea）、十足目（Decapoda）、拟螯虾科（Parastacidae）、光壳虾属（Cherax），具有生长快、抗逆强、肉质细嫩、出肉率高等特点，是世界名贵经济虾类之一。近年来，随着国内南美白对虾养殖效益的下滑，小龙虾等螯虾类的市场需求急剧增加，红螯螯虾的产业规模也得以迅速扩大，有望成为继罗氏沼虾、小龙虾后，国内又一新兴规模化养殖品种。
红螯螯虾自引进国内后，已经进行了亲虾培育、人工越冬、怀卵孵化、室内人工育苗及外塘养殖等一系列的研究（顾志敏等，2003；舒新亚等，2004；王冬冬等，2010；陈友明等，2016）。但其产业发展至今，仍有一大难题制约红螯螯虾的进一步产业化发展，这个难题就是苗种供应不足，即红螯螯虾苗种远远不能满足市场对虾苗的需求。由于红螯螯虾的生物学特性，具有怀卵量少、孵化率低、孵化时间不同步等缺点，这几个因素限制了虾苗的规模化生产。因此，亟需我们通过繁育技术的优化，解决苗种出苗量少的问题。国内外的研究者针对这个问题从不同角度开展了相关工作。包括通过控制光照、温度或饲料等条件提高亲虾繁殖性能（Karplus等，2003；罗文等，2004；Hervey等，2006）、通过提高亲虾交配时的培育密度以增加产量（Assaf等，2000）或者利用物理诱导手段改善孵化效果（Sagi等，1997），取得了一些成果，但这些成果仍然不能显著改善现状。
胚胎离体孵化，是一种低成本、高效益培育苗种的技术，这个技术应用于虾蟹类的繁育，不仅可以减少对抱卵虾蟹的饲养管理成本，还能减少抱卵过程中的卵掉落或者碰撞损坏几率，有助于提高孵化率，而且孵化同步性较高。有关虾蟹类胚胎离体孵化方面的研究，在国内外已有过相关报道。研究者最初主要是成功地对远洋梭子蟹（Portunus pelagicus）和中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）等胚胎的离体培养进行研究，并在育苗生产上取得了一定的成效（鲍鹰等，1999；廖永岩等，2001；王吉桥等，2005；陈文虎等，2002），而虾类则仅Brian等（2001）对产后2天的亚比虾（Cherax destructor）卵进行的离体孵化研究，结果表明，离体卵的平均成活率达87%，等于或高于母虾抱卵孵化。在蟹类及部分虾类胚胎离体孵化成功的基础上，研究者开始关注螯虾类胚胎的离体孵化。朱玉芳等（2002）首先尝试克氏原螯虾（Procambarus clarkii）胚胎的离体孵化，但未获得成功，结果显示抱卵孵化的孵化率远高于非抱卵的孵化率，他们分析原因之一可能是因为抱卵时母虾游泳足的不断划动为卵提供了更多的溶氧。王庆（2012）研究了不同时期剥离的胚胎孵化及剥离后不同孵化方式对孵化率的影响，结果表明，早期剥离的胚胎孵化率很低，而至虾已具雏形时再离体孵化则孵化率较高，说明将克氏原螯虾的胚胎剥离单独孵化，可以获得成功，进一步说明了甲壳类受精卵可在离开母体的情况下孵化，但离体孵化率较低，不能应用于克氏原螯虾规模化育苗。
发明内容
本发明基于上述研究的经验，提出针对红螯螯虾的胚胎离体孵化方法，大大提高红螯螯虾亲虾抱卵孵化效果，孵化同步率较高，为今后摸索建立红螯螯虾SPF苗种培育技术提供参考。
本发明采取如下的技术方案：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用消毒剂进行消毒，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29-30℃，2-3天换一次水，及时去除死胚或死虾；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始喂食，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。
作为优选，所述消毒剂为1000-2000ppm甲醛溶液。
进一步优选，所述消毒剂为1500ppm甲醛溶液。
作为优选，步骤（3）和（4）中的孵化采用改进孵化装置，所述改进孵化装置包括孵化器，所述孵化器包括底部为圆弧形的孵化桶、设置于所述孵化桶桶口的上盖和穿过所述上盖至所述孵化桶内的进水管、进气管、出水管。
采用上述孵化器，令胚胎在一个可控制的动态水流中处于一个不断翻滚状态，从而形成一个稳定的循环水流，不仅为胚胎提供一个高氧孵化环境，而且使胚胎均匀而轻柔地翻动，不会因水流波动不均或突然冲击，使胚胎剧烈碰撞孵化器底部壁面而造成损伤；且底部为圆弧形，便于虾卵无死角滚动。
作为优选，还包括孵化箱，孵化器安装在孵化箱内，所述上盖呈圆柱形，所述进水管的进水口位于所述圆柱形上盖的底部。
作为优选，所述上盖上设置有过滤件。
作为优选，所述过滤件为过滤海绵。
作为优选，所述出水管的出水口段呈L型，出水口在上盖所在区域之外。
作为优选，所述进气管从所述进水管内穿过，且进水管的出水口低于所述进气管的出气口。
通过实施上述技术方案，本发明具有如下优点：本发明采用的孵化方法配合改进的孵化装置，使胚胎在一个可控制的动态水流中不断均匀而轻柔地翻动，为胚胎提供一个高氧孵化环境，且能够保持水温在29-30℃的最适范围内，并通过臭氧消毒机对孵化用水进行消毒，防止了原生动物、真菌或细菌等的滋生，结合最适消毒剂的筛选，得到胚胎孵化的高孵化率及高同步率，为今后摸索建立红螯螯虾SPF苗种培育技术提供参考。
附图说明
附图1为本发明与对比例的孵出效果对比图；其中，A-实施例1，B-对比例1，C-对比例2，D-对比例3。
附图2为本发明孵出的虾苗；
附图3为本发明一实施例中孵化器示意图；
附图4为本发明一实施例中孵化器的平面图。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明进行进一步说明。
实施例1：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用1500ppm的甲醛溶液消毒10S，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在30℃，3天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始投喂丰年虫，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。
实施例2：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用1000ppm的甲醛溶液进行消毒10S，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在30℃，2天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始投喂丰年虫，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。
实施例3：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用2000ppm的甲醛溶液进行消毒10S，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29℃，2天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始投喂丰年虫，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。
实施例1-3的 步骤（3）和（4）采用的孵化装置如附图3-4所示，包括孵化箱（含控温棒）（图中未示出）、通过吸盘安装在孵化箱壁上的孵化器，孵化箱内装孵化用水，2-3天换一次水，孵化器包括孵化桶10、设置于所述孵化桶10桶口的上盖20。上盖呈漏斗状，上部为圆柱形，在外圈上开有环形槽，槽内安装密封圈，与孵化桶10之间密封设置。上盖20的底部设置向下延伸至接近孵化桶10底部的进水管30，进水管30开有是与上盖一体成型的，也可以是焊接在上盖上的。上盖放置一块过滤海绵40，进水管30的进水口位于过滤海绵之下。穿过上盖20延伸至孵化桶内的进气管50连接气泵，出水管60通至孵化桶外，出水管60的出水口段呈L型，出水口在上盖所在区域之外，保证排出的水不会落在上盖上，而是先在孵化箱内进行循环、沉淀杂质等。另一实施例可以优选进气管从所述进水管内穿过，且进水管的出水口低于所述进气管的出气口，利于控制水流的冲击力度，也利于氧气在水中的溶解。
孵化时，气体从进气管进入孵化桶内，同时孵化箱内的孵化水从进水管进入孵化桶内，水内压力增大，促使部分水从出水管排出，循环进出水，为孵化提供富氧环境，同时动态水流中不断均匀而轻柔地翻动。
对比例1：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用70%酒精进行消毒10S，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29-30℃，2-3天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始投喂丰年虫，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。采用实施例1相同的孵化装置进行孵化。
对比例2：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用0.1g/L强氯精消毒10S，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29-30℃，2-3天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始投喂丰年虫，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。采用实施例1相同的孵化装置进行孵化。
对比例3：
红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）通过梳子顺着腹足轻轻剥离出胚胎，用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29-30℃，2-3天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始投喂丰年虫，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。采用普通的孵化箱进行孵化。
实施例1与对比例1-3，各组孵化效果见图1，实施例1，也即采用甲醛消毒的效果最佳。
实施例1-3与对比例1-3，各组孵化率比较见表1。
Claims (9)
1.红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，包括：（1）取胚胎处于发育中期且呈橘黄色的红螯螯虾抱卵虾；（2）剥离出胚胎，用消毒剂进行消毒，再用无菌水进行洗涤；（3）洗涤后的胚胎进行孵化，控制孵化水温在29-30℃，2-3天换一次水；（4）胚胎孵出后继续进行培育，当发现部分虾卵黄囊消失时，开始喂食，每日投喂一次；至全部虾卵黄囊消失，得到虾苗。
2.根据权利要求1所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，所述消毒剂为1000-2000ppm甲醛溶液。
3.根据权利要求2所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，所述消毒剂为1500ppm甲醛溶液。
4.根据权利要求1所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，步骤（3）和（4）中的孵化采用改进孵化装置，所述改进孵化装置包括孵化器，所述孵化器包括底部为圆弧形的孵化桶、设置于所述孵化桶桶口的上盖和穿过所述上盖至所述孵化桶内的进水管、进气管、出水管。
5.根据权利要求4所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，还包括孵化箱，孵化器安装在孵化箱内，所述上盖呈圆柱形，所述进水管的进水口位于所述圆柱形上盖的底部。
6.根据权利要求5所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，所述上盖上设置有过滤件。
7.根据权利要求6所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，所述过滤件为过滤海绵。
8.根据权利要求4所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，所述出水管的出水口段呈L型，出水口在上盖所在区域之外。
9.根据权利要求4所述红螯螯虾胚胎的离体孵化方法，其特征在于，所述进气管从所述进水管内穿过，且进水管的出水口低于所述进气管的出气口。
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| CN201910546583.0A Pending CN110269013A (zh) | 2019-06-24 | 2019-06-24 | 红螯螯虾胚胎的离体孵化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110269013A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111304145A (zh) * | 2020-03-03 | 2020-06-19 | 天津农学院 | 一种提高罗氏沼虾胚胎离体培养孵化率的方法 |
| CN113133421A (zh) * | 2021-04-30 | 2021-07-20 | 广东海兴农集团有限公司 | 一种红螯螯虾胚胎离体孵化方法 |
| CN114793964A (zh) * | 2022-03-07 | 2022-07-29 | 江苏中水东泽农业发展股份有限公司 | 一种红螯螯虾的离体孵化系统和方法 |
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| CN103960182A (zh) * | 2014-04-28 | 2014-08-06 | 江苏省海洋水产研究所 | 一种应用虾卵离体培养建立脊尾白虾家系的方法 |
| US20140216351A1 (en) * | 2007-06-25 | 2014-08-07 | Yorktown Technologies, L.P. | Aquarium with adjustable lighting |
| CN207322383U (zh) * | 2017-07-17 | 2018-05-08 | 广东大健鱼苗水产有限公司 | 一种大鳞鲃鱼孵化桶 |
-
2019
- 2019-06-24 CN CN201910546583.0A patent/CN110269013A/zh active Pending
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