CN110225758A - 提供腹绞痛的膳食管理的营养组合物 - Google Patents

Abstract

提供一种减少儿科受试者腹绞痛的发生率的方法，所述方法包括向受试者施用营养组合物，所述营养组合物具有约1×10³至约1×10¹² cfu/100 kcal的LA代谢益生菌；至多约7 g/100 kcal的脂肪或脂质；至多约5 g/100 kcal的蛋白质或蛋白质等同来源；约0.06 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的富乳制品；约5 mg/100 kcal至约90 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸的来源；和约0.015 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的益生元组合物。

Description

提供腹绞痛的膳食管理的营养组合物

技术领域

本公开涉及通过经由施用本文公开的营养组合物改变受试者的肠道微生物群来管理儿科受试者的腹绞痛的方法。本公开的一些实施方案涉及增强或促进儿科受试者中有益菌如乳杆菌(Lactobacillus)和双歧杆菌(Bifidobacterium)物种的浓度的增加，同时抑制可促进腹绞痛发作的细菌物种,尤其是布劳特氏属(Blautia genus)，包括活泼瘤胃球菌(Ruminococcus gnavus)的生长。活泼瘤胃球菌是一种厌氧革兰氏阳性球菌，属于毛螺菌科(Lachnospiraceae)家族(该物种的分类正处于修订中，并且现在认为该物种属于布劳特氏属，而不是瘤胃球菌属(Ruminococccus)，其可以在动物和人类的胃肠道中发现；它不是丁酸盐生产者，但它是氢生产者和粘蛋白降解者。在腹绞痛婴儿中，布劳特氏菌，特别是活泼瘤胃球菌的增加与短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)的减少相关。

在一些实施方案中，营养组合物包含益生元共混物，其包括聚葡萄糖和低聚半乳糖。所公开的营养组合物还可包含富乳制品，诸如富含乳清蛋白浓缩物(eWPC)和长链多不饱和脂肪酸，任选还与一种或多种乳铁蛋白和短链脂肪酸组合。

背景技术

婴儿腹绞痛对婴儿来说是痛苦的，并且可能对父母造成严重的情绪困扰和不适，因此这被认为是婴儿期的一个主要问题。可以降低或预防婴儿腹绞痛的方法和组合物将为婴儿和父母提供缓解。

据报道，与健康婴儿相比，患有腹绞痛的婴儿具有不同的肠道微生物群，但迄今尚未建立因果关系。然而，现在已经表明，不能将膳食亚油酸(LA)代谢成共轭亚油酸(CLA)的腹绞痛婴儿的改变的肠道微生物群的特异性与增加的氢和促炎物质的产生相关。相反，双歧杆菌的物种，诸如短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、链状双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)、假链状双歧杆菌(Bifidobacterium pseudocatenulatum)等，可以将LA代谢为CLA，从而减少氢的产生。布劳特氏属的成员，诸如活泼瘤胃球菌，不能将LA代谢为CLA；因此，丰富的双歧杆菌属物种(除了布劳特氏物种)可以减少氢和其他促炎物质的产生并减少腹绞痛。

最近，已经发现，增加特别是婴儿的儿科受试者的肠道中能够代谢营养组合物的脂质级分以将LA转化为CLA及其衍生物的细菌(“LA代谢益生菌”)与布劳特氏属包括活泼瘤胃球菌的比率，将产生改善的LA向CLA的代谢分解或转化，从而降低腹绞痛的发生率。LA代谢益生菌与布劳特氏/活泼瘤胃球菌的比率可以通过以下方式增加：通过增加婴儿肠道中有益细菌的存在，诸如通过提供包含优选与益生元如聚葡萄糖和低聚半乳糖组合的短双歧杆菌的营养组合物；以及通过经由竞争性菌如双歧杆菌和/或乳酸杆菌的存在经由竞争相同的营养素来减少肠道中布劳特氏菌的存在，通过补充CLA转化菌或通过用益生元选择性地刺激CLA转化肠道微生物群的生长。因此，提供含有这种组合的供儿科受试者以及孕妇或哺乳期妇女用的营养组合物将是有益的。

概述

简而言之，本公开涉及通过经由向儿科受试者或孕妇或哺乳期妇女施用营养组合物改变所述受试者的肠道微生物群来管理所述儿科受试者的腹绞痛的方法，所述营养组合物可以增加所述受试者的肠道中LA代谢益生菌与布劳特氏属包括活泼瘤胃球菌的比率。在某些实施方案中，LA代谢益生菌如短双歧杆菌的数量比布劳特氏菌的数量高至少1 log。在其他实施方案中，LA代谢益生菌如短双歧杆菌与布劳特氏菌的比率为至少8:1；在其他实施方案中，LA代谢益生菌如短双歧杆菌与布劳特氏菌的比率为至少10:1。在其他实施方案中，LA代谢益生菌如短双歧杆菌与布劳特氏菌的比率为至少12:1。

在某些实施方案中，所述营养组合物还包含乳源富脂质级分，诸如富乳清蛋白浓缩物(eWPC)。在一些实施方案中，营养组合物可以包含乳源富脂质级分，其包括乳脂肪球。乳脂肪球的添加为婴儿提供了丰富的脂肪和脂质来源，它们可以被儿科受试者更充分地消化。在一些实施方案中，营养组合物还可以包含长链多不饱和脂肪酸，任选地与一种或多种乳铁蛋白和短链脂肪酸组合。

在某些实施方案中，富脂质级分和/或乳脂肪球可以包含饱和脂肪酸、反式脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、胆固醇、支链脂肪酸“BCFA”、共轭亚油酸“CLA”、磷脂或乳脂肪球膜蛋白及其混合物。

更具体地讲，在某些实施方案中，本公开的营养组合物包含：

约1×10³至约1×10¹² cfu/100 kcal的LA代谢益生菌；

至多约7 g/100 kcal的脂肪或脂质；

至多约5 g/100 kcal的蛋白质或蛋白质等同来源；

约0.06 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的富乳制品；

约5 mg/100 kcal至约90 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸(“LCPUFA”)；和

约0.015 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的益生元。

在一些实施方案中，LA代谢益生菌包括短双歧杆菌。在其他实施方案中，LA代谢益生菌包括链状双歧杆菌和假链状双歧杆菌。此外，LA代谢益生菌可以包括短双歧杆菌、链状双歧杆菌和假链状双歧杆菌的组合；短双歧杆菌和链状双歧杆菌的组合；短双歧杆菌和假链状双歧杆菌的组合；或链状双歧杆菌和假链状双歧杆菌的组合。

另外，在一些实施方案中，富乳制品包含eWPC。而且，在一些实施方案中，营养组合物还包含约5 mg/100 kcal至约300 mg/100 kcal的乳铁蛋白。儿科受试者可以是婴儿，并且营养组合物可以作为婴儿配方食品提供。

在本公开的上下文中，富乳制品意指富含乳脂肪球膜(MFGM)组分如MFGM蛋白和脂质的乳制品。富乳制品可以通过例如非人(例如牛)乳的分级来形成。富乳制品的总蛋白质水平可以在20%和90%之间，更优选在68%和80%之间的范围内，其中3%至50%是MFGM蛋白；在一些实施方案中，MFGM蛋白占富乳制品蛋白质含量的7%至13%。富乳制品还包含0.5%至5%(并且有时，1.2%至2.8%)的唾液酸，2%至25%(并且，在一些实施方案中，4%至10%)的磷脂，0.4%至3%的鞘磷脂，0.05%至1.8%，并且在某些实施方案中，0.10%至0.3%的神经节苷脂和0.02%至约1.2%，更优选0.2%至0.9%的胆固醇。因此，富乳制品包含比牛乳和其他非人乳中发现的水平更高的所需组分。

乳诸如牛乳是一种复杂乳液，其含有可满足营养需求和/或为消费者带来特殊健康益处的若干类组分。乳的脂肪组分是以小球的形式存在，其大小范围为0.1微米至10微米。脂肪球包含约98%三酰基甘油(TAG，其是动物中能量的主要储存形式)并且被乳脂肪球膜包围并稳定化，所述乳脂肪球膜源自内质网膜和细胞膜。

乳脂肪球膜由三层脂质结构组成，其包括磷脂、蛋白质、糖蛋白、甘油三酯、极性脂质、胆固醇、酶和在常规婴儿配方食品和成长乳中通常不丰富的其他组分的复杂混合物。

MFGM中发现的极性脂质由以下物质组成：

(i) 甘油磷脂，诸如磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰肌醇(PI)，及其衍生物，和

(ii) 鞘氨醇或鞘脂，诸如鞘磷脂(SM)和鞘糖脂，其包含脑苷脂(含有不带电的糖的中性糖鞘脂)和神经节苷脂(GG，含有唾液酸的酸性鞘糖脂)及其衍生物。

磷脂酰乙醇胺是在生物膜中，特别是在神经组织如脑、神经、神经组织以及脊髓中的白质中发现的磷脂，其中其占所有磷脂的45%。鞘磷脂是一种在动物细胞膜中，特别是在围绕一些神经细胞轴突的膜状髓鞘中发现的鞘脂。其通常由磷酸胆碱和神经酰胺或磷酸乙醇胺头基组成；因此，鞘磷脂也可以归类为鞘磷脂。在人类中，SM代表所有鞘脂的约85%，并且通常构成质膜脂质的10-20摩尔%。鞘磷脂存在于动物细胞的质膜中，并且在髓鞘中尤其突出，髓鞘是包围并隔离一些神经元的轴突的膜鞘。

LCPUFA如二十二碳六烯酸(“DHA”)是ω-3脂肪酸，它是人脑、大脑皮层、皮肤、精子、睾丸和视网膜的主要结构组分。DHA可以由α-亚麻酸合成或直接从母乳或鱼油中获得。DHA是大脑和视网膜中最丰富的ω-3脂肪酸。DHA占脑中多不饱和脂肪酸(PUFA)的40%和视网膜中PUFA的60%。神经元质膜的50重量%由DHA组成。DHA在母乳喂养期间供应丰富，并且人乳中的DHA含量很高。人乳中的DHA浓度为总脂肪酸的0.07%至大于1.0%范围内，平均为约0.32%。如果母亲的膳食中鱼类含量高，则人乳中的DHA含量会更高。

应当理解，前面的一般性描述和以下的详细描述都呈现了本公开的实施方案，并且旨在提供用于理解要求保护的本公开的性质和特性的概述或框架。该描述用于解释所要求保护的主题的原理和操作。通过阅读以下公开内容，本领域技术人员将容易明白本公开的其他和另外的特征和优点。

附图简述

图1图示根据实施例1在腹绞痛状态(上部双条)和非腹绞痛状态(上部双框)期间取自单个受试者的粪便样品的代谢组学概况；

图2图示根据实施例2使用PLSDA分析(考虑所有化合物和所有婴儿)通过GC-MS分析的腹绞痛婴儿(红色)和对照者(蓝色)粪便的三份样品的分离；

图3报告根据实施例3在分析特定菌群时获得的变性梯度凝胶电泳(DGGE)输出；凝胶中的每个条带代表不同的群体并且与对照婴儿相比，腹绞痛婴儿具有更复杂的微生物群；

图4图示根据实施例3，7名腹绞痛婴儿中的4名以及7名对照婴儿中的1名存在包括活泼瘤胃球菌的布劳特氏属(蓝色箭头)并且7名腹绞痛婴儿中的6名以及7名对照婴儿中的3名中存在活泼瘤胃球菌(红色箭头)；

图5图示根据实施例6的家族水平的聚类分析；

图6图示根据实施例6，物种水平的聚类分析支持活泼瘤胃球菌在引起婴儿腹绞痛中的作用(活泼瘤胃球菌在许多样品，特别是样品24、25和32中的存在，参见紫色条，这些样品均来自腹绞痛婴儿(腹绞痛样品用红色圆圈标记：10、24、25、31、32、35和38)；

图7图示根据实施例6，两组中物种的差异性丰度；除了活泼瘤胃球菌之外，两组之间的嗜血杆菌、阿克曼菌(Akkermansia)和短双歧杆菌似乎差异很大。

详述

现在将详细参考本公开的实施方案，其一个或多个实施例在下文中阐述。每个实施例通过解释本公开的营养组合物提供，并且不是限制。实际上，对于本领域技术人员显而易见的是，在不脱离本公开的范围的情况下，可以对本公开的教导进行各种修改和变化。例如，作为一个实施方案的一部分示出或描述的特征可以与另一实施方案一起使用以产生又一个实施方案。

因此，本公开旨在涵盖落入所附权利要求及其等同物的范围内的这些修改和变化。本公开的其他目的、特征和方面在以下详细描述中公开或显而易见。本领域普通技术人员应理解，本讨论仅是示例性实施方案的描述，并不意图限制本公开的更广泛方面。

本公开通常涉及适合施用到儿科受试者，尤其是婴儿的营养组合物。另选地，可以将所公开的营养组合物施用到孕妇或哺乳期妇女，以便为其婴儿提供所述益处。另外，本公开涉及通过经由施用本文公开的营养组合物改变受试者的肠道微生物群来管理儿科受试者的腹绞痛的方法。本公开的一些实施方案涉及增强或促进儿科受试者中有益菌如乳杆菌和双歧杆菌物种的浓度的增加，同时抑制可以促进腹绞痛发作的细菌物种，尤其是布劳特氏属包括活泼瘤胃球菌属成员的生长。

“营养组合物”意指满足受试者营养需求的至少一部分的物质或制剂。术语“一种或多种营养物”、“一种或多种营养配方食品”、“一种或多种肠营养物”和“一种或多种营养补充剂”用作整个本公开的一种或多种营养组合物的非限制性实例。此外，“一种或多种营养组合物”可以指液体、粉末、凝胶、糊剂、固体、浓缩物、悬浮液或即用肠内配方食品、口服配方食品、婴儿配方食品、儿科受试者配方食品、儿童配方食品、成人奶和/或成人配方食品的形式。

“小儿腹绞痛”或“腹绞痛”被定义为在其他方面都健康的婴儿中阵发性(突然、短暂和重复)、过度、无法安慰的哭泣，每天超过三小时，每周至少三天，持续一周或更久。这在两周至四个月大的婴儿中最常观察到。根据Rome III分类将其视为婴儿期的功能性胃肠道病症。持续的婴儿腹绞痛会导致父母疲劳和痛苦，并且可能导致父母关系紧张，以及父母与婴儿的关系不佳。

术语“肠内”意指通过胃肠道或消化道递送或在胃肠道或消化道内递送。“肠内施用”包括经口喂养、胃内喂养、经幽门施用或施用到消化道内的任何其他施用。“施用”比“肠内施用”更广泛，并且包括肠胃外施用或将物质带入受试者体内的任何其他施用途径。

“儿科受试者”意指不超过13岁的人。在一些实施方案中，儿科受试者是指出生至8岁的人受试者。在其他实施方案中，儿科受试者是指1岁至6岁的人受试者。在更进一步的实施方案中，儿科受试者是指6岁至12岁的人类受试者。术语“儿科受试者”可以指婴儿(早产或足月)和/或儿童，如下所述。

“婴儿”意指从出生到不超过一岁的年龄范围内的人受试者，并且包括0至12个月的校正年龄的婴儿。短语“校正年龄”意指婴儿的实际年龄减去婴儿早产的时间。因此，如果婴儿已经足月，则校正年龄是婴儿的年龄。术语婴儿包括出生体重轻的婴儿、出生体重很轻的婴儿、出生体重极轻的婴儿和早产儿。“早产”意指在妊娠37周结束前出生的婴儿。“晚期早产”意指在妊娠34周至36周的婴儿形式。“足月”意指在妊娠37周后出生的婴儿。“出生体重轻的婴儿”意指体重轻于2500克(约5磅，8盎司)的婴儿。“出生体重很轻的婴儿”意指体重轻于1500克(约3磅，4盎司)的婴儿。“出生体重极轻的婴儿”意指体重轻于1000克(约2磅，3盎司)的婴儿。

“儿童”意指年龄从12个月到13岁的受试者。在一些实施方案中，儿童是1岁至12岁的受试者。在其他实施方案中，术语“儿童”是指年龄在1岁和约6岁之间，或在约7岁和约12岁之间的受试者。在其他实施方案中，术语“儿童”是指12个月和约13岁之间的任何年龄范围。

术语“水解度”是指通过水解方法破坏肽键的程度。用于表征营养组合物的水解蛋白质组分的蛋白质水解的程度由配制领域的普通技术人员通过量化所选制剂的蛋白质组分的氨基氮与总氮之比(AN/TN)容易地确定。氨基氮组分通过USP滴定方法定量以确定氨基氮含量，而总氮组分通过Tecator Kjeldahl方法确定，所有这些都是分析化学领域的普通技术人员熟知的方法。

术语“部分水解”意指具有大于0%但小于约50%的水解度。

术语“深度水解”意指具有大于或等于约50%的水解度。

术语“不含蛋白质”意指不含可测量之量的蛋白质，如通过标准蛋白质检测方法如十二烷基(月桂基)硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)或尺寸排阻色谱法测量。在一些实施方案中，营养组合物基本上不含蛋白质，其中“基本上不含”在下文中定义。

“婴儿配方食品”意指满足婴儿的营养需求的至少一部分的组合物。在美国，婴儿配方食品的含量由21 C.F.R.第100、106和107节中阐述的联邦法规规定。这些法规定义了常量营养素、维生素、矿物质和其他成分水平，以尝试模拟人类母乳的营养和其他性质。

“较大婴儿配方食品”意指满足6个月以上的婴儿和1-3岁幼儿的营养需求的至少一部分的组合物。较大婴儿配方食品的法典标准(CODEX STAN 156-1987)在第3节中定义了较大婴儿配方食品的组成要求。

“乳基”意指包含从哺乳动物的乳腺中抽取或提取的至少一种组分。在一些实施方案中，乳基营养组合物包含源自驯化的有蹄类动物、反刍动物或其他哺乳动物或其任何组合的乳组分。

此外，在一些实施方案中，乳基意指包含牛酪蛋白、乳清、乳糖或其任何组合。另外，“乳基营养组合物”可以指包含本领域已知的任何乳源或乳基产品的任何组合物。

“乳”意指从哺乳动物的乳腺中抽取或提取的组分。在一些实施方案中，营养组合物包含源自驯化的有蹄类动物、反刍动物或其他哺乳动物或其任何组合的乳组分。

“分级程序”包括将一定量的混合物分成许多较小量(称为级分)的任何过程。级分的组成可以与混合物和其他级分不同。分级程序的实例包括但不限于熔融分级、溶剂分级、超临界流体分级和/或其组合。

“脂肪球”是指由磷脂和其他膜和/或血清蛋白包围的少量脂肪，其中脂肪本身可以是任何植物或动物脂肪的组合。

“极性脂质”是天然膜的主要成分，存在于所有生物体中。乳中的极性脂质(即，乳极性脂质)主要位于乳脂肪球膜中。极性脂质也存在于除乳之外的来源中，诸如蛋、肉和植物中。

极性脂质通常分为磷脂和鞘脂(包括神经节苷脂)，它们是具有疏水尾部和亲水头基的两亲分子。甘油磷脂由甘油骨架组成，其上的两个脂肪酸在sn-1和sn-2位上酯化。这些脂肪酸比乳的甘油三酯级分更不饱和。在第三羟基上，可以连接具有不同有机基团(胆碱、丝氨酸、乙醇胺等)的磷酸酯残基。通常，与sn-2位相比，sn-1位上的脂肪酸链更饱和。溶血磷脂仅含有一个酰基，主要位于sn-1位。头基保持相似。鞘脂的特征结构单元是类鞘氨醇碱，其是含有两个或三个羟基的长链(12-22个碳原子)脂族胺。鞘氨醇(d18:1)是哺乳动物鞘脂中最普遍的类鞘氨醇碱，其含有18个碳原子、两个羟基和一个双键。当该类鞘氨醇碱的氨基通常与饱和脂肪酸连接时，形成神经酰胺。在该神经酰胺单元上，有机磷酸酯基团可以结合形成鞘磷脂(sphingophospholipid)(例如，在鞘磷脂(sphingomyelin)的情况下为磷酸胆碱)或糖类以形成神经鞘糖脂(糖基神经酰胺)。单葡糖胺神经酰胺如葡糖神经酰胺或半乳糖神经酰胺通常表示为脑苷脂，而具有末端半乳糖胺残基的三-和四糖基神经酰胺表示为红细胞糖苷酯。最后，神经节苷脂是高度复杂的低聚糖基神经酰胺，除葡萄糖、半乳糖和半乳糖胺外还含有一个或多个唾液酸基团。

“营养完全”是指可以用作唯一营养来源的组合物，其将提供基本上所有每日所需量的维生素、矿物质和/或微量元素以及蛋白质、碳水化合物和脂质。实际上，“营养完全”描述提供足够量的碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和支持受试者正常生长和发育所需的能量的营养组合物。

因此，根据定义，对于早产儿来说“营养完全”的营养组合物将提供定性上和定量上足够量的碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和早产儿生长所需的能量。

根据定义，对于足月婴儿而言“营养完全”的营养组合物将提供定性上和定量上足够量的所有碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和足月婴儿成长所需的能量。

根据定义，对于儿童而言“营养完全”的营养组合物将提供定性上和定量上足够量的所有碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和儿童成长所需的能量。

当应用于营养素时，术语“必需”是指不能由身体以足以用于正常生长和维持健康的量合成，因此必须由膳食提供的任何营养素。当应用于营养素时，术语“条件必需”意指在身体得不到足够量的前体化合物进行内源性合成的条件下必须由膳食供应营养素。

“益生菌”是指活的微生物，当作为食物的一部分以足够的量食用时，赋予宿主健康益处。益生菌也应当在科学上被证实为人类所安全使用。

术语“灭活的益生菌”意指如下益生菌，其中所提及的益生菌的代谢活性或繁殖能力已被降低或破坏。然而，“灭活的益生菌”在细胞水平上仍然保留其细胞结构或与细胞相关的其他结构，例如胞外多糖和其生物乙二醇-蛋白质和DNA/RNA结构的至少一部分。如本文所用，术语“失活的”与“无活力的”同义。

“益生元”意指通过选择性地刺激消化道中一种或有限数量的细菌的生长和/或活性而有益地影响宿主的不可消化的食物成分，其可以改善宿主的健康。

“支链脂肪酸”(“BCFA”)意指含有从碳链分支出的碳成分的脂肪酸。通常，支链是烷基支链，尤其是甲基，但乙基和丙基支链也是已知的。与等同的直链脂肪酸相比，加入甲基支链降低了熔点。这包括在碳链中具有偶数碳原子的支链脂肪酸。这些的实例可以是十四烷酸、十六烷酸的异构体。

“反式脂肪酸”是指具有反式异构体的不饱和脂肪。反式脂肪可以是单不饱和或多不饱和的。反式是指与双键中涉及的碳原子键合的两个氢原子的排列。在反式排列中，氢位于键的相对侧。因此，反式脂肪酸是以反式几何构造的含有一个或多个双键的脂质分子。

“磷脂”意指含有甘油二酯、磷酸酯基团和简单有机分子的有机分子。磷脂的实例包括但不限于磷脂酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰肌醇磷酸酯、磷脂酰肌醇二磷酸酯和磷脂酰肌醇三磷酸酯、神经酰胺磷酰胆碱、神经酰胺磷酰乙醇胺和神经酰胺磷酰甘油。该定义还包括鞘脂、糖脂和神经节苷脂。

“植物营养素”意指植物中天然存在的化合物。植物营养素可以包含在任何植物源物质或提取物中。术语“一种或多种植物营养素”涵盖由植物产生的几大类化合物，诸如多酚化合物、花青素、原花青素和黄烷-3-醇(即，儿茶素、表儿茶素)，并且可以源自例如水果、种子或茶提取物。另外，术语植物营养素包括所有类胡萝卜素、植物甾醇、硫醇和其他植物源化合物。此外，如技术人员应理解，除了蛋白质、纤维或其他植物源组分之外，植物提取物可以包括植物营养素，诸如多酚。因此，例如，除了其他植物源物质之外，一种或多种苹果或葡萄籽提取物可以包括有益的植物营养素组分，诸如多酚。

“β-葡聚糖”意指所有β-葡聚糖，包括特定类型的β-葡聚糖，诸如β-1,3-葡聚糖或β-1,3;1,6-葡聚糖。此外，β-1,3;1,6-葡聚糖是一种类型的β-1,3-葡聚糖。因此，术语“β-1,3-葡聚糖”包括β-1,3;1,6-葡聚糖。

“果胶”是指包含可以在植物细胞壁中发现的半乳糖醛酸的任何天然存在的低聚糖或多糖。本领域已知具有不同物理和化学性质的不同品种和等级的果胶。实际上，果胶的结构可以在植物之间、组织之间且甚至在单个细胞壁内显著变化。通常，果胶由带负电的酸性糖(半乳糖醛酸)组成，并且一些酸性基团呈甲酯基团的形式。果胶的酯化程度是与用甲醇酯化的吡喃半乳糖醛酸单元连接的羧基百分比的量度。

酯化度小于50%的果胶(即，小于50%的羧基被甲基化以形成甲酯基团)被归类为低酯低甲氧基或低甲基化(“LM”)果胶，而具有50%或更高的酯化度(即，大于50%的羧基被甲基化)的那些被归类为高酯高甲氧基或高甲基化(“HM”)果胶。很低(“VL”)果胶是低甲基化果胶的子集，其酯化度小于约15%。

如本文所用，“来自非人来源的乳铁蛋白”意指由除人乳之外的来源产生或获得的乳铁蛋白。例如，用于本公开的乳铁蛋白包括由遗传修饰的生物体产生的人乳铁蛋白以及非人乳铁蛋白。如本文所用，术语“生物体”是指任何连续的生命系统，例如动物、植物、真菌或微生物。

如本文所用，“非人乳铁蛋白”意指乳铁蛋白，其氨基酸序列不同于人乳铁蛋白的氨基酸序列。

“病原体”是指引起疾病状态或病理综合症的生物体。病原体的实例可以包括细菌、病毒、寄生虫、真菌、微生物或其组合。

“调节(modulate或modulating)”意指发挥改变、控制和/或调节影响。在一些实施方案中，术语“调节”意指对特定组分的水平/量表现出增加或刺激作用。在其他实施方案中，“调节”意指对特定组分的水平/量表现出降低或抑制作用。

除非另有说明，否则本文所用的所有百分比、份数和比率均基于总制剂的重量计。

指定为“每天”施用的所有量可以在24小时期间内以一个单位剂量以一份施用或以两个或更多个剂量或份施用。

本公开的营养组合物可以基本上不含本文所述的任何任选的或选择的成分，条件是剩余的营养组合物仍含有本文所述的所有所需成分或特征。在本文中，并且除非另有说明，否则术语“基本上不含”意指所选择的组合物可以含有少于功能量，通常小于0.1重量%的任选成分，并且还包括0重量%的这种任选或所选定的成分。

除非另有说明或通过引用的上下文清楚地暗示相反的含义，否则对本公开的单数特征或限制的所有引用应包括相应的复数特征或限制，反之亦然。

本文所用的方法或工艺步骤的所有组合可以以任何顺序执行，除非另有说明或通过引用组合的上下文清楚地暗示相反情况。

本公开的方法和组合物，包括其组分，可以包含、由或基本上由本文所述的实施方案的基本要素和限制以及本文所述或以其他方式可用于营养组合物中的任何另外或任选的成分、组分或限制组成。

如本文所用，术语“约”应解释为指代指定为任何范围的一个或多个端点的两个数字。对范围的任何提及都应视为对该范围内的任何子集提供支持。

本公开涉及营养组合物，其可以增加受试者肠道中LA代谢益生菌与活泼瘤胃球菌的比率。在一个实施方案中，营养组合物是婴儿配方食品，其包含LA代谢益生菌和包含低聚半乳糖(GOS)和聚葡萄糖(PDX)的益生元组合物。本公开的营养组合物支持儿科人受试者如婴儿(早产和/或足月)的整体健康和发育，并且可以预防或减少腹绞痛。

相信所公开的营养组合物中营养素的独特组合能够为婴儿提供减少腹绞痛的新颖且意想不到的益处，并且为腹绞痛婴儿的父母提供缓解。

营养组合物中营养素的组合以协同方式组合以提供前述益处。例如，提供具有包含聚葡萄糖和低聚半乳糖的益生元的LA代谢益生菌可以协同地增加胃肠道中的特定有益细菌物种，包括双歧杆菌物种，诸如短双歧杆菌，同时还竞争性地减少非LA代谢细菌如活泼瘤胃球菌的存在。短双歧杆菌或其他LA代谢益生菌与活泼瘤胃球菌的比率的这种增加导致婴儿肠道中由LA产生CLA的显著增加，导致腹绞痛显著减少。可以使用来自婴儿的粪便样品通过分析粪便微生物群确定婴儿肠道中存在短双歧杆菌或一种或多种其他LA代谢益生菌和包括活泼瘤胃球菌的布劳特氏属(且，因此测量一种与另一种的比率的方式)。用于从婴儿的粪便样品中提取DNA的方案、DGGE分析和定量PCR是Sagheddu等，2016所描述的那些。根据Payne AN, Chassard C, Banz Y, Lacroix C执行用于测序的DNA提取和序列分析。儿童肠道微生物群的组成和代谢活性证明在结肠发酵的体外模型中对不同营养素负荷的差异性适应。FEMS Microbiol Ecol (2012) 80:608-23. doi:10.111l/j.1574-6941.2012.01330.x。

其他益生菌也可以包含在本公开的营养组合物中，以便与布劳特氏物种竞争营养素，从而减少肠道中布劳特氏菌的存在；这些可以选自双歧杆菌物种或乳杆菌物种，并且可以包括鼠李糖乳杆菌GG (LGG)(ATCC号53103)，除短双歧杆菌之外的双歧杆菌物种，诸如长双歧杆菌BB536 (BL999，ATCC：BAA-999)、长双歧杆菌AH 1206 (NCIMB：41382)、婴儿双歧杆菌35624(NCIMB：41003)和动物双歧杆菌乳酸亚种BB-12 (DSM号10140)或其任何组合。

在一些实施方案中，待施用到儿科受试者或孕妇或哺乳期妇女的LA代谢益生菌的每日量可以自约1×10⁴至约1×10¹¹ cfu变化。在某些实施方案中，本公开的营养组合物可以包含以每100 g粉末约1×10⁴至约1×10¹¹ cfu的水平的LA代谢益生菌(当营养组合物以粉末形式提供用于以后重构时)。或者，在实施方案中，本公开的营养组合物可以包含以每100 cal约1×10³至约1×10¹² cfu的益生菌的水平的LA代谢益生菌。在其他实施方案中，本公开的营养组合物可以包含以每100 cal约1×10⁴至约1×10¹⁰ cfu的益生菌的水平的LA代谢益生菌；在又其他实施方案中，LA代谢益生菌以每100 cal约1×10⁶至约1×10⁹ cfu的水平存在。

此外，由于益生菌包含活细胞，因此可能需要通过将至少一种磷脂和至少一种甘油酯共混在一起；将益生菌、保护基质和水组合以产生混合物；和干燥步骤的混合物到最终含水量为约4%或更低来为益生菌提供保护基质，从而确保在加工、储存和运输期间的持续存活。该方法可以包括将干燥的混合物添加到粉状营养产品或将干燥的混合物封入胶囊中的另外步骤。

如上所提，在某些实施方案中，营养组合物还含有一种或多种益生元(也称为益生元组分)。益生元发挥健康益处，其可以包括但不限于选择性刺激一种或有限数量的有益肠细菌如LA代谢益生菌的生长和/或活性，刺激摄入的益生菌微生物的生长和/或活性，选择性减少肠道病原体，以及有利地影响肠道短链脂肪酸分布。这种益生元可以是天然存在的，合成的，或通过生物体和/或植物的遗传操作开发的，而无论这种新来源现在是已知的，还是后来开发的。可用于本公开的益生元可以包括低聚糖、多糖和含有果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的其他益生元。

更具体地讲，可用于本公开的益生元可以包括聚葡萄糖、聚葡萄糖粉、乳果糖、乳蔗糖、棉子糖、低聚葡萄糖、菊粉、低聚果糖、低聚异麦芽糖、大豆低聚糖、乳糖蔗糖、低聚木糖、低聚壳聚糖、低聚甘露糖、低聚阿拉伯糖(aribino-oligosaccharide)、唾液酸低聚糖、低聚岩藻糖、低聚半乳糖和低聚龙胆糖。

在一个实施方案中，营养组合物中存在的益生元的总量可以为约1.0 g/L至约10.0 g/L组合物。更优选地，营养组合物中存在的益生元的总量可以为约2.0 g/L至约8.0g/L组合物。在一些实施方案中，营养组合物中存在的益生元的总量可以为约0.01 g/100kcal至约1.5 g/100 kcal。在某些实施方案中，营养组合物中存在的益生元的总量可以为约0.15 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal。此外，营养组合物可以包含含有聚葡萄糖的益生元组分。在一些实施方案中，益生元组分包含至少20%w/w的聚葡萄糖或其混合物。

在一个实施方案中，营养组合物中聚葡萄糖的量可以在约0.015 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的范围内。在另一个实施方案中，聚葡萄糖的量在约0.2 g/100 kcal至约0.6 g/100 kcal的范围内。在一些实施方案中，聚葡萄糖可以以足以提供约1.0 g/L和10.0g/L之间的量包含在营养组合物中。在另一个实施方案中，营养组合物含有在约2.0 g/L和8.0 g/L之间的量的聚葡萄糖。并且，在其他实施方案中，营养组合物中聚葡萄糖的量可以为约0.05 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal。

益生元组分还包含低聚半乳糖。在一个实施方案中，营养组合物中低聚半乳糖的量可以为约0.015 g/100 kcal至约1.0 g/100 kcal。在另一个实施方案中，营养组合物中低聚半乳糖的量可以为约0.2 g/100 kcal至约0.5 g/100 kcal。

在本发明的一个特定的实施方案中，聚葡萄糖与低聚半乳糖组合施用。

在一个特定的实施方案中，将低聚半乳糖和聚葡萄糖以至少约0.015 g/100 kcal或约0.015 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的总量补充到营养组合物中。在一些实施方案中，营养组合物可以包含总量为约0.1 g/100 kcal至约1.0 g/100 kcal的低聚半乳糖和聚葡萄糖。

在某些实施方案中，本公开的营养组合物中还包含来自非人来源的乳铁蛋白。乳铁蛋白是含有1-4个聚糖的约80 kD的单链多肽(取决于物种)。不同物种的乳铁蛋白的3-D结构非常相似，但不相同。每种乳铁蛋白包含两个同源的叶，称为N-叶和C-叶，分别称作分子的N-末端和C-末端部分。每个叶进一步由两个子叶或结构域组成，其形成裂隙，其中三价铁离子（Fe³⁺）与碳酸(氢)根阴离子协同配位而紧密结合。这些结构域分别称为N1、N2、C1和C2。乳铁蛋白的N-末端具有强阳离子肽区域，其负责许多重要的结合特性。乳铁蛋白具有非常高的等电点(约pI 9)，并且其阳离子性质在其防御细菌、病毒和真菌病原体的能力方面起主要作用。在乳铁蛋白的N-末端区域内存在若干个阳离子氨基酸残基簇，其介导乳铁蛋白对抗宽范围的微生物的生物活性。例如，人乳铁蛋白的N-末端残基1-47(牛乳铁蛋白的1-48)对乳铁蛋白的铁非依赖性生物活性是关键的。在人乳铁蛋白中，残基2至5(RRRR)和残基28至31(RKVR)是N-末端富含精氨酸的阳离子结构域，其对乳铁蛋白的抗微生物活性尤其关键。在牛乳铁蛋白中发现N-末端的类似区域(残基17-42；FKCRRWQWRMMKKLGAPSITCVRRAFA)。

来自不同宿主物种的乳铁蛋白的氨基酸序列可以不同，但通常具有相对高的等电点，在内叶的末端区域具有带正电荷的氨基酸。适用于本公开的非人乳铁蛋白包括但不限于与人乳铁蛋白的氨基酸序列具有至少48%同源性的那些。例如，牛乳铁蛋白(“bLF”)具有与人乳铁蛋白具有约70%序列同源性的氨基酸组成。在一些实施方案中，非人乳铁蛋白与人乳铁蛋白具有至少55%同源性，并且在一些实施方案中，具有至少65%同源性。可接受用于本公开的非人乳铁蛋白包括但不限于bLF、猪乳铁蛋白、马乳铁蛋白、水牛乳铁蛋白、山羊乳铁蛋白、鼠乳铁蛋白和骆驼乳铁蛋白。

在一个实施方案中，来自非人来源的乳铁蛋白以至少约15 mg/100 kcal的量存在于营养组合物中。在某些实施方案中，营养组合物可以包含在约15 mg/100 kcal和约300mg/100 kcal之间的乳铁蛋白。在另一个实施方案中，当营养组合物是婴儿配方食品时，营养组合物可以包含以约60 mg/100 kcal至约150 mg/100 kcal的量的乳铁蛋白；在另一个实施方案中，营养组合物可以包含约60 mg/100 kcal至约100 mg/100 kcal的乳铁蛋白。

在一些实施方案中，营养组合物可以包含每ml配方食品约0.5 mg至约1.5 mg的量的乳铁蛋白。在替代人乳的营养组合物中，乳铁蛋白可以以每ml配方食品约0.6 mg至约1.3mg的量存在。在某些实施方案中，营养组合物可以包含每升约0.1 g至约2 g的乳铁蛋白。在一些实施方案中，营养组合物包含每升配方食品约0.6 g至约1.5 g的乳铁蛋白。

在某些实施方案中使用的bLF可以是从全脂乳中分离的和/或具有低体细胞计数的任何bLF，其中“低体细胞计数”是指小于200,000个细胞/毫升的体细胞计数。举例来说，合适的bLF可从新西兰莫林斯维尔的Tafua Co-operative Dairy Co. Ltd.，荷兰阿默斯福特的FrieslandCampina Domo或新西兰奥克兰的Fonferra Co-Operative Group Limited获得。

用于本公开的来自非人来源的乳铁蛋白可以例如从非人动物的乳中分离或由遗传修饰的生物体产生。例如，在美国专利号4,791,193中，该专利的全文通过引用结合到本文中，Okonogi等公开了一种生产高纯度的牛乳铁蛋白的方法。通常，所公开的方法包括三个步骤。首先使原料乳材料与弱酸性阳离子交换剂接触以吸附乳铁蛋白，然后进行第二步骤，其中进行洗涤以除去未吸附的物质。随后进行解吸步骤，其中除去乳铁蛋白以产生纯化的牛乳铁蛋白。其他方法可以包括美国专利号7,368,141、5,849,885、5,919,913和5,861,491中描述的步骤，其公开内容全部通过引用结合到本文中。

在某些实施方案中，本公开中使用的乳铁蛋白可以通过用以从乳源中分离蛋白质的膨胀床吸附(“EBA”)方法来提供。EBA，有时也称为稳定化流化床吸附，是从乳源中分离乳蛋白如乳铁蛋白的方法，包括建立包含颗粒基质的膨胀床吸附柱，将乳源施加到基质上，以及用包含约0.3 M至约2.0 M氯化钠的洗脱缓冲液从基质洗脱乳铁蛋白。任何哺乳动物乳源均可以用于本发明方法，虽然在特定实施方案中，所述乳源是牛乳源。在一些实施方案中，乳源包括全脂乳、减脂乳、脱脂乳、乳清、酪蛋白或其混合物。

在特定的实施方案中，目标蛋白是乳铁蛋白，虽然也可以分离其他乳蛋白，如乳过氧化物酶或乳白蛋白。在一些实施方案中，所述方法包括以下步骤：建立包含颗粒基质的膨胀床吸附柱，将乳源施加到基质上，以及用约0.3 M至约2.0 M氯化钠从基质中洗脱乳铁蛋白。在其他实施方案中，乳铁蛋白用约0.5 M至约1.0 M氯化钠洗脱，而在进一步的实施方案中，乳铁蛋白用约0.7 M至约0.9 M氯化钠洗脱。

膨胀床吸附柱可以是本领域已知的任何一种，诸如美国专利号7,812,138、6,620,326和6,977,046中所述的那些，其公开内容通过引用结合到本文中。在一些实施方案中，将乳源施加到以膨胀模式的柱上，并且以膨胀或填充模式执行洗脱。在特定的实施方案中，洗脱以膨胀模式执行。例如，膨胀模式下的膨胀比可以是约1至约3，或约1.3至约1.7。EBA技术在国际公布申请号WO 92/00799、WO 02/18237、WO 97/17132中进一步描述，这些申请的全部内容通过引用结合到本文中。

乳铁蛋白的等电点为约8.9。现有的分离乳铁蛋白的EBA方法使用200 mM氢氧化钠作为洗脱缓冲液。因此，系统的pH升高至超过12，并且通过不可逆的结构变化，可以包含乳铁蛋白的结构和生物活性。现已发现可以将氯化钠溶液用作从EBA基质中分离乳铁蛋白的洗脱缓冲液。在某些实施方案中，氯化钠具有约0.3 M至约2.0 M的浓度。在其他实施方案中，乳铁蛋白洗脱缓冲液具有约0.3 M至约1.5 M，或约0.5 M至约1.0 M的氯化钠浓度。

在一些实施方案中，本公开的营养组合物还可以含有LCPUFA的来源；尤其是包含二十二碳六烯酸的LCPUFA的来源。其他合适的LCPUFA包括但不限于α-亚油酸、γ-亚油酸、亚油酸、亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)和花生四烯酸(ARA)。

在一个实施方案中，特别是如果营养组合物是婴儿配方食品，则营养组合物补充有DHA和ARA。在该实施方案中，ARA:DHA的重量比可以为约1:3至约9:1。在一个特定的实施方案中，ARA:DHA的比率为约1:2至约4:1。

营养组合物中长链多不饱和脂肪酸的量有利地为至少约5 mg/100 kcal，并且可以自约5 mg/100 kcal至约100 mg/100 kcal变化，更优选自约10 mg/100 kcal至约50 mg/100 kcal变化。

可以使用本领域已知的标准技术向营养组合物补充含有DHA和/或ARA的油。例如，可以通过替换通常存在于组合物中的等量的油如高油酸葵花籽油，将DHA和ARA添加到组合物中。作为另一个实例，含有DHA和ARA的油可以通过替换等量的通常存在于没有DHA和ARA的组合物中的总脂肪共混物的其余部分而添加到组合物中。

如果使用的话，DHA和/或ARA的来源可以是本领域已知的任何来源，诸如海洋油、鱼油、单细胞油、蛋黄脂质和脑脂质。在一些实施方案中，DHA和ARA来源于单细胞Martek油、DHASCO^®和ARASCO^®或其变体。DHA和ARA可以呈天然形式，条件是LCPUFA来源的其余部分不会对婴儿产生任何实质性的有害影响。另选地，DHA和ARA可以以精制形式使用。

在一个实施方案中，DHA和ARA的来源是单细胞油，如美国专利号5,374,567；5,550,156；和5,397,591中所教导，这些美国专利的公开内容通过引用结合到本文中。然而，本公开不仅仅限于这些油。

在一些实施方案中，营养组合物可以包含乳源富脂质级分。在某些实施方案中，富脂质级分包含富乳清蛋白浓缩物(eWPC)。乳源富脂质级分可以通过任何数量的分级技术生产。这些技术包括但不限于熔点分级、有机溶剂分级、超临界流体分级以及其任何变体和组合。在一些实施方案中，营养组合物可以包含源自含有乳脂肪球的乳的富脂质级分。另选地，eWPC可商购获得，包括以商品名Lacprodan MFGM-10。另一种合适的富乳制品可以商品名Lacprodan PL-20商购获得。Lacprodan MFGM-10和Lacprodan PL-20可从Aria FoodIngredients，Viby, Denmark获得。通过添加富乳制品，婴儿配方食品和其他儿科营养组合物的脂质组成可以更接近于人乳的脂质组成。例如，包含Lacprodan MFGM-10或LacprodanPL-20的示例性婴儿配方食品中的磷脂(mg/L)和神经节苷脂(mg/L)的理论值可以如表1所示计算：

表1

在一些实施方案中，富脂质级分以约0.5克/升(g/L)至约10 g/L的水平包含在本公开的营养组合物中；在其他实施方案中，富乳制品以约1 g/L至约9 g/L的水平存在。在其他实施方案中，富脂质级分以约3 g/L至约8 g/L的水平存在于营养组合物中。另选地，在某些实施方案中，富脂质级分以约0.06克/100千卡(g/100 kcal)至约1.5 g/100 kcal的水平包含在本公开的营养组合物中；在其他实施方案中，富脂质级分以约0.3 g/100 kcal至约1.4g/100 kcal的水平存在。在其他实施方案中，富脂质级分产物以约0.4 g/100 kcal至约1g/100 kcal的水平存在于营养组合物中。

在某些实施方案中，添加富脂质级分或包含乳脂肪球的富脂质级分可以为营养组合物提供饱和脂肪酸、反式脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、BCFA、CLA、胆固醇、磷脂和/或乳脂肪球膜蛋白质的来源。

乳脂肪球可以具有至少约2 μm的平均直径(体积-表面积平均直径)。在一些实施方案中，平均直径在约2 μm至约13 μm范围内。在其他实施方案中，乳脂肪球可以在约2.5 μm至约10 μm范围内。在其他实施方案中，乳脂肪球可以具有在约3 μm至约6 μm范围内的平均直径。在某些实施方案中，小球的比表面积小于3.5 m²/g，并且在其他实施方案中，小球的比表面积在约0.9 m²/g至约3 m²/g之间。不受任何特定理论的束缚，相信上述大小的乳脂肪球更容易被脂肪酶接近，因此引起更好的针对脂质消化的消化。

在一些实施方案中，富脂质级分和/或乳脂肪球含有饱和脂肪酸。饱和脂肪酸可以约0.1 g/100 kcal至约8.0 g/100 kcal的浓度存在。在某些实施方案中，饱和脂肪酸可以约0.5 g/100 kcal至约2.0 g/100 kcal存在。在其他实施方案中，饱和脂肪酸可以约3.5g/100 kcal至约6.9 g/100 kcal存在。

适合包含在内的饱和脂肪酸的实例包括但不限于丁酸、戊酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸、二十四烷酸、十四烷酸、十六烷酸、棕榈酸和十八烷酸和/或其组合及混合物。

另外，在一些实施方案中，富脂质级分和/或乳脂肪球可以包含月桂酸。月桂酸，也称为十二烷酸，是具有12个碳原子的链的饱和脂肪酸，并且被认为是目前在人母乳中发现的主要抗病毒且抗菌的物质之一。乳脂肪球可以在Sn-1、Sn-2和/或Sn-3位富含含有月桂酸的甘油三酯。不受任何特定理论的束缚，相信当摄入富脂质级分时，口腔脂肪酶和胰脂肪酶将甘油三酯水解成包括单月桂酸和游离月桂酸的甘油酯的混合物。

小球中月桂酸的浓度自80 mg/100 ml到800 mg/100 ml变化。小球中单月桂基的浓度可以在20 mg/100 ml至300 mg/100 ml进料的范围内。在一些实施方案中，该范围是60mg/100 ml至130 mg/100 ml。

在某些实施方案中，富脂质级分和/或乳脂肪球可以含有反式脂肪酸。包含在乳脂肪球中的反式脂肪酸可以是单不饱和或多不饱和的反式脂肪酸。在一些实施方案中，反式脂肪酸可以约0.2 g/100 kcal至约7.0 g/100 kcal的量存在。在其他实施方案中，反式脂肪酸可以约3.4 g/100 kcal至约5.2 g/100 kcal的量存在。在其他实施方案中，反式脂肪酸可以约1.2 g/100 kcal至约4.3 g/100 kcal存在。

包含的反式脂肪酸的实例包括但不限于异油酸或反油酸及其混合物。此外，当食用时，哺乳动物将异油酸转化为瘤胃酸，这是一种展示出抗癌性质的共轭亚油酸。此外，富含异油酸的膳食可能有助于降低总胆固醇、LDL胆固醇和甘油三酯水平。

在一些实施方案中，富脂质级分和/或乳脂肪球可以包含BCFA。在一些实施方案中，BCFA以约0.2 g/100 kcal至约5.82 g/100 kcal的浓度存在。在另一个实施方案中，BCFA以约2.3 g/100 kcal至约4.2 g/100 kcal的量存在。在又一个实施方案中，BCFA以约4.2 g/100 kcal至约5.82 g/100 kcal存在。在其他实施方案中，乳脂肪球包含至少一种BCFA。

在人乳中鉴定出的BCFA优选包含在营养组合物中。向婴儿或儿童配方食品中添加BCFA允许这类配方食品反映人乳的组成和功能并促进一般健康和安康。

在某些实施方案中，富脂质级分和/或乳脂肪球可以包含CLA。在一些实施方案中，CLA可以约0.4 g/100 kcal至约2.5 g/100 kcal的浓度存在。在其他实施方案中，CLA可以约0.8 g/100 kcal至约1.2 g/100 kcal存在。在其他实施方案中，CLA可以约1.2 g/100kcal至约2.3 g/100 kcal存在。在其他实施方案中，乳脂肪球包含至少一种CLA。

在人乳中鉴定出的CLA优选包含在营养组合物中。通常，CLA被婴儿从哺乳母亲的人乳中吸收。在婴儿或儿童配方食品中添加CLA允许这些配方食品反映人乳的组成和功能并促进一般健康和安康。

在用于营养组合物的乳脂肪球中发现的CLA的实例包括但不限于顺-9,反-11CLA、反-10,顺-12 CLA、顺-9,反-12十八碳二烯酸及其混合物。

在一些实施方案中，本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球包含单不饱和脂肪酸。可以将富脂质级分和/或乳脂肪球配制成包含约0.8 g/100 kcal至约2.5 g/100 kcal的单不饱和脂肪酸。在其他实施方案中，乳脂肪球可以包含约1.2 g/100 kcal至约1.8 g/100kcal的单不饱和脂肪酸。

适合的单不饱和脂肪酸的实例包括但不限于棕榈油酸、顺式异油酸、油酸及其混合物。

在某些实施方案中，本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球包含约2.3 g/100 kcal至约4.4 g/100 kcal的多不饱和脂肪酸。在其他实施方案中，多不饱和脂肪酸以约2.7 g/100 kcal至约3.5 g/100 kcal存在。在又一个实施方案中，多不饱和脂肪酸以约2.4 g/100kcal至约3.3 g/100 kcal存在。

在一些实施方案中，本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球包含多不饱和脂肪酸，例如亚油酸、亚麻酸、十八碳三烯酸、花生四烯酸(ARA)、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。多不饱和脂肪酸是前列腺素和类二十烷酸的前体，已知它们提供许多健康益处，包括抗炎反应、胆固醇吸收和增加的支气管功能。

在一些实施方案中，本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球还可以包含约100 mg/100 kcal至约400 mg/100 kal的胆固醇。在另一个实施方案中，胆固醇以约200 mg/100kcal至约300 mg/100 kcal存在。与人乳和牛乳相似，乳脂肪球中包含的胆固醇可以存在于乳脂肪球的外双层膜中，以为球状膜提供稳定性。

在一些实施方案中，本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球包含约50 mg/100 kcal至约200 mg/100 kcal的磷脂。在其他实施方案中，磷脂以约75 mg/100 kcal至约150 mg/100 kcal存在。在其他实施方案中，磷脂以约100 mg/100 kcal至约250 mg/100 kcal的浓度存在。

在某些实施方案中，磷脂可以通过提供磷脂膜或双层磷脂膜掺入乳脂肪球中以使乳脂肪球稳定。因此，在一些实施方案中，乳脂肪球可以用比人乳中发现的那些磷脂高的量的磷脂配制。

人乳脂质的磷脂组成，以总磷脂的重量百分比，是磷脂酰胆碱(“PC”)24.9%、磷脂酰乙醇胺(“PE”)27.7%、磷脂酰丝氨酸(“PS”)9.3%、磷脂酰肌醇(“PI”)5.4 %和鞘磷脂(“SPGM”)32.4%，(Harzer, G.等，Am. J. Clin.Nutr.，第37卷，第612-621页(1983))。因此，在一个实施方案中，乳脂肪球包含PC、PE、PS、PI、SPGM及其混合物中的一种或多种。另外，包含在乳脂肪球中的磷脂组合物可以配制成通过掺入所需的磷脂来提供某些健康益处。

在某些实施方案中，本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球包含乳脂肪球膜蛋白。在一些实施方案中，乳脂肪球膜蛋白以约50 mg/100 kcal至约500 mg/100 kcal存在。

在一些实施方案中，半乳糖脂可以包含在本公开的富脂质级分和/或乳脂肪球中。出于本公开的目的，“半乳糖脂”是指其糖基为半乳糖的任何糖脂。更具体地讲，半乳糖脂与鞘糖脂的不同之处在于它们的组成中不含氮(nigtrogen)。半乳糖脂在支持大脑发育和整体神经元健康方面发挥重要作用。另外，半乳糖脂、半乳糖脑苷脂和硫苷脂分别占总髓磷脂含量的约23%和4%，因此在一些实施方案中可以将其掺入乳脂肪球中。

在一些实施方案中，本公开的一种或多种营养组合物可以包含除乳铁蛋白(如果存在的话)之外的至少一种蛋白质来源。蛋白质来源可以是本领域中使用的任何蛋白质来源，例如脱脂乳、乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、水解蛋白、氨基酸等。可用于实施本公开的牛乳蛋白质来源包括但不限于乳蛋白粉、乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物、脱脂乳固体、脱脂乳、脱脂干乳、乳清蛋白、乳清蛋白分离物、乳清蛋白浓缩物、甜乳清、酸乳清、酪蛋白、酸酪蛋白、酪蛋白酸盐(例如，酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钠钙、酪蛋白酸钙)及其任何组合。

在一些实施方案中，营养组合物的蛋白质作为完整蛋白质提供。在其他实施方案中，蛋白质作为完整蛋白质和水解蛋白质的组合提供。在某些实施方案中，蛋白质可以是部分水解的或深度水解的。在其他实施方案中，蛋白质源包含氨基酸。在又一个实施方案中，蛋白质来源可以补充有含谷氨酰胺的肽。在另一个实施方案中，蛋白质组分包含深度水解的蛋白质。在另一个实施方案中，营养组合物的蛋白质组分基本上由深度水解的蛋白质组成，以最小化食物过敏的发生。在又一个实施方案中，蛋白质来源可以补充有含谷氨酰胺的肽。

因此，在一些实施方案中，营养组合物的蛋白质组分包含部分或深度水解的蛋白质，诸如来自牛乳的蛋白质。可以用酶处理水解的蛋白质以分解导致不良症状的一些或大多数蛋白质，目的是减少过敏反应、不耐受和致敏。此外，蛋白质可以通过本领域已知的任何方法水解。

术语“蛋白质水解产物”或“水解的蛋白质”在本文中可以互换使用，并且指水解的蛋白质，其中水解度可以为约20%至约80%，或约30%至约80%，或甚至约40%至约60%。

当通过酶水解破坏蛋白质中的肽键时，每个肽键断裂释放一个氨基，导致氨基氮增加。应注意，即使非水解的蛋白质也会含有一些暴露的氨基。水解的蛋白质也将具有与形成它们的非水解的蛋白质不同的分子量分布。水解的蛋白质的功能和营养性质可以受不同大小的肽的影响。通常通过列出分子量(以道尔顿计)级分(例如，2,000至5,000道尔顿，大于5,000道尔顿)的特定范围的重量百分比给出分子量分布。

在一个特定的实施方案中，营养组合物不含蛋白质并且含有作为蛋白质等同来源的游离氨基酸。在该实施方案中，所述氨基酸可以包括但不限于组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、肉毒碱、牛磺酸及其混合物。在一些实施方案中，氨基酸可以是支链氨基酸。在其他实施方案中，可以包含小氨基酸肽作为营养组合物的蛋白质组分。这种小氨基酸肽可以是天然存在的或合成的。营养组合物中游离氨基酸的量可以自约1 g/100 kcal至约5 g/100 kcal变化。在一个实施方案中，100%的游离氨基酸具有小于500道尔顿的分子量。在该实施方案中，营养制剂可以是低变应原性的。

在一个实施方案中，蛋白质源包含约40%至约85%的乳清蛋白和约15%至约60%的酪蛋白。

在一些实施方案中，营养组合物包含每100 kcal约1 g至约7 g的蛋白质和/或蛋白质等同来源。在其他实施方案中，营养组合物包含每100 kcal约3.5 g至约4.5 g的蛋白质或蛋白质等同物。

此外，本公开的营养组合物可以包含至少一种淀粉或淀粉组分。淀粉是由两种不同的聚合物级分：直链淀粉和支链淀粉组成的碳水化合物。直链淀粉是由α-1,4连接的葡萄糖单元组成的线性级分。支链淀粉具有与直链淀粉相同的结构，但是一些葡萄糖单元以α-1,6键结合，产生支链结构。淀粉通常含有17-24%的直链淀粉和76-83%的支链淀粉。然而，已开发出特殊的植物遗传变种，其产生具有不寻常的直链淀粉与支链淀粉比率的淀粉。一些植物产生不含直链淀粉的淀粉。这些突变体在胚乳和花粉中产生淀粉颗粒，用碘能将其染成红色并含有接近100%的支链淀粉。这类产生支链淀粉的植物主要的是糯玉米、糯高粱和糯米淀粉。

可以通过化学改性来改变或改善在热、剪切和酸条件下的淀粉性能。通常通过引入取代基化学基团来实现修饰。例如，通过与二-或多官能试剂如三氯氧化磷交联，可以增加或稳定高温或高剪切下的粘度。

在一些情况下，本公开的营养组合物包含至少一种凝胶化或预凝胶化的淀粉。如本领域所知，当聚合物分子在其长度的一部分上相互作用以形成捕获溶剂和/或溶质分子的网络时，发生凝胶化。此外，当果胶分子由于共溶质分子的竞争性水合而失去一些水合水时，形成凝胶。影响凝胶化发生的因素包括pH、共溶质的浓度、阳离子的浓度和类型、温度和果胶浓度。值得注意的是，LM果胶仅在二价阳离子如钙离子存在下才会凝胶化。在LM果胶之中，酯化程度最低的那些具有最高的胶凝温度，并且最需要二价阳离子来交叉桥接。

同时，淀粉的预凝胶化是预煮淀粉以在冷水中产生水合并溶胀的材料的过程。然后例如通过转鼓式干燥或喷雾干燥将预煮过的淀粉干燥。此外，可以对本公开的淀粉进行化学改性，以进一步扩展其最终性质的范围。本公开的营养组合物可以包含至少一种预凝胶化的淀粉。

天然淀粉颗粒不溶于水，但当在水中加热时，当存在足够的热能以克服淀粉分子的结合力时，天然淀粉颗粒开始溶胀。随着持续加热，颗粒膨胀至其原始体积的许多倍。这些溶胀颗粒之间的摩擦是对淀粉糊粘度作贡献的主要因素。

本公开的营养组合物可以包含天然或改性的淀粉，诸如糯玉米淀粉、糯米淀粉、玉米淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉、小麦淀粉或其任何混合物。通常，普通玉米淀粉包含约25%的直链淀粉，而糯玉米淀粉几乎完全由支链淀粉组成。同时，马铃薯淀粉通常包含约20%直链淀粉，大米淀粉的直链淀粉:支链淀粉比率为约20:80，并且糯米淀粉仅包含约2%的直链淀粉。另外，木薯淀粉通常包含约15%至约18%直链淀粉，并且小麦淀粉具有约25%的直链淀粉含量。

在一些实施方案中，营养组合物包含凝胶化和/或预凝胶化的糯玉米淀粉。在其他实施方案中，营养组合物包含凝胶化和/或预凝胶化的木薯淀粉。也可以使用其他凝胶化或预凝胶化的淀粉，诸如大米淀粉或马铃薯淀粉。

另外，本公开的营养组合物包含至少一种果胶来源。果胶来源可以包括本领域已知的任何种类或等级的果胶。在一些实施方案中，果胶具有小于50%的酯化度并且被归类为低甲基化(“LM”)果胶。在一些实施方案中，果胶具有大于或等于50%的酯化度，并且被归类为高酯或高甲基化(“HM”)果胶。在其他实施方案中，果胶是非常低(“VL”)的果胶，其酯化度小于约15%。另外，本公开的营养组合物可以包含LM果胶、HM果胶、VL果胶或其任何混合物。营养组合物可以包含可溶于水的果胶。并且，如本领域已知，果胶溶液的溶解度和粘度与分子量、酯化度、果胶制剂的浓度和pH以及抗衡离子的存在有关。

此外，果胶具有独特的形成凝胶的能力。通常，在类似条件下，果胶的凝胶化程度、胶凝温度和凝胶强度彼此成比例，并且每一种通常与果胶的分子量成比例并且与酯化度成反比。例如，当果胶溶液的pH降低时，羧酸酯基团的电离受到抑制，并且由于失去电荷，糖分子在其整个长度上不会彼此排斥。因此，多糖分子可以在其长度的一部分上缔合以形成凝胶。然而，具有增加甲基化程度的果胶将在稍高的pH下凝胶化，因为它们在任何给定的pH下具有较少的羧酸根阴离子。(J.N.Bemiller, An Introduction to Pectins: Structureand Properties, Chemistry and Function of Pectins；第1章；1986)。

营养组合物可以包含凝胶化和/或预凝胶化淀粉以及果胶和/或凝胶化果胶。虽然不希望受到这个理论或任何其他理论的束缚，但相信使用果胶如LM果胶，其是大分子量的水状胶体，与淀粉颗粒一起，提供增加流体基质内分子内部摩擦的协同效应。果胶的羧基也可以与营养组合物中存在的钙离子相互作用，从而导致粘度增加，因为果胶的羧基与一个或多个钙离子以及营养组合物中的肽形成弱凝胶结构。在一些实施方案中，营养组合物的淀粉与果胶的比率分别在约12:1和20:1之间。在其他实施方案中，淀粉与果胶的比率为约17:1。在一些实施方案中，营养组合物可以包含在约0.05%w/w和约2.0%w/w之间的果胶。在一个特定的实施方案中，营养组合物可以包含约0.5%w/w的果胶。

用于本文的果胶通常具有8,000道尔顿或更高的峰值分子量。本公开的果胶具有在8,000道尔顿和约500,000道尔顿之间，更优选在约10,000道尔顿和约200,000道尔顿之间，且最优选在约15,000道尔顿和约100,000道尔顿之间的优选峰值分子量。在一些实施方案中，本公开的果胶可以是水解的果胶。在某些实施方案中，营养组合物包含水解的果胶，其分子量小于完整或未修饰的果胶的分子量。本公开的水解的果胶可以通过本领域已知的任何方法制备以降低分子量。所述方法的实例是化学水解、酶水解和机械剪切。降低分子量的优选方法是在升高的温度下通过碱或中性水解。在一些实施方案中，营养组合物包含部分水解的果胶。在某些实施方案中，部分水解的果胶的分子量小于完整或未修饰的果胶的分子量，但是大于3,300道尔顿。

营养组合物可以含有至少一种酸性多糖。酸性多糖如带负电荷的果胶可以对受试者胃肠道中的病原体诱发抗粘附作用。实际上，源自果胶的非人乳酸性低聚糖能够与上皮表面相互作用并且已知其抑制病原体在上皮表面上的粘附。

在一些实施方案中，营养组合物包含至少一种果胶源酸性低聚糖。一种或多种果胶源酸性低聚糖(pAOS)来自酶促果胶分解，并且pAOS的大小取决于酶的使用和反应的持续时间。在此类实施方案中，pAOS可以有益地影响受试者的大便粘度、大便次数、大便pH和/或进食耐受性。本公开的营养组合物可以包含每升配方食品约2 g pAOS至约6 g pAOS。在一个实施方案中，营养组合物包含约0.2 g pAOS/dL，对应于人乳中酸性低聚糖的浓度。(Fanaro等，“Acidic Oligosaccharides from Pectin Hydrolysate as New Componentfor Infant Formulae: Effect on Intestinal Flora, Stool Characteristics, andpH", Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition, 41: 186-190，2005年8月)。

在一些实施方案中，营养组合物包含至多约20%w/w的淀粉和果胶的混合物。在一些实施方案中，营养组合物包含至多约19%的淀粉和至多约1%的果胶。在其他实施方案中，营养组合物包含约至多约15%的淀粉和至多约5%的果胶。在其他实施方案中，营养组合物包含至多约18%的淀粉和至多约2%的果胶。在一些实施方案中，营养组合物包含约0.05%w/w和约20%w/w之间的淀粉和果胶的混合物。其他实施方案包含约0.05%w/w和约19%w/w之间的淀粉和约0.05%w/w和约1%w/w之间的果胶。另外，营养组合物可以包含约0.05%w/w和约15%w/w之间的淀粉和约0.05%w/w和约5%w/w之间的果胶。

在一些实施方案中，营养组合物包含至少一种另外的碳水化合物源，即除上述淀粉组分外还提供的碳水化合物组分。另外的碳水化合物源可以是本领域中使用的任何碳水化合物源，例如乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体、麦芽糖糊精、蔗糖、淀粉、大米糖浆固体等。营养组合物中的另外的碳水化合物组分的量通常可以在约5 g/100 kcal至约22 g/100kcal之间变化。在一些实施方案中，碳水化合物的量在约6 g/100 kcal和约16 g/100 kcal之间。在其他实施方案中，碳水化合物的量在约12 g/100 kcal和约14 g/100 kcal之间。在一些实施方案中，玉米糖浆固体是优选的。此外，水解、部分水解和/或深度水解的碳水化合物由于其易消化性而可能期望包含在营养组合物中。具体地讲，水解的碳水化合物不太可能含有过敏原表位。

适用于本文的碳水化合物材料的非限制性实例包括源自玉米、木薯、大米或马铃薯的以糯质或非糯质形式的水解或完整、天然或化学改性的淀粉。合适的碳水化合物的非限制性实例包括各种水解淀粉，其表征为水解的玉米淀粉、麦芽糖糊精、麦芽糖、玉米糖浆、右旋糖、玉米糖浆固体、葡萄糖和各种其他葡萄糖聚合物及其组合。其他合适的碳水化合物的非限制性实例包括通常称为蔗糖、乳糖、果糖、高果糖玉米糖浆、难消化的低聚糖如低聚果糖及其组合的那些。

在一个特定的实施方案中，营养组合物的另外的碳水化合物组分由100%乳糖组成。在另一个实施方案中，另外的碳水化合物组分包含在约0%和60%之间的乳糖。在另一个实施方案中，另外的碳水化合物组分包含在约15%和55%之间的乳糖。在另一个实施方案中，另外的碳水化合物组分包含在约20%和30%之间的乳糖。在这些实施方案中，剩余的碳水化合物来源可以是本领域已知的任何碳水化合物。在一个实施方案中，碳水化合物组分包含约25%的乳糖和约75%的玉米糖浆固体。

在一些实施方案中，营养组合物包含唾液酸。唾液酸是超过50个9-碳糖成员的家族，所有这些都是神经氨酸的衍生物。在人类中发现的主要唾液酸家族来自N-乙酰基神经氨酸亚家族。在诸如牛乳和山羊乳的乳中发现唾液酸。在哺乳动物中，与其他体细胞膜相比，神经元细胞膜具有最高浓度的唾液酸。唾液酸残基也是神经节苷脂的组分。

如果包含在营养组合物中，则唾液酸可以约0.5 mg/100 kcal至约45 mg/100kcal的量存在。在一些实施方案中，唾液酸可以约5 mg/100 kcal至约30 mg/100 kcal的量存在。在其他实施方案中，唾液酸可以约10 mg/100 kcal至约25 mg/100 kcal的量存在。

如上所提，所公开的营养组合物可以包含6-葡聚糖来源。葡聚糖是多糖，特别是葡萄糖的聚合物，其是天然存在的并且可以存在于细菌、酵母、真菌和植物的细胞壁中。Beta葡聚糖(β-葡聚糖)本身是葡萄糖聚合物的多样化子集，其由通过β-型糖苷键连接在一起的葡萄糖单体链组成，以形成复杂碳水化合物。

β-1,3-葡聚糖是从例如酵母、蘑菇、细菌、藻类或谷物中纯化的碳水化合物聚合物。(Stone BA, Clarke AE.Chemistry and Biology of (l-3)-Beta-Glucans，London:Portland Press Ltd; 1993)。β-1,3-葡聚糖的化学结构取决于β-1,3-葡聚糖的来源。此外，各种生理化学参数如溶解度、一级结构、分子量和支化在β-1,3-葡聚糖的生物活性中起作用。(Yadomae T, Structure and biological activities of fungal beta-l,3-glucans.Yakugaku Zasshi，2000; 120:413-431)。

β-1,3-葡聚糖是天然存在的多糖，其有或没有存在于各种植物、酵母、真菌和细菌的细胞壁中的β-1,6-葡萄糖侧链。β-1,3;1,6-葡聚糖是含有葡萄糖单元的那些，其中(1,3)链接具有在(1,6)位连接的侧链。β-1,3;1,6葡聚糖是享有结构共性的葡萄糖聚合物的异质组，包括直链葡萄糖单元的骨架，由β-1,3键与从该骨架延伸的β-1,6-连接的葡萄糖分支连接。虽然这是目前描述的β-葡聚糖类别的基本结构，但可能存在一些变化。例如，某些酵母β-葡聚糖具有从β(1,6)分支延伸的β(1,3)分支的另外区域，这进一步增加了它们各自结构的复杂性。

来自面包酵母—酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的β-葡聚糖由在1和3位连接的D-葡萄糖分子链组成，其具有在1和6位连接的葡萄糖侧链。酵母源β-葡聚糖是一种不溶的纤维状复杂糖，其具有葡萄糖单元线性链的一般结构，其中β-1,3骨架散布着β-1,6侧链，这些β-1,6侧链的长度通常为6至8个葡萄糖单元。更具体地讲，源自面包酵母的β-葡聚糖是聚-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1,3)-β-D-吡喃葡萄糖。

另外，β-葡聚糖具有良好的耐受性，并且不会在儿科受试者中产生或引起过量气体、腹胀、胃气胀或腹泻。向儿科受试者的营养组合物如婴儿配方食品、成长乳或其他儿童营养产品中添加β-葡聚糖将通过增加对入侵病原体的抵抗力从而维持或改善整体健康来改善受试者的免疫应答。

本公开的营养组合物包含β-葡聚糖。在一些实施方案中，β-葡聚糖是β-1,3;1,6-葡聚糖。在一些实施方案中，β-1,3;1,6-葡聚糖源自面包酵母。营养组合物可以包含全葡聚糖粒子β-葡聚糖、颗粒β-葡聚糖、PGG-葡聚糖(聚-1,6-β-D-吡喃葡萄糖基-1,3-β-D-吡喃葡萄糖)或其任何混合物。

在一些实施方案中，组合物中存在的β-葡聚糖的量为每100 g组合物约0.010 g至约0.080 g。在其他实施方案中，营养组合物包含约10 mg至约30 mg β-葡聚糖/份。在另一个实施方案中，营养组合物包含约5 mg至约30 mg β-葡聚糖/8盎司(236.6 mL)份。在其他实施方案中，营养组合物包含足以每天提供约15 mg至约90 mg β-葡聚糖的量的β-葡聚糖。营养组合物可以多剂量递送以达到全天递送到受试者的β-葡聚糖的目标量。

在一些实施方案中，营养组合物中的β-葡聚糖的量在约3 mg/100 kcal和约17mg/100 kcal之间。在另一个实施方案中，β-葡聚糖的量在约6 mg/100 kcal和约17 mg/100kcal之间。

一种或多种维生素和/或矿物质还可以以足以为受试者供应日常营养需求的量添加到营养组合物中。本领域普通技术人员应理解，维生素和矿物质的需求将例如基于儿童的年龄而变化。例如，婴儿可能具有与1岁至13岁之间的儿童不同的维生素和矿物质需求。因此，实施方案不旨在将营养组合物限制于特定年龄组，而是提供可接受的维生素和矿物质组分的一定范围。

营养组合物可以任选地包含但不限于以下维生素或其衍生物中的一种或多种：维生素B1(硫胺素、焦磷酸硫胺素、TPP、三磷酸硫胺素、TTP、盐酸硫胺素、单硝酸硫胺素)、维生素B2(核黄素、黄素单核苷酸、FMN、黄素腺嘌呤二核苷酸、FAD、乳黄素、卵黄素)、维生素B3(烟酸、烟碱酸、烟酰胺、烟碱酰胺、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、NAD、烟酸单核苷酸、NicMN、吡啶-3-甲酸)、维生素B3-前体色氨酸、维生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、盐酸吡哆醇)、泛酸(泛酸酯、泛醇)、叶酸酯/盐(叶酸(folic acid)、叶酸(folacin)、蝶酰谷氨酸)、维生素B12(钴胺、甲钴胺、脱氧腺苷钴胺、氰钴胺、羟钴胺、腺苷钴胺)、生物素、维生素C(抗坏血酸)、维生素A(视黄醇、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯、具有其他长链脂肪酸的视黄酯、视黄醛、视黄酸、视黄醇酯)、维生素D(钙化醇、胆钙化醇、维生素D3、1,25-二羟基维生素D)、维生素E(α-生育酚、α-生育酚乙酸酯、α-生育酚琥珀酸酯、α-生育酚烟酸酯、α-生育酚)、维生素K(维生素K1、叶绿醌、萘醌、维生素K2、甲基萘醌-7、维生素K3、甲基萘醌-4、甲萘醌、甲基萘醌-8、甲基萘醌-8H、甲基萘醌-9、甲基萘醌-9H、甲基萘醌-10、甲基萘醌-11、甲基萘醌-12、甲基萘醌-13)、胆碱、肌醇、β-胡萝卜素及其任何组合。

另外，营养组合物可以任选地包含但不限于以下矿物质或其衍生物中的一种或多种：硼、钙、乙酸钙、葡萄糖酸钙、氯化钙、乳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、氯化物、铬、氯化铬、吡啶甲酸铬、铜、硫酸铜(copper sulfate)、葡萄糖酸铜、硫酸铜(cupric sulfate)、氟化物、铁、羰基铁、三价铁、富马酸亚铁、正磷酸铁、铁研磨物(iron trituration)、多糖铁、碘化物、碘、镁、碳酸镁、氢氧化镁、氧化镁、硬脂酸镁、硫酸镁、锰、钼、磷、钾、磷酸钾、碘化钾、氯化钾、乙酸钾、硒、硫、钠、多库酯钠、氯化钠、硒酸钠、亚硒酸钠、钼酸钠、锌、氧化锌、硫酸锌及其混合物。矿物质化合物的非限制性示例性衍生物包括任何矿物质化合物的盐、碱性盐、酯和螯合物。

矿物质可以以盐如磷酸钙、甘油磷酸钙、柠檬酸钠、氯化钾、磷酸钾、磷酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰和亚硒酸钠的形式添加到营养组合物中。如本领域已知，可以添加另外的维生素和矿物质。

在一个实施方案中，营养组合物可以含有任何给定国家的最大膳食推荐量的约10%至约50%，或一组国家的平均膳食推荐量的约10%至约50%的维生素A、C和E、锌、铁、碘、硒和胆碱(按每份计)。在另一个实施方案中，儿童的营养组合物可以供应任何给定国家的最大膳食推荐量的约10-30%，或一组国家的平均膳食推荐量的约10-30%的B族维生素(按每份计)。在又一个实施方案中，儿童营养产品中维生素D、钙、镁、磷和钾的水平可以与乳中发现的平均水平相对应。在其他实施方案中，儿童营养组合物中的其他营养素可以以任何给定国家的最大膳食推荐量的约20%或一组国家的平均膳食推荐量的约20%存在(按每份计)。

本公开的营养组合物可以任选地包含一种或多种下列调味剂，所述调味剂包括但不限于调味提取物、挥发油、可可或巧克力调味料、花生酱调味料、饼干屑、香草或任何市售调味料。有用的调味料的实例包括但不限于纯茴香提取物、仿香蕉提取物、仿樱桃提取物、巧克力提取物、纯柠檬提取物、纯橙提取物、纯薄荷提取物、蜂蜜、仿菠萝提取物、仿朗姆提取物、仿草莓提取物或香草提取物；或挥发油，诸如蜂花油、月桂油、佛手柑油、雪松油、樱桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油；花生酱、巧克力调味料、香草饼干屑、奶油糖、乳脂糖及其混合物。调味剂的量可以根据使用的调味剂而大大改变。可以如本领域已知的那样选择调味剂的类型和量。

本公开的营养组合物可以任选地包含一种或多种乳化剂，可以添加乳化剂以稳定最终产品。合适乳化剂的实例包括但不限于卵磷脂(例如，来自蛋或大豆)、α-乳清蛋白和/或甘油单酯和甘油二酯及其混合物。其他乳化剂对于技术人员来说是显而易见的，一种或多种合适乳化剂的选择将部分地取决于制剂和最终产品。

本公开的营养组合物可以任选地包含一种或多种防腐剂，也可以添加所述防腐剂以延长产品的保质期。合适的防腐剂包括但不限于山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠、EDTA二钠钙及其混合物。

本公开的营养组合物可以任选地包含一种或多种稳定剂。用于实施本公开的营养组合物的合适稳定剂包括但不限于阿拉伯树胶、印度胶、刺梧桐树胶、黄蓍胶、琼脂、角叉藻胶、瓜尔胶、结冷胶、刺槐豆胶、果胶、低甲氧基果胶、明胶、微晶纤维素、CMC(羧甲基纤维素钠)、甲基纤维素羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、DATEM(甘油单酯和甘油二酯的二乙酰酒石酸酯)、葡聚糖、角叉菜胶及其混合物。

所公开的营养组合物可以以本领域已知的任何形式提供，诸如粉末、凝胶、悬浮液、糊剂、固体、液体、液体浓缩物、可重构的奶粉替代品或即用型产品。在某些实施方案中，营养组合物可以包含营养补充剂、儿童营养产品、婴儿配方食品或为婴儿或儿科受试者设计的任何其他营养组合物。本公开的营养组合物包括例如可口服摄取的促进健康的物质，包括例如食品、饮料、片剂、胶囊和粉末。此外，本公开的营养组合物可以标准化为特定的卡路里含量，它可以作为即用型产品提供，或者其可以以浓缩形式提供。在一些实施方案中，营养组合物以粉末形式，粒度在5 μm至1500 μm范围内，更优选在10 μm至300 μm范围内。

如果营养组合物以即用型产品的形式，则营养组合物的渗透压可以为约100mOsm/kg水至约1100 mOsm/kg水，更通常为约200 mOsm/kg水至约700 mOsm/kg水。

用于本公开的营养组合物的合适脂肪或脂质来源可以是本领域已知或使用的任何脂肪或脂质来源，包括但不限于动物来源，例如乳脂、黄油、黄油脂、蛋黄脂；海洋来源，诸如鱼油、海洋油、单细胞油；蔬菜和植物油，诸如玉米油、芥花油、葵花籽油、大豆油、棕榈油(palm olein oil)、椰子油、高油酸葵花籽油、月见草油、菜籽油、橄榄油、亚麻籽(flaxseed)(亚麻籽(linseed))油、棉籽油、高油酸红花油、棕榈硬脂精、棕榈仁油、小麦胚芽油；中链甘油三酯油和乳液以及脂肪酸酯；及其任何组合。

本公开的营养组合物可以提供最小、部分或全部的营养支持。所述组合物可以是营养补充剂或膳食替代品。所述组合物可以但不必是营养完全的。在一个实施方案中，本公开的营养组合物是营养完全的并且含有合适类型和量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。脂质或脂肪的量通常可以自约1 g/100 kcal至约7 g/100 kcal变化。蛋白质的量通常可以自约1 g/100 kcal至约7 g/100 kcal变化。碳水化合物的量通常可以自约6 g/100 kcal至约22 g/100 kcal变化。

本公开的营养组合物还可以包含至少一种另外的植物营养素，即，除上文描述的果胶和/或淀粉组分之外的另一种植物营养素组分。在人乳中鉴定出的植物营养素或其衍生物、缀合形式或前体优选包含在营养组合物中。通常，类胡萝卜素和多酚的膳食来源被哺乳母亲吸收并保留在乳中，使其可供哺乳婴儿使用。向婴儿或儿童配方食品中添加这些植物营养素允许这些配方食品反映人乳的组成和功能，并促进一般健康和安康。

例如，在一些实施方案中，本公开的营养组合物可以包含在8盎司(236.6 mL)份中的约80 mg至约300 mg花青素、约100 mg至约600 mg原花青素、约50 mg至约500 mg黄烷-3-醇或其任何组合或混合物。在其他实施方案中，营养组合物包含苹果提取物、葡萄籽提取物或其组合或混合物。另外，营养组合物的所述至少一种植物营养素可以源自任何单一或共混的水果、葡萄籽和/或苹果或茶提取物。

出于本公开的目的，可以以天然、纯化、包囊和/或化学或酶修饰形式将另外的植物营养素添加到营养组合物中，以递送所需的感官和稳定性质。在包囊的情况下，希望包囊的植物营养素抗水溶解，但在到达小肠时释放。这可以通过应用肠溶包衣如交联的藻酸盐等来实现。

适于营养组合物的另外的植物营养素的实例包括但不限于花青素、原花青素、黄烷-3-醇(即，儿茶素、表儿茶素等)、黄烷酮、类黄酮、异黄酮、芪类(即，白藜芦醇等)、原花青素、花青素、白藜芦醇、槲皮素、姜黄素和/或其任何混合物，以及纯化或天然形式的植物营养素的任何可能组合。营养组合物的某些组分，尤其是基于植物的组分可以提供植物营养素的来源。

一些量的植物营养素可以固有地存在于已知成分如天然油中，该天然油通常用于制备用于儿科受试者的营养组合物。这些固有的植物营养素可以但未必被认为是本公开中描述的植物营养素组分的一部分。在一些实施方案中，如本文所述的植物营养素浓度和比率基于添加的和固有的植物营养素来源计算。在其他实施方案中，如本文所述的植物营养素浓度和比率仅基于添加的植物营养素来源计算。

在一些实施方案中，营养组合物包含花青素例如苋菜苷、花青素、飞燕草素、europinidin、木犀草素、天竺葵素、锦葵素、芍药苷、矮牵牛花素和松香素的葡糖苷。适用于营养组合物的这些和其他花青素在多种植物来源中发现。花青素可以源自单一植物来源或植物来源的组合。适用于本发明组合物的富含花青素的植物的非限制性实例包括：浆果(巴西莓、葡萄、越橘、蓝莓、越橘、黑醋栗、苦莓、黑莓、覆盆子、樱桃、红醋栗、蔓越莓、山茱萸、云莓、欧洲越橘、花揪浆果)、紫玉米、紫薯、紫萝卜、红薯、红甘蓝、茄子。

在一些实施方案中，本公开的营养组合物包含原花青素，其包括但不限于黄烷-3-醇和黄烷-3-醇的聚合物(例如，儿茶素、表儿茶素)，其聚合度在2至11的范围内。此类化合物可以源自单一植物来源或植物来源的组合。适用于本发明营养组合物的富含原花青素的植物来源的非限制性实例包括：葡萄、葡萄皮、葡萄籽、绿茶、红茶、苹果、松树皮、肉桂、可可、越橘、蔓越莓、黑醋栗、苦莓。

适用于本发明的营养组合物的黄烷-3-醇的非限制性实例包括儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表儿茶素-3-没食子酸酯、表没食子儿茶素和没食子酸酯。富含合适的黄烷-3-醇的植物包括但不限于茶、红葡萄、可可、绿茶、杏和苹果。

某些多酚化合物，特别是黄烷-3-醇，可以通过增加脑血流量来改善人类受试者的学习和记忆，这与增加和持续的脑能量/营养物递送以及新神经元的形成相关。多酚还可以提供神经保护作用并且可以增加脑突触发生和抗氧化能力，从而支持幼儿的最佳脑发育。

用于营养组合物的黄烷-3-醇的优选来源包括至少一种苹果提取物、至少一种葡萄籽提取物或其混合物。对于苹果提取物，将黄烷-3-醇分解成以4%至20%存在的单体和以80%至96%存在的聚合物。对于葡萄籽提取物，将黄烷-3-醇分解成单体(约46%)和聚合物(约54%)，基于总黄烷-3-醇和总多酚含量。聚合型黄烷-3-醇的优选聚合度在约2和11之间。另外，苹果和葡萄籽提取物可以含有儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯、聚合型原花青素、芪类(即，白藜芦醇)、黄酮醇(即，槲皮素、杨梅素)或其任何混合物。富含黄烷-3-醇的植物来源包括但不限于苹果、葡萄籽、葡萄、葡萄皮、茶(绿茶或红茶)、松树皮、肉桂、可可、越橘、蔓越莓、黑醋栗、苦莓。

如果将营养组合物施用到儿科受试者，则可以施用范围在约0.01 mg/天至约450mg/天内的一定量的黄烷-3-醇，包括单体型黄烷-3-醇、聚合型黄烷-3-醇或其组合。在一些情况下，施用到婴儿或儿童的黄烷-3-醇的量可以为约0.01 mg/天至约170毫克/天，约50mg/天至约450 mg/天，或约100 mg/天至约300 mg/天。

在本公开的一个实施方案中，黄烷-3-醇在营养组合物中的存在量为约0.4 mg/g至约3.8 mg/g营养组合物(约9 mg/100 kcal至约90 mg/100 kcal)。在另一个实施方案中，黄烷-3-醇的存在量为约0.8 mg/g至约2.5 mg/g营养组合物(约20 mg/100 kcal至约60mg/100 kcal)。

在一些实施方案中，本公开的营养组合物包含黄烷酮。合适的黄烷酮的非限制性实例包括紫铆素、圣草酚、橙皮素、橙皮苷、产唾液酸、异樱花素、柚皮素、柚皮苷、乔松素、枸橘苷、樱花素、樱花苷、steurbin。富含黄烷酮的植物来源包括但不限于橙子、橘子、葡萄柚、柠檬、酸橙。营养组合物可以配制成每天递送约0.01 mg/至约150 mg黄烷酮。

此外，营养组合物还可以包含黄酮醇。可以使用来自植物或藻类提取物的黄酮醇。黄酮醇，诸如ishrhametin、山奈酚、杨梅素、槲皮素，可以足以向受试者每天递送约0.01 mg至150 mg之间的量包含在营养组合物中。

营养组合物的植物营养素组分还可以包含已在人乳中鉴定出的植物营养素，包括但不限于柚皮素、橙皮素、花青素、槲皮素、山奈酚、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯或其任何组合。在某些实施方案中，营养组合物包含约50 nmol/L至约2000 nmol/L表儿茶素、约40 nmol/L至约2000 nmol/L表儿茶素没食子酸酯、约100 nmol/L至约4000 nmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯、约50 nmol/L至约2000nmol/L柚皮素、约5 nmol/L至约500 nmol/L山奈酚、约40 nmol/L至约4000 nmol/L橙皮素、约25 nmol/L至约2000 nmol/L花青素、约25 nmol/L至约500 nmol/L槲皮素，或其混合物。另外，营养组合物可以包含植物营养素或其母体化合物的代谢物，或其可以包含其他类型的膳食植物营养素，诸如硫代葡萄糖苷或萝卜硫素。

在某些实施方案中，营养组合物包含类胡萝卜素，诸如叶黄素、玉米黄质、虾青素、番茄红素、β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、γ-胡萝卜素和/或β-隐黄质。富含类胡萝卜素的植物来源包括但不限于猕猴桃、葡萄、柑橘、西红柿、西瓜、木瓜和其他红色水果，或深绿色植物，诸如羽衣甘蓝、菠菜、青萝卜、甘蓝菜叶、生菜、西兰花、西葫芦、豌豆和布鲁塞尔豆芽、菠菜、胡萝卜。

人类无法合成类胡萝卜素，但已在人类母乳中鉴定出超过34种类胡萝卜素，包括某些类胡萝卜素的异构体和代谢物。除了它们存在于母乳中之外，哺乳期妇女和母乳喂养婴儿的血清中还存在膳食类胡萝卜素，诸如α-胡萝卜素和β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、玉米黄质、虾青素和隐黄质。据报道，类胡萝卜素通常改善细胞间通信，促进免疫功能，支持健康的呼吸系统健康，保护皮肤免受紫外线损害，并与降低某些类型癌症的风险和全因死亡率有关。另外，类胡萝卜素和/或多酚的膳食来源被人类受试者吸收、积聚并保留在母乳中，使其可供哺乳婴儿使用。因此，向婴儿配方食品或儿童产品中添加植物营养素会使配方食品与人乳的组成和功能更加接近。

类黄酮作为整体也可以包含在营养组合物中，因为类黄酮不能由人合成。此外，来自植物或藻类提取物的类黄酮可以以单体、二聚体和/或聚合物形式使用。在一些实施方案中，营养组合物包含与哺乳的前三个月期间的人乳中类似的单体形式的类黄酮水平。尽管已在人乳样品中鉴定出类黄酮糖苷配基(单体)，但类黄酮和/或其代谢物的缀合形式也可以用于营养组合物中。类黄酮可以以下列形式添加：游离、葡糖苷酸、甲基葡糖苷酸、硫酸盐和甲基硫酸盐形式。

营养组合物还可以包含异黄酮(isoflavonoid)和/或异黄酮(isoflavone)。实例包括但不限于染料木黄酮(染料木苷)、黄豆甙原(大豆苷)、黄豆黄素、生物素A、芒柄花素、香豆雌酚、德鸢尾素、奥洛波尔(orobol)、伪赝靛甙元、anagyroid异黄酮A和B、毛蕊异黄酮、glycitein、野鸢尾苷元、5-O-甲基染料木黄酮、红车轴草素、樱黄素、psi-鸢尾黄素、瑞士黄酮、鸢尾黄素、野鸢尾苷、芒柄花苷、葛根素、鸢尾苷、derrubone、羽扇豆异黄酮、wighteone、猫尾草异黄酮(alpinumisoflavone)、吡喃异黄酮、二-O-甲基猫尾草异黄酮和4'-甲基-猫尾草异黄酮。富含异黄酮的植物来源包括但不限于大豆、补骨脂、葛根、羽扇豆、蚕豆、鹰嘴豆、苜蓿、豆类和花生。可以配制营养组合物以每天递送约0.01 mg至约150 mg异黄酮(isoflavone)和/或异黄酮(isoflavonoid)。

在一个实施方案中，本公开的营养组合物包含有效量的胆碱。胆碱是一种对细胞正常功能必不可少的营养素。它是膜磷脂的前体，并且加速乙酰胆碱的合成和释放，乙酰胆碱是一种参与记忆储存的神经递质。此外，尽管不希望受这个理论或任何其他理论的束缚，但相信膳食胆碱和二十二碳六烯酸(DHA)协同作用以促进磷脂酰胆碱的生物合成，从而有助于促进人受试者中的突触发生。另外，胆碱和DHA可以表现出促进树突棘形成的协同效应，这对于维持已建立的突触连接是重要的。在一些实施方案中，本公开的营养组合物包含有效量的胆碱，其为约20 mg胆碱/8盎司(236.6 mL)份至约100 mg/8盎司(236.6 mL)份。

此外，在一些实施方案中，营养组合物是营养完全的，含有合适类型和量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质，以作为受试者的唯一营养来源。实际上，营养组合物可以任选地包含任何数量的蛋白质、肽、氨基酸、脂肪酸、益生菌和/或其代谢副产物、益生元、碳水化合物和任何其他营养素或可以提供给受试者许多营养和生理益处的化合物。另外，本公开的营养组合物可以包含调味剂、增味剂、甜味剂、颜料、维生素、矿物质、治疗成分、功能性食品成分、食品成分、加工成分或其组合。

本公开还提供了一种向受试者提供营养支持的方法。所述方法包括向受试者施用有效量的本公开的营养组合物。

所述营养组合物可以直接排出到受试者的肠道中。在一些实施方案中，将营养组合物直接排出到肠中。在一些实施方案中，所述组合物可以配制成在医生的监督下肠内消耗或施用，并且可以旨在用于疾病或病况如乳糜泻和/或食物过敏的特定膳食管理，基于公认的科学原理，对其独特的营养需求通过医学评估确定。

本公开的营养组合物不限于包含本文具体列出的营养素的组合物。为了满足营养要求和/或为了优化受试者的营养状态，可以将任何营养素作为组合物的一部分递送。

在一些实施方案中，营养组合物可以递送至出生直到与足月妊娠匹配的时间的婴儿。在一些实施方案中，可以将营养组合物递送至直至矫正年龄为至少约三个月的婴儿。在另一个实施方案中，可以将营养组合物递送至受试者，条件是矫正营养缺乏所必需。在另一个实施方案中，可以将营养组合物递送至出生直至矫正年龄为至少约六个月的婴儿。在另一个实施方案中，可以将营养组合物递送至出生直至矫正年龄为至少约一岁的婴儿。

在其他实施方案中，可以将所公开的营养组合物递送至孕妇或哺乳期妇女，以向受试妇女的儿童/儿童提供腹绞痛缓解。可以将营养组合物作为液体营养组合物递送给女性，包括重构的粉末，或作为适合成人的胶囊或其他剂型。

本公开的营养组合物可以标准化为特定的卡路里含量，其可以作为即用型产品提供，或者其可以以浓缩形式提供。

根据本公开的营养组合物的确切组成可以根据当地法规和感兴趣群体的膳食摄入信息而从根据市场变化。在一些实施方案中，根据本公开的营养组合物由乳蛋白源如全脂或脱脂乳，加上添加的糖和甜味剂以实现所需的感官性质以及添加的维生素和矿物质组成。脂肪组合物通常源自乳原料。可以总蛋白质为目标匹配人乳、牛乳或较低值。通常以总碳水化合物为目标提供尽可能少的添加糖，诸如蔗糖或果糖，以获得可接受的味道。通常，添加维生素A、钙和维生素D的水平与区域牛乳的营养贡献相匹配。另外，在一些实施方案中，维生素和矿物质的添加水平可以每份提供约20%的膳食参考摄入量(DRI)或20%的每日值(DV)。此外，营养价值取决于目标群体的确定的营养需求、原料贡献和区域法规根据市场而有所不同。

在某些实施方案中，营养组合物是低变应原性的。在其他实施方案中，营养组合物是犹太洁食。在更进一步的实施方案中，营养组合物是非遗传修饰的产品。在一个实施方案中，营养制剂不含蔗糖。营养组合物也可以不含乳糖。在其他实施方案中，营养组合物不含任何中链甘油三酯油。在一些实施方案中，组合物中不存在角叉菜胶。在其他实施方案中，营养组合物不含任何树胶。

在一些实施方案中，本公开涉及用于儿科受试者如婴儿或儿童的分阶段营养喂养方案，其包括根据本公开的多种不同营养组合物。每种营养组合物包含水解的蛋白质、至少一种预凝胶化淀粉和至少一种果胶。在某些实施方案中，所述喂养方案的营养组合物还可以包含长链多不饱和的脂肪酸、至少一种益生元的来源、铁源、β-葡聚糖、维生素或矿物质、叶黄素、玉米黄质的来源或上文描述的任何其他成分的来源。本文所述的营养组合物可以每天施用一次或在一整天通过几次施用来施用。

本文还提供了制造营养组合物如婴儿配方食品的方法，其包括以下步骤中的至少一个或组合：选择LA代谢益生菌，选择蛋白质或蛋白质等同物的来源，选择脂肪来源，选择富乳制品的来源，选择LCPUFA的来源，以及将所述LA代谢益生菌、蛋白质或蛋白质等同来源、LCPUFA来源和脂肪来源组合以产生营养组合物。在一些实施方案中，所述方法还包括选择将基于营养组合物的100 kcal份或基于营养组合物的重量百分比以特定量掺入的每种成分的一定量的步骤。

在某些实施方案中，本文公开的营养组合物的施用改变了肠道中的微生物群并降低了目标受试者中腹绞痛的发生率。因此，将本文公开的营养组合物施用到包括早产儿的婴儿或孕妇或哺乳期妇女可以预防腹绞痛并改善婴儿的生活质量并减少父母的情绪紧张和压力。

在一些实施方案中，所述方法涉及制造粉状营养组合物。除非另有说明，否则本文所用的术语“粉状营养组合物”是指包含LA代谢益生菌、蛋白质或蛋白质等同物、脂肪、富乳制品和LCPUFA的干混粉状营养制剂，其可以用水性液体重构，并且适合口服施用到人。

实际上，在一些实施方案中，所述方法包括以下步骤：干混所选营养素的所选营养粉以产生基础营养粉，可以向其中添加另外的所选成分如益生菌，并进一步与基础营养粉共混。除非另有说明，否则本文所用的术语“干混”是指将组分或成分混合以形成基础营养粉，或将干燥的粉状或颗粒状的组分或成分添加到基础粉末中以形成粉状营养配方食品。在一些实施方案中，基础营养粉是基于乳的营养粉末。在一些实施方案中，基础营养粉包含至少一种脂肪和一种蛋白质或蛋白质等同来源。粉状营养制剂可以具有针对目标受试者的营养需求定制的热量密度。

粉状营养组合物可以用足够种类和量的营养素配制，以提供唯一的、主要的或补充的营养来源，或提供专门的粉状营养配方用于患有特定病况如腹绞痛的个体。例如，在一些实施方案中，本文公开的营养组合物可以适合施用到儿科受试者和婴儿，以提供本文公开的示例性健康益处。

本文提供的粉状营养组合物还可以包含其他任选成分，所述成分可以改变产品的物理、化学、享乐或加工特性，或者当用于目标人群时用作营养组分。许多这样的任选成分是已知的或以其他方式适用于其他营养产品，并且还可以用于本文所述的粉状营养组合物中，条件是这类任选成分对于口服施用是安全且有效的并且与所选产品形式中的必需成分和其他成分相容。此类任选成分的非限制性实例包括防腐剂、抗氧化剂、乳化剂、缓冲剂、本文所述的另外营养素、着色剂、调味剂、增稠剂和稳定剂等。

本公开的粉状营养组合物可以包装并密封在单或多用途的容器中，然后在环境条件下储存长达约36个月或更久，更通常约12个月至约24个月。对于多用途容器，这些包装可以打开然后覆盖以供最终用户重复使用，条件是加盖的包装然后在环境条件下储存(例如，避免极端温度)并且在约一个月左右的时间内使用内容物。

在一些实施方案中，所述方法还包括将营养组合物置于合适的包装中的步骤。合适的包装可以包括容器、桶、小袋、小包、瓶子或本领域已知并用于容纳营养组合物的任何其他容器。在一些实施方案中，含有营养组合物的包装是塑料容器。在一些实施方案中，含有营养组合物的包装是金属、玻璃、涂覆或层压的纸板或纸容器。通常，这些类型的包装材料适合与制造用于口服施用配制的营养组合物期间利用的某些灭菌方法一起使用。

在一些实施方案中，营养组合物包装在容器中。用于本文的容器可以包括适用于液体营养产品的任何容器，其也能够承受如本文所述且本领域普通技术人员已知的无菌加工条件(例如，灭菌)。合适的容器可以是单剂量容器，或者可以是多剂量可再密封或可重新封闭的容器，其可以具有或可以不具有密封构件，诸如位于帽下方的薄箔密封构件。这类容器的非限制性实例包括袋子、塑料瓶或容器、小袋、金属罐、玻璃瓶、果汁盒型容器、箔小袋、盒子里出售的塑料袋或满足上述标准的任何其他容器。在一些实施方案中，容器是可再密封的多剂量塑料容器。在某些实施方案中，可再密封的多剂量塑料容器还包括箔密封件和塑料可再密封帽。在一些实施方案中，容器可以包括直接密封螺帽。在其他实施方案中，容器可以是柔性小袋。

在一些实施方案中，营养组合物是液体营养组合物并且通过“蒸煮包装”或“蒸煮灭菌”方法加工。术语“蒸煮包装”和“蒸煮灭菌”在本文中可互换使用，并且除非另有说明，否则指的是用营养液填充容器，最通常是金属罐或其他类似包装，然后对液体填充的包装进行必要的加热灭菌步骤以形成灭菌的、蒸煮包装的营养液产品的常规做法。

在一些实施方案中，本文公开的营养组合物通过可接受的无菌包装方法加工。除非另有说明，否则本文所用的术语“无菌包装”是指在不依赖于上述蒸煮包装步骤的情况下制造包装产品，其中营养液和包装在填充之前单独灭菌，然后在灭菌或无菌加工条件下组合，以形成灭菌的、无菌包装的营养液体产品。

提供实施例以说明本公开的营养组合物的一些实施方案，但不应解释为对其的任何限制。考虑到本文公开的营养组合物和方法的说明书或实践，本领域技术人员将显而易见本文中权利要求书的范围内的其他实施方案。说明书与实施例一起旨在被认为仅是示例性的，本公开的范围和精神由实施例后面的权利要求书示出。

实施例1

该实施例说明根据本公开的营养组合物的实施方案。

成分表：

乳糖(牛乳)、植物油共混物(棕榈油、椰子油、大豆油和高油酸葵花籽油)(植物)、脱脂奶粉(牛乳)、乳清蛋白浓缩物(牛乳)、低聚半乳糖(牛乳)、聚葡萄糖(植物)、矿物质(碳酸钙、磷酸钙、硫酸铜、硫酸亚铁、氧化镁、硫酸锰、氯化钾、柠檬酸钾、柠檬酸钠、碘化钠、亚硒酸钠、磷酸三钙和硫酸锌)、乳化剂(大豆卵磷脂)(植物)、作为花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)的来源的单细胞油(Mortierella alpina油、柯氏隐甲藻油)、乳铁蛋白(牛乳)、玉米糖浆固体(植物)、短双歧杆菌、维生素(α-生育酚乙酸酯、生物素、泛酸钙、胆钙化醇、氯化胆碱、氰钴胺、叶酸、烟酰胺、植物甲萘醌、盐酸吡哆醇、核黄素、抗坏血酸钠、盐酸硫胺素和维生素A棕榈酸酯)、肌醇、牛磺酸、核苷酸(腺苷单磷酸、胞苷单磷酸、鸟苷单磷酸和尿苷单磷酸)、L-肉毒碱和抗氧化剂(抗坏血酸和抗坏血酸棕榈酸酯)。

营养组合物：

实施例2

分析来自粪便样品的代谢组学概况，这些样品分别在患腹绞痛的一天内和没有腹绞痛的一天内从单个受试者采集，并且结果提供在图1中。结果显示，与在没有腹绞痛的一天中采集的样品相比，在患腹绞痛的一天内采集的样品中存在大量未消化的脂质化合物。

实施例3

从7名未患腹绞痛的婴儿(对照婴儿)和7名患婴儿腹绞痛的婴儿(腹绞痛婴儿)获得十四(14)个粪便样品。7个腹绞痛婴儿样品中的6个和7个对照婴儿通过GC-MS色谱法处理(如图2所示)。样品一式三份地处理。对于限制数量的化合物，这两组显著不同。这些化合物是脂质，并且参与亚油酸代谢。腹绞痛婴儿和对照婴儿分别聚类为粪便中存在的代谢物的两个不同组。特别是在腹绞痛婴儿中，存在LA和消退素E；它们都是可能的炎症状态的指标。所述分析以明显的方式将腹绞痛婴儿与对照非绞痛婴儿分开。

实施例4

使用培养独立方法，即变性梯度凝胶电泳(DGGE)，研究实施例3中使用的相同的14个样品的粪便微生物群组成；其中的一个结果报告在图3中，其报告分析特定细菌群时获得的DGGE输出；凝胶中的每个条带代表不同的群体，并且与对照婴儿相比，腹绞痛婴儿具有更复杂的微生物群。为了理解两组中存在的不同微生物，切下关注的条带，重新扩增，测序(BMRGenomics，Padova，Italy)，然后通过BLAST(Altschul等，1997)使用blastn算法和核糖体数据库项目(Ribosomal Database Project)(Maidak等，1994)与GenBank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中的序列进行比较。比对显示，收集的最常见物种是Blautialuti、黏液真杆菌(Blautia producta)、Blautia wexlerae、口腔毛绒厌氧杆菌(Lachnoanaerobaculum orale)、Dorea formicigenerans和活泼瘤胃球菌。布劳特氏属是毛螺旋菌属。DGGE分析还表明，活泼瘤胃球菌和/或Blautia wexlerae在腹绞痛婴儿中普遍存在(见图4)。

实施例5

对于活泼瘤胃球菌的物种特异性定量，对与实施例3相同的14个样品，使用先前描述的物种特异性引物和探针F：(5’-TGGCGGCGTGCTTAAC A-3’)，R: (5’-TCCG AAG AAATCCGTCAAGGT-3’)，探针：(FAM-5'-ATGC AAGTCG AGCG AAG-3’-TAM R A)的探针RT-PCR测定(Joossens等，2011)。用于标准曲线的模板由活泼瘤胃球菌ATCC29149的基因组DNA的10倍稀释液表示。实时PCR结果指示，在腹绞痛婴儿中检测到的活泼瘤胃球菌的16S rRNA基因拷贝的平均数为9.66±9.87，在非腹绞痛婴儿中检测到的活泼瘤胃球菌的16S rRNA基因拷贝的平均数为3.55±3.36(每克湿粪便的活泼瘤胃球菌的log 16S rRNA基因拷贝)。这些数据表明两组之间存在差异，但有限数量的重复(7个样品/组)使得难以确认具有统计学意义的结果。

通过使用用先前描述的引物进行的RT-PCR实现布劳特氏属的定量(Kurakawa等，2015)。与对照婴儿相比，布劳特氏属在腹绞痛婴儿中处于高水平，而活泼瘤胃球菌在腹绞痛婴儿中可能达到或不能达到高水平。结果然后清楚地指示，所有腹绞痛婴儿具有更高的布劳特氏属计数，其中的一些也具有大量存在的活泼瘤胃球菌，而与非腹绞痛的婴儿相比，在腹绞痛婴儿中短双歧杆菌的存在量肯定是低的。然后就作为毛螺菌科家族的生态竞争者的短双歧杆菌的存在而言来分析这些样品的含量。实时PCR结果指示，在腹绞痛婴儿中检测到的短双歧杆菌的16S rRNA基因拷贝的平均数为6,67±6,91，且在非腹绞痛婴儿中检测到的短双歧杆菌的16S rRNA基因拷贝的平均数为8,46±8,63(每克湿粪便的短双歧杆菌的log 16S rRNA基因拷贝)；因此可以得出结论，与腹绞痛的婴儿相比，非腹绞痛婴儿携带的短双歧杆菌多至多2 log。

实施例6

通过Illumina MiSeq方案处理实施例3的14个粪便样品。该技术涉及样品中细菌的16SrRNA基因的V3-V4区域的深度测序，允许全面覆盖分析的多样性，其中对大多数序列进行恰当分类直至物种水平(Polka等，2015年)。总共获得187,467个序列，并且每个样品缩减至共有数量为2083，这对应于总共33,328个序列。稀疏曲线和覆盖率分析显示非常好的结果，获得99.71%的平均覆盖率，指示Illumina分析捕获样品中细菌多样性的最大部分。

作为第一步，在家族水平上对分类学结果进行聚类分析(图5)。所述分析不允许在腹绞痛和对照非腹绞痛的粪便样品之间进行明确的分离；然而很明显肠杆菌科(绿条)在腹绞痛婴儿中不占主导(腹绞痛样品用红色圆圈标记：10、24、25、31、32、35和38)。然而，14种样品在物种水平上的良好覆盖率允许获得两组的微生物群的更清晰图片(图6)。

为了在定量水平上进一步证实该结果，使用Metastats模型，所述模型专门设计用于评估源自高通量测序方法的16S rRNA数据的相对丰度的显著差异(Paulson等，2011)。对10种最丰富的物种(包括活泼瘤胃球菌)运行该模型，这些物种代表所有观察到的多样性的90%(Metastats针对分化的物种和细菌的属或家族，这就是为什么在该分析中仅考虑活泼瘤胃球菌)：对于活泼瘤胃球菌获得的p值为0.06，其接近统计学显著性。两组中这些物种的有差别的丰度的图表显示腹绞痛婴儿中确实的强烈增加(图7)。

所有上述研究的意外结果是，腹绞痛婴儿中活泼瘤胃球菌的增加也与短双歧杆菌的减少相关；两种变化都必须发生，才会患腹绞痛；这些微生物失衡也是LA消化不良的原因，LA不会转化为CLA，为系统增加另外的促炎化合物。这种反向关联可以解释腹绞痛的出现，因为活泼瘤胃球菌和双歧杆菌对于某些糖具有相同的代谢途径。活泼瘤胃球菌能够使用肠上皮粘蛋白作为发酵底物并与短双歧杆菌共享糖降解的代谢途径，因此它们是相同生态位和发酵底物的竞争者。

然而，虽然短双歧杆菌不产生气体并且能够将促炎性LA转化为抗炎性CLA，然而活泼瘤胃球菌是产氢的物种，不能将LA转化为CLA。因此，高水平短双歧杆菌的存在可以将活泼瘤胃球菌的存在限制到对婴儿的危害较小的水平。

实施例7

已经对4个月大的腹绞痛婴儿执行了干预研究。婴儿是母乳喂养的，其膳食每天补充10⁹个短双歧杆菌菌株。在恼人的腹绞痛症状期间在施用益生菌菌株之前和在用益生菌14天后，收集粪便样品。基因组分析显示该婴儿具有高水平的布劳特氏属菌(10^-7)，而活泼瘤胃球菌的存在量低于RT-PCR的检测限。RT-PCR显示短双歧杆菌在治疗前浓度为10⁸，而在治疗后达到10⁹。在用短双歧杆菌治疗后，布劳特氏属菌浓度降低1 log，而短双歧杆菌的存在增加1 log。

本说明书中引用的所有参考文献，包括但不限于所有论文、出版物、专利、专利申请、介绍、教科书、报告、手稿、小册子、书籍、因特网帖子、期刊文章、期刊等，在此通过引用整体结合到本说明书中。本文对参考文献的讨论仅旨在总结其作者所作出的断言，且并非认可任何参考文献构成现有技术。申请人保留质疑所引用参考文献的准确性和针对性的权利。

尽管已使用特定术语、装置和方法描述了本公开的实施方案，但此描述仅用于说明性目的。使用的词语是描述性词语而不是限制性词语。应当理解，本领域普通技术人员可以在不脱离本公开的精神或范围的情况下进行改变和变化，本公开的精神或范围在所附权利要求中阐述。此外，应该理解的是，各种实施方案的各方面可以整体或部分地互换。例如，虽然已经举例说明了根据这些方法生产商业无菌液体营养补充剂的方法，但也考虑了其他用途。因此，所附权利要求的精神和范围不应限于其中包含的版本的描述。

Claims (20)

1.一种减少儿科受试者腹绞痛的发生率的方法，所述方法包括向受试者施用营养组合物，所述营养组合物包含：

约1×10³至约1×10¹² cfu/100 kcal的LA代谢益生菌；

至多约7 g/100 kcal的脂肪或脂质；

至多约5 g/100 kcal的蛋白质或蛋白质等同来源；

约0.06 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的富乳制品；

约5 mg/100 kcal至约90 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸的来源；和

约0.015 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的益生元组合物，其中在施用所述营养组合物之后所述儿科受试者的肠道中LA代谢益生菌与活泼瘤胃球菌(Ruminococcus gnavus)的比率为至少8:1。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述LA代谢益生菌包括短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、链状双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)、假链状双歧杆菌(Bifidobacterium pseudocatenulatum)或其组合。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述长链多不饱和脂肪酸的来源包括二十二碳六烯酸、花生四烯酸中的至少一种及其组合。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述乳脂肪球还包含神经节苷脂和磷脂。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述营养组合物包含至少约15 mg/100 kcal的来自非人来源的乳铁蛋白。

6.根据权利要求5所述的方法，其中乳铁蛋白以约10 mg/100 kcal至约200 mg/100kcal的水平存在。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述乳铁蛋白是牛乳铁蛋白。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中聚葡萄糖和低聚半乳糖占所述益生元组合物的至少约20%。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述营养组合物是婴儿配方食品。

10.一种减少儿科受试者腹绞痛的营养组合物，其包含：

约1×10³至约1×10¹² cfu/100 kcal的LA代谢益生菌；

至多约7 g/100 kcal的脂肪或脂质；

至多约5 g/100 kcal的蛋白质或蛋白质等同来源；

约0.06 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的富乳制品；

约5 mg/100 kcal至约90 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸；和

约0.015 g/100 kcal至约1.5 g/100 kcal的益生元组合物，所述益生元组合物包含聚葡萄糖和低聚半乳糖。

11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述LA代谢益生菌包括短双歧杆菌、链状双歧杆菌、假链状双歧杆菌或其组合。

12.根据权利要求10或权利要求11所述的组合物，其中所述长链多不饱和脂肪酸的来源以约5 mg/100 kcal至约75 mg/100 kcal存在。

13.根据权利要求10-12中任一项所述的组合物，其中所述乳脂肪球的平均直径范围为至少约2 μm。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述乳脂肪球的平均直径范围在约2 μm至约13 μm范围内。

15.根据权利要求10-14中任一项所述的组合物，其中所述乳脂肪球的比表面积范围在约0.9 m²/g至约3 m²/g范围内。

16.根据权利要求10-15中任一项所述的组合物，其还包含来自非人来源的乳铁蛋白。

17.根据权利要求16所述的组合物，其中乳铁蛋白以约15 mg/100 kcal至约300 mg/100 kcal的水平存在。

18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述乳铁蛋白是牛乳铁蛋白。

19.根据权利要求10-18中任一项所述的组合物，其中聚葡萄糖和低聚半乳糖占所述益生元组合物的至少约20%。

20.根据权利要求10-19中任一项所述的组合物，其中所述营养组合物是婴儿配方食品。