CN110208429A - 一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,包括有检测试剂盒体,检测试剂盒体内包括有:含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸,用来收集使用者唾液的试管,用来吸取唾液的定量毛细管,干纸片法检测试剂盒操作及采集唾液说明书,和返送用信封。使用者只需把微量唾液滴在尿酸采集卡纸的滤纸圆圈处,在室温下晾干后,放入返送用信封中,送到检测机构进行尿酸含量的测定。改变了原有的检测尿酸的模式,使用者可以不去医院,在家就能完成生物样本的采集。本发明具有采集唾液方便、运输储存便利和适用于各个年龄层人群唾液中尿酸的含量测定,是高尿酸相关疾病筛查过程中有效的工具。本发明的开发,将对痛风及高尿酸症的早期预警具有重要的意义。
Description
技术领域
本发明涉及试剂盒技术领域,尤其是涉及一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒。
背景技术
尿酸是人类和其他高等灵长类动物嘌呤代谢的最终氧化产物,呈弱酸性,它具有清除氧自由基,抗氧化的作用。尿酸既可以来自体内,也可以来自于食物中嘌呤的分解代谢。目前我们在生活中经常会发现尿酸高的现象,但通常情况下,一段时间后尿酸值可自行恢复,若不加以控制,注意平时的饮食习惯,会导致长期体内尿酸浓度水平升高,长期的高尿酸将会导致痛风、心血管疾病、肾病、糖尿病、高血压等各种疾病。近年来,人们生活水平的提高和饮食结构的改变,特别是富含蛋白质和嘌呤食物摄入的增加,使得高尿酸血症和痛风的患病率持续增加,但痛风因在早期阶段没有明显症状,所以并不能及时发现。因此迫切需要开发一种简便、廉价、高灵敏的早期预警诊断方法。
目前,测定尿酸的方法主要有尿酸酶法、磷钨酸还原法、电化学测定法、同位素稀释质谱法、高效液相法等。在临床应用中发现一些药物或试剂对尿酸酶法具有明显的干扰作用,灵敏度较低,检测结果的偏差较大;电化学测定法灵敏度高,但测定结果的重现性不佳;磷钨酸还原法操作步骤复杂;同位素稀释质谱法设备及测定成本昂贵。本发明使用高效液相色谱法,选择次黄嘌呤(Hypoxanthine)为内标物,并用反相色谱柱实现尿酸与内标物的完全分离,因此高效液相色谱法是测定尿酸的一种有效方法。
通常尿酸浓度水平的检测都是通过采集血液和尿液等生物样本,血液的采集需要专业人员来进行,采集后血液处理和储存繁琐,并且伤口容易感染;尿液的采集自己就可以进行,但不是随时就可以进行采集,受限制。
发明内容
本发明的目的是着眼于痛风及高尿酸症,开发一种可简便地检测尿酸的低侵袭性唾液干纸片法试剂盒,使用者可以足不出户地完成唾液的采集,节约时间和金钱成本。
本发明的技术方案是:一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,包括有检测试剂盒体,其中所述的检测试剂盒体内包括有:
标明有使用者名字及联系方式的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸,
用来收集使用者唾液的试管,
用来吸取唾液的定量毛细管,和干纸片法检测试剂盒操作及采集唾液说明书,用于向使用者说明试剂盒使用流程及注意事项。
进一步地,所述的检测试剂盒体内还包括有:用来装尿酸采集卡纸和具有邮寄功能的返送用信封。
进一步地,所述的检测试剂盒体内包括有:
1个标明有使用者名字及联系方式的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸,
1个用来收集使用者唾液的试管,
3个用来吸取唾液的定量毛细管,
1份干纸片法检测试剂盒操作及采集唾液说明书,和1份用来装尿酸采集卡纸和具有邮寄功能的返送用信封。
进一步地,所述的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸含有3个5 mm的圆形滤纸片。
本发明采用人体唾液为生物样本使用干纸片检测试剂盒采集人体唾液后使用HPLC法来检测尿酸,相比血液和尿液具有采集方便、快速、患者易于接受,且唾液易于保存、样品前处理简单等特点。人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,不是直接检测采集好的唾液样品,而是把唾液收集到带有内标物(次黄嘌呤)的滤纸上,只需微量的唾液,此方法称为人体唾液中尿酸干纸片法(Dried spot method of uric acid in human saliva, DSM-UHS),是疾病筛查过程中的一项有效的工具。和它相似的技术干血斑法(Dried bloodspot, DBS)也是众所周知,而且应用于各种疾病的诊断。干血斑法的优点在于在家就可取样,或者可以直接邮寄送到检测机构进行检测,人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒也具有相同的优点。
本发明试剂盒相比于其他传统测定尿酸的优点是采样方便、廉价、快速、运输存储方便及适用于各个年龄层的人群,可应用于痛风及高尿酸人群的早期预警和风险评估。因此,人体唾液中尿酸干纸片检测试剂盒的开发,不仅对高尿酸症及痛风的早期预警和风险评估中起到重要作用,并且对代谢类疾病的筛查研究具有重要意义。
附图说明
图1为本发明人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒模型示意图。
图2为加入内标的A类滤纸萃取后HPLC-UV色谱图,其中A:加内标的903滤纸。
图3为加入内标的B类滤纸萃取后HPLC-UV色谱图,其中B:加内标的FTA滤纸。
图4为加入内标的C类滤纸萃取后HPLC-UV色谱图,其中C:加内标的双圈定性滤纸。
图1中,1、干纸片法检测试剂盒体,2、尿酸采集卡纸,3、试管,4、定量毛细管,5、干纸片法试剂盒操作及采集唾液说明书,6、返送用信封。
下面结合附图对本发明进一步说明。
具体实施方式
如图1所示,一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,包括有检测试剂盒体1,其中所述的检测试剂盒体内包括有:
1个标明有使用者名字及联系方式的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸2,所述的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸2含有3个5 mm的圆形滤纸片,联系方式可以包括有地址、E-mail,电话等方式,
1个用来收集使用者唾液的试管3,
3个用来吸取唾液的定量毛细管4,
1份干纸片法检测试剂盒操作及采集唾液说明书5,用于向使用者说明试剂盒使用流程及注意事项,和1份用来装尿酸采集卡纸和具有邮寄功能的返送用信封6。
使用时,使用者首先阅览干纸片法试剂盒操作及采集唾液说明书5,然后把唾液收集到干纸片法检测试剂盒体1内的试管3中,用定量毛细管4从试管3中取出一定量的唾液,之后把毛细管4接触到尿酸采集卡纸2圆圈位置,在室温下等待卡纸上的滤纸2晾干后,把尿酸采集卡纸装入信封6中,邮寄给相应的检测机构进行尿酸含量的测定。
具体数据参看图2、图3、图4
从图2、图3、图4中可以看出,903和FTA滤纸在尿酸位置有未知物质干扰,但双圈定性滤纸没有干扰物质的出现,所以选择双圈定性滤纸作为试剂盒中尿酸卡纸上的滤纸。
表1 尿酸的标准曲线
表2 尿酸日间日内精密度及回收率
表3 唾液在室温及冻融过程中的稳定性
从表1、表2、表3中可以看出尿酸在10-200 ug/mL范围内线性关系良好(R2=0.9995),检测限为0.5 ug/mL。在实际唾液样品中加入已知量(25、50、100、200 ug/mL)的标准品溶液,在4个不同添加浓度下,方法平均回收率为91.61%,日间精密度和日内精密度均小于4.4%,具有良好的回收率和重复性。在4个不同浓度下,唾液稳定性实验表明在室温下24 h之内CV%≤3.29%,冻融循环CV≤6.53%,稳定性良好。
以上数据表明,用本发明采集的唾液,在检测尿酸时具有良好的准确性及稳定性。
Claims (4)
1.一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,包括有检测试剂盒体,其特征在于所述的检测试剂盒体内包括有:
标明有使用者名字及联系方式的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸,
用来收集使用者唾液的试管,
用来吸取唾液的定量毛细管,和干纸片法检测试剂盒操作及采集唾液说明书。
2.根据权利要求1所述的一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,其特征在于所述的检测试剂盒体内还包括有:用来装尿酸采集卡纸和具有邮寄功能的返送用信封。
3.根据权利要求2所述的一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,其特征在于所述的检测试剂盒体内包括有:
1个标明有使用者名字及联系方式的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸,
1个用来收集使用者唾液的试管,
3个用来吸取唾液的定量毛细管,
1份干纸片法检测试剂盒操作及采集唾液说明书,和1份用来装尿酸采集卡纸和具有邮寄功能的返送用信封。
4.根据权利要求1、2或3所述的一种人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒,其特征在于所述的含次黄嘌呤的尿酸采集卡纸含有3个5 mm的圆形滤纸片。
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