CN110201240B - 改性细胞外基质水凝胶及其制备方法和应用、组织工程材料 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种改性细胞外基质水凝胶及其制备方法和应用、组织工程材料，涉及水凝胶技术领域。该改性细胞外基质水凝胶主要由细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维混合得到，经透明质酸改性的纳米纤维和细胞外基质水凝胶具有良好的生物相容性和良好的细胞亲和性能，并且前者可以作为水凝胶的骨架以增强细胞外基质水凝胶的机械性能，缓解了现有技术中存在的缺乏一种既具有良好的力学性能，又具有良好的生物相容性和生物活性的水凝胶问题。

Description

改性细胞外基质水凝胶及其制备方法和应用、组织工程材料
技术领域
本发明涉及水凝胶技术领域，尤其是涉及一种改性细胞外基质水凝胶及其制备方法和应用、组织工程材料。
背景技术
水凝胶是一种具有优越力学性能的高分子聚合物，其内部的多孔网络结构有利于细胞的附着与迁移，本身富含大量的水分，可在液态时填充于缺损部位，在体温的作用下形成半固态的胶体，从而减少植入体内后造成的二次损伤。
细胞外基质(extracellular matrix，ECM)是由大分子构成的生物网络结构，是通过理化方法去除生物体组织中的细胞成分后的天然生物衍生材料，主要成分有胶原蛋白、非胶原蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖、氨基聚糖以及部分天然组织中的生物活性物质，能够为细胞生长提供物理支持和适宜的场所，促进细胞的粘附、生长、增殖和分化和损伤组织器官的再生。
由细胞外基质构成的水凝胶中富含大量的细胞外基质成分，可为组织修复提供大量的营养物质，内部呈现的多孔网状结构有助于再生细胞的附着和迁移，温敏的特性可在体温的作用条件下凝胶成型，利于附载药物的靶向递送和缓控释放，且在体内易于降解不会引起强烈的免疫排斥反应。单纯由细胞外基质制成的水凝胶虽然有良好的生物相容性和生物活性，但是其存在质地柔软，体内成胶无法塑形，且植入体内后容易降解的问题。
脊髓损伤主要是由交通事故、高空跌落和暴力等原因造成的脊髓内部灰质、白质和脊神经纤维束的结构破坏，进而出现损伤平面以下运动和感觉功能的障碍，并伴随排尿、排便和性功能的丧失和疼痛综合征的困扰，严重影响病人的生活质量。据世界卫生组织统计，全球每百万人约10-40的人会出现脊髓损伤，且在我国，目前脊髓损伤病人已远超200万并以每年10-14万病例的速度增长，主要以青壮年患者居多。巨额的医疗支出给家庭和社会带来了沉重的经济负担。
目前在临床上促进脊髓损伤修复的治疗方法主要包括减压、脊柱固定和康复训练，这些方法虽能部分改善患者的运动和感觉功能的恢复，但无法实现病人自主神经功能的完全恢复。通过皮质类固醇、东莨菪碱、利尿剂等临床用药也只能针对病人的特定症状或并发症进行治疗。细胞外基质水凝胶可移植至脊髓损伤部位，以促进细胞和组织的再生，可是由于天然细胞外基质水凝胶质地柔软，体内成胶无法塑形，且植入体内后容易降解而导致治疗效果不佳。
因此，一种具有良好的力学性能，同时又能够保持细胞外基质水凝胶良好的生物相容性和生物活性的改性细胞外基质水凝胶是目前需要的。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种改性细胞外基质水凝胶，缓解了现有技术中存在的缺乏一种既具有良好的力学性能，又具有良好的生物相容性和生物活性的水凝胶的问题。
本发明的第二目的在于提供一种上述改性细胞外基质水凝胶的制备方法。
本发明的第三目的在于提供一种上述改性细胞外基质水凝胶，上述改性细胞外基质水凝胶的制备方法，或上述制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶在制备组织工程材料中的应用。
本发明的第四目的在于提供一种组织工程材料，该组织工程材料包含上述改性细胞外基质水凝胶，或上述制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶。
为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：
根据本发明的一个方面，本发明提供了一种改性细胞外基质水凝胶，所述改性细胞外基质水凝胶包括细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维。
根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述改性细胞外基质水凝胶的制备方法，该制备方法包括将细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维混合，得到所述改性细胞外基质水凝胶。
根据本发明的另一个方面，本发明还提供了上述改性细胞外基质水凝胶，上述改性细胞外基质水凝胶的制备方法，或上述制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶在制备组织工程材料中的应用。
根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种组织工程材料，该组织工程材料包含上述改性细胞外基质水凝胶，或上述制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供的改性细胞外基质水凝胶主要由细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维组成。纳米纤维可以作为水凝胶中的骨架，以改善细胞外基质水凝胶的力学性能，进而维持细胞外基质水凝胶在植入体内后的机械强度并防止其过快降解。同时，为了增强纳米纤维和细胞外基质水凝胶混合时的相容性，本发明采用透明质酸改性纳米纤维，经透明质酸改性的纳米纤维和细胞外基质水凝胶具有良好的生物相容性和良好的细胞亲和性能。本发明提供的改性细胞外基质水凝胶在植入机体后，在体温作用条件下，能够凝胶塑形，形成的支架能够稳定改性细胞外基质水凝胶的形状结构并防止其过快的降解。
本发明提供的上述改性细胞外基质水凝胶的制备方法，各原料来源广泛，制备过程简单便捷，有助于实现标准化和产业化。基于上述细胞外基质水凝胶及其制备方法制备得到的组织工程材料也具有所述改性水凝胶的所有有益效果，在此不再赘述，并且所述组织工程材料中还可以含有具有治疗、辅助治疗或具有其他作用的组分，以进一步提高组织工程材料的治疗效果。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1提供的猪脊髓来源的10000倍细胞外基质水凝胶的扫描电镜图；
图2为本发明实施例2提供的含酰胺键PLLA静电纺丝纳米纤维1000倍扫描电镜图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种改性细胞外基质水凝胶，该改性细胞外基质水凝胶主要由细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维混合得到。
纳米纤维是尺度达到纳米级的纤维，纳米纤维优异的力学性能有助于保持材料结构的稳定性，向水凝胶中引入纳米纤维，纳米纤维可以作为水凝胶中的骨架，以改善细胞外基质水凝胶的力学性能，进而维持细胞外基质水凝胶在植入体内后的机械强度并防止其过快降解。
同时，为了增强纳米纤维和细胞外基质水凝胶混合时的相容性，本发明采用接枝有透明质酸的纳米纤维。透明质酸(HA)是一种线性多糖，由(1-β-4)D-葡萄糖醛酸和(1-β-3)N-乙酰基-D氨基葡萄糖的双糖单元重复连接构成，具有良好的生物相容性，在体内可被降解为氨基葡萄糖被人体吸收。
将透明质酸改性的纳米纤维和细胞外基质水凝胶混合后，纳米纤维可以作为水凝胶中的骨架结构，以增强整个水凝胶的机械强度；并且纳米纤维上的透明质酸使纳米纤维和细胞外基质水凝胶的相容性更佳，使接枝有透明质酸的纳米纤维更容易均匀的分散于细胞外基质水凝胶的内部。因此本发明提供的改性细胞外基质水凝胶在增强了细胞外基质水凝胶的机械性能的同时，还兼具良好的生物相容性，植入体能够良好的塑形，植入体内后不易降解。本发明提供的改性细胞外基质水凝胶在植入机体后，在体温作用条件下，凝胶塑形，形成的支架能够稳定改性细胞外基质水凝胶的形状结构并防止其过快的降解。
本发明所述的细胞外基质水凝胶指的是将细胞外基质溶解于液体中形成的吸收了大量液体的高分子网络体系，性质柔软，能保持一定的形状。本发明所述的细胞外基质水凝胶中的细胞外基质的来源的物种包括但不限于人类、哺乳类动物或者禽类等，在具体的实施例中，包括但不限于为人类、牛、羊、猪、马、鼠、鸡或鸭的组织或器官。在一些可选的实施方式中，细胞外基质来源的组织包括但不限于为脊髓、心包、心脏瓣膜、小肠粘膜、跟腱、膀胱粘膜、尿道、中枢神经、输尿管、真皮、腹膜或软骨等组织或器官。
本发明所述的纳米纤维可选择本领域可接受的用于制备组织工程材料的纳米纤维，所述纳米纤维应具有无毒性、良好的生物相容性、不引起机体免疫排斥反应，并具有一定的机械强度和良好的表面活性，具有上述特征的纳米纤维均可作为本申请的纳米纤维，所述纳米纤维包括但不限于聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚己内酯(PCL)、聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)、聚羟基丁酸酯(PHB)和聚三亚甲级碳酸酯(PYMC)、聚氧化乙烯(PEO)和聚对二氧环己酮(PDO)中的一种或者多种。
在一些优选的实施方式中，所述纳米纤维包括聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯中的至少一种，由于人体自身产生的乳酸是左旋乳酸，左旋聚乳酸具有更好的生物相容性，因此聚乳酸优选使用左旋聚乳酸(PLLA)。聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯具有如下优点：更好的机械性能，将其与细胞外基质的水凝胶混合后能显著的改善水凝胶的机械性能；更佳的生物降解能力，聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯均为惰性材料，降解后的产物无毒副作用，同时还具有良好的生物相容性和疏水性，良好的生物相容性使细胞更容易的在水凝胶中生长，良好的疏水性使纳米纤维与细胞外基质更充分的混合，使改性细胞外基质水凝胶体系均一。可选地，可以将聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯单独制成纳米纤维，也可以采用几种的组合，比如聚乳酸和聚乳酸-羟基乙酸混合制备纳米纤维，也可以聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯混合制备纳米纤维，或者是三者混合制备纳米纤维。
常规的纳米纤维通常由如下方法制备得到：拉伸法、模板合成法、熔喷法、分子自组装法、相分离法、气象成长法和静电纺丝法，本发明对纳米纤维的制备方法不做限制，只要能得到尺度上复合纳米级的纤维即可。在一些优选的实施方式中，使用静电纺丝纳米纤维改性细胞外基质水凝胶效果更佳。静电纺丝是在高压静电场中，带电的聚合物溶液或熔体受到的电场力大于其表面张力时，将形成喷射细流，在这一过程中，溶剂会挥发、熔融的聚合物由于温度降低而固化，高巨物纤维最终落在接受网上得到纳米纤维。静电纺丝纳米纤维比表面积大，具有多孔性和质量轻的优异性能，且其优异的力学性能有助于保持材料结构的稳定性。在一些更优选的实施方式中，所述纳米纤维包括定向排列的纳米纤维，所述定向排列的纳米纤维指的是在一束纳米纤维中所有的纳米纤维方向一致。纳米纤维以定向排列的结构混合在细胞外基质水凝胶中，能够实现细胞的定向迁移和趋向生长。
本发明提供的改性细胞外基质水凝胶中主要的成分为细胞外基质水凝胶、纳米纤维和透明质酸，因此优化这三种成分在改性细胞外基质水凝胶中的配比，能够优化改性细胞外基质水凝胶的性能，比如如果细胞外基质水凝胶含量过高会导致水凝胶的机械性能不佳；纳米纤维含量过高会一定程度的降低生物相容性，并且也不容易和细胞外基质水凝胶混合均匀；并且将修饰纳米纤维的透明质酸的含量维持在一个合理的范围内，能更好的促进纳米纤维和细胞外基质水凝胶混合。其中纳米纤维的用量指的是纳米纤维，或经过修饰、改性或接枝其他化学键的纳米纤的衍生物的用量；透明质酸的用量指的是透明质酸，或经过修饰、改性或接枝其他化学键的透明质酸的衍生物的用量。
在一些优选的实施方式中，按照质量百分比计，所述改性细胞外基质水凝胶包含如下原料：纳米纤维1.5％～3.5％、透明质酸0.4％～1.2％和细胞外基质水凝胶95.3％～98.1％；可选地，纳米纤维的含量例如可以为但不限于为1.5％、2％、2.5％、3％或3.5％；可选地，透明质酸的含量例如可以为但不限于为0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％、1.1％或1.2％；可选地，细胞外基质水凝胶的含量例如可以为但不限于为95.3％、95.5％、95.8％、96.0％、96.2％、96.5％、96.7％、97.0％、97.2％、97.5％、97.8％、98.0％或98.1％。在一些更优选的实施方式中，按照质量百分比计，所述改性细胞外基质水凝胶包含如下原料：纳米纤维2.5％～3.5％、透明质酸0.8％～1.2％和细胞外基质的水凝胶95.3％～96.7％。在一个具体的优选的实施方式中，按照质量百分比计，所述改性细胞外基质水凝胶包含如下原料：纳米纤维2.5％、透明质酸0.8％和细胞外基质的水凝胶96.7％。
本发明还提供了所述改性细胞外基质水凝胶的制备方法，该制备方法包括将细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维混合，得到所述改性细胞外基质水凝胶。本发明提供的制备方法只需将细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维物理混合，使纳米纤维均匀的混合到细胞外基质水凝胶中，就可以得到所述改性细胞外基质水凝胶，操作简单。其中纳米纤维优选使用聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯中的至少一种制备得到的纳米纤维，聚乳酸优选使用左旋聚乳酸。可选地，可以将聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯单独制成纳米纤维，也可以采用几种的组合，比如聚乳酸和聚乳酸-羟基乙酸混合制备纳米纤维，也可以聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯混合制备纳米纤维，或者是三者混合制备纳米纤维。
在一些优选的实施方式中，采用静电纺丝法制备纳米纤维，静电纺丝的纺丝电压的优选参数范围为12～18kV，例如可以为但不限于为12kV、13.kV、14kV、15kV、16kV、17kV或18kV；静电纺丝的纺丝针头与接收器之间的距离的优选参数范围为15～50cm，例如可以为但不限于为15cm、20cm、25cm、30cm、35cm、40cm、45cm或50cm；静电纺丝的纺丝速率的优选参数范围为0.8～1.2mL/h，例如可以为但不限于为0.8mL/h、0.9mL/h、1.0mL/h、1.1mL/h或1.2mL/h；静电纺丝的接收时间的优选参数范围为0.4～0.6h，例如可以为但不限于为0.4h、0.45h、0.5h、0.55或0.6h。在一些优选的实施方式中，静电纺丝的纺丝电压、纺丝针头与接收器之间的距离、纺丝速率和接收时间均采用上述优选参数，纺丝效果更佳，即静电纺丝工艺的优选参数为纺丝电压为12～18kV，静电纺丝的纺丝针头与接收器之间的距离为15～50cm，静电纺丝的纺丝速率为0.8～1.2mL/h和静电纺丝的接收时间为0.4～0.6h。
在一些优选的实施方式中，采用静电纺丝法制备定向排列的纳米纤维，本领域技术人员可采用本领域常规的方法制备定向排列的纳米纤维，例如可以为但不限于为飞轮法，间隔导电板法、辅助电极法、短纤维纺纱法或静态水浴法或旋转鼓法；并在制备定向排列的纳米纤维步骤前、后或在制备定向排列的纳米纤维的过程中将透明质酸接枝于纳米纤维。在一些优选的实施方式中，在采用静电纺丝法制备的含有定向排列结构的纳米纤维膜上接枝透明质酸，然后将所述纳米纤维膜粉碎后和细胞外基质水凝胶混合。其中纳米纤维膜优选使用飞轮法制备得到，飞轮法是使用带有非常尖锐的边缘的收集轮收集静电纺丝，该方法使电场的分布十分集中，纤维在该集中电场的作用下连续黏附在收集轮的边缘，纤维之间由于电荷的作用相互排斥从而呈现定向排列。其中飞轮得到转速优选为3000rpm～3500rpm，例如可以为但不限于为3000rpm、3100rpm、3200rpm、3300rpm、3400rpm或3500rpm。
在一些优选的实施方式中，将接枝有酰胺键的纳米纤维和接枝有双键的透明质酸在交联剂存在的条件下，紫外光照射使纳米纤维和透明质酸交联构成接枝有透明质酸的纳米纤维。所述交联剂包括但不限于N,N’-亚甲基双丙烯酰胺，邻苯二甲酸二烯丙脂，二亚乙基三胺。其中紫外照射时间优选为5～15min，例如可以为但不限于为5min、8min、10min、12min或15min。
在一些优选的实施方式中，接枝有双键的透明质酸包括透明质酸酯化衍生物。优选地，所述透明质酸酯化衍生物包括由透明质酸和丙烯酸，甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酐或马来酸酯化反应得到的产物，更优选使用甲基丙烯酸。
在一些优选的实施方式中，先给纳米纤维添加羧基，然后使用带双键的胺类化合物，所述带双键的胺类化合物优选包括3-丁烯胺，3-甲基-3-丁烯胺。并在催化剂的条件下与纳米纤维添上的羧基发生反应，使纳米纤维带有酰胺键，所述催化剂优选使用EDC和NHS，EDC为(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)，NHS为N-羟基琥珀酰亚胺，二者联合使用可催化双键的胺类化合物与羧基反应生成酰胺键，其中优选地，EDC和NHS的摩尔比为(3.5～4.5):(0.5～1.5)的条件下催化效果较佳，EDC和NHS的摩尔比更优选为4:1。
在一些优选的实施方式中，用等离子改性纳米纤维以使其带有羧基。等离子是在特定条件下使气体部分电离而产生的非凝聚体系，在等离子改性过程中，通入的气体会发生共价键的断裂形成活性基团，这些活性基团可以在材料表面引入相应的极性基团或自由基，从而对材料表面进行改性，本实施方式可采用常规的等离子处理聚合物表面的方式使纳米纤维带有羧基。
本发明还提供了所述改性细胞外基质水凝胶，改性细胞外基质水凝胶的制备方法或由上述改性细胞外基质水凝胶在制备组织工程材料中的应用。本发明提供的改性细胞外基质水凝胶，或由本发明提供的改性细胞外基质水凝胶的制备方法制备得到的水凝胶具有良好的生物相容性和机械性性能，同时植入机体内不易降解。
本发明还提供了一种组织工程材料，该组织工程材料包含上述改性细胞外基质水凝胶，或上述制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶。所述组织工程材料中还可以含有具有治疗、辅助治疗或具有其他作用的组分，其中具有治疗或辅助治疗的包括但不限于为细胞、用于维持细胞生长的营养物质、干扰素、肿瘤坏死因子、趋化因子、白细胞介素、激素、细胞生长因子、抗生素、核酸、脂质体、糖蛋白或其他具有治疗作用的活性物质等。
本发明提供的组织工程材料用于治疗或者修复机体组织损伤时，优选修复部位优选与其相同的或同源性较高的组织部位的细胞外基质作为改性细胞外基质水凝胶中的细胞外基质成分，例如在修复心在损伤时，可以以心包组织中的细胞外基质为原料制备细胞外基质水凝胶；修复皮肤损伤时，以皮肤组织中的细胞外基质作为细胞外基质水凝胶的制备原料。
在一些优选的实施方式中，所述改性细胞外基质水凝胶或含有其的组织工程材料优选用于治疗脊髓损伤，当所述组织工程材料用于治疗脊髓损伤时，所述细胞外基质来源于脊髓，所述纳米纤维包括定向排列的纳米纤维。脊髓来源的细胞外基质中含有适于脊髓中细胞或组织生长的活性物质，使改性细胞外基质水凝胶的生物相容性较其他部分来源的细胞外基质效果更佳，同时定向排列的纳米纤维能取向引导细胞的增殖和迁移，可定向引导再生轴突的方向，保障新生轴突穿越损伤区到达损伤区的对侧，有助于实现对脊髓的长期治疗。本发明通过脊髓撞击伤模型小鼠实验发现，经本发明提供的改性细胞外基质水凝胶治疗的脊髓撞击伤模型小鼠，对小鼠的脊髓损伤具有显著的改善作用。
下面结合实施例进一步说明本发明的技术方案和有益效果。
实施例1
脊髓来源的脱细胞基质水凝胶的制备，包括如下步骤：
将屠宰场获取的猪的新鲜脊髓，在低温条件下，剥去脊髓的外膜并将其剪成1.5～2cm长度，放入预冷的磷酸盐缓冲液(PBS)溶液中，PBS与放入脊髓的体积比约为4：1；随后，在冰浴条件下，将盛有脊髓的螺口瓶放于脱色摇床，并以160rpm的转速震荡至少4h；用纱布滤除多余的液体后，再将残存的脊髓结构放入螺口瓶并添加双蒸水至500mL，再次放入摇床震荡，如此反复，直至脊髓只剩下透明状的细胞骨架，此过程需经历7～8次循环，充分去除脊髓内部的灰质、白质和细胞质成分；随后将残存的脊髓骨架放入灭菌后的3％Triton X-100溶液并在冰浴条件下，以相同的转速震荡1h；双蒸水漂洗3次，每次10min，再用1.0M蔗糖溶液在冰浴条件下震荡15min；双蒸水漂洗3次，每次10min，放入灭菌后的4％脱氧胆酸钠在冰浴条件下震荡1h；分别用PBS与双蒸水各漂洗2次，每次15分钟；放入-40℃冰箱过夜，次日再次放入真空冷冻干燥机抽尽基质内部的水分；取出冻干的脊髓基质，在无菌条件下，运用小梁剪充分将其剪碎，放入1％的胃蛋白酶溶液，在转子的搅拌条件下，室温消化4h，并将消化后的溶液以30000g的转速离心45min；去除离心后的杂质，加入NaOH调节pH至6～8、然后加入HCl和10×PBS调整水凝胶的pH至5～7，使最终制备的脱脊髓细胞基质水凝胶在37℃条件下成胶。结果如图1所示。
实施例2
含酰胺键PLLA静电纺丝纳米纤维膜的制备，包括如下步骤：
称取一定量的左旋聚乳酸(PLLA)粉末，加入2mL六氟异丙醇(HFIP)并搅拌12h，使PLLA充分溶解并获得质量浓度为7.5％的PLLA溶液。将上述制备的溶液注入到5mL的玻璃注射器中，装上20g不锈钢针头并将其安装在静电纺丝装置上，取一张表面平整的锡箔纸固定在接收端，调节接好收距离并设置合适的电压和流速，使PLLA溶液在高压状态下形成定向排布的纤维丝并接收于锡箔纸的接收板上，环境温度控制在30℃。制备PLLA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为15kV，纺丝针头与接收器之间的距离为30cm，纺丝速率为1mL/h。样品接收时间为0.5h，得到的PLLA纤维放入50℃烘箱中干燥去除溶剂。干燥的样品放入等离子表面处理仪，调节参数如下：功率为300W，高压频率为40KHz，处理宽度为5mm，处理时间为3min。等离子(plasma)后的静电纺丝获得羧基(-COOH)，与3-丁烯胺在EDC/NHS(mEDC:mNHS摩尔比值为4:1)的催化条件下反应24h，形成酰胺键(-CO-NH-)。结果如图2所示。
实施例3
含酰胺键PLA静电纺丝纳米纤维膜的制备，包括如下步骤：
称取适量的聚乳酸(PLA)粉末，加入3mL N,N-二甲基甲酰胺(DMF)静置8h使PLA充分溶解并获得质量浓度为8.0％的PLA溶液。将上述制备的溶液注入到5mL的玻璃注射器中，装上20g不锈钢针头并将其安装在静电纺丝装置上，取一张表面平整的锡箔纸固定在接收端，调节接好收距离并设置合适的电压和流速，使PLLA溶液在高压状态下形成定向排布的纤维丝并接收于锡箔纸的接收板上，环境温度控制在30℃。制备PLA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为15kV，纺丝针头与接收器之间的距离为30cm，纺丝速率为1mL/h。样品接收时间为0.5h，得到的PLA纤维放入50℃烘箱中干燥去除溶剂。干燥的样品放入等离子表面处理仪，调节参数如下：功率为300W，高压频率为40KHz，处理宽度为5mm，处理时间为3min。等离子(plasma)后的静电纺丝获得羧基(-COOH)，与3-丁烯胺在EDC/NHS(mEDC:mNHS摩尔比值为4:1)的催化条件下反应24h，形成酰胺键(-CO-NH-)。
实施例4
含酰胺键PLGA静电纺丝纳米纤维膜的制备，包括如下步骤：
称取适量的聚乳酸－羟基乙酸共聚物(PLGA，含75％乳酸与25％羟基乙酸)粉末，加入2mL六氟异丙醇充分振摇使PLGA充分溶解并获得质量浓度为5.5％的PLGA溶液。将上述制备的溶液注入到5mL的玻璃注射器中，装上20g不锈钢针头并将其安装在静电纺丝装置上，取一张表面平整的锡箔纸固定在接收端，调节接好收距离并设置合适的电压和流速，使PLLA溶液在高压状态下形成定向排布的纤维丝并接收于锡箔纸的接收板上，环境温度控制在30℃。制备PLGA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为15kV，纺丝针头与接收器之间的距离为30cm，纺丝速率为1mL/h。样品接收时间为0.5h，得到的PLGA纤维放入50℃烘箱中干燥去除溶剂。干燥的样品放入等离子表面处理仪，调节参数如下：功率为300W，高压频率为40KHz，处理宽度为5mm，处理时间为3min。等离子(plasma)后的静电纺丝获得羧基(-COOH)，与3-丁烯胺在EDC/NHS(mEDC:mNHS摩尔比值为4:1)的催化条件下反应24h，形成酰胺键(-CO-NH-)。
实施例5
含酰胺键PCL静电纺丝纳米纤维膜的制备，包括如下步骤：
称取适量的聚己内酯(PCL)粉末，加入3mL二甲基乙酰胺(DMAc)充分振摇使PLC充分溶解并获得质量浓度为6.5％的PCL溶液。将上述制备的溶液注入到5mL的玻璃注射器中，装上20g不锈钢针头并将其安装在静电纺丝装置上，取一张表面平整的锡箔纸固定在接收端，调节接好接收距离并设置合适的电压和流速，使PCL溶液在高压状态下形成定向排布的纤维丝并接收于锡箔纸的接收板上，环境温度控制在30℃。制备PCL纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为15kV，纺丝针头与接收器之间的距离为30cm，纺丝速率为1mL/h。样品接收时间为0.5h，得到的PLGA纤维放入50℃烘箱中干燥去除溶剂。干燥的样品放入等离子表面处理仪，调节参数如下：功率为300W，高压频率为40KHz，处理宽度为5mm，处理时间为3min。等离子(plasma)后的静电纺丝获得羧基(-COOH)，与3-丁烯胺在EDC/NHS(mEDC:mNHS摩尔比值为4:1)的催化条件下反应24h，形成酰胺键(-CO-NH-)。
实施例6
含酰胺键PLLA静电纺丝纳米纤维膜的制备，与实施例2的区别在于，制备PLLA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为12kV，纺丝针头与接收器之间的距离为50cm，纺丝速率为0.8mL/h。样品接收时间为0.6h。
实施例7
含酰胺键PLLA静电纺丝纳米纤维膜的制备，与实施例2的区别在于，制备PLLA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为18kV，纺丝针头与接收器之间的距离为15cm，纺丝速率为1.2mL/h。样品接收时间为0.4h。
实施例8
含酰胺键PLLA静电纺丝纳米纤维膜的制备，与实施例2的区别在于，制备PLLA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为20kV，纺丝针头与接收器之间的距离为10cm，纺丝速率为1.5mL/h。样品接收时间为0.5h。
实施例9
含酰胺键PLLA静电纺丝纳米纤维膜的制备，与实施例2的区别在于，制备PLLA纺丝纤维束工艺参数如下：纺丝电压为10kV，纺丝针头与接收器之间的距离为50cm，纺丝速率为0.6mL/h。样品接收时间为0.5h。
实施例10
将实施例2～实施例9制备得到的含酰胺键的静电纺丝纤维分别按照如下方式处理：放入液氮粉碎机并以2000rpm的转速粉碎5min，使其变得蓬松，纳米纤维间的连接较为松散，再转移至研钵并用研杵捣碎成长度不等的纳米纤维丝。将酰胺键的纳米纤维丝和甲基丙烯酸透明质酸使用光交联剂N,N’-亚甲基双丙烯酰胺存在的条，并紫外光照10min，再与细胞外基质水凝胶相混合，4℃条件下，搅拌反应2h，以此制备具有良好力学性能的改性细胞外基质水凝胶。
实施例11～实施例62
实施例11～实施例62分别提供了改性细胞外基质水凝胶，各实施例提供的改性水凝胶中的原料配比如表1所示，细胞外基质水凝胶、纳米纤维以及透明质酸修饰纳米纤维的方法如实施例1～实施例10所示，猪外周神经细胞外基质水凝胶的制备方法同实施例1，其中实验组1A～实验组2C使用的PLLA为实施例2制备得到的PLLA，实验组9A～9D使用的PLLA依次为实施例6～实施例9提供的PLLA。
表1实施例11～实施例62，对比例1～对比例8的复合物的组成
Figure BDA0002100115470000151
Figure BDA0002100115470000161
Figure BDA0002100115470000171
注：“——”代表此项不添加物质。
效果例
脊髓撞击伤模型的制备和给药治疗：选取体重约200～220g的健康成年SD雌鼠50只，实验前在动物房适应性饲养一周。按照表1记录的实验组每组各10只，术前用苦味酸进行标记。称量每只大鼠的体重并按50mg/kg的剂量腹腔注射1％戊巴比妥钠，待动物充分麻醉后，剃去背部T10附近部位的毛，手术刀片划开T10正中线的皮肤，手术剪刀顿性分离周围的肌肉和肌腱，充分暴露T9～T11段的棘突及椎板，以T9脊髓段为中心，用咬骨钳咬去该区域的棘突及椎板并暴露直径约为0.8cm的圆形区域，将大鼠固定于打击器底板，保证脊髓的充分水平，以脊髓正中血管为中心，将撞针上升至一定的高度并使其下落时保证100kdyn的力度撞击脊髓，打击完毕后，可观察到T10段脊髓充血且尾巴出现痉挛并左右摇摆，提示模型制备成功。随后，用5-0手术缝合线逐层缝合切口。术后，每天进行2次排尿护理并补给生理盐水和抗感染治疗。在术后的第五天，麻醉大鼠并二次暴露脊髓，用手术刀片的最尖端轻轻划开撞击部位的硬脊膜，使内部的积水充分溢出至脊髓外部，再用显微剪和显微镊挖去内部坏死的脊髓组织，每组给予体积为10μL对应剂量的药物，缝合肌肉和皮肤后，在给药后的30天处死动物并收集损伤区及其周围的脊髓组织。
对脊髓损伤作用的疗效评价：各组大鼠原位注射药物后，每周进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)行为学评分，以评价脊髓损伤大鼠运动功能的改善。处死动物的最后一周运用肌电图仪检测各组大鼠神经传导速度。收集的脊髓组织在冰冻切片机下切成5μm的冰冻组织，运用苏木素-伊红染色，Masson三色染色和尼氏染色观察各组损伤脊髓形态的改善、胶质癜痕的减少和尼氏小体的变化。运用神经丝蛋白抗体(NF-200)和髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)荧光双染及透射电镜观察轴突和髓鞘的再生，结果如表2所示：
表2疗效评价
Figure BDA0002100115470000181
Figure BDA0002100115470000191
Figure BDA0002100115470000201
再髓鞘化和胶质癜痕减少五方面进行综合评分。“-”表示无效，“+”表示各指标均有改善或升高，“+”越多代表各指标改善越明显或修复越显著。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (26)

1.一种改性细胞外基质水凝胶的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将细胞外基质水凝胶和接枝有透明质酸的纳米纤维混合，得到所述改性细胞外基质水凝胶；
按照质量百分比计，所述改性细胞外基质水凝胶包含如下原料：纳米纤维1.5％～3.5％、透明质酸0.4％～1.2％和细胞外基质水凝胶95.3％～98.1％。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米纤维包括聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸和聚己内酯中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述聚乳酸包括左旋聚乳酸。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米纤维包括静电纺丝纳米纤维。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的纺丝电压为12～18kV。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的纺丝针头与接收器之间的距离为15～50cm。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的纺丝速率为0.8～1.2mL/h。
8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的接收时间为0.4～0.6h。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米纤维包括定向排列的纳米纤维。
10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，按照质量百分比计，所述改性细胞外基质水凝胶包含如下原料：纳米纤维2.5％～3.5％、透明质酸0.8％～1.2％和细胞外基质水凝胶95.3％～96.7％。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，按照质量百分比计，所述改性细胞外基质水凝胶包含如下原料：纳米纤维2.5％、透明质酸0.8％和细胞外基质水凝胶96.7％。
12.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在采用静电纺丝法制备的含有定向排列结构的纳米纤维膜上接枝透明质酸，然后将所述纳米纤维膜粉碎后和细胞外基质水凝胶混合。
13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，采用飞轮接收静电纺丝，以制备定向分布的纳米纤维膜。
14.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，飞轮接收时飞轮的转速为3000rpm～3500rpm。
15.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将接枝有酰胺键的纳米纤维和接枝有双键的透明质酸在交联剂存在的条件下，紫外光照射使纳米纤维和透明质酸交联构成接枝有透明质酸的纳米纤维。
16.根据权利要求15所述的制备方法，其特征在于，所述交联剂包括N,N’-亚甲基双丙烯酰胺，邻苯二甲酸二烯丙脂，二亚乙基三胺。
17.根据权利要求15所述的制备方法，其特征在于，紫外光照射5min～15min。
18.根据权利要求15所述的制备方法，其特征在于，所述接枝双键的透明质酸包括甲基丙烯酸透明质酸。
19.根据权利要求15所述的制备方法，其特征在于，先在纳米纤维上加羧基，再通过和带双键的胺类化合物反应以使纳米纤维接枝酰胺键。
20.根据权利要求19所述的制备方法，其特征在于，所述带双键的胺类化合物包括3-丁烯胺，3-甲基-3-丁烯胺。
21.根据权利要求15所述的制备方法，其特征在于，在EDC和NHS的摩尔比为(3.5～4.5):(0.5～1.5)的条件下催化胺类化合物和带有羧基的纳米纤维反应以使纳米纤维带有酰胺键。
22.根据权利要求21所述的制备方法，其特征在于，EDC和NHS的摩尔比4:1。
23.根据权利要求21所述的制备方法，其特征在于，用等离子改性纳米纤维以使其带有羧基。
24.权利要求1-23任一项所述的制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶在制备组织工程材料中的应用。
25.组织工程材料，其特征在于，所述组织工程材料包含权利要求1-23任一项所述的制备方法制备得到的改性细胞外基质水凝胶。
26.根据权利要求25所述的组织工程材料，其特征在于，所述细胞外基质来源于脊髓，所述纳米纤维包括定向排列的纳米纤维。
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CN103877622B (zh) * 2014-03-26 2016-04-20 中山大学 一种静电纺丝纳米纤维-细胞外基质复合材料及其制备方法和应用
KR20170070008A (ko) * 2014-08-15 2017-06-21 더 존스 홉킨스 유니버시티 조직 복원용 복합 재료
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