CN110156931A - 梳状亲水性类肽聚合物、其制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了梳状亲水性类肽聚合物、其制备方法及应用。本发明利用活性阳离子开环聚合反应以甲基丙烯酸为终止剂制备得到一种末端含有双键的聚(2‑甲基‑2‑噁唑啉)大分子单体(PMOXA‑MA)，与带有氨基官能团的单体2‑氨乙基甲基丙烯酸酯(AEMA)无规共聚制备得到一种梳状亲水性类肽聚合物poly(PMOXA‑r‑AEMA)，然后利用该聚合物中AEMA上的氨基可以与聚多巴胺反应的特点，在CuSO4/H2O2催化剂作用下，一步共混沉积快速制备聚合物抗污涂层，最后该聚合物涂层应用于毛细管内壁的修饰制备抗污涂层管，用于蛋白质的分离。

Description

梳状亲水性类肽聚合物、其制备方法及应用
技术领域
本发明涉及毛细管电泳内涂层技术领域，尤其涉及梳状亲水性类肽聚合物、其制备方法及应用。
背景技术
毛细管电泳(Capillary Electrophoresis，CE)分析技术因其快速、高效、经济、样品用量少等优点，在生物医学、环境科学和食品安全检测等众多领域得到了应用。但是在对蛋白样品进行研究时，由于蛋白质与毛细管内壁之间因静电相互作用而使得蛋白质吸附在毛细管内壁，一旦发生吸附，就会导致分离稳定性变差，减弱蛋白质峰的分离柱效，有时甚至难以检测出蛋白质信号峰，严重影响到CE的应用，目前，通过在毛细管内壁修饰上一层聚合物抗污涂层可以有效地减少蛋白质的吸附，提高CE分离的准确性。可以用于制备聚合物抗污涂层的多是一些亲水性的中性聚合物，它们可以通过分子链结合水分子在毛细管内壁形成一层致密的水合层，达到屏蔽毛细管内壁硅羟基，抑制电渗流以及阻抗蛋白质吸附的目的，这类抗污聚合物主要包括：聚乙二醇、聚丙烯酰胺、纤维素类、两性离子聚合物以及聚(2-噁唑啉)类肽类聚合物等，这其中，聚(2-甲基-2-噁唑啉)因其分子主链具有类多肽结构，不仅呈现出良好的亲水性和生物相容性，而且可以阻抗自氧化的发生，具有很好的化学稳定性，有望取代“金标准”抗污聚合物聚乙二醇应用于材料表面改性，如何将这些亲水性的抗污涂层材料结合在基底材料表面是需要解决的关键问题。
2007年，《自然》杂志报道了一种万能粘合剂多巴胺，它在弱碱性(pH>7.5)环境中，有氧条件下能够发生自氧化聚合，可在任何基底材料表面形成一层黏附性较强聚多巴胺功能涂层，该涂层表面具有大量的苯醌结构能够与带有活泼氢的官能团(-NH2，-SH)发生迈克尔加成反应进而可以在聚多巴胺涂层表面进行二次修饰制备功能性涂层，这种方法通常需要较长的时间，相比较而言，通过多巴胺与功能性聚合物的一步共混沉积法制备功能性涂层方法更简单，耗时更短。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了梳状亲水性类肽聚合物、其制备方法及应用，合成了一种亲水性梳状类肽聚合物，通过聚合物上的氨基官能团与多巴胺之间的相互作用，与多巴胺一步共混沉积制备得到抗污聚合物涂层，该聚合物涂层用于毛细管内壁的修饰，能够克服因毛细管内壁硅羟基的解离而引起的电渗流不稳以及与蛋白质之间的吸附问题，提高毛细管电泳分析的准确性。
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物由末端含有双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与带有氨基官能团的单体2-氨乙基甲基丙烯酸酯无规共聚制得。
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法步骤如下：
S1：在氮气条件下将2-甲基-2-噁唑啉、乙腈、和三氟甲磺酸甲酯依次加入装有小磁子的干燥玻璃封管中，重复2-4次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应；
S2：将所述S1中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并加入甲基丙烯酸甲酯和三乙胺，在真空下封管，并进行油浴加热反应；
S3：将所述S2中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并通过旋转蒸发除去其中的溶剂，然后再加入饱和NaHCO3水溶液，搅拌使三乙胺成盐析出，再通过旋转蒸发除去水；
S4：用氯仿将所述S3中固体进行溶解，并向溶液中加入无水硫酸镁干燥除水，搅拌过滤后，旋蒸除去其中的氯仿，旋蒸后的溶液在冰乙醚中沉淀出产物，抽滤后真空干燥，得到带有烯烃双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体；
S5：将所述S4制得的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈加入封管中，并向封管中加入异丙醇，重复2-4次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应；
S6：将所述S5中反应后的产物中加入乙醚进行沉淀、抽滤、干燥，得到梳状类肽聚合物。
优选地，所述S1中2-甲基-2-噁唑啉、三氟甲磺酸甲酯添加的摩尔比为(10-20):1，所述乙腈作为溶剂使2-甲基-2-噁唑啉单体浓度维持在3-5mol/L。
优选地，所述S1、S2和S5中的油浴加热反应条件均为：温度60-100℃、时间24-36h。
优选地，所述S2中三氟甲磺酸甲酯与甲基丙烯酸甲酯、三乙胺的摩尔比为1:(1.5-3):(3-5)。
优选地，所述S3中NaHCO3与三乙胺的摩尔比为(50-100):1。
优选地，所述S4中的真空干燥的条件为：真空度-0.1MPa，温度40-60℃，时间24-48小时。
优选地，所述S5中的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体、2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为(100-10):(50-10):1，所述异丙醇作为溶剂使聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体浓度维持在3-5mol/L。
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物在分离蛋白中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益技术效果：
(1)本发明制备的梳状结构聚合物中，PMOXA部分可以抗蛋白质吸附，AEMA部分作为锚点与聚多巴胺结合在材料表面；
(2)以本发明制备的梳状结构聚合物采用一步共混沉积法制备抗污涂层毛细管快速、简单、易操作；
(3)能够有效屏蔽毛细管内壁硅羟基，提高CE分离效率。
附图说明
图1为本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物的合成路线；
图2为本发明提出的PMOXA-MA和poly(PMOXA-r-AEMA)的核磁氢谱；
图3为本发明提出的类肽聚合物涂层抗蛋白质吸附荧光图片；
图4为本发明提出的类肽聚合物涂层抗蛋白质荧光强度对比图；
图5为本发明提出的类肽聚合物涂层抗血小板黏附扫描电镜图；
图6为本发明提出的类肽聚合物涂层管分离四种碱性蛋白质电泳谱图；
图7为本发明提出的类肽聚合物涂层管分离鸡蛋清蛋白质电泳谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例1
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物的合成路线如图1所示，制备方法步骤如下：
S1：在氮气条件下将2-甲基-2-噁唑啉、乙腈、和三氟甲磺酸甲酯依次加入装有小磁子的干燥玻璃封管中，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中2-甲基-2-噁唑啉、三氟甲磺酸甲酯添加的摩尔比为20:1，所述乙腈作为溶剂使2-甲基-2-噁唑啉单体浓度维持在5mol/L，油浴加热的条件为：温度100℃、时间36h；
S2：将所述S1中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并加入甲基丙烯酸甲酯和三乙胺，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中三氟甲磺酸甲酯与甲基丙烯酸甲酯、三乙胺的摩尔比为1:3:5，油浴加热的条件为：温度100℃、时间36h；
S3：将所述S2中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并通过旋转蒸发除去其中的溶剂，然后再加入饱和NaHCO3水溶液，搅拌使三乙胺成盐析出，再通过旋转蒸发除去水，其中NaHCO3与三乙胺的摩尔比为(50-100):1；
S4：用氯仿将所述S3中固体进行溶解，并向溶液中加入无水硫酸镁干燥除水，搅拌过滤后，旋蒸除去其中的氯仿，旋蒸后的溶液在冰乙醚中沉淀出产物，抽滤后真空干燥，得到带有烯烃双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体，其中真空干燥的条件为：真空度-0.1MPa，温度40-60℃，时间24-48小时，即可得到聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体，其核磁氢谱如图2(A)所示；
S5：将所述S4制得的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈加入封管中，并向封管中加入异丙醇，重复2-4次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体、2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为100:50:1，所述异丙醇作为溶剂使聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体浓度维持在5mol/L，油浴加热的条件为：温度100℃、时间36h；
S6：将所述S5中反应后的产物中加入乙醚进行沉淀、抽滤、干燥，得到梳状类肽聚合物，即poly(PMOXA-r-AEMA)，其核磁氢谱如图2(B)所示。
实施例2
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法步骤如下：
S1：在氮气条件下将2-甲基-2-噁唑啉、乙腈、和三氟甲磺酸甲酯依次加入装有小磁子的干燥玻璃封管中，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中2-甲基-2-噁唑啉、三氟甲磺酸甲酯添加的摩尔比为10:1，所述乙腈作为溶剂使2-甲基-2-噁唑啉单体浓度维持在3mol/L，油浴加热的条件为：温度60℃、时间24h；
S2：将所述S1中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并加入甲基丙烯酸甲酯和三乙胺，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中三氟甲磺酸甲酯与甲基丙烯酸甲酯、三乙胺的摩尔比为1:1.5:3，油浴加热的条件为：温度60℃、时间24h；
S3：将所述S2中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并通过旋转蒸发除去其中的溶剂，然后再加入饱和NaHCO3水溶液，搅拌使三乙胺成盐析出，再通过旋转蒸发除去水，其中NaHCO3与三乙胺的摩尔比为50:1；
S4：用氯仿将所述S3中固体进行溶解，并向溶液中加入无水硫酸镁干燥除水，搅拌过滤后，旋蒸除去其中的氯仿，旋蒸后的溶液在冰乙醚中沉淀出产物，抽滤后真空干燥，得到带有烯烃双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体，其中真空干燥的条件为：真空度-0.1MPa，温度40℃，时间24小时；
S5：将所述S4制得的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈加入封管中，并向封管中加入异丙醇，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体、2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为10:10:1，所述异丙醇作为溶剂使聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体浓度维持在3mol/L，油浴加热的条件为：温度60℃、时间24h；
S6：将所述S5中反应后的产物中加入乙醚进行沉淀、抽滤、干燥，得到梳状类肽聚合物。
实施例3
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法步骤如下：
S1：在氮气条件下将2-甲基-2-噁唑啉、乙腈、和三氟甲磺酸甲酯依次加入装有小磁子的干燥玻璃封管中，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中2-甲基-2-噁唑啉、三氟甲磺酸甲酯添加的摩尔比为15:1，所述乙腈作为溶剂使2-甲基-2-噁唑啉单体浓度维持在4mol/L，油浴加热的条件为：温度80℃、时间30h；
S2：将所述S1中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并加入甲基丙烯酸甲酯和三乙胺，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中三氟甲磺酸甲酯与甲基丙烯酸甲酯、三乙胺的摩尔比为1:2:4，油浴加热的条件为：温度80℃、时间30h；
S3：将所述S2中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并通过旋转蒸发除去其中的溶剂，然后再加入饱和NaHCO3水溶液，搅拌使三乙胺成盐析出，再通过旋转蒸发除去水，其中NaHCO3与三乙胺的摩尔比为80:1；
S4：用氯仿将所述S3中固体进行溶解，并向溶液中加入无水硫酸镁干燥除水，搅拌过滤后，旋蒸除去其中的氯仿，旋蒸后的溶液在冰乙醚中沉淀出产物，抽滤后真空干燥，得到带有烯烃双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体，其中真空干燥的条件为：真空度-0.1MPa，温度50℃，时间36小时；
S5：将所述S4制得的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈加入封管中，并向封管中加入异丙醇，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应，其中聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体、2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为50:30:1，所述异丙醇作为溶剂使聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体浓度维持在4mol/L，油浴加热的条件为：温度80℃、时间30h；
S6：将所述S5中反应后的产物中加入乙醚进行沉淀、抽滤、干燥，得到梳状类肽聚合物。
实施例4
本发明提出的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法步骤如下：
S1：在氮气条件下将2-甲基-2-噁唑啉(5mL，59.09mM)、乙腈(10mL)、和三氟甲磺酸甲酯(570μL，5.03mM)依次加入装有小磁子的25mL干燥玻璃封管中，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并在80℃下油浴加热反应24h；
S2：将所述S1中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并加入甲基丙烯酸甲酯(0.632mL，88.575mmol)和三乙胺(1.375mL，118.1mmol)，在真空下进行二次封管，并在80℃下油浴加热反应36h；
S3：将所述S2中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并通过旋转蒸发除去其中的溶剂，然后再加入100mL饱和NaHCO3水溶液，搅拌使三乙胺成盐析出，再通过旋转蒸发除去水；
S4：用100mL氯仿将所述S3中固体进行溶解，并向溶液中加入10g无水硫酸镁干燥除水，搅拌过滤后，旋蒸除去其中的氯仿，旋蒸后的溶液在冰乙醚中沉淀出产物，抽滤后真空干燥，得到带有烯烃双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体，其中真空干燥的条件为：真空度-0.1MPa，温度40-60℃，时间24-48小时；
S5：将所述S4制得的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体(1.3g，1.53mmol)与2-氨乙基甲基丙烯酸酯(0.2518g，1.53mmol)、偶氮二异丁腈(0.02518g，0.153mmol)加入25mL封管中，并向封管中加入10mL异丙醇，重复3次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并在70℃下油浴加热反应24h；
S6：将所述S5中反应后的产物中加入乙醚进行沉淀、抽滤、干燥，得到梳状类肽聚合物。
类肽聚合物抗污涂层的制备及抗污性能研究
本发明以实施例4所得的梳状类肽聚合物为原料制备PMOXA抗污涂层，其步骤如下：
配制多巴胺和poly(PMOXA-r-AEMA)的Tris-HCl溶液(浓度5-5mg/mL溶于10mM，pH8.5的Tris-HCl缓冲液中)，向其中加入CuSO4(5mM)和H2O2(19.6mM)搅拌均匀，将玻璃片置于以上混合溶液中，室温下反应60min，取出，去离子水冲洗表面，氮气吹干，至此PMOXA抗污涂层制备完成，为做对比实验，上述相同浓度下制备聚多巴胺涂层玻璃片以及未加速体系下24h制备PMOXA涂层玻璃片。
以上PMOXA涂层的抗蛋白质吸附性能通过对荧光标记蛋白质FITC-BSA的吸附效果验证如图3。图3(A)及图3(B)为裸玻璃片以及聚多巴胺修饰之后的表面对FITC-BSA的吸附效果图，很显然这些材料表面是吸附蛋白质的，所以显示出强烈的荧光特性。与之相对应的未加速体系下制备得到的PMOXA涂层表面(图3(C))以及在CuSO4/H2O2催化剂作用下制备得到的PMOXA涂层表面(图3(D))的抗蛋白质吸附效果明显提升，材料表面的荧光信号明显减弱，相应的荧光信号强度对比如图4所示，说明了该种方法制备得到的抗污涂层的明显优势，尤其是在CuSO4/H2O2催化剂作用下快速制备PMOXA抗污涂层的可靠性。
此外，开展了PMOXA涂层的抗血小板黏附性能研究，如图5所示。图5(A)及图5(B)为裸玻璃片以及聚多巴胺修饰之后的表面对血小板的吸附效果图，很显然这些材料表面吸附了血小板。与之相对应的未加速体系下制备得到的PMOXA涂层表面(图5(C))以及在CuSO4/H2O2催化剂作用下制备得到的PMOXA涂层表面(图5(D))的呈现出优异的抗血小板黏附性能。
上述研究表明在在CuSO4/H2O2催化剂作用下快速制备PMOXA抗污涂层的可靠性，因此该种方法应用于毛细管内壁的修饰制备PMOXA涂层毛细管。
类肽聚合物抗污涂层管的制备及用于蛋白质分离
制备方法：截取50cm长的毛细管(内径/外径为75/365μm)，在15cm处烧出2mm宽的窗口，依次用乙醇(15min)、1M HCl(15min)、去离子水(5min)、1M NaOH(30min)、去离子水(5min)冲洗毛细管，然后氮气吹干，得到预处理后的毛细管。然后配制多巴胺和上述poly(PMOXA-r-AEMA)的混合Tris-HCl溶液(浓度5-5mg/mL溶于10mM，pH 8.5的Tris-HCl缓冲液中)，向其中加入CuSO4(5mM)和H2O2(19.6mM)搅拌均匀后用注射器注入预处理后的毛细管中，用封口膜密封毛细管两端并置于电热板上，30℃下反应60min。反应结束后，用去离子水冲洗除去残留溶液，氮气吹干，得到PMOXA类肽聚合物涂层管。
PMOXA类肽聚合物涂层毛细管用于四种碱性蛋白质混合样品的分离如图6所示。未经修饰的毛细管由于在分离缓冲液环境下表面硅羟基的解离导致了与分析蛋白之间的静电相互作用加强，碱性蛋白质吸附在毛细管内壁发生了吸附，故不能实现蛋白质混合样品的有效分离，相比较而言，通过PMOXA修饰之后的涂层毛细管可以实现四种碱性蛋白质混合样品的有效分离，并且连续分离九次仍然保持迁移时间的稳定性。
PMOXA类肽聚合物涂层毛细管用于鸡蛋清蛋白的分离如图7所示。未经修饰的毛细管由于在分离缓冲液环境下表面硅羟基的解离导致了与鸡蛋清蛋白之间的静电相互作用加强，鸡蛋清蛋白吸附在毛细管内壁故难以检测出信号峰，相比较而言，通过PMOXA修饰之后的涂层毛细管可以实现鸡蛋清蛋白的有效分离，并且连续分离九次仍然保持迁移时间的稳定性。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种梳状亲水性类肽聚合物，其特征在于，所述梳状亲水性类肽聚合物由末端含有双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与带有氨基官能团的单体2-氨乙基甲基丙烯酸酯无规共聚制得。
2.一种如权利要求1所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，方法步骤如下：
S1：在氮气条件下将2-甲基-2-噁唑啉、乙腈、和三氟甲磺酸甲酯依次加入装有小磁子的干燥玻璃封管中，重复2-4次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应；
S2：将所述S1中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并加入甲基丙烯酸甲酯和三乙胺，在真空下封管，并进行油浴加热反应；
S3：将所述S2中反应结束后的干燥玻璃封管打开，并通过旋转蒸发除去其中的溶剂，然后再加入饱和NaHCO3水溶液，搅拌使三乙胺成盐析出，再通过旋转蒸发除去水；
S4：用氯仿将所述S3中固体进行溶解，并向溶液中加入无水硫酸镁干燥除水，搅拌过滤后，旋蒸除去其中的氯仿，旋蒸后的溶液在冰乙醚中沉淀出产物，抽滤后真空干燥，得到带有烯烃双键的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体；
S5：将所述S4制得的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体与2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈加入封管中，并向封管中加入异丙醇，重复2-4次“冷冻-抽真空-解冻”步骤，在真空下封管，并进行油浴加热反应；
S6：将所述S5中反应后的产物中加入乙醚进行沉淀、抽滤、干燥，得到梳状类肽聚合物。
3.根据权利要求2所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，所述S1中2-甲基-2-噁唑啉、三氟甲磺酸甲酯添加的摩尔比为(10-20):1，所述乙腈作为溶剂使2-甲基-2-噁唑啉单体浓度维持在3-5mol/L。
4.根据权利要求2所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，所述S1、S2和S5中的油浴加热反应条件均为：温度60-100℃、时间24-36h。
5.根据权利要求2所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，所述S2中三氟甲磺酸甲酯与甲基丙烯酸甲酯、三乙胺的摩尔比为1:(1.5-3):(3-5)。
6.根据权利要求2所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，所述S3中NaHCO3与三乙胺的摩尔比为(50-100):1。
7.根据权利要求2所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，所述S4中的真空干燥的条件为：真空度-0.1MPa，温度40-60℃，时间24-48小时。
8.根据权利要求2所述的梳状亲水性类肽聚合物的制备方法，其特征在于，所述S5中的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体、2-氨乙基甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为(100-10):(50-10):1，所述异丙醇作为溶剂使聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子单体浓度维持在3-5mol/L。
9.一种如权利要求1所述的梳状亲水性类肽聚合物在分离蛋白中的应用。
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