CN110150328B - 独活提取物在防治植物真菌病害中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及独活提取物在防治植物真菌病害中的应用。本发明中防治植物真菌病害的独活选用的是索斯诺夫独活，索斯诺夫独活提取物相对于中国独活提取物具有更高的活性，对于植物真菌病害的防治效果更好，用乙醇对索斯诺夫独活整株(包括根茎叶)进行提取，制得提取物，在防治植物真菌病害时，将提取物稀释50‑300倍，然后对土壤进行浇灌、对植物患病部位或整株进行喷施即可。本发明制备的独活提取物对植物真菌病害具有较高的抑制作用，且生产成本低，环境友好，对于田间作物的叶霉病、霜霉病、枯萎病、赤霉病等具有较高的防治效果，防治效果迅速稳定，易于掌握。

Description

独活提取物在防治植物真菌病害中的应用

技术领域

本发明涉及高活性独活提取物在防治植物真菌病害中的应用，属于生物防治植物真菌病害技术领域。

背景技术

索斯诺夫独活是一种耐寒的植物，在寒冷的气候中生长良好。索斯诺夫独活的拉丁名：Heracleum Sosnowskyi，俄文名：

中文名：索斯诺夫独活，伞形科，独活属，主要分布区域：俄罗斯、亚美尼亚、土耳其、爱沙尼亚、立陶宛、白俄罗斯、乌克兰等地，在中国还未有报道发现。索斯诺夫独活二年生或多年生植物，是雌雄同体植物，所以不需要传粉者，即使是一个单株也可以向周围扩散。一株正常生长的索斯诺夫独活，春天发芽，通过夏季形成9-15叶秋花环，直到秋末，越冬良好，明年冰雪融化后，立即生长。春天的植物耐受霜冻-7至-9℃，在秋天耐受-3至-5℃，一生一次结果(即开花，结果，然后死亡)；花期在当地的七月至八月，种子成熟40-45天，成果期七月至九月，一颗植物产生20000粒种子，有的高达10万粒种子，种子干皱倒卵形，扁平，粗糙，底部有尖刺毛，紫色或紫红色斑点，种子长10-12毫米，宽6-8毫米，种子发芽高达89％。埋在土壤中的种子即使缺乏生长条件仍可以存活几十年。

索斯诺夫独活株高2米，有的高达3米，茎粗壮，中空，深具凹陷，很少短柔毛，茎生长异常迅速，一天可生长出九厘米高。叶子有长柄，叶柄基部膨大成长圆形、带紫红色的叶鞘；茎上部叶通常仅一回羽状分裂；茎生叶，叶柄较短，最上部的叶多简化成顶端3裂的小叶片；叶缘下部全缘，先端锐尖，基部楔形。基部和下部叶片是三齿大叉或羽状深裂，通常解剖叶片黄绿色，所有的叶子都在外部裸露，很少在下面；直根长1.4-1.9米，大部分根层深30厘米，单根可深达2米。索斯诺夫独活属于极端环境生长的植物，有超强的生存能力，具有侵略性，在无节制环境中迅速蔓延，植物的数量不断增大，他们侵占了肥沃的土地，排挤其他植物，如果索斯诺夫独活能够被合理的利用，将能够极大的缓解这一植物危害。

中国独活，伞形科，独活属，中国独活有27个种，主要分布在我国西南横断山区，中国独活在中药上应用较多，不仅在风寒湿痹，腰膝疼痛，少阴伏风头痛，风寒挟湿头痛等方面具有显著作用，对于心血管系统以及激素等方面的作用也尤为突出，其成分复杂，主要包括香豆素类、挥发油、萜类、甾醇、有机酸等，其中主要成分为香豆素类。中国独活醇提取物在农业上的应用较少，仅有在防治柑桔贮藏病害上的防治和减轻除草剂对农作物要害方面的应用有一些报道，但在植物的真菌防治上鲜有报道。

植物病害中，70％-80％的病害是由于病原真菌侵染所导致的。植物真菌病害是指生活在土壤或空气中的真菌病原菌在条件适宜的情况下，从植物根、茎或叶侵染植物，从而导致植株萎蔫、枯死的病害，甚至危害果实，使果实产生病斑或腐烂，影响产量。植物真菌病害不仅直接造成农作物产量下降与品质降低，而且部分病原真菌在侵染农作物过程中，可分泌产生多种对人畜有害的毒素与代谢物，对农产品的安全性构成极大威胁。真菌病原菌的传播有多种途径，其侵染并引发植株的系统性病害，给农业生产造成极大的损失，例如褐孢霉(Cladosporiumfulvum)不仅能够导致田间作物引发叶霉病，影响叶片光合作用，而且还会感染茎秆和果实；古巴假霜霉菌(Pseudoperonosporacubensis Rostov.)可引起瓜类的霜霉病；链格孢菌(Alternariasp.)可引起包括玉米、小麦、烟草、马铃薯、番茄、苹果、梨等几十种农作物的病害，引发早疫病、叶枯病等，造成田间和产后损失；立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)可引起水稻、马铃薯、甘蓝、番茄、苹果等几十种作物幼苗的萎蔫甚至枯死，导致作物幼苗根部或茎基部组织腐烂、坏死，严重影响作物成活率；尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporium)、禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)和瓜果腐霉菌(Pythiumaphanidermatum)是世界性的土传病原真菌，可危害麦类、瓜类、豆科、花卉等100多种植物，使植物大批量枯萎或坏死，导致作物大批量减产等。

目前对植物真菌病害的控制多为化学防治和微生物防治。中国专利文献CN102972398A(申请号201210562784.8)公开了一种化合物在防治链格孢菌所致植物真菌病害中的应用，具体涉及2-甲基-5-异丙基苯酚在防治链格孢菌所致植物真菌病害中的应用，发明内容为：按总体积1～45％的比例将OP-10型乳化剂加入2-甲基-5-异丙基苯酚中用丙酮溶解，制成含量为1～80％(w/w)的2-甲基-5-异丙基苯酚溶液，用于链格孢菌所致的番茄早疫病、白菜黑斑病、烟草赤星病的防治。但是化学杀菌剂不仅在生产上会污染环境以及生产成本高，而且其反复施用不可避免地带来环境污染与农产品农药残留问题，而微生物防治是目前研究较广的生态友好和生成成本低的防治方法，有利于延缓害虫抗药性的发生和发展，在连续使用的情况下，对一些真菌病害也具有连续而持久的抑制作用等诸多优点。中国专利文献CN104164382A(申请号201410246750.7)公开了防治植物真菌病害的生防菌G58及其菌剂制备方法和应用。该生防菌命名为Bacillus amyloliquefaciensG58，保藏号CGMCCNO.8977；该生防菌菌剂的制备方法为将活化后的菌株G58接种于NA培养液培养22～26h获得种子液，将种子液接种于发酵培养基培养48～72h获得发酵液，即为生防菌菌剂；含菌株G58的生防菌剂对于水稻纹枯病表现出显著的防治效果，防效可达73.6％。但是微生物防治也有其局限性，防治效果比较缓慢，应付突发性真菌病害较为被动，同时由于受环境因素的影响较大，防治效果不够稳定，使用时间和技术要求比较严格，不易掌握。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了高活性独活提取物在防治植物真菌病害中的应用。本发明中防治植物真菌病害的独活选用的是不同于中国独活的索斯诺夫独活，本发明人意外发现索斯诺夫独活提取物相对于中国独活提取物具有更高的活性，对于植物真菌病害的防治效果更好，用乙醇对索斯诺夫独活整株(包括根茎叶)进行提取，制得提取物，在防治植物真菌病害时，将提取物稀释50-300倍，然后对土壤进行浇灌、对植物患病部位或整株进行喷施即可。

本发明的技术方案如下：

高活性独活提取物在防治植物真菌病害中的应用，其特征在于，所述独活为索斯诺夫独活，拉丁名称：Heracleum Sosnowskyi，伞形科，独活属。

根据本发明优选的，所述高活性独活提取物的制备方法，包括步骤如下：

将整株独活截成小段后，干燥粉碎得独活粉，向独活粉中加入体积分数为70％-90％的乙醇，所述独活粉与乙醇的加量比为1：(3-10)，单位为kg/L，在30～50℃，150～200r/min，振荡提取12-15h，过滤，收集滤液，滤渣被重复提取2-3次，合并上述滤液，离心收集上清液，30-50℃下减压浓缩20-50倍，加入5-20倍体积的体积分数为40～65％的乙醇溶解，即得高活性独活提取物。

本发明中，提取时采用高浓度乙醇可以尽可能多的将独活中的活性成分提取出来，而在溶解时采用5-20倍40～65％的乙醇已经可以将其溶解，即可以减少乙醇的使用量。优选的，在溶解时采用9-12倍体积50～60％的乙醇，进一步优选采用10倍体积50％的乙醇。

进一步优选的，所述干燥为自然晾干或35-45℃烘干。

进一步优选的，所述离心为4000-8000r/min离心10-20min。

根据本发明优选的，所述应用是将高活性独活提取物稀释50-300倍，然后对土壤进行浇灌、对植物患病部位或整株进行喷施即可。

有益效果：

1、索斯诺夫独活醇提取物对植物真菌病害具有较高的抑制作用，由于索斯诺夫独活有超强的生存能力，在俄罗斯等地分布较广，泛滥成灾，仅在俄罗斯存在的天然资源就有一百万多公顷，资源丰富，取材容易，生产成本低，环境友好。

2、索斯诺夫独活醇提取物用于植物真菌病害的防治，对叶霉病病原菌褐孢霉(Cladosporium fulvum)、作物早疫病和叶枯病等病原菌链格孢菌(Alternaria sp.)、谷类纹枯病和蔬菜立枯病病原菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、作物枯萎病病原菌尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporium)、谷类赤霉病病原菌禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)和瓜果茎基腐病病原菌瓜果腐霉菌(Pythium ultimum)等真菌病原菌的菌丝生长具有较强的抑制作用，并且抑制作用明显高于中国独活的醇提取物，对于田间作物的叶霉病、霜霉病、枯萎病、赤霉病等具有较高的防治效果，且防治效果迅速稳定，易于掌握。

附图说明

图1是独活提取物对番茄枯萎病治理的盆栽实验图；图中，Blank为空白组，CK为对照组，Cnh.为中国独活组，Snh.为索斯诺夫独活组；

图2是独活提取物对番茄叶霉病的治理效果图；图中，CK为对照组，Cnh.为中国独活组，Snh.为索斯诺夫独活组。

具体实施方案

下面结合实施案例来进一步说明本发明，可以使本领域技术人员更有效的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

本发明中所述独活为俄罗斯索斯诺夫独活，有超强的生存能力。

实施例和实验例中所使用培养基如下：

平板PDA培养基组分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂17～20g，去离子水定容至1000mL，121℃高温灭菌20分钟。

液体PDB培养基组分为马铃薯200g，葡萄糖20g，去离子水定容至1000mL，121℃高温灭菌20分钟。

浓缩一倍的PDA培养基组分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，去离子水定容至500mL，121℃高温灭菌20分钟。

平板琼脂培养基组分为琼脂17～20g，去离子水定容至1000mL，121℃高温灭菌20分钟。

实施例中涉及的菌种均为现有菌种，不涉及微生物保藏，微生物来源如下：

褐孢霉：北纳生物有售，菌种编号ATCC44962；

链格孢菌：中国典型培养物保藏中心有售，菌种编号CCTCC AF 93082；

立枯丝核菌：中国普通微生物菌种保藏管理中心有售，菌种编号CGMCC 3.17046；

尖孢镰孢菌：中国普通微生物菌种保藏管理中心有售，菌种编号CGMCC 3.12834；

瓜果腐霉菌：中国普通微生物菌种保藏管理中心有售，菌种编号CGMCC 3.17833；

禾谷镰孢菌：中国典型培养物保藏中心有售，菌种编号CCTCC AF 2015031。

实施例1

高活性独活提取物的制备方法，步骤如下：

(1)将整株索斯诺夫独活截成小段后，自然晾干，用粉碎机粉碎，称取1kg独活粉，加入5L体积分数为80％的乙醇，在30℃，150r/min，振荡提取12h，过滤，收集滤液，滤渣重复提取2次；

(2)合并上述滤液，8000r/min离心10min，收集上清液，45℃下用旋转蒸发仪浓缩35倍，浓缩成膏状近乎蒸干，加入10倍体积的体积分数为50％的乙醇溶解，即得高活性独活提取物。

同理制备中国独活提取物作为对照组，中国独活产自湖北。

进行体外抑菌活性实验，病原菌使用褐孢霉、链格孢菌、立枯丝核菌、尖孢镰孢菌、禾谷镰孢菌和瓜果腐霉菌。

牛津杯法测定发酵液的抑菌活力：

先将上述菌种活化，用接种环将冷藏保存的上述菌种在超净工作台中划线接种于平板PDA培养基上，28℃静置培养48小时，挑取边缘菌丝接种于液体PDB培养基中，在150rpm、26～30℃的条件下培养24-28小时，进行二次活化；再吸取二次活化的PDB培养液接种到新的PDB培养基中，在150rpm、26～30℃的条件下培养48-52小时，制得活孢子悬液。

在灭菌的培养皿中，倒入平板琼脂培养基，冷凝后，用镊子将无菌的牛津杯轻轻放在平板琼脂培养基上，每平板放置3只牛津杯，分别做空白组(Blank)、中国独活组(Cnh.)、索斯诺夫独活组(Snh.)；用已灭菌浓缩一倍的PDA培养基，在60℃下与等体积的上述孢子悬液快速混匀后，快速倒入放有牛津杯的平板琼脂培养基上，倒入量以距离牛津杯顶端边缘约1mm，冷却后，用无菌镊子取出牛津杯。

取1mL上述独活提取液加入99mL无菌水，制备含1％独活提取液的独活制剂，在培养基中牛津杯形成的槽内加入0.2mL 1％独活制剂，空白组加入等量无菌水，平行三组。加入独活制剂后，将平板放入4℃冰箱中12小时，使独活制剂在平板中扩散开，再放入25-28℃恒温培养箱中，培养72小时后，测量抑菌圈的直径，结果见表1。

表1：独活提取物对各植物真菌抑菌圈的直径

组别	褐孢霉	链格孢菌	立枯丝核菌	尖孢镰孢菌	禾谷镰孢菌	瓜果腐霉菌
							Blank(mm)	0	0	0	0	0	0
Cnh.(mm)	18.73	12.51	15.75	19.11	19.26	18.06
							Snh.(mm)	22.27**	16.43**	18.28*	22.49*	22.82*	23.04**

注：表格中“*”表示同一测定指标不同处理间差异达5％显著水平，“**”表示同一测定指标不同处理间差异达1％显著水平。

用牛津杯法检测的抑菌活性结果显示，索斯诺夫独活组(Snh.)对褐孢霉、链格孢菌、立枯丝核菌、尖孢镰孢菌、禾谷镰孢菌和瓜果腐霉菌的生长抑制作用比中国独活组(Cnh.)高，且具有显著差异。Snh.对褐孢霉的抑菌圈的直径比Cnh.高出约18.90％，对链格孢菌的抑菌圈的直径比Cnh.高出约31.33％，对立枯丝核菌的抑菌圈的直径比Cnh.高出约16.06％，对尖孢镰孢菌的抑菌圈的直径比Cnh.高出约17.69％，对瓜果腐霉菌的抑菌圈的直径比Cnh.高出约27.57％。

实施例2

独活提取物对番茄枯萎病防治的盆栽实验

番茄枯萎病尖孢镰孢菌菌种活化，用接种环将冷藏保存的尖孢镰孢菌在超净工作台中划线接种于平板PDA培养基上，28℃静置培养48小时，挑取边缘菌丝接种于液体PDB培养基中，在150rpm、26～30℃的条件下培养24-28小时，进行二次活化；再吸取二次活化的PDB培养液接种到新的PDB培养基中，在150rpm、26～30℃的条件下培养48-52小时，制得活孢子悬液。

以灭菌的黄土：营养土＝2∶1(w/w)为基质(黄土来自山东莱阳)，番茄种子用次氯酸钠消毒液消毒3min，再用体积分数为75％的乙醇消毒5min，用无菌水冲洗3遍，置28℃恒温箱催芽，移栽入盆，每盆4株，每组处理6盆，移栽后放置在植物培养室内生长，培养条件为光照14h，黑暗10h，温度25℃，湿度75％。

30天后接种尖孢镰孢菌，利用伤根处理的方法接种病原菌，伤根后在尖孢镰孢菌活孢子悬液中浸泡30min后，移栽到18cm的圆形花盆中，同时在每个花盆中再浇灌40mL尖孢镰孢菌活孢子悬液，1h后向花盆中浇灌100mL 150倍稀释的实施例1中独活提取物制剂，实验共设置4组，分别为100mL无菌水代替稀释制剂的对照组(CK)、中国独活组(Cnh.)、索斯诺夫独活组(Snh.)、空白组(Blank)，空白组为伤根后用无菌水浸泡30min后移栽，用100mL无菌水浇灌处理；接种5天后调查病情，计算病情指数并测定叶片丙二醛、超氧阴离子含量和过氧化氢含量。结果见表2和图1。

表2：叶片丙二醛、超氧阴离子和过氧化氢含量

组数	丙二醛	超氧阴离子	过氧化氢	病情指数	相对防效
						Blank(nmol·mg<sup>-1</sup>)	4.81cd	4.52d	2.04c	1.14	-
CK(nmol·mg<sup>-1</sup>)	7.82a	9.69a	3.81a	92.47	-
						Cnh.(nmol·mg<sup>-1</sup>)	6.44b	7.46b	2.94b	38.18	58.71
Snh.(nmol·mg<sup>-1</sup>)	5.17c	5.73c	2.17c	10.57	88.57

注：表格中abc表示同一测定指标不同处理间差异达5％显著水平。

图1显示，空白组(Blank)番茄叶片几乎全部处于伸展状态，未有萎蔫现象；对照组(CK)番茄均呈现萎蔫状态，叶片蜷缩，患病严重；中国独活组(Cnh.)有部分植株叶片萎蔫，呈现轻度枯萎现象，相对防效为58.71％；索斯诺夫独活组(Snh.)仅有个别叶片呈现轻度蜷缩，整体生长状态良好，相对防效为88.57％。表2的结果显示叶片丙二醛、超氧阴离子含量和过氧化氢含量趋势一致，CK组叶片的丙二醛、超氧阴离子含量和过氧化氢含量均较高，表明细胞膜过氧化严重，超氧阴离子含量和过氧化氢含量积累较多，叶片受损伤较为严重，与图1中结果一致，患病严重；其次是Cnh组，丙二醛、超氧阴离子和过氧化氢含量虽然比CK组较低，但比Snh组和Blank组含量较高，表明Cnh组对枯萎病有一定的防治效果，但防治效果相对Snh组较差；Snh组的丙二醛、超氧阴离子和过氧化氢含量相对较低，与Blank组的结果相似，差异并不显著。上述结果表明，Snh组的制剂可以很好的抑制枯萎病对植物的侵害，效果较好；Cnh组也可以防治番茄枯萎病，但效果相对Snh组较差。

实施例3

独活提取物对甜瓜霜霉病的防治效果(山东金乡)

高活性独活提取物的制备方法，步骤如下：

(1)将整株索斯诺夫独活截成小段后，自然晾干，用粉碎机粉碎，称取10kg独活粉，加入50L体积分数为80％的乙醇，在30℃，150r/min，搅拌提取12h，过滤，收集滤液，滤渣重复提取2次；

(2)合并上述滤液，6000r/min离心10min，收集上清液，45℃下用减压浓缩40倍，浓缩成膏状近乎蒸干，加入10倍体积的体积分数为60％的乙醇溶解，即得高活性独活提取物。

同理制备中国独活提取物作为对照，中国独活产自湖北。

供试作物为甜瓜，品种京玉352，在连续两年患有严重甜瓜霜霉病的实验地上，试验共设3个处理组：清水处理组(CK)；中国独活提取物稀释100倍组(Cnh)；索斯诺夫独活提取物稀释100倍组(Snh1)；索斯诺夫独活提取物稀释200倍组(Snh2)；索斯诺夫独活提取物稀释300倍组(Snh1)；其他施肥和生长条件一致。

在幼苗定植前，以每平方4L的剂量向作物生长的土壤进行喷洒，同时在移栽期，开花期，坐果期向叶面各喷施1次，其他管理措施均同大田。按照叶片病斑数和病斑面积占叶圆盘面积的百分率，对甜瓜霜霉病病情进行分级，测定甜瓜植株病情指数(％)＝{∑(各级病叶数×该级代表值)/(调查总叶数×最高级代表值)}×100，相对防效(％)＝{(对照组病情指数-实验组病情指数)/对照组病情指数}×100。结果如表3所示。

表3：对甜瓜霜霉病病害的防治效果

组数	Blank	Cnh.	Snh1	Snh2	Snh3
						霜霉病病害发病率/％	84.69	29.38	4.38	8.13	13.44
相对防效/％	-	65.31	94.83	90.41	77.49

上述结果显示在甜瓜霜霉病的防治上，索斯诺夫独活提取物稀释100倍组(Snh1)效果最为明显，相对防效可高达94.83％；索斯诺夫独活提取物稀释200倍组(Snh2)的效果次之，相对防效为90.41％；索斯诺夫独活提取物稀释300倍组(Snh3)的效果相对较差，相对防效为77.49％；中国独活提取物稀释100倍组(Cnh)相对于索斯诺夫独活提取物稀释100倍组(Snh1)效果较差，仅有65.31％。

实施例4

独活提取物对番茄叶霉病的防治效果(山东莱阳)

供试番茄品种为普罗旺斯，番茄于2018年10月27日在大棚播种，采用24孔穴盘育苗，穴盘中装草炭土，每穴播种1粒。待番茄幼苗长至3叶时开始移栽。采用高畦深沟式栽培，畦宽1m，畦距0.5m。共种植12个栽培畦，每畦30株。当番茄植株长至6叶时吊蔓，将尼龙绳上吊铁丝，下缚番茄藤。

试验设空白组(CK)、中国独活组(Cnh.)、索斯诺夫独活组(Snh.)3个处理组，每个处理组3个栽培畦。在开花期和坐果期分别向番茄根际大量喷施叶霉病病原菌褐孢霉活孢子悬液，褐孢霉活孢子悬液的制备方法同实施例2中尖孢镰孢菌活孢子悬液的制备方法，活孢子浓度为8×10⁸个/mL，使植株染病。制剂处理组是将实施例3中索斯诺夫独活提取物稀释100倍，在移栽期，开花期，坐果期各喷施1次，其他管理措施均同大田。

根据叶片上黄化斑的个数和叶片背面霉状物的颜色，对番茄叶霉病病害进行分级，进而测定番茄叶霉病的发病率，即植株病情指数(％)＝{∑(各级发病数×该级代表值)/(调查总株数×最高级代表值)}×100，以及相对防效(％)＝{(对照组病情指数-实验组病情指数)/对照组病情指数}×100。结果见表4和图2。

表4：对番茄叶霉病病害的防治效果

组数	CK	Cnh.	Snh.
				叶霉病病害发病率/％	90.83	26.67	7.50
相对防效/％	-	70.64	91.74

表4和图2结果表明，独活醇提取物对抑制番茄叶霉病有较好的效果，索斯诺夫独活组(Snh.)将发病率控制到7.50％，相对防效高达91.74％；中国独活组(Cnh.)相对索斯诺夫独活组(Snh.)较差，发病率控制在26.67％，相对防效为70.64％；而CK组有23株苗含有大量干枯卷曲的叶片，甚至植株整体呈干枯状。

实施例5

独活提取物对小麦赤霉病的防治效果(山东枣庄)

供试小麦品种为农大399，实验共设空白组(CK)、中国独活组(Cnh.)、索斯诺夫独活组(Snh.)3组，每组重复3次，总共9个试验地，每个试验地约40m²。在小麦扬花初期，向小麦麦穗喷洒禾谷镰孢菌活孢子悬液，禾谷镰孢菌活孢子悬液的制备方法同实施例2中尖孢镰孢菌活孢子悬液的制备方法，使小麦染病，随后以2L/10m²喷洒稀释100倍的实施例3的索斯诺夫独活提取物制剂，CK组用等量清水代替。在小麦扬花率为90％左右第二次以2L/10m²喷洒稀释100倍的索斯诺夫独活提取物制剂。以单个成穗为调查对象，以发病粒数占总穗粒数的百分比调查病情指数和相对防效，即植株病情指数(％)＝{∑(各级发病数×该级代表值)/(调查总株数×最高级代表值)}×100，以及相对防效(％)＝{(对照组病情指数-实验组病情指数)/对照组病情指数}×100。结果见表5。

表5：对小麦赤霉病病害的防治效果

组别	CK	Cnh.	Snh.
				小麦赤霉病发病率/％	90.94	30.31	17.81
相对防效/％	-	66.67	80.41

表5结果表明，独活醇提取物对小麦赤霉病有一定的防治效果，索斯诺夫独活组(Snh.)效果较好，将发病率控制到17.81％，相对防效高达80.41％；中国独活组(Cnh.)相对索斯诺夫独活组(Snh.)较差，发病率控制在30.31％，相对防效为66.67％；而CK组患病严重，有一些麦穗粒几乎全部得病。

Claims (4)

1.独活提取物在防治植物真菌病害中的应用，其特征在于，所述独活为索斯诺夫独活,拉丁名称：Heracleum Sosnowskyi，伞形科，独活属；

所述防治植物真菌病害是对叶霉病病原菌褐孢霉(Cladosporium fulvum)、谷类纹枯病和蔬菜立枯病病原菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、作物枯萎病病原菌尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporium)、谷类赤霉病病原菌禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)和瓜果茎基腐病病原菌瓜果腐霉菌(Pythium ultimum)的生长具有抑制作用；

所述独活提取物的制备方法，包括步骤如下：

将整株独活截成小段后，干燥粉碎得独活粉，向独活粉中加入体积分数为70％-90％的乙醇，所述独活粉与乙醇的加量比为1:(3-10)，单位为kg/L，在30～50℃，150～200r/min，振荡提取12-15h，过滤，收集滤液，滤渣被重复提取2-3次，合并上述滤液，离心收集上清液，30-50℃下减压浓缩20-50倍，加入5-20倍体积的体积分数为40～65％的乙醇溶解，即得独活提取物。

2.如权利要求1所述的独活提取物在防治植物真菌病害中的应用，其特征在于，所述制备方法中干燥为自然晾干或35-45℃烘干。

3.如权利要求1所述的独活提取物在防治植物真菌病害中的应用，其特征在于，所述制备方法中离心为4000-8000r/min离心10-20min。

4.如权利要求1所述的独活提取物在防治植物真菌病害中的应用，其特征在于，所述应用是将独活提取物稀释50-300倍，然后对土壤进行浇灌、对植物患病部位或整株进行喷施即可。

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