CN110121340B - 聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶的调配物 - Google Patents

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Abstract

提供了包含聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶(ADI‑PEG)的冻干调配物及相关的经重构的液体组合物，和使用该组合物用于精氨酸耗尽疗法(包括治疗各种癌症)的方法。

Description

聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶的调配物
发明领域
相关申请 的交叉引用
本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2016年11月2日提交的美国申请号 62/416,607的优先权，该申请以全文引用方式并入。
关于序列表的声明
与本申请相关的序列表以txt格式替代纸质复本来提供，且据此以引用方式并入本说明书中。含有序列表的txt文档的名称为 POLA_007_01TW_ST25.txt。该txt文档为约198KB，于2017年11月1日创建，且经由FES-Web电子提交。
发明背景
技术领域
本公开的实施方案尤其涉及包含聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶(ADI-PEG) 的冻干调配物及相关的经重构的液体组合物，和使用该组合物以进行精氨酸耗尽疗法(包括治疗各种癌症)的方法。
现有技术描述
精氨酸耗尽疗法可为某些形式的癌症以及其他疾病的有效治疗。例如，聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶(ADI-PEG)可通过将精氨酸转化为瓜氨酸和氨而耗尽精氨酸的血流供应。ADI-PEG 20为正在临床上经研究用于缺乏关键酶精氨基琥珀酸合成酶-1(ASS1)的肿瘤的示例性ADI-PEG，该精氨基琥珀酸合成酶-1牵涉于将瓜氨酸转化为精氨酸。ADI-PEG 20已经良好耐受且在临床研究中显示出希望(参见，例如，Qiu等人,Cancer Lett.2015Aug 1；364(1):1-7； Phillips等人,Cancer Res Treat.2013Dec；45(4):251-62；Feun等人,CurrPharm Des.2008；14(11):1049-57；Feun及Savaraj,Expert Opin Investig Drugs.2006Jul；15(7):815-22；Feun等人,Curr Opin Clin Nutr Metab Care.2015 Jan；18(1):78-82)。
冻干或冷冻干燥为一种自液体药剂中除去水以产生固体粉末或饼的过程。冻干固态或调配物的制备代表一种优化生物医药药剂的稳定性的方法。使用冻干调配物可减少降解反应、运输过程中的搅动及储存过程中温度波动的影响以及其他益处。
发明概述
某些实施方案涉及冻干调配物，其包含聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶 (ADI-PEG)，其中该冻干调配物为无菌的，实质上不含内毒素，且处于医药学上可接受的pH下。
一些实施方案包含医药学上可接受的缓冲剂，例如选自以下中的一种或多种的缓冲剂：组氨酸、柠檬酸钠、甘氨酰-甘氨酸、磷酸钠、Tris及赖氨酸。在某些实施方案中，缓冲剂的浓度为约0.10mM至约200mM，或约0.10、0.15、 0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、 0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、 6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、 95、100、105、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、 170、175、180、185、190、195或200mM，包括其间所有整数及范围。在特定实施方案中，缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM或约10mM。
一些实施方案包含医药学上可接受的赋形剂，例如选自以下中的一种或多种的赋形剂：冷冻保护剂、冻干保护剂、稳定剂、增积剂、张力调节剂、表面活性剂、医药塑化剂、螯合剂和前述项的任何组合。
在一些实施方案中，冷冻保护剂以以下量存在：约0.001％至约20％ (wt％)，包括其间所有整数及范围。在一些实施方案中，冷冻保护剂选自以下中的一种或多种：蔗糖、海藻糖、乙二醇、丙二醇、甘油和前述项的任何组合。
在一些实施方案中，冻干保护剂以以下量存在：约0.001％至约20％ (wt％)，包括其间所有整数及范围。在一些实施方案中，冻干保护剂选自以下中的一种或多种：蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、甘油和前述项的任何组合。
在一些实施方案中，稳定剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)，包括其间所有整数及范围。在某些实施方案中，稳定剂选自以下中的一种或多种：蔗糖、甘露醇、乳糖、海藻糖、麦芽糖、山梨醇、明胶、白蛋白和前述项的任何组合。
在某些实施方案中，增积剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)，包括其间所有整数及范围。在某些实施方案中，增积剂选自以下中的一种或多种：甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘氨酸、白蛋白、葡聚糖40。
在某些实施方案中，张力调节剂以以下量存在：约0.001％至约20％ (wt％)，包括其间所有整数及范围。在特定实施方案中，张力调节剂选自以下中的一种或多种：氯化钠、蔗糖、甘露醇和前述项的任何组合。
特定冻干调配物包含选自以下中的一种或多种的医药学上可接受的赋形剂：蔗糖、海藻糖、葡聚糖、甘露醇、脯氨酸、甘氨酸、表面活性剂、医药塑化剂、螯合剂和前述项的任何组合。
某些冻干调配物包含的蔗糖为约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、 0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、 0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、 0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、 0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、 0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、 4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、 6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、 7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、 9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19 或20％，包括其间所有整数及范围。
一些冻干调配物包含的海藻糖为约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、 0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、 0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、 0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、 0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、 4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、 6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、 7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、 9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19 或20％，包括其间所有整数及范围。
某些冻干调配物包含的葡聚糖(任选地是葡聚糖40)为约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、 0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、 0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、 0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、 0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、 2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、 6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、 7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、 9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。
特定冻干调配物包含的甘露醇为约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、 0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、 0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、 0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、 0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、 4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、 6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、 7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、 9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19 或20％，包括其间所有整数及范围。
一些冻干调配物包含的脯氨酸为约0.10mM至约200mM、或约0.10、 0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、 0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、 5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、 90、95、100、105、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、 165、170、175、180、185、190、195或200mM、或约0.001％至约20％、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、 0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、 0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、 0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、 0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、 2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、 3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、 6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、 7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、 9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19或20％，包括其间所有整数及范围。
某些冻干调配物包含的甘氨酸为约0.10mM至约200mM、或约0.10、 0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、 0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、 5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、 165、170、175、180、185、190、195或200mM、或约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、 0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、 0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、 0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、 3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、 6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、 9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19或20％，包括其间所有整数及范围。
某些冻干调配物包含的表面活性剂为约0.001％至约20％(wt％)、或约 0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、 0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、 0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、 0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、 0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、 2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、 3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、 6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、 7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、 9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在一些实施方案中，表面活性剂选自以下中的一种或多种：Tween-80、聚山梨醇酯20(P20)、聚山梨醇酯80 (P80)、泊洛沙姆188和前述项的任何组合。
一些冻干调配物包含的医药塑化剂为约0.001％至约20％(wt％)、或约 0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、 0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、 0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、 0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、 0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、 2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、 3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、 6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、 7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、 9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在某些实施方案中，医药塑化剂为甘油。
某些冻干调配物包含螯合剂，例如乙二胺四乙酸(EDTA)。在一些实施方案中，螯合剂以以下量存在：约0.001％至约1％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、 0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、 0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、 0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95或1.0％，包括其间所有整数及范围。
在某些实施方案中，医药学上可接受的pH为约5.0至约8.0(±0.01至±0.1)、或约5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、 6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、 7.9或8.0(±0.01至±0.1)，包括其间所有整数及范围。
在具体实施方案中，缓冲剂为组氨酸，其浓度约1至约50mM、或约10 至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。
这些和相关实施方案中的某些包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。一些实施方案包含的甘露醇为约1％至约10％、或约4％至约 6％、或约5％。一些实施方案包含的葡聚糖例如葡聚糖40为约0.1％至约5％、或约0.5％至约2％、或约1％。一些实施方案包含的葡聚糖例如葡聚糖40为约 0.1％至约5％、或约0.5％至约2％、或约1％，且包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。一些实施方案包含的海藻糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。一些实施方案包含的甘露醇为约1％至约10％、或约 3％至约5％、或约4％，且包含的蔗糖为约0.1％至约5％、或约0.5％至约2％、或约1％。一些实施方案包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约 4.8％或5％，且包含的Tween-80为约0.001％至约0.1％、或约0.005％至约0.05％、或约0.01％。一些实施方案包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约4.8％或5％，包含的Tween-80为约0.001％至约0.1％、或约0.005％至约 0.05％、或约0.01％，且包含的甘油为约0.01％至约1.0％、或约0.1％至约0.5％、或约0.25％。在这些和相关实施方案中的一些中，pH为约6.0至约6.5至约7.2 (±0.1)、或约6.6至约7.0(±0.1)、或约6.8(±0.1)。
一些实施方案包含的海藻糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9.5％。一些实施方案包含的海藻糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9.5％，且包含的脯氨酸为约10mM至约40mM、或约15至约30 mM、或约20mM。一些实施方案包含的海藻糖为约5％至约15％、或约8％至约12％、或约10％或9.5％，且包含的甘氨酸为约10mM至约40mM、或约15 至约30mM、或约20mM。一些实施方案包含的蔗糖为约1％至约15％、或约 5％至约12％、或约10％或9.5％。一些实施方案包含的蔗糖为约1％至约10％、约4％至约6％、或约5％或4.5％，且包含的海藻糖为约1％至约10％、约4％至约6％、或约5％或4.5％。一些实施方案包含的海藻糖为约5％至约15％、或约 8％至约12％、或约10％或9.5％，且包含的EDTA为约0.01％至约0.1％、或约 0.02％至约0.08％、或约0.05％。在这些和相关实施方案中的一些中，pH为约 6.0至约7.2(±0.1)、或约6.4至约6.8(±0.1)、或约6.5(±0.1)。
在某些实施方案中，缓冲剂为约1至约30mM、或约5至约20mM、或约 10mM的组氨酸，包含的甘氨酸为约1％至约5％、或约2％或1.9％，包含的海藻糖为约0.1％至约2％、或约0.5％至约1.5％、或约1％，且包含的表面活性剂例如P20为约0.001％至约0.1％、或约0.005％至约0.02％、或约0.01％。在某些实施方案中，缓冲剂为约1至约30mM、或约5至约20mM、或约10mM的组氨酸，包含的蔗糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或8.5％，且包含的海藻糖为约0.1％至约2％、或约0.5％至约1.5％、或约1％。在某些实施方案中，缓冲剂为约1至约30mM、或约5至约20mM、或约10mM的组氨酸，包含的蔗糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9％。在某些实施方案中，缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约40mM、或约20、25、30 或35mM的组氨酸，包含的氯化钠为约100至约150mM、或约120、130或140 mM。在一些实施方案中，缓冲剂为约100至约200mM、或约150mM的磷酸钠，包含的蔗糖和/或海藻糖为约1％至约10％、约4％至约6％、或约5％或4.5％，包含的甘氨酸为约0.1至约1％、或约0.5％，包含的甘油为约0.1至约1.0％、或约0.25％，包含的Tween 80为约0.001至约0.1％、或约0.01％，且包含的EDTA 为约0.01至约0.1％、或约0.05％。在某些实施方案中，pH为约6.0至约6.5至约 7.2(±0.1)、或约6.6至约7.0(±0.1)、或约6.8(±0.1)。
在一些实施方案中，ADI-PEG的干重为约50mg/g至约150mg/g。在一些实施方案中，ADI-PEG包含与表A1中序列至少80、95、90、95、96、97、98、 99或100％一致的氨基酸序列。在一些实施方案中，ADI-PEG共价连接至约1 至约21个PEG分子。在一些实施方案中，ADI-PEG包含一或多个共价附接ADI 和PEG的水不稳定接头。在一些实施方案中，ADI-PEG为ADI-PEG20，其中精氨酸脱亚氨酶共价连接至约5±1.0的质量平均数的PEG分子。
在一些实施方案中，相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG， ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶(ADI)活性的至少80、85、90或95％。在一些实施方案中，例如相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG， ADI-PEG保留(原始)PEG分子(每ADI单体/原体)的至少50、55、60、65、70、 75、80、85、90、95或100％。
还包括重构本文所述的冻干调配物的方法，该方法包括将医药学上可接受的溶剂添加至冻干调配物以形成经重构的液体组合物。
在一些实施方案中，冻干调配物在小于约五分钟的时间内重构成约5-20 mg/mlADI-PEG的实质上不含聚集体的溶液。在一些实施方案中，冻干调配物在小于约一或二分钟的时间内重构成约5-20mg/ml ADI-PEG的实质上不含聚集体的溶液。
在一些实施方案中，相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，经重构的液体组合物中的ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶活性的至少75、 80、85、90或95％，和/或保留PEG分子(每ADI单体/原体)的至少50、55、60、 65、70、75、80、85、90、95或100％。在一些实施方案中，在作为冻干调配物储存约或至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、 15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、60或72个月后，例如在约2-8℃的温度和/或约室温下储存后，ADI-PEG在重构时保留其精氨酸脱亚氨酶活性的至少75、80、85、90或95％。在一些实施方案中，在作为冻干调配物储存约或至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、 15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、60或72个月后，例如在约2-8℃的温度和/或约室温下储存后，ADI-PEG保留(原始)PEG分子(每 ADI单体/原体)的至少50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100％。在一些实施方案中，ADI-PEG在重构后的酶比活性为约5.0至约120IU/mg、或约5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9.0、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、 13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、 20、20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、 27、27.5、28、28.5、29、29.5、30、30.5、35、40、45、50、55、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115或120IU/mg。
在一些实施方案中，ADI-PEG的重量摩尔渗透浓度(osmolality)为约50 mOsm/kg至约500mOsm/kg、或约50、55、60、65、70、75、80、85、90、 95、100、105、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、 170、175、180、185、190、195、200、205、210、220、225、230、235、 240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300、 305、310、320、325、330、335、340、345、350、355、360、365、370、 375、380、385、390、395、400、405、410、420、425、430、435、440、 445、450、455、460、465、470、475、480、485、490、495或约500mOsm/kg。
在具体实施方案中，溶剂为水。
某些实施方案涉及通过本文所述的任何方法制备的经重构的液体组合物。
一些实施方案包括经重构的液体组合物，其包含本文所述的冻干调配物及医药学上可接受的溶剂。在一些实施方案中，ADI-PEG的浓度为约5-20 mg/ml、或约5、6、7、8、9、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、 15、16、17、18、19或20mg/ml，包括其间所有整数及范围。在一些实施该方案中，相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，经重构的液体组合物中的ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶活性的至少75、80、85、90或95％。
在一些实施方案中，ADI-PEG的酶比活性为约5.0至约120IU/mg、或约 5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9.0、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、 13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、 20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、 27.5、28、28.5、29、29.5、30、30.5、35、40、45、50、55、55、60、65、 70、75、80、85、90、95、100、105、110、115或120IU/mg。
在一些实施方案中，ADI-PEG的重量摩尔渗透浓度为约50mOsm/kg至约 500mOsm/kg、或约50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、 110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、 180、185、190、195、200、205、210、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300、305、310、 320、325、330、335、340、345、350、355、360、365、370、375、380、 385、390、395、400、405、410、420、425、430、435、440、445、450、455、460、465、470、475、480、485、490、495或约500mOsm/kg。
在一些实施方案中，溶剂为水。某些经重构的溶液适于注射至受试者中。
还包括治疗有需要的受试者的癌症、改善该癌症的症状或抑制该癌症的进展的方法，其包含向该受试者施用本文所述的经重构的液体调配物。
在某些实施方案中，该癌症选自以下一种或多种：肝细胞癌(HCC)、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、间皮瘤、淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、淋巴瘤、肝癌、肉瘤、白血病、急性骨髓性白血病、复发性急性骨髓性白血病、B细胞恶性肿瘤、乳癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胃癌、神经胶质瘤(例如星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤或脉络丛乳头状瘤)、多形性神经胶质母细胞瘤(例如，巨细胞神经胶质母细胞瘤或神经胶质肉瘤)、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原发性CNS 淋巴瘤、原始神经外胚层肿瘤(神经管胚细胞瘤)、非小细胞肺癌(NSCLC)、肾癌、膀胱癌、子宫癌、食道癌、脑癌、头颈癌、子宫颈癌、睪丸癌及胃癌。
在一些实施方案中，癌症展现减少的精氨基琥珀酸合成酶-1表达。
某些实施方案包括一或多种患者护理试剂盒，其包含本文所述的冻干调配物和任选地医药学上可接受的溶剂。在具体实施方案中，溶剂为水。
附图说明
图1A-1D图示了可以缀合至本文所述的ADI多肽的多种半胱氨酸反应性 PEG分子。
发明详述
除非另外定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语皆具有与本公开所属领域的一般技术人员通常所理解相同的含义。尽管与本文所述的那些类似或等同的任何方法、材料、组合物、试剂、细胞可用于本公开主题的实践或测试，但描述的为优选方法和材料。本说明书中所引用的所有出版物及参考文献(包括但不限于专利及专利申请)以全文引用的方式并入本文中，如同具体地及单独地指示各单独出版物或参考文献如所完全阐述以引用的方式并入本文中一样。为本申请所主张优先权的任何专利申请亦以以上对于出版物和参考文献所述的方式以全文引用的方式并入本文中。
除非具体相反地指示，否则本公开的实践将采用病毒学、免疫学、微生物学、分子生物学的常规方法和本领域技术中的重组DNA技术，其中许多在以下出于说明的目的来描述。此类技术在文献中得到充分说明。参见，例如， Current Protocols in ProteinScience,Current Protocols in Molecular Biology or Current Protocols inImmunology,John Wiley&Sons,New York,N.Y.(2009)； Ausubel等人,Short Protocolsin Molecular Biology,第3版,Wiley&Sons,1995； Sambrook及Russell,MolecularCloning:A Laboratory Manual(第3版,2001)； Maniatis等人Molecular Cloning:ALaboratory Manual(1982)；DNA Cloning: A Practical Approach,第I及II卷(D.Glover,编)；Oligonucleotide Synthesis(N. Gait,编,1984)；Nucleic Acid Hybridization(B.Hames及S.Higgins,编,1985)； Transcription and Translation(B.Hames及S.Higgins,编,1984)；Animal Cell Culture(R.Freshney,编,1986)；Perbal,A PracticalGuide to Molecular Cloning (1984)以及其他类似参考文献。
标准技术可用于重组DNA、寡核苷酸合成和组织培养与转化(例如，电穿孔、脂转染)。可根据制造商说明书或如本领域中通常所达成或如本文所述来执行酶促反应及纯化技术。这些技术及相关技术和程序可通常根据本领域中公知的和如本说明书整篇引用和论述的各种一般及更具体参考文献中所述的常规方法来执行。除非提供具体定义，否则结合本文所述的分子生物学、分析化学、合成有机化学以及医疗和医药化学使用的命名法是本领域公知和通常使用的。标准技术可用于重组技术、分子生物学、微生物学、化学合成、化学分析、医药制备、调配和递送以及患者治疗。
出于本公开的目的，下列术语定义如下。
冠词“一(个/种)”在本文中用于指代一个(种)或一个(种)以上(亦即，至少一个(种))的该冠词的语法客体。举例而言，“一要素”意指一个要素或多于一个要素。
“约”意指数量、水平、值、数目、频率、百分比、尺寸、大小、量、重量或长度变化多达参考数量、水平、值、数目、频率、百分比、尺寸、大小、量、重量或长度的30％、25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、 4％、3％、2％或1％。
如本文所使用，术语“氨基酸”意欲指代天然产生的氨基酸和非天然产生的氨基酸以及氨基酸类似物及模拟物。天然产生的氨基酸包括在蛋白质生物合成期间利用的20种(L)-氨基酸以及其他氨基酸，例如4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链素、异锁链素、高半胱氨酸、瓜氨酸及鸟氨酸。非天然产生的氨基酸包括例如(D)-氨基酸、正亮氨酸、正缬氨酸、对氟苯基丙氨酸、乙硫氨酸及类似物，其为本领域技术人员所知晓。氨基酸类似物包括天然产生的氨基酸及非天然产生的氨基酸的经修饰形式。此等修饰可包括例如氨基酸上化学基团及部分的取代或置换，或氨基酸的衍生作用。氨基酸模拟物包括例如有机结构，这些有机结构在功能上展现类似性质，诸如参考氨基酸的电荷及电荷间距特性。例如，模拟精氨酸(Arg或R)的有机结构将具有正电荷部分，该正电荷部分位于类似分子空间中且具有与天然产生的Arg氨基酸的侧链的 e-氨基相同的迁移率程度。模拟物还包括限制结构以便维持氨基酸或氨基酸官能基的最佳间距及电荷相互作用。本领域技术人员知晓或可判定何种结构构成功能上等效的氨基酸类似物及氨基酸模拟物。
“生物兼容性”指通常不会损害生物功能且不会导致任何程度的不可接受的毒性(包括过敏及疾病状态)的材料或化合物。
“编码序列”意指有助于编码基因的多肽产物的任何核酸序列。相比之下，术语“非编码序列”指并不直接有助于编码基因的多肽产物的任何核酸序列。
在本公开整篇中，除非上下文另外需要，否则“包含”、“包括”等词将理解为暗示包括所述步骤或要素或步骤或要素的群组，而不排除任何其他步骤或要素或步骤或要素的群组。
“由...组成”意指包括且限于短语“由...组成”后接的内容。因此，短语“由... 组成”指示所列要素为必需或必备的，且不可存在其他要素。“基本上由...组成”意指包括该词组之后所列的任何要素，且限于不干扰或贡献于本公开内容中对所列要素所规定的活性或作用的其他要素。因此，短语“基本上由... 组成”指示：所列要素为必需或必备的，但其他要素为可选的且可存在或可不存在，此取决于这些其他要素是否实质上影响所列要素的活性或作用。
术语“不含内毒素”或“实质上不含内毒素”通常涉及含有至多痕量(例如，对受试者没有临床不良生理效应的量)内毒素且优选不可检测量的内毒素的组合物、溶剂和/或器皿。内毒素为与某些微生物(诸如细菌，典型地为革兰氏阴性细菌)相关联的毒素，尽管内毒素亦可见于革兰氏阳性细菌诸如单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)中。最盛行的内毒素为脂多醣 (LPS)或脂寡糖(LOS)，其见于各种革兰氏阴性细菌的外膜中，且代表这些细菌引起疾病的能力的中心致病特征。人类中的少量内毒素可能产生发热、血压降低及炎症与凝血的激活，以及其他不良生理效应。
因此，在医药生产中，通常期望自药物产品和/或药物容器中除去大部分或全部痕量的内毒素，因为即使少量亦可能在人类中引起不良影响。去热原烘箱可用于此目的，因为典型地需要超过300℃的温度来分解大部分内毒素。例如，基于主要包装材料诸如注射器或小瓶，250℃的玻璃温度和30分钟保持时间的组合通常足以达成内毒素水平的3log降低。涵盖除去内毒素的其他方法，包括例如如本文所述和本领域已知的层析及过滤方法。
可使用本领域已知的常规技术来侦测内毒素。例如，利用来自鲎的血液的鲎变形细胞溶胞产物测定是用于检测内毒素存在的非常灵敏的测定。在此测试中，极低水平的LPS可由于强大的酶促级联而引起可检测的鲎溶胞产物的凝结，该强大的酶促级联放大此反应。内毒素亦可通过酶联免疫吸附测定 (ELISA)来定量。为了实质上不含内毒素，内毒素水平可小于约0.001、0.005、 0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.08、0.09、0.1、0.5、1.0、1.5、2、 2.5、3、4、5、6、7、8、9或10EU/mg的活性化合物。典型地，1ng脂多醣 (LPS)对应于约1至10EU。
多肽的“半衰期”可指代多肽相对于施用至生物体的血清或组织中时的活性或相对于任何其他定义的时间点而损失其一半药理学、生理学或其他活性所花费的时间。“半衰期”也可指代多肽的量或浓度相对于施用至生物体的血清或组织中时的量或浓度或相对于任何其他定义的时间点而减少了投与至生物体的血清或组织中的起始量的一半所花费的时间。半衰期可在血清和 /或任何一或多个所选组织中量测。
术语“调节”及“改变”包括典型地以相对于对照的统计学上显著或生理学上显著的量或程度“增加”、“增强”或“刺激”，以及“减少”或“降低”。“增加的”、“刺激的”或“增强的”量典型地为“统计学上显著”的量，且可包括作为并未由组合物(例如，在不存在药剂的情况下)或由对照组合物所产生的量的1.1、1.2、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30或更多倍(例如，500、1000倍)(包括其间所有整数及范围，例如1.5、1.6、1.7、1.8等)的增加。“减少的”量或“降低的”量典型地为“统计学上显著”的量，且可包括例如并未由组合物(例如，在不存在药剂的情况下)或由对照组合物所产生的量的1％、2％、3％、4％、 5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、 70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％减少(包括其间所有整数及范围)。本文描述比较和“统计学上显著”的量的实例。
术语“多肽”、“蛋白质”和“肽”可互换使用，且意指不限于任何特定长度的氨基酸聚合物。术语“酶”包括多肽或蛋白质催化剂，且关于ADI，与蛋白质、多肽或肽可互换使用。这些术语包括诸如肉豆蔻酰化、硫酸化、糖基化、磷酸化和信号序列的添加或缺失的修饰。术语“多肽”或“蛋白质”意指一个或多个氨基酸链，其中各链包含通过肽键共价连接的氨基酸，且其中该多肽或蛋白质可包含非共价和/或通过肽键共价连接在一起的复数个链，该复数个链具有天然蛋白质(即由天然产生且具体而言非重组细胞或遗传工程化或重组细胞所产生的蛋白质)的序列，并包含具有天然蛋白质的氨基酸序列的分子，或具有天然序列的一或多个氨基酸的缺失、添加和/或取代的分子。术语“多肽”和“蛋白质”具体涵盖本文所述的ADI酶/蛋白质，或具有ADI蛋白质的一个或多个氨基酸的缺失、添加和/或取代的序列。在某些实施方案中，多肽为由包含一个或多个重组DNA分子的重组细胞所产生的“重组”多肽，所述一个或多个重组DNA分子典型地由否则将不会见于细胞中的异源多核苷酸序列或多核苷酸序列的组合制成。
术语“分离的”多肽或蛋白质在本文中指受试蛋白(1)不含通常与其一起见于自然界中的至少一些其他蛋白质，(2)基本上不含来自相同来源，例如来自相同物种的其他蛋白质，(3)由来自不同物种的细胞表达，(4)已经与至少约50％在自然界中与其缔合的多核苷酸、脂质、碳水化合物或其他材料分离， (5)未与在自然界中与“分离的蛋白质”缔合的蛋白质的部分缔合(通过共价或非共价相互作用)，(6)与在自然界中未与其缔合的多肽可操作地缔合(通过共价或非共价相互作用)，或(7)未存在于自然界中。该种分离的蛋白质可由可能具有合成来源的基因组DNA、cDNA、mRNA或其他RNA或其任何组合编码。在某些实施方案中，分离的蛋白质实质上不含存在于其天然环境中且将干扰其使用(治疗、诊断、预防、研究或其他方面)的蛋白质或多肽或其他污染物。
在某些实施方案中，组合物中任何给定药剂(例如，ADI-PEG)的“纯度”可以具体定义。例如，某些组合物可包含至少70％、75％、80％、85％、90％、 91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％纯(例如，基于蛋白质)(包括其间所有小数及范围)的药剂，如例如通过高效液相层析 (HPLC)所测定，该高效液相层析为常用于生物化学及分析化学中以分离、鉴定及量化化合物的管柱层析法的公知形式。
术语“参考序列”通常指另一序列正在与其比较的核酸编码序列或氨基酸序列。本文所述的所有多肽和多核苷酸序列作为参考序列而包括，包括由名称描述的那些序列以及表中及序列表中描述的那些序列。
如本文所使用的术语“序列一致性”或例如包含“与…50％一致的序列”指在比较窗上基于核苷酸对核苷酸或氨基酸对氨基酸而言序列一致的程度。因此，“序列一致性百分比”可通过以下方式来计算：在比较窗口上比较两个最佳比对序列，判定两个序列中出现一致核酸碱基(例如，A、T、C、G、I)或一致氨基酸残基(例如，Ala、Pro、Ser、Thr、Gly、Val、Leu、Ile、Phe、Tyr、 Trp、Lys、Arg、His、Asp、Glu、Asn、Gln、Cys及Met)所处位置的数目以得出匹配位置的数目，将匹配位置的数目除以比较窗口中位置的总数(亦即，窗口大小)，且将结果乘以100得出序列一致性的百分比。用于比对比较窗口的序列的最佳比对可通过算法的计算机化实行方案(Wisconsin Genetics软件套件7.0发布版中的GAP、BESTFIT、FASTA及TFASTA,Genetics Computer Group,575Science Drive Madison,Wis.,USA)或通过检查和由所选各种方法中的任一种所产生的最佳比对(亦即，在比较窗口上产生更高百分比同源性) 来进行。亦可对如例如由Altschul等人,Nucl.Acids Res.25:3389,1997所公开的BLAST家族程序进行参考。
术语“溶解度”指本文所提供的药剂(例如，ADI-PEG)溶解在液体溶剂中且形成均质溶液的性质。溶解度通常表示为浓度，藉由每单位体积溶剂的溶质质量(每kg溶剂的溶质g数、g/dL(100mL)、mg/ml等等)、摩尔浓度、摩尔浓度、摩尔分数或其他类似浓度描述来表示。每单位溶剂量可溶解的溶质的最大平衡量为在规定条件下，该溶质在该溶剂中的溶解度，所述规定条件包括温度、压力、pH和溶剂的性质。在某些实施方案中，溶解度于生理pH下或其他pH下量测，例如在pH 5.0、pH 6.0、pH 7.0、pH 7.4、pH 7.6、pH 7.8 或pH 8.0(例如，约pH 5至pH 8)下测量。在某些实施方案中，溶解度于水或诸如PBS或NaCl(有或没有NaP)的生理缓冲液中测量。在具体实施方案中，溶解度于相对较低pH(例如，pH 6.0)及相对较高盐(例如，500mM NaCl和10 mM NaP)下测量。在某些实施方案中，溶解度于诸如血液或血清的生物流体(溶剂)中测量。在某些实施方案中，温度可为约室温(例如，约20、21、22、 23、24、25℃)或约体温(约37℃)。在某些实施方案中，药剂在室温下或在37℃下具有至少约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、 6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、40、 50、60、70、80、90或100mg/ml的溶解度。
“受试者”或“有需要的受试者”或“患者”或“有需要的患者”包括哺乳动物受试者，诸如人类受试者。
“实质上”或“基本上”意指几乎全部地或完全地，例如，某一给定数量的 95％、96％、97％、98％、99％或更大。
“统计学上显著”意指结果不可能偶然发生。统计显著性可通过本领域中已知的任何方法来判定。显著性的常用量度包括p值，其为在虚无假设为真的情况下，将发生所观察事件的频率或机率。若所获得p值小于显著性水平，则拒绝虚无假设。在简单状况下，显著性水平定义在0.05或更小的p值。
“治疗反应”指基于施用一种或多种治疗剂的症状改善(无论是否持续)。
如本文所使用，受试者(例如哺乳动物，诸如人类)或细胞的“治疗”为用于试图改变个体或细胞的自然过程的任何类型的干预。治疗包括但不限于医药组合物的施用，且可预防性地抑或在病理事件起始或与病原因子接触之后执行。还包括“预防性”治疗，其可以旨在降低所治疗疾病或病状的进展速率、延迟该疾病或病状的发作或降低其发作的严重性。“治疗”或“预防”未必指示疾病或病状或其相关联症状的完全根除、治愈或预防。
术语“野生型”指基因或基因产物(例如，多肽)，其在群体中最常观察到，且因此经任意设计而呈现基因的“正常”或“野生型”形式。
除非另有明确说明，否则本说明书中的每个实施方案将在加以必要修正的情况下应用于每个其他实施方案。
在本公开整篇中，可使用以下缩写：PEG，聚乙二醇；ADI，精氨酸脱亚氨酶；SS，琥珀酰亚胺基琥珀酸酯；SSA，琥珀酰亚胺基琥珀酰亚胺；SPA，琥珀酰亚胺基丙酸酯；NHS，N-羟基-琥珀酰亚胺；ASS-1，精氨基琥珀酸合成酶-1。
冻干调配物
某些实施方案涉及冻干调配物，其包含聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶(ADI-PEG)，其中该冻干调配物为无菌的，实质上不含内毒素，且处于医药学上可接受的pH下。在一些实施方案中，调配物包含医药学上可接受的缓冲剂。在某些实施方案中，调配物包含一种或多种医药学上可接受的赋形剂，包括例如一种或多种冷冻保护剂、冻干保护剂、稳定剂、增积剂、张力调节剂、表面活性剂、医药塑化剂或螯合剂，包括前述项的任何组合。
一些调配物包含一或多种医药学上可接受的缓冲剂。在某些实施方案中，缓冲剂的浓度为约0.10mM至约200mM，或约0.10、0.15、0.20、0.25、 0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、 0.90、0.95、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、 7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、 105、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、 175、180、185、190、195或200mM，包括其间所有整数及范围。在某些实施方案中，缓冲剂的浓度为约1mM至约50mM、或约10mM至约30mM、或约15mM至约25mM、或约10mM至约20mM、或约20mM或约10mM。在特定实施方案中，缓冲剂选自以下中的一种或多种：组氨酸、柠檬酸钠、甘氨酰-甘氨酸、磷酸钠、Tris、赖氨酸和前述项的任何组合。
在具体实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。在一些实施方案中，调配物包含的柠檬酸钠为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25 mM、或约20mM。在特定实施方案中，调配物包含的甘氨酰-甘氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。在具体实施方案中，调配物包含的磷酸钠缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。在一些实施方案中，调配物包含的Tris缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。在某些实施方案中，调配物包含的甘氨酸缓冲剂为约1至约50 mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。
一些调配物包含一种或多种冷冻保护剂。“冷冻保护剂”是指在冻干的一个(或多个)冷冻阶段保护一种(或多种)活性剂的医药学上可接受的物质或赋形剂。在一些实施方案中，冷冻保护剂以以下量存在：约0.001％至约20％ (wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、 0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、 0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、 2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、 3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、 6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、 7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在具体实施方案中，冷冻保护剂选自以下中的一种或多种：蔗糖、海藻糖、乙二醇、丙二醇、甘油和前述项的任何组合。
某些调配物包含一种或多种冻干保护剂。“冻干保护剂”是指在冻干的一个(或多个)干燥阶段保护一种(或多种)活性剂的医药学上可接受的物质或赋形剂。在一些实施方案中，冻干保护剂以以下量存在：约0.001％至约20％ (wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、 0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、 0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、 0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、 2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、 3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、 6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、 7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在具体实施方案中，冻干保护剂选自以下中的一种或多种：蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、甘油和前述项的任何组合。
某些调配物包含一种或多种医药学可上接受的稳定剂。在一些实施方案中，稳定剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、 0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、 1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、 5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、 6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、 8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、 9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在一些实施方案中，稳定剂选自以下中的一种或多种：蔗糖、甘露醇、乳糖、海藻糖、麦芽糖、山梨醇、明胶、白蛋白和前述项的任何组合。
一些调配物包含一种或多种医药学上可接受的增积剂。在一些实施方案中，增积剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、 0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、0.025、 0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、 0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、 1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、 5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、 6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、 8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、 9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在具体实施方案中，增积剂选自以下中的一种或多种：甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘氨酸、白蛋白、葡聚糖40和前述项的任何组合。
一些调配物包含一种或多种医药学上可接受的张力调节剂。在一些实施方案中，张力调节剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、 0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、 0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、 0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、 2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、 4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、 6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、 7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19 或20％，或浓度为约0.10mM至约200mM、或约0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、 0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、 0.95、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、 8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、 30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、 110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、 180、185、190、195或200mM，包括其间所有整数及范围。在特定实施方案中，张力调节剂选自以下中的一种或多种：氯化钠、蔗糖、甘露醇和前述项的任何组合。
在某些实施方案中，调配物包含一种或多种表面活性剂。在一些实施方案中，表面活性剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、 0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、 0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、 0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、 0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、 1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、 2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、 5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、 6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、 8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、 9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20％。示范性表面活性剂包括Tween-80、聚山梨醇酯20(P20)、聚山梨醇酯80(P80)、泊洛沙姆188及其组合。
某些调配物包含一种或多种医药塑化剂。在一些实施方案中，医药塑化剂以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、 0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、 0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、 0.085、0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、 0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、 1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、 5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、 6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、 8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、 9.9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20％，包括其间所有整数及范围。在一些实施方案中，医药塑化剂为甘油。
一些调配物包含一种或多种螯合剂。在一些实施方案中，螯合剂以以下量存在：约0.001％至约1％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、 0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、 0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、 0.090、0.095、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、 0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95或1.0％，包括其间所有整数及范围。在具体实施方案中，螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。
特定调配物包含选自以下中的一种或多种的医药学上可接受的赋形剂：蔗糖、海藻糖、葡聚糖、甘露醇、脯氨酸、甘氨酸、表面活性剂、医药塑化剂、螯合剂和前述项的任何组合。例如，在一些实施方案中，蔗糖、海藻糖、葡聚糖(例如葡聚糖40)、甘露醇、脯氨酸和/或甘氨酸以以下量存在：约0.001％至约20％(wt％)、或约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、 0.008、0.009、0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050、0.055、0.060、0.065、0.070、0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、 0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、 0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、 1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、 3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、 7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、 8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19或20％，或浓度为约0.10mM至约200mM、或约0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、 0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、 5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、 15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、 80、85、90、95、100、105、110、120、125、130、135、140、145、150、 155、160、165、170、175、180、185、190、195或200mM，包括其间所有整数及范围。
在具体实施方案中，如上所述，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约 50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的甘露醇为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的葡聚糖例如葡聚糖40为约0.1％至约5％、或约0.5％至约2％、或约1％。
在特定实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的葡聚糖例如葡聚糖40为约0.1％至约5％、或约0.5％至约2％、或约1％，且包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。
在某些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的海藻糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约5％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的甘露醇为约1％至约10％、或约3％至约5％、或约4％，且包含的蔗糖为约0.1％至约5％、或约 0.5％至约2％、或约1％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约4.8％或5％，且包含的Tween-80为约0.001％至约0.1％、或约0.005％至约0.05％、或约0.01％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的蔗糖为约1％至约10％、或约4％至约6％、或约4.8％或5％，包含的Tween-80为约0.001％至约 0.1％、或约0.005％至约0.05％、或约0.01％，且包含的甘油为约0.01％至约 1.0％、或约0.1％至约0.5％、或约0.25％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的海藻糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9.5％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的海藻糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9.5％，且包含的脯氨酸为约10mM 至约40mM、或约15至约30mM、或约20mM。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的海藻糖为约5％至约15％、或约8％至约12％、或约10％或9.5％，且包含的甘氨酸为约10mM 至约40mM、或约15至约30mM、或约20mM。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的蔗糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9.5％。
在一些实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的蔗糖为约1％至约10％、约4％至约6％、或约5％或4.5％，且包含的海藻糖为约1％至约10％、约4％至约6％、或约5％或4.5％。
在特定实施方案中，调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约30mM、或约15至约25mM、或约20mM，且包含的海藻糖为约5％至约15％、或约8％至约12％、或约10％或9.5％，且包含的EDTA为约0.01％至约0.1％、或约0.02％至约0.08％、或约0.05％。
某些调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约30mM、或约5至约20mM、或约10mM，且包含的甘氨酸为约1％至约5％、或约2％或1.9％，包含的海藻糖为约0.1％至约2％、或约0.5％至约1.5％、或约1％，且包含的表面活性剂例如P20为约0.001％至约0.1％、或约0.005％至约0.02％、或约0.01％。一些调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约30mM、或约5至约20mM、或约10mM，且包含的蔗糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或8.5％，且包含的海藻糖为约0.1％至约2％、或约0.5％至约1.5％、或约1％。特定调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约30mM、或约5至约20mM、或约10mM，且包含的蔗糖为约1％至约15％、或约5％至约12％、或约10％或9％。一些调配物包含的组氨酸缓冲剂为约1至约50mM、或约10至约40mM、或约20、25、30 或35mM，且包含的氯化钠为约100至约150mM、或约120、130或140mM。某些调配物包含的磷酸钠缓冲剂为约100至约200mM、或约150mM，且包含的蔗糖和/或海藻糖为约1％至约10％、约4％至约6％、或约5％或4.5％，且包含的甘氨酸为约0.1至约1％、或约0.5％，且包含的甘油为约0.1至约1.0％、或约0.25％，且包含的Tween 80为约0.001至约0.1％、或约0.01％，且包含的 EDTA为约0.01至约0.1％、或约0.05％。
在一些实施方案中，调配物的医药学上可接受的pH为约5.0至约8.0 (±0.01至±0.1或至±1.0)、或约5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、 5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、 7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9或8.0(±0.01至±0.1)，包括其间所有整数及范围。在具体实施方案中，包含ADI-PEG的调配物的pH为约6.8(±1.0)。在特定实施方案中，pH为约6.5至约7.2(±0.1)、或约6.6至约7.0(±0.1)、或约6.8(±0.1)。在一些实施方案中，pH为约6.0至约7.2(±0.1)、或约6.4至约6.8(±0.1)、或约 6.5(±0.1)。
如上所述，本文所述的调配物包含一个或多个聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶(ADI-PEG)分子，或通过共价附接至一个或多个聚乙二醇(PEG)分子而修饰的精氨酸脱亚氨酶(ADI)多肽。当与未经修饰ADI相比时，ADI-PEG保持其大部分酶活性，免疫原性或抗原性较低，具有极大延长的循环半衰期，且在肿瘤治疗中更为有效。
在某些实施方案中，冻干调配物中ADI-PEG的干重为约50mg/g至约150 mg/g、或约50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、 120、125、130、135、140、145或150mg/g，包括其间所有整数及范围。
在某些实施方案中，ADI多肽或ADI-PEG分子具有“ADI活性”或将精氨酸转化或代谢成瓜氨酸和氨的能力。ADI活性可根据本领域中的常规技术来测量。例如，L-瓜氨酸的量可通过比色终点测定来检测(参见，例如Knipp及 Vasak,Analytical Biochem.286:257-264,2000)，且与已知量的L-瓜氨酸的标准曲线进行比较，以便计算ADI的比活性，该比活性可表示为IU/mg蛋白质。在一些实施方案中，将一个IU的ADI酶活性定义为在所测试pH和温度下每分钟产生1μmol瓜氨酸的酶的量。
ADI-PEG分子的ADI部分可来源于多种来源。例如，在一些实施方案中， ADI多肽来自人型支原体(M.hominis)、精氨酸支原体(M.arginini)、关节炎支原体(M.arthritidis)、海豹脑支原体(M.phocicerebrale)、猫支原体(M.gateae)、海豹支原体(M.phocidae)、鸽支原体(M.columbinum)、衣阿华支原体(M. iowae)、鳄鱼支原体(M.crocodyli)、短吻鳄支原体(M.alligatoris)、奥氏嗜热盐丝菌(H.orenii)或牛支原体(M.bovis)。在一些实施方案中，ADI多肽来自唾液支原体(Mycoplasma salivarium)、泡沫支原体(Mycoplasmaspumans)、加拿大支原体(Mycoplasma canadense)、耳支原体(Mycoplasma auris)、猪滑液支原体(Mycoplasma hyosynoviae)、泄殖腔支原体(Mycoplasma cloacale)、鹅支原体(Mycoplasma anseris)、产碱支原体(Mycoplasma alkalescens)、口腔支原体(Mycoplasmaorale)、惰性支原体(Mycoplasma iners)、火鸡支原体 (Mycoplasma meleagridis)、蜂房支原体(Mycoplasma alvi)、渗透支原体 (Mycoplasma penetrans)、家禽支原体(Mycoplasma gallinarum)、梨支原体 (Mycoplasma pirum)、灵长类支原体(Mycoplasmaprimatum)、发酵支原体 (Mycoplasma fermentans)、Mycoplasma lipofaciens、小猫支原体(Mycoplasma felifaucium)、模仿支原体(Mycoplasma imitans)、乳白色支原体(Mycoplasma opalescens)、毛氏支原体(Mycoplasma moatsii)、象支原体(Mycoplasmaelephantis)、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)、龟支原体(Mycoplasmatestudinis)、支原体属CAG:877(Mycoplasma sp.CAG:877)或支原体属 CAG:472(Mycoplasma sp.CAG:472)。
说明性ADI多肽提供于下表A1中。
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因此，在一些实施方案中，ADI-PEG中的ADI多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：来自表A1(SEQ ID NO:1至56)的说明性序列或其具有ADI活性的变体或片段。
某些实施方案包括本文所述的参考ADI多肽序列的变体，无论是由名称抑或通过参考表或序列标识符(例如，表A1，SEQ ID NO:1至56)来描述。“变体”序列指与参考序列相差一或多个取代、缺失(例如，截短)、添加和/或插入的多肽或多核苷酸序列。某些变体因此包括本文所述的参考序列的片段。多肽变体为生物活性的，也就是说，其持续拥有参考多肽的酶活性或结合活性。这些变体可由例如遗传多态性和/或人类操纵而产生。
在许多情况下，生物活性变体将含有一个或多个保守取代。“保守取代”为其中一个氨基酸由具有类似性质的另一氨基酸取代以使得肽化学领域的技术人员可预测多肽的二级结构及亲水性质实质上不会改变的取代。如上所述，可在本公开的多核苷酸和多肽的结构中进行修饰，且仍获得编码具有合乎需要特性的变体或衍生多肽的功能分子。当意欲改变多肽的氨基酸序列以产生本文所述的多肽的等效或甚至改改善变体或部分时，本领域技术人员通常将改变编码DNA序列的密码子中的一个或多个。
例如，蛋白质结构中的某些氨基酸可由其他氨基酸取代，而没有与诸如抗体的抗原结合区或底物分子上的结合位点的结构的相互作用结合能力的可观损失。因为正是蛋白质的相互作用能力及性质界定蛋白质的生物功能活性，所以可在蛋白质序列中且当然可在其基础DNA编码序列中进行某些氨基酸序列取代，且虽然如此仍获得具有类似性质的蛋白质。因此涵盖的是，可在所公开组合物的肽序列或编码该等肽的相应DNA序列中进行各种改变，而没有其效用的可观损失。
在进行此等改变时，可考虑氨基酸的亲水指数。本领域中通常理解亲水氨基酸指数在对蛋白质赋予相互作用生物功能中的重要性(Kyte&Doolittle, 1982，以引用方式并入本文)。所接受的是，氨基酸的相对亲水特性促成所得蛋白质的二级结构，其继而界定蛋白质与其他分子的相互作用，所述其他分子为例如酶、底物、受体、DNA、抗体、抗原及类似物。已基于各氨基酸的疏水性及电荷特性来指定该等氨基酸的亲水指数(Kyte&Doolittle,1982)。这些值为：异亮氨酸(+4.5)；缬氨酸(+4.2)；亮氨酸(+3.8)；苯丙氨酸(+2.8)；半胱氨酸(+2.5)；甲硫氨酸(+1.9)；丙氨酸(+1.8)；甘氨酸(-0.4)；苏氨酸(-0.7)；丝氨酸(-0.8)；色氨酸(-0.9)；酪氨酸(-1.3)；脯氨酸(-1.6)；组氨酸(-3.2)；谷氨酸(-3.5)；谷氨酰胺(-3.5)；天冬氨酸(-3.5)；天冬酰氨(-3.5)；赖氨酸(-3.9)；及精氨酸(-4.5)。本领域中已知的是，某些氨基酸可由具有类似疏水指数或分数的其他氨基酸取代，且产生具有类似生物活性的蛋白质，也就是说，仍获得生物学上功能等效的蛋白质。在进行此类改变时，亲水指数在±2内的氨基酸的取代是优选的，亲水指数在±1内的氨基酸的取代尤其优选，且亲水指数在±0.5内的氨基酸的取代甚至尤其更优选。
本领域中亦理解，可基于亲水性来有效地进行类似氨基酸的取代。美国专利4,554,101(特别地以全文引用方式并入本文中)阐述：如受蛋白质的相邻氨基酸的亲水性所支配，蛋白质的最大局部平均亲水性与该蛋白质的生物性质有关。如美国专利4,554,101中所详述，已对氨基酸残基指定以下亲水性值：精氨酸(+3.0)；赖氨酸(+3.0)；天冬氨酸(+3.0±1)；谷氨酸(+3.0±1)；丝氨酸 (+0.3)；天冬酰氨(+0.2)；谷氨酰胺(+0.2)；甘氨酸(0)；苏氨酸(-0.4)；脯氨酸(–0.5±1)；丙氨酸(-0.5)；组氨酸(-0.5)；半胱氨酸(-1.0)；甲硫氨酸(-1.3)；缬氨酸(-1.5)；亮氨酸(-1.8)；异亮氨酸(-1.8)；酪氨酸(-2.3)；苯丙氨酸(-2.5)；色氨酸(-3.4)。应理解，氨基酸可由具有类似亲水性值的另一氨基酸取代，并且仍获得生物上等效且尤其免疫上等效的蛋白质。在此类改变中，亲水性值在±2内的氨基酸的取代是优选的，亲水性值在±1内的氨基酸的取代尤其优选，且亲水性值在±0.5内的氨基酸的取代甚至尤其更优选。
如以上所概述，氨基酸取代因此通常基于氨基酸侧链取代基的相对相似性，例如基于其疏水性、亲水性、电荷、大小及类似者。将各种前述特性考虑在内的示例性取代为本领域技术人员所熟知，且包括：精氨酸及赖氨酸；谷氨酸及天冬氨酸；丝氨酸及苏氨酸；谷氨酰胺及天冬酰胺；以及缬氨酸、亮氨酸及异亮氨酸。
氨基酸取代可进一步基于残基的极性、电荷、溶解度、疏水性、亲水性和/或两亲性质的相似性来进行。例如，带负电的氨基酸包括天冬氨酸及谷氨酸；带正电的氨基酸包括赖氨酸及精氨酸；且具有未带电极性头部基团的具有类似亲水性值的氨基酸包括亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸；甘氨酸及丙氨酸；天冬酰胺及谷氨酰胺；以及丝氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸及酪氨酸。可表示保守改变的其他氨基酸群组包括：(1)ala、pro、gly、glu、asp、gln、asn、ser、thr；(2)cys、ser、tyr、thr；(3)val、ile、leu、met、ala、phe；(4)lys、arg、 his；以及(5)phe、tyr、trp、his。
变体亦可或替代地含有非保守改变。在优选的实施方案中，多肽变体与天然或参考序列相差少于约10、9、8、7、6、5、4、3、2个氨基酸或甚至1 个氨基酸的取代、缺失或添加。变异体亦可(或替代地)通过例如对多肽的免疫原性、二级结构、酶促活性和/或疏亲性质具有最小影响的氨基酸的缺失或添加来修饰。
在某些实施方案中，多肽序列的长度为约、至少约或多达约5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、 43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、 100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、 230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、 360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、610、 620、630、640、650、660、670、680、690、700、710、720、730、740、 750、760、770、780、790、800、800、810、820、830、840、850、860、 870、880、890、900、900、910、920、930、940、950、960、970、980、 990、1000或更多个邻接氨基酸，包括其间所有整数，且该多肽序列可包含参考序列(参见例如序列表)的全部或一部分。
在一些实施方案中，多肽序列由以下组成：约或不大于约5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、 43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、 100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、 230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、 360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、610、 620、630、640、650、660、670、680、690、700、710、720、730、740、 750、760、770、780、790、800、800、810、820、830、840、850、860、 870、880、890、900、900、910、920、930、940、950、960、970、980、 990、1000或更多个邻接氨基酸，包括其间所有整数，且该多肽序列可包含参考序列(参见例如序列表)的全部或一部分。
在某些实施方案中，多肽序列为约10至1000个、10至900个、10至800个、 10至700个、10至600个、10至500个、10至400个、10至300个、10至200个、 10至100个、10至50个、10至40个、10至30个、10至20个、20至1000个、20 至900个、20至800个、20至700个、20至600个、20至500个、20至400个、20 至300个、20至200个、20至100个、20至50个、20至40个、20至30个、50至 1000个、50至900个、50至800个、50至700个、50至600个、50至500个、50 至400个、50至300个、50至200个、50至100个、100至1000个、100至900个、 100至800个、100至700个、100至600个、100至500个、100至400个、100至 300个、100至200个、200至1000个、200至900个、200至800个、200至700个、 200至600个、200至500个、200至400个或200至300个邻接氨基酸，包括其间所有范围，且包含参考序列的全部或一部分。在某些实施方案中，任何参考多肽的C端或N端区可截短了约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、 150、160、170、180、190、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750或800或更多个氨基酸，或截短了约10至50个、20至50 个、50至100个、100至150个、150至200个、200至250个、250至300个、300 至350个、350至400个、400至450个、450至500个、500至550个、550至600 个、600至650个、650至700个、700至750个、750至800个或更多个氨基酸，包括其间所有整数及范围(例如，101、102、103、104、105)，只要经截短的多肽保持参考多肽的结合性质和/或活性即可。典型地，生物活性片段具有不小于其所来源于的生物活性参考多肽的活性的约1％、约5％、约10％、约25％或约50％。
一般而言，变体将与参考多肽序列显示至少约30％、40％、50％、55％、 60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、 96％、97％、98％、99％相似性或序列一致性或序列同源性。此外，涵盖与天然或亲本序列的区别在于约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、 47、48、49、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100个氨基酸(包括其间所有整数及范围)的添加(例如，C端添加、N端添加、两者兼有)、缺失、截短、插入或取代(例如，保守取代)，但保持亲本或参考多肽序列的性质或活性的序列。
在一些实施方案中，多肽变异体与参考序列相差至少一个但小于50、40、 30、20、15、10、8、6、5、4、3或2个氨基酸残基。在某些实施方案中，多肽变异体与参考序列相差至少1％但小于20％、15％、10％或5％的残基。(若此比较需要比对，则序列应针对最大相似性来比对。因缺失或插入或错配而处于“环”外的序列被视为差异。
序列之间的序列相似性或序列一致性(这些术语在本文中可互换使用)的计算如下执行。为判定两个氨基酸序列或两个核酸序列的一致性百分比，针对最佳比较目的来比对序列(例如，可将空隙引入第一氨基酸或核酸序列及第二氨基酸或核酸序列之一或两者中以达最佳比对，且出于比较目的可忽视非同源序列)。在某些实施方案中，出于比较目的而比对的参考序列的长度为参考序列长度的至少30％、较佳至少40％、更佳至少50％、60％且甚至更佳至少70％、80％、90％、100％。随后比较相应氨基酸位置或核苷酸位置处的氨基酸残基或核苷酸。当第一序列中的位置由与第二序列中相应位置相同的氨基酸残基或核苷酸占据时，则分子在该位置处为一致的。
两个序列之间的一致性百分比随序列共有的一致位置的数目而变化，考虑到了空隙的数目及各空隙的长度，需要引入该等空隙以达成两个序列的最佳比对。
序列的比较及两个序列之间的一致性百分比的判定可使用数学算法来完成。在优选的实施方案中，使用已并入GCG软件套件的GAP程序中的 Needleman及Wunsch(J.Mol.Biol.48:444-453,1970)算法，使用Blossum 62矩阵或PAM250矩阵以及16、14、12、10、8、6或4的空隙加权值及1、2、3、4、 5或6的长度加权值来测定两个氨基酸序列之间的一致性百分比。在又一优选的实施方案中，使用GCG软件套件中的GAP程序，使用NWSgapdna.CMP矩阵以及40、50、60、70或80的空隙加权值及1、2、3、4、5或6的长度加权值来测定两个核苷酸序列之间的一致性百分比。一组尤其优选的参数(且为除非另有规定否则应使用的参数)包括Blossum 62记分矩阵，其中空隙罚分为 12、空隙延伸罚分为4且框架移位空隙罚分为5。
两个氨基酸或核苷酸序列之间的一致性百分比可使用E.Meyers及 W.Miller(Cabios.4:11-17,1989)的算法来判定，该算法已经并入ALIGN程序 (2.0版)中，使用PAM120加权残基表，空隙长度罚分为12，空隙罚分为4。
本文所述的核酸及蛋白质序列可用作“查询序列”以执行针对公众数据库的搜索，以便例如鉴定其他家族成员或相关序列。此等搜索可使用Altschul 等人,(1990,J.Mol.Biol,215:403-10)的NBLAST及XBLAST程序(2.0版)执行。BLAST核苷酸搜索可利用NBLAST程序、记分＝100、字长＝12来执行，以获得与本文所述的核酸分子同源的核苷酸序列。BLAST蛋白质搜索可利用 XBLAST程序、记分＝50、字长＝3来执行，以获得与本文所述的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目的的空隙化比对，可利用如Altschul等人,(Nucleic Acids Res.25:3389-3402,1997)中所述的空隙化BLAST。当利用BLAST及空隙化BLAST程序时，可使用各个程序(例如，XBLAST及 NBLAST)的预设参数。
在一些实施方案中，如上所述，可使用BLAST比对工具评估多核苷酸和 /或多肽。局部比对仅由一对序列区段组成，各序列区段来自每个受比较序列。Smith-Waterman或Sellers算法的修改形式将找出其记分无法通过延伸或修整而改良的所有区段对，此称为高记分区段对(HSP)。BLAST比对的结果包括统计学量度，以指示可有机会单独预期BLAST记分的可能性。
原始记分S是由与各比对序列相关联的空隙及取代的数目计算，其中较高相似性记分指示更显著比对。取代记分通过检查表(参见PAM,BLOSUM) 给出。
空隙记分是典型地计算为空隙开放罚分G及空隙延伸罚分L的总和。对于长度n的空隙而言，空隙耗值将为G+Ln。空隙耗值、G及L的选择为经验性的，但习惯对G选择高值(10-15)，例如11，而对L选择低值(1-2)，例如1。
位记分S’衍生自原始比对记分S，其中已考虑到所使用记分系统的统计学性质。位记分相对于记分系统加以正规化，因此该位记分可用于比较来自不同搜索的比对记分。术语“位记分”和“相似性记分”可互换使用。位记分给出对该比对良好程度如何的指示；分数愈高，比对愈好。
E-值或预期值描述具有类似分数的序列将偶然出现在数据库中的可能性。其为具有相当于或优于S的记分的不同比对数目的预测值，预期S有机会出现在数据库搜索中。E-值越小，比对越显著。例如，具有e-117的E值的比对意指：具有类似记分的序列极不可能有机会简单地出现。另外，用于比对一对随机氨基酸的预期记分需要为负值，否则长比对将趋向于具有高记分，此不依赖于所比对的区段是否相关。另外，BLAST算法使用适当取代矩阵、核苷酸或氨基酸，且针对空隙化比对而言，使用空隙创建及延伸罚分。例如，多肽序列的BLAST比对及比较典型地使用BLOSUM62矩阵、11的空隙存在罚分及1的空隙延伸罚分来进行。
在一些实施方案中，序列相似性记分由使用BLOSUM62矩阵、11的空隙存在罚分及1的空隙延伸罚分进行的BLAST分析来报导。
在特定实施方案中，本文所提供的序列一致性/相似性记分指使用10版 GAP(GCG,Accelrys,San Diego,Calif.)使用以下参数所获得的值：核苷酸序列的一致性％及相似性％使用50的GAP加权值、及3的长度加权值及 nwsgapdna.cmp记分矩阵；氨基酸序列的一致性％及相似性％使用8的GAP加权值、及2的GAP长度加权值及BLOSUM62记分矩阵(Henikoff及Henikoff, PNAS USA.89:10915-10919,1992)。GAP使用Needleman及Wunsch(JMol Biol. 48:443-453,1970)的算法来找出最大化匹配数目并最小化空隙数目的两个完全序列的比对。
在特定实施方案中，多肽变体包含可与参考多肽序列(参见例如序列表) 最佳比对以产生以下BLAST位记分或序列相似性记分的氨基酸序列：至少约 50、60、70、80、90、100、100、110、120、130、140、150、160、170、 180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、 310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、 440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、 570、580、590、600、610、620、630、640、650、660、670、680、690、 700、710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、 960、970、980、990、1000或1000以上，包括其间所有整数及范围，其中BLAST 比对使用BLOSUM62矩阵、11的空隙存在罚分及1的空隙延伸罚分。
如上所述，参考多肽可以包括氨基酸取代、缺失、截短、添加及插入的各种方式改变。用于此类操纵的方法为本领域中通常已知的。例如，参考多肽的氨基酸序列变体可藉由DNA中的突变来制备。本领域中熟知用于突变诱发及核苷酸序列改变的方法。参见，例如，Kunkel(PNAS USA.82:488-492, 1985)；Kunkel等人,(Methods in Enzymol.154:367-382,1987)、美国专利第 4,873,192号、Watson,J.D.等人,(「Molecular Biology of theGene,」第4版, Benjamin/Cummings,Menlo Park,Calif.,1987)及其中所引用的参考文献。关于不影响所关注蛋白质的生物活性的适当氨基酸取代的指导可见于Dayhoff 等人,(1978)Atlas of Protein Sequence and Structure(Natl.Biomed.Res. Found.,Washington,D.C.)的模型中。
用于筛选通过此类修饰制成的组合文库的基因产物以及用于筛选cDNA 文库的具有所选性质的基因产物的方法在本领域中已知。此类方法亦适于快速筛选通过参考多肽的组合突变诱发所产生的基因文库。作为一个实例，递归系集突变诱发(REM)可与筛选测定组合使用来鉴定多肽变异体，该递归系集突变诱发为一种提高文库中功能突变体的出现频率的技术(Arkin及 Yourvan,PNAS USA 89:7811-7815,1992；Delgrave等人,ProteinEngineering. 6:327-331,1993)。
“聚乙二醇”或“PEG”指环氧乙烷与水的缩合聚合物的混合物，呈支链或直链，由通式H(OCH2CH2)nOH表示，其中n为至少4。“聚乙二醇”或“PEG”与数字后缀组合使用以指示其近似重量平均分子量。例如，PEG5,000指总重量平均分子量为约5,000的PEG；PEG12,000是指总重量平均分子量为约12,000 的PEG；PEG20,000是指总重量平均分子量为约20,000的PEG。
在一些实施方案中，PEG的总重量平均分子量为约1,000至约50,000；约 3,000至约40,000；约5,000至约30,000；约8,000至约30,000；约11,000至约 30,000；约12,000至约28,000；约16,000至约24,000；约18,000至约22,000；或约19,000至约21,000。在一些实施方案中，PEG的总重量平均分子量为约1,000 至约50,000；约3,000至约30,000；约3,000至约20,000；约4,000至约12,000；约4,000至约10,000；约4,000至约8,000；约4,000至约6,000；或约5,000。在具体实施方案中，PEG的总重量平均分子量为约20,000。通常，分子量为30,000 或更高的PEG难以溶解，且可能降低调配产物的产率。PEG可为支链或直链。通常，增加PEG的分子量会降低ADI的免疫原性。PEG可为支链或直链，且在某些实施方案中为直链。具有本文所述的分子量的PEG可联合ADI和任选地生物兼容性接头一起使用。
某些实施方案采用硫醇、巯基或半胱氨酸反应性PEG。在一些实施方案中，硫醇、巯基或半胱氨酸反应性PEG附接至一个或多个天然产生的半胱氨酸残基、一个或多个引入的半胱氨酸残基(例如，用一个(或多个)半胱氨酸残基取代一或多个野生型残基、插入一或多个半胱氨酸残基)或其任何组合(参见，例如，Doherty等人,Bioconjug Chem.16:1291-98,2005)。在某些实施方案中，某些野生型ADI半胱氨酸残基可首先经另一个氨基酸取代，以防止PEG 聚合物附接至野生型半胱氨酸，例如以防止一种(或多种)PEG在其他方面所需的生物活性受到破坏。一些实施方案采用一或多种非天然半胱氨酸衍生物 (例如同型半胱氨酸)代替半胱氨酸。
硫醇、巯基或半胱氨酸反应性PEG的非限制性实例包括甲氧基PEG顺丁烯二酰亚胺(M-PEG-MAL)(例如，MW 2000、MW 5000、MW 10000、MW 20000、MW 30000、MW 40000)。M-PEG-MAL与蛋白质及肽中的半胱氨酸侧链上的硫醇基反应以产生稳定的3-硫代琥珀酰亚胺基醚键联。此反应为高度选择性的，且可以在其他官能基存在下在约pH 5.0至pH 6.5的温和条件下进行。市售的硫醇、巯基(sulfyhdryl)或半胱氨酸反应性PEG分子的具体实例示于图1A至图1D中。因此，在某些实施方案中，ADI酶缀合至本文所述的硫醇、巯基或半胱氨酸反应性PEG分子中的任何一种或多种。
尽管优选的实施方案利用接头，但ADI可用或不用接头来共价连接至修饰剂，诸如PEG。ADI可经由本领域已知的方法经由生物兼容性接头来共价连接至PEG，此类方法如由例如以下所述：Park等人,Anticancer Res., 1:373-376(1981)；以及Zaplipsky及Lee,Polyethylene Glycol Chemistry: Biotechnical and Biomedical Applications,J.M.Harris,编,Plenum Press,NY,第 21章(1992)，这些文献的公开特此以全文引用的方式并入本文中。在一些情况下，ADI可例如经由氨基、巯基、羟基、羧基或其他基团直接(亦即，不用接头)偶联至修饰剂，诸如PEG。
用于将ADI共价附接至修饰剂(例如PEG)的接头可为任何生物兼容性接头。如上所述，“生物兼容性”指化合物或基团是无毒的且可在体外或体内利用，而不引起损伤、病患、疾病或死亡。修饰剂诸如PEG可例如经由醚键、硫醇键、酰胺键或其他键来连接至接头。
在一些实施方案中，合适的接头的总链长为约1至100个原子、1至80个原子、1至60个原子、1至40个原子、1至30个原子、1至20个原子或例如1、2、 3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个原子，其中链中的原子包含C、S、N、P和/或O。在某些实施方案中，接头是可选的，例如PEG共轭的ADI酶不包含接头。在一些情况下，接头基团包括例如琥珀酰基、酰胺基、酰亚胺基、氨基甲酸酯基、酯基、环氧基、羧基、羟基、碳水化合物、酪氨酸基、半胱氨酸基、组氨酸基、亚甲基及其任何组合。稳定接头的具体实例包括琥珀酰亚胺、丙酸、羧甲基化键、醚、氨基甲酸酯、酰胺、胺、胺甲酰胺、酰亚胺、脂族C-C键及硫醚。在某些实施方案中，生物兼容性接头为琥珀酰亚胺基琥珀酸酯(SS)基。
其他合适的接头包括氧羰基咪唑基(包括例如羰基咪唑(CDI))、硝基苯基 (包括例如碳酸硝基苯酯(NCP)或碳酸三氯苯酯(TCP))、trysylate基、醛基、异氰酸酯基、乙烯基砜基或一级胺。在某些实施方案中，接头来源于SS、SPA、 SCM或NHS；在某些实施方案中，使用SS、SPA或NHS，且在一些实施方案中，使用SS或SPA。因此，在某些实施方案中，潜在接头可由以下形成：甲氧基PEG琥珀酰亚胺基琥珀酸酯(SS)、甲氧基PEG琥珀酰亚胺基戊二酸酯(SG)、甲氧基PEG琥珀酰亚胺基碳酸酯(SC)、甲氧基PEG琥珀酰亚胺基羧甲基酯(SCM)、甲氧基PEG2N-羟基琥珀酰亚胺基(NHS)、甲氧基PEG琥珀酰亚胺基丁酸甲酯(SBA)、甲氧基PEG琥珀酰亚胺基丙酸酯(SPA)、甲氧基PEG琥珀酰亚胺基戊二酰胺和/或甲氧基PEG琥珀酰亚胺基琥珀酰亚胺。
接头的另外实例包括但不限于以下中的一种或多种：—O—、—NH—、—S—、—C(O)—、C(O)—NH、NH—C(O)—NH、O—C(O)—NH、—C(S)—、—CH2—、—CH2—CH2—、—CH2—CH2—CH2—、—CH2—CH2—CH2—CH2—、—O—CH2—、—CH2—O—、—O—CH2—CH2—、—CH2—O—CH2—、—CH2—CH2—O—、—O—CH2—CH2—CH2—、—CH2—O—CH2—CH2—、—CH2—CH2—O—CH2—、—CH2—CH2—CH2—O—、—O—CH2—CH2—CH2—CH2—、—CH2—O—CH2—CH2—CH2—、—CH2—CH2—O—CH2—CH2—、—CH2—CH2—CH2—O—CH2—、—CH2—CH2—CH2—CH2—O—、—C(O)—NH—CH2—、—C(O)—NH—CH2—CH2—、—CH2—C(O)—NH—CH2—、—CH2—CH2—C(O)—NH—、—C(O)—NH—CH2—CH2—CH2—、—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—、—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—、—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—、—C(O)—NH—CH2—CH2—CH2—CH2—、—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—CH2—、—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—、—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—、—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—、—CH2—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—、—NH—C(O)—CH2—、—CH2—NH—C(O)—CH2—、—CH2—CH2—NH—C(O)—CH2—、—NH—C(O)—CH2—CH2—、—CH2—NH—C(O)—CH2—CH2、—CH2—CH2—NH—C(O)—CH2—CH2、—C(O)—NH—CH2—、—C(O)—NH—CH2—CH2—、—O—C(O)—NH—CH2—、—O—C(O)—NH—CH2—CH2—、—NH—CH2—、—NH—CH2—CH2—、—CH2—NH—CH2—、—CH2—CH2—NH—CH2—、—C(O)—CH2—、—C(O)—CH2—CH2—、—CH2—C(O)—CH2—、—CH2—CH2—C(O)—CH2—、—CH2—CH2—C(O)—CH2—CH2—、—CH2—CH2—C(O)—、—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—NH—、—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—NH—C(O)—、—CH2—CH2—CH2—C(O)—NH—CH2—CH2—NH—C(O)—CH2—、二价环烷基、—N(R6)—，R6是H或选自由以下组成的群组的有机基：烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基及取代的芳基。另外，本文所述的任何接头部分可进一步包括包含1至20个环氧乙烷单体单元 [亦即，-(CH2CH2O)1-20-]的环氧乙烷寡聚物链。亦即，环氧乙烷寡聚物链可出现在接头之前或之后，且任选地出现在包含二个或更多个原子的接头部分的任何两个原子之间。此外，若寡聚物相邻于聚合物链段且仅代表聚合物链段的延伸，则寡聚物链将不被视为接头部分的一部分。
在某些实施方案中，ADI酶包含如本文所述的一个或多个PEG分子和/ 或接头。在某些实施方案中，接头为水不稳定接头。
PEG附接至ADI增加了ADI的循环半衰期。通常，PEG附接至ADI的一级胺上。如本领域技术人员所知，PEG或其他修饰剂在ADI上的附接位点的选择是通过蛋白质的活性域内的每个位点的作用来判定。PEG可附接至ADI的一级胺，而不会实质上损失酶活性。例如，存在于ADI中的赖氨酸残基皆为可能的点，在这些可能的点处，如本文所述的ADI可经由生物兼容性接头诸如SS、SPA、SCM、SSA和/或NHS附接至PEG。鉴于本公开，本领域技术人员将显而易知，PEG亦可附接至ADI上的其他位点。
1至约30个PEG分子可共价连接至ADI。在某些实施方案中，ADI经修饰有(亦即包含)一个PEG分子。在一些实施方案中，ADI以一个以上的PEG分子来修饰。在特定实施方案中，ADI以约1至约10个或约7至约15个PEG分子、或约2至约8个或约9至约12个PEG分子来修饰。在一些实施方案中，ADI以约 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个PEG分子来修饰。在具体实施方案中，ADI以4.5至5.5个PEG分子/ADI来修饰。在一些实施方案中， ADI以5±1.5个PEG分子来修饰。
在某些实施方案中，ADI中约15％至约70％的一级胺基以PEG来修饰，在一些实施方案中，约20％至约65％、约25％至约60％，或在某些实施方案中，约30％至约55％、或45％至约50％，或在一些实施方案中，在精氨酸脱亚氨酶中约50％的一级胺基以PEG来修饰。当PEG共价连接至ADI的末端时，可能仅需要使用1个PEG分子。增加ADI上的PEG单元的数目延长了酶的循环半衰期。然而，增加ADI上的PEG单元的数目降低了酶的比活性。因此，鉴于本公开，本领域技术人员将显而易知，需要在两者之间达成平衡。
在一些实施方案中，生物兼容性接头的共同特征在于它们经由琥珀酰亚胺基附接至精氨酸脱亚氨酶的一级胺。一旦与ADI偶联，SS-PEG便具有紧挨着PEG的酯键，由此可能使得此位点对血清酯酶敏感，该血清酯酶可在体内将PEG自ADI中释放。SPA-PEG及PEG2-NHS不具有酯键，因此它们对血清酯酶不敏感。
与SS-PEG、SPA-PEG及SC-PEG一样，附接至蛋白质的PEG可为直链，或者与PEG2-NHS一样，可使用PEG的支链。
在一些实施方案中，例如，氨基酸取代采用非天然氨基酸以共轭至PEG 或其他修饰剂(参见，例如，de Graaf等人,Bioconjug Chem.20:1281-95,2009)。因此，某些实施方案包括经由一个或多个非天然氨基酸共轭至一个或多个 PEG的ADI酶。在一些实施方案中，非天然氨基酸包含具有选自由以下组成的群组的官能基的侧链：烷基、芳基、芳基卤化物、乙烯基卤化物、烷基卤化物、乙酰基、酮、吖丙啶、腈、硝基、卤化物、酰基、酮基、迭氮基、羟基、肼、氰基、卤基、酰肼、烯基、炔基、醚、硫醚、环氧化合物、砜、硼酸、硼酸酯、硼烷、苯基硼酸、硫醇、硒基、磺酰基、硼酸盐、酉朋酸盐、二氧磷基、膦酰基、膦、杂环-、吡啶基、萘基、二苯甲酮、受限的环诸如环辛烯、硫酯、烯酮、亚胺、醛、酯、硫代酸、羟胺、氨基、羧酸、α-酮羧酸、α或β不饱和酸及酰胺、乙醛酰胺及有机硅烷基。在一些实施方案中，非天然氨基酸选自由以下组成的群组：对乙酰基-L-苯丙氨酸、O-甲基-L-酪氨酸、L-3-(2-萘基)丙氨酸、3-甲基-苯丙氨酸、O-4-烯丙基-L-酪氨酸、升半胱氨酸、4-丙基-L-酪氨酸、三-O-乙酰基-GlcNAcβ-丝氨酸、β-O-GlcNAc-L-丝氨酸、三-O-乙酰基-GalNAc-α-苏氨酸、α-GalNAc-L-苏氨酸、L-多巴、氟化苯丙氨酸、异丙基-L-苯丙氨酸、对迭氮基-L-苯丙氨酸、对酰基-L-苯丙氨酸、对苯甲酰基-L-苯丙氨酸、L-二氧磷基丝氨酸、膦酰丝氨酸、膦酰酪氨酸、对碘苯丙氨酸、对溴苯丙氨酸、对氨基-L-苯丙氨酸和异丙基-L-苯丙氨酸。
虽然ADI-PEG为本文所述的说明性经修饰ADI，但本领域技术人员将认识到，ADI可用其他聚合物或适当的分子来修饰以达到所需效果，尤其是降低抗原性及增加血清半衰期。
应当理解，一些实施方案基于以下认识，当经由重组技术产生时，精氨酸脱亚氨酶的某些结构特性可阻止或干扰适当及快速的复性。具体来说，这些结构特性阻碍或阻止酶在重组生产期间呈现活性构形。在一些实施方案中，术语“活性构形”定义为允许未经修饰或经修饰的精氨酸脱亚氨酶的酶活性的三维结构。具体而言，活性构形对于催化精氨酸转化成瓜氨酸为必需的。术语“结构特性”可定义为由特定氨基酸或氨基酸组合产生的多肽链的任何性状、品质或性质。例如，精氨酸脱亚氨酶可含有导致正常肽链弯曲或扭结的氨基酸，且由此阻碍酶在酶复性期间呈现活性构形。特别地，来自人型支原体的精氨酸脱亚氨酶在210位处具有脯氨酸，该脯氨酸可在肽链中导致弯曲或扭结，使得难以使酶在重组生产期间复性。应当理解，来源于其他生物体的精氨酸脱亚氨酶亦可具有对应于来自人型支原体的精氨酸脱亚氨酶的 210位的位点。
一些实施方案提供野生型精氨酸脱亚氨酶的多肽链中的具体氨基酸取代。例如，在一些实施方案中，位置210处脯氨酸(或等效残基)被丝氨酸取代。其他取代的非限制性实例包括Pro210至Thr210、Pro210至Arg210、Pro210至 Asn210、Pro210至Gln210或Pro210至Met210。
在具体实施方案中，经修饰的ADI为ADI-PEG 20。ADI-PEG 20指例如以下中所述的ADI分子：美国专利第6,183,738号；美国专利第6,635,462号； Ascierto PA,等人(2005)Pegylated arginine deiminase treatment of patients with metastatic melanoma:results from phase I and II studies.J Clin Oncol 23(30): 7660–7668；Izzo F,等人(2004)Pegylated arginine deiminase treatment of patients with unresectablehepatocellular carcinoma:results from phase I/II studies.J Clin Oncol 22(10):1815–1822；Holtsberg FW,等人(2002), Poly(ethylene glycol)(PEG)conjugatedarginine deiminase:effects of PEG formulations on its pharmacologicalproperties.J Control Release 80(1–3): 259–271；及Kelly等人,(2012)BritishJournal of Cancer 106,324-332。本领域技术人员将认识到，ADI-PEG 20是来源于人型支原体的聚乙二醇化ADI酶 (约5.5±1.0的质量平均数的连接的PEG 20,000分子)，其相对于野生型人型支原体ADI序列具有两个取代(K112E；P210S)。
在某些实施方案中，例如相对于非冻干液体对照组合物中的相应 ADI-PEG，调配物中的ADI-PEG保留其ADI活性的至少50、55、60、65、70、 75、80、85、90或95％。在一些实施方案中，在作为冻干调配物储存约或至少约1、2、3或4周、或约或至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、60或72 个月后，ADI-PEG保留其(原始)ADI活性的至少50、55、60、65、70、75、 80、85、90或95％。在一些实施方案中，ADI活性在约2-8℃的温度下、或在约室温下、或在应力温度(例如，约或至少约50-60℃的温度)下储存后保留。在某些实施方案中，例如相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，ADI-PEG保留(原始)PEG分子(每ADI单体/原体)的至少50、55、60、65、70、 75、80、85、90、95或100％。
本领域技术人员将理解，本文所述的ADI-PEG多肽可与本文所述的各种调配物组分中的任何一种或多种组合，且根据本文所述的方法和组合物中的任何一种或多种来使用。
经重构液体组合物及相关方法
某些实施方案包括经重构液体组合物、重构液体组合物的方法及使用该经重构液体组合物以进行精氨酸耗尽疗法(包括治疗各种癌症)的方法。
例如，某些实施方案包括重构本文所述的冻干调配物的方法，该方法包括将医药学上可接受的溶剂或稀释剂添加至冻干调配物以形成经重构液体组合物。亦包括通过本文所述的任何方法制备的经重构液体组合物。某些示例性实施方案涉及经重构液体组合物，其包含本文所述的冻干调配物及医药学上可接受的稀释剂或溶剂，即其中将冻干调配物溶解或以其他方式增溶于溶剂中以形成液体组合物。
在特定实施方案中，溶剂或稀释剂为水或无菌水。在一些情况下，冻干调配物在约或小于约五、四、三、二或一分钟的时间内重构成约5-20mg/ml ADI-PEG(例如，约5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、 19或20mg/ml ADI-PEG)的实质上不含聚集体的溶液。
在一些实施方案中，例如相对于非冻干液体对照组合物中的相应 ADI-PEG，经重构液体组合物中的ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶(ADI)活性的至少50、55、60、65、70、75、80、85、90或95％。在一些实施方案中，在作为冻干调配物储存约或至少约1、2、3或4周、或约或至少约1、2、3、4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、60或72个月后，经重构液体组合物中的ADI-PEG保留其ADI 活性的至少50、55、60、65、70、75、80、85、90或95％。在一些实施方案中，ADI活性在约2-8℃的温度下、或在约室温下、或在应力温度(例如，约或至少约50-60℃的温度)下储存后保留。在一些实施方案中，经重构液体调配物中的ADI-PEG的ADI酶比活性为约5.0至约120IU/mg、或约5.5、6、6.5、 7、7.5、8、8.5、9.0、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、 14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21、 21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、 28.5、29、29.5、30、30.5、35、40、45、50、55、55、60、65、70、75、80、 85、90、95、100、105、110、115或120IU/mg，包括其间所有整数及范围。
在某些实施方案中，例如相对于非冻干液体对照组合物中的相应 ADI-PEG，经重构液体组合物中的ADI-PEG在重构时保留(原始)PEG分子(每 ADI单体/原体)的至少50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100％。在一些实施方案中，例如在作为冻干调配物储存约或至少约1、2、3或4周、或约或至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、60或72个月后，视情况在约2-8℃的温度和/或约室温下储存后，经重构液体组合物中的ADI-PEG在重构时保留 (原始)PEG分子(每ADI单体/原体)的至少50、55、60、65、70、75、80、85、 90、95或100％。
在一些实施方案中，液体组合物中的ADI-PEG的重量摩尔渗透浓度为约 50mOsm/kg至约500mOsm/kg、或约50、55、60、65、70、75、80、85、90、 95、100、105、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、220、225、230、235、 240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300、 305、310、320、325、330、335、340、345、350、355、360、365、370、 375、380、385、390、395、400、405、410、420、425、430、435、440、 445、450、455、460、465、470、475、480、485、490、495或约500mOsm/kg，包括其间所有整数及范围。在一些实施方案中，经重构液体组合物适于注射至受试者(例如，人类受试者)中。
还包括使用经重构液体组合物以进行精氨酸耗尽疗法的方法。例如某些实施方案包括治疗、改善有需要的受试者的癌症的症状或抑制该癌症的进展的方法，其包含向该受试者施用本文所述的经重构液体调配物。
本文所述的方法及组合物可用于治疗各种癌症。在一些实施方案中，该癌症选以下一种或多种：肝细胞癌(HCC)、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、间皮瘤、淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、淋巴瘤、肝癌、肉瘤、白血病、急性骨髓性白血病、复发性急性骨髓性白血病、B细胞恶性肿瘤、乳癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胃癌、神经胶质瘤(例如星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤或脉络丛乳头状瘤)、多形性神经胶质母细胞瘤(例如，巨细胞神经胶质母细胞瘤或神经胶质肉瘤)、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原发性CNS淋巴瘤、原始神经外胚层肿瘤 (神经管胚细胞瘤)、非小细胞肺癌(NSCLC)、肾癌、膀胱癌、子宫癌、食道癌、脑癌、头颈癌、子宫颈癌、睪丸癌及胃癌。
在一些实施方案中，癌症展现减少的精氨基琥珀酸合成酶-1(ASS-1)表达和/或活性，或在其他方面为精氨基琥珀酸合成酶-1缺陷的。在一些情况下，相对于适当对照样品(例如，正常细胞或组织)的表达和/或活性，减少的ASS-1 表达或活性为约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、 55％、60％、65％、70％或更多的表达和/或活性减少。在某些实施方案中，相对于对照样品的表达或活性，ASS或ASL表达或活性减少至少两倍。ASS-1 表达或活性减少可根据本领域中常规技术来测量，该常规技术包括例如定量PCR、免疫组织化学、酶活性测定(例如，测量瓜氨酸至精氨基琥珀酸的转化或精氨基琥珀酸至精氨酸及富马酸盐的转化ADI活性测定)及类似者。
在一些实施方案中，本文所述的方法或组合物将患者的中值存活时间增加了4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、15周、20周、25周、30周、40 周或更长时间。在某些实施方案中，本文所述的方法或组合物将患者的中值存活时间增加了1年、2年、3年或更长时间。在一些实施方案中，本文所述的方法或组合物将无进展存活增加了2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、 9周、10周或更长时间。在某些实施方案中，本文所述的方法或组合物将无进展存活增加了1年、2年、3年或更长时间。
在某些实施方案中，如通过存活肿瘤量的统计学上显著减少(例如，肿瘤质量的至少10％、20％、30％、40％、50％或更大的减少)或通过改变的(例如，在统计学上显著减少)扫描尺寸所指示，所施用的组合物足以导致肿瘤消退。在某些实施方案中，所施用的组合物足以导致疾病稳定。在某些实施方案中，所施用的组合物足以导致熟练临床医师已知的具体疾病适应症症状的稳定或临床上相关的减少。
用于治疗癌症的方法或组合物可与其他治疗模式组合。例如，本文所述的组合物可在其他治疗干预(包括症状护理、放射疗法、手术、移植、激素疗法、光动力疗法、抗生素疗法或其任何组合)之前、期间或之后向受试者施用。症状护理包括施用皮质类固醇，以减轻脑水肿、头痛、认知功能不全及呕吐，且施用抗痉挛剂，以减少癫痫型发作。放射疗法包括全脑照射、分级放射疗法及放射手术，诸如立体定向放射手术，该放射疗法可进一步与传统手术组合。
用于鉴定患有本文所述的一种或多种疾病或病状的受试者的方法是本领域中已知的。
施用可通过各种不同途径实现，包括口服、肠胃外、鼻内、静脉内、皮内、肌肉内、囊内、皮下、舌下、口腔、直肠、阴道及局部。优选的施用方式取决于待治疗或预防的病状的性质。特定实施方案包括通过IV输注进行的施用。
精确剂量及持续时间随所治疗的疾病而变，且可使用已知测试方案或通过在本领域已知的模型系统中测试组合物且由此外推而凭经验判定。亦可执行对照临床试验。剂量亦可随待缓解的病状的严重性而变化。医药组合物通常经调配及施用以发挥治疗上有用的作用，同时使不期望有的副作用最小化。组合物可施用一次，或可分成许多较小剂量，以便以一定时间间隔施用。对于任何具体受试者，特定剂量方案可随时间推移根据个体需要来调整。
在一些实施方案中，本文所述的组合物的治疗有效量或治疗剂量为有效使肿瘤生长降低或稳定的量。在某些情况下，治疗以小剂量起始，该小剂量可以小的增量增加直至达成该等情况下的最佳效果。
在一些实施方案中，自约一天一次至约每二或三周一次施用剂量。例如，在某些实施方案中，约每1、2、3、4、5、6或7天一次、或约一周一次、或约一周两次、或约一周三次、或约每二或三周一次施用剂量。
在一些实施方案中，剂量为约0.1mg/kg至约20mg/kg、或至约10mg/kg、或至约5mg/kg、或至约3mg/kg。在一些实施方案中，剂量为约0.10mg/kg、 0.15mg/kg、0.20mg/kg、0.25mg/kg、0.30mg/kg、0.35mg/kg、0.40mg/kg、 0.45mg/kg、0.50mg/kg、0.55mg/kg、0.60mg/kg、0.65mg/kg、0.70mg/kg、 0.75mg/kg、0.80mg/kg、0.85mg/kg、0.90mg/kg、0.95mg/kg、1.0mg/kg、 1.5mg/kg、2.0mg/kg、2.5mg/kg、3.0mg/kg、3.5mg/kg、4.0mg/kg、4.5mg/kg、5.0mg/kg、5.5mg/kg、6.0mg/kg、6.5mg/kg、7.0mg/kg、7.5mg/kg、8.0mg/kg、8.5mg/kg、9.0mg/kg、9.5mg/kg、10mg/kg、11mg/kg、12mg/kg、13mg/kg、 14mg/kg、15mg/kg、16mg/kg、17mg/kg、18mg/kg、19mg/kg或20mg/kg，包括其间所有整数及范围。在具体实施方案中，剂量作为2ml静脉内注射为每周一次约1mg/kg至每3天一次约20mg/kg。
在一些实施方案中，剂量为约50IU/m2至约1000IU/m2。在特定实施方案中，剂量为约50IU/m2、60IU/m2、70IU/m2、80IU/m2、90IU/m2、100IU/m2、 110IU/m2、120IU/m2、130IU/m2、140IU/m2、150IU/m2、160IU/m2、170IU/m2、 180IU/m2、190IU/m2、200IU/m2、210IU/m2、220IU/m2、230IU/m2、240IU/m2、 250IU/m2、260IU/m2、270IU/m2、280IU/m2、290IU/m2、300IU/m2、310IU/m2、约320IU/m2、约330IU/m2、340IU/m2约350IU/m2、360IU/m2、370IU/m2、 380IU/m2、390IU/m2、400IU/m2、410IU/m2、420IU/m2、430IU/m2、440IU/m2、 450IU/m2、500IU/m2、550IU/m2、600IU/m2、620IU/m2、630IU/m2、640 IU/m2、650IU/m2、660IU/m2、670IU/m2、680IU/m2、690IU/m2、700IU/m2、 710IU/m2、720IU/m2、730IU/m2、740IU/m2、750IU/m2、760IU/m2、770IU/m2、 780IU/m2、790IU/m2、800IU/m2、810IU/m2、820IU/m2、830IU/m2、840IU/m2、 850IU/m2、860IU/m2、870IU/m2、880IU/m2、890IU/m2、900IU/m2、910IU/m2、 920IU/m2、930IU/m2、940IU/m2、950IU/m2、960IU/m2、970IU/m2、980IU/m2、 990IU/m2或约1000IU/m2，包括其间所有整数及范围。
还包括患者护理组合物，其包含本文所述的一种或多种冻干调配物。某些试剂盒还包含一或多种医药学上可接受的稀释剂或溶剂，诸如水(例如，无菌水)。在一些实施方案中，冻干调配物储存在小瓶、药筒、双室注射器和/或预填充混合系统中。
本文中的试剂盒还可包括适合于或意欲用于所治疗适应症或所欲诊断应用的一或多种另外的治疗剂或其他组分。本文中的试剂盒还可包括一种或多种注射器或促进意欲的递送方式所必需或所需的其他组分(例如，支架、可植入式贮库等等)。
本说明书中所引用的所有公开、专利申请及发布的专利均以引用的方式并入本文中，如同明确及单独地指示将各单独公开、专利申请或发布的专利以引用的方式并入一样。
尽管已以说明及举例方式出于清晰理解的目的而在一定程度上详细地描述前述发明，但本领域的普通技术人员根据本发明的教导将显而易知，可在不偏离所附权利要求的精神或范畴的情况下对本发明进行某些改变及修改。以下实例仅经由说明方式且不经由限制方式来提供。本领域技术人员将容易地认识到可进行改变或修改以产生基本上类似结果的多种非关键参数。
实施例
实施例1
在本研究中，对各种赋形剂类型提供具有雅观饼外观的冻干ADI-PEG 20 调配物的能力进行评估，且各种赋形剂类型在冻干过程及重构之后维持稳定。下表E1提供本研究中测试的调配物的概述。
Figure BDA0002046750130000591
Figure BDA0002046750130000601
使用VirTis Genesis 25XL冻干器在小瓶中冻干表E1的调配物。将搁架预冷至5℃，之后加载小瓶。冻干循环如下：
·将搁架在5℃下维持30分钟；
·将搁架以1℃/min冷却至-40℃，且在-40℃下保持1小时；
·在初级干燥在50mtorr下进行72小时的情况下，将搁架以1℃/分钟加热至-35℃；
·在次级干燥在50mtorr下进行8小时的情况 下，将搁架以0.1℃/分钟加热至20℃。
在60℃的应力储存条件下一周之前及之后，通过视觉外观评估冻干调配物。所有冻干调配物在冻干后显示白色着色，且在应力储存条件下显示灰白色至黄色着色。
相对于冻干前调配物(无阴影结果)以及在应力储存条件(阴影结果)之前及之后，还通过尺寸排阻层析评估冻干调配物的酶活性。结果示于下表E2 和表E3中。
Figure BDA0002046750130000602
Figure BDA0002046750130000603
Figure BDA0002046750130000611
还评估了总PEG水平和游离PEG水平(mg/ml)(数据未显示)，且根据分配的+值的总数来对调配物进行分级及分组)。自最高(第1组)至最低(第5组)的分级示于下表E4中。
Figure BDA0002046750130000612
总而言之，本研究中制备的所有ADI-PEG 20调配物(F1至F10)产生雅观、均匀冻干饼，且全部似乎基于来自酶活性和尺寸排阻层析的评估保持稳定。来自应力储存条件(60℃，一周)的结果指示，最佳冻干ADI-PEG 20调配物含有冷冻保护剂及冻干保护剂。添加增积剂(诸如葡聚糖40或结晶甘露醇)或高玻璃转移温度赋形剂(诸如海藻糖)似乎减弱活性损失且改善重构后PEG分子的形成。
实施例2
在本研究中，调配物开发包括(a)缓冲剂评估(组氨酸、柠檬酸盐和甘氨酰-甘氨酸缓冲剂、pH 6-7)和(b)组合评估(增积剂，海藻糖和蔗糖；稳定剂，脯氨酸、甘氨酸；EDTA，以增强酶活性)。调配物的评估使用快速冻干循环 (FAST LYO循环；冷冻，随后进行次级干燥)。
下表E5提供经测试用于缓冲剂评估的调配物的概述。还提供某些冻干前特征。在透析之后评估冻干前液体样品的RALS(直角光散射)及浓度，且还评估与激烈温度缓变组合的RALS。
Figure BDA0002046750130000621
回收百分比的结果相对较高，且所有调配物在透析后保持透明，指示没有缓冲剂不兼容性问题。含柠檬酸盐的调配物的RALS值较高，这可能指示可溶性聚集体。
随后在SPDurastop冻干器中使用Formatch’s FAST LYO循环进行透析后执行冻干。在没有初级干燥循环的情况下执行FAST LYO循环；代替地，仅使用次级干燥循环来干燥样品。用于评估缓冲剂选择的冻干循环为：在-50℃下冷冻2小时(2℃/min)；在60mtorr下在22℃下干燥4小时(所有缓变为 2℃/min)。
使用RALS及IF(内在荧光)评估来自表E5的所有冻干缓冲剂调配物。使用两种技术来评估不同调配物的热稳定性。将样品自20℃加热至90℃。此温度扫描显露Tm，即发生急剧变化的温度，反映蛋白质的热诱导的变性或去折叠。若侦测到较高的Tm值，则认为蛋白质更稳定。
在T(0)时，观察到所有液体对照调配物的RALS和IF的转变温度为约60℃。在冻干之前，将透析后的液体调配物分别透过0.2μm过滤器过滤。另外，缓冲剂调配物之间没有显著差异。含有组氨酸pH 6.5及7.0的调配物显示略好，藉由RALS分析来执行，且含有pH值为6.5的组氨酸缓冲剂的调配物显示总体最低的初始RALS读数，指示可溶性聚集体的量最少。
为了组合评估，采用pH 6.5的20mM组氨酸的碱缓冲剂。将海藻糖、蔗糖及其组合作为增积剂评估，其评估它们向调配物提供等渗性的能力。将氨基酸脯氨酸及甘氨酸作为稳定剂评估。另外，将EDTA作为螯合剂评估。下表E6提供经测试用于组合评估的调配物的概述。
Figure BDA0002046750130000631
在SPDurastop冻干器中使用Formatch’s FAST LYO循环进行透析后执行冻干。用于评估组合研究的冻干循环如下：在-50℃下冷冻2小时；在75mtorr 下在22℃下干燥过夜(所有缓变为1℃/min)。将ADI-PEG 20样品以11.1mg/mL 冻干(1mL填充于10mL小瓶中)。
RALS温度缓变数据，RALS初始值及酶活性结果表明，含有蔗糖的调配物为ADI-PEG20提供最佳的稳定化可冻干调配物。含有海藻糖或海藻糖及蔗糖二者的调配物也提供稳定化调配物。另外的赋形剂(例如甘氨酸、脯氨酸、 EDTA)未显著增强冻干调配物的活性。
含有9％蔗糖或9％海藻糖的调配物也通过调制微差扫描热量法(MDSC) 来评估以判定玻璃转移。此分析的结果(约-16℃至-18℃的共熔点)表明-20℃或更低的初级干燥温度应导致非坍塌的冻干饼。随后评估表E7中的冻干循环，且其显示可接受的饼外观。
Figure BDA0002046750130000641
总而言之，缓冲剂评估(组氨酸、柠檬酸盐及甘氨酰-甘氨酸缓冲剂显示，所有缓冲剂为可接受的，但将组氨酸缓冲剂(pH 6.5)鉴定为最佳冻干缓冲剂。组合评估(增积剂，海藻糖及蔗糖；稳定剂，脯氨酸、甘氨酸；EDTA，以增强酶活性)指示含有蔗糖的调配物显示最佳总体结果。然而，含有海藻糖及经组合蔗糖/海藻糖的调配物也表现良好。与相应液体对照相比，所有缓冲剂的酶活性结果显示，冻干后的回收大于90％，且加速稳定性(50℃下培育5天) 后的回收大于80％。所有缓冲剂的重构时间小于1分钟，且所有饼通过尺寸排阻层析显示100％纯度。
实例3
在本研究中，用填充体积为3.5mL/瓶的11mg/mL ADI-PEG 20的三种不同调配物中的各者评估两种不同的冻干循环。评估的冻干参数为干燥期间的搁架温度、室压力及冷冻条件。下表E8提供本研究中测试的调配物的概述。
Figure BDA0002046750130000642
如上所述，测试两种不同的冻干循环：侵袭性循环(冻干循环1)及中间循环(冻干循环2)。
冻干循环1的参数概述于下表E9中。
Figure BDA0002046750130000651
在完成循环1时，分析所得亲液物(lyophile)。在用3.5mL水复溶后，调配物ID 1明显混浊，而调配物ID 2及3透明且没有微粒。
对来自循环1的冻干产物及经重构产物执行傅立叶变换红外光谱 (FTIR)、微差扫描热量法(DSC)及SDS-PAGE分析。在干燥时在调配物ID 2及 3中观察到β折叠(1630cm-1)的一些结构变化，但是在重构之后，这两种调配物的ADI-PEG 20的结构返回至其原始状态。在干燥时检测到调配物ID 1的主要结构变化。重构后，此调配物中的ADI-PEG 20的结构似乎与冻干前样品相似，但不一致。SDS-PAGE分析显示在任何调配物中没有降解峰。
为了调节保守性及侵袭性循环之间的升华速率，设计0℃的搁架温度以在冻干循环2中进行初级干燥。中间冻干循环2的参数概述于下表E10中。
Figure BDA0002046750130000652
在完成循环2时，分析所得亲液物。在用3.5mL水复溶后，调配物ID 1 明显浑浊，而调配物ID 2及3澄清且无色。
对来自冻干循环2的冻干产物及经重构产物执行FTIR、DSC和SDS-PAGE 分析。在干燥时在调配物ID 2及3中观察到β折叠(1630cm-1)的一些结构变化，但是在重构之后，这两种调配物的ADI-PEG 20的结构返回至其原始状态。还在干燥时检测到调配物ID 1的显著结构变化。复溶后，此调配物中的 ADI-PEG 20的结构与冻干前的结构类似。SDS-PAGE分析显示在任何调配物中没有降解峰。
再次执行冻干循环2以确认其作为经优化干燥循环的稳健性。在此后续冻干循环中仅干燥调配物2及3。通过SDS-PAGE检查调配物ID 2和3的经重构样品的物理降解。当将结果与液体药物物质及冻干前样品比较时，未观察到经重构样品的降解产物。
总而言之，本研究用三种不同的ADI-PEG 20调配物评估侵袭性及中间冻干循环。在各循环之后，经由DSC分析样品的饼外观、水分含量、浊度、二级结构的变化及物理稳定性。调配物ID 1(w/甘氨酸)在循环1及2后在重构时显示沉淀迹象，且自确认性冻干循环中排除。相反，在各测试的冻干循环之后，含有蔗糖的调配物ID 2及3的完整性维持良好。干燥后结构的任何变化在重构时为可逆的。
实施例4
在本研究中，在两种不同的储存温度下评估两种具有不同PEG数目的 ADI-PEG 20制剂。评估的稳定性参数包括重构之前及之后的外观、酶活性及 PEG数目。下表E11提供PEG数目及本研究中测试的调配物的概述。
Figure BDA0002046750130000661
冻干过程如下。将样品冷冻以确保整个调配物呈固相。随后，使用Virtis FreezeMobile 25EL在-78℃至-85℃及50-120mTorr下将各小瓶的样品冷冻干燥约24小时，以使尽可能多的水升华。
如先前所提及，这些冻干产物中的各者的储存温度为2-8℃或室温。两种储存温度及储存持续时间列出于下表E12中。
Figure BDA0002046750130000671
在各个温度下冻干且储存后，分析亲液物。在冻干后，产物的外观为白色且蓬松的松散的饼。在用水重构后，调配物ID P204及C204皆透明且无微粒。P204及C204中的各者的重构时间少于1分钟。
对冻干产物及经重构产物执行酶活性、逆相(RP)层析及SDS-PAGE分析。如下表E13中所示，在2-8℃下储存亲液物相对于室温储存时的储存导致ADI 酶活性的较大保留。例如，P204在2-8℃下储存3个月后保留其ADI酶活性的约92％，且在室温下储存3个月后保留其活性的约86％(相对于0个月时间点)。 C204在2-8℃下储存3个月后保留其ADI酶活性的约96％，且在室温下储存3 个月后保留其酶活性的约74％(相对于0个月时间点)。
Figure BDA0002046750130000672
使用RP层析来分析PEG数目。如下表E14中所示，冻干及重构之前及之后每原体一种(或多种)PEG的数目未显著改变。冻干过程及储存未导致PEG 的任何解偶联。SDS-PAGE分析也显示每ADI原体一种(或多种)PEG的数目未显著改变。
Figure BDA0002046750130000673
Figure BDA0002046750130000681
在用溶剂重构后，P204及C204中的各者皆透明且无微粒，且在小于1分钟内发生重构。此外，对于P204及C204中的各者，在室温下储存后发生的 ADI酶活性的损失大于在2-8℃储存后所观察到的。此外，对于两种储存温度，每ADI原体PEG的数目保持不变。
实例5
执行研究以评估由藉由水不稳定接头与PEG共价连接的ADI组成的 ADI-PEG 20调配物的储存条件。储存条件为2-8℃多达28个月。评估的稳定性参数包括外观、PEG数目、游离PEG及ADI酶活性。下表E12提供本研究中测试的调配物的概述。
Figure BDA0002046750130000682
在评估的条件下冻干且储存时，分析调配物ID HS。在2-8℃下冻干且储存28个月后，调配物的外观为均匀的致密的白色饼，而无肉眼可见的回熔。在储存28个月的冻干产物用水重构后，调配物ID HS透明且无微粒。重构时间为约40秒。
对在2-8℃储存的冻干产物进行酶活性评估，且与在-70℃下冷冻储存的产物的活性进行比较。在2-8℃储存亲液物28个月时，酶活性完全保留。结果显示于下表E13中。
Figure BDA0002046750130000683
分别使用RP层析及SEC层析分析PEG数目及游离PEG浓度(mg/mL)。下表E14中显示，冻干之前及之后以及在2-8℃下储存28个月后每原体一种(或多种)PEG的数目及游离PEG未显著改变。显然，冻干过程及多达28个月的储存未导致PEG与酶解偶联。
Figure BDA0002046750130000691
总之，在用溶剂重构后，调配物HS透明且无微粒，且在小于1分钟内发生重构。另外，本研究亦显示，共价附接的PEG的解偶联未在储存期间发生，且酶在重构时为完全活性的。与水不稳定PEG共价键联的ADI在冻干及重构之前及之后在2-8℃的储存条件下稳定至少28个月。
序列表
<110> 波拉里集团
<120> 聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶的调配物
<130> POLA-007/00US 314479-2045
<150> 62/416,607
<151> 2016-11-02
<160> 56
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 409
<212> PRT
<213> 人型支原体
<400> 1
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Gln Ser Phe Val Lys Ile
50 55 60
Met Lys Asp Arg Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Lys Ala Ala Lys Glu Glu Phe Ile Glu
85 90 95
Thr Phe Leu Glu Glu Thr Val Pro Val Leu Thr Glu Ala Asn Lys Lys
100 105 110
Ala Val Arg Ala Phe Leu Leu Ser Lys Pro Thr His Glu Met Val Glu
115 120 125
Phe Met Met Ser Gly Ile Thr Lys Tyr Glu Leu Gly Val Glu Ser Glu
130 135 140
Asn Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp
145 150 155 160
Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Phe Met Arg Tyr
165 170 175
Ile Val Arg Arg Arg Glu Thr Leu Phe Ala Arg Phe Val Phe Arg Asn
180 185 190
His Pro Lys Leu Val Lys Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Met Lys
195 200 205
Met Pro Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Glu Thr Leu
210 215 220
Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Asp Thr Ile Thr Leu Leu
225 230 235 240
Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Val Glu Phe Lys Arg Ile Val
245 250 255
Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp
260 265 270
Leu Thr Met Leu Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala Asn
275 280 285
Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ala Glu
290 295 300
Pro Gln Pro Gln Leu Asn Gly Leu Pro Leu Asp Lys Leu Leu Ala Ser
305 310 315 320
Ile Ile Asn Lys Glu Pro Val Leu Ile Pro Ile Gly Gly Ala Gly Ala
325 330 335
Thr Glu Met Glu Ile Ala Arg Glu Thr Asn Phe Asp Gly Thr Asn Tyr
340 345 350
Leu Ala Ile Lys Pro Gly Leu Val Ile Gly Tyr Asp Arg Asn Glu Lys
355 360 365
Thr Asn Ala Ala Leu Lys Ala Ala Gly Ile Thr Val Leu Pro Phe His
370 375 380
Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser Met
385 390 395 400
Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405
<210> 2
<211> 409
<212> PRT
<213> PHX8
<400> 2
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Gln Ser Phe Val Lys Ile
50 55 60
Met Lys Asp Arg Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Lys Ala Ala Lys Glu Glu Phe Ile Glu
85 90 95
Thr Phe Leu Glu Glu Thr Val Pro Val Leu Thr Glu Ala Asn Lys Glu
100 105 110
Ala Val Arg Ala Phe Leu Leu Ser Lys Pro Thr His Glu Met Val Glu
115 120 125
Phe Met Met Ser Gly Ile Thr Lys Tyr Glu Leu Gly Val Glu Ser Glu
130 135 140
Asn Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp
145 150 155 160
Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Phe Met Arg Tyr
165 170 175
Ile Val Arg Arg Arg Glu Thr Leu Phe Ala Arg Phe Val Phe Arg Asn
180 185 190
His Pro Lys Leu Val Lys Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Met Lys
195 200 205
Met Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Glu Thr Leu
210 215 220
Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Asp Thr Ile Thr Leu Leu
225 230 235 240
Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Val Glu Phe Lys Arg Ile Val
245 250 255
Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp
260 265 270
Leu Thr Met Leu Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala Asn
275 280 285
Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ala Glu
290 295 300
Pro Gln Pro Gln Leu Asn Gly Leu Pro Leu Asp Lys Leu Leu Ala Ser
305 310 315 320
Ile Ile Asn Lys Glu Pro Val Leu Ile Pro Ile Gly Gly Ala Gly Ala
325 330 335
Thr Glu Met Glu Ile Ala Arg Glu Thr Asn Phe Asp Gly Thr Asn Tyr
340 345 350
Leu Ala Ile Lys Pro Gly Leu Val Ile Gly Tyr Asp Arg Asn Glu Lys
355 360 365
Thr Asn Ala Ala Leu Lys Ala Ala Gly Ile Thr Val Leu Pro Phe His
370 375 380
Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser Met
385 390 395 400
Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405
<210> 3
<211> 392
<212> PRT
<213> 海豹脑支原体
<400> 3
Ile His Val Tyr Ser Glu Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His
1 5 10 15
Glu Pro Gly Arg Glu Ile Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu
20 25 30
Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His
35 40 45
Gln Ser Phe Val Lys Gln Leu Lys Asp Asn Gly Ile Asn Val Val Glu
50 55 60
Leu Thr Asp Leu Val Ala Glu Thr Phe Asp Leu Ala Ser Lys Glu Glu
65 70 75 80
Gln Glu Lys Leu Ile Glu Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu
85 90 95
Ser Glu Ala His Lys Thr Ala Val Arg Lys Phe Leu Thr Ser Arg Lys
100 105 110
Ser Thr Arg Glu Met Val Glu Phe Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr
115 120 125
Asp Leu Gly Ile Glu Ala Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro
130 135 140
Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val
145 150 155 160
Thr Ile His Tyr Met Arg Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe
165 170 175
Ser Arg Phe Val Phe Ser Asn His Pro Lys Leu Val Lys Thr Pro Trp
180 185 190
Tyr Tyr Asp Pro Ala Met Lys Met Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe
195 200 205
Ile Tyr Asn Asn Asp Thr Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp
210 215 220
Leu Glu Thr Ile Thr Leu Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu
225 230 235 240
Val Glu Phe Lys Arg Ile Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn
245 250 255
Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe
260 265 270
Leu Tyr Ser Pro Ile Ala Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp
275 280 285
Leu Val Asn Gly Gly Ala Glu Pro Gln Pro Lys Glu Asn Gly Leu Pro
290 295 300
Leu Glu Gly Leu Leu Gln Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Val Leu Ile
305 310 315 320
Pro Ile Ala Gly Asn Asn Ala Ser His Ile Asp Ile Glu Arg Glu Thr
325 330 335
His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Ala Ile Lys Pro Gly Val Val Ile
340 345 350
Gly Tyr Ala Arg Asn Glu Lys Thr Asn Ala Ala Leu Ala Ala Ala Gly
355 360 365
Ile Lys Val Leu Pro Phe His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly
370 375 380
Asn Ala Arg Cys Met Ser Met Pro
385 390
<210> 4
<211> 410
<212> PRT
<213> 精氨酸支原体
<400> 4
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Ser Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Gln Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Ala Asn Asp Ile Asn Val Val Glu Leu Ile Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Gln Glu Ala Lys Asp Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Glu His Lys Val
100 105 110
Val Val Arg Asn Phe Leu Lys Ala Lys Lys Thr Ser Arg Glu Leu Val
115 120 125
Glu Ile Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Glu Ala
130 135 140
Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Val Phe Ser
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Ile Asn Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ser Leu
195 200 205
Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Gln Thr Val Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Val Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ala
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Val Glu Asn Gly Leu Pro Leu Glu Gly Leu Leu Gln
305 310 315 320
Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Val Leu Ile Pro Ile Ala Gly Glu Gly
325 330 335
Ala Ser Gln Met Glu Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Arg Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 5
<211> 409
<212> PRT
<213> 关节炎支原体
<400> 5
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Lys Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Glu Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Lys Arg Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Val Asp Leu Ile Val
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Lys Glu Ala Lys Glu Lys Leu Leu Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Asp Asp Ser Val Pro Val Leu Ser Asp Glu His Arg Ala
100 105 110
Ala Val Lys Lys Phe Leu Gln Ser Gln Lys Ser Thr Arg Ser Leu Val
115 120 125
Glu Tyr Met Ile Ala Gly Ile Thr Lys His Asp Leu Lys Ile Glu Ser
130 135 140
Asp Leu Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Val Phe Ser
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Glu
195 200 205
Gly Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Gln Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Asp
290 295 300
Ala Pro Gln Pro Val Asp Asn Gly Leu Pro Leu Glu Asp Leu Leu Lys
305 310 315 320
Ser Ile Ile Gly Lys Lys Pro Thr Leu Ile Pro Ile Ala Gly Ala Gly
325 330 335
Ala Ser Gln Ile Asp Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Val Ala Pro Gly Ile Val Ile Gly Tyr Ala Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Thr Val Leu Pro Phe
370 375 380
Arg Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys
405
<210> 6
<211> 408
<212> PRT
<213> 口腔支原体
<220>
<221> misc_feature
<222> (201)..(201)
<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (263)..(263)
<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (272)..(272)
<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (294)..(294)
<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸
<400> 6
Ser Val Phe Ser Asp Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu Ile
1 5 10 15
Gly Asp Leu Glu Ser Val Leu Val His Glu Pro Gly Lys Glu Ile Asp
20 25 30
Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu
35 40 45
Glu Ser Thr Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Glu Phe Val Glu Ile Leu
50 55 60
Lys Lys Gln Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Val Asp Leu Val Val Glu
65 70 75 80
Thr Tyr Asn Leu Val Asp Lys Lys Thr Gln Glu Lys Leu Leu Lys Asp
85 90 95
Phe Leu Asp Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Pro Glu His Arg Lys Ala
100 105 110
Val Glu Lys Phe Leu Lys Ser Leu Lys Ser Thr Lys Glu Leu Ile Gln
115 120 125
Tyr Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Lys Ala Asp
130 135 140
Lys Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp
145 150 155 160
Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg Tyr
165 170 175
Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Lys Phe Ile Phe Thr Asn
180 185 190
His Pro Lys Leu Val Lys Thr Pro Xaa Tyr Tyr Asp Pro Ala Met Lys
195 200 205
Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr Leu
210 215 220
Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Glu Thr Ile Thr Leu Leu
225 230 235 240
Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile Val
245 250 255
Ala Ile Asn Val Pro Lys Xaa Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr Xaa
260 265 270
Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala Asn
275 280 285
Asp Val Phe Lys Phe Xaa Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ser Asn
290 295 300
Pro Glu Pro Val Val Asn Gly Leu Pro Leu Asp Lys Leu Leu Glu Ser
305 310 315 320
Ile Ile Asn Lys Lys Pro Val Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Gly Ala
325 330 335
Thr Glu Ile Glu Thr Ala Val Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr
340 345 350
Leu Ala Ile Lys Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Val Lys
355 360 365
Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Asn Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe Lys
370 375 380
Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser Met
385 390 395 400
Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys
405
<210> 7
<211> 391
<212> PRT
<213> 猫支原体
<400> 7
Ile His Val Tyr Ser Glu Ile Gly Glu Leu Glu Ser Val Leu Val His
1 5 10 15
Glu Pro Gly Arg Glu Ile Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu
20 25 30
Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His
35 40 45
Lys Leu Phe Val Ser Glu Leu Lys Ala Asn Asp Ile Asn Val Val Glu
50 55 60
Leu Thr Asp Leu Val Thr Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Gln Glu Ala
65 70 75 80
Lys Asp Asn Leu Ile Glu Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu
85 90 95
Thr Glu Glu Leu Lys Ser Val Val Arg Thr Tyr Leu Lys Ser Ile Lys
100 105 110
Ser Thr Arg Glu Leu Ile Gln Met Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr
115 120 125
Asp Leu Gly Ile Glu Ala Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro
130 135 140
Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val
145 150 155 160
Thr Ile His Tyr Met Arg Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe
165 170 175
Ser Arg Phe Val Phe Ser Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Trp
180 185 190
Tyr Tyr Asp Pro Ser Leu Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe
195 200 205
Ile Tyr Asn Asn Asn Thr Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp
210 215 220
Leu Glu Thr Val Thr Leu Leu Ala Lys Asn Ile Val Ala Asn Lys Glu
225 230 235 240
Cys Glu Phe Lys Arg Ile Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn
245 250 255
Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe
260 265 270
Leu Tyr Ser Pro Ile Ala Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp
275 280 285
Leu Val Asn Gly Gly Glu Glu Pro Gln Pro Val Glu Asn Gly Leu Pro
290 295 300
Leu Glu Gly Leu Leu Glu Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Ile Leu Ile
305 310 315 320
Pro Ile Ala Gly Glu Gly Ala Ser Gln Ile Asp Ile Glu Arg Glu Thr
325 330 335
His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Ala Ile Arg Pro Gly Val Val Ile
340 345 350
Gly Tyr Ser Arg Asn Glu Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly
355 360 365
Ile Lys Val Leu Pro Phe His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly
370 375 380
Asn Ala Arg Cys Met Ser Met
385 390
<210> 8
<211> 392
<212> PRT
<213> 海豹支原体
<400> 8
Ile His Val Tyr Ser Glu Ile Gly Glu Leu Gln Thr Val Leu Val His
1 5 10 15
Glu Pro Gly Arg Glu Ile Glu Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu
20 25 30
Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His
35 40 45
Gln Glu Phe Val Ala Glu Leu Lys Lys Asn Asn Ile Asn Val Val Glu
50 55 60
Leu Thr Asp Leu Val Ser Glu Thr Tyr Asp Met Val Ser Lys Glu Lys
65 70 75 80
Gln Glu Lys Leu Ile Glu Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu
85 90 95
Ser Glu Glu His Lys Gly Leu Val Arg Lys Phe Leu Lys Ser Leu Lys
100 105 110
Ser Ser Lys Glu Leu Ile Gln Tyr Met Met Ala Gly Ile Thr Lys His
115 120 125
Asp Leu Asn Ile Glu Ala Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro
130 135 140
Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val
145 150 155 160
Thr Ile His Tyr Met Arg Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe
165 170 175
Ser Arg Phe Ile Phe Ala Asn His Pro Lys Leu Met Asn Thr Pro Leu
180 185 190
Tyr Tyr Asn Pro Asp Met Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe
195 200 205
Val Tyr Asn Asn Glu Thr Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp
210 215 220
Leu Asp Thr Ile Thr Leu Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu
225 230 235 240
Arg Glu Phe Lys Arg Ile Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn
245 250 255
Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe
260 265 270
Leu Tyr Ser Pro Ile Ala Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp
275 280 285
Leu Val Asn Gly Gly Asp Glu Pro Gln Pro Lys Val Asn Gly Leu Pro
290 295 300
Leu Glu Lys Leu Leu Glu Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Ile Leu Ile
305 310 315 320
Pro Ile Ala Gly Thr Ser Ala Ser Asn Ile Asp Val Glu Arg Glu Thr
325 330 335
His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Val Val Ile
340 345 350
Gly Tyr Ser Arg Asn Val Lys Thr Asn Glu Ala Leu Glu Ala Ala Gly
355 360 365
Ile Lys Val Leu Pro Phe Lys Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly
370 375 380
Asn Ala Arg Cys Met Ser Met Pro
385 390
<210> 9
<211> 401
<212> PRT
<213> 鸽支原体
<400> 9
Met Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Glu Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Asn Glu Ala Ile
35 40 45
Lys Glu His Lys Gly Phe Leu Lys Ile Leu Gln Asp Lys Gly Ile Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Ser Asp Leu Val Ala Glu Thr Tyr Thr Tyr His Ala
65 70 75 80
Thr Gln Lys Glu Arg Glu Ala Phe Ile Glu Lys Trp Leu Asp Glu Ala
85 90 95
Glu Pro Ala Leu Thr Lys Asp Leu Arg Ala Lys Val Lys Ser Tyr Val
100 105 110
Leu Ser Lys Glu Gly Thr Pro Val Ala Met Val Arg Thr Met Met Ala
115 120 125
Gly Val Ser Lys Gln Glu Leu Asn Val Glu Ser Glu Thr Glu Leu Val
130 135 140
Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
145 150 155 160
Ala Gly Asn Gly Ile Ser Leu Asn Asn Met Lys Tyr Val Thr Arg Lys
165 170 175
Arg Glu Thr Ile Phe Ala Glu Phe Ile Phe Ala Thr His Pro Asp Tyr
180 185 190
Lys Thr Thr Pro His Trp Phe Asp Arg Leu Asp Glu Gly Asn Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Lys Asp Thr Leu Val Ile Gly Val
210 215 220
Ser Glu Arg Thr Asn Lys Glu Ala Ile Leu Thr Ile Ala Lys Lys Ile
225 230 235 240
Lys Asn Asn Lys Glu Ala Lys Phe Lys Lys Ile Val Ala Ile Asn Val
245 250 255
Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val
260 265 270
Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys
275 280 285
Val Trp Glu Ile Asp Leu Ser Lys Glu Ile Glu Met Val Glu Thr Asn
290 295 300
Lys Pro Leu Ala Asp Val Leu Glu Ser Ile Ile Gly Val Lys Pro Val
305 310 315 320
Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Gly Ala Thr Gln Leu Asp Ile Asp Ile
325 330 335
Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val
340 345 350
Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Ile Lys Thr Glu Ala Ala Leu Arg Ala
355 360 365
Ala Gly Val Thr Val Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly
370 375 380
Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Val
385 390 395 400
Lys
<210> 10
<211> 407
<212> PRT
<213> 衣阿华支原体
<400> 10
Met Gly Asn Asn Ile Pro Lys Lys Ile Asn Val Phe Ser Glu Ile Gly
1 5 10 15
Asn Leu Lys Arg Val Leu Val His Thr Pro Gly Lys Glu Ile Glu Tyr
20 25 30
Val Thr Pro Gln Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Asp
35 40 45
Pro Val Arg Ala Arg Glu Glu His Lys Glu Phe Ile Lys Ile Leu Glu
50 55 60
Ser Gln Gly Val Glu Val Val Gln Leu Val Asp Leu Thr Ala Glu Thr
65 70 75 80
Tyr Asp Val Ala Glu Ser Gln Ala Lys Glu Asn Phe Ile Gln Lys Trp
85 90 95
Leu Asp Glu Ser Leu Pro Lys Leu Thr Asp Glu Asn Arg Asn Lys Val
100 105 110
Tyr Ser Leu Leu Lys Ser Leu Glu Lys Asp Pro Lys Glu Met Ile Arg
115 120 125
Lys Met Met Ser Gly Val Leu Ala Ser Glu Ile Gly Val Lys Ser Asp
130 135 140
Val Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp
145 150 155 160
Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Ile Thr Leu His Arg Met Phe Arg
165 170 175
Pro Thr Arg Arg Arg Glu Thr Ile Phe Ala Asp Phe Ile Phe Ser Asn
180 185 190
His Pro Glu Tyr Lys Ser Thr Gln Lys Tyr Tyr Glu Arg Glu Asp Lys
195 200 205
Phe Ser Leu Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Lys Thr Leu
210 215 220
Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Glu Lys Gly Ala Ile Lys Ala Leu
225 230 235 240
Ala Lys Ala Val Gln Asn Asn Ser Asn Met Ser Phe Glu Lys Ile Tyr
245 250 255
Ala Ile Asn Val Pro Lys Met Ser Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp
260 265 270
Leu Thr Met Leu Asp Thr Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Met
275 280 285
Gly Val Leu Lys Ile Trp Glu Ile Asp Leu Ser Asp Lys Ser Leu Lys
290 295 300
Trp Lys Glu Ile Arg Asp Ser Leu Asp His Phe Leu Ser Thr Ile Ile
305 310 315 320
Gly Lys Lys Ala Ile Thr Val Pro Val Ala Gly Lys Asp Ala Met Gln
325 330 335
Phe Glu Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Ala Thr Asn Phe Ile Ala
340 345 350
Val Ala Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Asp Arg Asn Lys Lys Thr Asn
355 360 365
Glu Ala Leu Lys Glu Ala Gly Ile Lys Val Leu Ser Trp Asn Gly Asp
370 375 380
Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Thr Met Pro Leu
385 390 395 400
Tyr Arg Glu Glu Leu Lys Lys
405
<210> 11
<211> 402
<212> PRT
<213> 鳄鱼支原体
<400> 11
Met Asn Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Val Gly Lys Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Glu Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Asp Ser Ala Ile
35 40 45
Glu Glu His Lys Arg Phe Leu Lys Ile Leu Glu Asp Asn Asn Ile Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Asp Gln Leu Val Ala Asp Thr Tyr Glu Leu Val Asn
65 70 75 80
Pro Ser Val Arg Asp Ala Phe Ile Glu Lys Trp Leu Asn Glu Ser Glu
85 90 95
Pro Lys Leu Asp Lys Lys Leu Arg Glu Lys Val Lys Glu Tyr Leu Leu
100 105 110
His Thr Gln Lys Thr Val Gly Thr Lys Arg Met Val Arg Ile Met Met
115 120 125
Ala Gly Val Asp Arg Val Glu Leu Gly Val Glu Leu Asp Arg Gln Leu
130 135 140
Val Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala
145 150 155 160
Ser Ala Gly Asn Gly Ile Ser Leu Asn Asn Met Lys Tyr Val Thr Arg
165 170 175
Lys Arg Glu Thr Ile Phe Ser Glu Phe Ile Phe Glu Asn His Pro Asp
180 185 190
Tyr Lys Thr Thr Pro His Trp Phe Asp Arg Leu Asp Lys Gly Asn Ile
195 200 205
Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Arg Thr Thr Leu Val Ile Gly
210 215 220
Ile Ser Glu Arg Thr Asn Lys Asp Ala Leu Leu Thr Ile Ala Asn Asn
225 230 235 240
Ile Lys Ser Asn Lys Glu Ser Lys Phe Glu Arg Ile Val Ala Val Asn
245 250 255
Val Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met
260 265 270
Val Asp His Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Met Lys Thr Leu
275 280 285
Lys Phe Trp Thr Ile Asp Leu Thr Lys Pro Ile Lys Met Val Glu Leu
290 295 300
Glu Glu Ser Leu Ser Asp Met Ile Glu Thr Ile Ile Gly Lys Lys Pro
305 310 315 320
Val Leu Ile Pro Ile Ala Gly His Asp Ala Ser Pro Leu Asp Val Asp
325 330 335
Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly
340 345 350
Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Lys Leu Thr Glu Lys Ala Leu Thr
355 360 365
Lys Ala Gly Val Lys Val Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu
370 375 380
Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp
385 390 395 400
Ile Lys
<210> 12
<211> 430
<212> PRT
<213> 发酵支原体
<400> 12
Met Gln Ile Ile Ala Lys Ile Asp Leu Leu Thr Asn Met Leu Ile Phe
1 5 10 15
Met Lys Ile Tyr Phe Ile Gly Arg Leu Ile Met Lys Lys Ile Asn Val
20 25 30
Tyr Ser Glu Tyr Gly Lys Leu Lys Glu Val Leu Val His Thr Pro Gly
35 40 45
Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ala Pro Ser Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe
50 55 60
Ser Ala Ile Leu Glu Pro Asp Ser Ala Ile Ala Glu His Lys Arg Phe
65 70 75 80
Val Gln Leu Leu Lys Asp Asn Gly Ile Lys Val Ile Gln Leu Asp Glu
85 90 95
Leu Phe Ala Lys Thr Phe Asp Leu Val Ser Glu Ser Val Lys Gln Ser
100 105 110
Leu Ile Glu Arg Trp Leu Asp Glu Cys Glu Pro Lys Leu Asp Ala Thr
115 120 125
Leu Arg Ala Lys Val Lys Glu Tyr Ile Leu Glu Leu Lys Ala Lys Ser
130 135 140
Ser Lys Lys Met Val Arg Val Met Met Ala Gly Ile Asp Lys Lys Glu
145 150 155 160
Leu Gly Ile Glu Leu Asp Arg Asp Leu Val Val Asp Pro Met Pro Asn
165 170 175
Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Ile Ser
180 185 190
Leu His His Met Lys Tyr Val Thr Arg Gln Arg Glu Thr Ile Phe Ser
195 200 205
Glu Phe Ile Phe Asp Asn Asn Leu Asp Tyr Asn Thr Val Pro Arg Trp
210 215 220
Phe Asp Arg Lys Asp Glu Gly Arg Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile
225 230 235 240
Tyr Ser Ala Asp Thr Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asn Lys
245 250 255
Glu Ala Ile Asn Val Met Ala Arg Lys Ile Ala Ala Asp Lys Glu Val
260 265 270
Lys Phe Lys Arg Ile Tyr Ala Ile Asn Val Pro Pro Met Pro Asn Leu
275 280 285
Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asn Lys Phe Leu
290 295 300
Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys Val Trp Arg Ile Asp Leu
305 310 315 320
Asn Asp Pro Asp Phe Val Trp His Glu Ile Glu Gly Ser Leu Glu Glu
325 330 335
Ile Leu Glu Gln Ile Ile Gly Met Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala
340 345 350
Gly Lys Gly Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp
355 360 365
Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Ser Val Val Val Gly Tyr Ser
370 375 380
Arg Asn Glu Lys Thr Glu Lys Ala Leu Lys Ala Ala Lys Val Lys Val
385 390 395 400
Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg
405 410 415
Cys Met Ser Met Pro Leu Ile Arg Glu Asp Ile Lys Lys Lys
420 425 430
<210> 13
<211> 452
<212> PRT
<213> 渗透支原体
<400> 13
Met Val Ile Thr Ile Ala Leu Asn Ile Leu Asn Lys Ile Tyr Phe Lys
1 5 10 15
Pro Gln Asn Arg Ser Ile Leu Lys Leu Tyr Arg Leu Pro Ser Leu Cys
20 25 30
Thr Gln Ile Ser Ile Phe Ile Gly Gly Lys Met Ser Ser Ile Asp Lys
35 40 45
Asn Ser Leu Gly Asn Gly Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Glu Leu
50 55 60
Lys Glu Val Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Tyr Thr Ala
65 70 75 80
Pro Ser Arg Leu Glu Glu Leu Leu Phe Ser Ala Val Leu Lys Ala Asp
85 90 95
Thr Ala Ile Glu Glu His Lys Gly Phe Val Lys Ile Leu Gln Asn Asn
100 105 110
Gly Ile Lys Val Ile Gln Leu Cys Asp Leu Val Ala Glu Thr Tyr Glu
115 120 125
Leu Cys Ser Lys Glu Val Arg Asn Ser Phe Ile Glu Gln Tyr Leu Asp
130 135 140
Glu Ala Leu Pro Val Leu Lys Lys Glu Ile Arg Pro Val Val Lys Asp
145 150 155 160
Tyr Leu Leu Ser Phe Pro Thr Val Gln Met Val Arg Lys Met Met Ser
165 170 175
Gly Ile Leu Ala Asn Glu Leu Asn Ile Lys Gln Asp Asn Pro Leu Ile
180 185 190
Ile Asp Gly Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
195 200 205
Met Gly Asn Gly Val Ser Ile Asn Cys Met Lys Tyr Pro Thr Arg Lys
210 215 220
Arg Glu Val Ile Phe Ser Arg Phe Val Phe Thr Asn Asn Pro Lys Tyr
225 230 235 240
Lys Asn Thr Pro Arg Tyr Phe Asp Ile Val Gly Asn Asn Gly Thr Ile
245 250 255
Glu Gly Gly Asp Ile Phe Ile Tyr Asn Ser Lys Thr Leu Val Ile Gly
260 265 270
Asn Ser Glu Arg Thr Asn Phe Ala Ala Ile Glu Ser Val Ala Lys Asn
275 280 285
Ile Gln Ala Asn Lys Asp Cys Thr Phe Glu Arg Ile Val Val Ile Asn
290 295 300
Val Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met
305 310 315 320
Leu Asp Tyr Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Met Asn Val Leu
325 330 335
Lys Ile Trp Glu Ile Asp Leu Asn Val Lys Pro Val Lys Phe Val Glu
340 345 350
Lys Lys Gly Thr Leu Glu Glu Val Leu Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Lys
355 360 365
Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Gly Ala Asn Gln Leu Asp Ile
370 375 380
Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro
385 390 395 400
Gly Val Val Val Gly Tyr Glu Arg Asn Glu Lys Thr Gln Lys Ala Leu
405 410 415
Val Glu Ala Gly Ile Lys Val Leu Ser Phe Asn Gly Ser Gln Leu Ser
420 425 430
Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Ile Arg Glu
435 440 445
Asn Leu Lys Lys
450
<210> 14
<211> 403
<212> PRT
<213> 鸡毒支原体
<400> 14
Met Phe Asn Lys Ile Arg Val Tyr Ser Glu Ile Gly Lys Leu Arg Lys
1 5 10 15
Val Leu Val His Thr Pro Gly Lys Glu Leu Asp Tyr Val Thr Pro Gln
20 25 30
Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ser Leu Leu Asn Pro Ile Lys Ala
35 40 45
Arg Gln Glu His Glu Thr Phe Ile Lys Leu Leu Glu Asp His Asp Val
50 55 60
Glu Cys Val Gln Leu Ser Thr Leu Thr Ala Gln Thr Phe Gln Ala Val
65 70 75 80
Asn Ser Lys Ile Gln Glu Glu Phe Ile Asn Arg Trp Leu Asp Glu Cys
85 90 95
Leu Pro Val Leu Ser Glu Ile Asn Arg Leu Lys Val Tyr Asp Tyr Leu
100 105 110
Lys Ser Leu Ala Thr Asn Pro Gln Val Met Ile Arg Lys Met Met Ser
115 120 125
Gly Ile Leu Ala Lys Glu Val Gly Ile Gln Ser Glu Val Glu Leu Val
130 135 140
Ala Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
145 150 155 160
Ile Gly Lys Gly Ile Thr Leu His Ser Met Phe His Pro Thr Arg Lys
165 170 175
Arg Glu Thr Ile Phe Ala Asp Phe Ile Phe Ser His His Pro Glu Tyr
180 185 190
Lys Asn Ala Pro Lys Tyr Tyr Ser Arg Glu Asp Lys Tyr Ser Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Leu Phe Val Tyr Asp Asp Lys Thr Leu Val Ile Gly Val
210 215 220
Ser Glu Arg Thr Glu Lys Lys Ala Ile Gln Ser Leu Ala Glu Lys Leu
225 230 235 240
Arg Gln Asn Asp Glu Thr Ser Phe Glu Lys Ile Tyr Ala Ile Asn Val
245 250 255
Pro Lys Met Ser Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu
260 265 270
Asp Tyr Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Met Gly Val Leu Lys
275 280 285
Ile Trp Glu Ile Asp Leu Ile His Pro Thr Leu Ile Trp Arg Glu Leu
290 295 300
Asn Glu Ser Leu Glu Gly Phe Leu Ser Met Val Ile Gly Lys Lys Ala
305 310 315 320
Thr Leu Ile Pro Val Ala Gly Glu Asp Ser Thr Gln Ile Glu Ile Asp
325 330 335
Val Glu Thr Asn Phe Asp Ala Thr Asn Phe Leu Val Ile Gln Pro Gly
340 345 350
Val Val Val Gly Tyr Asp Arg Asn Tyr Lys Thr Asn Gln Ala Leu Arg
355 360 365
Asp Ala Gly Val Lys Val Ile Ser Trp Asn Gly Asp Gln Leu Ser Leu
370 375 380
Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Tyr Arg Asp Pro
385 390 395 400
Ile Lys Lys
<210> 15
<211> 402
<212> PRT
<213> 短吻鳄支原体
<400> 15
Met Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Val Gly Arg Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Thr Arg
20 25 30
Leu Glu Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Asp Thr Ala Ile
35 40 45
Glu Glu His Lys Arg Phe Leu Asn Val Leu Glu Lys Asn Gly Ile Lys
50 55 60
Ala Ile Gln Leu Asp Glu Leu Val Ala Gln Thr Tyr Asp Gln Val Asp
65 70 75 80
Gln Lys Ile Lys Asp Glu Phe Ile Asp Gln Trp Leu Gln Glu Ala Lys
85 90 95
Pro Val Leu Asn Asp Gln Leu Lys Lys Leu Val Lys Asn Tyr Leu Leu
100 105 110
Lys Ser Gln Lys Glu Phe Ser Thr Lys Lys Met Val Arg Ile Met Met
115 120 125
Ala Gly Ile Asp Lys Lys Glu Ile Asn Ile Asp Leu Asp Arg Asp Leu
130 135 140
Val Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala
145 150 155 160
Ser Val Gly Asn Gly Ile Ser Leu His Asn Met Lys Tyr Gln Thr Arg
165 170 175
Lys Arg Glu Thr Ile Phe Ala Gln Phe Ile Phe Lys Tyr Asn Lys Asp
180 185 190
Tyr Lys Thr Thr Pro His Trp Phe Asp Arg Phe Asp His Gly Ser Ile
195 200 205
Glu Gly Gly Asp Val Phe Val Tyr Thr Lys Asp Thr Leu Val Ile Gly
210 215 220
Ile Ser Glu Arg Thr Thr Lys Glu Ala Val Leu Asn Ile Ala Lys Lys
225 230 235 240
Ile Lys Ala Asn Thr Asp Ser Lys Phe Lys Lys Ile Val Ala Ile Asn
245 250 255
Val Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Ile Thr Met
260 265 270
Val Asp His Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Met Lys Ser Leu
275 280 285
Lys Phe Trp Leu Ile Asp Leu Ser Lys Glu Ile Lys Met Val Glu Leu
290 295 300
Glu Glu Ser Leu Ser Asn Met Leu Glu Ala Ile Ile Gly Lys Lys Pro
305 310 315 320
Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Asn Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp
325 330 335
Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly
340 345 350
Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Lys Leu Thr Gln Lys Ala Leu Glu
355 360 365
Asp Ala Gly Val Lys Val Leu Ser Phe Asp Gly Asn Gln Leu Ser Leu
370 375 380
Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp
385 390 395 400
Ile Lys
<210> 16
<211> 438
<212> PRT
<213> 肺炎支原体
<400> 16
Met Ser Lys Lys Gln Leu Val Lys Thr Asp Gly His Asn Gln Leu Asp
1 5 10 15
Gln Pro Asn Thr Lys Ala Leu Gln Leu Lys Lys Lys Gln Phe Asn Ser
20 25 30
Gly Val Arg Val Thr Ser Glu Ile Ser Phe Leu Arg Glu Val Ile Ala
35 40 45
His His Pro Gly Ile Glu Thr Glu Arg Val Ile Asp Asn Gln Thr Phe
50 55 60
Gly Ser Ala Met Tyr Leu Glu Arg Ala Gln Lys Glu His Gln Leu Phe
65 70 75 80
Ile Lys Ile Leu Arg Gln His Gly Thr Lys Val His Tyr Leu Gln Asp
85 90 95
Leu Leu Leu Glu Ala Leu Ser Ala Ala Asp Pro Asn Val Arg Gln Asp
100 105 110
Phe Ile Lys Asn Phe Leu Leu Glu Ser Gly Ile Lys Ser Val Ser Thr
115 120 125
Phe Glu Ala Cys Leu Asn Phe Phe Arg Ser Leu Asp Ser Leu Val Asp
130 135 140
Val Ile Lys Val Met Phe Gly Gly Ile Lys Val Ser Asp Val Pro Pro
145 150 155 160
Ile Thr Pro Gln Arg Phe Ala Asp Ile His Val Ser Asn Ser Pro Phe
165 170 175
Leu Ile Lys Pro Leu Ser Phe Ser Leu Tyr Pro His Lys Phe Phe Asn
180 185 190
Thr Leu Gly Thr Gly Val Ala Leu Phe Val Thr Asn Asp Ser Glu Leu
195 200 205
Lys Arg His Ser Leu Val Tyr Glu Tyr Ile Met Arg Phe His Pro Arg
210 215 220
Phe Asp Gly Val Lys Leu Tyr Thr Asn Arg Asp Phe Lys Asn Cys Leu
225 230 235 240
Ile Asn Ser Ser Asp Ile Ile Gln Ile Ser Asn Glu Ile Leu Leu Ile
245 250 255
Gly Ile Ser His Asp Thr Asp Val Leu Gly Ile Glu Ser Leu Ala Arg
260 265 270
Asn Leu Leu Ser Asp His Thr Asn Pro Ile Lys Gln Ile Ile Ala Ile
275 280 285
Asn Ile His Lys Phe Gly Ala Lys Thr Asn Leu Asn Lys Leu Ile Ala
290 295 300
Met Val Asp Val Asp Lys Phe Ile Ile Ala Arg Lys Val Leu Gln Ala
305 310 315 320
Thr Glu Ile Phe Glu Leu Thr Ala Thr Ala Gln Arg Asp Val Asp Gly
325 330 335
Leu Ala Gln Ile Lys Phe Lys Pro Leu Lys Phe Asn Phe Gly Glu Ile
340 345 350
Ile Glu Ala Ile Ile Asp Lys Gln Pro Arg Phe Val Ile Ile Gly Gly
355 360 365
Gly Asp Glu Val Ala Glu Arg Lys Glu Leu Leu Asp Cys Gly Met Gly
370 375 380
Val Leu Asn Leu Ser Pro Gly Glu Ile Val Val Phe Asp Arg Asn His
385 390 395 400
Tyr Thr Asn Asn Leu Leu Asn Glu Leu Gly Leu Ile Ile His Lys Ile
405 410 415
Pro Ala Ser Glu Leu Ser Arg Gly Pro Ser Gly Pro Leu Glu Met Val
420 425 430
Cys Ser Leu Trp Arg Glu
435
<210> 17
<211> 409
<212> PRT
<213> 运动支原体
<400> 17
Met Lys Asp Thr Lys Asp Ile Ile Asn Val Phe Ser Glu Ile Gly Glu
1 5 10 15
Leu Lys Lys Val Leu Ile His Thr Pro Gly Asn Glu Leu Lys Tyr Val
20 25 30
Ser Pro Tyr Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Asn Val Leu Glu Trp
35 40 45
Arg Glu Ala Lys Lys Glu His Asn Glu Phe Ile Gln Lys Leu Lys Ser
50 55 60
Glu Gly Val Glu Pro Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala Glu Ser Phe
65 70 75 80
Glu Glu Ser Ser Ile Lys Val Lys Asn Asp Phe Ile Arg Gln Tyr Leu
85 90 95
Asp Glu Ala Thr Pro Ile Leu Asp Gly Leu Thr Lys Gln Lys Leu Leu
100 105 110
Pro Phe Phe Leu Asp Ile Lys His Ser Thr Arg Lys Thr Ile Glu Leu
115 120 125
Met Met Ser Gly Ile Thr Gln Lys Asp Ile Ser Ile Ser His Ile Glu
130 135 140
Arg Glu Leu Ile Ile Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Ser Arg Asp
145 150 155 160
Asn Phe Ile Ser Ile Gly Asn Ser Val Ile Ile Ser Asn Met Lys Tyr
165 170 175
Lys Thr Arg Lys Arg Glu Thr Ile Phe Thr Asp Phe Ile Phe Lys Asn
180 185 190
His Pro Leu Tyr Lys Lys Val Asn Met Ala Phe Glu Arg Lys Asp Leu
195 200 205
Asn Asn Gln Ile Ser Ile Ile Glu Gly Gly Asp Val Leu Val Tyr Ser
210 215 220
Lys Glu Ile Leu Ile Ile Gly Ile Ser Glu Arg Thr Thr Met Ser Ala
225 230 235 240
Ile Leu Glu Leu Ala Glu Asn Phe Lys Lys Thr Lys Arg Ser Phe Lys
245 250 255
Lys Ile Tyr Gly Val Glu Val Pro Lys Met Lys Asn Leu Met His Leu
260 265 270
Asp Thr Trp Leu Thr Met Ile Asp Tyr Asp Lys Phe Ile Tyr Ser Pro
275 280 285
Asn Val Leu Thr Asp Leu Lys Phe Trp Glu Ile Asn Leu Asp Tyr Glu
290 295 300
Lys Ile Ser Ser Lys Glu Leu His Ala Ser Leu Ser Glu Phe Leu Lys
305 310 315 320
Leu Ile Ile Gly Lys Asp Pro Ile Leu Ile Pro Ile Gly Gly Lys Gly
325 330 335
Ala Ser Gln Ile Thr Ile Asp Ile Glu Thr Asn Phe Val Ala Ala Asn
340 345 350
Tyr Leu Val Ile Arg Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Tyr
355 360 365
Glu Thr Gln Lys Ala Leu Glu Gly His Gly Val Lys Val Ile Ala Phe
370 375 380
Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ser Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ile Arg Ser Asn Leu Lys
405
<210> 18
<211> 411
<212> PRT
<213> 化脓性链球菌
<400> 18
Met Thr Ala Gln Thr Pro Ile His Val Tyr Ser Glu Ile Gly Lys Leu
1 5 10 15
Lys Lys Val Leu Leu His Arg Pro Gly Lys Glu Ile Glu Asn Leu Met
20 25 30
Pro Asp Tyr Leu Glu Arg Leu Leu Phe Asp Asp Ile Pro Phe Leu Glu
35 40 45
Asp Ala Gln Lys Glu His Asp Ala Phe Ala Gln Ala Leu Arg Asp Glu
50 55 60
Gly Ile Glu Val Leu Tyr Leu Glu Thr Leu Ala Ala Glu Ser Leu Val
65 70 75 80
Thr Pro Glu Ile Arg Glu Ala Phe Ile Asp Glu Tyr Leu Ser Glu Ala
85 90 95
Asn Ile Arg Gly Arg Ala Thr Lys Lys Ala Ile Arg Glu Leu Leu Met
100 105 110
Ala Ile Glu Asp Asn Gln Glu Leu Ile Glu Lys Thr Met Ala Gly Val
115 120 125
Gln Lys Ser Glu Leu Pro Glu Ile Pro Ala Ser Glu Lys Gly Leu Thr
130 135 140
Asp Leu Val Glu Ser Asn Tyr Pro Phe Ala Ile Asp Pro Met Pro Asn
145 150 155 160
Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Thr Ile Gly Thr Gly Val Ser
165 170 175
Leu Asn His Met Phe Ser Glu Thr Arg Asn Arg Glu Thr Leu Tyr Gly
180 185 190
Lys Tyr Ile Phe Thr His His Pro Ile Tyr Gly Gly Gly Lys Val Pro
195 200 205
Met Val Tyr Asp Arg Asn Glu Thr Thr Arg Ile Glu Gly Gly Asp Glu
210 215 220
Leu Val Leu Ser Lys Asp Val Leu Ala Val Gly Ile Ser Gln Arg Thr
225 230 235 240
Asp Ala Ala Ser Ile Glu Lys Leu Leu Val Asn Ile Phe Lys Gln Asn
245 250 255
Leu Gly Phe Lys Lys Val Leu Ala Phe Glu Phe Ala Asn Asn Arg Lys
260 265 270
Phe Met His Leu Asp Thr Val Phe Thr Met Val Asp Tyr Asp Lys Phe
275 280 285
Thr Ile His Pro Glu Ile Glu Gly Asp Leu Arg Val Tyr Ser Val Thr
290 295 300
Tyr Asp Asn Glu Glu Leu His Ile Val Glu Glu Lys Gly Asp Leu Ala
305 310 315 320
Glu Leu Leu Ala Ala Asn Leu Gly Val Glu Lys Val Asp Leu Ile Arg
325 330 335
Cys Gly Gly Asp Asn Leu Val Ala Ala Gly Arg Glu Gln Trp Asn Asp
340 345 350
Gly Ser Asn Thr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val Val Val Val Tyr Asn
355 360 365
Arg Asn Thr Ile Thr Asn Ala Ile Leu Glu Ser Lys Gly Leu Lys Leu
370 375 380
Ile Lys Ile His Gly Ser Glu Leu Val Arg Gly Arg Gly Gly Pro Arg
385 390 395 400
Cys Met Ser Met Pro Phe Glu Arg Glu Asp Ile
405 410
<210> 19
<211> 408
<212> PRT
<213> 粪肠球菌
<400> 19
Met Ser His Pro Ile Asn Val Phe Ser Glu Ile Gly Lys Leu Lys Thr
1 5 10 15
Val Met Leu His Arg Pro Gly Lys Glu Leu Glu Asn Leu Met Pro Asp
20 25 30
Tyr Leu Glu Arg Leu Leu Phe Asp Asp Ile Pro Phe Leu Glu Lys Ala
35 40 45
Gln Ala Glu His Asp Ala Phe Ala Glu Leu Leu Arg Ser Lys Asp Ile
50 55 60
Glu Val Val Tyr Leu Glu Asp Leu Ala Ala Glu Ala Leu Ile Asn Glu
65 70 75 80
Glu Val Arg Arg Gln Phe Ile Asp Gln Phe Leu Glu Glu Ala Asn Ile
85 90 95
Arg Ser Glu Ser Ala Lys Glu Lys Val Arg Glu Leu Met Leu Glu Ile
100 105 110
Asp Asp Asn Glu Glu Leu Ile Gln Lys Ala Ile Ala Gly Ile Gln Lys
115 120 125
Gln Glu Leu Pro Lys Tyr Glu Gln Glu Phe Leu Thr Asp Met Val Glu
130 135 140
Ala Asp Tyr Pro Phe Ile Ile Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr
145 150 155 160
Arg Asp Asn Phe Ala Thr Met Gly His Gly Ile Ser Leu Asn His Met
165 170 175
Tyr Ser Val Thr Arg Gln Arg Glu Thr Ile Phe Gly Gln Tyr Ile Phe
180 185 190
Asp Tyr His Pro Arg Phe Ala Gly Lys Glu Val Pro Arg Val Tyr Asp
195 200 205
Arg Ser Glu Ser Thr Arg Ile Glu Gly Gly Asp Glu Leu Ile Leu Ser
210 215 220
Lys Glu Val Val Ala Ile Gly Ile Ser Gln Arg Thr Asp Ala Ala Ser
225 230 235 240
Ile Glu Lys Ile Ala Arg Asn Ile Phe Glu Gln Lys Leu Gly Phe Lys
245 250 255
Asn Ile Leu Ala Phe Asp Ile Gly Glu His Arg Lys Phe Met His Leu
260 265 270
Asp Thr Val Phe Thr Met Ile Asp Tyr Asp Lys Phe Thr Ile His Pro
275 280 285
Glu Ile Glu Gly Gly Leu Val Val Tyr Ser Ile Thr Glu Lys Ala Asp
290 295 300
Gly Asp Ile Gln Ile Thr Lys Glu Lys Asp Thr Leu Asp Asn Ile Leu
305 310 315 320
Cys Lys Tyr Leu His Leu Asp Asn Val Gln Leu Ile Arg Cys Gly Ala
325 330 335
Gly Asn Leu Thr Ala Ala Ala Arg Glu Gln Trp Asn Asp Gly Ser Asn
340 345 350
Thr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Glu Val Val Val Tyr Asp Arg Asn Thr
355 360 365
Ile Thr Asn Lys Ala Leu Glu Glu Ala Gly Val Lys Leu Asn Tyr Ile
370 375 380
Pro Gly Ser Glu Leu Val Arg Gly Arg Gly Gly Pro Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Tyr Arg Glu Asp Leu
405
<210> 20
<211> 403
<212> PRT
<213> 山羊支原体
<400> 20
Met Glu Lys Lys Ile Asn Val Phe Ser Glu Ile Gly Thr Leu Lys Thr
1 5 10 15
Val Leu Val His Arg Pro Gly Asp Glu Ile Glu Asn Leu Thr Pro Glu
20 25 30
Leu Leu Glu Arg Leu Leu Phe Asp Asp Val Pro Phe Lys Asp Val Ala
35 40 45
Val Lys Glu His Asp Ala Phe Thr Lys Ile Met Arg Asp Asn Gly Val
50 55 60
Glu Val Leu Tyr Ile Glu Lys Leu Ala Ala Glu Thr Leu Asp Gln His
65 70 75 80
Pro Asp Leu Arg Glu Lys Phe Ile Asp Gln Phe Ile Ser Glu Ala Asn
85 90 95
Ile Glu Asp Lys Tyr Lys Glu Lys Tyr Arg Asp Phe Ile Ser Ser Leu
100 105 110
Asp Asn Tyr Arg Met Ile Lys Lys Met Ile Ala Gly Thr Lys Lys Leu
115 120 125
Glu Leu Gly Ile Asp Glu Gly Tyr Lys Ala Tyr Pro Phe Ile Ala Asp
130 135 140
Pro Leu Pro Asn Val Leu Phe Gln Arg Asp Pro Phe Ser Ser Val Gly
145 150 155 160
Phe Gly Ile Thr Met Asn Arg Met Trp Ser Val Thr Arg Asn Arg Glu
165 170 175
Thr Ile Phe Pro Asp Leu Val Phe Lys His His Asn Arg Phe Ala Asn
180 185 190
Gln Val Pro Tyr Tyr Tyr Glu Arg Asp Trp Lys Glu Glu Thr Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Ile Leu Val Leu Asn Lys Glu Thr Leu Ile Ile Gly Val
210 215 220
Thr Gln Arg Thr Thr Leu Lys Ala Ile Glu Lys Phe Ser Glu Arg Leu
225 230 235 240
Phe Asn Asp Pro Glu Ser Ser Tyr Ser Lys Val Ile Ala Leu Asp Leu
245 250 255
Pro Lys Ser Arg Ala Phe Met His Leu Asp Thr Val Phe Thr Asn Ile
260 265 270
Asp Tyr Asp Lys Phe Ile Ala His Pro Leu Ile Phe Asp Cys Ile Asp
275 280 285
Glu Phe Lys Ile Tyr Glu Val Ser Lys Gln Gly Thr Lys Glu Val Lys
290 295 300
Lys Thr Leu Ile Glu Leu Leu Ser Asp Ala Ala Gly Arg Glu Val Gln
305 310 315 320
Ile Ile Arg Cys Gly Gly Asn Asp Val Val Gly Ala Ser Arg Glu Gln
325 330 335
Trp Asn Asp Gly Thr Asn Val Val Ala Leu Arg Pro Gly Lys Val Ile
340 345 350
Ala Tyr Glu Arg Asn Trp Ile Thr Ile Asp Leu Leu Arg Lys Ala Gly
355 360 365
Val Glu Val Leu Thr Ile Ala Ser Ser Glu Leu Ser Arg Gly Arg Gly
370 375 380
Gly Pro Arg Cys Met Thr Met Pro Leu Trp Arg Glu Asp Leu Gln Glu
385 390 395 400
Ile Lys Arg
<210> 21
<211> 410
<212> PRT
<213> 奥氏嗜热盐丝菌
<400> 21
Met Phe Lys Lys Ser Pro Leu Asn Val Thr Ser Glu Ile Gly Lys Leu
1 5 10 15
Lys Lys Val Leu Leu His Arg Pro Gly His Glu Ile Glu Asn Leu Thr
20 25 30
Pro Asp Leu Leu Glu Arg Leu Leu Phe Asp Asp Ile Pro Tyr Leu Lys
35 40 45
Val Ala Gln Glu Glu His Asp Ala Phe Ala Gln Thr Leu Arg Asp Asn
50 55 60
Gly Val Glu Val Leu Tyr Leu His Glu Leu Ala Ala Glu Ala Ile Gln
65 70 75 80
Glu Asp Glu Ile Arg Lys Lys Phe Ile Glu Gln Phe Leu Asp Glu Ala
85 90 95
Gly Val Ile Gly Lys Gly Ala Arg Gln Val Leu Lys Glu Tyr Phe Ala
100 105 110
Asp Met Asp Asn Glu Thr Leu Ile Arg Lys Met Met Ala Gly Val Arg
115 120 125
Lys Lys Glu Ile Pro Ala Ile Glu Lys Val Ala Ser Leu Asn Asp Met
130 135 140
Val Glu Glu Asp Tyr Pro Phe Val Leu Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr
145 150 155 160
Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Thr Ile Gly Thr Gly Ile Thr Leu Asn
165 170 175
His Met Arg Thr Glu Thr Arg Asn Arg Glu Val Ile Phe Ala Glu Tyr
180 185 190
Ile Phe Ser Tyr His Pro Asp Phe Lys Asp Thr Glu Ile Pro Phe Trp
195 200 205
Phe Asp Arg Asn Glu Thr Thr Ser Ile Glu Gly Gly Asp Glu Leu Ile
210 215 220
Leu Ser Asp Lys Val Leu Ala Met Gly Ile Ser Glu Arg Thr Asp Ala
225 230 235 240
Ala Ser Ile Glu Lys Val Ala Arg Asn Ile Phe Thr Asp Gly Gln Pro
245 250 255
Phe Glu Thr Ile Leu Ala Phe Lys Ile Pro Glu Lys Arg Ala Phe Met
260 265 270
His Leu Asp Thr Val Phe Thr Met Val Asp Tyr Asp Lys Phe Thr Ile
275 280 285
His Ala Glu Ile Glu Gly Pro Leu Lys Val Tyr Ser Ile Thr Lys Gly
290 295 300
Asp Asn Asp Glu Leu Lys Ile Asp Glu Glu Lys Ala Thr Leu Glu Asp
305 310 315 320
Thr Leu Lys Lys Tyr Leu Gly Leu Asp Glu Val Thr Leu Ile Arg Cys
325 330 335
Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Asp Ala Gly Arg Glu Gln Trp Asn Asp Gly
340 345 350
Ser Asn Thr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Glu Val Val Val Tyr Asn Arg
355 360 365
Asn His Thr Thr Asn Arg Leu Leu Glu Glu His Gly Ile Lys Leu His
370 375 380
Val Ile Pro Ser Ser Glu Leu Ser Arg Gly Arg Gly Gly Pro Arg Cys
385 390 395 400
Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Ile
405 410
<210> 22
<211> 411
<212> PRT
<213> 金黄色葡萄球菌
<400> 22
Met Thr Asp Gly Pro Ile Lys Val Asn Ser Glu Ile Gly Ala Leu Lys
1 5 10 15
Thr Val Leu Leu Lys Arg Pro Gly Lys Glu Leu Glu Asn Leu Val Pro
20 25 30
Asp Tyr Leu Asp Gly Leu Leu Phe Asp Asp Ile Pro Tyr Leu Glu Val
35 40 45
Ala Gln Lys Glu His Asp His Phe Ala Gln Val Leu Arg Glu Glu Gly
50 55 60
Val Glu Val Leu Tyr Leu Glu Lys Leu Ala Ala Glu Ser Ile Glu Asn
65 70 75 80
Pro Gln Val Arg Ser Glu Phe Ile Asp Asp Val Leu Ala Glu Ser Lys
85 90 95
Lys Thr Ile Leu Gly His Glu Glu Glu Ile Lys Ala Leu Phe Ala Thr
100 105 110
Leu Ser Asn Gln Glu Leu Val Asp Lys Ile Met Ser Gly Val Arg Lys
115 120 125
Glu Glu Ile Asn Pro Lys Cys Thr His Leu Val Glu Tyr Met Asp Asp
130 135 140
Lys Tyr Pro Phe Tyr Leu Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Gln Ala Ser Ile Gly His Gly Ile Thr Ile Asn Arg Met Phe
165 170 175
Trp Arg Ala Arg Arg Arg Glu Ser Ile Phe Ile Gln Tyr Ile Val Lys
180 185 190
His His Pro Arg Phe Lys Asp Ala Asn Ile Pro Ile Trp Leu Asp Arg
195 200 205
Asp Cys Pro Phe Asn Ile Glu Gly Gly Asp Glu Leu Val Leu Ser Lys
210 215 220
Asp Val Leu Ala Ile Gly Val Ser Glu Arg Thr Ser Ala Gln Ala Ile
225 230 235 240
Glu Lys Leu Ala Arg Arg Ile Phe Glu Asn Pro Gln Ala Thr Phe Lys
245 250 255
Lys Val Val Ala Ile Glu Ile Pro Thr Ser Arg Thr Phe Met His Leu
260 265 270
Asp Thr Val Phe Thr Met Ile Asp Tyr Asp Lys Phe Thr Met His Ser
275 280 285
Ala Ile Leu Lys Ala Glu Gly Asn Met Asn Ile Phe Ile Ile Glu Tyr
290 295 300
Asp Asp Val Asn Lys Asp Ile Ala Ile Lys Gln Ser Ser His Leu Lys
305 310 315 320
Asp Thr Leu Glu Asp Val Leu Gly Ile Asp Asp Ile Gln Phe Ile Pro
325 330 335
Thr Gly Asn Gly Asp Val Ile Asp Gly Ala Arg Glu Gln Trp Asn Asp
340 345 350
Gly Ser Asn Thr Leu Cys Ile Arg Pro Gly Val Val Val Thr Tyr Asp
355 360 365
Arg Asn Tyr Val Ser Asn Asp Leu Leu Arg Gln Lys Gly Ile Lys Val
370 375 380
Ile Glu Ile Ser Gly Ser Glu Leu Val Arg Gly Arg Gly Gly Pro Arg
385 390 395 400
Cys Met Ser Gln Pro Leu Phe Arg Glu Asp Ile
405 410
<210> 23
<211> 417
<212> PRT
<213> 香鱼假单胞菌
<400> 23
Met Ser Ala Glu Lys Gln Lys Tyr Gly Val His Ser Glu Ala Gly Lys
1 5 10 15
Leu Arg Lys Val Met Val Cys Ala Pro Gly Leu Ala His Lys Arg Leu
20 25 30
Thr Pro Ser Asn Cys Asp Glu Leu Leu Phe Asp Asp Val Ile Trp Val
35 40 45
Asp Gln Ala Lys Arg Asp His Phe Asp Phe Val Thr Lys Met Arg Glu
50 55 60
Arg Gly Val Asp Val Leu Glu Met His Asn Leu Leu Thr Asp Ile Val
65 70 75 80
Gln Asn Pro Glu Ala Leu Lys Trp Ile Leu Asp Arg Lys Ile Thr Pro
85 90 95
Asp Thr Val Gly Val Gly Leu Thr Asn Glu Val Arg Ser Trp Leu Glu
100 105 110
Gly Gln Glu Pro Arg His Leu Ala Glu Phe Leu Ile Gly Gly Val Ala
115 120 125
Gly Gln Asp Leu Pro Glu Ser Glu Gly Ala Ser Val Val Lys Met Tyr
130 135 140
Asn Asp Tyr Leu Gly His Ser Ser Phe Ile Leu Pro Pro Leu Pro Asn
145 150 155 160
Thr Gln Phe Thr Arg Asp Thr Thr Cys Trp Ile Tyr Gly Gly Val Thr
165 170 175
Leu Asn Pro Met Tyr Trp Pro Ala Arg Arg Gln Glu Thr Leu Leu Thr
180 185 190
Thr Ala Ile Tyr Lys Phe His Pro Glu Phe Thr Lys Ala Asp Phe Gln
195 200 205
Val Trp Tyr Gly Asp Pro Asp Gln Glu His Gly Gln Ala Thr Leu Glu
210 215 220
Gly Gly Asp Val Met Pro Ile Gly Lys Gly Ile Val Leu Ile Gly Met
225 230 235 240
Gly Glu Arg Thr Ser Arg Gln Ala Ile Gly Gln Leu Ala Gln Asn Leu
245 250 255
Phe Ala Lys Gly Ala Val Glu Gln Val Ile Val Ala Gly Leu Pro Lys
260 265 270
Ser Arg Ala Ala Met His Leu Asp Thr Val Phe Ser Phe Cys Asp Arg
275 280 285
Asp Leu Val Thr Val Phe Pro Glu Val Val Arg Glu Ile Val Pro Phe
290 295 300
Ile Ile Arg Pro Asp Glu Ser Lys Pro Tyr Gly Met Asp Val Arg Arg
305 310 315 320
Glu Asn Lys Ser Phe Ile Glu Val Val Gly Glu Gln Leu Gly Val Lys
325 330 335
Leu Arg Val Val Glu Thr Gly Gly Asn Ser Phe Ala Ala Glu Arg Glu
340 345 350
Gln Trp Asp Asp Gly Asn Asn Val Val Ala Leu Glu Pro Gly Val Val
355 360 365
Ile Gly Tyr Asp Arg Asn Thr Tyr Thr Asn Thr Leu Leu Arg Lys Ala
370 375 380
Gly Ile Glu Val Ile Thr Ile Ser Ala Gly Glu Leu Gly Arg Gly Arg
385 390 395 400
Gly Gly Gly His Cys Met Thr Cys Pro Ile Val Arg Asp Pro Ile Asn
405 410 415
Tyr
<210> 24
<211> 417
<212> PRT
<213> 恶臭假单胞菌
<400> 24
Met Ser Ala Glu Lys Gln Lys Tyr Gly Val His Ser Glu Ala Gly Lys
1 5 10 15
Leu Arg Lys Val Met Val Cys Ala Pro Gly Leu Ala His Lys Arg Leu
20 25 30
Thr Pro Ser Asn Cys Asp Glu Leu Leu Phe Asp Asp Val Ile Trp Val
35 40 45
Asp Gln Ala Lys Arg Asp His Phe Asp Phe Val Thr Lys Met Arg Glu
50 55 60
Arg Gly Val Asp Val Leu Glu Met His Asn Leu Leu Thr Asp Ile Val
65 70 75 80
Gln Asn Lys Asp Ala Leu Lys Trp Ile Leu Asp Arg Lys Ile Thr Pro
85 90 95
Asp Thr Val Gly Val Gly Leu Thr Asn Glu Val Arg Ser Trp Leu Glu
100 105 110
Gly Leu Glu Pro Arg His Leu Ala Glu Phe Leu Ile Gly Gly Val Ala
115 120 125
Gly Gln Asp Leu Pro Gln Ser Glu Gly Ala Asp Val Val Lys Met Tyr
130 135 140
Asn Asp Tyr Leu Gly His Ser Ser Phe Ile Leu Pro Pro Leu Pro Asn
145 150 155 160
Thr Gln Phe Thr Arg Asp Thr Thr Cys Trp Ile Tyr Gly Gly Val Thr
165 170 175
Leu Asn Pro Met Tyr Trp Pro Ala Arg Arg Gln Glu Thr Leu Leu Thr
180 185 190
Thr Ala Ile Tyr Lys Phe His Pro Gln Phe Thr Gly Ala Asp Phe Gln
195 200 205
Val Trp Tyr Gly Asp Pro Asp Lys Asp His Gly Asn Ala Thr Leu Glu
210 215 220
Gly Gly Asp Val Met Pro Ile Gly Lys Gly Ile Val Leu Ile Gly Met
225 230 235 240
Gly Glu Arg Thr Ser Arg Gln Ala Ile Gly Gln Leu Ala Gln Asn Leu
245 250 255
Phe Ala Lys Gly Ala Val Glu Lys Val Ile Val Ala Gly Leu Pro Lys
260 265 270
Ser Arg Ala Ala Met His Leu Asp Thr Val Phe Ser Phe Cys Asp Arg
275 280 285
Asp Leu Val Thr Ile Phe Pro Glu Val Val Lys Glu Ile Val Pro Phe
290 295 300
Ile Ile Arg Pro Asp Glu Ser Lys Pro Tyr Gly Met Asp Val Arg Arg
305 310 315 320
Glu Asn Lys Ser Phe Ile Glu Val Val Gly Glu Gln Leu Gly Val Lys
325 330 335
Leu Arg Val Val Glu Thr Gly Gly Asn Ser Phe Ala Ala Glu Arg Glu
340 345 350
Gln Trp Asp Asp Gly Asn Asn Val Val Ala Val Glu Pro Gly Val Val
355 360 365
Ile Gly Tyr Asp Arg Asn Thr Tyr Thr Asn Thr Leu Leu Arg Lys Ala
370 375 380
Gly Ile Glu Val Ile Thr Ile Ser Ala Gly Glu Leu Gly Arg Gly Arg
385 390 395 400
Gly Gly Gly His Cys Met Thr Cys Pro Ile Val Arg Asp Pro Ile Asp
405 410 415
Tyr
<210> 25
<211> 418
<212> PRT
<213> 绿脓杆菌
<400> 25
Met Ser Thr Glu Lys Thr Lys Leu Gly Val His Ser Glu Ala Gly Lys
1 5 10 15
Leu Arg Lys Val Met Val Cys Ser Pro Gly Leu Ala His Gln Arg Leu
20 25 30
Thr Pro Ser Asn Cys Asp Glu Leu Leu Phe Asp Asp Val Ile Trp Val
35 40 45
Asn Gln Ala Lys Arg Asp His Phe Asp Phe Val Thr Lys Met Arg Glu
50 55 60
Arg Gly Ile Asp Val Leu Glu Met His Asn Leu Leu Thr Glu Thr Ile
65 70 75 80
Gln Asn Pro Glu Ala Leu Lys Trp Ile Leu Asp Arg Lys Ile Thr Ala
85 90 95
Asp Ser Val Gly Leu Gly Leu Thr Ser Glu Leu Arg Ser Trp Leu Glu
100 105 110
Ser Leu Glu Pro Arg Lys Leu Ala Glu Tyr Leu Ile Gly Gly Val Ala
115 120 125
Ala Asp Asp Leu Pro Ala Ser Glu Gly Ala Asn Ile Leu Lys Met Tyr
130 135 140
Arg Glu Tyr Leu Gly His Ser Ser Phe Leu Leu Pro Pro Leu Pro Asn
145 150 155 160
Thr Gln Phe Thr Arg Asp Thr Thr Cys Trp Ile Tyr Gly Gly Val Thr
165 170 175
Leu Asn Pro Met Tyr Trp Pro Ala Arg Arg Gln Glu Thr Leu Leu Thr
180 185 190
Thr Ala Ile Tyr Lys Phe His Pro Glu Phe Ala Asn Ala Glu Phe Glu
195 200 205
Ile Trp Tyr Gly Asp Pro Asp Lys Asp His Gly Ser Ser Thr Leu Glu
210 215 220
Gly Gly Asp Val Met Pro Ile Gly Asn Gly Val Val Leu Ile Gly Met
225 230 235 240
Gly Glu Arg Ser Ser Arg Gln Ala Ile Gly Gln Val Ala Gln Ser Leu
245 250 255
Phe Ala Lys Gly Ala Ala Glu Arg Val Ile Val Ala Gly Leu Pro Lys
260 265 270
Ser Arg Ala Ala Met His Leu Asp Thr Val Phe Ser Phe Cys Asp Arg
275 280 285
Asp Leu Val Thr Val Phe Pro Glu Val Val Lys Glu Ile Val Pro Phe
290 295 300
Ser Leu Arg Pro Asp Ala Ser Ser Pro Tyr Gly Met Ser Ile Arg Arg
305 310 315 320
Glu Glu Lys Thr Phe Leu Glu Val Val Ala Glu Ser Leu Gly Leu Lys
325 330 335
Lys Leu Arg Val Val Glu Thr Gly Gly Asn Ser Phe Ala Ala Glu Arg
340 345 350
Glu Gln Trp Asp Asp Gly Asn Asn Val Val Cys Leu Glu Pro Gly Val
355 360 365
Val Val Gly Tyr Asp Arg Asn Thr Tyr Thr Asn Thr Leu Leu Arg Lys
370 375 380
Ala Gly Val Glu Val Ile Thr Ile Ser Ala Ser Glu Leu Gly Arg Gly
385 390 395 400
Arg Gly Gly Gly His Cys Met Thr Cys Pro Ile Ile Arg Asp Pro Ile
405 410 415
Asp Tyr
<210> 26
<211> 402
<212> PRT
<213> 结核分枝杆菌群
<400> 26
Met Gly Val Glu Leu Gly Ser Asn Ser Glu Val Gly Ala Leu Arg Val
1 5 10 15
Val Ile Leu His Arg Pro Gly Ala Glu Leu Arg Arg Leu Thr Pro Arg
20 25 30
Asn Thr Asp Gln Leu Leu Phe Asp Gly Leu Pro Trp Val Ser Arg Ala
35 40 45
Gln Asp Glu His Asp Glu Phe Ala Glu Leu Leu Ala Ser Arg Gly Ala
50 55 60
Glu Val Leu Leu Leu Ser Asp Leu Leu Thr Glu Ala Leu His His Ser
65 70 75 80
Gly Ala Ala Arg Met Gln Gly Ile Ala Ala Ala Val Asp Ala Pro Arg
85 90 95
Leu Gly Leu Pro Leu Ala Gln Glu Leu Ser Ala Tyr Leu Arg Ser Leu
100 105 110
Asp Pro Gly Arg Leu Ala His Val Leu Thr Ala Gly Met Thr Phe Asn
115 120 125
Glu Leu Pro Ser Asp Thr Arg Thr Asp Val Ser Leu Val Leu Arg Met
130 135 140
His His Gly Gly Asp Phe Val Ile Glu Pro Leu Pro Asn Leu Val Phe
145 150 155 160
Thr Arg Asp Ser Ser Ile Trp Ile Gly Pro Arg Val Val Ile Pro Ser
165 170 175
Leu Ala Leu Arg Ala Arg Val Arg Glu Ala Ser Leu Thr Asp Leu Ile
180 185 190
Tyr Ala His His Pro Arg Phe Thr Gly Val Arg Arg Ala Tyr Glu Ser
195 200 205
Arg Thr Ala Pro Val Glu Gly Gly Asp Val Leu Leu Leu Ala Pro Gly
210 215 220
Val Val Ala Val Gly Val Gly Glu Arg Thr Thr Pro Ala Gly Ala Glu
225 230 235 240
Ala Leu Ala Arg Ser Leu Phe Asp Asp Asp Leu Ala His Thr Val Leu
245 250 255
Ala Val Pro Ile Ala Gln Gln Arg Ala Gln Met His Leu Asp Thr Val
260 265 270
Cys Thr Met Val Asp Thr Asp Thr Met Val Met Tyr Ala Asn Val Val
275 280 285
Asp Thr Leu Glu Ala Phe Thr Ile Gln Arg Thr Pro Asp Gly Val Thr
290 295 300
Ile Gly Asp Ala Ala Pro Phe Ala Glu Ala Ala Ala Lys Ala Met Gly
305 310 315 320
Ile Asp Lys Leu Arg Val Ile His Thr Gly Met Asp Pro Val Val Ala
325 330 335
Glu Arg Glu Gln Trp Asp Asp Gly Asn Asn Thr Leu Ala Leu Ala Pro
340 345 350
Gly Val Val Val Ala Tyr Glu Arg Asn Val Gln Thr Asn Ala Arg Leu
355 360 365
Gln Asp Ala Gly Ile Glu Val Leu Thr Ile Ala Gly Ser Glu Leu Gly
370 375 380
Thr Gly Arg Gly Gly Pro Arg Cys Met Ser Cys Pro Ala Ala Arg Asp
385 390 395 400
Pro Leu
<210> 27
<211> 409
<212> PRT
<213> 关节炎支原体
<400> 27
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Lys Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Glu Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Lys Arg Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Val Asp Leu Ile Val
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Lys Glu Ala Lys Glu Lys Leu Leu Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Asp Asp Ser Val Pro Val Leu Ser Asp Glu His Arg Ala
100 105 110
Ala Val Lys Lys Phe Leu Gln Ser Gln Lys Ser Thr Arg Ser Leu Val
115 120 125
Glu Tyr Met Ile Ala Gly Ile Thr Lys His Asp Leu Lys Ile Glu Ser
130 135 140
Asp Leu Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Val Phe Ser
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Glu
195 200 205
Gly Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Gln Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Asp
290 295 300
Ala Pro Gln Pro Val Asp Asn Gly Leu Pro Leu Glu Asp Leu Leu Lys
305 310 315 320
Ser Ile Ile Gly Lys Lys Pro Thr Leu Ile Pro Ile Ala Gly Ala Gly
325 330 335
Ala Ser Gln Ile Asp Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Val Ala Pro Gly Ile Val Ile Gly Tyr Ala Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Thr Val Leu Pro Phe
370 375 380
Arg Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys
405
<210> 28
<211> 410
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 海豹脑支原体的人工全长
<400> 28
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Gln Ser Phe Val Lys Gln
50 55 60
Leu Lys Asp Asn Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Phe Asp Leu Ala Ser Lys Glu Glu Gln Glu Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Ala His Lys Thr
100 105 110
Ala Val Arg Lys Phe Leu Thr Ser Arg Lys Ser Thr Arg Glu Met Val
115 120 125
Glu Phe Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Glu Ala
130 135 140
Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Val Phe Ser
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Lys Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Met
195 200 205
Lys Met Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Glu Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Val Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ala
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Lys Glu Asn Gly Leu Pro Leu Glu Gly Leu Leu Gln
305 310 315 320
Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Val Leu Ile Pro Ile Ala Gly Asn Asn
325 330 335
Ala Ser His Ile Asp Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Lys Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ala Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Ala Ala Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 29
<211> 410
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 猫支原体的人工全长
<400> 29
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Gln Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Glu Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Gln Glu Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Lys Asn Asn Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ser
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Met Val Ser Lys Glu Lys Gln Glu Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Glu His Lys Gly
100 105 110
Leu Val Arg Lys Phe Leu Lys Ser Leu Lys Ser Ser Lys Glu Leu Ile
115 120 125
Gln Tyr Met Met Ala Gly Ile Thr Lys His Asp Leu Asn Ile Glu Ala
130 135 140
Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile Phe Ala
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Met Asn Thr Pro Leu Tyr Tyr Asn Pro Asp Met
195 200 205
Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Val Tyr Asn Asn Glu Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Asp Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Arg Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Asp
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Lys Val Asn Gly Leu Pro Leu Glu Lys Leu Leu Glu
305 310 315 320
Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Thr Ser
325 330 335
Ala Ser Asn Ile Asp Val Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Val
355 360 365
Lys Thr Asn Glu Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
Lys Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 30
<211> 410
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 海豹支原体的人工全长
<400> 30
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Gln Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Glu Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Gln Glu Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Lys Asn Asn Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ser
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Met Val Ser Lys Glu Lys Gln Glu Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Glu His Lys Gly
100 105 110
Leu Val Arg Lys Phe Leu Lys Ser Leu Lys Ser Ser Lys Glu Leu Ile
115 120 125
Gln Tyr Met Met Ala Gly Ile Thr Lys His Asp Leu Asn Ile Glu Ala
130 135 140
Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile Phe Ala
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Met Asn Thr Pro Leu Tyr Tyr Asn Pro Asp Met
195 200 205
Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Val Tyr Asn Asn Glu Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Asp Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Arg Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Asp
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Lys Val Asn Gly Leu Pro Leu Glu Lys Leu Leu Glu
305 310 315 320
Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Thr Ser
325 330 335
Ala Ser Asn Ile Asp Val Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Val
355 360 365
Lys Thr Asn Glu Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
Lys Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 31
<211> 410
<212> PRT
<213> 唾液支原体
<400> 31
Met Ser Val Phe Ser Ser Lys Phe Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Lys Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ser Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Gln Glu Phe Val Ala Thr
50 55 60
Leu Lys Lys Glu Lys Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Thr
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Val Asp Gln Lys Thr Lys Asp Lys Leu Ile Asp
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Thr Ala Glu Leu Lys Ala
100 105 110
Thr Val Lys Lys Phe Leu Lys Ser Phe Lys Glu Thr Arg Lys Leu Ile
115 120 125
Glu Val Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Lys Ala
130 135 140
Asp Arg Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile Phe Asn
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Lys Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Met
195 200 205
Lys Met Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Asp Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Ile Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ala
290 295 300
Asn Pro Gln Pro Lys Asp Asn Gly Leu Pro Leu Asp Lys Leu Leu Lys
305 310 315 320
Ser Ile Ile Gly Lys Glu Pro Val Leu Ile Pro Ile Ala Gly His His
325 330 335
Ala Thr Glu Ile Glu Val Ala Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Arg Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ala Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Glu Ala Leu Lys Asp Ala Gly Ile Thr Val Leu Pro Phe
370 375 380
Lys Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 32
<211> 411
<212> PRT
<213> 泡沫支原体
<400> 32
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Ser Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Gly Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Lys Gln Asn Val Asn Val Ile Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Glu Leu Ala Ser Lys Glu Ala Gln Ala Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Asp Phe Ile Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Asn Ala Glu Glu Ala Gln
100 105 110
Ala Val Arg Lys Phe Leu Ser Glu Arg Lys Ser Thr Arg Glu Met Val
115 120 125
Glu Tyr Met Met Ser Gly Leu Thr Lys Tyr Glu Leu Gly Leu Glu Ser
130 135 140
Ala Asp Arg Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr
145 150 155 160
Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met
165 170 175
Lys Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ala Lys Phe Val Phe
180 185 190
Ser Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Arg Tyr Tyr Asp Pro Ser
195 200 205
Met Lys Leu Pro Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Glu
210 215 220
Thr Leu Val Val Gly Cys Ser Glu Arg Thr Glu Leu Glu Thr Ile Thr
225 230 235 240
Leu Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Val Glu Phe Lys Arg
245 250 255
Ile Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp
260 265 270
Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile
275 280 285
Ala Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly
290 295 300
Glu Glu Pro Gln Pro Val Glu Asn Gly Leu Pro Leu Glu Glu Leu Leu
305 310 315 320
Ala Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Thr Leu Ile Pro Ile Ala Gly Glu
325 330 335
Gly Ala Thr His Ile Asp Val Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr
340 345 350
Asn Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Ala Leu Ile Ile Gly Tyr Ser Arg Asn
355 360 365
Glu Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Lys Ala Gly Ile Thr Val Leu Pro
370 375 380
Phe His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met
385 390 395 400
Ser Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 33
<211> 410
<212> PRT
<213> 耳支原体
<400> 33
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Lys Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Glu Ala Arg Lys Glu His Lys Gln Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Ala Asn Asp Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Val Ser Gln Glu Leu Lys Asp Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Asp Asp Ser Tyr Pro Val Leu Thr Glu Glu His Lys Lys
100 105 110
Ala Val Arg Ser Phe Leu Lys Ser Arg Ser Ser Thr Arg Glu Leu Ile
115 120 125
Glu Tyr Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Glu Ala
130 135 140
Glu Gly Asp Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile Phe Asp
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Arg Tyr Tyr Asp Pro Ser Leu
195 200 205
Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Met Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Glu Thr Val Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Val Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro His Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Tyr Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ala
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Val Val Asn Glu Leu Pro Leu Asp Lys Leu Leu Glu
305 310 315 320
Ser Ile Ile His Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Glu Gly
325 330 335
Ala Ser Gln Ile Asp Leu Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Val Leu Arg Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Ala Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Val Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
Tyr Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ser Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 34
<211> 410
<212> PRT
<213> 猪滑液支原体
<400> 34
Met Ser Val Phe Asn Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Asp Leu Glu Ser Val Leu Val His Glu Pro Gly Lys Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ser Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser Asn Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Glu Phe Val Glu Ile
50 55 60
Leu Lys Lys Glu Gly Val Asn Val Val Glu Leu Val Asp Leu Ile Ala
65 70 75 80
Glu Thr Ile Asp Leu Val Asp Ala Lys Lys Lys Glu Ala Leu Ile Asp
85 90 95
Glu Tyr Ile Glu Asp Ser Glu Pro Val Val Asp Ala Lys Val Lys Pro
100 105 110
Leu Val Lys Lys Leu Leu Leu Gly Ile Lys Asp Thr Lys Glu Leu Val
115 120 125
Lys Leu Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Glu Ile Glu Ser
130 135 140
Glu Lys Glu Leu Ile Ile Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Val Phe Arg
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Thr Ser Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ala Met
195 200 205
Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Asp Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Ile Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ser
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Lys Asp Asn Gly Leu Pro Leu Glu Lys Leu Leu Glu
305 310 315 320
Ser Ile Ile Gly Lys Lys Pro Val Leu Ile Pro Ile Ala Gly Cys Cys
325 330 335
Ala Ser Asp Ile Glu Ile Ala Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Lys Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ala Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Lys Ala Leu Glu Lys Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
Lys Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 35
<211> 409
<212> PRT
<213> 泄殖腔支原体
<400> 35
Met Ser Val Phe Asp Lys Arg Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Gln Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Glu Phe Val Lys Ile
50 55 60
Leu Glu Ser Gln Gly Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Ile Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Glu Leu Ala Ser Glu Glu Ala Lys Asp Asn Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Asp Glu Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Glu His Arg Ile
100 105 110
Leu Val Arg Asn Phe Leu Lys Gly Ile Thr Lys Thr Lys Glu Leu Val
115 120 125
Lys Met Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Glu Ala
130 135 140
Asp Arg Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile Phe Glu
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Ser Thr Pro Ile Tyr Tyr His Pro Ser Gln
195 200 205
Gly Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Gln Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Glu Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Asp
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Val Asp Asn Gly Leu Pro Leu Asn Glu Leu Leu Ala
305 310 315 320
Ser Ile Ile Gly Glu Glu Pro Val Leu Val Pro Ile Ala Gly Glu Gly
325 330 335
Ala Ser Lys Met Asp Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Lys Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
Lys Gly His Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Tyr Arg Lys Asp Val Lys
405
<210> 36
<211> 412
<212> PRT
<213> 产碱支原体
<400> 36
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Ser Val Leu Val His Glu Pro Gly His Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ser Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Met
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Gln Phe Val Ala Glu
50 55 60
Leu Lys Ala Asn Asn Val Asn Val Ile Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Gln Glu Ala Lys Asp Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Glu Asn Lys Ile
100 105 110
Ala Val Arg Asp Phe Leu Lys Ser Arg Lys Thr Thr Arg Glu Leu Ile
115 120 125
Glu Val Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Lys Asn
130 135 140
Cys Lys Cys Gln Asp Leu Val Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe
145 150 155 160
Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Ile Thr Ile His Tyr
165 170 175
Met Arg Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile
180 185 190
Phe Ala Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Ile Tyr Tyr His Pro
195 200 205
Ser Leu Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn
210 215 220
Asp Thr Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Glu Thr Ile
225 230 235 240
Thr Leu Leu Ala Lys Asn Ile Val Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys
245 250 255
Arg Ile Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu
260 265 270
Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro
275 280 285
Ile Ala Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly
290 295 300
Gly Ala Glu Pro Lys Pro Val Glu Asn Gly Ser Ser Leu Glu Ala Ile
305 310 315 320
Leu Glu Ser Ile Ile His Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Gly Gly
325 330 335
Asp Ser Ala Ser Gln Ile Glu Val Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly
340 345 350
Thr Asn Tyr Leu Ala Ile Arg Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg
355 360 365
Asn Val Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Lys Val Ile
370 375 380
Pro Phe His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys
385 390 395 400
Met Ser Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 37
<211> 401
<212> PRT
<213> 惰性支原体
<400> 37
Met Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Val Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ala Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Ser Ala Ala Ile
35 40 45
Gln Glu His Lys Ser Phe Leu Lys Ile Leu Gln Asp Arg Gly Ile Lys
50 55 60
Thr Ile Gln Leu Ser Asp Leu Val Ala Glu Thr Tyr Lys His Tyr Ala
65 70 75 80
Ser Glu Ala Glu Lys Glu Ala Phe Ile Glu Lys Tyr Leu Asp Glu Ala
85 90 95
Thr Pro Val Leu Ser Lys Asp Met Arg Ala Lys Val Lys Asn Tyr Ile
100 105 110
Leu Ser Met Gln Gly Glu Pro Val Lys Met Val Arg Thr Met Met Ala
115 120 125
Gly Val Ser Lys Gln Glu Leu Asn Val Glu Ser Glu Val Glu Leu Ile
130 135 140
Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
145 150 155 160
Ala Gly Asn Gly Ile Ser Leu Asn Asn Met Lys Tyr Val Val Arg Lys
165 170 175
Arg Glu Thr Ile Phe Ala Glu Phe Ile Phe Ser Ile His Pro Glu Tyr
180 185 190
Lys Lys Thr Pro His Trp Phe Asp Arg Leu Asp Asn Gly Ser Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Lys Asp Thr Leu Val Ile Gly Val
210 215 220
Ser Glu Arg Thr Asn Lys Glu Ala Ile Ile Thr Ile Ala Lys His Ile
225 230 235 240
Gln Asp Asn Lys Glu Ala Gln Phe Lys Lys Ile Val Ala Ile Asn Val
245 250 255
Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val
260 265 270
Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys
275 280 285
Val Trp Glu Ile Asp Leu Ser Lys Pro Ile Glu Met Val Glu Thr Asn
290 295 300
Lys Pro Leu Ala Glu Val Leu Glu Ser Ile Ile Gly Glu Lys Pro Ile
305 310 315 320
Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Asp Ala Thr Gln Leu Asp Ile Asp Ile
325 330 335
Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val
340 345 350
Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Val Lys Thr Glu Ala Ala Leu Arg Ala
355 360 365
Ala Gly Val Thr Val Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly
370 375 380
Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Val
385 390 395 400
Lys
<210> 38
<211> 348
<212> PRT
<213> 家禽支原体
<400> 38
Phe Val Lys Leu Leu Glu Asp Arg Gly Ile Gln Ala Ile Gln Leu Ser
1 5 10 15
Asp Leu Val Ala Glu Thr Tyr Val Lys Tyr Ala Thr Ala Glu Gln Lys
20 25 30
Ala Ala Phe Ile Glu Lys Tyr Leu Asp Glu Ala Thr Pro Ala Leu Ser
35 40 45
Ala Glu Asn Arg Glu Arg Ala Lys Lys Tyr Ile Leu Ser Leu Glu Met
50 55 60
Gln Pro Val Lys Met Ile Arg Thr Met Met Ala Gly Leu Ser Lys Tyr
65 70 75 80
Glu Leu Asn Val Glu Ser Asn Ile Glu Leu Ile Ile Asp Pro Met Pro
85 90 95
Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Ala Gly Asn Gly Ile
100 105 110
Ser Leu Asn Asn Met Lys Tyr Val Val Arg Lys Arg Glu Thr Ile Phe
115 120 125
Ala Glu Phe Ile Phe Ala Ile His Pro Glu Tyr Lys Glu Thr Pro His
130 135 140
Trp Phe Asp Arg Leu Asp His Gly Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe
145 150 155 160
Val Tyr Asn Lys Asp Thr Leu Val Ile Gly Val Ser Glu Arg Thr Asn
165 170 175
Lys Glu Ala Ile Ile Thr Ile Ala Lys His Ile Gln Asp Asn Lys Glu
180 185 190
Ala Glu Phe Lys Lys Ile Val Ala Ile Asn Val Pro Pro Met Pro Asn
195 200 205
Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val Asp Lys Asn Lys Phe
210 215 220
Ile Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys Ile Trp Glu Ile Asp
225 230 235 240
Leu Ala Lys Pro Ile Glu Met Val Glu Ser Asn Lys Ser Leu Thr Glu
245 250 255
Val Leu Glu Ser Ile Ile Gly Glu Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala
260 265 270
Gly Glu Gly Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp
275 280 285
Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Ser
290 295 300
Arg Asn Glu Lys Thr Glu Lys Ala Leu Lys Ala Ala Gly Ile Thr Val
305 310 315 320
Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg
325 330 335
Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Val Lys
340 345
<210> 39
<211> 405
<212> PRT
<213> 梨支原体
<400> 39
Met Asn Ser Asn Gln Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu Ile Gly Lys
1 5 10 15
Leu Lys Glu Val Leu Val His Arg Pro Gly Arg Glu Leu Asp Phe Leu
20 25 30
Asp Pro Thr Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ala Ala Thr Leu Glu Ala
35 40 45
Glu Thr Ala Arg Leu Glu His Asp Asn Phe Thr Asn Ala Leu Lys Asn
50 55 60
Gln Gly Val Thr Val Ile Glu Leu Ala Asp Leu Val Ala Gln Thr Tyr
65 70 75 80
Ser Ser Ser Thr Pro Thr Ile Lys Ala Ala Phe Ile Asn Lys Tyr Leu
85 90 95
Asp Glu Ala Thr Pro Ala Leu Thr Thr Lys Leu Arg Thr Leu Val Lys
100 105 110
Asp Phe Leu Thr Lys Gln Lys Ser Val Arg Lys Met Val Asp Tyr Met
115 120 125
Ile Gly Gly Ile Leu Ser Thr Asp Leu Asn Ile Lys Gly Lys Pro Glu
130 135 140
Leu Ile Val Glu Pro Met Pro Asn Ala Tyr Phe Thr His Asp Pro Phe
145 150 155 160
Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Leu His Tyr Met Lys His Asn Val
165 170 175
Arg Arg Arg Glu Val Leu Phe Ser Glu Phe Ile Phe Asn Asn Asn Glu
180 185 190
Arg Phe Gln Asn Thr Pro Arg Tyr Ile Val Pro Thr Lys Gly Leu Asp
195 200 205
Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Val Tyr Asn Lys Asn Thr Leu Val Val
210 215 220
Gly Val Ser Glu Arg Thr Lys Met Val Thr Ile Lys Glu Leu Ala Lys
225 230 235 240
Asn Ile Leu Lys Asn Lys Glu Cys Leu Phe Lys Lys Ile Tyr Ala Ile
245 250 255
Asn Val Pro Lys Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr
260 265 270
Met Leu Asp His Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val
275 280 285
Leu Lys Ile Trp Glu Ile Asp Ile Ser Ser Gly Lys Ser Ile Ser Ser
290 295 300
Pro Lys Glu Leu Asn Met Asp Leu Ser Lys Ala Leu Ser Ile Ile Ile
305 310 315 320
Gly Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Val Ala Gly Glu Asn Ala Ser Gln
325 330 335
Ile Asp Ile Asn Ile Glu Thr Asn Phe Asp Ala Thr Asn Tyr Leu Val
340 345 350
Thr Gln Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Lys Lys Thr Glu
355 360 365
Ala Ala Leu Ile Lys Ala Gly Ile Glu Val Ile Pro Phe Gln Gly Asn
370 375 380
Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu
385 390 395 400
Ile Arg Glu Asp Val
405
<210> 40
<211> 404
<212> PRT
<213> 灵长类支原体
<400> 40
Met Ser Lys Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Tyr Gly Asn Leu Lys
1 5 10 15
Glu Val Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Thr Pro
20 25 30
Ser Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Lys Ser
35 40 45
Ala Ile Ala Glu His Lys Ser Phe Cys Gln Ile Leu Lys Asp Asn Lys
50 55 60
Val Lys Ala Ile Gln Leu Asp Glu Leu Val Ala Ala Thr Tyr Lys Gly
65 70 75 80
Val Ser Glu Ser Val Gln Asn Ser Phe Val Glu Arg Trp Leu Asp Glu
85 90 95
Cys Glu Pro Lys Leu Glu Asn Asn Val Arg Pro Ile Val Lys Glu Tyr
100 105 110
Leu Leu Lys Ala Ala Glu Gln Ser Val Lys Lys Met Ile Arg Ile Met
115 120 125
Met Ala Gly Ile Asp Lys Arg Glu Ile Gly Val Glu Ser Glu Val Asp
130 135 140
Phe Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe
145 150 155 160
Ala Ser Val Gly Asn Gly Ile Thr Leu His His Met Lys Tyr Val Val
165 170 175
Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Glu Phe Ile Phe Asp Asn His Pro
180 185 190
Asp Tyr Lys Phe Val Pro Arg Tyr Phe Asp Arg Asp Asp Glu Gly Lys
195 200 205
Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Ser Lys Thr Leu Val Val
210 215 220
Gly Ile Ser Glu Arg Thr Asn Lys Asp Ala Ile Arg Ile Val Ala Lys
225 230 235 240
Lys Ile Gln Ala Asn Ala Asp Ala Lys Phe Glu Lys Ile Phe Ala Ile
245 250 255
Asn Val Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr
260 265 270
Met Leu Asp Ser Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val
275 280 285
Leu Lys Val Trp Glu Ile Asn Leu Asp Asp Pro Ala Leu Glu Trp Lys
290 295 300
Glu Ile Ser Gly Ser Leu Glu Glu Ile Leu Thr Tyr Ile Ile Gly Lys
305 310 315 320
Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Gly Ala Ser Gln Phe Glu
325 330 335
Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Ala Ile Ala
340 345 350
Pro Ser Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Glu Leu Thr Glu Lys Ala
355 360 365
Leu Lys Lys Ala Gly Val Lys Val Leu Ser Leu Asp Gly Asn Gln Leu
370 375 380
Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Asp Val Lys
<210> 41
<211> 401
<212> PRT
<213> Mycoplasma lipofaciens
<400> 41
Met Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Val Gly Val Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Val Ala Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Gln Asp Ala Ile
35 40 45
Ala Glu His Lys Arg Phe Ile Lys Ile Leu Glu Asp Asn Asn Ile Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Asp Glu Leu Val Ser Glu Thr Trp Glu Lys Ala Thr
65 70 75 80
Ala Glu Gln Arg Asp Ala Phe Ile Glu Lys Trp Leu Asp Glu Ala Glu
85 90 95
Pro Val Leu Asp Ala Lys Leu Arg Glu Thr Val Lys Lys Tyr Leu Leu
100 105 110
Ser Leu Asn Pro Val Lys Lys Met Val Arg Thr Met Met Ala Gly Ile
115 120 125
Asp Lys Lys Glu Leu Lys Ile Glu Leu Asp Arg Asp Leu Val Val Asp
130 135 140
Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Ala Gly
145 150 155 160
Asn Gly Ile Ser Leu Asn Asn Met Lys Tyr Val Thr Arg Lys Arg Glu
165 170 175
Thr Ile Phe Ala Glu Phe Ile Phe Asn Ile His Pro Asp Tyr Lys Thr
180 185 190
Thr Pro His Trp Phe Asp Arg Leu Asp Lys Gly Asn Ile Glu Gly Gly
195 200 205
Asp Val Phe Ile Tyr Asn Lys Asp Thr Leu Val Leu Gly Val Ser Glu
210 215 220
Arg Thr Asn Lys Asp Ala Val Met Thr Ile Ala Lys His Ile Gln Ser
225 230 235 240
Asn Glu Gln Ala Lys Phe Lys Lys Leu Val Ala Ile Asn Val Pro Pro
245 250 255
Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val Asp His
260 265 270
Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys Ile Trp
275 280 285
Glu Ile Asp Leu Thr Pro Gly Lys Glu Ile Glu Met Val Glu Ser Thr
290 295 300
Lys Ser Leu Ser Asp Met Leu Glu Ser Ile Ile Gly Lys Lys Pro Val
305 310 315 320
Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Asp Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp Ile
325 330 335
Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Arg Pro Gly Val
340 345 350
Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Cys Leu Thr Glu Gln Ala Leu Lys Asp
355 360 365
Ala Gly Val Thr Val Leu Ser Phe Asp Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly
370 375 380
Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Ile
385 390 395 400
Lys
<210> 42
<211> 405
<212> PRT
<213> 小猫支原体
<400> 42
Met Asn Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Lys Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asn Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Leu Leu Glu Pro Asn Phe Ala Ala
35 40 45
Lys Glu His Thr Ala Phe Cys Glu Ile Leu Lys Glu Asn Gly Ile Lys
50 55 60
Ala Ile Gln Leu Val Asp Leu Val Ser Asp Thr Trp Arg Ile Ala Ser
65 70 75 80
Glu Lys Ala Lys Thr Glu Phe Ile Glu Arg Trp Leu Asp Glu Cys Glu
85 90 95
Pro Lys Leu Asp Ser Asn Leu Arg Glu Ile Val Arg Lys His Ile Tyr
100 105 110
Ala Ile Glu Lys Arg Ser Val Lys Arg Met Val Lys Thr Met Met Ala
115 120 125
Gly Ile Glu Arg Arg Glu Leu Pro Val Thr Ser Lys Glu Val Ala Arg
130 135 140
Glu Leu Val Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro
145 150 155 160
Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Ile Ser Leu His His Met Lys Tyr Val
165 170 175
Thr Arg Gln Arg Glu Thr Ile Phe Ala Glu Phe Val Phe Gly Asn His
180 185 190
Pro Asp Tyr Ile Asp Thr Pro Arg Trp Phe Asp Arg Ser Asp Asp Gly
195 200 205
Arg Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Gly Ser Lys Thr Leu Val
210 215 220
Ile Gly Val Ser Glu Arg Thr Asn Lys Glu Ala Ile Lys Val Met Ala
225 230 235 240
Lys Lys Ile Gln Ala Asn Lys Glu Ala Thr Phe Glu Lys Ile Tyr Ala
245 250 255
Ile Asn Val Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu
260 265 270
Thr Met Leu Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ala
275 280 285
Val Leu Gln Val Trp Glu Ile Asp Leu Lys Asp Pro Glu Leu Thr Trp
290 295 300
His Glu Leu Ser Gly Ser Leu Glu Glu Ile Leu His Lys Ile Ile Gly
305 310 315 320
Arg Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly His Gly Ala Gln Gln Ile
325 330 335
Asp Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Ala Ile
340 345 350
Ala Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Asn Arg Asn Val Leu Thr Glu Arg
355 360 365
Ala Leu Lys Lys Ala Gly Ile Lys Val Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln
370 375 380
Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Ile
385 390 395 400
Arg Glu Asn Leu Lys
405
<210> 43
<211> 404
<212> PRT
<213> 模仿支原体
<400> 43
Met Phe Asn Lys Ile Lys Val Tyr Ser Glu Ile Gly Arg Leu Arg Lys
1 5 10 15
Val Leu Val His Thr Pro Gly Lys Glu Leu Glu Tyr Val Thr Pro Gln
20 25 30
Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ser Leu Leu Asn Pro Val Lys Ala
35 40 45
Arg Gln Glu His Glu Ala Phe Ile Lys Ile Leu Gln Asp Gln Gly Val
50 55 60
Glu Cys Val Gln Leu Thr Thr Leu Thr Ala Gln Thr Phe Gln Ser Ala
65 70 75 80
Thr Ser Glu Val Lys Glu Lys Phe Ile Asn Arg Trp Leu Asp Glu Cys
85 90 95
Leu Pro Lys Leu Ser Asp Asp Asn Arg Ile Lys Val Tyr Ala Tyr Leu
100 105 110
Lys Asp Leu Ser Ser Asp Pro Glu Val Met Ile Arg Lys Met Met Ser
115 120 125
Gly Ile Leu Ala Lys Glu Val Asn Val Gln Ser Asp Val Glu Leu Ile
130 135 140
Ala Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
145 150 155 160
Ile Gly Lys Gly Val Thr Leu His Ser Met Phe His Pro Thr Arg Lys
165 170 175
Arg Glu Thr Ile Phe Ala Asp Phe Val Phe Ser His His Pro Glu Tyr
180 185 190
Lys Gln Thr Pro Lys Tyr Tyr Ser Arg Leu Asn Glu Tyr Ser Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Leu Phe Val Tyr Asp Asp Lys Thr Leu Val Ile Gly Val
210 215 220
Ser Glu Arg Thr Glu Lys Lys Ala Ile Gln Phe Leu Ala Glu Lys Leu
225 230 235 240
Arg Glu Asn Tyr Glu Thr Thr Phe Glu Lys Ile Tyr Ala Ile Asn Val
245 250 255
Pro Lys Met Ser Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu
260 265 270
Asp Tyr Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Met Gly Val Leu Lys
275 280 285
Ile Trp Glu Ile Asp Leu Thr His Glu Gln Leu Ser Trp Arg Glu Leu
290 295 300
Asn Glu Ser Leu Glu Glu Phe Leu Ser Met Val Ile Gly Lys Lys Ala
305 310 315 320
Thr Thr Ile Pro Val Ala Gly Glu Asp Ser Thr Gln Ile Glu Ile Asp
325 330 335
Val Glu Thr Asn Phe Asp Ala Thr Asn Phe Leu Val Ile Gln Pro Gly
340 345 350
Val Val Val Gly Tyr Asp Arg Asn Tyr Lys Thr Asn Gln Ala Leu Val
355 360 365
Asn Ala Gly Ile Lys Val Leu Ser Trp Asn Gly Asp Gln Leu Ser Leu
370 375 380
Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Tyr Arg Asp Pro
385 390 395 400
Ile Lys Lys Gly
<210> 44
<211> 401
<212> PRT
<213> 乳白色支原体
<400> 44
Met Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Thr Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Val Ala Pro Ala Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Asn His Ala Ile
35 40 45
Ala Glu His Lys Ala Phe Ile Lys Ile Leu Glu Asp Asn Gly Ile Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Asp Glu Leu Val Val Gln Thr Trp Asn Gln Val Asp
65 70 75 80
Glu Ala Thr Arg Lys Ala Phe Val Thr Lys Trp Leu Asp Glu Cys Glu
85 90 95
Pro Lys Leu Glu Ser Asn Val Arg Val Glu Val Glu Lys Tyr Ile Tyr
100 105 110
Ser Leu Ala Lys Glu Pro Lys Lys Met Val Arg Thr Met Met Ala Gly
115 120 125
Ile Ser Lys Glu Glu Leu Pro Leu Asn Val Asn Arg Pro Leu Val Val
130 135 140
Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val
145 150 155 160
Gly Thr Gly Ile Ser Leu His His Met Lys Tyr Val Thr Arg Gln Arg
165 170 175
Glu Thr Ile Phe Ala Gln Phe Val Phe Asp Asn His Lys Asp Tyr Asn
180 185 190
Thr Val Pro Arg Trp Phe Asp Asn Lys Asp Gln Gly Arg Ile Glu Gly
195 200 205
Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Val Ile Gly Val Ser
210 215 220
Glu Arg Thr Asp Lys Asp Ala Ile Lys Ile Met Ala Lys Lys Ile Gln
225 230 235 240
Ala Asp Lys Asn Cys Lys Phe Glu Lys Ile Phe Ala Ile Asn Val Pro
245 250 255
Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val Asp
260 265 270
Arg Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys Val
275 280 285
Trp Glu Ile Asp Leu Lys Asp Ala Ser Leu Ala Trp Lys Glu Ile Glu
290 295 300
Gly Ser Leu Ser Gln Ile Leu Glu Lys Ile Ile Gly Glu Lys Pro Ile
305 310 315 320
Leu Ile Pro Ile Ala Gly Glu Asn Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp Ile
325 330 335
Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val
340 345 350
Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Val Lys Thr Glu Gln Ala Leu Lys Ala
355 360 365
Ala Gly Val Lys Val Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly
370 375 380
Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Ile Arg Glu Asp Leu
385 390 395 400
Lys
<210> 45
<211> 425
<212> PRT
<213> 毛氏支原体
<400> 45
Met Lys Lys Asn Ala Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Lys Leu Lys
1 5 10 15
Lys Val Leu Val His Arg Pro Gly Asp Glu Leu Lys Tyr Val Thr Pro
20 25 30
Gln Arg Met Asp Glu Leu Leu Met Ser Ala Ile Ile Glu Leu Glu Gln
35 40 45
Ala Lys Glu Glu His Asp Ala Phe Thr Lys Ile Leu Arg Asp Asn Gly
50 55 60
Val Glu Val Ile Glu Leu Ala Asp Leu Thr Ala Glu Met Tyr Asp Ser
65 70 75 80
Leu Thr Pro Ser Glu Lys Asp Ala Phe Leu Asn Gln Trp Val Lys Glu
85 90 95
Ala Ser Trp Gly Lys Lys Ser Ser Ile Asp Ala Leu Lys Ile Lys Lys
100 105 110
Asn Leu Ser Lys Lys Val Phe Asp Tyr Val Lys Ser Ile Lys Pro Thr
115 120 125
Arg Lys Met Ile Asp Lys Leu Met Ala Gly Val Leu Leu Ser Glu Ile
130 135 140
Gly Glu Lys Ser Ile Ile Leu Asn Lys Asp Lys Lys Asn Glu Met Val
145 150 155 160
Ile Asp Leu Val Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp
165 170 175
Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Ile Thr Leu His Asn Met Lys Tyr
180 185 190
Pro Thr Arg Lys Arg Glu Thr Ile Phe Ala Gln Trp Ile Phe Asn Lys
195 200 205
His Pro Glu Tyr Lys Asp Val Pro Gln Phe Ile Ser Lys Arg Asp Gly
210 215 220
Lys Glu Thr Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Thr Lys Asp Val
225 230 235 240
Leu Ala Ile Gly Val Ser Glu Arg Thr Asn Met Glu Ala Ile Leu Arg
245 250 255
Ile Ala Thr Asn Ile Lys Lys Asp Lys Asn Cys Glu Phe Lys Lys Ile
260 265 270
Val Ala Ile Asn Val Pro Pro Met Gly Asn Leu Met His Leu Asp Thr
275 280 285
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Leu Phe Leu Tyr Ser Gly Asn Ile
290 295 300
Lys Ser Ala Leu Lys Val Trp Glu Ile Asp Leu Thr Lys Pro Ile Thr
305 310 315 320
Pro Lys Ser Pro Lys Leu Ser Thr Ala Lys Leu Ala Asp Ile Leu Ala
325 330 335
Lys Ile Val Gly Lys Lys Val Arg Met Ile Pro Ile Gly Gly Lys Asp
340 345 350
Gly Asn Gln Met Asp Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
355 360 365
Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Val Val Val Gly Tyr His Arg Asn Arg
370 375 380
Lys Thr Gln Lys Ala Leu Glu Glu Ala Gly Val Lys Val Leu Ala Phe
385 390 395 400
Gln Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser
405 410 415
Met Pro Leu Val Arg Glu Glu Val Lys
420 425
<210> 46
<211> 399
<212> PRT
<213> 象支原体
<400> 46
Met Ser Gln Ile Asn Val Phe Ser Glu Ile Gly Gln Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Lys Arg
20 25 30
Tyr Asn Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Ala Asp Val Ala Ile
35 40 45
Lys Glu His Lys Ser Phe Val Lys Ile Leu Glu Glu Asn Asn Val Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Lys Asp Ile Leu Leu Glu Thr Trp Asn Ile Cys Ser
65 70 75 80
Lys Glu Ala Lys Asn Ile Phe Ile Asn Lys Trp Ile Glu Glu Ala Gln
85 90 95
Pro Val Ile His Ser Ser Ser Leu Lys Glu Lys Ile Lys Leu Phe Leu
100 105 110
Lys Ser Lys Thr Pro Leu Glu Ile Ile Asp Ile Met Met Lys Gly Ile
115 120 125
Leu Lys Gln Glu Leu Gly Ile Glu Tyr Lys His Glu Leu Ile Ile Asp
130 135 140
Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Thr Ser Met Gly
145 150 155 160
Ser Gly Ile Thr Ile Asn Asn Met Lys Tyr Gln Thr Arg Lys Arg Glu
165 170 175
Thr Ile Phe Ser Glu Phe Ile Phe Asn Asn His Pro Lys Tyr Lys Asn
180 185 190
Thr Pro Arg Trp Phe Asp Arg Phe Asp Ser Gly Asn Ile Glu Gly Gly
195 200 205
Asp Leu Phe Val Tyr Thr Lys Glu Thr Ile Val Val Gly Val Ser Glu
210 215 220
Arg Thr Lys Lys Lys Ala Ile Leu Lys Ile Ala Lys Asn Ile Gln Glu
225 230 235 240
Asn Asn Asn Ser Phe Lys Lys Ile Val Val Ile Lys Val Pro Ile Met
245 250 255
Gln Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Ile Val Met Val Asp Phe Asp
260 265 270
Lys Phe Ile Tyr Ser Pro Asn Val Thr Lys Ser Leu Lys Phe Trp Glu
275 280 285
Ile Asp Leu Thr Lys Lys Pro Lys Phe Ile Gln Leu Lys Asn Glu Thr
290 295 300
Leu Glu Asp Val Leu Tyr Arg Val Ile Gly Lys Lys Pro Ile Leu Ile
305 310 315 320
Pro Val Ala Gly Glu Asn Ala Asn Gln Ile Asp Ile Asp Val Glu Thr
325 330 335
His Phe Asp Ala Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Arg Pro Gly Val Val Val
340 345 350
Gly Tyr Ser Arg Asn Lys Lys Thr Glu Glu Ala Leu Ile Asn Ala Gly
355 360 365
Val Lys Val Tyr Ala Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly
370 375 380
Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Ile Arg Glu Asp Ile Ile
385 390 395
<210> 47
<211> 399
<212> PRT
<213> 龟支原体
<400> 47
Met Lys Asn Ile Asn Val Tyr Ser Glu Val Gly Lys Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Val Val His Thr Pro Gly Glu Glu Leu His Asn Val Ala Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Gln Glu Leu Leu Thr Ser Ala Val Leu Glu Pro Glu Val Ala Arg
35 40 45
Lys Glu His Leu Lys Phe Ile Lys Ile Leu Asn Asp Tyr Gly Val Lys
50 55 60
Val Ile Gln Ile Val Asp Leu Ile Thr Glu Thr Tyr Glu Ala Val Asp
65 70 75 80
Ser Asn Lys Lys Glu Ala Phe Ile Asn Asn Trp Leu Asp Asn Ser Val
85 90 95
Pro Lys Leu Thr Asp Lys Asn Arg Met Ile Leu Arg Asn Tyr Leu Thr
100 105 110
Gln Phe Ser Thr Lys Ala Met Ile Arg Lys Met Ile Ser Gly Ile Arg
115 120 125
Ala Lys Glu Leu Asn Leu Lys Thr Pro Ser Ala Leu Leu Val Asp Pro
130 135 140
Met Pro Asn Leu Cys Phe Ala Arg Asp Thr Phe Ala Cys Val Gly Ser
145 150 155 160
Ala Ile Ser Leu Ser Thr Met Lys His Pro Thr Arg Arg Arg Glu Ala
165 170 175
Leu Leu Thr Glu Phe Ile Phe Gln Asn His Pro Lys Tyr Lys Asp Val
180 185 190
Ile Lys Tyr Phe Asp Ser Lys Asn Ser Lys Ala Thr Ile Glu Gly Gly
195 200 205
Asp Ile Phe Val Tyr Asn Pro Lys Thr Leu Val Val Gly Asn Ser Glu
210 215 220
Arg Thr Asn Met Gln Ala Cys Leu Leu Leu Ala Lys Lys Ile Gln Ser
225 230 235 240
Asn Pro Asn Asn Lys Phe Glu Lys Ile Val Ile Val Asn Val Pro Pro
245 250 255
Leu Pro His Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val Asp Tyr
260 265 270
Asp Lys Phe Ile Tyr Ser Pro Asn Ile Leu His Thr Leu Lys Phe Trp
275 280 285
Val Ile Asp Leu Lys Lys Arg Lys Leu Glu Ala Val Glu Lys His Asn
290 295 300
Thr Leu Lys Ala Met Leu Arg Met Ile Ile Lys Lys Glu Pro Ile Leu
305 310 315 320
Ile Pro Val Gly Asp Val Gly Ala Asp Gln Leu Asp Ile Asp Leu Glu
325 330 335
Thr His Phe Asp Ala Thr Asn Tyr Leu Ala Leu Ala Pro Gly Val Val
340 345 350
Val Gly Tyr Asp Arg Asn Ile Lys Thr Gln Arg Ala Leu Glu Lys Ala
355 360 365
Gly Val Lys Val Leu Ser Phe Ser Gly Asn Gln Leu Ser Leu Ala Met
370 375 380
Gly Ser Ala Arg Cys Leu Ser Met Pro Leu Ile Arg Glu Glu Asn
385 390 395
<210> 48
<211> 410
<212> PRT
<213> 加拿大支原体
<400> 48
Met Ser Val Phe Asp Ser Lys Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Glu Ser Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Lys Glu His Lys Gln Phe Val Ser Glu
50 55 60
Leu Lys Ala Asn Asp Ile Asn Val Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Gln Glu Ala Lys Asp Lys Leu Ile Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Glu Asp Ser Glu Pro Val Leu Ser Glu Glu His Lys Ala
100 105 110
Ile Val Arg Lys Tyr Leu Lys Gly Ile Gln Pro Thr Arg Lys Leu Ile
115 120 125
Glu Met Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Glu Ala
130 135 140
Asp His Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Val Phe Ser
180 185 190
Asn His Pro Lys Leu Val Asn Thr Pro Trp Tyr Tyr Asp Pro Ser Leu
195 200 205
Lys Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Val Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Gln Thr Val Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Val Ala Asn Lys Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Lys Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Ser
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Val Glu Asn Gly Leu Pro Leu Glu Gly Leu Leu Glu
305 310 315 320
Ser Ile Ile Asn Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Glu Gly
325 330 335
Ala Ser Gln Met Glu Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Arg Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
His Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ser Arg Lys Asp Val Lys Trp
405 410
<210> 49
<211> 409
<212> PRT
<213> 鹅支原体
<400> 49
Met Ser Val Phe Asp Lys Arg Phe Lys Gly Ile His Val Tyr Ser Glu
1 5 10 15
Ile Gly Glu Leu Gln Thr Val Leu Val His Glu Pro Gly Arg Glu Ile
20 25 30
Asp Tyr Ile Thr Pro Ala Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile
35 40 45
Leu Glu Ser His Asp Ala Arg Ala Glu His Lys Lys Phe Val Ala Thr
50 55 60
Leu Lys Glu Gln Gly Ile Asn Thr Val Glu Leu Thr Asp Leu Val Ala
65 70 75 80
Glu Thr Tyr Asp Leu Ala Ser Gln Glu Ala Arg Asp Asn Leu Leu Glu
85 90 95
Glu Phe Leu Asp Asp Ser Ala Pro Val Leu Ser Glu Glu His Lys Glu
100 105 110
Ile Val Arg Thr Tyr Leu Lys Gly Ile Lys Gly Thr Arg Lys Leu Ile
115 120 125
Glu Thr Met Met Ala Gly Ile Thr Lys Tyr Asp Leu Gly Ile Glu Ala
130 135 140
Glu Gln Glu Leu Ile Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg
145 150 155 160
Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Asn Gly Val Thr Ile His Tyr Met Arg
165 170 175
Tyr Lys Val Arg Gln Arg Glu Thr Leu Phe Ser Arg Phe Ile Phe Ser
180 185 190
Asn His Pro Gln Leu Val Asn Thr Pro Trp Tyr Tyr Asn Pro Ala Glu
195 200 205
Gly Leu Ser Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Asn Asp Thr
210 215 220
Leu Val Val Gly Val Ser Glu Arg Thr Asp Leu Gln Thr Ile Thr Leu
225 230 235 240
Leu Ala Lys Asn Ile Lys Ala Asn Glu Glu Cys Glu Phe Lys Arg Ile
245 250 255
Val Ala Ile Asn Val Pro Lys Trp Thr Asn Leu Met His Leu Asp Thr
260 265 270
Trp Leu Thr Met Leu Asp Thr Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Ile Ala
275 280 285
Asn Asp Val Phe Lys Phe Trp Asp Tyr Asp Leu Val Asn Gly Gly Asp
290 295 300
Glu Pro Gln Pro Val Asp Asn Gly Leu Pro Leu Asn Glu Leu Leu Lys
305 310 315 320
Ser Ile Ile Gly Glu Glu Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Asp Gly
325 330 335
Ala Thr Gln Ile Glu Ile Glu Arg Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Ala Ile Ala Pro Gly Val Val Ile Gly Tyr Ser Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Asn Ala Ala Leu Glu Ala Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe
370 375 380
Lys Gly His Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Asn Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Tyr Arg Lys Asp Val Lys
405
<210> 50
<211> 401
<212> PRT
<213> 火鸡支原体
<400> 50
Met Ser Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Ile Gly Val Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Gln Pro Glu Gln Ala Ile
35 40 45
Lys Glu His Gln Ser Phe Val Lys Ile Leu Gln Asp Arg Gly Ile Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Ser Asp Leu Val Ala Glu Thr Tyr Val Lys Tyr Ala
65 70 75 80
Thr Ser Lys Glu Lys Glu Ser Phe Ile Glu Lys Trp Leu Asp Glu Ala
85 90 95
Thr Pro Ala Leu Asn Ser Glu Asn Arg Ala Arg Val Lys Asn Tyr Ile
100 105 110
Thr Ala Met Gln Gly Gln Pro Val Lys Met Val Arg Ala Met Met Ala
115 120 125
Gly Val Ser Lys Gln Glu Leu Asn Ile Glu Ser Asp Val Glu Leu Ile
130 135 140
Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
145 150 155 160
Ala Gly Asn Gly Ile Ser Leu Asn Asn Met Lys Tyr Val Val Arg Lys
165 170 175
Arg Glu Thr Ile Phe Ala Glu Phe Ile Phe Ser Ile His Pro Glu Tyr
180 185 190
Lys Gln Thr Pro His Trp Phe Asp Arg Leu Asp Lys Gly Asn Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Asn Lys Asp Thr Leu Val Ile Gly Val
210 215 220
Ser Glu Arg Thr Asn Lys Glu Ala Ile Leu Thr Ile Ala Glu His Ile
225 230 235 240
Lys Asn Asn Lys Glu Ala Lys Phe Lys Lys Ile Val Ala Ile Asn Val
245 250 255
Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Val
260 265 270
Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys
275 280 285
Ile Trp Glu Ile Asp Leu Ser Lys Glu Ile Lys Met Val Glu Thr Ser
290 295 300
Lys Pro Leu Ala Asp Val Leu Glu Ser Ile Ile Gly Glu Lys Pro Ile
305 310 315 320
Leu Ile Pro Ile Ala Gly Glu Asn Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp Ile
325 330 335
Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val
340 345 350
Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Val Lys Thr Glu Ala Ala Leu Lys Ala
355 360 365
Ala Gly Val Thr Val Tyr Ser Phe Asp Gly Asn Gln Leu Ser Leu Gly
370 375 380
Met Gly Ser Gly Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Val
385 390 395 400
Lys
<210> 51
<211> 404
<212> PRT
<213> 蜂房支原体
<400> 51
Met Ser Ile Lys Glu Asn Gly Ile His Val Tyr Ser Glu Ile Gly Lys
1 5 10 15
Leu Arg Asp Val Leu Val His Arg Pro Gly Arg Glu Leu Asn Phe Leu
20 25 30
Asp Pro Ser Arg Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ala Ala Thr Leu Glu Pro
35 40 45
Glu Thr Ala Arg Leu Glu His Asp Asn Phe Thr Thr Val Leu Lys Asn
50 55 60
Gln Gly Val Asn Val Ile Glu Leu Ala Asp Leu Val Ser Gln Thr Tyr
65 70 75 80
Ser Lys Val Asp Ser Lys Val Lys Lys Glu Phe Ile Asp Gln Tyr Leu
85 90 95
Asn Glu Ala Thr Pro Lys Leu Thr Ser Glu Leu Ser Lys Lys Val Tyr
100 105 110
Asp Phe Leu Thr Lys Gln Lys Ser Asn Arg Glu Met Val Asp Phe Met
115 120 125
Met Gly Gly Ile Leu Ser Ser Asp Leu Asn Ile Lys Gly Gln Pro Tyr
130 135 140
Leu Ile Val Glu Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe
145 150 155 160
Ala Ser Val Gly Asn Gly Ala Thr Ile His Trp Met Lys His Asn Val
165 170 175
Arg Arg Arg Glu Val Leu Phe Ala Asn Phe Ile Phe Lys Tyr Asn Glu
180 185 190
Arg Phe Gln Asn Thr Pro Lys Tyr Ile Thr Pro Thr Lys Gly Leu Asp
195 200 205
Ile Glu Gly Gly Asp Val Phe Val Tyr Asn Lys Lys Thr Leu Val Val
210 215 220
Gly Val Ser Glu Arg Thr Lys Met Glu Thr Ile Lys Glu Leu Ala Lys
225 230 235 240
Asn Ile Ser Lys Asn Lys Glu Cys Thr Phe Thr Lys Ile Tyr Ala Ile
245 250 255
Asn Val Pro Lys Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr
260 265 270
Met Leu Asp Tyr Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val
275 280 285
Leu Lys Val Trp Glu Ile Asn Ile Ser Asn Asn Lys Val Ser Ala Pro
290 295 300
Lys Glu Leu Asn Val Asn Leu Glu Lys Ala Leu Ser Met Ile Ile Gly
305 310 315 320
Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Val Ala Gly Ala Asn Ala Ser Gln Ile
325 330 335
Asp Ile Asn Ile Glu Thr Asn Phe Asp Ala Thr Asn Tyr Leu Val Ile
340 345 350
Glu Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Lys Lys Thr Glu Glu
355 360 365
Ala Leu Val Lys Ala Gly Ile Lys Val Leu Pro Phe His Gly Asn Gln
370 375 380
Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Tyr
385 390 395 400
Arg Glu Asp Val
<210> 52
<211> 410
<212> PRT
<213> 渗透支原体
<400> 52
Met Ser Ser Ile Asp Lys Asn Ser Leu Gly Asn Gly Ile Asn Val Tyr
1 5 10 15
Ser Glu Ile Gly Glu Leu Lys Glu Val Leu Val His Thr Pro Gly Asp
20 25 30
Glu Ile Arg Tyr Thr Ala Pro Ser Arg Leu Glu Glu Leu Leu Phe Ser
35 40 45
Ala Val Leu Lys Ala Asp Thr Ala Ile Glu Glu His Lys Gly Phe Val
50 55 60
Lys Ile Leu Gln Asn Asn Gly Ile Lys Val Ile Gln Leu Cys Asp Leu
65 70 75 80
Val Ala Glu Thr Tyr Glu Leu Cys Ser Lys Glu Val Arg Asn Ser Phe
85 90 95
Ile Glu Gln Tyr Leu Asp Glu Ala Leu Pro Val Leu Lys Lys Glu Ile
100 105 110
Arg Pro Val Val Lys Asp Tyr Leu Leu Ser Phe Pro Thr Val Gln Met
115 120 125
Val Arg Lys Met Met Ser Gly Ile Leu Ala Asn Glu Leu Asn Ile Lys
130 135 140
Gln Asp Asn Pro Leu Ile Ile Asp Gly Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr
145 150 155 160
Arg Asp Pro Phe Ala Ser Met Gly Asn Gly Val Ser Ile Asn Cys Met
165 170 175
Lys Tyr Pro Thr Arg Lys Arg Glu Val Ile Phe Ser Arg Phe Val Phe
180 185 190
Thr Asn Asn Pro Lys Tyr Lys Asn Thr Pro Arg Tyr Phe Asp Ile Val
195 200 205
Gly Asn Asn Gly Thr Ile Glu Gly Gly Asp Ile Phe Ile Tyr Asn Ser
210 215 220
Lys Thr Leu Val Ile Gly Asn Ser Glu Arg Thr Asn Phe Ala Ala Ile
225 230 235 240
Glu Ser Val Ala Lys Asn Ile Gln Ala Asn Lys Asp Cys Thr Phe Glu
245 250 255
Arg Ile Val Val Ile Asn Val Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu
260 265 270
Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu Asp Tyr Asp Lys Phe Leu Tyr Ser Pro
275 280 285
Asn Met Met Asn Val Leu Lys Ile Trp Glu Ile Asp Leu Asn Val Lys
290 295 300
Pro Val Lys Phe Val Glu Lys Lys Gly Thr Leu Glu Glu Val Leu Tyr
305 310 315 320
Ser Ile Ile Asp Lys Lys Pro Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Gly
325 330 335
Ala Asn Gln Leu Asp Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn
340 345 350
Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Gly Val Val Val Gly Tyr Glu Arg Asn Glu
355 360 365
Lys Thr Gln Lys Ala Leu Val Glu Ala Gly Ile Lys Val Leu Ser Phe
370 375 380
Asn Gly Ser Gln Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser
385 390 395 400
Met Pro Leu Ile Arg Glu Asn Leu Lys Lys
405 410
<210> 53
<211> 404
<212> PRT
<213> 发酵支原体
<400> 53
Met Lys Lys Ile Asn Val Tyr Ser Glu Tyr Gly Lys Leu Lys Glu Val
1 5 10 15
Leu Val His Thr Pro Gly Asp Glu Ile Arg Arg Ile Ala Pro Ser Arg
20 25 30
Leu Asp Glu Leu Leu Phe Ser Ala Ile Leu Glu Pro Asp Ser Ala Ile
35 40 45
Ala Glu His Lys Arg Phe Val Gln Leu Leu Lys Asp Asn Gly Ile Lys
50 55 60
Val Ile Gln Leu Asp Glu Leu Phe Ala Lys Thr Phe Asp Leu Val Ser
65 70 75 80
Glu Ser Val Lys Gln Ser Phe Ile Glu Arg Trp Leu Asp Glu Cys Glu
85 90 95
Pro Lys Leu Asp Ala Thr Leu Arg Ala Lys Val Lys Glu Tyr Ile Leu
100 105 110
Glu Leu Lys Ala Lys Ser Ser Lys Lys Met Val Arg Val Met Met Ala
115 120 125
Gly Ile Asp Lys Lys Glu Leu Gly Ile Glu Leu Asp Arg Asp Leu Val
130 135 140
Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser
145 150 155 160
Val Gly Asn Gly Ile Ser Leu His His Met Lys Tyr Val Thr Arg Gln
165 170 175
Arg Glu Thr Ile Phe Ser Glu Phe Ile Phe Asp Asn Asn Leu Asp Tyr
180 185 190
Asn Thr Val Pro Arg Trp Phe Asp Arg Lys Asp Glu Gly Arg Ile Glu
195 200 205
Gly Gly Asp Val Phe Ile Tyr Ser Ala Asp Thr Leu Val Val Gly Val
210 215 220
Ser Glu Arg Thr Asn Lys Glu Ala Ile Asn Val Met Ala Arg Lys Ile
225 230 235 240
Ala Ala Asp Lys Glu Val Lys Phe Lys Arg Ile Tyr Ala Ile Asn Val
245 250 255
Pro Pro Met Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu Thr Met Leu
260 265 270
Asp Lys Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ser Val Leu Lys
275 280 285
Val Trp Arg Ile Asp Leu Asn Asp Pro Asp Phe Val Trp His Glu Ile
290 295 300
Glu Gly Ser Leu Glu Glu Ile Leu Glu Gln Ile Ile Gly Met Lys Pro
305 310 315 320
Ile Leu Ile Pro Ile Ala Gly Lys Gly Ala Ser Gln Leu Asp Ile Asp
325 330 335
Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile Ala Pro Ser
340 345 350
Val Val Val Gly Tyr Ser Arg Asn Glu Lys Thr Glu Lys Ala Leu Lys
355 360 365
Ala Ala Lys Val Lys Val Leu Ser Phe Glu Gly Asn Gln Leu Ser Leu
370 375 380
Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Ile Arg Glu Asp
385 390 395 400
Ile Lys Lys Lys
<210> 54
<211> 404
<212> PRT
<213> 肺炎支原体
<400> 54
Met Lys Tyr Asn Ile Asn Val His Ser Glu Ile Gly Gln Leu Gln Thr
1 5 10 15
Val Leu Val His Thr Pro Gly Asn Glu Ile Arg Arg Ile Ser Pro Arg
20 25 30
Arg Leu Asp Asp Leu Leu Phe Ser Ala Val Ile Glu Pro Asp Thr Ala
35 40 45
Ile Gln Glu His Gln Thr Phe Cys Gln Leu Leu Gln Glu Gln Asn Ile
50 55 60
Glu Val Val Gln Leu Thr Asp Leu Thr Ala Thr Thr Phe Asp Lys Ala
65 70 75 80
Asn Ala Thr Ala Gln Asn Gln Phe Ile Glu Thr Trp Leu Asp Gln Ala
85 90 95
Glu Pro Lys Leu Thr Pro Glu His Arg Lys Val Ala Lys Gln Tyr Leu
100 105 110
Leu Glu Gln Lys Ala Lys Ser Thr Leu Ser Met Val Arg Ser Met Met
115 120 125
Gly Gly Ile Asp Lys Arg Lys Val Ala Ala Ala Asn Thr Ile Asn Gly
130 135 140
Asp Phe Leu Val Asp Pro Met Pro Asn Leu Tyr Phe Thr Arg Asp Pro
145 150 155 160
Phe Ala Ser Ile Gly His Gly Ile Ser Ile Asn Arg Met Lys Tyr Leu
165 170 175
Thr Arg Arg Arg Glu Thr Leu Phe Ala Ser Phe Ile Phe Ala Asn His
180 185 190
Pro Ile Ile Ala Ala Arg Lys Phe Tyr Phe Lys Pro Ile Asp Met Gly
195 200 205
Thr Ile Glu Gly Gly Asp Ile Phe Val Tyr Asp Gln Gln Thr Val Val
210 215 220
Met Gly Leu Ser Glu Arg Thr Thr Glu Ala Ala Ile Asn Val Leu Ala
225 230 235 240
Lys Lys Ile Gln Gln Asp Ser Ser Thr Ser Phe Lys Arg Ile Phe Val
245 250 255
Ile Asn Val Pro Gln Leu Pro Asn Leu Met His Leu Asp Thr Trp Leu
260 265 270
Thr Met Leu Asp Arg Asn Lys Phe Leu Tyr Ser Pro Asn Met Leu Ala
275 280 285
Val Leu Lys Ala Trp Arg Ile Asp Phe Thr Asp Pro Ala Leu Lys Trp
290 295 300
Asn Glu Ile Ala Gly Asp Leu Ser Thr Ile Leu His Thr Ile Ile Gly
305 310 315 320
Gln Lys Pro Met Leu Ile Pro Ile Ala Gly Ala Asp Ala Asn Gln Thr
325 330 335
Glu Ile Asp Ile Glu Thr His Phe Asp Gly Thr Asn Tyr Leu Thr Ile
340 345 350
Ala Pro Ser Val Val Val Gly Tyr Ala Arg Asn Lys Leu Thr His Gln
355 360 365
Thr Leu Glu Ala Ala Gly Val Lys Val Ile Ala Phe Lys Gly Asn Gln
370 375 380
Leu Ser Leu Gly Met Gly Ser Ala Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val
385 390 395 400
Arg Lys Pro Leu
<210> 55
<211> 414
<212> PRT
<213> 支原体属CAG:877
<400> 55
Met Glu Lys Ile His Val Thr Ser Glu Ile Gly Pro Leu Lys Lys Val
1 5 10 15
Leu Leu His Arg Pro Gly Asn Glu Leu Leu Asn Leu Thr Pro Asp Thr
20 25 30
Leu Ser Arg Leu Leu Phe Asp Asp Ile Pro Tyr Leu Pro Asp Ala Ile
35 40 45
Lys Glu His Asp Glu Phe Ala Asp Ala Leu Arg Ala Asn Gly Val Glu
50 55 60
Val Val Tyr Leu Glu Asn Leu Met Ala Asp Val Leu Asp Leu Ser Asp
65 70 75 80
Glu Ile Arg Asp Lys Phe Ile Lys Gln Phe Ile Tyr Glu Ala Gly Ile
85 90 95
Arg Thr Pro Lys Tyr Lys Tyr Leu Val Phe Asp Tyr Leu Asp Gln Ile
100 105 110
Thr Asn Ser Lys Lys Leu Val Leu Lys Thr Met Glu Gly Ile Gln Ile
115 120 125
Ser Asp Ile Pro Arg Arg Lys Arg Glu Ile Glu Lys Ser Leu Val Asp
130 135 140
Leu Ile Glu Thr Glu Asp Glu Phe Ile Ala Asp Pro Met Pro Asn Leu
145 150 155 160
Tyr Phe Thr Arg Asp Pro Phe Ala Ser Val Gly Glu Gly Ile Ser Leu
165 170 175
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180 185 190
Tyr Ile Phe Lys Tyr His Pro Asp Tyr Lys Asp Gln Ala Arg Leu Tyr
195 200 205
Tyr Asp Arg Tyr Asn Pro Tyr His Ile Glu Gly Gly Asp Val Leu Asn
210 215 220
Ile Asn Asp His Val Leu Ala Ile Gly Ile Ser Gln Arg Thr Thr Ala
225 230 235 240
Glu Ala Ile Asp Gln Ile Ala Lys Asn Leu Phe Lys Asp Pro Glu Cys
245 250 255
Lys Ile Asp Thr Ile Leu Ala Phe Asn Ile Pro Glu Ser Arg Ala Phe
260 265 270
Met His Leu Asp Thr Val Phe Thr Gln Val Asp Tyr Asp Lys Phe Thr
275 280 285
Tyr His Pro Gly Ile Met Gly Thr Leu Gln Val Phe Glu Ile Thr Glu
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Gly Asp Asp Pro Asn Ser Asp Glu Asp Leu Thr Val Thr Glu Ile Asn
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Ala Pro Leu Glu Glu Ile Leu Thr Lys Tyr Val Gly Arg Lys Val Thr
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Leu Ile Pro Cys Ala Gly Gly Asp Lys Val Ser Ala Glu Arg Glu Gln
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370 375 380
Leu Lys Val Ile Glu Ile His Gly Ala Glu Leu Ser Arg Gly Arg Gly
385 390 395 400
Gly Pro Arg Cys Met Ser Met Pro Leu Val Arg Glu Asp Ile
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<212> PRT
<213> 支原体属CAG:472
<400> 56
Met His Val Thr Ser Glu Ile Lys Lys Leu Lys Lys Val Leu Val His
1 5 10 15
Arg Pro Gly Lys Glu Leu Leu Asn Leu Thr Pro Asp Thr Leu Gly Arg
20 25 30
Leu Leu Phe Asp Asp Ile Pro Tyr Leu Lys Asp Ala Ile Leu Glu His
35 40 45
Asp Glu Phe Cys Gln Ile Leu Arg Asp Asn Asp Val Glu Val Val Tyr
50 55 60
Leu Glu Asp Leu Met Ala Glu Thr Leu Asp Glu Asn Pro Gln Val Lys
65 70 75 80
Pro Ser Phe Ile Arg Gln Phe Ile Tyr Glu Ala Gly Val Arg Thr Pro
85 90 95
Lys Tyr Lys Asp Leu Leu Phe Asp Tyr Leu Met Ser Tyr Thr Asn Asn
100 105 110
Lys Glu Leu Val Leu Lys Thr Met Glu Gly Ile Lys Val Ser Glu Val
115 120 125
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130 135 140
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165 170 175
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245 250 255
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260 265 270
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370 375 380
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385 390 395 400
Ser Met Pro Leu Glu Arg Glu Asp
405

Claims (48)

1.一种冻干调配物，其包含聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶(ADI-PEG)，其中所述冻干调配物为无菌的，实质上不含内毒素，且处于医药学上可接受的pH下，其中所述调配物包含浓度为约1至约50 mM的组氨酸缓冲剂、浓度为约100至约150 mM的氯化钠、和浓度为约1 wt%至约20 wt%的蔗糖，并且其中相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，该ADI-PEG保留精氨酸脱亚氨酶(ADI)活性的至少85%。
2.如权利要求1的冻干调配物，其中该组氨酸缓冲剂的浓度为约10、20、25、30、35或40mM，并且其中所述氯化钠的浓度为约120、130或140 mM。
3.如权利要求1或2的冻干调配物，其包含的蔗糖为约1 wt%至约10 wt%。
4.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该医药学上可接受的pH为在±0.1之内约5.0至约8.0。
5.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该缓冲剂为约20 mM的组氨酸。
6.如权利要求5的冻干调配物，其包含的蔗糖为约1 wt%至约10 wt%。
7.如权利要求5的冻干调配物，其包含的蔗糖为约1 wt%至约10 wt%，且包含约0.001wt%至约0.1 wt%的Tween-80。
8.如权利要求5的冻干调配物，其包含的蔗糖为约1 wt%至约10 wt%，包含约0.001 wt%至约0.1 wt%的Tween-80，且包含约0.01 wt%至约1.0 wt%的甘油。
9.如权利要求5-8中任一项的冻干调配物，其中该pH为在±0.1之内约6.0至约7.2。
10.如权利要求5的冻干调配物，其包含的蔗糖为约10 wt%或约9.5 wt%。
11.如权利要求5的冻干调配物，其包含的蔗糖为约1 wt%至约10 wt%，且包含约1 wt%至约10 wt%的海藻糖。
12.如权利要求10或11的冻干调配物，其中该pH为在±0.1之内约6.0至约7.2。
13.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该ADI-PEG的干重为约50至约150mg/g。
14.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该ADI-PEG包含与表A1中序列一致的氨基酸序列。
15.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该ADI-PEG共价连接至约1至约21个PEG分子。
16.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该ADI-PEG包含共价附接至该ADI及PEG的一个或多个水不稳定接头。
17.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中该ADI-PEG为ADI-PEG 20，其中该精氨酸脱亚氨酶共价连接至质量平均数为约5±1.0个PEG分子或约2±1.0个PEG分子。
18.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，该ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶(ADI)活性的至少85%。
19.如前述权利要求中任一项的冻干调配物，其中任选地相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，该ADI-PEG保留每ADI单体或原体的该原始PEG分子的至少85%。
20.一种重构如权利要求1-19中任一项的冻干调配物的方法，该方法包含向该冻干调配物中添加医药学上可接受的溶剂以形成经重构的液体组合物。
21.如权利要求20的方法，其中该冻干调配物在小于约五分钟的时间内重构成5-20mg/ml ADI-PEG的实质上不含聚集体的溶液。
22.如权利要求21的方法，其中该冻干调配物在小于约一或二分钟的时间内重构成5-20 mg/ml ADI-PEG的实质上不含聚集体的溶液。
23.如权利要求20-22中任一项的方法，其中任选地相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，该经重构的液体组合物中的该ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶(ADI)活性的至少85%，或其中该经重构液体组合物中的该ADI-PEG保留每ADI单体/原体的该原始PEG分子的至少85%。
24.如权利要求20-23中任一项的方法，其中在作为冻干调配物储存至少1周后，任选地在约2-8℃的温度和/或约室温下储存后，该ADI-PEG在重构时保留其ADI活性的至少85%，或其中该ADI-PEG在重构时保留每ADI单体/原体的该PEG分子的至少85%。
25.如权利要求20-24中任一项的方法，其中该ADI-PEG的ADI酶比活性为约5.0至约120IU/mg。
26.如权利要求20-25中任一项的方法，其中该ADI-PEG的重量摩尔渗透浓度(osmolality)为约50 mOsm/kg至约500 mOsm/kg。
27.如权利要求20-26中任一项的方法，其中该溶剂为水。
28.一种通过如权利要求20-27中任一项的方法制备的经重构的液体组合物。
29.一种经重构的液体组合物，其包含如权利要求1-19中任一项的冻干调配物和医药学上可接受的溶剂。
30.如权利要求28或29的经重构的液体组合物，其中该ADI-PEG的浓度为约5-20 mg/ml。
31.如权利要求28-30中任一项的经重构的液体组合物，其中相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，该经重构的液体组合物中的该ADI-PEG保留其精氨酸脱亚氨酶活性的至少85%。
32.如权利要求28-31中任一项的经重构液体组合物，其中任选地相对于非冻干液体对照组合物中的相应ADI-PEG，该ADI-PEG保留每ADI单体/原体的该原始PEG分子的至少85%。
33.如权利要求28-32中任一项的经重构的液体组合物，其中该ADI-PEG的酶比活性为约5.0至约120 IU/mg。
34.如权利要求28-33中任一项的经重构的液体组合物，其中该ADI-PEG的重量摩尔渗透浓度为约50 mOsm/kg至约500 mOsm/kg。
35.如权利要求28-34中任一项的经重构的液体组合物，其中该溶剂为水。
36.如权利要求28-35中任一项的经重构的液体组合物，其适于注射至受试者中。
37.权利要求28-36中任一项的经重构的液体组合物在制备用于治疗有需要的受试者的癌症、改善该癌症的症状或抑制该癌症的进展的药物中的用途，其中该癌症展现减少的精氨基琥珀酸合成酶-1表达和/或活性。
38.如权利要求37的用途，其中该癌症选自以下一种或多种：黑色素瘤、胰腺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、间皮瘤、淋巴瘤、肝癌、肉瘤、白血病、B细胞恶性肿瘤、乳癌、卵巢癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌、肾癌、膀胱癌、子宫癌、食道癌、脑癌、子宫颈癌、睾丸癌及胃癌。
39.如权利要求38的用途，其中所述肝癌是肝细胞癌。
40.如权利要求38的用途，其中所述白血病选自以下一种或多种：淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、急性骨髓性白血病及复发性急性骨髓性白血病。
41.如权利要求38的用途，其中所述黑色素瘤是转移性黑色素瘤。
42.如权利要求38的用途，其中所述脑癌选自以下一种或多种：神经胶质瘤、多形性神经胶质母细胞瘤、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层肿瘤、原发性CNS淋巴瘤及头颈癌。
43.如权利要求38的用途，其中所述胃癌是胃部癌。
44.如权利要求42的用途，其中所述神经胶质瘤是星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤或脉络丛乳头状瘤。
45.如权利要求42的用途，其中所述多形性神经胶质母细胞瘤是巨细胞神经胶质母细胞瘤或神经胶质肉瘤。
46.如权利要求42的用途，其中所述原始神经外胚层肿瘤是神经管胚细胞瘤。
47.一种患者护理试剂盒，其包含如权利要求1-19中任一项的冻干调配物和任选地医药学上可接受的溶剂。
48.如权利要求47的患者护理试剂盒，其中该溶剂为水。
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