CN110101846B - 一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法 - Google Patents

一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110101846B
CN110101846B CN201810099727.8A CN201810099727A CN110101846B CN 110101846 B CN110101846 B CN 110101846B CN 201810099727 A CN201810099727 A CN 201810099727A CN 110101846 B CN110101846 B CN 110101846B
Authority
CN
China
Prior art keywords
preparation
microspheres
somaglutide
heptane
hexane
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201810099727.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110101846A (zh
Inventor
孙彦华
杨清敏
赵树雍
李延志
陈曈
张明会
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qilu Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Qilu Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN201810099727.8A priority Critical patent/CN110101846B/zh
Publication of CN110101846A publication Critical patent/CN110101846A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110101846B publication Critical patent/CN110101846B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明提供了一种低突释率索玛鲁肽微球制剂及其制备方法。该制剂是由占微球重量1％～20％的活性成分索玛鲁肽和微球重量60％～99％的生物相容性聚合物基质，以及占微球重量0～20％的药学上可接受的其他辅料制备而成的长效注射剂。本发明制备得到的索玛鲁肽微球具有较高的包封率、较低的突释率并能够缓慢持续释放，缓释效果可以长达20～60天，降血糖效果至少可以维持2～4周，只需每两周至每一个月甚至更长时间注射给药一次，显著提高了多肽类药物索玛鲁肽的生物利用度、延长了其代谢半衰期，进而降低了其给药频繁程度、提高了患者用药的顺应性，并且由于该制剂表面以及浅层的药物很少，因此给药初期几乎不释放，从而避免了不利的药物突释效应。

Description

一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法
技术领域
本发明涉及到一种长效载药微球制剂，属于药物制剂领域。具体涉及到一种可持续释放、低突释率、安全性高的索玛鲁肽微球及其制备方法。
背景技术
2型糖尿病是一种慢性代谢障碍性疾病，占糖尿病的90％以上，已成为世界范围内严重的公共健康问题。其主要特点为持续的高血糖状态、尿糖阳性和糖耐量减低。目前已上市的糖尿病治疗药物种类繁多，治疗机制也各不相同，但是糖尿病治疗的目标是为了改善患者全天的血糖值，使其降低至正常范围内。传统的降糖药由于其明显的副作用等因素，限制了糖尿病患者的用药。临床常见的降糖药存在低血糖、胃肠道反应、肝功能损害、过敏反应、加重心脏负担等不良反应。
近年来，具有新作用机制的GLP-1受体激动剂已成为2型糖尿病治疗药物研发领域的热点之一。与传统药物相比，GLP-1受体激动剂具有血糖依赖性浓度降低血糖的特点，可显著降低患者发生低血糖的风险，同时还可降低患者体重，并且对于患者的心血管、胰腺以及其他组织也可能存在潜在的影响。GLP-1受体激动剂是一种胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的类似物，具有保护胰岛β细胞，促进胰岛素合成和分泌，抑制胰高血糖素分泌的作用，因而在调节血糖方面效果明显。且GLP-1促进胰岛素分泌，抑制胰高血糖素分泌的作用具有葡萄糖浓度相关性，即血糖越高，其作用就越强。此外，GLP-1还可以通过作用中枢神经增加饱腹感，减少食物摄取，并通过作用迷走神经抑制胃和十二指肠蠕动，减少胃酸分泌，延缓胃排空，进而降低食欲，致使患者体重不增加或下降。
药物治疗的遵从性是取得最佳治疗结局的基本条件，尤其是对于糖尿病这种需要长期甚至终生用药来控制症状和预防并发症的慢性疾病而言，并且糖尿病患者一般是老年人容易遗漏服药、传统糖尿病治疗药物具有不良反应等。另外，索玛鲁肽等GLP-1受体激动剂常见的不良反应为恶心，且恶心为轻度到中度，在患者开始治疗和增加剂量时发生频率高。但是恶心是一过性的，随着治疗时间的延长而减轻或消失，这可能是由于初始给药以及增加剂量时，药物对身体的刺激而产生的，当患者对药物产生耐受性时，不良反应就会消失。由于GLP-1分子易被体内DPP-4降解而失去活性，从而导致其在体内的半衰期极短，限制了其临床应用。因此，出于提高药效、降低毒副作用、增加患者用药依从性等方面的考虑，GLP-1受体激动剂的研发方向主要为抗酶解突变和长效化。
按照临床持续作用时间长短，目前已上市与处于临床阶段的主要GLP-1受体激动剂药物大致分为三代：(1)第一代为天然的GLP-1类似物分子艾塞那肽(Exenatide)，艾塞那肽注射液需每天给药两次。(2)第二代为利拉鲁肽(Liraglutide)与利司那肽(Lixisenatide)，前者为十六烷酸修饰的GLP-1分子，后者对艾塞那肽进行结构改造修饰得到的新分子，这两种药物治疗时一天只需给药一次。(3)第三代则包括一周给药一次的艾塞那肽微球(ExenatideLAR)、阿必鲁肽(Abiglutide)、杜拉鲁肽(Dulaglutide)以及目前处于临床阶段的聚乙二醇洛塞那肽(PEX-168)与索玛鲁肽(Semaglutide)，其中艾塞那肽微球是通过微囊化方法将艾塞那肽包裹至聚乳酸乙醇酸共聚物基质制备得到的；阿必鲁肽是通过基因工程技术，将人源GLP-1的第8位天然丙氨酸替换为甘氨酸，再将两条修饰后的肽链以二聚体形式与人白蛋白融合成为重组融合白蛋白；杜拉鲁肽是将修饰后的GLP-1链(Ala8替换成Gly，Gly22替换成Glu，Arg36替换成Gly)，通过二硫键融合到重组G4免疫白蛋白的Fc片段上得到的；PEX-168是在艾塞那肽的化学结构式基础上进行氨基酸改造和经聚乙二醇修饰而成的，目前处于III期临床试验阶段。
中国专利CN 101065116B、CN 1968700A、CN 101291685A等公开了艾塞那肽微球的处方组成与制备工艺，但是由于艾塞那肽自身半衰期短，已上市艾塞那肽微球注射液需要一天注射两次、艾塞那肽微球需要一周注射一次。美国专利US8895033B2、中国专利CN103906528A公开了一种只需每月给药一次的艾塞那肽微球制剂，就是将一周给药一次的艾塞那肽微球在给药前混悬于非亲水性载体(一般是油，比如中链甘油三酯
Figure BDA0001565972830000032
)进行注射，但是混悬用油性介质存在一定的刺激性，给药剂量准确性不易把握且给药后血药浓度波动比较大。目前已上市的利拉鲁肽注射液需要每天注射给药一次，中国专利CN104069485A公开了一种利拉鲁肽的缓释原位凝胶制剂，但是这种原位凝胶制剂突释率偏高，可能存在一定的安全性问题。
索玛鲁肽是诺和诺德在利拉鲁肽的为模板，经过修饰改造开发的，其结构见式1所示，即在修饰的GLP-1链(Ala8替换成Aib，Lys34替换成Arg)上化学偶联十八烷酸脂肪链来延长半衰期的，索玛鲁肽的半衰期长达165小时，具有良好的降糖与减肥效果，且能够显著降低2型糖尿病患者重大心血管事件风险。
Figure BDA0001565972830000031
目前国内外尚未见有关索玛鲁肽微球等长效制剂或微囊化技术的公开报道。中国专利CN101133082A、CN104717972A公布了索玛鲁肽的化学结构、合成与修饰方法、给药方式、给药剂量、药物制剂形式，但是索玛鲁肽口服制剂需要每天给药一次且给药剂量偏大、索玛鲁肽注射液需要一周注射一次。CN 104203266A、CN 104203221A公开了索玛鲁肽口服制剂的处方组成、制备工艺，但是无论是片剂还是胶囊剂，无论湿法/干法制粒的大小，无论片剂制备工艺如何，选用何种辅料(包括崩解剂、粘合剂、润滑剂等)，最长持续时间只有一天，且口服有效给药剂量高达40mg，与其他一周给药一次的抗糖尿病药物相比，无明显优势且疾病治疗费用必然昂贵。
因此开发更为长效、能够持续稳定释放且低突释率的索玛鲁肽微球制剂，能够进一步减少给药次数、提高患者用药依从性与生活质量，从而避免造成治疗失败。
发明内容
本发明的目的在于为了满足临床用药的需要，提供一种更为长效、低突释率的索玛鲁肽微球制剂及其制备方法，本发明不仅具有良好的降血糖治疗效果，而且减少给药频率、降低药物毒副作用、提高患者的依从性与生活质量。
注射用缓释微球制剂就是将药物活性成分包裹在生物可降解高分子材料基质中所形成的微小球状实体，这使药物能够从微球内部按照既定的速率持续释放出来，从而在较长的时间内维持一定水平的血药浓度，最终提高患者的耐受性与依从性。微球制剂应用最早最为广泛的就是瑞林类药物，比如目前已有1个月给药1次、3个月给药1次、6个月给药1次上市的醋酸亮丙瑞林微球被批准上市，从而显著拓宽了该药物的临床应用范围、提高了前列腺癌等疾病患者的生活质量。
目前国内外已上市糖尿病治疗药物的最长给药间隔为1周，尚未有更长给药间隔的抗糖尿病药物上市，国内外也未见有关索玛鲁肽微球制剂的报道。本发明所述的索玛鲁肽微球是采用复凝聚法制备得到低突释率、安全性高的长效抗糖尿病药物，只需每两周至每一个月服药一次，能够显著减少糖尿病患者的给药频率，提高糖尿病患者的依从性与生活质量。
本发明的索玛鲁肽微球制剂，由微球重量1％～20％活性成分的索玛鲁肽和微球重量60％～99％的生物相容性聚合物基质，以及占微球重量0～20％的药学上可接受的其他辅料制备而成的长效注射剂。
文献报道多肽类药物微球制剂一般是采用W/O/W型溶剂挥发法制备得到的，先将药物溶解于水形成内水相、聚合物溶解于有机溶剂形成油相，之后将内水相与油相剧烈混合形成乳剂，最后将乳剂在水溶液中分散并硬化成球。但是由于亲水性多肽药物存在向外进入水溶液的倾向，因此活性药物会较多地存在于微球的表面，从而造成较高的突释率。中国专利CN101065116B公开了采用W/O/O型相分离法艾塞那肽微球，但是该法未去除微球表面析出的药物，所制备得到的艾塞那肽微球的体外突释率仍高达0.5％。
本发明的索玛鲁肽微球制剂，是采用改进的W/O/O型和S/O/O型复凝聚法制备得到的，索玛鲁肽药物在油相溶媒、凝聚剂、硬化液、洗涤液中几乎不溶，并且在进行硬化/淬灭的同时和/或之后，又洗去载药微球表面的少量药物，因此所获得微球制剂的包封率较高、突释率能够进一步降低至约0.1％～0.2％，甚至0.1％以下，能够克服GLP-1受体激动剂类似物初期用药所产生的不良反应。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种索玛鲁肽微球制剂的制备方法，该方法具体包括以下步骤：
(1)油相的制备：将生物相容性聚合物基质溶于一定量的有机溶剂，得到质量浓度约为2wt％～15wt％的油相，其中有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或其任意组合物；
(2)乳剂或药物-聚合物混悬液的制备：将索玛鲁肽与药物保护剂，加入到一定量的注射用水中进行溶解形成水相，将水相加入步骤(1)中的油相中，或者将索玛鲁肽原料药进行微粉化处理后混悬于步骤(1)中的油相中，分别经高速剪切、高压均质机或超声波法分散，得到乳剂或药物-聚合物混悬液；
(3)成球：将凝聚剂加入到步骤(2)得到的乳剂或药物-聚合物混悬液中，同时进行搅拌，即得含有柔软状态微球的凝聚相；
(4)微球的硬化、洗涤：将步骤(3)得到的凝聚相，转移到淬灭体系中进行硬化；
(5)采用真空、气流或二者相结合的方式，对微球进行控温干燥。
优选的，制备得到的索玛鲁肽微球制剂中，相对于微球总重量，其中索玛鲁肽含量为1％～20％，生物相容性聚合物基质含量为60％～99％，药物保护剂含量为0～20％，优选为2～15％。
优选的，所述生物相容性聚合物基质选自乙交酯丙交酯共聚物，并且所述的乙交酯丙交酯共聚物组成单元中丙交酯含量为45％～85％、乙交酯含量为15％～55％，特性粘度为0.30～0.55dL/g。
优选的，所述凝聚剂为100CST～1000CST粘度的一种或者两种二甲硅油。
优选的，所述药物保护剂为糖，优选的，所述糖为蔗糖、果糖或葡萄糖。
优选的，所述步骤(4)中淬灭体系为正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系，或者为正庚烷或正己烷与注射用水、表面活性剂的乳液，硬化之后收集硬化后的微球，当采用正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系时继续采用正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的非均相体系洗涤冲洗微球。
优选的，所述正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系中正庚烷或正己烷与无水乙醇的重量比为80:20；所述正庚烷或正己烷与注射用水、表面活性剂的乳液中正庚烷或正己烷与注射用水与表面活性剂的重量比80:19.5:0.5；所述正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的非均相体系中正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的重量比为80:15:5。
优选的，所述表面活性剂可以为司盘-80。
本发明中的“正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系”其含义是指正庚烷或正己烷中任选一个组分与无水乙醇所组成的混合体系。
本发明中的“正庚烷或正己烷与注射用水、表面活性剂的乳液”其含义是指正庚烷或正己烷中任选一个组分与注射用水以及表面活性剂所组成的乳液。
本发明中的“正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的非均相体系”其含义是指正庚烷或正己烷中任选一个组分与无水乙醇以及注射用水所组成的非均相体系。
上述方法制备得到的索玛鲁肽微球制剂的体外1小时突释率不超过0.5％，优选的，不超过0.2％，所述的索玛鲁肽微球缓释周期约为30～40天。
本发明所述索玛鲁肽微球制剂的缓释周期约为30～40天，而索玛鲁肽自身经注射后可维持一周的有效血药浓度，因此该索玛鲁肽微球至少可以在两周至一个月的时间内维持降血糖效果。因此，该索玛鲁肽微球只需两周至一个月注射给药一次，这是目前国内外所有已上市糖尿病药物所达不到的。
本发明所述的索玛鲁肽微球制剂，具有以下有益效果：(1)具有更长的起效时间；(2)较低的突释率，较高的安全性；(3)易于放大生产，制备工艺稳定性与重现性好。
附图说明
图1是本发明实施例1制备的索玛鲁肽微球的扫描电镜图像(放大2000倍)。
图2是本发明实施例1制备的索玛鲁肽微球的扫描电镜图像(放大100倍)。
图3是本发明实施例6制备的索玛鲁肽微球的扫描电镜图像(放大1300倍)。
图4是本发明实施例6制备的索玛鲁肽微球的扫描电镜图像(放大200倍)。
图5是本发明实施例1制备的索玛鲁肽微球的粒度分布图。
图6是本发明实施例1与实施例2制备的索玛鲁肽微球的体外37℃累积释放曲线。
图7是本发明实施例1制备的索玛鲁肽微球的大鼠药动学曲线。
具体实施方式
下面结合附图说明和以下实施例来进一步描述本发明的有益效果，实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明范围之内。
实施例1 10g规模6％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将9.1g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000081
Select 5050DLG 4A)溶于175.75g二氯甲烷制得油相；将0.6g索玛鲁肽与0.3g蔗糖，加入到7.0g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将316g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3505g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，正庚烷/乙醇/注射用水(重量比80:15:5)继续洗涤，最后收集、真空干燥进行干燥。
实施例2 10g规模8％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将8.8g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000082
Select 5050DLG 4A)溶于167.2g二氯甲烷制得油相；将0.8g索玛鲁肽与0.4g蔗糖，加入到10.4g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将290g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3344g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，再收集硬化后的微球，正庚烷/乙醇/注射用水(重量比80:15:5)继续洗涤，最后收集、真空干燥进行干燥。
实施例3 10g规模12％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将8.8g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000091
Select 5050DLG 4A)溶于167.2g二氯甲烷制得油相；将1.2g索玛鲁肽与0.4g蔗糖，加入到15.0g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将250g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)匀速加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；再将凝聚相转移到3344g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，正庚烷/乙醇/注射用水(重量比80:15:5)继续洗涤，最后收集、真空干燥进行干燥。
实施例4 1kg规模6％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将0.91kg乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000092
Select 5050DLG 4A)溶于17.57kg二氯甲烷制得油相；将60g索玛鲁肽与30g蔗糖，加入到700g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到油相中，经IKA在线高速剪切机分散得到乳剂；将30kg凝聚剂二甲硅油(DowCorning 360Medical Fluid,350CST)匀速加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；再将凝聚相转移到351kg淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，之后采用Sweco PH12型无菌干燥筛收集硬化后的微球，正庚烷/乙醇/注射用水(重量比80:15:5)继续冲洗，最后收集、通氮气同时抽真空控温进行干燥。
实施例5 10g规模6％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将9.1g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000101
Select 5050DLG 4A)溶于175.75g二氯甲烷制得油相；将0.6g索玛鲁肽与0.3g蔗糖，加入到4.25g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将140g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,1000CST)5min内加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，保持2min，之后将140g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)5min内加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，继续保持2min得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3505g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，正庚烷/乙醇/注射用水(重量比80:15:5)继续冲洗，最后收集、真空干燥进行干燥。
实施例6 10g规模6％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将9.1g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000102
Select 5050DLG 4A)溶于175.75g二氯甲烷制得油相；将0.6g索玛鲁肽与0.3g蔗糖，加入到7.0g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将302g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3505g淬灭溶剂(正庚烷/司盘-80/注射用水混合液，重量比80:0.5:19.5)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，最后收集、真空干燥进行干燥。
实施例7 10g规模2％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将9.8g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000103
Select 5050DLG 4A)溶于175.75g二氯甲烷制得油相；将0.2g索玛鲁肽进行研磨粉碎、过筛处理，之后加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散或湿法研磨得到药物-聚合物混悬液；将302g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)5min内加入到上述药物-聚合物混悬液中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3505g淬灭溶剂(正庚烷/司盘-80/注射用水混合液，重量比80:0.5:19.5)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，最后收集、真空干燥进行干燥。
对照例1 10g规模6％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将9.1g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000111
Select 5050DLG 4A)溶于175.75g二氯甲烷制得油相；将0.6g索玛鲁肽与0.3g蔗糖，加入到7.0g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将316g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3505g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，正庚烷/无水乙醇混合液(重量比80:20)继续洗涤，最后收集、真空干燥进行干燥。
对照例2 10g规模8％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将8.8g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000112
Select 5050DLG 4A)溶于167.2g二氯甲烷制得油相；将0.8g索玛鲁肽与0.4g蔗糖，加入到10.4g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将290g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；之后将凝聚相转移到3344g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，再收集硬化后的微球，正庚烷/无水乙醇混合液(重量比80:20)继续洗涤，最后收集、真空干燥进行干燥。
对照例3 10g规模12％载药量索玛鲁肽微球的制备
首先将8.8g乙交酯丙交酯共聚物(Evonik,
Figure BDA0001565972830000121
Select 5050DLG 4A)溶于167.2g二氯甲烷制得油相；将1.2g索玛鲁肽与0.4g蔗糖，加入到15.0g注射用水中溶解形成水相；将水相加入到冰浴油相中，经超声波细胞破碎仪超声分散得到乳剂；将250g凝聚剂二甲硅油(Dow Corning 360Medical Fluid,350CST)匀速加入到上述乳剂中，同时进行搅拌，得到含有柔软状态微球的凝聚相；再将凝聚相转移到3344g淬灭溶剂(正庚烷/无水乙醇混合液，重量比80:20)中进行硬化，之后收集硬化后的微球，正庚烷/无水乙醇混合液(重量比80:20)继续洗涤，最后收集、真空干燥进行干燥。
扫描电子显微镜
将制备得到的微球置于胶带上，喷金后，采用SUPRATM55热场发射扫描电子显微镜观察其形态。按照实施例1制备的索玛鲁肽微球的扫描电镜图像见附图1(放大2000倍)、附图2(放大100倍)，按照实施例6制备的索玛鲁肽微球的扫描电镜图像见附图3(放大1300倍)、附图4(放大200倍)。
粒度测定
照粒度及粒度分布测定法(中国药典2015年版四部通则0982第三法)测定。采用马尔文激光粒度测定仪，按照湿法光散射法分析，以水为分散介质，折射率为1.33，泵速为1000转/分钟，遮光度为5％～12％，背景测量时间12秒，样品测量时间10秒。取索玛鲁肽微球适量，分别加入混悬用溶剂(含有助悬剂、表面活性剂、等渗调节剂、pH调节剂以及注射用水的无菌溶剂)使分散制成混悬液，合并混悬液，向仪器中加样，直至遮光度达到5％～12％，测定并记录d(0.9)、d(0.5)、d(0.1)结果，计算平均值。按照实施例1制备的索玛鲁肽微球的粒度分布结果见附图5。
含量的测定
取索玛鲁肽微球约50mg，精密称定，置10ml的容量瓶中，加入乙腈至10ml，密闭并混合溶解，平行制备三份；溶解完全后用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；照高效液相色谱法(中国药典2015年版第四部通则0512)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(如TSK-gel G2000SWxl凝胶柱，7.8×300mm，5μm)，以0.1mol/L硫酸钠溶液-乙腈-三氟醋酸(70:30:0.1)，检测波长为280nm，柱温为30℃，流速为2ml/min。理论板数按索玛鲁肽计算应不低于1000。另精密称取索玛鲁肽对照品适量，采用乙腈溶解稀释制成每1mL中含100μg溶液，同法测定。
突释率与体外37℃释放的测定
取索玛鲁肽微球约50mg，精密称定，置250ml的密闭试剂瓶中，加入释放介质(含5％叠氮化钠水溶液、0.1％聚山梨酯80的10mM磷酸盐缓冲液)200ml，旋盖密闭并混匀，平行制备三份；溶液温度保持在37℃±0.5℃，于放置后的第1小时、第1天、第3天、第7天直至第54天依次取样，精密量取每份溶液2ml，同时补入等体积等温释放介质，取出的溶液用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；照高效液相色谱法(中国药典2015年版第四部通则0512)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(如TSK-gel G2000SWxl凝胶柱，7.8×300mm，5μm)，以0.1mol/L硫酸钠溶液-乙腈-三氟醋酸(70:30:0.1)，检测波长为280nm，柱温为30℃，流速为2ml/min。理论板数按索玛鲁肽计算应不低于1000。另精密称取索玛鲁肽对照品适量，采用乙腈溶解稀释制成每1mL中含100μg溶液，同法测定。供试品峰面积以色谱图中除溶剂峰外的所有峰的总和计，按外标法以峰面积分别计算本品在不同时间的释放量。按照实施例1与实施例2制备的索玛鲁肽微球的体外37℃累积释放曲线见附图6。按照实施例1～7与对照例1～3所制备索玛鲁肽微球的体外1小时突释率检测结果如下表表1所示，结果发现通过在洗涤液正庚烷/无水乙醇混合体系中加入少量的水，能够显著降低索玛鲁肽微球的突释率。
表1
Figure BDA0001565972830000141
大鼠药动学研究
将按实施例1制备得到的索玛鲁肽微球混悬于悬浮用无菌溶剂，微球浓度约为40mg/mL，药物浓度约为2mg/mL。将雄性SD大鼠按体重随机分组，按3mg/kg皮下多点索玛鲁肽微球，给药体积为1.5mL/kg，分别于给药后相应时间点采血0.5ml至加有肝素钠的EP管中，4000×离心5min，取上层血浆于-20℃保存，待试验结束采用ELISA试剂盒双抗夹心法检测血浆中索玛鲁肽含量。按照实施例1制备的索玛鲁肽微球的大鼠药动学曲线见附图7。

Claims (9)

1.一种索玛鲁肽微球制剂的制备方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤：
(1)油相的制备：将生物相容性聚合物基质溶于一定量的有机溶剂，得到质量浓度为2wt％～15wt％的油相，其中有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或其任意组合物；
(2)乳剂或药物-聚合物混悬液的制备：将索玛鲁肽与药物保护剂，加入到一定量的注射用水中进行溶解形成水相，将水相加入步骤(1)中的油相中，或者将索玛鲁肽原料药进行微粉化处理后混悬于步骤(1)中的油相中，分别经高速剪切、高压均质机或超声波法分散，得到乳剂或药物-聚合物混悬液；
(3)成球：将凝聚剂加入到步骤(2)得到的乳剂或药物-聚合物混悬液中，同时进行搅拌，即得含有柔软状态微球的凝聚相；
(4)微球的硬化、洗涤：将步骤(3)得到的凝聚相，转移到淬灭体系中进行硬化；
(5)采用真空、气流或二者相结合的方式，对微球进行控温干燥；
制备得到的索玛鲁肽微球制剂中，相对于微球总重量，其中索玛鲁肽含量为1％～20％，生物相容性聚合物基质含量为60％～99％，药物保护剂含量为0～20％；
所述生物相容性聚合物基质选自乙交酯丙交酯共聚物，并且所述的乙交酯丙交酯共聚物组成单元中丙交酯含量为45％～85％、乙交酯含量为15％～55％，特性粘度为0.30～0.55dL/g；
所述凝聚剂为100CST～1000CST粘度的一种或者两种二甲硅油；
所述步骤(4)中淬灭体系为正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系，或者为正庚烷或正己烷与注射用水、表面活性剂的乳液，硬化之后收集硬化后的微球，当采用正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系时继续采用正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的非均相体系洗涤冲洗微球。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述药物保护剂为糖。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述糖为蔗糖、果糖或葡萄糖。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述正庚烷或正己烷与无水乙醇的混合体系中正庚烷或正己烷与无水乙醇的重量比为80:20；所述正庚烷或正己烷与注射用水、表面活性剂的乳液中正庚烷或正己烷与注射用水与表面活性剂的重量比80:19.5:0.5；所述正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的非均相体系中正庚烷或正己烷与无水乙醇、注射用水的重量比为80:15:5。
5.如权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于：所述表面活性剂为司盘-80。
6.如权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于：所述药物保护剂含量为2～15％。
7.如权利要求1-6任一项制备方法制备获得的索玛鲁肽微球制剂。
8.如权利要求7所述的索玛鲁肽微球制剂，其特征在于：所述索玛鲁肽微球制剂的体外1小时突释率不超过0.5％，所述的索玛鲁肽微球缓释周期为30～40天。
9.如权利要求8所述的索玛鲁肽微球制剂，其特征在于：所述索玛鲁肽微球制剂的体外1小时突释率不超过0.2％。
CN201810099727.8A 2018-02-01 2018-02-01 一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法 Active CN110101846B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810099727.8A CN110101846B (zh) 2018-02-01 2018-02-01 一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810099727.8A CN110101846B (zh) 2018-02-01 2018-02-01 一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110101846A CN110101846A (zh) 2019-08-09
CN110101846B true CN110101846B (zh) 2022-09-23

Family

ID=67483008

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810099727.8A Active CN110101846B (zh) 2018-02-01 2018-02-01 一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110101846B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113018277B (zh) * 2019-12-25 2023-10-31 丽珠医药集团股份有限公司 注射用缓释制剂及其制备方法
EP4104820A4 (en) * 2020-02-14 2024-04-17 G2GBIO, Inc. PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING SUSTAINED-RELEASE MICROSPHERES COMPRISING A GLP -1 ANALOG OR A PHARMACEUTICALLY ACCEPTABLE SALT THEREOF
US11865213B2 (en) 2021-07-05 2024-01-09 Mapi Pharma Ltd. Semaglutide depot systems and use thereof
WO2024061216A1 (zh) * 2022-09-19 2024-03-28 广州玻思韬控释药业有限公司 微球

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101065116A (zh) * 2004-04-15 2007-10-31 安米林药品公司 包含多肽和糖的基于丙交酯/乙交酯共聚物的缓释微胶囊
CN105878190A (zh) * 2016-04-26 2016-08-24 广州帝奇医药技术有限公司 缓释微粒的制备方法、制得的缓释微粒及其应用
CN106667958A (zh) * 2015-11-04 2017-05-17 四川科伦药物研究院有限公司 一种多肽缓释微球制剂及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101065116A (zh) * 2004-04-15 2007-10-31 安米林药品公司 包含多肽和糖的基于丙交酯/乙交酯共聚物的缓释微胶囊
CN106667958A (zh) * 2015-11-04 2017-05-17 四川科伦药物研究院有限公司 一种多肽缓释微球制剂及其制备方法
CN105878190A (zh) * 2016-04-26 2016-08-24 广州帝奇医药技术有限公司 缓释微粒的制备方法、制得的缓释微粒及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110101846A (zh) 2019-08-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110101846B (zh) 一种低突释率的索玛鲁肽微球及其制备方法
JP4113778B2 (ja) 真性糖尿病の治療方法
US20090092650A1 (en) Sustained Delivery Formulations of Octreotide Compounds
CN103622902B (zh) 一种温敏凝胶药物制剂及其制备方法
CA2511530C (en) Night-time oral insulin therapy
WO2015123997A1 (zh) 含有降血糖活性成分的长效控释脂质体凝胶组合物及其制备方法
KR20210103985A (ko) Glp-1 유사체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 서방형 미립구를 포함하는 약학적 조성물
Vlugt-Wensink et al. Preclinical and clinical in vitro in vivo correlation of an hGH dextran microsphere formulation
CN109640955A (zh) 含有聚乙二醇洛塞那肽的药物制剂及其制备方法
CN108434118A (zh) 胰高血糖素样肽-1类似物缓释微球及其制备方法
Ruan et al. Long-acting release microspheres containing novel GLP-1 analog as an antidiabetic system
CN106667958B (zh) 一种多肽缓释微球制剂及其制备方法
EP3922269A1 (en) Extended release conjugates of exenatide analogs
Niloy et al. Injectable systems for long-lasting insulin therapy
WO2005041873A2 (en) Formulation of exendin-4
AU1226901A (en) Biodegradable microparticles with novel erythropoietin stimulating protein
WO2009062136A2 (en) Controlled delivery of insulin from thermo-sensitive polymer solution
WO2005040195A2 (en) Formulation of exendins
CA2270320A1 (en) Novel microsphere composition
WO2023039531A1 (en) Injectable high concentration pharmaceutical formulations and methods of manufacturing and use thereof
ZA200505426B (en) Night-time oral insulin therapy
TW202406568A (zh) 新穎組合物
CA2387229A1 (en) Biodegradable microparticles with novel erythropoietin stimulating protein
JP2005529083A (ja) 神経変性疾患の治療および予防のためのｉｇｆ−１製剤
Rosinha Is There an Impact of Encapsulation on Parenteral Delivery of Insulin?

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant