CN110068635A - 一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法 - Google Patents

一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：筛查步骤：分别取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；供试品如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则进行确证；确证步骤：分别取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱‑质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；供试品如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。该检测方法灵敏度高、选择性好、确证性强、操作简便快捷，可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀的定性筛查和准确确认。

Description

一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法
技术领域
本发明涉及分析化学技术领域，尤其涉及一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法。
背景技术
目前，市场上出现不少减肥瘦身类中成药、减肥类保健食品及瘦身产品，它们中有不少会非法添加盐酸氟西汀。但是，盐酸氟西汀是一种口服抗抑郁药，用于治疗抑郁症和其伴随的焦虑，治疗强迫症及暴食症，盐酸氟西汀具有一定的减肥功效。但盐酸氟西汀为精神类药物，对服用者的精神将产生极大伤害。检测该物质的快速检测方法为薄层色谱法，但此方法中需要用到环己烷、乙酸乙酯，它们均属于毒性试剂，会对检测人员有一定的伤害性，且该方法检测灵敏度比较低，会出现“假阳性”、“假阴性”情况，无法保证检测结果的准确性。故设计一种快速灵敏且最终能确证阳性样品的检测方法，以解决出现“假阳性”、“假阴性”情况是非常迫切的。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，灵敏度高、选择性好、确证性强、操作简便快捷，可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀的定性筛查和准确确认。
本发明的目的采用如下技术方案实现：
一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：
(1)筛查步骤：高效液相色谱法；
测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；
判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用法确证；否则，检测完成；
(2)确证步骤：高效液相色谱-质谱联用法；
测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入高效液相色谱-质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；
判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。
进一步地，在所述筛查步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论塔板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。
进一步地，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶Lichrospher C18柱，尺寸为4.6×250mm，粒径为5μm。
进一步地，在所述筛查步骤中，洗脱程序为等度洗脱；
进一步地，在所述筛查步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；
所述供试品溶液制备步骤如下：若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，超声处理后，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量，置容量瓶中，加甲醇，振摇，加甲醇稀释至刻度，摇匀后用微孔滤膜滤过；滤液作为供试品溶液；同法制备阴性样品溶液；
所述盐酸氟西汀对照品溶液制备步骤如下：取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg盐酸氟西汀的储备液。
进一步地，在所述确证步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，检测波长为226nm；流速为0.3ml/ml；进样体积为3μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。
进一步地，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱(Agilent ZORBAX SB C18柱)，尺寸为100mm×2.1mm，粒径为1.8μm。
进一步地，在所述确证步骤中，洗脱程序为等度洗脱；
进一步地，在所述确证步骤中，进行测定时的质谱条件如下：配有电喷雾离子化源，ESI+扫描，干燥气温度为350℃，毛细管电压为3.5KV，锥孔电压为120V，干燥气温度为350℃，干燥气流量为10L/min，扫描方式为一级质谱全扫描、二级质谱扫描，扫描范围为100-1000。
进一步地，在所述确证步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；
所述供试品溶液制备步骤如下：取所述筛查步骤中检查呈阳性的供试品溶液作为此步骤中的供试品溶液，用甲醇稀释至与盐酸氟西汀对照品浓度相近的溶液；同法制备阴性样品溶液；
所述盐酸氟西汀对照品溶液制备步骤如下：取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg的盐酸氟西汀储备液。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
(1)本发明所提供的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，可以作为药品检测方法，具体可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀化学品的定性检查方法(高效液相色谱法)和确证(液质联用法)方法。工作原理为：将供试品用甲醇提取和稀释，C18色谱柱分离，根据高效液相色谱DAD检测器定性检测，一级质谱及二级质谱图确证。
(2)本发明所提供的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，使用基层基本普及的高效液相色谱仪定性筛查和定量，液质联用仪准确确认，既能适用于基层大批量筛选，又能避免假阳性结果。经验证，本方法灵敏度高、选择性好、确证性强、操作简便快捷，可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀的定性筛查和准确确认，为药品监督管理部门、公安系统对减肥类中成药及保健品的打假工作提供可靠的技术支持，保证人民饮食用药安全。
附图说明
图1为本发明检测非法添加盐酸氟西汀的方法流程图；
图2为筛查步骤中盐酸氟西汀对照品溶液的色谱图；
图3为筛查步骤中盐酸氟西汀对照品溶液的紫外光谱图；
图4为筛查步骤中排毒润颜胶囊的色谱图；
图5为筛查步骤中黄金坐立瘦胶囊的色谱图；
图6为筛查步骤中黄金坐立瘦胶囊色谱峰的紫外光谱图；
图7为筛查步骤中窈窕教主胶囊的色谱图；
图8为筛查步骤中窈窕教主胶囊色谱峰的紫外光谱图；
图9为确证步骤中阴性样品溶液(排毒润颜胶囊)的EIC图；
图10A为确证步骤中盐酸氟西汀对照品的EIC图；
图10B为确证步骤中盐酸氟西汀对照品的一级质谱图(M+H)+；
图10C为确证步骤中盐酸氟西汀对照品的二级质谱图MS/MS；
图11A为确证步骤中黄金坐立瘦胶囊样品溶液的EIC图；
图11B为确证步骤中黄金坐立瘦胶囊样品溶液的一级质谱图(M+H)+；
图11C为确证步骤中黄金坐立瘦胶囊样品溶液的二级质谱图MS/MS；
图12A为确证步骤中窈窕教主胶囊样品溶液的EIC图；
图12B为确证步骤中窈窕教主胶囊样品溶液的一级质谱图(M+H)+；
图12C为确证步骤中窈窕教主胶囊样品溶液的二级质谱图MS/MS。
具体实施方式
下面，结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：
(1)筛查步骤：高效液相色谱法
1.1、色谱条件与系统适用性试验
十八烷基硅烷键合硅胶Lichrospher C18柱，尺寸为4.6×250mm，粒径为5μm；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论塔板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000；洗脱程序为等度洗脱。
1.2、对照品溶液的制备
取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg的储备液；
1.3、供试品溶液的制备
若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，超声处理后，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量，置容量瓶中，加甲醇，振摇，加甲醇稀释至刻度，摇匀，摇匀后用微孔滤膜滤过；滤液作为供试品溶液；同法制备阴性样品溶液。
1.4、测定
分别取供试品溶液和对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；
1.5、结果判断
供试品色谱图中，应不得检出与对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，若检出相应的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用仪确证；否则，检测完成；
(2)确证步骤：高效液相色谱-质谱联用法
2.1、色谱条件与系统适用性试液
十八烷基硅烷键合硅胶柱(Agilent ZORBAX SB C18柱)，尺寸为100mm×2.1mm，粒径为1.8μm，检测波长为226nm；扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为0.3ml/ml；进样体积为3μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000；洗脱程序为等度洗脱。
2.2、质谱条件
配有电喷雾离子化源，ESI+扫描，干燥气温度为350℃，毛细管电压为3.5KV，锥孔电压为120V，干燥气温度为350℃，干燥气流量为10L/min，扫描方式为一级质谱全扫描、二级质谱扫描，扫描范围为100-1000。
2.3、对照品溶液的制备
取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg的储备液。
2.4、供试品溶液的制备
取筛查步骤中高效液相色谱法检查呈阳性的供试品溶液作为检查用的供试品溶液，用甲醇稀释至与对照品浓度相近的溶液；同法制备阴性样品溶液。
2.5、测定
分别取阴性样品溶液、供试品溶液和对照品溶液各3μl，注入液质联用仪，记录液相色谱图及一级质谱图、二级质谱图。
2.6、结果判断
供试品色谱图中，应不得检出与对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰；若检出相应的色谱峰，则确定供试品中非法添加了盐酸氟西汀。
以下是本发明具体的实施例，在下述实施例中所采用的原材料、设备等除特殊限定外均可以通过购买方式获得。
Ⅰ、试验材料
1、供试品
阳性样品：黄金坐立瘦，生产单位标示为美国恒生元药业集团，批号15010801；
窈窕教主，生产单位标示为美国艾森药业集团，批号05030201；
阴性样品：排毒润颜胶囊，生产单位标示为美国某生物制药有限公司，批号20140520。
2、对照品
盐酸氟西汀(EP标准物质)，批号：00ACF7，规格250mg，购自EDQM CS。
3、试剂：见下表1。
表1实施例中使用的试剂列表
4、仪器：见下表2。
Ⅱ、试验方法
一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：
(1)筛查步骤：高效液相色谱法；
测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；
判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用法确证；否则，检测完成；
(2)确证步骤：高效液相色谱-质谱联用法；
测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入高效液相色谱-质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；
判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。
更加具体的方案如下所述：
一、筛查步骤：高效液相色谱法
1、色谱条件及样品制备方法：
1.1色谱条件
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱Lichrospher C18(4.6×250mm，粒径5μm)；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论塔板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000；洗脱程序为等度洗脱。
1.2样品制备方法
1.2.1对照品溶液的制备
取盐酸氟西汀对照品，加甲醇溶解并制成每1ml含0.05mg的溶液作为对照品溶液。
1.2.2供试品溶液的制备
取样品2粒内容物，研细，置于100ml量瓶中，加甲醇15ml，超声10分钟并时时振摇，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
阴性样品溶液同法制备。
2、专属性
分别精密吸取黄金坐立瘦胶囊、窈窕教主胶囊、排毒润颜胶囊供试品溶液和对照品溶液各20μL，注入色谱仪，记录图谱。将浓度为0.05mg/ml的对照品溶液进样20μl，色谱图及光谱图如图2、3所示：图2中12.0min色谱峰为对照品的色谱峰，图3为对照品色谱峰的光谱扫描图。
将按上述制备方法制备的排毒润颜胶囊的供试品溶液进样20μl，色谱图如图4所示：图4中3.0min色谱峰为排毒润颜胶囊的色谱峰。
将按上述制备方法制备的黄金坐立瘦胶囊的供试品溶液进样20μl，色谱图及光谱图如图5、6所示：图5中11.9min色谱峰为黄金坐立瘦胶囊的色谱峰，图6为黄金坐立瘦供试品溶液中主峰的光谱扫描图。
将按上述制备方法制备的窈窕教主胶囊的供试品溶液进样20μl，色谱图及光谱图如图7、8所示：图7中11.9min色谱峰为窈窕教主胶囊的色谱峰，图8为窈窕教主供试品溶液中主峰的光谱扫描图。
结果显示：黄金坐立瘦胶囊、窈窕教主胶囊供试品溶液中出现与盐酸氟西汀对照品保留时间一致的色谱峰，且它们的DAD光谱与盐酸氟西汀对照品的DAD光谱一致。而排毒润颜胶囊供试品溶液中未出现与对照品保留时间一致的色谱峰。
二、确证步骤：液相色谱-质谱法
飞行时间质谱法测定结果
1、色谱条件与系统适用性试验
十八烷基硅烷键合硅胶Agilent ZORBAX SB C18柱(色谱柱规格为100mm×2.1mm，1.8μm)，检测波长为226nm；扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为0.3ml/ml；进样体积为3μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000；洗脱程序为等度洗脱。
2、质谱条件
配有电喷雾离子化源，ESI+扫描，干燥气温度为350℃，毛细管电压为3.5KV，锥孔电压为120V，干燥气温度为350℃，干燥气流量为10L/min，扫描方式为一级质谱全扫描、二级质谱扫描，扫描范围为100-1000。
3、对照品溶液的制备
取盐酸氟西汀对照品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理10分钟使溶解，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取3ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
4、供试品溶液的制备
取筛查步骤中高效液相色谱法检查呈阳性的供试品溶液作为本项目检查用的供试品溶液，用甲醇稀释为与对照品浓度相近的溶液。
5、测定
取供试品溶液和对照品溶液各3μl，注入液相色谱仪，记录色谱、质谱图。
6、结果
供试品色谱图中，出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰，且其一级质谱及二级质谱均与对照品一致，如图9、10、11所示。
图9为阴性样品溶液的色谱图，未出现3.6min的色谱峰。
图10A为对照品溶液色谱图，出现3.67min色谱峰为盐酸氟西汀；图10B为对照品的一级质谱，准分子离子峰为301.1413(盐酸氟西汀的准分子离子以氟西汀准分子离子为准)；图10C为盐酸氟西汀对照品的二级质谱图，主要离子碎片为m/z57.0699，91.0523,117.0679，148.1108，237.1110，293.1748。
图11A为黄金坐立瘦胶囊样品溶液色谱图，出现保留时间3.66min色谱峰为盐酸氟西汀；图11B为黄金坐立瘦胶囊样品的一级质谱图，准分子离子峰为310.1410；图11C为黄金坐立瘦样品的二级质谱图，主要离子碎片m/z57.0704，91.0644，117.0694，148.1112，237.1106，293.1759。
图12A为窈窕教主胶囊样品溶液色谱图，出现保留时间3.68min色谱峰为盐酸氟西汀；图12B为窈窕教主胶囊样品的一级质谱图，准分子离子峰为310.1410；图12C为窈窕教主样品的二级质谱图，主要离子碎片m/z57.0683，91.0550，117.0697，148.1124，237.1088，293.1727。
表3盐酸氟西汀的HPLC/MS/MS表
检测成分 扫描方式 一级质谱 二级质谱
盐酸氟西汀 正离子 310 57，91，117，148，237，293
样品中未知物与对照品一级质谱、二级质谱均一致，则可认定样品中未知物为盐酸氟西汀C17H18F3NO·HCl。
黄金坐立瘦胶囊样品[M+H]+310.1410，盐酸氟西汀(C17H18F3NO·HCl)理论[M+H]+m/z310.1413，误差为-0.97ppm，误差小于5ppm，可以认为黄金坐立瘦胶囊样品中未知物为盐酸氟西汀C17H18F3NO·HCl。
窈窕教主胶囊样品[M+H]+310.1416，盐酸氟西汀(C17H18F3NO·HCl)理论[M+H]+m/z310.1413，误差为0.97ppm，误差小于5ppm，可以认为窈窕教主胶囊样品中未知物为盐酸氟西汀C17H18F3NO·HCl。
三、实施例的检测结果总结
筛查步骤(液相色谱法)：专属性试验表明，样品中出现与对照品保留时间相同的色谱峰，DAD光谱谱图均与对照品一致。
确证步骤(液相色谱-质谱联用法)：供试品色谱图中，出现与对照品色谱保留时间的色谱峰，且其一级质谱及二级质谱均与对照品一致，一级[M+H]+310.1413，二级57.0699，91.0523，117.0679，148.1108，237.1110，293.1748.；黄金坐立瘦胶囊样品[M+H]+m/z310.1410，盐酸氟西汀(C17H18F3NO·HCl)理论[M+H]+m/z310.1413，误差为-0.97ppm，误差小于5ppm，可以认为样品中未知物为盐酸氟西汀C17H18F3NO·HCl。黄金坐立瘦胶囊样品[M+H]+m/z310.1416，盐酸氟西汀(C17H18F3NO·HCl)理论[M+H]+m/z310.1413，误差为0.97ppm，误差小于5ppm，可以认为样品中未知物为盐酸氟西汀C17H18F3NO·HCl。
综上，本发明实施例的实验结果均满足要求，表明实施例所提供的检测方法可专属、灵敏、快速、准确地初筛和确证瘦身减肥类中成药和保健食品中是否非法添加了盐酸氟西汀。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)筛查步骤：高效液相色谱法；
测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；
判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用法确证；否则，检测完成；
(2)确证步骤：高效液相色谱-质谱联用法；
测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入高效液相色谱-质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；
判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。
2.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述筛查步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液为流动相，所述醋酸铵溶液中含0.1％甲酸；理论塔板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。
3.如权利要求2所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶Lichrospher C18柱，尺寸为4.6×250mm，粒径为5μm。
4.如权利要求2所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述筛查步骤中，洗脱程序为等度洗脱。
5.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述筛查步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；
所述供试品溶液制备步骤如下：若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，超声处理后，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量，置容量瓶中，加甲醇，振摇，加甲醇稀释至刻度，摇匀后用微孔滤膜滤过；滤液作为供试品溶液；同法制备阴性样品溶液；
所述盐酸氟西汀对照品溶液制备步骤如下：取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg盐酸氟西汀的储备液。
6.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述确证步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，检测波长为226nm；扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为0.3ml/ml；进样体积为3μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液为流动相，所述醋酸铵溶液中含0.1％甲酸；理论板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。
7.如权利要求6所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶Agilent ZORBAX SB C18柱，尺寸为100mm×2.1mm，粒径为1.8μm。
8.如权利要求6所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述确证步骤中，洗脱程序为等度洗脱。
9.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述确证步骤中，进行测定时的质谱条件如下：配有电喷雾离子化源，ESI+扫描，干燥气温度为350℃，毛细管电压为3.5KV，锥孔电压为120V，干燥气温度为350℃，干燥气流量为10L/min，扫描方式为一级质谱全扫描、二级质谱扫描，扫描范围为100-1000。
10.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述确证步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；
所述供试品溶液制备步骤如下：取所述筛查步骤中检查呈阳性的供试品溶液作为此步骤中的供试品溶液，用甲醇稀释至与盐酸氟西汀对照品浓度相近的溶液；同法制备阴性样品溶液；
所述盐酸氟西汀对照品溶液制备步骤如下：取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg的盐酸氟西汀储备液。
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