CN110054684A - 东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5及其编码基因和应用 - Google Patents

东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5及其编码基因和应用 Download PDF

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    • C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
    • C07K14/8121—Serpins
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Abstract

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin‑5及其编码基因和应用。东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin‑5，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明克隆了东亚飞蝗的serpin‑5基因，并通过连接，转化步骤将基因转入大肠单菌体内。通过饲喂serpin‑5纯化蛋白，绿僵菌侵染的蝗虫的死亡率大大降低，并测定蝗虫体内POD和SOD的酶活力，经serpin‑5处理后较绿僵菌的处理组相比，蝗虫体内的两者酶活力都降低到与对照无显著性差异，因此，serpin‑5基因能够作为负调控因子控制病菌的侵入引起的过度免疫反应。

Description

东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5及其编码基因和应用
技术领域
本发明属于农业生物技术领域，具体涉及东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5及其编码基因和应用。
背景技术
丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpins)蛋白家族是一个成员众多、分布广泛的蛋白酶抑制剂家族，能够抑制丝氨酸蛋白酶活性，参与调节生物体内多种生理反应，例如血液凝集、纤维蛋白溶解、补体激活、免疫黑化、生长发育过程中组织构建等。serpins蛋白家族成员功能差异显著，Serpin-6与家蚕表皮黑化、蜕皮变态、先天性免疫等生理过程有关，烟草天蛾serpin3a可以与丝氨酸蛋白酶PAP1和PAP3形成共价复合物而抑制酚氧化酶原(PPO)的激活，烟草天蛾serpin4,5抑制PPO激活是通过抑制上游血淋巴蛋白酶而完成的。在革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染时，serpin又涉及不同的调节方式，只有革兰氏阳性菌感染时，serpin4与HP-21形成共价复合物，serpin_5与HP1和HP6结合成共价复合物来抵御感染；在革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染时，serpin4与血淋巴蛋白酶HP1和HP6形成共价复合物抑制PPO激活，烟草天蛾serpin6也可以通过调节PAP3和HP8来抑制PPO激活。
发明内容
本发明的目的在于提供一种东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5。
本发明的再一目的在于提供上述东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5的基因。
本发明的再一目的在于提供包含上述基因的重组表达载体。
本发明的再一目的在于提供包含上述基因的重组菌株。
本发明的再一目的在于提供包含上述基因的应用。
本发明的再一目的在于提供上述东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5的应用。
本发明的再一目的在于提供一种绿僵菌抑制剂。
本发明提供的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5，其氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示：
上述蛋白的分子质量为47.5KD，等电点为8.90。
本发明提供东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因，其核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示：
本发明的丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5的cDNA序列长度为1530bp，完整的开放阅读框长为1263bp，完整开放阅读框位于268-1531bp。
本发明提供包含serpin-5基因的重组表达载体，表达载体优选为pMD19-T Vector载体。
本发明提供包含丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5编码基因的重组菌株，重组菌株优选为大肠杆菌BL21。
本发明还提供上述丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5及其编码基因的应用。
本发明还提供绿僵菌抑制剂，其包括上述东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5。
绿僵菌侵染能使蝗虫体内的酶发生一系列变化，蝗虫体内的保护酶的酶活性持续提高而使蝗虫过度免疫，导致蝗虫死亡。本发明的丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5编码基因能够有效控制这种现象，serpin-5基因表达的蛋白与绿僵菌混合后的毒力测定结果表明，丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因能够有效降低绿僵菌的毒力，有效抑制绿僵菌对蝗虫的侵染；绿僵菌侵染会造成蝗虫体内的保护酶的活力升高，而丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5与绿僵菌混合处理后，蝗虫体内的POD和SOD酶活力下降，因此，本发明丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5能够通过控制蝗虫体内蛋白酶的活性有效抑制绿僵菌侵染。
附图说明
图1显示serpin-5基因的SDS-PAGE电泳结果；
图2显示serpin-5的产物电泳分析结果；
图3显示不同饵剂处理后东亚非蝗的死亡率情况；
图4显示不同饵剂处理后POD酶活的变化情况；
图5显示不同饵剂处理后SOD酶活的变化情况。
具体实施方式
供试绿僵菌菌株接种到添加马铃薯琼脂培养基(PDAY)平板上，25℃下培养14d。收集分生孢子粉，密封贮存于4℃冰箱，备用。
东亚飞蝗卵采集于河北省沧州市，在人工气候培养箱中孵化温度(30士2)℃，相对湿度(60士5)％，光周期14L:10D。孵化后，将同一时间孵化的蝗蛹转移到60cm×50cm×70cm规格的养虫笼中饲养，光周期14L:10D，温度为(30士2)℃。
实施例1克隆serpin-5基因
用trizol溶液提取东亚飞蝗中肠中的总RNA，反转录合成cDNA的一条链，并以此为模板进行PCR克隆，已去除信号肽的目的基因的引物序列为F:5'CGCGGATCCCATGCCAGTCCGCGC 3'(下划线表示设计的BamHⅠ酶切位点)；R:5'CCCAAGCTTTTGCGGAGGCCTTTGTGG3'(下划线表示设计的HindⅢ酶切位点)。PCR产物用1％的琼脂糖凝胶电泳分离并回收纯化，经分析其序列大小为1630bp，完整的开放阅读框长1263bp。
实施例2构建重组表达载体
将纯化产物连接到Pmd19-T Vector载体，并将连接产物加入感受态细胞BL21中，将LB固体培养基上培养的阳性克隆菌株送去测序。将测序成功的重组基因提取质粒，用BamHⅠ和HindⅢ进行酶切，将酶切产物连接到PET-21b质粒载体中，即PET-21b-serpin-5转入大肠杆菌BL21中，经过SDS-PAGE凝胶电泳验证，结果如图1所示。
实施例3诱导重组蛋白表达
取重组基因的单克隆接种于新鲜的LB含Amp培养液，震荡过夜，转接培养至OD值为0.5-0.6，然后加IPTG(终浓度为0.5mmol/L)，27℃诱导过夜后，用5％浓缩胶和12％分离胶进行SDS-PAGE电泳分析蛋白样品。将诱导蛋白5000Xg离心10min收集菌体。加入预冷的Binding BufferI重悬菌体，加入PMSF至终浓度0.25mg/ml。冰上超声裂解菌体(300w，超声持续5s，暂停5s，重复99个循环)。4℃,12000Xg，离心10min，回收上清。沉淀加入预冷的Binding Buffer II重悬，4℃轻柔振荡1h以溶解包涵体。用SDS-PAGE电泳检测目的蛋白，结果如图2所示。
实施例4验证serpin-5的功能
4.1测定serpin-5和绿僵菌混合后的毒力
将预先饥饿12h的东亚飞蝗3龄蝗蛹每15头放入无菌的塑料筐中，加入处理好的饵剂(含有5％植物油的无菌麦麸)5g，24h后将饵剂取出，以新鲜麦苗饲喂至实验结束，每日检测蝗虫的死亡率。试验在35℃,16L:8D下室内进行，重复五次。饵剂中绿僵菌和serpin-5的浓度见下表：
表1不同处理饵剂成分及浓度
死亡率测定结果如表2，图3所示：
表2 Serpin-5处理后东亚飞蝗的死亡率
经绿僵菌处理后的第3天开始直到第8天，东亚飞蝗的死亡率显著高于对照(P＜0.05)，serpin-5处理组与对照无显著差异(P＞0.05)，经过serpin-5和绿僵菌混合处理后的死亡率在第三天和第四天与对照无显著差异(P＞0.05)，与绿僵菌处理组相比其死亡率显著降低(P＜0.05)，第五天至第八天与对照差异显著，与绿僵菌处理组相比其死亡率显著降低。
4.2测定serpin-5处理后POD和SOD的酶活
将3-4龄的蝗虫分装，每个处理3个重复，每筐装30头蝗虫，饥饿处理24小时。按照不同的处理，进行饲喂不同处理的饵剂，饵剂的浓度和组成如表1所示。饲喂24h后正常喂食无处理的饵剂，从第二天开始每组处理取3头，于液氮中研磨均匀，用POD试剂盒和SOD试剂盒分别测定POD和SOD的活性。
Pod酶活结果如图4所示，总体呈先升高再降低的趋势。绿僵菌处理后第一天，东亚飞蝗体内的POD酶活力与对照无差异(p＜0.05)，处理第二天时，蝗虫体内的pod酶活力显著上升，第三天酶活力降低，与对照无显著差异。而serpin-5与绿僵菌的混合处理后，蝗虫体内的酶活自第二天较绿僵菌处理组升高，第三天后且与对照组无显著性差异。
绿僵菌处理后SOD酶活力结果如图5所示，绿僵菌处理后sod酶活力总体呈先升高再降低。处理第二天至第三天时，蝗虫的酶活力显著上升，第四天至第五天时，蝗虫体内的sod酶活力降低，于对照无显著差异。而serpin-5与绿僵菌的混合处理后，第二天与第三天蝗虫体内的酶活力较绿僵菌处理组下降，且于对照组无显著性差异。
4.3中肠提取液总可溶性蛋白含量测定
参照Bradford方法测定，以0.1％的牛血清蛋白BSA为标准蛋白，检测纯化的serpin-5蛋白的蛋白含量，用SDS-PAGE电泳检测serpin-5蛋白和BSA的蛋白含量。根据两者蛋白条带对比测出serpin-5蛋白含量，对比处理和对照均重复3次。实验结果表明serpin-5的蛋白含量为0.7mg/ml。
序列表
<110> 中国农业科学院植物保护研究所
<120> 东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5及其编码基因和应用
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 431
<212> PRT
<213> 东亚飞蝗(Locusta migratoria manilensis )
<400> 1
Met Glu Thr Leu Thr Gly Gly Ala Thr Gly Ala Thr Ala Ala Gly Leu
1 5 10 15
Gly Thr Gly Leu Leu Leu Thr Leu Ala Ala Ser Gly Thr Ala Gly Leu
20 25 30
Thr Ser Ala Ile Val Ala Ser Leu Gly Ala Ala Ala Ser Ala Thr Leu
35 40 45
Pro Ala Leu Gly Ala Leu Val Thr Ala Ala Leu Ser Leu Thr Leu Ala
50 55 60
Pro Ala Pro Val Thr Ile Leu Ala Ala Pro Thr Ala Ser Ala Ile Gly
65 70 75 80
Ala Val Ala Pro Ala Ala Pro Leu Thr Val Pro Leu Ile Ala Gly Thr
85 90 95
Val Leu Ala Ala Thr Ala Gly His Ile Ala Ser Ile Met Glu Thr Ser
100 105 110
Gly Ala Gly Leu Ser Ala Ala Val Leu Leu Leu Val Ala Ala Leu Thr
115 120 125
Pro Leu Gly Ser Thr Leu Thr Gly Pro Gly Pro Gly Pro Ser Pro Pro
130 135 140
Gly Ala Pro Thr Ala Gly Leu Gly Leu Ser Ile Ala Ala Gly Pro Met
145 150 155 160
Glu Thr Ala Gly Ser Ala Gly Pro Thr Thr Leu His Ser Leu Gly Ile
165 170 175
Ala Ala Ser Ile Leu Ala Leu Pro Thr Leu Gly Ala Leu Pro Ala Met
180 185 190
Glu Thr Pro Ile Val Leu Pro Ala Ala Leu Ala Gly Leu Gly Ala Leu
195 200 205
Leu Ser Thr Val Ala Pro Pro Ala Leu Ala Gly Ala Leu Gly Leu Leu
210 215 220
Ala Pro Thr Ala Val His Val Val Leu Pro Leu Pro Thr Pro Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Leu Leu Ala Ala Val Leu Leu Gly Leu Gly Ile Leu Gly Ile
245 250 255
Pro Thr Ala Ala Ala Ala Leu Gly Gly Ile Ala Ala Ser Ala Thr Gly
260 265 270
Ala Leu Ser Val Ser Leu Val Leu Gly Leu Ser Ala Leu Gly Val Ala
275 280 285
Gly Gly Gly Thr Thr Ala Ala Ala Val Thr Gly Ile Gly Val Ile Ala
290 295 300
Ala Ile Gly Val Ala Gly Val Thr Pro Ala Ala Thr His Pro Pro Leu
305 310 315 320
Pro Pro Ile Gly Ala Gly Thr Thr Gly Thr Val Ile Pro Val Gly Leu
325 330 335
Val Val Gly Pro Ser Thr Ala Leu Thr Pro Leu Thr Thr Ile Ser Val
340 345 350
Ala Gly Gly Gly Pro Pro Gly Ala Leu Leu Leu Ala Ala Ser Leu Gly
355 360 365
Gly His Gly Pro His Ile Pro Gly Thr Ala Leu Ala Gly Pro Thr Thr
370 375 380
Ile Gly Met Glu Thr Pro Ala Pro Ala Val Thr Ser Gly Thr Ile Thr
385 390 395 400
Leu Ala Gly Gly Gly Leu Leu Ala Val Thr Thr Ile Leu Ser Gly Ser
405 410 415
Ala Pro His Thr Leu Ile Gly Pro Leu Pro Gly Ala Pro Pro Gly
420 425 430
<210> 2
<211> 1263
<212> DNA
<213> 东亚飞蝗(Locusta migratoria manilensis )
<400> 2
atgctgtacg agggcgcgac gggagacacc gcgcgccagc tcgaaacggg gctgctgctc 60
accaaggacc gctcgcagac gcgcgagaag tacagcgcca tcgtggcgtc gttgcaggca 120
aacaactcgg actatctgtt cgacttgggg aacaaagtat acgcagactt gtcactgact 180
ctacgcccac gctttgttac gatcctgagg gcgttttata acagtgatat tgaaaatgtc 240
gactttagag atcccaaaac tgtgccctta attaatgaat gggtaaaaaa tgcaacacgt 300
ggtcacattg actcgataat gagtgaagat ggcttgtcgg acgccgtcct cctgcttgtg 360
aacgcactgt acttcaaagg gtcatggaaa taccaatttc agcctcagtt ctcctttccc 420
ggcaatttct acgcaggcaa aggaaagagt atagccgcac agttcatgcg tcagagtgca 480
gaattttact acttgcactc aaaggaaatt aatgcaagca tattgcgact accgtatctt 540
ggcaggaaat ttgcgatgtt tatcgtcctg ccagatgaca aggatggact tgaaaatctt 600
ttgagcaccg taaacccatt cgctctgcga gaagatctcg gacttctcag accgactgca 660
gtacatgtgg tgctgccaaa atttactttc gaattttctg tgctcttaaa tgatgttctg 720
aaggagctgg gaataaagca gattttcact gacagagcta atctgcaagg aatcgcgagg 780
agtcgttatg gaagactgtc agtctcgaag gttttacaga aatcagctct agaagtaaac 840
gaacaaggaa ctacagcagc ggcagttaca ggcatcgagg tcattgatcg aattggagtc 900
agagaggtga cgttcaatgc tacacatcca ttccttttct ttatcgaaga cgagacgacc 960
ggtacggtaa tattcgtagg aaaagttgtg gaaccatcaa ctgacaaaac accgaaaact 1020
acgatttctg ttcggcaagg agagttcccg ggtgacaaga agaaagataa ctccaaaggt 1080
ggtcatcaac ctcacattcc tcaaactgac aaggacggac cttacacaat agaaatgcca 1140
gattttgacg tcacatctca aacaatctac aaggacggac agcagaaaaa gcgtgtctat 1200
tatatcttat cccaaagcgc gtttcattac ttgattcaat ttttaccaca aaggcctccg 1260
caa 1263

Claims (9)

1.东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因，其特征在于，编码权利要求1所述的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5。
3.根据权利要求2所述的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.包含东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因的重组表达载体。
5.包含东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因的重组菌株。
6.权利要求1所述的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5的应用。
7.权利要求1所述的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5在防控蝗虫中的应用。
8.权利要求2所述的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5基因的应用。
9.一种绿僵菌抑制剂，其特征在于，所述绿僵菌抑制剂包括权利要求1所述的东亚飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-5。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111378665A (zh) * 2020-04-03 2020-07-07 中国农业科学院植物保护研究所 东亚飞蝗的serpin5基因的干扰序列及其应用
CN111647599A (zh) * 2020-04-13 2020-09-11 中国农业科学院植物保护研究所 东亚飞蝗serpin1基因的干扰序列及其应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1763187A (zh) * 2005-10-27 2006-04-26 西南大学 重组丝氨酸蛋白酶及含有其的杀虫真菌剂
CN101688219A (zh) * 2007-05-09 2010-03-31 美国陶氏益农公司 新除草剂抗性基因
US20170058270A1 (en) * 2015-08-27 2017-03-02 The Procter & Gamble Company Bifidobacterium longum
CN106478812A (zh) * 2016-10-21 2017-03-08 沈阳药科大学 丝氨酸蛋白酶抑制剂‑3及其功能、制备方法和应用
WO2018039283A1 (en) * 2016-08-22 2018-03-01 Fred Hutchinson Cancer Research Center Peptides and methods of use thereof
CN108138213A (zh) * 2015-02-20 2018-06-08 罗尔公司 控制蛋白酶产生的方法
CN108841812A (zh) * 2018-07-24 2018-11-20 中国农业科学院植物保护研究所 绿僵菌蛋白酶Pr1J及其基因和应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1763187A (zh) * 2005-10-27 2006-04-26 西南大学 重组丝氨酸蛋白酶及含有其的杀虫真菌剂
CN101688219A (zh) * 2007-05-09 2010-03-31 美国陶氏益农公司 新除草剂抗性基因
CN108138213A (zh) * 2015-02-20 2018-06-08 罗尔公司 控制蛋白酶产生的方法
US20170058270A1 (en) * 2015-08-27 2017-03-02 The Procter & Gamble Company Bifidobacterium longum
WO2018039283A1 (en) * 2016-08-22 2018-03-01 Fred Hutchinson Cancer Research Center Peptides and methods of use thereof
CN106478812A (zh) * 2016-10-21 2017-03-08 沈阳药科大学 丝氨酸蛋白酶抑制剂‑3及其功能、制备方法和应用
CN108841812A (zh) * 2018-07-24 2018-11-20 中国农业科学院植物保护研究所 绿僵菌蛋白酶Pr1J及其基因和应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JUN CHEN等: "Serpin7 controls egg diapause of migratory locust (Locusta migratoria) by regulating polyphenol oxidase", 《FEBS OPEN BIOLOGY》 *
王峰等: "绿僵菌属4个生防潜力菌株的多基因鉴定", 《中国生物防治学报》 *
王正浩等: "不同蛋白酶抑制剂对绿僵菌侵染东亚飞蝗的影响", 《中国生物防治学报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111378665A (zh) * 2020-04-03 2020-07-07 中国农业科学院植物保护研究所 东亚飞蝗的serpin5基因的干扰序列及其应用
CN111647599A (zh) * 2020-04-13 2020-09-11 中国农业科学院植物保护研究所 东亚飞蝗serpin1基因的干扰序列及其应用
CN111647599B (zh) * 2020-04-13 2022-02-25 中国农业科学院植物保护研究所 东亚飞蝗serpin1基因的干扰序列及其应用

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