CN110041318A - 一类多巴胺d5受体激动剂及其制备和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一类多巴胺D5受体激动剂及其制备和应用，具体地，本发明提供了如式I所示的双噻吩亚甲基取代的5‑羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R‑异构体、S‑异构体，本发明还提供了该类化合物或其药学上可接受的盐的制备方法。本发明还提供了该类化合物在制备治疗注意力缺陷多动障碍的药物的用途。

Description

一类多巴胺D5受体激动剂及其制备和应用

技术领域

本发明属药物化学领域，涉及一类新型的多巴胺D5受体激动剂，具体涉及双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物或其药学上可接受的盐；本发明还涉及该类化合物或其药学上可接受的盐的制备方法以及其在制备治疗治疗注意力缺陷多动障碍的药物中的用途的药物中的用途。

背景技术

注意力缺陷多动障碍(Attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)是儿童多发性的行为障碍，世界范围内儿童患病率为8％～12％，临床表现为注意力不集中、冲动和多动。神经生物学研究显示，ADHD存在多种递质传递异常，而其中最受关注的是多巴胺(DA)系统。精神兴奋药哌甲酯(methylphenidate,Ritalin,利他林)对ADHD有效，该药通过抑制DA转运体(DA transporter,DAT)、提高胞外DA浓度发挥作用。儿茶酚胺系统的一些基因异常，包括DAT、去甲肾上腺素转运蛋白(norepinephrine transporter,NET)、D4受体、D5受体、突触体相关蛋白-25(synaptosomal-associatedprotein，SNAP-25)等的编码基因，被认为与ADHD有关。其中D5和D4受体基因多态性与ADHD关系最为密切，也是该领域研究的热点。

多巴胺受体包括D1-D5五种亚型，控制着运动、情感及神经内分泌的调节，与许多神经系统疾病密切相关,如:精神分裂症、帕金森氏病、抑郁症、焦虑症以及ADHD等。目前对D1和D2受体的研究最多，以此为靶点多种药物上市；对D3和D4受体的研究也较多，分别作为抗帕金森氏症和精神分裂症的靶点。相比较而言，目前对D5受体的研究最不清楚。一般从功能上把多巴胺分为D1样(D1、D5)和D2样(D2、D3、D4)两大类，这两类受体分别于Gα和Gi偶联，其作用往往是相反的。D5与D1受体有高度的序列同源性，其中在跨膜区的同源性高达95％。目前研究D5受体的困难之一是缺乏特异性的激动剂，但是另一方面内源性激动剂多巴胺对D5受体的亲和力是最高的，比对D1的亲和力高10倍以上，比对D2的亲和力高100倍。

近年来一些研究表明，D5受体与注意力缺陷多动症(ADHD)密切相关。目前治疗ADHD的临床一线药物主要是中枢兴奋药(哌醋甲酯，利他林)。然而在临床上大约有20-30％的患者使用治疗效果差甚至无效，不能达到症状的控制。还有一部分患者因不能耐受的副作用睡眠障碍、食欲降低、头痛、抽搐等而减少药量甚至停药，也不能达到临床控制。另外由于中枢兴奋药物远期疗效的局限性和潜在的滥用危险，一些家庭拒绝中枢兴奋药物的治疗。因此进一步深入研究发病机制，寻找新的治疗靶标至关重要，也是目前研究的热点。

尽管研究表明D5受体可能是治疗ADHD的新靶标，但是一直以来缺乏D5受体的特异性的激动剂，新发现的调节剂往往对D1和D5都有相似的作用，对两类受体亲和力的差别还不如内源性激动递质多巴胺(10倍差别)，而且这些调节剂的血浆浓度和生物利用度达不到成药性的要求。

综上所述，本领域迫切需要开发一种多巴胺受体D5特异性调节剂。

发明内容

本发明的目的是开发一种多巴胺受体D5特异性调节剂。

本发明的第一方面，提供了一种如下式I所示的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体：

在另一优选例中，所述药学上可接受的盐包括无机酸盐或有机酸盐。

在另一优选例中，所述药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、甲酸盐、乙酸盐、己二酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、马来酸盐、草酸盐、水杨酸盐、酒石酸盐，或其组合。

本发明的第二方面，提供了一种如本发明第一方面所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体的制备方法，其特征在于，包括步骤：

在惰性溶剂中，用4-哌啶基哌啶与式I-a化合物反应，得到式I化合物。

在另一优选例中，所述的反应在Ar₂气氛下进行。

在另一优选例中，所述的反应在CH₂Cl₂溶剂条件下进行。

在另一优选例中，所述的反应在Et₃N存在下进行。

在另一优选例中，所述的反应温度为10-40℃。

在另一优选例中，所述的反应时间为0.5-2h。

在另一优选例中，所述的方法包括步骤：

在惰性溶剂中，用I-b与I-c反应，得到式I化合物。

在另一优选例中，所述的反应在Ar₂气氛下进行。

在另一优选例中，所述的反应在CH₂Cl₂溶剂条件下进行。

在另一优选例中，所述的反应在Et₃N和/或DMAP存在下进行。

在另一优选例中，所述的反应在溶剂回流温度下进行。

在另一优选例中，所述的反应时间为12-48h。

在另一优选例中，所述的方法包括步骤：

在惰性溶剂中，用式I-d化合物与4-硝基苯基氯甲酸酯反应，得到式I-a化合物。

在另一优选例中，所述的反应在Ar₂气氛下进行。

在另一优选例中，所述的反应在CH₂Cl₂溶剂条件下进行。

在另一优选例中，所述的反应在Et₃N存在下进行。

在另一优选例中，所述的反应在10-40℃下进行。

在另一优选例中，所述的反应时间为0.5-2h。

在另一优选例中，所述的方法包括步骤：

在惰性溶剂中，用式I-e化合物与2-噻吩甲醛反应，得到式I-d化合物。

在另一优选例中，所述的反应在Ar₂气氛下进行。

在另一优选例中，所述的反应在MeOH溶剂条件下进行。

在另一优选例中，所述的反应在选自下组的试剂存在下进行：NaOMe，AcOH，NaCNBH₃，或其组合。

在另一优选例中，所述的反应在10-40℃下进行。

在另一优选例中，所述的反应时间为12-48h。

在另一优选例中，所述的式I-c化合物通过以下方法制备：

在惰性溶剂中，用式I-f化合物与三光气反应，得到式I-c化合物。

在另一优选例中，所述的反应在Ar₂气氛下进行。

在另一优选例中，所述的反应在CH₂Cl₂溶剂条件下进行。

在另一优选例中，所述的反应在Et₃N存在下进行。

在另一优选例中，所述的反应在10-40℃下进行。

在另一优选例中，所述的反应时间为0.5-2h。

在另一优选例中，所述的三光气在低于10℃下加入反应体系。

在另一优选例中，所述的方法还包括步骤：

在惰性溶剂中，用质子酸与式I化合物反应，得到式I化合物的盐。

在另一优选例中，所述的强酸选自下组：HCl、H₃PO₄、HNO₃、H₂SO₄，或其组合。

在另一优选例中，所述的惰性溶剂选自下组：CH₂Cl₂、丙酮溶剂，或其组合。

在另一优选例中，所述的反应在10-40℃下进行。

在另一优选例中，所述的反应时间为0.1-1h。

本发明的第三方面，提供了一种如本发明第一方面所述的式I化合物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体用于制备治疗注意力缺陷多动障碍的药物组合物，或用于制备与多巴胺受体D5活性或表达量相关的疾病的药物组合物的用途。

本发明的第四方面，提供了一种药物组合物，其包含：(a)治疗有效量的所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐作为活性成分，以及(b)药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述的药物组合物用于治疗注意力缺陷多动障碍。

在另一优选例中，所述的药物组合物用于特异性激动多巴胺受体D5。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1为本发明的双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物。

图2为阳性对照多巴胺对D5受体的亲和作用实验。

图3显示了QH197对于多巴胺受体的选择性激动实验。

图4为QH197抗焦虑的大鼠高架十字迷宫模型实验结果图。

具体实施方式

发明人经过长期而深入的研究，针对D5受体进行了化合物设计，发现双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物对D5受体的激动作用比多巴胺强一倍，而且具有一定的特异性，对D2、D4、D1以及多个5-HT受体没有明显的作用，且具有显著的抗焦虑和镇痛作用，药效表现与临床一线药物一致。基于上述发现，发明人完成了本发明。

式I化合物

本发明提供了如结构式I所示的双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物或其药学上可接受的盐：

本发明中双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物的药学上可接受的盐包括和无机酸或有机酸衍生的化合物。与合适的酸成盐的例子包括：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、甲酸盐、乙酸盐、己二酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、马来酸盐、草酸盐、水杨酸盐、酒石酸盐。

式I化合物的制备

本发明还提供了制备双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物或其药学上可接受的盐的方法，5-羟色胺氨原料可商购或通过有机化学领域普通技术人员熟知的方法制备。本发明的全部最终化合物都是通过以下反应式中描述的方法或通过其类似的方法制备。

目标产物的合成制备：

化学反应式

试剂及反应条件：(a)Ar₂，NaOMe，MeOH，AcOH，2-Thenaldehyde，NaCNBH₃，室温，过夜；：(b)Ar₂，CH₂Cl₂，4-nitrophenyl chloroformate，Et₃N，室温，1h；(c)Ar₂，CH₂Cl₂，4-Piperidinopiperidine，Et₃N，室温，1h；(d)Ar₂，CH₂Cl₂，Et₃N，Triphosgene(CH₂Cl₂溶液)滴加时控温低于10℃，反应室温1h；(e)Ar₂，CH₂Cl₂，Et₃N，DMAP，回流，过夜。

所述式I化合物的盐通过以下方法制备

试剂及反应条件：(a)HCl或H₃PO4或HNO₃或H₂SO4，CH₂Cl₂或丙酮溶剂，室温，30min。

上述各步骤中，如无特别说明，反应在如下溶剂中进行：甲醇(MeOH)、二氯甲烷(CH₂Cl₂)、丙酮(Acetone)或上述溶剂的混合溶剂。反应还需要加入NaH、K₂CO₃、HOAc等活化剂。根据具体化合物的反应情况，反应温度一般为0℃至室温。反应时间根据具体反应物而定。通常用TLC来跟踪测定反应的完成程度。反应完毕后一般采用的后处理方法包括浓缩反应液除尽溶剂、萃取、柱层析分离等。最终产物用NMR来检测证明。

治疗注意力缺陷多动障碍的药物组合物

由于本发明化合物具有优异的作为多巴胺D5受体激动剂的活性，因此本发明化合物及其各种晶型，药学上可接受的无机或有机盐，水合物或溶剂合物，以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗、预防以及缓解与多巴胺D5受体活性或表达量相关的疾病。根据现有技术，本发明化合物可用于治疗以下疾病：注意力缺陷多动障碍。临床上ADHD症状一般分为注意力缺陷型、多动型和混合型。D5受体激动剂可能主要作用于注意力缺陷，也不排除对于改善混合型ADHD的潜力。

本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg本发明化合物/剂，更佳地，含有10-1000mg本发明化合物/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊或药片。

“药学上可以接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。

使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选50～1000mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

与现有技术相比，本发明的主要优点包括：

(1)本发明提供了一类新型的多巴胺D5受体激动剂，其对多巴胺D5受体的激动作用比多巴胺强一倍，而且具有一定的特异性，对D2、D4、D1以及多个5-HT受体没有明显的作用。

(2)本发明化合物的药效学实验表明有显著的抗焦虑和镇痛作用，这与临床治疗注意力缺陷多动障碍(ADHD)一线药物利他林具有相似的药效作用，且可能克服现有中枢兴奋类药物存在的副作用：睡眠障碍、食欲降低、头痛、抽搐等。

(3)本发明的双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物结构相对简单，易于大量制备。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

所得化合物以Bruck AM-400核磁共振仪测定其¹H NMR谱，所用试剂均为分析纯或化学纯。

实施例1双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物QH-197

试剂和条件：(a)Ar₂，NaOMe，MeOH，AcOH，2-Thenaldehyde，NaCNBH₃，室温，过夜；：(b)Ar₂，CH₂Cl₂，4-nitrophenyl chloroformate，Et₃N，室温，1h；(c)Ar₂，CH₂Cl₂，4-Piperidinopiperidine，Et₃N，室温，1h；(d)Ar₂，CH₂Cl₂，Et₃N，Triphosgene(CH₂Cl₂溶液)滴加时控温低于-10℃，反应室温1h；(e)Ar₂，CH₂Cl₂，Et₃N，DMAP，回流，过夜。

具体试验操作：

(a)氩气环境下，250ml反应瓶中加入5-羟基色胺盐酸盐1.3g(6mmol)，加入100ml无水甲醇，搅拌至溶解，冰浴冷却，搅拌下加入新制甲醇钠(140mg Na溶解在4ml无水甲醇中)调节pH＝8～9，接着加入1.4ml醋酸(24mmol)调节pH＝5～6，再依次加入754mg氰基硼氢化钠(12mmol)和噻吩甲醛1.4ml(14.4mmol)，反应温度升至室温，继续搅拌过夜(TLC检测反应进程)，反应完全后，滴加2mol/L的Na₂CO₃溶液调pH约8-9终止反应，过滤，滤液在45℃下减压浓缩，加入冰水(100ml)稀释，氯仿(100ml×2)萃取，合并氯仿萃取液，饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩除尽溶剂，得中间体QH-91(2.17g，产率98％)。

方案1:

(b)Ar2环境下，250ml反应瓶中加入QH-91 1.1g(3mmol)，加入干燥二氯甲烷100ml，搅拌溶解，O℃搅拌下，依次加入氯甲酸4-硝基苯酯1.8g(9mmol),三乙胺2.1ml(15mmol)，反应温度升至室温下，反应1h，TLC检测反应完全。加水猝灭反应，萃取分层，有机相用饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩至干，得中间体QH-91CE(1.47g，产率92％)。

(c)Ar2环境下，100ml反应瓶中加入QH-91CE 534mg(1mmol)，加入干燥二氯甲烷50ml，搅拌至溶解，依次加入4-哌啶基哌啶336mg(2mmol),三乙胺418ul(3mmol)，室温反应1h，TLC检测反应完全。加水猝灭反应，萃取分层，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩得粗品。用丙酮：异丙醇(体积比3:2)结晶，重结晶得最终产物QH-197(501mg，产率89％)。

方案2:

(d)在装有温度计、滴液漏斗、干燥管的250ml三口反应瓶中，加入三光气1.8g(6mmol)、干燥二氯甲烷50ml，搅拌至溶解，将反应液冷却至-15℃，搅拌，滴加4-哌啶基哌啶2g(11.9mmol)、三乙胺5.3ml的干燥二氯甲烷溶液50ml，滴加时反应温度控制在-15℃～-10℃，滴毕，升至室温继续搅拌1小时，TLC点板检测确定反应终点。待反应完成，向反应瓶中加入预冷的饱和碳酸氢钠溶液至PH＝8，萃取分层，有机相用预冷的饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸镁干燥，过滤，35℃水浴减压浓缩至油状物，得中间体4-哌啶基哌啶甲酰氯(2.7g，产率98％)。

(e)往250ml二口反应瓶中加入QH-91 1.1g(3mmol)，4-哌啶基哌啶甲酰氯1.4g(6mmol)，干燥二氯甲烷100ml，搅拌至溶解，加入三乙胺1.7ml(12mmol)，4-二甲氨基吡啶111mg(0.9mmol)，加热回流(回流冷凝管外接干燥管)过夜，TLC点板检测反应完全。向反应瓶中加入冰水猝灭反应，萃取分层，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩得粗品。用丙酮：异丙醇3:2结晶，重结晶得最终产物QH-197(1.6g产率95％)。

实施例2：

250ml反应瓶中加入化合物QH-197 562mg(1mmol)，加入80ml无水丙酮，45℃加热搅拌至溶解，冷却至室温，搅拌下滴加浓盐酸184μl(2.2mmol)的丙酮(80ml)溶液，析出沉淀，过滤，抽干得化合物QH-197的盐酸盐QH-197.2HCl(623mg,98％)。

药理试验实施例1：多巴胺受体的靶点测试

试验目的：检测多巴胺和多种5-HT受体活性

通用实验原理、方法、样品(β-arrestin荧光标记方法)

本发明的实验样品包括：

QH197有常规方法合成，多巴胺购自sigma公司。

实验方法：

应用β-arrestin荧光标记方法，受体激活后会引起β-arrestin的內吞，內吞后的β-arrestin释放荧光标记物，从而发出荧光，荧光的强度反应了受体的激活程度。应用稳定表达多巴胺D5受体的细胞株，以多巴胺作为多巴胺D5受体的阳性激动剂，测试QH197对受体的激动作用。

数据分析：

所有数据分析采用spss 22(for mac)数据处理软件完成。使用单因素方差分析，采用LSD法多重比较校验结果。数据用Mean±sem表示。p<0.05时标记一个星号；p<0.01时标记两个星号。

实验结果：

阳性对照多巴胺对D5受体的结合作用如图2中所示。QH197对多巴胺D5受体有特异性的激动作用，并且其激动作用是多巴胺(EC₅₀＝99nM)的2倍。

药理试验实施例2：靶点的特异性测试

试验目的：测试QH197对5-HT受体的作用

本发明的实验样品包括：

QH197有常规方法合成，五羟色胺(5-HT)购自sigma公司。

实验方法：

应用β-arrestin荧光标记方法，受体激活后会引起β-arrestin的內吞，內吞后的β-arrestin释放荧光标记物，从而发出荧光，荧光的强度反应了受体的激活程度。应用稳定表达多巴胺5-HT受体的细胞株，以5-HT作为5-HT受体的阳性激动剂，测试QH197对受体的激动作用。

数据分析：

所有数据分析采用spss 22(for mac)数据处理软件完成。使用单因素方差分析，采用LSD法多重比较校验结果。数据用Mean±sem表示。p<0.05时标记一个星号；p<0.01时标记两个星号。

试验结果：QH197对5-HT1A、5-HT4受体无作用。进一步表明QH197的特异性。

表1.QH197对5-HT1A、5-HT4受体无激动作用。

药理试验实施例3：抗焦虑药效评价

试验目的：QH197抗焦虑的药效评价。

应用经典的抗抑郁和抗焦虑小鼠行为学试验，测试QH197抗抑郁、抗焦虑及镇痛作用。实验器械呈十字型，架高于离地80cm处。其包括长度为50cm、宽度为15cm的四条臂。两条相对的臂由高40cm的垂直墙封闭，另两条臂则对空间开放，代表实验动物产生焦虑的位置。

大鼠被分为载体对照组，OH197低剂量组，QH197高剂量组和FLX对照组，分别给予载体，QH197化合物5mg/kg，10mg/kg，以及FLX化合物10mg/kg。药物分散于载体中给药。在接受给药后1小时，动物被置于器械十字的中央，并能够自由到达所有四条臂。经ANYMAZE系统进行5分钟的动物行为记录。在本实验中研究的变量是在开放臂中移动的距离在全部移动距离中的百分比。在开放臂中移动的距离百分比低，表示焦虑程度更重。

试验结果：大鼠高架十字迷宫实验结果如图4中所示，结果显示，QH197有显著的抗焦虑作用。由于一般用抗焦虑药效作用评价注意力障碍多动症，因此QH197具有抗儿童注意力障碍多动症的潜力。

药理试验实施例4：镇痛药效评价

试验目的：QH197的镇痛药效评价。

应用热板实验，测试QH197的镇痛作用。为了检验化合物QH197的疼痛缓解效果，参照神经系统科学的实验室指南；行为神经科学8.9(Current Protocols in Neuroscience；Behavioral Neuroscience Unit 8.9)的热板试验，在一般性疼痛动物模型中进行。

ICR小鼠(雄性，30-35g；东方生物，韩国)随机分为六组，试验前在试验室习惯1小时。化合物给药之前动物禁食2小时。分别给予，美洛昔康10mg/kg，苯甲酸利扎曲普坦10mg/kg，QH197化合物30mg/kg，10mg/kg，3.3mg/kg口服给药。所有化合物溶解于载体中，对照组用不含化合物的载体处理。

施用化合物30min，60min，和120min后，将小鼠置于预先被加热到55±1℃的热板上，然后，测试当每只小鼠从板上抽回爪，颤抖，舔爪或后腿，或从板上跳起的时间点，作为痛阈，并在表2中示出。

表2热板实验结果

根据上述结果，双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物QH-197对D5受体的激动作用比多巴胺强一倍，而且具有一定的特异性，对D2、D4、D1以及多个5-HT受体没有明显的作用。药效学实验表明QH-197具有有显著的抗焦虑和镇痛作用，这与临床一线药物利他林具有相似的药效作用。所以本发明的双噻吩亚甲基取代的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物或其药学上可接受的盐可以用于制备治疗ADHD药物。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种如下式I所示的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体：

2.如权利要求1所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体，其特征在于，所述药学上可接受的盐包括无机酸盐或有机酸盐。

3.如权利要求1所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体，其特征在于，所述药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、甲酸盐、乙酸盐、己二酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、马来酸盐、草酸盐、水杨酸盐、酒石酸盐，或其组合。

4.如权利要求1所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体的制备方法，其特征在于，包括步骤：

在惰性溶剂中，用4-哌啶基哌啶与式I-a化合物反应，得到式I化合物。

5.如权利要求1所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体的制备方法，其特征在于，包括步骤：

在惰性溶剂中，用I-b与I-c反应，得到式I化合物。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，包括步骤：

在惰性溶剂中，用式I-d化合物与4-硝基苯基氯甲酸酯反应，得到式I-a化合物。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，包括步骤：

在惰性溶剂中，用式I-e化合物与2-噻吩甲醛反应，得到式I-d化合物。

8.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述方法还包括步骤：

在惰性溶剂中，用质子酸与式I化合物反应，得到式I化合物的盐。

9.如权利要求1所述的式I化合物，或其药学上可接受的盐、外消旋体、R-异构体、S-异构体的用途，其特征在于，用于制备治疗注意力缺陷多动障碍的药物组合物，或用于制备与多巴胺受体D5活性或表达量相关的疾病的药物组合物。

10.一种药物组合物，其特征在于，包含：(a)治疗有效量的如权利要求所述的5-羟色胺氨基甲酸酯衍生物,或其药学上可接受的盐作为活性成分，以及(b)药学上可接受的载体。