CN109932354B - 一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置及应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置及应用。所述原位分离富集装置，包括加热系统和原位分离富集装置；所述原位分离富集装置包括至少一个样品检测单元，所述样品检测单元包括样品腔、内环隔离槽、分离膜和接收液，可以实现对样品的分离‑富集一体化。利用沸点差异，将待分析物质气化，穿过分离膜，被吸收液吸收；经过相应的处理后，再加热，待测物和拉曼增强粒子富集于环线，形成咖啡环，提高表面增强拉曼光谱检测的灵敏度。本发明所述的装置的应用范围广泛，可应用于易挥发目标待测物或者特定条件下可以转化为易挥发目标物的高通量实时快速分析。

Description

一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置及 应用

技术领域

本发明涉及分析化学样品前处理及分析检测领域，尤其涉及用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置及应用，适用于复杂体系中痕量易挥发目标待测物或者特定条件下可以转化为易挥发目标物的高通量实时快速分析。

背景技术

表面增强拉曼光谱(SERS)是近年来发展的新检测技术，其具有检测速度快，灵敏度高，仪器便携等特点，已经在环境分析、食品安全、农药残留、公共安全卫生和医疗检测领域有所应用。目前，这些领域的现场分析检测样品量大，时效性强，对检测技术的要求更为快速、简单、高通量。然而，SERS在应用于复杂体系的分析过程中，如何消除样品基质干扰已经成为SERS实际应用亟待解决的问题，原因是SERS增强粒子在复杂的基质环境中容易团聚或者发生其他物理化学变化，导致SERS灵敏度和准确度大大下降。

高灵敏度的SERS检测需要发展与之适配的样品前处理技术，将待测物与基质分离和富集，目前的样品前处理分离富集技术主要有固相(微)萃取、液液萃取、磁珠萃取、顶空萃取、分子印迹、薄层色谱等。虽然这些前处理技术的发展和应用提高了SERS检测的准确度，但目前大部分样品前处理技术一次只能处理一个或者几个样品，此外，这些前处理过程相对复杂、耗时，并且处理样品的通量小，方法所需的器件体积庞大，不便于携带到现场结合SERS进行现场实时快速检测分析。针对这些问题，申请人已经申请专利(CN108333034A)一种用于表面增强拉曼光谱检测的气膜分离样品前处理装置。有效的解决了上述问题，但是对于样品的前处理技术，分离、富集以及SERS检测过程是独立的过程，无法一体化，这样的处理过程仍是相对复杂。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的缺点和不足，提供一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置及应用，该装置将分离和富集集成一体化，装置结构简单、通量高、体积小、便于携带至现场进行实时检测。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，包括加热系统和原位分离富集装置；所述加热系统包括加热板，所述原位分离富集装置设置于所述加热板上；所述原位分离富集装置包括至少一个样品检测单元，所述每个样品检测单元包括用于容纳待测样品或待分析物质标准液的样品腔、与样品腔同心设置并位于样品腔外边缘的内环隔离槽、分离膜和接收液；所述分离膜贴合覆盖所述样品腔和内环隔离槽，所述分离膜边缘至内环隔离槽外边缘设置有超疏水区；所述接收液滴加于所述分离膜上，并使接收液处于内环隔离槽外。

相对于现有技术，本发明的用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，适用于复杂体系的痕量分析，本发明所述的装置能实现分离-富集一体化，并具有多个样品检测单元。可将待分析物质气化，利用沸点差异实现目标物与基体的完全分离，穿过分离富集装置中的分离膜，被置于膜上的吸收液吸收；经过相应的衍生化处理后，由于内环隔离槽以及超疏水区的设置，将分离后的待测物通过分离富集装置的环线加热后，待测物和拉曼增强粒子富集于环线，形成咖啡环，提高表面增强拉曼光谱检测的灵敏度。并且，所述装置结构简单、通量高、体积小便于携带至现场进行实时检测。

进一步地，所述样品检测单元在原位检测装置上呈阵列分步。

进一步地，所述的原位分离装置材质是阳极氧化铝金属，所述加热板为控温加热板。原位分离装置为金属材料，导热迅速。

进一步地，所述的分离膜为防水透气膜，所述超疏水区为分离膜边缘经浸润超疏水处理形成。

进一步地，所述的分离膜具有与所述内环隔离槽和样品腔可拆卸式固定的贴条；所述内环隔离槽外设置有划痕。设置划痕的目的是为了分离膜与内环隔离槽贴合方便，使得圆形的分离膜与内环隔离槽装置圆心重合。贴条可以使分离膜更牢固地贴合于内环隔离槽口，可拆卸式固定使分离膜撕取更方便。

进一步地，所述接收液中含有待分析物质的衍生化试剂。在一些待分析物质不具有表面增强拉曼光谱响应时，需要通过衍生化反应使得分析物质具有表面增强拉曼光谱响应。

本发明还提供一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置的应用，包括以下步骤：

1)样品预处理：取待测样品，配置一系列不同浓度的待分析物质的标准液；

2)待测样品及待分析物质的标准液气化处理：开启加热板的加热模式，分别将待测样品及待分析物质的标准液通过分离富集装置使得待分析物质与基体分离，气体透过边缘处经浸润超疏水处理防水透气膜，被顶部的接收液吸收，停止加热；

3)成环富集：向步骤2)处理后的一系列接收液中加入相同量的增强粒子，然后通过调节加热板温度，将接收液挥发干后形成咖啡环；

4)标准曲线的绘制：分别取一系列不同浓度的标准液的接收液，经过经步骤2)和步骤3)处理的后用拉曼仪检测咖啡环，读取待分析物质特征拉曼位移处的峰面积，绘制特征拉曼位移处的峰面积-待分析物质含量标准曲线；

5)样品浓度的测定：量取与步骤4)中相同体积的待测样品的接收液，经步骤2)和步骤3)处理的后用拉曼仪检测，检测条件与步骤4)相同，读取待分析物质特征拉曼位移处的峰面积，对照特征拉曼位移处的峰面积-待分析物质含量标准曲线，得到待测样品中待分析物质的含量。

进一步地，当目标待测物是易挥发物质，所述待分析物质即目标待测物，步骤1)中待分析物质的标准液是目标待测物标准液，步骤2)中待测样品及待分析物质的标准液在加热作用下，直接通过分离富集装置使得待分析物质与基体分离。

进一步地，当目标待测物是不易挥发物质，步骤2)需要向待测样品或待分析物质的标准液中加入反应剂使待目标待测物转化为挥发性待测物，再通过分离富集装置使得该挥发性待测物与基体分离，步骤1)中待分析物质的标准液是转化后的挥发性待测物对应的标准液。

进一步地，当待分析物质不具有表面增强拉曼光谱响应时，所述步骤2)中待测样品及待分析物质的标准液挥发气化完全后，停止加热，再向接收液中加入衍生化试剂，使待分析物质发生衍生化反应转化成强表面增强拉曼响应的物质。

本发明通过物理或者化学作用，使得挥发性的目标待测物挥发透过分离膜，或者使一些不挥发的目标待测物转化为挥发的待测物，被接收液所吸收；对于不具有表面增强拉曼光谱响应的待分析物质再通过衍生化手段使得之转化为强表面增强拉曼响应的物质进行检测。

本发明的有益效果是：

(1)相对于现有技术，本发明的用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置，适用于复杂体系的痕量分析，本发明所述的装置能实现分离-富集一体化，并具有多个样品检测单元。可将待分析物质气化，利用沸点差异实现目标物与基体的完全分离，穿过富集系统中的分离膜，被置于膜上的吸收液吸收。经过相应的衍生化处理后，通过富集系统的环线加热后待测物和拉曼增强粒子富集于环线，形成咖啡环，提高表面增强拉曼光谱检测的灵敏度。并且，所述装置结构简单、通量高、体积小便于携带至现场进行实时检测；

(2)相对于现有技术，本发明所述的装置的应用范围广泛，可应用于易挥发目标待测物或者特定条件下可以转化为易挥发目标物的高通量实时快速分析，例如可以用于体液中的痕量待测物分析：唾液样品中的硫化氢和尿液样品中肌氨酸分析。

为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。

附图说明

图1是本发明的用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置的结构示意图；

图2是本发明的用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置的成环过程图；

图3是本发明的原位分离富集装置的俯视图；

图4是本发明的样品检测单元(无分离膜)的横剖面图；

图5是本发明的样品检测单元(无分离膜)的纵剖面图；

图6是用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置成环效果实物图(a)和拉曼成像图(b)；

图7是表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置分析唾液中硫化氢含量的拉曼光谱及标准曲线；

图8是表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置分析尿液中肌氨酸含量的拉曼光谱及标准曲线。

图中，1、加热板；2、原位分离富集装置；3、分离膜；4、超疏水区；5、样品腔；6、内环隔离槽；7、样品液；8、接收液；9、拉曼增强粒子；10、待测物。

具体实施方式

为更进一步阐述本发明以达成预定发明目的所采取的技术手段及其技术效果，以下结合实施例和附图，对本发明提出的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置的结构、特征及其具体实施方式进行说明，详细说明如下。

请参阅图1，其是本发明的用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置的结构示意图，包括加热系统和原位分离富集装置2，加热系统包括加热板1，所述原位分离富集装置2设置于所述加热板1上。所述原位分离富集装置2为一体化装置，且包括至少一个样品检测单元，所述样品检测单元包括用于容纳待测样品或待分析物质标准液的样品腔5、与样品腔同心设置并位于样品腔的外边缘的内环隔离槽6、分离膜3和接收液8。所述内环隔离槽和样品腔之间留有一定的距离。所述分离膜3在样品液7加入样品腔5后贴合覆盖所述样品腔5和内环隔离槽6，所述分离膜边缘至内环隔离槽6外边缘设置有超疏水区4；所述接收液8滴加于所述分离膜3上，并使接收液处于内环隔离槽外。

优选的，所述原位分离富集装置2是阳极氧化铝金属，具体为具有一定厚度的金属板，所述加热板为控温加热板。可根据实际情况控制加热温度。

优选的，分离膜3为防水透气膜，边缘至内环隔离槽6外边缘处经浸润超疏水处理，形成超疏水区4。另外，分离膜3具有与样品腔5和内环隔离槽可拆卸式固定的贴条。贴条可以使分离膜更牢固地贴合于内环隔离槽口，可拆卸式固定使分离膜3撕取方便。所述内环隔离槽6外设置有划痕。设置划痕的目的是为了分离膜与内环隔离槽贴合方便，使得圆形的分离膜与内环隔离槽和样品腔圆心重合。

具体的，请参阅图3-图5，图3是本发明的分离富集装置的俯视图；图4是本发明的样品检测单元的横剖面图；图5是本发明的样品检测单元的纵剖面图；如图3所示，本发明所设计的原位分离富集装置为一长方体，其长×宽×高(L3×L4×L6)为55.0mm×30.0mm×12.0mm。所述样品检测单元在原位分离富集装置呈阵列分步，具体个数可根据实际情况加工。在本发明中，所述原位分离富集装置设置8个样品检测单元，呈2×4阵列分布，每个样品检测单元之间的圆心距L5为12.0mm。所述内环隔离槽的边缘距原位分离富集装置左右侧边的距离L1为5.0mm，距装置上下侧边的距离L2为4.5mm。

具体的，所述内环隔离槽6为环形结构，其深度小于样品腔的深度，所述内环隔离槽6设置在样品腔外边缘0.5mm处，所述内环隔离槽深度L8为2.0mm，环宽D2为2.0mm。中间样品腔5的直径D1为3.0mm，深度L7为10.0mm，样品腔的厚度以及划痕与内环隔离槽的距离D3均为0.5mm。这样设置的目的是：一、样品腔与分离膜接触的加热面为内外环形式，使得加热模式为内外环加热，更有利于咖啡环的形成；二、划痕的设置是为了分离膜与内环隔离槽贴合方便，使得圆形的分离膜与内环隔离槽装置圆心重合。

本发明的原位分离检测装置，不同于现有技术，样品腔和内环隔离槽都是在金属材料上加工成形，当用加热板进行加热时，样品腔受热更加快速、均匀，且气化的样品被接收液吸收，再次通过加热，由于内环隔离槽和疏水区的设置使得样品富集成环，进而提高检测的灵敏度。

在一些待分析物质不具有表面增强拉曼光谱响应时，接收液8中还含有待分析物质的衍生化试剂。

加入拉曼增强纳米粒子9后通过调节加热板1温度，将接收液挥发干后可形成咖啡环，实验样品的富集。

下面通过实施例来具体说明本发明的用于表面增强拉曼光谱痕量分析的分离富集装置的使用方法及应用。

实施例1

为了进一步说明本发明，本实施例详细说明采用表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置成环效果。在本实施例中，以亚甲基蓝为拉曼信号分子，展现样品原位分离富集装置富集成环效果，具体的，包括以下步骤：

(1)分离膜边缘超疏水化预处理：本施例中，我们采用膨松聚四氟乙烯防水透气膜(e-PTFE)作为分离膜。首先用较小的分离膜盖住目标分离膜，保证中心区域不被超疏水化。然后在未覆盖的区域涂抹超疏水润滑剂，本施例中，我们采用杜邦101超疏水润滑剂。最后擦去多余的润滑剂，去掉较小的分离膜。

(2)成环富集：在边缘超疏水处理的分离膜上滴加80μL 20ng/mL亚甲基蓝水溶液，再加入10μL金溶胶拉曼增强粒子(约1.5×10^-3mol/L)。控温板温度调节至70℃，溶液完全挥发干后停止加热，形成咖啡环处可用拉曼仪进行检测。如图2所示。

请参阅图6，其是用于表面增强拉曼光谱复杂体系痕量分析的原位分离富集装置成环效果实物图(a)和拉曼成像图(b)。本施例中采用的拉曼成像仪器为XpolRa-Horiba科技公司的共聚焦显微拉曼成像仪，激发波长为785nm。

实施例2

为了进一步说明本发明，本实施例详细说明采用表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置于唾液中硫化氢的检测应用。在本实施例中，待分析物质即目标待测物是硫化氢，所述接收液8内置有80μL的100μg/mL的N,N-二甲基对苯二胺溶液(0.1mol/L的HCl为溶剂)。具体的，包括以下几个步骤：

(1)样品预处理：取唾液样品；配置一系列不同浓度的硫化氢标准液。

(2)样品及标准液气化处理：分别将样品及标准液通过原位分离富集装置使得待测物10与基体分离，透过分离膜，被顶部的接收液吸收后进行衍生化处理。分别量取30μL唾液样品及30μL一系列不同浓度的硫化氢标准液加入样品腔5中，加入5μL 20％H₃PO₄溶液(v/v)，贴上边缘超疏水化的分离膜3。打开供电单元电源，调节加热温度至60℃，使加热板1对样品腔5加热，进而使唾液样品中的硫化氢及标准液中的硫化氢挥发，并且穿透过分离膜3，被接收液8吸收。待样品及标准液挥发气化完全后，停止加热。然后向接收液8中加入10μL5mol/L HCl溶液和5μL 3.0mg/mL的FeCl₃溶液(0.1mol/L的HCl水溶液为溶剂)，反应10min，待测。

(3)成环富集：步骤(2)中的接收液中加入10μL金溶胶(约1.5×10^-3mol/L)，控温板温度调节至70℃，溶液完全挥发干后停止加热，形成咖啡环处可用拉曼仪进行检测。

(4)标准曲线的绘制：分别量取30μL一系列不同浓度的硫化氢标准液的于原位分离富集装置中的样品腔中，经步骤(2)和步骤(3)处理的后用拉曼仪检测咖啡环，并读取452cm^-1拉曼位移处的峰面积，绘制452cm^-1拉曼位移处的峰面积-硫化氢含量标准曲线。所述拉曼仪为XpolRa-Horiba科技公司的共聚焦显微拉曼成像仪，激发波长为785nm，积分时间为5s。

(5)样品浓度的测定：量取30μL唾液样品液于原位分离富集装置的样品腔中，经步骤(2)和步骤(3)处理的后用拉曼仪检测，检测条件与步骤(4)相同，读取452cm^-1拉曼位移处的峰面积，对照452cm^-1拉曼位移处的峰面积-硫化氢含量标准曲线，得到唾液样品中硫化氢的含量。

请参阅图4，其是表面增强拉曼光谱复杂体系痕量分析的原位分离富集装置分析唾液中硫化氢含量的拉曼光谱及标准曲线。线性范围为1.0-20.0ng/mL(RSD＝5.4％)，检出限为0.2ng/mL。从图中可计算得出，唾液样品中硫化氢的含量为8.6ng/mL。

实施例5

为了进一步说明本发明，为了进一步说明本发明，本实施例详细说明采用表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置于尿液中肌氨酸的检测应用。在本实施例中，目标待测物是肌氨酸，待分析物质是甲醛，所述接收液8内置有80μL的100μg/mL的3-甲基-苯并噻唑腙水溶液。具体的，包括以下几个步骤：

(1)样品预处理：取尿液样品；配置一系列不同浓度的肌氨酸标准液。

(2)样品及标准液气化处理：分别将样品及标准液通过原位分离富集装置使得待测物与基体分离，透过分离膜，被顶部的接收液吸收后进行衍生化处理。分别量取30μL尿液样品及30μL一系列不同浓度的肌氨酸标准液加入样品腔5中，加入10μL、pH＝8.0、0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液和10μL 10U/mL肌氨酸氧化酶，贴上边缘超疏水化的分离膜3。打开供电单元电源，调节加热温度至40℃，使加热板1对样品腔5加热，进而使尿液样品中及标准液中的肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甲醛挥发，并且穿透过分离膜3，被接收液8吸收。待样品及标准液挥发气化完全后，停止加热。然后向接收液8中加入5μL10mg/mL的硫酸铁铵溶液(0.1mol/L的HCl水溶液为溶剂)，反应15min，待测。

(3)成环富集：步骤(2)中的接收液中加入10μL金溶胶(约1.5×10^-3mol/L)，控温板温度调节至70℃，溶液完全挥发干后停止加热，形成咖啡环处可用拉曼仪进行检测。

(4)标准曲线的绘制：分别量取30μL一系列不同浓度的肌氨酸标准液的于原位分离富集装置中的样品腔中，经步骤(2)和步骤(3)处理的后用拉曼仪检测咖啡环，并读取1275cm^-1拉曼位移处的峰面积，绘制1275cm^-1拉曼位移处的峰面积-肌氨酸含量标准曲线。所述拉曼仪为XpolRa-Horiba科技公司的共聚焦显微拉曼成像仪，激发波长为785nm，积分时间为2s。

(5)样品浓度的测定：量取30μL尿液样品液于原位分离富集装置的样品腔中，经步骤(2)和步骤(3)处理的后用拉曼仪检测，检测条件与步骤(4)相同，读取1275cm^-1拉曼位移处的峰面积，对照1275cm^-1拉曼位移处的峰面积-肌氨酸含量标准曲线，得到尿液样品中肌氨酸的含量。

请参阅图5，其是表面增强拉曼光谱复杂体系痕量分析的原位分离富集装置分析尿液中肌氨酸含量的拉曼光谱及标准曲线。线性范围为20-100ng/mL(RSD＝6.7％)，检出限为5.0ng/mL。从图中可计算得出，唾液样品中肌氨酸的含量为49.2ng/mL。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，其特征在于：包括加热系统和原位分离富集装置；所述加热系统包括加热板，所述原位分离富集装置设置于所述加热板上；所述原位分离富集装置包括至少一个样品检测单元，每个所述样品检测单元包括用于容纳待测样品或待分析物质标准液的样品腔、与样品腔同心设置并位于样品腔外边缘的内环隔离槽、分离膜和接收液；

所述分离膜贴合覆盖所述样品腔和内环隔离槽，所述分离膜边缘至内环隔离槽外边缘设置有超疏水区；所述接收液滴加于所述分离膜上，并使接收液处于内环隔离槽外；所述的分离膜为防水透气膜；所述超疏水区为分离膜边缘经浸润超疏水处理形成。

2.根据权利要求1所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，其特征在于：当所述样品检测单元为多个时，所述样品检测单元在原位分离装置上呈阵列分布。

3.根据权利要求1所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，其特征在于：所述的原位分离装置材质是阳极氧化铝金属，所述加热板为控温加热板。

4.根据权利要求1所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，其特征在于：所述的分离膜具有与所述内环隔离槽和样品腔可拆卸式固定的贴条；所述内环隔离槽外设置有划痕。

5.根据权利要求1所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置，其特征在于：所述接收液中含有待分析物质的衍生化试剂。

6.根据权利要求1所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置的应用，其特征在于：包括以下步骤：

1）样品预处理：取待测样品，配置一系列不同浓度的待分析物质的标准液；

2）待测样品及待分析物质的标准液气化处理：开启加热板的加热模式，分别将待测样品及待分析物质的标准液通过分离富集装置使得待分析物质与基体分离，气体透过边缘处经浸润超疏水处理防水透气膜，被顶部的接收液吸收，停止加热；

3）成环富集：向步骤2）处理后的一系列接收液中加入相同量的增强粒子，然后通过调节加热板温度，将接收液挥发干后形成咖啡环；

4）标准曲线的绘制：分别取一系列不同浓度的标准液的接收液，经过经步骤2）和步骤3）处理的后用拉曼仪检测咖啡环，读取待分析物质特征拉曼位移处的峰面积，绘制特征拉曼位移处的峰面积-待分析物质含量标准曲线；

5）样品浓度的测定：量取与步骤4）中相同体积的待测样品的接收液，经步骤2）和步骤3）处理的后用拉曼仪检测，检测条件与步骤4）相同，读取待分析物质特征拉曼位移处的峰面积，对照特征拉曼位移处的峰面积-待分析物质含量标准曲线，得到待测样品中待分析物质的含量。

7.根据权利要求6所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置的应用，其特征在于：当目标待测物是易挥发物质，所述待分析物质即目标待测物，步骤1）中待分析物质的标准液是目标待测物标准液，步骤2）中待测样品及待分析物质的标准液在加热作用下，直接通过分离富集装置使得待分析物质与基体分离。

8.根据权利要求6所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置的应用，其特征在于：当目标待测物是不易挥发物质，步骤2）需要向待测样品或待分析物质的标准液中加入反应剂使待目标待测物转化为挥发性待测物，再通过分离富集装置使得该挥发性待测物与基体分离，步骤1）中待分析物质的标准液是转化后的挥发性待测物对应的标准液。

9.根据权利要求6所述的一种用于表面增强拉曼光谱痕量分析的原位分离富集装置的应用，其特征在于：当待分析物质不具有表面增强拉曼光谱响应时，所述步骤2）中待测样品及待分析物质的标准液挥发气化完全后，停止加热，再向接收液中加入衍生化试剂，使待分析物质发生衍生化反应转化成强表面增强拉曼响应的物质。

Images