CN109875963A - 一种头孢曲松钠注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

公开了一种头孢曲松钠注射液，包括头孢曲松钠、脂质体膜材、D‑吡喃葡萄糖酰胺；所述注射液进一步包括脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂。此外，还公开了上述头孢曲松钠注射液的制备方法。上述注射液不仅包封率较高且泄漏率较低，能够在较大程度上满足产业需求；同时能够提高肺内血药浓度，有利于治疗呼吸道感染疾病。

Description

一种头孢曲松钠注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域；涉及一种头孢曲松钠注射液及其制备方法，更具体地，涉及一种头孢曲松钠脂质体注射液及其制备方法。

背景技术

头孢曲松钠的化学名称为[6R[6α,7β(Z)]]-3-[[(1,2,5,6-四氢-2-甲基-5,6-二氧代-1,2,4-三嗪-3-基)硫代]甲基]-7-[[(2-氨基-4-噻唑基)(甲氧亚氨基)乙酰基]氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸二钠盐三倍半水合物，分子量661.6，属于第三代β-内酰胺类头孢菌素。该药物首先由瑞士罗氏公司研制出来，为白色或类白色结晶性粉末，原料和注射液记载于中国药典（2015年版）第二部的第252-253页。头孢曲松钠具有广谱抗菌活性，对多数革兰氏阳性菌和阴性菌具备抗菌活性。

作为注射液，现有技术中存在的主要问题是：头孢曲松钠对环境适应能力较差，在加热、pH<4.5以及pH>10等酸碱性环境下容易开环或降解，即使在中性环境中长时间放置也容易产生有关物质，尤其是一些头孢曲松钠聚合物杂质。

为了解决上述问题，东北农大刘永坤研制了头孢曲松钠的脂质体混悬液。粒径集中于30-90 nm。研究表明，在上述脂质体混悬液中，脂质体的类型主要是小单室脂质体，导致药物包封率仅在30%左右，难以进一步提高。

江苏开元医药化工有限公司和郝志艳分别在中国专利申请CN102973568A和CN10204874A中提供了一种头孢曲松钠他唑巴坦钠药物组合物脂质体注射剂。所述注射剂均由头孢曲松钠、他唑巴坦钠、脂质体膜材和冻干支持剂等辅剂制成。尽管在脂质体中，头孢曲松钠和他唑巴坦钠的包封率均达到70%以上，但头孢曲松钠和他唑巴坦钠的药代动力学行为存在差异，脂质体的存在又显著地放大了这种差异。这导致上述复方注射剂在实际使用时甚至不如普通的注射剂。

中国专利CN107095874B记载了一种小儿用头孢曲松钠注射液。原料包括作为成膜物质的氢化大豆卵磷脂和胆固醇以及单方头孢曲松钠，还包括作为成膜物质稳定剂的D-吡喃葡萄糖酰胺。该脂质体的包封率在60%以上，4℃条件下贮存10天的泄露率在10%以下。该文献还记载了D-吡喃葡萄糖酰胺的用量对包封率和泄漏率存在较大影响。然而，该专利并未说明脂质体注射液的应用情况。

发明人通过相关试验对上述注射液的药代动力学行为和动物不同组织内的血药浓度进行研究。结果表明，上述注射液能够显著延长半衰期，提高药物有效血液浓度的维持时间；但该注射液在动物肺内的血药浓度不高，导致其对肺炎杆菌等呼吸道细菌的抗菌效果不佳。

因此，迫切需要在上述注射液的基础上，进一步研究能够提高肺内血药浓度同时具有较佳包封率和泄露率的头孢曲松钠注射液及其制备方法。

发明内容

本发明目的之一是克服现有技术的不足，提供一种包封率和泄露率至少与现有技术相当且能够提高肺内血药浓度的头孢曲松钠注射液。

本发明目的之二是提供一种制备上述头孢曲松钠注射液的方法。该方法简单易行，重复性好。

为实现上述目的，一方面，本发明提供了一种头孢曲松钠注射液，包括头孢曲松钠、脂质体膜材、D-吡喃葡萄糖酰胺；其特征在于，所述注射液进一步包括脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述脂质体膜材由氢化大豆卵磷脂和胆固醇组成。

作为氢化大豆卵磷脂，化学名为1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂，简称HSPC，CAS号为92128-87-5，分子量为784；作为胆固醇，CAS号为57-88-5，分子量为387。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，氢化大豆卵磷脂与胆固醇的重量比为(2.4-4):1。

优选，氢化大豆卵磷脂与胆固醇的重量比为(2.5-3.8):1；更优选，氢化大豆卵磷脂与胆固醇的重量比为(2.7-3.5):1；以及，最优选，氢化大豆卵磷脂与胆固醇的重量比为(2.9-3.3):1。

在一个具体实施方式中，氢化大豆卵磷脂与胆固醇的重量比为3.1:1。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，头孢曲松钠与脂质体膜材的重量比为(4-6):100。

优选，头孢曲松钠与脂质体膜材的重量比为(4.2-5.8):100；更优选，头孢曲松钠与脂质体膜材的重量比为(4.4-5.4):100；以及，最优选，头孢曲松钠与脂质体膜材的重量比为(4.8-5.2):100。

在一个具体实施方式中，头孢曲松钠与脂质体膜材的重量比为5:100。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述D-吡喃葡萄糖酰胺选自D-吡喃葡萄糖C8-C18脂肪酸酰胺。

作为脂肪酸，可以为直链或支化的饱和脂肪酸；可以为单一脂肪酸，也可以为混合脂肪酸。本领域技术人员可以知晓，D-吡喃葡萄糖酰胺可以包括α型、β型或其混合物。所述残基指的是脂肪酸除COOH之外的所有基团。脂肪酸实例包括但不限于，辛酸、癸酸、月桂酸、豆蔻酸、棕榈酸、异棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、山嵛酸。有利地，所述脂肪酸为直链的饱和C8-C22脂肪酸。

优选，所述脂肪酸选自直链的饱和C8-C18脂肪酸；更优选，所述脂肪酸选自直链的饱和C8-C14脂肪酸；以及，最优选，所述脂肪酸选自直链的饱和C8-C10脂肪酸。

在一个具体实施方式中，所述D-吡喃葡萄糖酰胺选自N-(β-D-吡喃葡萄糖)辛酰胺（CAS号为134403-86-4，分子量305）。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，D-吡喃葡萄糖酰胺与脂质体膜材的重量比为(2-4):100。

优选，D-吡喃葡萄糖酰胺与脂质体膜材的重量比为(2.2-3.8):100；更优选，D-吡喃葡萄糖酰胺与脂质体膜材的重量比为(2.4-3.4):100；以及，最优选，D-吡喃葡萄糖酰胺与脂质体膜材的重量比为(2.8-3.2):100。

在一个具体实施方式中，D-吡喃葡萄糖酰胺与脂质体膜材的重量比为3:100。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自C10-C22脂肪酸烷醇酰胺。

作为脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂的实例，包括但不限于，十一碳烯酸单乙醇酰胺、月桂酸单乙醇酰胺、豆蔻酸单乙醇酰胺、椰油酸单乙醇酰胺、棕榈酸单乙醇酰胺、异棕榈酸单乙醇酰胺、硬脂酸单乙醇酰胺、异硬脂酸单乙醇酰胺、油酸单乙醇酰胺、亚油酸单乙醇酰胺、山嵛酸单乙醇酰胺、十一碳烯酸二乙醇酰胺、月桂酸二乙醇酰胺、豆蔻酸二乙醇酰胺、椰油酸二乙醇酰胺、棕榈酸二乙醇酰胺、异棕榈酸二乙醇酰胺、硬脂酸二乙醇酰胺、异硬脂酸二乙醇酰胺、油酸二乙醇酰胺、亚油酸二乙醇酰胺、山嵛酸二乙醇酰胺。

优选，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自十一碳烯酸单乙醇酰胺、月桂酸单乙醇酰胺、豆蔻酸单乙醇酰胺、椰油酸单乙醇酰胺、棕榈酸单乙醇酰胺、异棕榈酸单乙醇酰胺、硬脂酸单乙醇酰胺、异硬脂酸单乙醇酰胺、油酸单乙醇酰胺、亚油酸单乙醇酰胺、山嵛酸单乙醇酰胺；更优选，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自月桂酸单乙醇酰胺、豆蔻酸单乙醇酰胺、棕榈酸单乙醇酰胺、异棕榈酸单乙醇酰胺、硬脂酸单乙醇酰胺、异硬脂酸单乙醇酰胺、油酸单乙醇酰胺、亚油酸单乙醇酰胺；以及，最优选，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自月桂酸单乙醇酰胺、豆蔻酸单乙醇酰胺、棕榈酸单乙醇酰胺、硬脂酸单乙醇酰胺、油酸单乙醇酰胺。

在一个具体实施方式中，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自月桂酸单乙醇酰胺。

根据本发明所述的头孢曲松钠注射液，其中，脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂与脂质体膜材的重量比为(5-7):100。

优选，脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂与脂质体膜材的重量比为(5.2-6.8):100；更优选，脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂与脂质体膜材的重量比为(5.4-6.4):100；以及，最优选，脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂与脂质体膜材的重量比为(5.8-6.2):100。

在一个具体实施方式中，脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂与脂质体膜材的重量比为6:100。

另一方面，本发明还提供了制备上述头孢曲松钠注射液的方法，所述方法包括下列步骤：

i) 称量头孢曲松钠、脂质体膜材、D-吡喃葡萄糖酰胺和脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂，将上述混合物用有机溶剂溶解；

ii) 向其中加入包含头孢曲松钠的水化介质，超声使混合体系成为均相体系；

iii) 减压蒸发除去有机溶剂直至形成凝胶，加入水化介质进行水化反应，然后继续减压蒸发5-30分钟；

iv) 超声后静置，得到上述头孢曲松钠注射液。

根据本发明所述的方法，所述有机溶剂选自乙醚、氯仿、乙醇、甲醇或其混合物。优选地，所述有机溶剂选自乙醚、氯仿、乙醇或其混合物；更优选地，所述有机溶剂选自乙醚、氯仿或其混合物；以及，最优选地，所述有机溶剂选自乙醚或乙醚和氯仿的混合物。

在一个优选的实施方式中，所述有机溶剂选自乙醚/氯仿1：1的混合物。

根据本发明所述的方法，所述有机溶剂与水化介质总量的体积比为2∶1至12∶1。优选地，所述有机溶剂与水化介质总量的体积比为2∶1至10∶1；更优选地，所述有机溶剂与水化介质总量的体积比为3∶1至8∶1；以及最优选地，所述有机溶剂与水化介质总量的体积比为3∶1至6∶1。

在一个优选的实施方式中，所述有机溶剂与水化介质总量的体积比为4∶1。

根据本发明所述的方法，所述水化介质选自pH值为4.5-7.0的酸性缓冲液。优选地，所述水化介质选自pH值为5.0-7.0的酸性缓冲液；更优选地，所述水化介质选自pH值为5.5-7.0的酸性缓冲液；以及最优选地，所述水化介质选自pH值为5.5-6.5的酸性缓冲液。

在一个优选的实施方式中，所述水化介质选自pH值为5.5的PBS缓冲液。

根据本发明所述的方法，所述水化反应条件为：温度为20-50 ^oC，水化时间为1-5h。优选地，所述水化反应条件为：温度为20-40 ^oC，水化时间为1.5-4.5 h；更优选地，所述水化反应条件为：温度为20-35 ^oC，水化时间为2-4 h；以及，最优选地，所述水化反应条件为：温度为20-30 ^oC，水化时间为2-3 h。

在一个优选的实施方式中，所述水化反应条件为：温度为25 ^oC，水化时间为2 h。

根据本发明所述的方法，所述静置条件为：温度为4-30 ^oC，时间为1-24 h。优选地，所述静置条件为：温度为4-20 ^oC，时间为1-8 h；更优选地，所述静置条件为：温度为4-15 ^oC，时间为1-6 h；以及，最优选地，所述静置条件为：温度为4-10 ^oC，时间为1-4 h。

在一个优选的实施方式中，所述静置条件为：温度为4 ^oC，时间为2 h。

发明人发现，在脂质体膜材中同时加入特定比例的D-吡喃葡萄糖酰胺和脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂，既能够使头孢曲松钠药物的包封率和泄露率与现有技术相当，同时又能够提高肺内血药浓度。

不希望局限于任何理论，本发明所使用的D-吡喃葡萄糖酰胺和脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂均具有双亲表面活性性质。二者对头孢曲松钠药物的包封率和泄露率均有贡献，同时，后者又能够提高肺内血药浓度。

与现有技术相比，本发明具有下列有益技术效果：

i) 本发明的头孢曲松钠注射液不仅包封率较高且泄漏率较低，能够在较大程度上满足产业需求。

ii) 本发明的头孢曲松钠注射液能够提高肺内血药浓度，有利于治疗呼吸道感染疾病。

具体实施方式

实施例1：

称量氢化大豆卵磷脂3.4 g、胆固醇1.1 g、N-(β-D-吡喃葡萄糖)辛酰胺0.135 g和月桂酸单乙醇酰胺0.27 g，将上述混合物用120 mL乙醚/氯仿1：1混合物溶解；向其中加入包含0.225 g头孢曲松钠的20 mL pH值为5.5的PBS缓冲液，超声使混合体系成为均相体系；减压蒸发除去有机溶剂直至形成凝胶，加入10 mL pH值为5.5的PBS缓冲液进行水化反应，温度为25 ^oC，水化时间为2 h；然后继续减压蒸发20分钟；超声后在温度为4 ^oC条件下静置2 h，得到上述头孢曲松钠注射液。

按照CN107095874B记载的条件进行包封率和泄露率测试，结果表明，其包封率为72.6%，泄露率为7.1%。相关技术指标与CN107095874B实施例1-3相当。

比较例1：

同CN107095874B的实施例1，但头孢曲松钠用量为0.225g。

应用实施例

使用体重20±5g的健康小鼠作为试验对象，分为三组（实施例1、比较例1和0.75%的原料药注射液）；分别为实施例1、比较例1；在注射后不同时间段（30 min、1 h、2 h、4 h）对小鼠眼眶采血；取少量血浆加入乙腈离心后取上清液分析。小鼠组织（心、肾、肝和肺）在不同时间段取出，精密称重后加入生理盐水进行组织匀浆，然后取少量组织浆液加入乙腈离心后取上清液分析。分别针对血浆和组织匀浆建立标准曲线回归方程，并验证其回收率和精密度良好，符合要求。相关结果如表1所示：

表1

表1中，T实施例1和T比较例1分别定义为相应的脂质体注射液与原料药注射液的AUC比值。

可以看出，相对于比较例1而言，本发明的脂质体注射液肺内血药浓度至少高出一半以上；同时肾和肝中的血药浓度显著降低。上述结果表明，本发明的脂质体注射液包封率和泄露率至少与现有技术相当，且能够提高肺内血药浓度，从而有利于治疗呼吸道感染疾病。

发明人认为，这是因为D-吡喃葡萄糖酰胺和脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂均具有双亲表面活性性质。二者对头孢曲松钠药物的包封率和泄露率均有贡献，同时，后者又能够提高肺内血药浓度，从而取得了意料不到的效果。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种头孢曲松钠注射液，包括头孢曲松钠、脂质体膜材、D-吡喃葡萄糖酰胺；其特征在于，所述注射液进一步包括脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂。

2.根据权利要求1所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述脂质体膜材由氢化大豆卵磷脂和胆固醇组成。

3.根据权利要求2所述的头孢曲松钠注射液，其中，氢化大豆卵磷脂与胆固醇的重量比为(2.4-4):1。

4.根据权利要求1所述的头孢曲松钠注射液，其中，头孢曲松钠与脂质体膜材的重量比为(4-6):100。

5.根据权利要求1所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述D-吡喃葡萄糖酰胺选自D-吡喃葡萄糖C8-C18脂肪酸酰胺。

6.根据权利要求5所述的头孢曲松钠注射液，其中，D-吡喃葡萄糖酰胺与脂质体膜材的重量比为(2-4):100。

7.根据权利要求1所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自C10-C22脂肪酸烷醇酰胺。

8.根据权利要求7所述的头孢曲松钠注射液，其中，所述脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂选自十一碳烯酸单乙醇酰胺、月桂酸单乙醇酰胺、豆蔻酸单乙醇酰胺、椰油酸单乙醇酰胺、棕榈酸单乙醇酰胺、异棕榈酸单乙醇酰胺、硬脂酸单乙醇酰胺、异硬脂酸单乙醇酰胺、油酸单乙醇酰胺、亚油酸单乙醇酰胺、山嵛酸单乙醇酰胺、十一碳烯酸二乙醇酰胺、月桂酸二乙醇酰胺、豆蔻酸二乙醇酰胺、椰油酸二乙醇酰胺、棕榈酸二乙醇酰胺、异棕榈酸二乙醇酰胺、硬脂酸二乙醇酰胺、异硬脂酸二乙醇酰胺、油酸二乙醇酰胺、亚油酸二乙醇酰胺、山嵛酸二乙醇酰胺。

9.根据权利要求7所述的头孢曲松钠注射液，其中，脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂与脂质体膜材的重量比为(5-7):100。

10.一种制备权利要求1-9任一项所述头孢曲松钠注射液的方法，所述方法包括下列步骤：

i) 称量头孢曲松钠、脂质体膜材、D-吡喃葡萄糖酰胺和脂肪酸烷醇酰胺类表面活性剂，将上述混合物用有机溶剂溶解；

ii) 向其中加入包含头孢曲松钠的水化介质，超声使混合体系成为均相体系；

iii) 减压蒸发除去有机溶剂直至形成凝胶，加入水化介质进行水化反应，然后继续减压蒸发5-30分钟；

iv) 超声后静置，得到上述头孢曲松钠注射液。