CN109867706A - 一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：S1，取新鲜的灯盏花植株；S2，将洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中；S3，将纤维素酶灭活；S4，将S3加入到乙醇溶液中，升温回流，同时对乙醇溶液进行超声处理；S5，将S4中回收的醇液调节pH至6‑7，静置5‑8h，然后再将pH调至1‑2，静置3‑5h；S6，对S5中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；S7，将灯盏花素的粗结晶放入到乙醇溶液中，升温，调节pH，静置；S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温，调节pH，静置；S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合、烘干。

Description

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法

技术领域

本发明属于提取技术领域，涉及一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法。

背景技术

灯盏花中国植物志正名为短葶飞蓬，系菊科，飞蓬属多年生草本植物，木质根状茎，斜升或横走，高可达50厘米，根纤维状，叶主要集中于基部，密集，莲座状，花期生存，倒卵状披针形或宽匙形，顶端钝或圆形，基部渐狭，两面被密或疏，边缘被较密的短硬毛，茎叶少数，狭长圆状披针形或狭披针形，头状花序，单生于茎或分枝的顶端，总苞半球形，总苞片线状披针形，长于花盘或与花盘等长，舌片开展，蓝色或粉紫色，中央的两性花管状，黄色，裂片无毛；花药伸出花冠。该种俗称灯盏花或灯盏细辛，主治小儿疳积、小儿麻痹及脑膜炎的后遗症、牙痛、小儿头疮等有效。

其中，灯盏花乙素就是灯盏花中比较重要的有效成分之一，但是目前市场上的对灯盏花乙素的提取方法普遍存在提取率较低的情况。

发明内容

本发明的目的在于提供一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，旨在解决灯盏花乙素提取率低的问题。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，静置1-2h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温；

S4，将S3加入到体积分数为50％-70％的乙醇溶液中，升温至60-75℃，回流3-4次，同时对乙醇溶液进行超声处理，其中乙醇溶液与灯盏花的比为2-5L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至6-7，静置5-8h，然后再将pH调至1-2，静置3-5h；

S6，对S5中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为50％-70％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为10-20L/kg，升温至60-70℃，调节pH至6-7，静置4-5h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至60-70℃，调节pH至1-2，静置3-4h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，并烘干。

本发明进一步设置为，对所述S2中的溶液进行超声处理。

本发明进一步设置为，所述S3中对纤维素酶的灭活方式为低温灭活。

本发明进一步设置为，所述S3中对纤维素酶的灭活方式为紫外线灭活。

本发明进一步设置为，所述S4中在进行回流时，乙醇溶液处于负压状态。

本发明进一步设置为，所述S2中添加有缓冲剂。

本发明进一步设置为，所述缓冲剂为碳酸氢钠。

本发明进一步设置为，所述S6中为负压烘干。

本发明进一步设置为，所述S9中为负压烘干。

与现有技术相比，本发明提供了一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，具体来说是对灯盏花中灯盏乙素的提取方法，首先是通过纤维素酶将灯盏花的细胞壁进行分解，从而使得灯盏花细胞内的各种物质能够更为彻底的流出；再后来在超声条件下通过乙醇溶液对灯盏花素进行反复的溶解、过滤以及烘干析出，并最终得到精制的灯盏花素，同时也得到了精制的灯盏花乙素。

在这个提取纯化的过程中，通过纤维素酶能够最大程度上将灯盏花细胞破碎，并使得细胞内的物质流出，可以提高灯盏花素的流出率；同时在通过乙醇溶液对灯盏花素进行溶解的时候，超声的作用可以加快灯盏花素分子的震动，并更好的与原组织中的成分分离，并溶解到乙醇溶液中，提高了灯盏花素以及灯盏花乙素的提取率。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明提出的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法作进一步详细说明。根据下面说明和权利要求书，本发明的优点和特征将更清楚。

实施例1

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎；

S3，将S2加入到体积分数为70％的乙醇溶液中，升至恒温60℃，回流4次，其中乙醇溶液与灯盏花的比为5L/kg；

S4，将S5中回收的醇液调节pH至6，静置8h，然后再将pH调至1，静置5h；

S5，对S4中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S6，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为50％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为20L/kg，升温至60℃，调节pH至7，静置4h；

S7，对S6中的溶液进行过滤，滤液升温至70℃，调节pH至1，静置4h；

S8，对S7再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，并烘干得到精制灯盏花素。

实施例2

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，静置1h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温，其中灭活方式为低温灭活；

S4，将S3加入到体积分数为50％的乙醇溶液中，升温至75℃，回流3次，其中乙醇溶液与灯盏花的比为2L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至7，静置5h，然后再将pH调至2，静置3h；

S6，对S5中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为70％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为10L/kg，升温至70℃，调节pH至6，静置5h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至60℃，调节pH至2，静置3h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，并烘干得到精制灯盏花素。

实施例3

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，静置1.5h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温，其中灭活方式为紫外线灭活；

S4，将S3加入到体积分数为60％的乙醇溶液中，升温至65℃，回流3次，同时对乙醇溶液进行超声处理，其中乙醇溶液与灯盏花的比为3L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至6.5，静置7h，然后再将pH调至1.5，静置4h；

S6，对S5中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为60％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为15L/kg，升温至65℃，调节pH至6.5，静置4.5h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至65℃，调节pH至1.5，静置3.5h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，并烘干等到精制灯盏花素。

实施例4

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，静置1h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温，其中灭活方式为紫外线灭活；

S4，将S3加入到体积分数为50％的乙醇溶液中，升温至70℃，在负压条件下回流4次，同时对乙醇溶液进行超声处理，其中乙醇溶液与灯盏花的比为5L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至6，静置6h，然后再将pH调至2，静置5h；

S6，对S5中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为65％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为15L/kg，升温至60℃，调节pH至7，静置5h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至60℃，调节pH至1.5，静置3h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，并烘干得到精制灯盏花素。

实施例5

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，静置2h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温，其中灭活方式为低温灭活；

S4，将S3加入到体积分数为70％的乙醇溶液中，升温至75℃，负压状态下回流4次，同时对乙醇溶液进行超声处理，其中乙醇溶液与灯盏花的比为4L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至7，静置6h，然后再将pH调至1，静置5h；

S6，对S5中的醇液在负压状态下进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为70％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为18L/kg，升温至62℃，调节pH至6.5，静置4.2h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至70℃，调节pH至2，静置3h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，在负压状态下烘干得到精制灯盏花素。

实施例6

一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，同时加入缓冲剂碳酸氢钠，而且碳酸氢钠与灯盏花植株的比为0.5g/g，静置1.5h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温，其中灭活方式为低温灭活；

S4，将S3加入到体积分数为55％的乙醇溶液中，升温至65℃，回流4次，同时对乙醇溶液进行超声处理，其中乙醇溶液与灯盏花的比为3L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至6-7，静置5-8h，然后再将pH调至1.5，静置3.5h；

S6，对S5中的醇液在负压状态下进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为55％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为12L/kg，升温至70℃，调节pH至6.5，静置4h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至60℃，调节pH至1.5，静置3h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，在负压状态下烘干得到精制灯盏花素。

记录各个实施例中灯盏花乙素的回收率(通过高效液相外标法)，结果如下：

实施例	灯盏花乙素的回收率(％)
		实施例1	75.3
实施例2	84.9
		实施例3	88.4
实施例4	87.2
		实施例5	90.3
实施例6	92.7

通过以上数据可以看出，不仅通过纤维素酶对灯盏花进行处理后，可以提高灯盏花乙素的回收率，同时乙醇溶液在对灯盏花素进行溶解时，通过超声处理还可以进一步的提高灯盏花乙素的回收率；更进一步的，乙醇溶液在回流以及烘干过程中负压状态也可以提高灯盏花乙素的回收率。

需要说明的是，本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。

上述描述仅是对本发明较佳实施例的描述，并非对本发明范围的任何限定，本发明领域的普通技术人员根据上述揭示内容做的任何变更、修饰，均属于权利要求书的保护范围。

Claims (9)

1.一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，取新鲜的灯盏花植株，洗净并自然风干；

S2，将S1中洗净的灯盏花植株碾碎，并放入到盛装有纤维素酶的溶液中，静置1-2h；

S3，将S2中的纤维素酶灭活，灭活后恢复至室温；

S4，将S3加入到体积分数为50％-70％的乙醇溶液中，升温至60-75℃，回流3-4次，同时对乙醇溶液进行超声处理，其中乙醇溶液与灯盏花的比为2-5L/kg；

S5，将S4中回收的醇液调节pH至6-7，静置5-8h，然后再将pH调至1-2，静置3-5h；

S6，对S5中的醇液进行过滤和烘干，得到灯盏花素的粗结晶；

S7，将灯盏花素的粗结晶放入到体积分数为50％-70％的乙醇溶液中，乙醇溶液与灯盏花素粗结晶的比为10-20L/kg，升温至60-70℃，调节pH至6-7，静置4-5h；

S8，对S7中的溶液进行过滤，滤液升温至60-70℃，调节pH至1-2，静置3-4h；

S9，对S8再次进行过滤，将滤饼集中，并用乙醇溶液进行若干次洗涤，将所得溶液集中混合，并烘干。

2.根据权利要求1所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，对所述S2中的溶液进行超声处理。

3.根据权利要求1或2所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述S3中对纤维素酶的灭活方式为低温灭活。

4.根据权利要求1或2所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述S3中对纤维素酶的灭活方式为紫外线灭活。

5.根据权利要求1所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述S4中在进行回流时，乙醇溶液处于负压状态。

6.根据权利要求1所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述S2中添加有缓冲剂。

7.根据权利要求6所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述缓冲剂为碳酸氢钠。

8.根据权利要求1所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述S6中为负压烘干。

9.根据权利要求1所述的一种彝药灯盏花中有效成分的提取纯化方法，其特征在于，所述S9中为负压烘干。