CN109851592A

CN109851592A - 奥利司他衍生物

Info

Publication number: CN109851592A
Application number: CN201910074434.9A
Authority: CN
Inventors: 米婷婷; 罗怀岗; 任建东; 侯君; 张育勤; 金伟华; 陈华; 肖雯靖
Original assignee: Western Theater General Hospital of PLA
Current assignee: Western Theater General Hospital of PLA
Priority date: 2019-01-25
Filing date: 2019-01-25
Publication date: 2019-06-07
Anticipated expiration: 2039-01-25
Also published as: CN109851592B

Abstract

本发明涉及奥利司他衍生物。具体地，本发明涉及通式(Ⅰ)所示的化合物，其中R如说明书和权利要求书中所限定。通式(Ⅰ)所示的化合物可以被用作抗肿瘤以及抑制脂肪酶活性类药物。

Description

奥利司他衍生物

技术领域

本发明涉及医药技术领域。更具体地说，本发明涉及奥利司他衍生物。

背景技术

奥利司他化学名为(3S,4S)-3-己基-4-[(2S)-2-羟基十三烷基]-2-氧杂环丁酮N-甲酰基-L-亮氨酸酯，其制剂是目前全球唯一的OTC减肥药，也是唯一被美国FDA和我国食品药品监督管理局批准的减肥药。奥利司他是长效和强效的脂肪酸合成酶(FAS)抑制剂，该酶不仅是合成脂肪酸的关键酶，也在肥胖，胚胎发育，和肿瘤发展中扮演重要角色。正常情况下，FAS在脂肪生成较多的组织如脂肪组织，哺乳期女性的乳腺以及肝脏中表达较高，而在其他细胞中表达较低。2014年，Agostini M等人报道了FAS在包括黑色素瘤、卵巢癌、前列腺癌、软组织肉瘤和乳腺癌等多种恶性肿瘤中均存在过表达。FAS的这种高表达与肿瘤的形成、发展以及预后存在相关性。因此，选择性抑制FAS从而诱导肿瘤细胞凋亡，作为一个设计抗肿瘤药物的新思路吸引了大批学者的目光。我们采用计算机辅助药物设计的方法，对奥利司他进行结构修饰，以期获得抗肿瘤活性更强的新型化合物。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种奥利司他衍生物，其能够在抗肿瘤药物以及抑制脂肪酶活性方面具有更强的药理活性。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，本发明的技术方案如下：

通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐；

其中R是如下所示的取代基中的任一个：

本发明所述的奥利司他衍生物在药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐包括碱金属盐，如钠盐、钾盐、锂盐等；碱土金属盐，如钙盐、镁盐等；其他金属盐，如铝盐、铁盐、锌盐、铜盐、镍盐、钴盐等；无机碱盐，如铵盐；有机碱盐，如叔辛基胺盐、二苄基胺盐、吗啉盐、葡糖胺盐、苄基甘氨酸烷基酯盐、乙二胺盐、N-甲基葡糖胺盐、胍盐、二乙胺盐、三乙胺盐、二环己基胺盐、N-N’-二苄基乙二胺盐、氯普鲁卡因盐、普鲁卡因盐、二乙醇胺盐、N-苄基-苯乙基胺盐、哌嗪盐、四甲基胺盐、三(羟甲基)胺基甲烷盐等；氢卤酸盐，如氢氟酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等；无机酸盐，如硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐、磷酸盐等；低级烷磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、乙磺酸盐等；芳基磺酸盐，如苯磺酸盐、对苯磺酸盐等；有机酸盐，如醋酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐、马来酸盐等；氨基酸盐，如甘氨酸盐、三甲基甘氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐等。

本发明进一步要求保护用于制备所述奥利司他衍生物的方法，包括：

步骤一、以奥利司他为原料，在苄溴保护下经碱催化水解生成化合物苄基(2S,3S,5S)-2-己基-3,5-二羟基十六烷酸酯(1)；

步骤二、将化合物(1)在-78℃下与TIPSOTf反应，选择性保护5位的羟基，生成化合物苄基(2S,3S,5S)-2-己基-3-羟基-5-[(三异丙基硅基)氧基]十六烷酸酯(2)；

步骤三、将化合物(2)在N-苯基-双三氟甲磺酰亚胺作用下，经钯碳催化氢解，合环生成化合物(3S,4S)-3-己基-4-{(S)-2-[(三异丙基硅基)氧基]十三烷基}氧杂环丁烷-2-酮(3)；

步骤四、将化合物(3)在氟化氢吡啶盐的作用下脱去硅基保护，生成(3S,4S)-3-己基-4-[(S)-2-羟基十三烷基]氧杂环丁烷-2-酮(4)；

步骤五、将化合物(4)与各种羧酸在EDCI的作用下缩合形成各种奥利司他衍生物，得通式(Ⅰ)所示的化合物。

反应路线如下：

本发明进一步要求保护通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物在抗肿瘤活性药物中的应用。

本发明进一步要求保护通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物中取代基为8、11、12和22的化合物，其在脂肪酶抑制剂中的应用，以及其在治疗肥胖症或降低与肥胖相关的其他疾病中的应用，所述与肥胖相关的其他疾病包括高胆固醇血症、Ⅱ型糖尿病、糖耐量减低、高胰岛素血症、高血压、冠心病、肝病、呼吸系统疾病、肾脏病、皮肤病。

本发明进一步要求保护，通式(Ⅰ)所示奥利司他衍生物的给药方式，包括单独给药或者与一种或者多种药用载体或\和稀释剂组合后给药。

本发明进一步要求保护，通式(Ⅰ)所示奥利司他衍生物的给药方式，包括单独给药或者与一种或者多种抗炎药、抑酸剂组合给药。

本发明进一步要求保护，通式(Ⅰ)所示奥利司他衍生物的给药方式，包括单独给药或者与生长抑素组合给药。

本发明进一步要求保护，通式(Ⅰ)所示奥利司他衍生物的给药方式，包括为临床上或者药学上可接受的任一剂型，以口服、肠胃外、直肠或者经肺给药等方式施用于需要某种治疗的患者；用于口服给药时，可以制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等；制成口服制剂时，还可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等；用于肠胃外给药时，可制成注射剂，包括注射液、注射用无菌粉末以及注射用浓溶液；制成注射剂时，可采用现有制药领域中常规方法生产，配制注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂；用于直肠给药时，可制成栓剂等；用于经肺给药时，可制成吸入剂或者喷雾剂等。

本发明进一步要求保护，通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物的给药量，单次给药的生理有效量为0.01～10g。

本发明至少包括以下有益效果：一、本发明所述奥利司他衍生物具有较好的抗肿瘤活性；二、本发明所述奥利司他衍生物可以较好地抑制肥胖症及肥胖相关的其他疾病。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

实施例1

(S)-1-((2(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基4-丙烯酰胺丁酸酯的制备：

步骤一、化合物(1)的合成：

化合物(1)的结构式如下：

合成方法：室温下，在150mL烧瓶中加入2.000g Orlistat和53.5mL甲醇，搅拌下滴加8.7mL 1N的KOH水溶液；加毕后继续搅拌反应1h，TLC监测反应至无原料为止；在旋转蒸发仪上旋去大部分的甲醇后加入甲苯反复带水4次，得透明油状物中间体；氮气保护下，向上述油状物中加入无水DMF33mL，搅拌下滴入溴化苄1.05mL；氮气保护，室温下搅拌反应24h后加水淬灭反应；乙酸乙酯(3×40mL)萃取，合并有机层，无水Na2SO4干燥；过滤，滤液浓缩得淡黄色油状物；经硅胶柱层析[洗脱剂：A＝V(石油醚)/V(乙酸乙酯)＝6/1]纯化得无色油状物即为化合物(1)。产品1.350g，产率72.5％。¹H NMRδ:7.36～7.31(m，5H)，5.12～5.04(m，2H)，4.85～4.83(d，1H)，4.48～4.47(d，1H)，3.73～3.72(m，1H)，3.60(m，1H)，2.42～2.41(m，1H)1.50～1.16(m，32H)，0.87～0.81(m，6H)。

步骤二、化合物(2)的合成：

化合物(2)的结构式如下：

合成方法：氮气保护下，向烧瓶中加入1 1.350g，无水DCM 31mL；-78℃加入2，4，6-三甲基吡啶0.95mL，TIPSOTf 1.2mL反应3h。加水淬灭反应，DCM萃取4次，合并有机相，依次用1N HCl和饱和氯化钠溶液洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，滤液浓缩得无色油状物；经硅胶柱层析[洗脱剂：A＝V(石油醚)/V(乙酸乙酯)＝20/1]纯化得无色油状物即为化合物(2)。产品1.73g，产率95.6％。¹H NMRδ:7.36～7.31(m，5H)，5.08(s，2H)，4.85～4.84(d，1H)，4.03～4.02(m，1H)，3.64～3.61(m，1H)，2.40～2.37(m，1H)1.55～1.13(m，35H)，1.05～0.91(m，18H)，0.86～0.81(m，6H)。

步骤三、化合物(3)的合成：

化合物(3)的结构式如下：

合成方法：向250mL烧瓶中加入2 1.73g与无水钯碳(10％)300mg，无水乙酸乙酯15mL，真空置换氢气3次，剧烈搅拌，常温常压氢解。抽滤，滤液浓缩得无色油状物中间体；将上述油状物加入无水DCM 25mL，TEA 0.77mL，搅拌下加入PhNTf2 1.5g，氮气保护，室温搅拌反应过夜；浓缩，残余液经硅胶柱层析[洗脱剂：V(石油醚)/V(二氯甲烷)＝6/1]纯化得无色油状物即为化合物(3)。产品0.90g，产率63.2％。¹H NMRδ:4.50～4.47(m，1H)，3.99～3.97(m，1H)，3.28～3.24(m，1H)，2.10～1.26(m，35H)，1.06(m，18H)，0.89～0.86(m，6H)。

步骤四、化合物(4)的合成：

化合物(4)的结构式如下：

合成方法：在塑料反应器中加入3 750mg，无水THF 12.5mL，5～10℃搅拌下加入HF-py(65～70％)1.02g，缓慢升至室温，反应搅拌过夜加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，无水Na2SO4干燥；抽滤，浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：A＝V(石油醚)/V(乙酸乙酯)＝7/1]纯化得白色石蜡状固体即为化合物(4)。产品380mg，产率73.1％。¹H NMRδ:4.49～4.45(m，1H)，3.82～3.77(m，1H)，3.34～3.29(m，1H)，2.06～1.23(m，33H)，0.89～0.86(m，6H)。

步骤五、(S)-1-((2(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基4-丙烯酰胺丁酸酯的合成：

向烧瓶中加入4 30mg，EDCI 33mg，DMAP 21mg，4-丙烯酰氨基丁酸21mg，无水DCM3mL。氮气保护下室温搅拌反应过夜。经硅胶柱层析[洗脱剂：A＝V(石油醚)/V(乙酸乙酯)＝9/1]纯化即为所得。结构式如下：

¹H NMRδ：6.28～6.23(dd，J＝1.2，16.8，1H)，6.19(s，1H)，6.14～6.11(d，J＝10，1H)，6.09～6.07(d，J＝10，1H)，5.62～5.59(dd，J＝1.2，10，1H)，5.06～5.04(m，1H)，4.35～4.31(m，1H)，3.45～3.40(m，1H)，3.32～3.27(m，1H)，3.22～3.17(m，1H)，2.39～2.33(m，1H)，2.10～1.23(m，32H)，0.87～0.84(m，6H)；¹³C NMRδ:173.1，171.2，165.7，130.8，126.2，75.6，71.3，56.9，38.9，38.6，34.3，31.8，31.5，31.4，29.5，29.4，29.3，29.2，28.9，27.5，26.7，25.2，24.2，22.6，22.4，14.0，13.9；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₂₉H₅₂NO₅{[M+H]⁺}494.3845found494.3840。

实施例2

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基肉桂酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ:7.71～7.67(d，J＝16，1H)，7.55～7.53(m，2H)，7.41～7.39(m，3H)，6.45～6.41(d，J＝16，1H)，5.13～5.11(m，1H)，4.41～4.36(m，1H)，3.27～3.22(m，1H)，2.30～1.25(m，32H)，0.89～0.83(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，166.4，145.3，134.2，130.4，128.9，128.1，117.7，74.7，71.1，56.9，38.6，34.2，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，27.6，26.7，25.2，22.6，22.4，14.1，13.9；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₃₁H₄₉O₄{[M+H]⁺}485.3631，found 485.3642。

实施例3

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基烟酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ:9.29(brs，1H)，8.65～8.63(d，J＝7.6，1H)，7.74(brs，1H)，5.38～5.36(m，1H)，4.41～4.37(m，1H)，3.28～3.24(m，1H)，2.34～1.26(m，32H)，0.89～0.87(m，6H)ⁱ。

实施例4

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基丙烯酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ:6.44～6.40(dd，J＝1.2，17.4，1H)，6.15～6.08(dd，J＝10.4，17.4，1H)，5.88～5.85(dd，J＝1.2，17.4，1H)，5.10～5.03(m，1H)，4.36～4.31(m，1H)，3.25～3.20(m，1H)，2.26～1.25(m，32H)，0.89～0.86·(m，6H)。13C NMRδ:171.05，165.69，131.12，128.39，74.68，71.27，56.97，38.68，34.15，31.93，31.47，29.63，29.54，29.46，29.35，28.97，27.69，26.69，25.26，22.70，22.51，14.11，14.01；HR-ESI-MS m/z:Calcd forC25H44O4{[M+H]+}409.3240，found 409.3312。

实施例5

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基2-氯乙酸酯的制备

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：5.14～5.08(m，1H)，4.37～4.33(m，1H)，4.05(s，2H)，3.24～3.20(m，1H)，2.21～1.25(m，32H)，0.89～0.86(m，6H)；¹³C NMRδ:170.8，167.1，74.8，73.5，57.0，41.0，38.7，33.9，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，29.2，28.9，27.6，26.7，25.1，22.6，22.5，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₂₄H₄₄ClO₄{[M+H]⁺}431.2928found431.2921。

实施例6

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基2-(1H-吲哚-3-基)乙酸甲酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ:8.071(brs，1H)，7.63～7.61(d，J＝8，1H)，7.37，7.35(d，J＝8，1H)，7.22～7.18(m，2H)，7.15～7.11(m，1H)，4.99～4.97(m，1H)，4.15～4.10(m，1H)，3.77(s，2H)，3.10～3.06(m，1H)，2.14～1.20(m，32H)，0.89～0.86(m，6H)；¹³C NMRδ:171.6，171.3，136.1，127.0，123.0，122.2，119.6，118.7，111.2，108.2，74.7，71.3，56.6，38.5，34.1，31.9，31.6，31.4，29.6，29.50，29.40，29.3，29.2，28.9，27.4，26.5，25.2，22.6，22.5，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Caled for C₃₂H₅₀NO₄{[M+H]⁺}512.3740found 512.3733。

实施例7

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基呋喃-2-羧酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.59(s，1H)，7.19～7.18(d，J＝3.6，1H)，6.52～6.51(d，J＝3.6，1H)，5.23～5.17(m，1H)，4.41～4.37(m，1H)，3.28～3.23(m，1H)，2.34～1.24(m，32H)，0.89～0.84(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，158.2，146.5，144.4，118.2，111.9，74.5，71.8，56.9，38.6，34.1，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，27.6，26.6，25.2，22.6，22.4，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₂₇H₄₅O₅{[M+H]⁺}449.3267found 449.3258。

实施例8

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基(E)-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.66～7.62(d，J＝16，1H)，7.48～7.45(d，J＝8.4，2H)，7.38～7.36(d，J＝8.4，2H)，6.42～6.38(d，J＝16，1H)，5.15～5.10(m，1H)，4.40～4.35(m，1H)，3.26～3.21(m，1H)，2.29～1.25(m，32H)，0.89～0.84(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，166.2，143.8，136.3，132.7，129.2，129.1，118.3，74.7，71.3，56.9，38.7，34.2，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，27.6，26.7，25.2，22.6，22.4，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₃₁H₄₈ClO₄{[M+H]⁺}519.3241found 519.3235。

实施例9

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基2-(2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-1-基)乙酸甲酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.96(s，1H)，5.21～5.18(m，1H)，5.10～4.92(dd，J＝17.6，54，1H)，4.4～4.3(m，1H)，3.23～3.18(m，1H)，2.50(s，3H)，2.08～1.26(m，32H)，0.90～0.86(m，6H)；¹³CNMRδ:170.6，166.4，150.8，138.5，132.3，75.5，74.0，57.1，47.4，39.1，34.2，31.8，31.4，29.5，29.4，29.3，29.2，29.1，28.8，27.4，26.7，25.0，22.6，22.4，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₂₈H₄₈N₃O₆{[M+H]⁺}522.3543found 522.3534。

实施例10

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基(E)-3-(全氟苯基)丙烯酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.68～7.64(d，J＝4.4，1H)，6.76～6.72(d，J＝4.4，1H)，5.15(m，1H)，4.38～4.37(m，1H)，3.24～3.23(m，1H)，2.29～1.25(m，32H)，0.87(m，6H)；¹³C NMRδ:171.0，165.5，146.9，144.3，139.0，138.0，136.6，128.8，125.9，109.6，74.7，72.0，57.0，38.7，34.8，34.1，31.931.4，30.7，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，28.2，27.6，26.7，25.2，22.6，22.4，18.1，14.1，14.0，12.5；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₃₁H₄₄F₅O₄{[M+H]⁺}575.3160found 575.3151。

实施例11

(E)-(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基3-(2-氟苯基)丙烯酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.844～7.80(d，J＝16，1H)，7.56～7.53(t，J＝7.4，1H)，7.38～7.35(m，1H)，7.19～7.15(t，J＝7.4，1H)，7.14～7.09(m，1H)，6.55～6.51(d，J＝16，1H)，5.14～5.12(m，1H)，4.41～4.37(m，1H)，3.27～3.22(td，J＝4，7.6，1H)，3.31～1.25(m，32H)，0.89～0.83(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，166.3，162.6，160.1，137.9，131.9，131.8，129.1，124.5，122.3，120.4，120.3，116.3，116.0，74.7，71.2，56.9，38.6，34.1，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，27.6，26.7，25.3，22.6，22.4，14.1，13.9；HR-ESI-MS m/z:Calcd forC₃₁H₄₈FO₄{[M+H]⁺}503.3537found 503.3522。

实施例12

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基(E)-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.68～7.64(d，J＝16，1H)，7.54～7.51(t，J＝8，2H)，7.11～7.07(t，J＝8，1H)，6.37～6.33(d，J＝16，1H)，5.13～5.11(m，1H)，4.38～4.36(m，1H)，3.27～3.22(m，1H)，2.28～1.25(m，32H)，0.89～0.84(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，166.3，165.2，162.7，143.9，130.5，130.0，129.9，117.5，116.1，116.0，74.7，71.2，56.9，38.7，34.2，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，27.6，26.7，25.2，22.6，22.5，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcdfor C₃₁H₄₈FO₄{[M+H]⁺}503.3537found 503.3528。

实施例13

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基3-苯基丙酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.30～7.27(m，2H)，7.21～7.19(m，3H)，5.00～4.98(m，1H)，4.21～4.17(m，1H)，3.16～3.12(m，1H)，2.97～2.94(t，J＝8，2H)，2.66～2.63(t，J＝8，2H)，2.13～1.26(m，32H)，0.90～0.86(m，6H)；¹³C NMRδ:172.4，171.0，140.2，128.4，128.2，126.3，74.8，71.0，56.8，38.7，35.8，34.1，31.9，31.4，30.8，29.6，29.5，29.4，29.3，29.2，29.0，27.6，26.7，25.1，22.6，22.5，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₃₁H₅₁O₄{[M+H]⁺}487.3709found 487.3776。

实施例14

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-基(R)-2-(4-异丁基苯基)丙酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.26～7.12(d，J＝25.6，2H)，7.18～7.07(d，J＝25.6，2H)，4.97～4.93(m，1H)，4.23～4.18(m，1H)，3.69～3.64(m，1H)，3.19～3.14(m，1H)，2.45～2.43(d，J＝7.2，2H)，2.157～1.26(m，32H)，0.88～0.84(m，6H)；¹³C NMRδ:174.2，171.1，140.6，137.5，129.3，127.1，74.8，70.9，56.8，45.3，45.0，38.8，34.0，31.9，31.4，30.2，29.6，29.5，29.4，29.2，29.0，27.6，26.6，24.8，22.5，22.3，17.9，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd forC₃₅H₅₉O₄{[M+H]⁺}543.4413found 543.4402。

实施例15

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-基(S)-2-(4-异丁基苯基)丙酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.20～7.18(d，J＝8，2H)，7.10～7.08(d，J＝8，2H)，4.15～4.09(m，1H)，3.90～3.86(m，1H)，3.70～3.65(m，1H)，3.03～2.98(m，1H)，2.45～2.43(d，J＝7.2，2H)，2.13～1.24(m，37H)，0.91～0.86(m，12H)；¹³C NMRδ:174.1，171.0，140.8，137.5，129.4，127.1，74.3，70.9，56.6，45.2，45.0，38.3，34.0，31.9，31.5，30.2，29.6，29.5，29.4，29.3，29.0，27.6，26.5，25.2，22.7，22.5，22.3，17.9，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd forC₃₅H₅₉O₄{[M+H]⁺}543.4413found 543.4404。

实施例16

(S)-1-((2S，3S)-3-己基-4-氧代氧杂环丁烷-2-基)十三烷-2-基(E)-3-(3-氟苯基)丙烯酸酯的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.66～7.62(d，J＝16，1H)，7.40～7.34(m，1H)，7.31～7.29(d，J＝8，1H)，7.24～7.22(d，J＝8，1H)，7.12～7.07(td，J＝1.6，8，1H)，6.44～6.40(d，J＝16，1H)，5.14～5.10(m，1H)，4.40～4.36(m，1H)，3.27～3.22(m，1H)，2.30～1.25(m，32H)，0.89～0.84(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，166.1，164.2，161.7，143.8，136.4，130.5，130.4，124.1，119.2，117.4，117.2，114.4，114.2，74.7，71.4，56.9，38.7，34.2，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，29.0，27.7，26.7，25.2，22.6，22.5，14.1，14.0；HR-ESI-MS m/z:Calcd forC₃₁H₄₈FO₄{[M+H]⁺}503.3537found 503.3523。

实施例17

(3S，4S)-3-己基-4-((S)-2-(2-氧代-2-(噻吩-2-基)乙基)十三烷基)氧杂环丁烷-2-酮的制备：

参考实施例1的制备方法。

结构式如下：

¹H NMRδ：7.83～7.81(dd，J＝0.8，4，1H)，7.60～7.58(dd，J＝0.8，4，1H)，7.14～7.12(m，1H)，5.21～5.17(m，1H)，4.44～4.40(m，1H)，3.30～3.24(m，1H)，2.37～1.25(m，32H)，0.90～0.85(m，6H)；¹³C NMRδ:171.1，161.7，133.6，132.6，127.8，74.5，72.0，56.8，38.5，34.1，31.9，31.4，29.6，29.5，29.4，29.3，28.9，27.6，26.6，25.2，22.6，22.4，14.0，13.9；HR-ESI-MS m/z:Calcd for C₂₇H₄₄O₄S{[M+H]⁺}465.2960found 465.3031。

1、orlistat衍生物抗肿瘤活性测定及效果：

将乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7，分别在含有10％胎牛血清，42mM谷氨酰胺，1mM丙酮酸钠，100μg/mL青霉素，100μg/mL链霉素和0.25μg/mL两性霉素的DMEM培养基中常规培养。培养物在37℃的温度下维持在5％CO2。细胞被接种在含有10％胎牛血清的DMED培养基的24孔板培养板上，接种密度为每孔20000个。然后将细胞用Orlistat衍生物在0.01mM至1nM间的5种不同的剂量范围培养5天。等体积的DMSO被用作空白对照。利用细胞数与细胞活力分析仪进行计数。以药物处理过的细胞存活数除以空白对照的细胞存活数计算细胞存活百分比。从每个试验化合物的剂量-存活比曲线计算IC50值，所得结果见表1。

表1orlistat衍生物的抗肿瘤活性

为了验证合成化合物的抗肿瘤活性，我们以乳腺肿瘤细胞系MAD-MB-231、MCF-7为模型，测试各化合物对该肿瘤细胞的IC50值。表1显示，实施例3所得化合物和实施例6所得化合物对MAD-MB-231的抑制活性明显优于orlistat(IC50＝21.5μmol/mL)，IC50分别为11.72μmol/mL和13.36μmol/mL。实施例4所得化合物和实施例6所得化合物外，其余新合成的化合物对MCF-7的抑制活性均优于orlistat(IC50＝16μmol/mL)，且这几个化合物的活性相当。

2、抑制脂肪酶活性的测定及效果

脂肪酶活性测定原理：甘油三酯和水制成的乳胶，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。胶束中的甘油三酯在脂肪酶的作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而降低，降低的速率与脂肪酶活力有关。

Tris缓冲液：试剂盒提供

底物缓冲液：试剂盒提供

胰脂肪酶溶液：胰脂肪酶溶于Tris缓冲液，3000转/min离心5min，收集上清液得1mg/mL酶溶液。

阳性对照：奥利司他(DMSO溶解)

反应过程：先将底物缓冲液37℃预温5min，在试管中加入100μL胰脂肪酶溶液、4mL

预温好的底物缓冲液和100μL待测物质，于37℃反应10min，在反应30sec和反应10min时于420nm分别测定吸光度A1和A2，计算酶活力。

脂肪酶活力单位定义：在37℃条件下，每升脂肪酶在本反应体系中与底物反应1min，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位，其计算公式如式1所示：

标准管吸光度的计算：取底物缓冲液4ml加生理盐水100μL，420nm处比浊，读取吸光度值As值，此As值相当于标准管(454μmol/L)的浓度的吸光度值。

IC₅₀是指酶活性被抑制50％时抑制剂的浓度，可间接表示抑制剂对胰脂肪酶的抑制作用，IC₅₀越低表示化合物抑制效果越好。将前面各化合物抑制率高于50％的抑制剂挑选出来，然后将其配制成不同浓度的溶液(DMSO溶解)，按照2.1中的方法测定不同时间的吸光度值，用抑制率公式(式2)计算出不同浓度化合物的胰脂肪酶抑制率，然后以浓度为横坐标，抑制率为纵坐标作图，绘制出剂量反应曲线，根据剂量反应曲线计算出各化合物的IC₅₀。以奥利司他作为阳性对照，测定其不同浓度(0.05，0.1，0.5，1.0，5.0，10.0μg/mL)对胰脂肪酶的抑制率。

以奥利司他作为阳性对照，按照上述方法测定各实施例化合物不同浓度(0.05，0.1，0.5，1.0，5.0，10.0μg/mL)对胰脂肪酶的抑制率，由剂量反应曲线计算其IC50为12.5μmol/L。各实施例化合物IC50见表2。

表2orlistat衍生物IC₅₀测定结果

由表2可见，实施例3、6以及17对胰脂肪酶的抑制活性明显优于orlistat，其IC₅₀分别为8.87、7.05和11.06μmol/L。实施例7对胰脂肪酶的抑制活性与orlistat相当。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的具体实施例。

Claims

1.通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐；

其中R是如下所示的取代基中的任一个：

2.用于制备权利要求1所述奥利司他衍生物的方法，其特征在于，包括：

3.如权利要求1所述的奥利司他衍生物在抗肿瘤活性药物中的应用。

4.如权利要求1所述奥利司他衍生物中取代基为8、11、12和22的化合物在脂肪酶抑制剂中的应用，以及其在治疗肥胖症或降低与肥胖相关的其他疾病中的应用，所述与肥胖相关的其他疾病包括高胆固醇血症、Ⅱ型糖尿病、糖耐量减低、高胰岛素血症、高血压、冠心病、肝病、呼吸系统疾病、肾脏病、皮肤病。

5.如权利要求1所述的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐，其特征在于，通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物单独给药或者与一种或者多种药用载体或\和稀释剂组合后给药。

6.如权利要求1所述的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐，其特征在于，通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物单独给药或者与一种或者多种抗炎药、抑酸剂组合给药。

7.如权利要求1所述的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐，其特征在于，通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物单独给药或者与生长抑素组合给药。

8.如权利要求1所述的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐，其特征在于，通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物的给药形式为临床上或者药学上可接受的任一剂型。

9.如权利要求1所述的奥利司他衍生物及其药学上可接受的盐，特征在于，通式(Ⅰ)所示的奥利司他衍生物单次给药的生理有效量为0.01～10g。