CN109843299A - 用于治疗皮肤病的非诺多泮局部制剂 - Google Patents

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Abstract

公开了用于给予非诺多泮(化合物(I)或其药学上可接受的盐或其溶剂化物)的稳定局部组合物的实施方案，其用于即释或持续缓慢释放给药，在长时间内安全地使用而非诺多泮的全身暴露最小(降低降血压的风险)。所述组合物包括那些增加药物稳定性和皮肤吸收的组合物，特别是无水半固体组合物和乳膏。这是通过将非诺多泮以可溶或分散的形式加入无刺激性的半固体组合物如软膏或无水凝胶中来实现的。本发明公开了使用局部组合物治疗皮肤病(包括银屑病、脱发、特应性皮炎和白癜风)的方法的实施方案。

Description

用于治疗皮肤病的非诺多泮局部制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求2016年8月31日提交的美国临时申请62/381,674和2017年8月6日提交的美国临时申请62/541,756的优先权；两者的内容通过引用整体并入本文。
技术领域
本发明涉及非诺多泮的稳定局部制剂(或组合物)及其在治疗皮肤病中的用途。
背景技术
银屑病是一种常见的皮肤病，影响许多人。其特征是皮肤红色斑块，具有银色鳞屑和由角质形成细胞增生引起的增厚的表皮。该疾病的影响范围从局部小病变到覆盖整个身体表面的病变。银屑病有几种形式，其中斑块型银屑病是最常见的形式。局部、全身和光疗是银屑病的可用治疗选择，其中与其他治疗方式相比，局部治疗提供更高的安全效率比。用于改善银屑病的大量临床可用疗法例证了银屑病的慢性和复发性质。但由于其不适当的毒性，可用的治疗方案提供了较差的患者依从性。因此，对开发具有较少副作用的安全有效治疗的需求增加。
白癜风的特征是皮肤斑块失去色素并变白。原因尚不清楚，尽管它似乎是由免疫和遗传因素引发的。通过组织活检可以获得疾病的确认。对该疾病没有治愈或有效的治疗方法。防晒剂，化妆品，类固醇乳霜和光疗法用于改善疾病症状。
脱发是一种自身免疫性疾病，其中头发的一些或所有区域的头发都会丢失，表现为头皮上的秃斑。瘢痕性脱发的特征在于纤维化和毛囊缺失，而在非瘢痕性脱发中，毛干消失但毛囊仍在，使得这种类型的脱发可逆。
特应性皮炎是一种以瘙痒，发红，肿胀和皮肤破裂为特征的皮肤炎症。年龄在1至5岁之间的儿童受该疾病的影响最大。原因尚不清楚，尽管可能与免疫紊乱或遗传有关。这种疾病可能在童年期间或之后消失。可以用润滑霜和局部类固醇治疗。
题为“非诺多泮制剂及其前药衍生物”的PCT公开WO2009/052491，其全部内容在此引入作为参考，公开了甲磺酸非诺多泮对TCR活化细胞(表达T细胞受体的非癌性人外周T细胞)的活性，所述细胞在其细胞表面大量表达升高水平的D1R。
甲磺酸非诺多泮化学名为6-氯-2,3,4,5-四氢-1-(4-羟基苯基)-[1H]-3-苯并氮杂-7,8-二醇，甲磺酸盐(“FD”)，由于其血管舒张作用是用于临床的多巴胺D1受体(D1R)的高选择性激动剂。具有一定血管舒张作用的非诺多泮的最低血液水平在1至10ng/mL的范围内(FDA临床药理学和生物药学评论，NDA 19922，)，这意味着局部制剂不应达到这些血液水平。由于氧化敏感性，非诺多泮表现出稳定性问题。此外，药物的盐形式具有更高的熔点，这反过来意味着该部分的透皮通量差，参见PCT公开WO 99/55341，标题为“非诺多泮透皮给药”。
发明内容
本发明涉及通过局部给予治疗有效量的非诺多泮(“FD”)或其药学上可接受的盐来治疗皮肤病，优选T细胞介导的自身免疫性皮肤炎性病症的方法。更优选地，本发明涉及治疗D1受体介导的皮肤病的方法。
本发明涉及显示最小全身吸收的局部组合物。FDA(临床药理学和生物药学评论，NDA 19922，)公开了具有一定血管舒张作用的非诺多泮的最低血液水平在1至10ng/ml的范围内。因此，希望非诺多泮的局部组合物在皮肤内具有最大的定位和最小的全身吸收，以防止任何心血管副作用。本发明的发明人发现该组合物显示出最小的全身吸收。因此，局部给予本发明的组合物不会对血压产生任何实质性影响。
在一个实施方案中，本发明涉及配制甲磺酸非诺多泮以便以稳定的形式和最小的全身药物水平将药物递送到受影响的皮肤表面的方法，以及增强药物渗透到皮肤中的方法。
本发明的一个目的是提供稳定的非诺多泮组合物，用于治疗T细胞介导的自身免疫性皮肤炎性疾病，如银屑病，特应性皮炎，脱发和白癜风。
本发明的另一个目的是提供一种碱或盐形式的局部非诺多泮组合物，用于治疗对D1受体结合剂有响应的皮肤病，包括某些类型的皮肤癌。
在一个实施方案中，施用于皮肤的组合物包含浓度为0.01重量％至3重量％的非诺多泮或其盐。在另一个实施方案中，组合物包含浓度为0.1重量％或0.01重量％的非诺多泮或其盐、水合物或溶剂化物。在一个更优选的实施方案中，该组合物包含浓度为约0.1重量％至约1重量％的非诺多泮或其盐，用于治疗皮肤病，包括但不限于：银屑病，特应性皮炎，脱发和白癜风。在另一个实施方案中，组合物包含浓度小于5重量％的非诺多泮或其盐。
在一个实施方案中，非诺多泮完全溶解在局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含3重量％或更少的非诺多泮，其中非诺多泮完全溶解在局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含约1重量％的非诺多泮，其中非诺多泮完全溶解在局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含约0.1重量％的非诺多泮，其中非诺多泮完全溶解在局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含浓度为约0.1重量％至约1重量％的非诺多泮，其中非诺多泮完全溶解在局部载体中。
在一个实施方案中，至少80％的非诺多泮溶解在局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含3重量％或更少的非诺多泮，其中至少80％的非诺多泮溶解在局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含约1重量％的非诺多泮，其中至少80％的非诺多泮溶解于局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含约0.1重量％的非诺多泮，其中至少80％的非诺多泮溶解于局部载体中。在一个实施方案中，组合物包含浓度为约0.1重量％至约1重量％的非诺多泮，其中至少80％的非诺多泮溶解于局部载体中。
在一个实施方案中，组合物包含3重量％或更少的非诺多泮，其中非诺多泮悬浮在局部载体中并且其粒度大于500nm。在一个实施方案中，组合物包含约1重量％的非诺多泮，其中非诺多泮悬浮在局部载体中并且其粒度大于500nm。在一个实施方案中，组合物包含约0.1重量％的非诺多泮，其中非诺多泮悬浮在局部载体中并且其粒度大于500nm。在一个实施方案中，组合物包含约0.1重量％至约1重量％的非诺多泮，其中非诺多泮悬浮在局部载体中并且其粒度大于500nm。在一个实施方案中，组合物包含小于5重量％的非诺多泮，其中非诺多泮悬浮在局部载体中并且其粒度大于500nm。
在一个实施方案中，本发明涉及以其碱或盐形式的局部非诺多泮组合物用于治疗T细胞介导的自身免疫性皮肤炎性病症，其中在组合物暴露于加速稳定性条件(40℃和75％湿度)后最长达6个月不到10％的非诺多泮发生降解。在一个优选的实施方案中，在组合物暴露于加速稳定性条件下最长达6个月后，不到5％的非诺多泮发生降解。
在一个实施方案中，本发明涉及局部非诺多泮组合物，其包含碱或盐形式的非诺多泮，含量为3％或更少，优选少于约1％，更优选约0.05％至约0.15％，用于治疗皮肤病，包括但不限于：银屑病，特应性皮炎，脱发和白癜风。
在一个实施方案中，本发明涉及局部稳定的非诺多泮组合物，其包含碱或盐形式的非诺多泮以及将pH保持在4以下的酸化剂和/或缓冲系统，以保护非诺多泮在pH>4的组合物中或者非诺多泮施用到皮肤上之后免于降解。局部组合物用于治疗皮肤病，包括但不限于：银屑病，特应性皮炎，脱发和白癜风。
在一个实施方案中，缓冲系统选自药学上可接受的分子或聚合酸性缓冲剂，包括：柠檬酸和柠檬酸钠，乙酸和乙酸钠，藻酸和藻酸钠，以及聚丙烯酸和聚丙烯酸钠盐。
在另一个实施方案中，酸化剂选自：柠檬酸，马来酸，丙二酸，乳酸，乙醇酸，丙烯酸或甲基丙烯酸，或含马来酸的聚合物或藻酸盐。
在另一个实施方案中，酸化剂选自：基于硫酸，磺酸，磷酸或膦酸的有机酸，例如乙基硫酸和十二烷基硫酸。
在一个实施方案中，本发明涉及包含非诺多泮的无水、pH非依赖性局部组合物，用于治疗皮肤病。
在一个实施方案中，本发明涉及包含非诺多泮的非刺激性局部组合物用于治疗皮肤病，该组合物具有不高于4的pH，其中所述组合物在每日暴露后至少1周不会引起皮肤刺激。
在另一个实施方案中，本发明涉及pH高于4的局部用非诺多泮组合物，其中所述组合物在室温下稳定至少3个月。在另一个实施方案中，局部组合物还包含抗炎剂，镇痛剂，局部麻醉剂，焦油和用于治疗T细胞介导的炎性皮肤病的其他活性物质。
在另一个实施方案中，本发明涉及抑制银屑病诱导的促炎细胞因子分泌的方法，包括局部给予有效量的非诺多泮，从而抑制细胞因子分泌。
附图说明
图1描述了pH对非诺多泮稳定性的影响。图1a描述了通过质谱(MS)测定的不同pH水平的溶液中非诺多泮的稳定性。将pH为2.5的非诺多泮样品和用NaOH调节至pH 3.6,6.6和7.2的样品保持72小时，之后进行MS分析。图1b描述了暴露于高于4的pH后获得的非诺多泮可能的降解产物。
图2是描绘从本发明的不同软膏基质中释放甲磺酸非诺多泮的图。
图3是描绘从具有不同比例的PEG和增溶剂的水溶性基质中释放甲磺酸非诺多泮的图。
图4是描绘从含有和不含抗氧化剂的无水凝胶基质中释放甲磺酸非诺多泮的图。
图5是描绘从软膏和无水凝胶非诺多泮的比较释放曲线的图。
图6描绘了通过平行板法测定的非诺多泮组合物的铺展性。FD可水洗软膏(WB45/55)和FD无水凝胶(AGBHT)的铺展性的图示。与AGBHT相比，WB45/55在所有施加的重量下表现出相对较高的铺展性。
图7描绘了通过荧光显微镜观察的软膏和无水凝胶的皮肤分布。用载有异硫氰酸荧光素(“FITC”)的可水洗的软膏(FITC_WB)处理3小时(A)和6小时(B)；以及用载有FITC的无水凝胶(FITC_AG)处理3小时(C)和6小时(D)时收集的皮肤切片的荧光图像。A'，B'，C'和D'代表在应用载有FITC的组合物后3小时和6小时收集的皮肤切片的相应亮视野图像。
图8描绘了在BALB/c小鼠上测试的非诺多泮局部组合物的生物相容性。在开发的制剂连续七天施用后第7天分离用于生物相容性测试的皮肤切片的组织病理学图像：A)非诺多泮溶液(FD-溶液)处理的皮肤；B)非诺多泮软膏(WB45/55)处理的皮肤；C)非诺多泮无水凝胶(AGBHT)处理的皮肤。
图9描绘了在BALB/c小鼠上测定非诺多泮组合物的体内皮肤沉积。与软膏和溶液组合物相比，无水凝胶在两个时间点都显示出非诺多泮的最高皮肤沉积。****P<0.0001(相对于溶液)，**p<0.01(相对于溶液)，##P<0.01(相对于软膏)，#p<0.05(相对于软膏)。
图10描绘了通过测量用非诺多泮组合物处理并暴露于UV-A照射的BALB/c小鼠的耳厚度的光毒性评价。a)显示了第一剂UV-A后第6天的耳厚度测量值；b)显示在第二剂UV-A后第12天的耳厚度测量值。所有数据代表平均值±SD(n＝4)。
图11描绘了来自不同处理组的代表性小鼠的小鼠背部皮肤的表型图像和银屑病面积严重程度指数(“PASI”)评分。A)SHAM。它代表正常的皮肤状况。B)IMQ。在咪喹莫特(“IMQ”)处理组中观察到典型的银屑病、红斑、鳞屑和皮肤厚度症状。C)IMQ_BMV。用倍他米松戊酸酯(“BMV”)处理显示银屑病症状的改善。D)IMQ_FD。用FD溶液处理显示银屑病症状的改善。E)IMQ_WB45/55。WB45/55是非诺多泮可水洗软膏，分别含有45和55份PEG 400和PEG4000。用FD可水洗软膏处理显示银屑病症状得到改善。F)IMQ_AG_BHT。AGBHT是含有丁基化羟基甲苯(“BHT”)作为抗氧化剂的非诺多泮无水凝胶。用FD无水凝胶处理显示出银屑病症状的改善。G)红斑的PASI评分。H)鳞屑的PASI分数。I)皮肤厚度的PASI评分。
图12描绘了来自不同处理组的代表性小鼠的背部皮肤的苏木精和曙红(“H&E”)染色(放大10倍)。该图显示了从A)SHAM收集的皮肤切片的组织病理学图像。它代表表皮和真皮的正常组织学。B)IMQ。在IMQ处理组中观察到银屑病的典型特征，黑棘皮症(表皮增生)，角化过度，角化不全(伴有角质层中核保留的角质层增厚)和炎性浸润。C)IMQ_BMV。BMV处理显示银屑病特征强度下降。D)IMQ_FD。用FD溶液处理显示银屑病特征的强度下降。E)IMQ_WB45/55。用FD可水洗软膏处理显示银屑病特征的强度下降。F)IMQ_AGBHT。FD无水凝胶处理显示银屑病特征的强度下降。
图13描绘了使用酶联免疫吸附测定(“ELISA”)测量的促炎细胞因子的水平。该图显示了不同处理组的皮肤匀浆物中测量的细胞因子水平的平均值±SD(n＝5只动物)。A)IL-17。IMQ处理组中IL-17的水平增加，并且在FD-和BMV-处理组中被抑制。B)IL-23。IMQ处理组中IL-23的水平显著增加，并且在FD和BMV处理组中被抑制。C)TNF-α。IMQ处理组中TNF-α的水平显著增加，并且在FD和BMV处理组中被抑制。***P<0.001(相对于SHAM)，###p<0.001(相对于IMQ)，*#p<0.01(相对于IMQ_FD)。SHAM是未经处理的样品；IMQ是阴性对照；IMQ_BMV是IMQ+阳性对照；IMQ_FD是IMQ+非诺多泮溶液；IMQ_WB45/55是IMQ+非诺多泮可水洗软膏；IMQ_AGBHT是IMQ+非诺多泮无水凝胶。
图14描绘了来自不同处理组的代表性小鼠的背部皮肤的表型图像。SHAM：代表正常的皮肤状况；IMQ：在IMQ处理组中观察到典型的银屑病症状，包括红斑、鳞屑和皮肤厚度；IMQ_BMV：BMV处理显示银屑病症状改善；IMQ_WB_0.01％，IMQ_WB_0.1％，IMQ_WB_1％：用可水洗基质(WB45/55)处理显示银屑病症状以剂量依赖性方式改善；IMQ_OB_0.01％，IMQ_OB_0.1％，IMQ_OB_1％：用油性软膏处理显示银屑病症状以剂量依赖性方式改善；IMQ_WB_1％_无柠檬酸：用不含柠檬酸的可水洗软膏处理显示银屑病症状缓解，排除柠檬酸的影响；FD_IP：用全身性非诺多泮(腹膜内“IP”)制剂处理对银屑病症状没有显示出太大影响。
图15描绘了红斑、鳞屑和皮肤厚度的PASI评分。对于不同的银屑病参数，在y轴上绘制在第6天获取的评分。代表的参数是SHAM，未处理的小鼠；IMQ，咪喹莫特处理；IMQ_BMV，用咪喹莫特和倍他米松戊酸酯处理；IMQ_WB-45/55_0.01％，用咪喹莫特和0.01％非诺多泮可水洗软膏处理；IMQ_WB-45/55_0.1％，用咪喹莫特和0.1％非诺多泮可水洗软膏处理；IMQ_WB-45/55_1％，用咪喹莫特和1％非诺多泮可水洗软膏处理；IMQ_OB_0.01％，用咪喹莫特和0.01％非诺多泮油性软膏处理；IMQ_OB_0.1％，用咪喹莫特和0.1％非诺多泮油性软膏处理；IMQ_OB_1％，用咪喹莫特和1％非诺多泮油性软膏处理；IMQ_WB-45/55_1％_无柠檬酸，用不含柠檬酸的咪喹莫特和1％非诺多泮可水洗软膏处理；IMQ_FD_IP，用咪喹莫特和非诺多泮IP(全身)处理。结果表示为平均值±SD(n＝5)。
图16描绘了使用ELISA估计不同组中的IL-17水平。所有数据代表平均值±SD(n＝5)。****(相对于SHAM,p<0.0001),#(相对于IMQ,p<0.05),###(相对于IMQ,p<0.001),####(相对于IMQ,p<0.0001),Ω(相对于IMQ_BMV,p<0.05),@@@(相对于IMQ_WB45/55_0.01％,p<0.001),$$(s.IMQ_WB45/55_0.1％,p<0.01),$$$(相对于IMQ_WB45/55_0.1％,p<0.001),&&(相对于IMQ_WB45/55_1％,p<0.01),&&&(相对于IMQ_WB45/55_1％,p<0.001),XXX(相对于IMQ_OB_0.01％,p<0.001),XXXX(相对于IMQ_OB_0.01％,p<0.0001),Y(相对于IMQ_OB_0.1％,p<0.05),^^^(相对于IMQ_OB_1％,p<0.001),ΦΦΦΦ(相对于IMQ_WB45/55_1％_无柠檬酸,p<0.001)。与SHAM相比，在IMQ组中观察到IL-17水平显著增加(p<0.0001)。与阴性对照相比，除了IMQ_OB_0.01％和IMQ_FD_IP之外，所有处理组均观察到IL-17水平下降。
图17描绘了使用ELISA估计不同组中的IL-23水平。所有数据代表平均值±SD(n＝5)。**(相对于SHAM,p<0.01),#(相对于IMQ,p<0.05),##(相对于IMQ,p<0.01),Ω(相对于IMQ_BMV,p<0.05),ΩΩΩ(相对于IMQ_BMV,p<0.001),&&(相对于IMQ_WB45/55_1％,p<0.01),XX(相对于IMQ_OB_0.01％,p<0.01)。与SHAM相比，在IMQ组中观察到IL-23水平显著增加(p<0.01)。与阴性对照相比，在一些处理组中观察到IL-23水平下降，包括IMQ_BMV(p<0.01)，IMQ_WB45/55_1％(p<0.05)和IMQ_WB45/55_1％_无柠檬酸(p<0.01)。
图18描绘了使用ELISA估计不同组中的TNF-α水平。所有数据代表平均值±SD(n＝5)。****(相对于SHAM,p<0.0001),##(相对于IMQ,p<0.01),###(相对于IMQ,p<0.001),####(相对于IMQ,p<0.0001),Ω(相对于IMQ_BMV,p<0.05)。与SHAM相比，在IMQ组中观察到TNF-α水平显著增加(p<0.0001)。除IMQ_OB_0.01％组之外，所有处理组均可见TNF-α水平下降。与IL-17和IL-23水平不同，非诺多泮IP组也显示TNF-α水平下降。
图19描绘了使用ELISA估计不同组中的IL-22水平。所有数据代表平均值±SD(n＝5)。*(相对于SHAM,p<0.05),##(相对于IMQ,p<0.01),###(相对于IMQ,p<0.001)。与SHAM相比，在IMQ组中观察到IL-22水平显著增加(p<0.05)。除IMQ_WB45/55_0.01％,IMQ_OB_0.01％和IMQ_FD_IP组之外，在非诺多泮处理组中观察到IL-22水平的统计学显著下降。
图20描绘了在功效研究的第7天从每组的代表性小鼠收集的皮肤的组织病理学图像。A)SHAM，未处理的小鼠；B)IMQ，咪喹莫特处理；C)IMQ_BMV，用咪喹莫特和倍他米松戊酸酯处理；D)IMQ_WB45/55_0.01％，用咪喹莫特和0.01％非诺多泮可水洗软膏处理；E)IMQ_WB45/55_0.1％，用咪喹莫特和0.1％非诺多泮可水洗软膏处理；F)IMQ_WB45/55_1％，用咪喹莫特和1％非诺多泮可水洗软膏处理；G)IMQ_OB_0.01％，用咪喹莫特和0.01％非诺多泮油性软膏处理；H)IMQ_OB_0.1％，用咪喹莫特和0.1％非诺多泮油性软膏处理；I)IMQ_OB_1％，用咪喹莫特和1％非诺多泮油性软膏处理；J)IMQ_WB45/55_1％_无柠檬酸，用不含柠檬酸的咪喹莫特和1％非诺多泮可水洗软膏处理；和K)IMQ_FD_IP，用咪喹莫特和非诺多泮IP处理。
发明详述
在一个实施方案中，本发明证明了该药物在局部治疗常见的T细胞介导的炎性疾病如银屑病中的潜力。免疫系统的遗传异常和异常在疾病的发展中起重要作用，风险因子包括：病症家族史，肥胖，吸烟，不受控制的压力，病毒或细菌感染以及某些药物的使用等。这种疾病呈现出具有重要的身体、心理和社会影响。本发明提供稳定形式的非诺多泮的局部组合物，其不产生可用疗法经常观察到的严重副作用。此外，本发明提供了无刺激性组合物形式的顺应且合适的组合物。
在一个实施方案中，本发明涉及配制甲磺酸非诺多泮以便以稳定的形式和最小的全身药物水平将药物递送到受影响的皮肤表面的方法，以及增强药物渗透到皮肤中的方法。FDA(临床药理学和生物药学评论，NDA 19922，)公开了具有一定血管舒张作用的非诺多泮的最低血液水平在1至10ng/ml的范围内。因此，希望局部组合物在皮肤内具有最大的定位和最小的全身吸收，以防止任何心血管副作用。
在一个实施方案中，局部非诺多泮组合物的最大全身吸收在血液中小于约10ng/ml。在另一个实施方案中，局部非诺多泮组合物的最大全身吸收小于约5ng/ml。在另一个实施方案中，局部非诺多泮组合物的最大全身吸收小于约2.5ng/ml。在另一个实施方案中，局部非诺多泮组合物的最大全身吸收小于约1ng/ml。在另一个实施方案中，局部非诺多泮组合物的最大全身吸收小于约0.5ng/ml。在另一个实施方案中，局部非诺多泮组合物的最大全身吸收小于约0.1ng/ml。
在另一个实施方案中，本发明的局部组合物可以是疏水性软膏，亲水性软膏，亲水性溶液，乳膏，凝胶，洗液，混悬液，喷雾剂或泡沫。本发明的局部组合物能够改善非诺多泮的稳定性和渗透性。这些组合物可以作为软膏或贴剂或其他支持物施用于患病部位。本发明的非诺多泮局部组合物能够改善非诺多泮在皮肤中的稳定性和渗透性。
本发明的一个实施方案是通过将药物以可溶或分散的形式掺入合适的半固体基质中，得到非诺多泮或其药学上可接受的盐的局部组合物。在各个方面，所述基质可以是软膏或凝胶。
在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.01重量％至3重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.01重量％至2重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.01重量％至1重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.1重量％至3重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.1重量％至2重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，施用于皮肤的组合物包含浓度为0.1重量％至1重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.5重量％至3重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.5重量％至2重量％的非诺多泮或其盐。在一个实施方案中，所述组合物包含浓度为0.5重量％至1重量％的非诺多泮或其盐。在一个更优选的实施方案中，所述组合物包含浓度为0.1重量％至1重量％的非诺多泮或其盐。在另一个实施方案中，组合物包含浓度小于5％的非诺多泮或其盐。
在另一个实施方案中，组合物包含浓度为0.1重量％或0.01重量％的非诺多泮或其盐。在一个更优选的实施方案中，组合物包含浓度为1重量％的非诺多泮或其盐。
在一个实施方案中，该组合物是软膏。在另一个实施方案中，软膏组合物包含治疗有效浓度的非诺多泮或其盐，优选0.01重量％至3重量％，1重量％至2重量％的酸性调节剂，10重量％至20重量％的增溶剂或渗透增强剂，以及70重量％至85重量％的软膏基质。
在一个实施方案中，该组合物是无水凝胶。在另一个实施方案中，无水凝胶组合物包含治疗有效浓度为0.01重量％至3重量％的非诺多泮，0.05重量％至0.2重量％的抗氧化剂，10重量％至20重量％的增溶剂，2重量％至2.5重量％胶凝剂，以及90重量％的水合剂或凝胶促进剂。在一个实施方案中，无水凝胶不含抗氧化剂。
在一些实施方案中，组合物还包含另外的组分，包括但不限于：防腐剂，渗透增强剂和保湿剂。
在本发明的一个方面，配制药物组合物，例如本发明的软膏或无水凝胶，以在局部给药时将治疗有效量的非诺多泮或其类似物递送至皮肤的表皮层。在某些实施方案中，配制局部组合物以在局部施用时将浓度为约0.5重量％至约1重量％的药物递送至皮肤的表皮层。在一个更优选的实施方案中，施用于皮肤的局部组合物配制成在局部施用时将浓度为约1重量％至约5重量％的非诺多泮或其类似物递送至表皮皮肤层。
实施例
实施例1：不同pH值下非诺多泮的稳定性
进行以下实验，用于评价非诺多泮在高于4的各种pH值的溶液中以及进一步调节回到酸性pH的其他溶液中的稳定性。首先将甲磺酸非诺多泮溶解在pH 2.5的缓冲磷酸盐中，浓度为0.1mg/mL(样品A)。然后将该溶液分成5个样品：
样品A：保持在pH 2.5
样品B：用NaOH将pH调节至pH 3.6。
样品C：用NaOH将pH调节至pH 6.6。
样品D：用NaOH将pH调节至pH 7.2。
样品E：用NaOH将pH调节至pH 9.3。
将所有样品避光，并在室温下放置12小时。12小时后，使用HCl将具有调节的pH的样品的pH调节回pH 2.5，并且将所有样品避光并在室温下放置5小时(样品B1，C1，D1，E1)或48小时(样品B2，C2，D2，E2)。然后通过HPLC和UV检测器在225nm处分析所有样品。
表1表示通过用不同的非诺多泮样品进行的HPLC分析获得的结果。样品B，B1，B2(在pH 3.6下12小时，然后将pH调节回到pH 2.5)和样品B3(在pH 3.6下72小时)是稳定的，具有非诺多泮的单峰并且显示不到1％的RRT-0.9杂质)。样品C，C1和C2(在pH 6.6下12小时，然后将pH调节回到pH 2.5)显示出4％的RRT-0.9杂质，而样品C3(在pH 6.6下72小时，没有pH调节回到pH 2.5)显示17.5％的RRT-0.9杂质，表明18％的非诺多泮被降解。样品D，D1和D2(在pH 7.2下12小时，然后将pH调节回到pH 2.5)显示出11.5％至15.8％的RRT-0.9杂质，而样品D3(在pH 7.2下72小时，没有pH调节)显示49.8％的RRT-0.9杂质，表明50％的非诺多泮被降解。样品E，E1和E2(在pH 9.3下12小时，然后将pH调节回到pH 2.5)和样品E3(在pH 9.3下72小时，没有pH调节回到pH 2.5)显示非诺多泮的小峰(～2％)，表明几乎所有的非诺多泮都被降解。
表1
pH 3.6–澄清
pH 6.6-淡黄
pH 7.2-淡黄
pH 9.3-淡黄
将另外的非诺多泮样品(样品A3-D3)保持在2.5,3.6,6.6和7.2的pH，而不调节回到pH 2.5，并在72小时后通过HPLC在225nm和质谱(MS)下进行分析。
结果：pH值为2.5和3.6的非诺多泮样品在3天后稳定，并且使用MS分析显示单峰(图1a前两个图)。然而，pH为6.6和7.2的样品在3天后显示出形成多个峰(图1a后两个图)，表明在pH 6.6和7.2下非诺多泮分子的变化。
在pH 7.2下储存3天的样品中获得的非诺多泮降解产物的估计结构通过质谱法测定，如图1b所示。主要的降解产物是非诺多泮从七元环转化为六元环(这解释了14个MS单元的损失)及其水合作用。
实施例2:
表2：甲磺酸非诺多泮软膏和无水凝胶的组成
在一个实施方案中，本发明中使用的酸性调节剂通常以1-2重量％的浓度存在，可包括但不限于：柠檬酸，酒石酸，乳酸，马来酸，乙醇酸，琥珀酸，富马酸，苹果酸，丙酸，苯甲酸，肉桂酸。更优选地，选择柠檬酸作为pH调节剂，其中柠檬酸与药物的比例为1:1至10:1。酸性调节剂可以是直链或交联的聚合物，例如丙烯酸或甲基丙烯酸均聚物和共聚物，例如聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)，称为来自Evonik的Eudragit，或交联的甲基丙烯酸，称为Carbopol。其他酸性聚合物是具有磺酸酯，硫酸酯，膦酸酯或磷酸酯侧基的聚合物。本发明中使用的增溶剂浓度为10-20重量％，可包括但不限于：丙二醇，三甘醇，以及它们的甲基或乙基封端的液体聚(乙二醇)(PEG)，N-甲基吡咯烷酮(NMP)，二甲基亚砜(DMSO)和其他常用于软膏、乳膏或凝胶组合物中的溶剂。在另一个实施方案中，本发明中使用的丙二醇，PEG和DMSO可以不限于用作增溶剂，还可以用作皮肤的渗透增强剂和保湿剂。
在本发明的一个实施方案中，软膏中使用的半固体基质可包括但不限于吸收基质、油质基质或可水洗的基质。在本发明的一个实施方案中，吸收基质可包含86重量％的白凡士林，8重量％的白蜡，3重量％的胆固醇和3重量％的硬脂醇。本发明另一个实施方案中的油质基质可包含95重量％的白凡士林和5重量％的白蜡。在本发明的另一个实施方案中，可水洗的基质可包含40重量％至60重量％的PEG 400和40重量％至60重量％的PEG 4000。在37℃下在24小时内测量从上述具有不同基质的软膏中非诺多泮的释放。用已知体积的磷酸钠缓冲液填充接收隔室，使用正磷酸将其调节至pH 2.75。图2描绘了非诺多泮通过具有明确的截留分子量的明胶膜从不同软膏中的体外释放。
在本发明的一个实施方案中，PEG 400和PEG 4000的比例在可水洗的基质中各自在40重量％至60重量％之间变化。在另一个实施方案中，可水洗软膏的组合物含有约45重量％，约50重量％，约55重量％，或约60重量％的PEG 400，和约45重量％，约50重量％，约55重量％，或约60重量％的PEG 4000。此外，溶剂比例根据PEG的比例而改变，这又有助于递送药物的可溶性或分散形式。图3描绘了非诺多泮通过明胶膜从具有不同比例的PEG的可水洗软膏体外释放，以比较以分散和可溶形式存在的药物的释放。
在本发明的一个优选实施方案中，将药物掺入无水凝胶基质中。适用于本发明的胶凝剂可包括但不限于浓度为2重量％至2.5重量％的在基质中添加10重量％至20重量％的增溶剂有助于增溶药物并且还改善皮肤渗透性。在一个实施方案中，DMSO也可以用作增溶剂，其也用作渗透增强剂。
在另一个实施方案中，以90重量％的浓度添加甘油有助于促进凝胶化，并且还起到保湿剂的作用，其在干燥条件如银屑病的情况下有助于滋润皮肤。而且，添加甘油避免使用中和剂，又能将最终组合物的pH保持在酸性范围内。
最终组合物的酸性pH改善了非诺多泮的溶解度。此外，抗氧化剂的存在改善了非诺多泮的稳定性，因为非诺多泮对氧化高度敏感。浓度为0.05重量％至0.2重量％的本发明中使用的抗氧化剂可包括但不限于：丁基化羟基苯甲醚(BHA)；丁基化羟基甲苯(BHT)；抗坏血酸衍生物，如抗坏血酸，异抗坏血酸和抗坏血酸钠；硫醇衍生物，如硫代甘油；半胱氨酸；乙酰半胱氨酸；胱氨酸；二硫赤藓糖醇(dithioerythreitol)；二硫苏糖醇；谷胱甘肽；生育酚；和硫酸盐，如硫酸钠，亚硫酸氢钠，丙酮亚硫酸氢钠，偏亚硫酸氢钠，亚硫酸钠，甲醛次硫酸钠和硫代硫酸钠。使用正磷酸调节至pH 2.75的已知体积的磷酸钠缓冲液的接收介质，在37℃下在24小时内从含有和不含抗氧化剂的无水凝胶中释放非诺多泮。图4描绘了从无水凝胶中甲磺酸非诺多泮的释放。在48小时内在上述释放介质中可水洗软膏和无水凝胶之间的比较释放描述于图5中，并且释放动力学描述于表3中。
表3：使用不同模型的甲磺酸非诺多泮组合物的药物释放动力学
“Qt”是药物在时间“t”中释放的量，“Qo”是药物的初始量，“Q∞”是剂型用尽时溶解的药物总量。“Ko,”“K1,”“KH”和“Kk”是零级，一级，Higuchi和Korsmeyer-Peppas方程的释放速率常数。对可水洗软膏和无水凝胶进行体外释放研究。动力学分析表明WB45/55和AGBHT的FD释放显示出更好地拟合至Korsmeyer-Peppas模型。
在本发明的其他实施方案中，组合物可包含防腐剂，以通过防止组合物降解来提供额外的稳定性。合适的防腐剂可包括但不限于：苯甲醇(1％至2％)，氯甲酚(0.1％)，羟基苯甲酸酯(0.05％至0.4％)，苯甲酸(5％)等。
在本发明的其他实施方案中，组合物中使用的渗透增强剂可包括但不限于：多元醇，醇，脂肪醇，脂肪酸，脂肪酸酯，阴离子表面活性剂，阳离子表面活性剂，两性表面活性剂，非离子表面活性剂等，以10重量％至20重量％的浓度使用。
将可水洗软膏和无水凝胶的组合物在37℃，2℃至8℃和室温(RT)的不同条件下进行稳定性测试。
将一段时间内释放的药物量与初始概括定期比较3个月。表4描述了在将组合物暴露于不同稳定性条件最长达3个月的时间后24小时期间从非诺多泮组合物中释放的累积药物％。在稳定期期间以预定间隔收集的不同样品的药物释放概括与初始概括相比的释放量相似。
表4：从非诺多泮组合物中释放的累积药物％
储存非诺多泮组合物用于在各种条件(2℃至8℃，37℃和室温)下的稳定性测试。在预定时间点收集样品并通过HPLC分析。上表显示了在0,15,45和90天的不同时间点，在2℃至8℃、室温和37℃下储存的软膏组合物(WB45/55)在24小时内回收的非诺多泮的累积百分比；以及在2℃至8℃、室温和37℃下储存的无水凝胶组合物(AGBHT)在24小时内回收非诺多泮的累积百分比。所有数据代表平均值±标准偏差(n＝3)。在储存6个月和储存9个月后，组合物中非诺多泮的释放不受影响。
通过平行平板法评价非诺多泮组合物的铺展性。简言之，将0.5g每种优化的软膏和凝胶样品置于玻璃板的中心，并将另一块板同心地定位在第一板上方。测量组合物铺展的圆的直径作为初始直径。之后，将5、10、20、50、100、150和200g量级的已知重量逐渐放置在上板上，每个重物之间间隔1分钟。基于直径的变化测量组合物的铺展性随施加的重量的变化。每增加一个已知重量后沿垂直轴和水平轴测量铺展区域的增加。根据等式[S＝πr2]，以铺展面积表示结果，其中S是施加确定质量(g)后的铺展面积(cm2)，r是每个样品达到的平均半径(cm)。通过在y轴上绘制的铺展区域与在x轴上添加的重量作图来获得铺展性概况。所有测量一式三份进行。
局部组合物的功效取决于其铺展性，因此铺展性被认为是局部组合物开发过程中的重要参数之一。铺展性关系到递送至目标部位的正确的剂量，易于在基底上施用，以及可以从包装中挤出。组合物的最佳稠度有助于确保将合适的剂量递送至目标部位。评估了非诺多泮的优化组合物(即软膏和无水凝胶)的铺展性，以验证优化组合物的稠度和易用性。图6显示了软膏和无水凝胶的铺展性概况。软膏的初始铺展面积为2.44cm2±0.13cm2，而无水凝胶的铺展面积为1.52cm2±0.014cm2。在组合物中加入200g重物后，对于软膏而言，铺展面积为15.49cm2±0.55cm2，对于无水凝胶而言，铺展面积为12.60cm2±0.06cm2。
使用BALB/c小鼠和载有FITC的软膏和凝胶组合物研究软膏和无水凝胶在不同皮肤层中的皮肤分布。获得含有载有FITC的组合物的皮肤样品，置于标记的冷冻模型(cryomold)中，并用最佳切片温度试剂(OCT)覆盖。将含有样品的模具储存在-80℃冰箱中直至切片。使用低温恒温器在-30℃下获得5μm厚度的冷冻切片，并使用具有FITC过滤器的荧光显微镜观察切片。
使用载有FITC的组合物，即载有FITC的软膏和载有FITC的无水凝胶，研究可水洗软膏和无水凝胶的皮肤分布。将皮肤样品切片并在3小时和6小时时间点观察荧光。图7表示在应用载有FITC的组合物后3小时和6小时收集的皮肤切片的荧光图像(A，B，C和D)和各自的亮视野图像(A'，B'，C'和D')。在应用载有FITC的软膏3小时后，在角质层和表皮层中观察到荧光。在6小时时间点，载有FITC的软膏在表皮层中荧光强度增加。这些荧光图像显示，软膏通过细胞间路径遵循被动渗透途径。在可水洗软膏中存在化学渗透增强剂如PG有助于FD被动渗透到皮肤中。相同的机制可以应用于非诺多泮软膏中非诺多泮的皮肤渗透，通过增加扩散性，药物在皮肤中的溶解度和药物在载体中的饱和度。在载有FITC的无水凝胶的情况下，在3小时荧光被限制在角质层中，而在6小时，在表皮/皮肤层中可以看到荧光。对于无水凝胶处理的皮肤获得的荧光图像显示，被动渗透也是无水凝胶渗透的主要机制。DMSO(无水凝胶中研究最广泛的渗透增强剂)的存在可能在其渗透中起作用。不受理论束缚，已显示DMSO与角质层的细胞间脂质结构域和一些双层脂质的头部基团相互作用以扭曲包装几何形状。这种DMSO渗透增强机制可能会影响非诺多泮无水凝胶中非诺多泮的皮肤渗透。与载有FITC的软膏相比，在6小时时载有FITC的无水凝胶观察到更高的荧光强度可能是由于FITC从无水凝胶中比从软膏中更容易迁移。
根据报道的方法进行生物相容性研究，只是稍作修改。将小鼠在背侧剃光，然后分成三个测试组，即非诺多泮溶液，软膏和凝胶组。为了检查测试组合物的生物相容性，将非诺多泮溶液，软膏和凝胶应用于各动物组的剃毛背部皮肤上至2cm2的界定区域，连续7天。在研究结束时，从给药区域切下皮肤样品并固定在10％w/v缓冲的福尔马林溶液中。使用H&E染色观察福尔马林固定的样品在皮肤中的形态变化。
通过组织病理学分析评估本发明组合物的生物相容性。在健康小鼠上连续7天应用非诺多泮溶液，软膏和无水凝胶后，收集皮肤样品并进行H&E染色。组织学分析显示，与正常皮肤相比，非诺多泮处理组的皮肤样本没有明显的形态变化，如图8所示。暴露于测试组合物后，在非诺多泮组合物处理组中可以看到表皮和真皮的正常组织学，没有皮肤刺激的视觉迹象，如红斑和肿胀。该研究表明，所开发的组合物是生物相容的并且适合局部应用。
在小鼠中单剂量局部应用后，分析皮肤组织中非诺多泮的浓度。在0.05体积％甲酸中制备非诺多泮(10mg/mL)和贝那普利储备溶液(1mg/mL)。将储备标准品在0.05体积％甲酸中稀释至10000,8000,4000,2000和1000μg/mL的工作浓度以制备校准曲线。通过将10g抗坏血酸溶解在100mLMillipore水中制备10％抗坏血酸溶液。
为了测定真皮组织中非诺多泮的浓度：BALB/c小鼠背侧剃毛；将背部皮肤分离并储存在-20℃直至使用。在研究期间，将皮肤在Millipore水中再水化，然后在0.05体积％甲酸中匀浆化，使用Millipore水和组织匀浆器以3000RPM(转/分钟)持续5分钟进行制备。将匀浆物在4℃以13,000RPM离心15分钟，收集得到的上清液用于制备校准曲线。
为了校准皮肤匀浆物中的非诺多泮，将20μL工作溶液加入到180μL分离的皮肤匀浆物中，以产生浓度为1000,800,400,200和100μg/mL的校准标准品。将所有样品与新鲜制备的10％抗坏血酸溶液混合至终浓度0.5％(w/v)的抗坏血酸。每个样品掺入相当于100μg/mL的内标(贝那普利)。将上述混合物与40μL 2.5％v/v氢氧化铵合并，并将样品涡旋20秒。将乙酸乙酯(1.0mL)加入到样品中，然后将样品在室温下涡旋5分钟。将样品在4℃下以5000RPM离心10分钟。将0.5mL等份的上清液在室温下真空干燥。将剩余的残余物在100μL流动相中重建。将混合物涡旋10秒，然后在4℃下以10000RPM离心15分钟。使用HPLC，用乙腈:0.05体积％(40:60，体积％)在225nm的波长下分析所得上清液。
体内皮肤沉积：每个时间点(6小时和18小时)将BALB/c小鼠分成三组，包括非诺多泮溶液，软膏和无水凝胶组，每组5只动物。小鼠背部皮肤剃光，并选择1平方厘米的面积进行研究。将非诺多泮组合物(1重量％可水洗软膏(100mg)，1重量％无水凝胶(100mg)和pH2.75磷酸盐缓冲液(100μL)中的10mg/mL溶液，其相当于1000μg非诺多泮)应用于相应组的所选区域。收集处理过的皮肤，然后用棉花擦拭，然后储存在-20℃直至分析。如校准样品所述将皮肤样品匀浆化，并收集匀浆物。掺入内标，通过如上所述的相同过程提取，并通过HPLC分析。
图9显示在局部应用非诺多泮组合物后6小时和18小时，非诺多泮的体内皮肤沉积。在两个时间点，溶液组合物显示出与软膏和无水凝胶组合物相比更少的非诺多泮沉积。软膏组合物在6小时的皮肤沉积为214.53μg/cm2±66.06μg/cm2，在18小时为376.79μg/cm2±29.65μg/cm2，而无水凝胶组合物在6时的皮肤沉积为383.28μg/cm2±65.66μg/cm2，18小时为442.29μg/cm2±44.12μg/cm2。与普通药物溶液相比，渗透增强剂(如软膏组合物中的PG和无水凝胶组合物中的DMSO)的存在显著增加了皮肤沉积。与软膏基质相比药物从凝胶基质更快迁移可能是与6小时(p<0.01)和18小时(p<0.05)的软膏相比更高的皮肤沉积的原因。在18小时，软膏和无水凝胶显示出约38.32％和44.22％的皮肤沉积，并且该研究表明非诺多泮在不同皮肤层中的定位。
还进行了非诺多泮组合物的光毒性测试。将BALB/c小鼠分成四个不同的剂量组(第一剂量和第二剂量)，包括仅UV-A光(“UV-A”)，非诺多泮溶液+UV-A，非诺多泮软膏+UV-A以及非诺多泮无水凝胶+UV-A，每组4只动物。在剃光的背部皮肤和左耳上用100mg各自的组合物处理该组中的每只动物。应用30分钟后，从小鼠背部皮肤到倒置在笼子顶部的灯的玻璃罩的距离为15cm并保持100分钟，使用UVA 9W/10灯(发射范围315-400nm；峰值365nm)使动物暴露于UV-A照射。对于两剂处理动物，在第一剂量处理后第6天对皮肤施用类似剂量并暴露于UV-A。使用Vernier卡尺测量耳厚度。在第6天目测观察红斑和水肿的迹象，以评估第一剂量的效果，并且在第12天评估第二剂量的效果。
在第一剂量和第二剂量UV-A暴露于非诺多泮处理的动物后，未观察到皮肤刺激的视觉迹象，包括红斑或水肿。图10显示了采用第一剂量和第二剂量UV-A暴露后测量的耳厚度。在第一和第二剂量暴露的所有组中未观察到耳厚度的显著差异，表明所开发的组合物对于皮肤病学应用是安全的。
实施例3:乳膏
本发明的乳膏是可以应用于皮肤的油包水或水包油型半固体乳液中的外用制剂。油包水乳液形式的疏水制剂可称为“油性乳膏”。乳膏通常通过混合油相和水相组分来制备。这些相中的任何一种都可以含有非诺多泮，这取决于成分和非诺多泮在两相中的溶解度。在乳膏中，可以将足量的防腐剂添加到填充在多剂量容器中的制剂中，以防止微生物的生长。
表5：非诺多泮局部乳膏的组成
在本发明的另一方面，非诺多泮局部乳膏可通过以下方法制备。乳膏是基于水包油乳液的制剂，其含有水相和油相。通过在瓷盘中熔化并持续搅拌将油相的成分混合在一起。将水相的组分混合在一起并加热至与油相相同的温度。在不断搅拌下将水相逐滴加入油相中。在将混合物冷却至室温后，加入防腐剂对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸甲酯。柠檬酸为组合物提供酸性pH，以保护非诺多泮免于在储存期间或在皮肤上应用后在pH>4时降解。添加抗氧化防腐剂以保护药物免于氧化。上述实施例说明了以本发明的方式制备和使用的优选局部乳膏，但并不意图限制本发明。
实施例4：混悬液
在另一个实施方式中，组合物是混悬液。混悬液是非诺多泮的液体制剂，其中非诺多泮已经在合适的载体中精细且均匀地悬浮。通过将混悬剂或其他合适的赋形剂和纯化水或油加入固体活性物质中来制备混悬液。可以添加所需的防腐剂，稳定剂等。为了避免变质，在使用前准备混悬液并均匀混合。在本发明的另一个实施方案中，每毫升非诺多泮局部混悬液在载体中含有1％至10％的药物，所述载体由纯化水、丙二醇、二乙醇胺、聚乙二醇400、羟乙基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、黄原胶、柠檬酸和偏亚硫酸氢钠组成。
表6：非诺多泮局部混悬液的组成
Sr.编号 成分 重量％
1 非诺多泮或其盐 0.01-1
2 二乙醇胺 1-5
3 丙二醇 5-10
4 PEG 400 5-10
5 羟乙基纤维素 2-5
6 黄原胶 2-5
7 对羟基苯甲酸甲酯 01.0
8 对羟基苯甲酸丙酯 0.05
9 柠檬酸 0.1-10
10 偏亚硫酸氢钠 0.05-0.10
11 净化水 60-70
在本发明的另一个实施方案中，非诺多泮局部混悬液可通过以下方法制备。非诺多泮在含有润湿剂的载体的帮助下研磨。以与载体相等的比例，将其他组分悬浮并混合。将两相在分级容器中混合，并调节混悬液的最终体积。该组合物可用于需要较高浓度药物的应用中。上述实施例说明了以本发明的方式制备和使用的优选局部混悬液，但并不意图限制本发明。
实施例5：泡沫和软膏
在又一个实施方案中，可以制备泡沫。该平台提供了一种创新的易于应用的现代乳霜和软膏替代品。泡沫组合物的显著优点是它易于在大的皮肤区域上铺展，在施用后不会在皮肤上留下油腻或油性薄膜，并且在施用时和施用后不会产生油腻感。
在一个实施方案中，非诺多泮泡沫可以在水基乳液泡沫载体中包含0.1-10mg/g的非诺多泮，所述载体由鲸蜡醇(1至5重量％)，柠檬酸(1至10重量％)，乙醇(60至65％)，聚山梨醇酯80(1至2重量％)，柠檬酸钾(1至5重量％)，丙二醇(10至15重量％)，偏亚硫酸氢钠(0.10重量％)，对羟基苯甲酸甲酯(0.10重量％)，对羟基苯甲酸丙酯(0.05重量％)，纯化水(30至40重量％)和硬脂醇(10至15重量％)组成，用烃(丙烷/丁烷)推进剂加压。
在本发明的另一个实施方案中，非诺多泮泡沫可通过以下方法制备。将非诺多泮溶解在含有乙醇和丙二醇的载体中。十六醇用作泡沫中的润肤剂。将其他组分混合，并溶解在水中。用合适的推进剂对该制剂加压，并且制剂由铝罐分配。上述实施例说明了以本发明的方式制备和使用的优选的局部泡沫，但并不意图限制本发明。
在另一个非限制性实施方案中，非诺多泮泡沫含有以下成分：超白凡士林-66.1％，PPG-15硬脂基醚-8％，矿物油-10.9％，十八烷基聚醚-2-4％，BHA-1％，丙二醇-10％，甲磺酸非诺多泮-0.1％。
在另一个非限制性实施方案中，非诺多泮软膏含有以下成分：白凡士林-79％，石蜡-3％，蜂蜡白-7％，矿物油USP-1％，丙二醇-10％和甲磺酸非诺多泮-0.1％。
实施例6：洗液
在本发明的另一个实施方案中，可以制备洗液(lotion)。根据本发明，洗液是外用液体，其中非诺多泮可以溶解、乳化或细分散在含水载体中。在本发明的一个实施方案中，通常通过用赋形剂将药物溶解、悬浮或乳化在纯化水中并使组合物整体均质化来制备洗液。如果需要，本发明的洗液可包括防腐剂和抗氧化剂。通常认为洗液比溶液更稠，并且更可能含有油以及水或酒精。摇动洗液随时间分离成各部分，因此需要在使用前摇动形成混悬液。
在一个实施方案中，非诺多泮洗液可以含有在载体中的0.01至1重量％的非诺多泮，所述载体含有乙醇(20至30％w/v)，丙二醇(10至15％w/v)，柠檬酸钠(1至2％w/v)，柠檬酸(1至10％w/v)，甘油(20至30％w/v)和纯化水(40至50％w/v)。在另一个实施方案中，将非诺多泮溶解在丙二醇中，将其他组分在纯化水中混合，并将两种溶液混合在一起。上述实施例说明了以本发明的方式制备和使用的优选局部洗液，但并不意图限制本发明。
实施例7：贴剂
在本发明的另一个实施方案中，非诺多泮的透皮贴剂是加药的粘合剂贴剂，其置于皮肤上以通过皮肤递送特定剂量的药物并进入血流。在另一方面，这可以有助于治疗T细胞介导的皮肤病。在另一个实施方案中，贴剂可以是基质贴剂或储库贴剂。基质贴剂包含剥离衬垫、药物/粘合剂层和背衬层，而储库贴剂包含剥离衬垫、粘合剂层、速率控制膜、药物储库和背衬层。
非诺多泮基质贴剂的方法：通过倒入2％(w/v)聚乙烯醇溶液浇铸背衬膜，然后在60℃下干燥6小时。通过将乙基纤维素溶解在氯仿:甲醇(1:1)混合物中来制备药物储库。邻苯二甲酸二丁酯15％(无水聚合物组合物的重量百分比)用作增塑剂。在用磁力搅拌器缓慢搅拌的条件下，将非诺多泮(1至10重量％)以及溶解在丙二醇中的1至5重量％的萜烯(渗透增强剂)加入均质分散体中。将粘合剂溶液加入药物增强剂混合物中，并使用电动搅拌器适当地混合该混合物以制备均质混合物。将上述混合物超声处理几分钟直至溶液变澄清。将均匀分散体浇铸在PVA背衬膜上，然后在室温下干燥。将干燥的贴剂层压，然后切成所需的面积并储存在40℃/75％RH的聚乙烯袋中直至进一步评价。
根据本发明，本文所述的组合物具有良好的稳定性，良好地粘附于皮肤，并具有良好的渗透能力。本发明中提到的组合物可以以乳膏，凝胶，贴剂，泡沫，洗液，混悬液或软膏的形式用于治疗皮肤病。上述实施例说明了以本发明的方式制备和使用的优选局部组合物，但并不意图限制本发明。
实施例8：非诺多泮的包封
在本发明的一个方面，可以使用药学上可接受的载体和组合物成分将非诺多泮包封成微粒。
包封非诺多泮的方法：
通过乳液溶剂扩散法制备非诺多泮包封的微粒。使用不同的药物与聚合物(乙基纤维素)的比例1:1，1:2，1:3和1:4，研究聚合物/药物比率对微球的释放和物理表征的影响。将乙基纤维素溶解在二氯甲烷中，然后通过在35℃下超声处理将非诺多泮加入溶液中，并通过将PVA溶解在60℃的蒸馏水中10分钟来制备外相。将内相逐渐加入PVA溶液中。将所得混合物通过磁力搅拌器在25℃下搅拌1小时，并过滤以分离微粒。将微粒在40℃的热空气烘箱中干燥12小时并称重以确定产率。将这些非诺多泮微粒进一步掺入凝胶基质中用于局部应用。该实施例说明了乙基纤维素和PVA作为延迟(retardant)聚合物和乳化剂用于制备非诺多泮微粒的用途，但不是限制性的。
在另一个实施方案中，如下制备非诺多泮微粒：将非诺多泮分散在可生物降解的聚合物，聚(丙交酯-乙交酯)50:50或75:25比例或聚(癸二酸酐)的二氯甲烷的溶液中。将溶液加入到抗溶剂庚烷中，收集沉淀的颗粒以进一步加入无水软膏或凝胶中。微粒中非诺多泮的载量为每聚合物载体5至50重量％。
包封的非诺多泮应在组合物保留在患病皮肤上的期间释放。释放曲线应适合于在皮肤上释放治疗剂量，该剂量低于可达到对患者是有毒的血液水平的量。释放时间应在12小时至24小时的范围内，这是两次应用之间的时间；然而，较长释放的组合物也可用于长效贴剂。
在另一个实施方案中，将氢化植物油熔化(～55℃)并加入1重量％的非诺多泮粉末，然后将各成分充分混合。向混合物中加入表面活性剂如将油逐滴添加到抗溶剂中，快速均质化以形成微粒。应用水溶性药物包封的常用方法。
在另一个实施方案中，将包封的非诺多泮颗粒加入到pH控制的软膏或凝胶基质中，并用于治疗皮肤病。
实施例9：0.01重量％和0.1重量％非诺多泮的组合物及其他药物的组合
在该实施例中，制备250克非诺多泮局部组合物。
表7：制备250克水溶性组合物的材料：
表8：制备250克软膏组合物的材料：
表9：250克水溶性组合物的总结成分，不含柠檬酸：
通过将甲磺酸非诺多泮溶解或分散在丙二醇中，然后混合到制剂基质中来制备组合物。该组合物是均质的，药物含量均匀，光滑且易于应用到皮肤上。
实施例10
在本发明的一个实施方案中，使用丙二醇作为非诺多泮的增溶剂。非诺多泮通过丙二醇溶解，丙二醇是亲水性溶剂。在一个实施方案中，非诺多泮的局部组合物包含丙二醇作为增溶剂，并且可以是无水组合物、PEG基凝胶或软膏或软膏泡沫。
1)无水组合物
2)PEG基凝胶
3)软膏或软膏泡沫
与其他活性剂联用
通过在制备过程中将另外的活性剂溶解或分散到非诺多泮中，或者在制备的非诺多泮局部组合物中混合另外的活性剂，制备用于治疗皮肤病的常用局部组合物的联合组合物。在制备过程中向组合物中加入活性剂，例如皮质类固醇，三戊胺，维生素D，维生素A，维生素D类似物，他扎罗汀，他克莫司，雷帕霉素，匹莫里斯(pimerolimus)和环孢菌素，用量为0.005至0.1重量％。抗炎剂如吲哚美辛、布洛芬和阿司匹林的加入量为0.1-3重量％；水杨酸和苯甲酸的加入量为0.1至约3重量％。煤焦油在基质中以1％至5％的量混合以形成组合物。还可以制备两种以上药剂的组合，例如：0.01至0.1重量％的地塞米松和维生素D。可以加入抗微生物剂如磺胺钠、杆菌肽、红霉素、磺胺嘧啶银、多粘菌素和两性霉素B。可加入镇痛剂如NSAID和局部麻醉剂如利多卡因、布比卡因和普鲁卡因酰胺以减轻疼痛。将具有上述活性的草药提取物在制备过程中或在制备含有非诺多泮的软膏后加入组合物中。
生物药物如阿达木单抗和其他TNF-α抑制剂与非诺多泮一起加入。添加量以纳克为单位，因为这些类型的活性剂非常强效。在混合到软膏中之前，应将这些敏感剂稳定在预组合物中。在加入局部组合物之前，将掺入局部组合物中的上述活性剂(包括非诺多泮)在没有任何预制剂，包封或与稳定剂混合的情况下混合。
另外的活性剂可以与非诺多泮以相同的剂型掺入，或以单独的剂型掺入。在一个实施方案中，在制备过程中将地塞米松以0.001％至0.1％的量加入组合物中。可以掺入非诺多泮软膏和凝胶中的其他类固醇包括地塞米松磷酸酯或琥珀酸酯，曲安西龙，倍氯米松及其衍生物。
实施例10：预期用途
用于治疗银屑病的非诺多泮局部组合物(功效研究)
已经在两项动物研究中测试了局部组合物对治疗银屑病的作用。在这两项研究中，通过在连续6天的时间内在BALB/c小鼠的背部皮肤上施用5重量％咪喹莫特(IMQ)乳膏诱导银屑病的典型特征，即红斑、鳞屑和皮肤厚度。采用产生银屑病样症状的动物研究非诺多泮局部组合物的功效。在非诺多泮处理组中，动物仅在前两天接受咪喹莫特。从研究的第三天起，动物在接下来的四天内接受了咪喹莫特和非诺多泮。
第一项动物研究：
第一项动物研究中使用的不同处理组小鼠如下：该研究中的SHAM组代表在没有任何处理的情况下在背侧剃光的小鼠；阴性对照组代表由咪喹莫特5％(IMQ)诱导的典型银屑病模型；阳性对照组代表用咪喹莫特诱导银屑病然后用市售的类固醇倍他米松戊酸酯(IMQBMV)处理的小鼠；处理组代表用咪喹莫特诱导银屑病然后采用不同的非诺多泮组合物以局部剂量1mg/cm2非诺多泮处理的小鼠，所述非诺多泮组合物包括例如溶液(IMQ FD)，可水洗软膏(IMQ WB 45/55)，或无水凝胶(IMQ AG BHT)组合物。
以适当的对照作为研究的一部分，分析银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分以确定本发明的非诺多泮组合物的功效。图11描绘了PASI评分，包括在研究期间确定的体重、红斑、鳞屑和皮肤厚度。在研究期间的规则时间点以0-4的等级给出的评分显示在图12中。阴性对照组代表典型的银屑病状况，相对于所有参数均显示出最高的PASI评分。包括阳性对照，非诺多泮溶液，非诺多泮软膏和非诺多泮无水凝胶的处理组在处理期间显示PASI评分下降，几乎与阳性对照相似。基于PASI评分，非诺多泮处理组可见的抗银屑病作用与用市售类固醇处理的阳性对照组相当。
作为功效研究的一部分，进行组织病理学研究以研究代表不同处理组的小鼠皮肤的形态学观察。通过H&E染色，该研究的阴性对照组(咪喹莫特处理的动物)代表典型的银屑病特征，黑棘皮症，角化不全，角化过度和皮肤浸润。从处理组小鼠收集的皮肤的类似染色显示表皮增厚减少，角质层增厚减少，皮肤浸润减少。组织病理学图像如图12所示。用非诺多泮组合物处理的效果与倍他米松戊酸酯的作用相当。
IMQ诱导的银屑病模型再现了人类银屑病损伤的生物化学和组织病理学特征。局部应用IMQ乳膏增加了处理的皮肤组织中细胞因子如IL-23，TNF-α和IL-17的水平。使用ELISA分析从不同组的小鼠获得的皮肤匀浆物，用于定量IL-17，IL-23和TNF-α水平，这些选择的白细胞介素是银屑病的典型炎症标志物。与SHAM(正常)组相比，IMQ组显示白细胞介素水平显著升高(p<0.001)，这反映了银屑病炎症的发展。与IMQ组相比，处理组显示IL-17，IL-23和TNF-α显著降低(p<0.001)，如图13所示。与普通药物溶液相比，在FD组合物中，可水洗软膏和无水凝胶显示出更多白细胞介素水平的降低(p<0.01)。可水洗软膏和无水凝胶对白细胞介素水平的影响没有显著性差异。与SHAM组相比，IMQ组显示IL-17水平升高5倍，而与IMQ组相比，市售的类固醇、非诺多泮溶液、非诺多泮软膏和非诺多泮凝胶组显示IL-17水平分别降低2.74,2.55,8.69和11.56倍(图13A)。与SHAM组相比，IMQ组显示IL-23水平升高2.30倍，而与IMQ组相比，市售的类固醇、非诺多泮溶液、非诺多泮软膏和非诺多泮凝胶组显示IL-23水平分别降低2.02,1.18,2.05和2.65-倍(图13B)。与SHAM组相比，IMQ组显示TNF-α水平升高8.42倍，而与IMQ组相比，市售的类固醇、非诺多泮溶液、非诺多泮软膏和非诺多泮凝胶组显示TNF-α水平分别降低2.75,3.17,6.27和5.82-倍(图13C)。该研究证实，与IMQ组相比，局部应用WB45/55和AGBHT对银屑病鼠模型导致对促炎细胞因子水平的统计学显著性抑制作用。非诺多泮的效果与市售类固醇的参比局部处理一样有效。
第二项动物研究：
进行第二项动物研究以测试另外的具有不同强度(0.01％，0.1％和1％非诺多泮)的非诺多泮局部组合物，以及全身给予非诺多泮的效果。第二项动物研究中使用的各组小鼠如下：该研究中的SHAM组代表在没有任何处理的情况下在背侧剃光的小鼠；阴性对照组代表由咪喹莫特5％(IMQ)诱导的典型银屑病模型；阳性对照组代表用咪喹莫特诱导银屑病然后用市售的类固醇倍他米松戊酸酯(IMQ BMV)处理的小鼠；处理组代表用咪喹莫特诱导银屑病然后用局部剂量的各种非诺多泮组合物处理的小鼠，所述非诺多泮组合物包括：可水洗的基质(IMQ_WB45/55-0.01％,IMQ_WB45/55-0.1％,IMQ_WB45/55-1％或IMQ_WB45/55_1％_无柠檬酸)，或油性软膏组合物(IMQ_OB 0.01％,IMQ_OB 0.1％或IMQ_OB 0.01％)。另一组小鼠通过腹膜内注射(IMQ_FD_IP)接受全身性非诺多泮。
图14描绘了代表不同组，即SHAM，阴性对照，阳性对照和用不同浓度的非诺多泮软膏组合物处理的处理组的小鼠的图像。非诺多泮组接受每日剂量范围为0.02至2mg/cm 2(相当于0.02％至2％)不同浓度的软膏组合物。SHAM组显示正常的未经处理的皮肤，阴性对照组显示典型的银屑病特征(红斑，鳞屑和皮肤厚度)(IMQ)，倍他米松戊酸酯和非诺多泮处理组(IP组除外)显示与阴性对照相比银屑病症状缓解。IMQ_WB45/55_0.01％和IMQ_WB45/55_0.1％显示出鳞屑和红斑减少，而两组均观察到皮肤增厚。与阴性对照相比，IMQ_WB45/55_1％显示银屑病症状完全缓解，这可能是由于相对较高剂量的药物。在油性软膏组中观察到类似的结果，其中IMQ_OB_0.01％和IMQ_OB_0.1％显示皮肤增厚，而IMQ_OB_1％显示红斑，鳞屑和皮肤增厚减少。基于非诺多泮的浓度范围为0.01％至0.1％，在软膏组(基于PEG的软膏和基于脂肪的软膏)中观察到症状缓解的逐渐增加。IMQ_WB45/55_1％_无柠檬酸也显示银屑病症状减少，与1％软膏组相似，排除了柠檬酸的作用。IMQ_FD_IP对银屑病症状没有显示出太大影响，这证实了该药物对皮肤病如银屑病的局部作用。
该软膏用作载体并导致活性成分的完全吸收，这也可能有助于长时间保持湿润的皮肤状况。除此之外，软膏中丙二醇的存在还有助于通过帮助药物渗透到皮肤的较深层来缓解银屑病症状。
采用适当的对照作为研究的一部分，进行银屑病面积和严重程度指数(PASI评分)的分析，以确定所开发组合物的功效。第6天评分红斑、鳞屑和皮肤厚度的强度显示在图15中，并在不同组之间进行比较。在IMQ处理的第6天，IMQ组显示出红斑、鳞屑和厚度，评分为约3(严重)，这表明与SHAM组相比，IMQ产生炎症反应。对于非诺多泮软膏组，在第6天观察到红斑、鳞屑和厚度评分的下降。不同剂量的非诺多泮相对于两种软膏组均观察到轻微差异。在非诺多泮全身组(IMQ_FD_IP)和阴性对照(IMQ)之间未观察到显著差异，这表明非诺多泮的全身给药对于处理局部皮肤病如银屑病无效。
使用ELISA分析从不同组的小鼠获得的皮肤匀浆物，用于定量IL-17，IL-23，TNF-α和IL-22水平，这些选择的白细胞介素是银屑病的典型炎症标志物。
如图16所示，与SHAM相比，IMQ组显示IL-17水平显著增加(p<0.0001)。与阴性对照相比，除了IMQ_OB_0.01％和IMQ_FD_IP之外，所有处理组均观察到IL-17水平下降。
如图17所示，与SHAM相比，IMQ组显示IL-23水平显著增加(p<0.01)。与阴性对照相比，在一些处理组中观察到IL-23水平下降，包括IMQ_BMV(p<0.01)，IMQ_WB45/55_1％(p<0.05)和IMQ_WB45/55_1％_无柠檬酸(p<0.01)。
如图18所示，与SHAM相比，IMQ组显示TNF-α水平显著增加(p<0.0001)。除IMQ_OB_0.01％组之外，所有处理组均可见TNF-α水平下降。与IL-17和IL-23水平不同，非诺多泮IP组也显示TNF-α水平下降。
如图19所示，与SHAM相比，IMQ组显示IL-22水平显著增加(p<0.005)。除IMQ_WB45/55_0.01％,IMQ_OB_0.01％和IMQ_FD_IP组之外，在非诺多泮处理组中观察到IL-22水平的统计学显著下降。
该研究证实，根据非诺多泮的浓度，局部应用不同的软膏组显示出不同的效果。在软膏组中，随着非诺多泮浓度的增加，白细胞介素水平的倍数减少逐渐增加。在所分析的参数中，非诺多泮的IP组未显示IL-17，IL-22和IL-23水平的任何显著下降。表6显示了不同组之间在不同参数方面观察到的倍数差异。
表9：不同组之间观察到的白细胞介素水平的倍数差异
与SHAM相比，在阴性对照(IMQ)中观察到统计学IL-17水平(1.63倍)，IL-23(1.55倍)，TNF-α(2.08倍)和IL-22(1.36倍)的统计学显著性增加。在处理组中，阳性对照组显示白细胞介素水平下降，即IL-17水平(1.43倍)，IL-23(1.57倍)，TNF-α(2.21倍)和IL-22(1.55倍)。在软膏组中，随着非诺多泮浓度的增加，白细胞介素水平的倍数减少逐渐增加。在所有非诺多泮处理组中，非诺多泮IP组显示细胞因子水平降低较少。
作为功效研究的一部分，进行组织病理学研究以研究代表不同组的小鼠皮肤的形态学观察。H&E染色后，该研究的阴性对照表现为典型的银屑病特征，角化过度，角化不全，黑棘皮症，表皮突起和离散的慢性炎性浸润。用参考化合物BMV局部治疗改善了所有上述参数(图20C)。用WB45/55非诺多泮可水洗软膏)和OB(非诺多泮油性软膏)处理显示典型的银屑病特征的浓度依赖性缓解。在两个软膏组中，0.01重量％剂量对黑棘皮症和慢性炎性浸润的特征没有显示出太大影响。在三种不同剂量的非诺多泮可水洗软膏(WB_45/55)，(即WB45/55_0.01％(图20D),WB45/55_0.1％(图20E)和WB45/55_1％(图20F))中，与其他两个较低剂量相比，最高剂量(1重量％)显示两种软膏组中银屑病特征的缓解。使用不同剂量的油性软膏(即OB_0.01％(图20G)，OB_0.1％(图20H)和OB_1％(图20I))观察到类似结果，与另外两个剂量相比，最高剂量显示症状缓解。WB45/55_1％和OB_1％软膏之间未观察到显著差异。没有柠檬酸的非诺多泮可水洗软膏(WB45/55_1％_无柠檬酸)也显示出与1％可水洗软膏和油性软膏相似的效果(图20J)。该结果排除了在非诺多泮油性软膏和可水洗软膏的情况下存在于载体中的柠檬酸的影响。非诺多泮IP组(图20K)未显示对银屑病特征的任何影响，这证实了与非诺多泮的全身给药相比，非诺多泮的局部载体的局部和靶向作用。
本发明的局部组合物用于治疗对D1受体结合剂如非诺多泮有响应的皮肤病。某些皮肤癌，包括黑色素瘤，鳞状细胞癌和基底细胞癌，对非诺多泮有响应，非诺多泮可作为单一药物，或者与5-氟尿嘧啶(5-FU)和咪喹莫特(FDA批准用于治疗皮肤癌)一起用于治疗皮肤病。

Claims (29)

1.一种治疗皮肤病的方法，包括局部给予治疗有效量的非诺多泮或其药学上可接受的盐，其中非诺多泮的浓度小于5％。
2.如权利要求1所述的方法，还包括酸化剂和/或缓冲系统。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述缓冲系统选自分子或聚合酸性缓冲剂，选自：柠檬酸和柠檬酸钠，乙酸和乙酸钠，藻酸和藻酸钠，以及聚丙烯酸和聚丙烯酸钠盐。
4.如权利要求2所述的方法，其中，所述酸化剂是：柠檬酸，马来酸，丙二酸，乳酸，乙醇酸，丙烯酸或甲基丙烯酸，含马来酸的聚合物或藻酸，或硫酸，磺酸，磷酸或膦酸。
5.如权利要求1所述的方法，其中，所述治疗有效量的非诺多泮包含0.01-3重量％。
6.如权利要求1所述的方法，其中，所述治疗有效量的非诺多泮包含0.1重量％。
7.如权利要求1所述的方法，其中，所述治疗有效量的非诺多泮包含1重量％。
8.如权利要求1所述的方法，其中，所述皮肤病选自：银屑病，特应性皮炎，脱发和白癜风。
9.一种局部用组合物，其包含治疗有效量的碱或盐形式的非诺多泮，用于治疗T细胞介导的自身免疫性炎性疾病，其中至少80％的非诺多泮是溶解形式。
10.一种局部组合物，其包含治疗有效量的碱或盐形式的非诺多泮，用于治疗D1受体介导的皮肤病。
11.如权利要求9或10所述的局部组合物，其中，所述组合物是基于乳膏的组合物，无水PEG基凝胶，基于脂质的软膏，泡沫，固体颗粒，糊剂，洗液以及粘合剂条或贴剂。
12.如权利要求9或10所述的局部组合物，其中，所述病症选自：银屑病，特应性皮炎，脱发，白癜风，基底细胞癌和鳞状细胞癌。
13.如权利要求9或10所述的局部组合物，其包含约0.01-3重量％的非诺多巴。
14.如权利要求11的无水PEG基组合物，其中，与水基组合物相比，无水PEG组合物表现出更高的非诺多泮皮肤通量。
15.如权利要求9或10所述的局部组合物，还包含至少一种渗透增强剂以改善对皮肤的渗透性。
16.如权利要求15所述的局部组合物，其中，渗透增强剂选自：多元醇，醇，脂肪醇，脂肪酸，脂肪酸酯，阴离子表面活性剂，阳离子表面活性剂，两性表面活性剂和非离子表面活性剂。
17.如权利要求9或10所述的局部组合物，还包含至少一种抗氧化剂，以改善非诺多泮在组合物中的稳定性。
18.如权利要求17所述的局部组合物，其中，所述抗氧化剂选自：丁基化羟基苯甲醚(BHA)，丁基化羟基甲苯(BHT)，抗坏血酸衍生物如抗坏血酸，异抗坏血酸，抗坏血酸钠，硫醇衍生物如硫代甘油，半胱氨酸，乙酰半胱氨酸，胱氨酸，二硫赤藓糖醇，二硫苏糖醇，谷胱甘肽，生育酚，硫酸盐如硫酸钠，亚硫酸氢钠，丙酮亚硫酸氢钠，偏亚硫酸氢钠，亚硫酸钠，甲醛次硫酸钠和硫代硫酸钠。
19.如权利要求9或10所述的局部组合物，还包含至少一种防腐剂，以进一步改善含水组合物的稳定性。
20.如权利要求19所述的局部组合物，其中，所述防腐剂选自：苯甲醇，氯甲酚，羟基苯甲酸酯，苯甲酸，硫柳汞，氯霉素和对羟基苯甲酸酯。
21.如权利要求9或10所述的局部组合物，其在室温下稳定至少9个月。
22.一种治疗皮肤病的方法，包括局部给予治疗有效量的非诺多泮或其药学上可接受的盐，其中至少80％的非诺多泮是溶解形式。
23.一种治疗银屑病的方法，包括至少每天一次或两次在受影响的皮肤区域局部给予权利要求9或10所述的组合物，从而治疗所述病症。
24.一种用于治疗皮肤病的包含非诺多泮的非刺激性局部组合物，所述组合物具有不高于4的pH，其中所述组合物在每日暴露后至少1周不引起皮肤刺激。
25.一种pH高于4的局部非诺多泮组合物，其中，所述组合物在室温下稳定至少3个月。
26.一种包含用于治疗皮肤病的非诺多泮的局部无水pH依赖性非诺多泮组合物，其中，所述组合物在室温下稳定至少3个月。
27.如权利要求25所述的局部组合物，还包含选自天然多元酸，藻酸，聚(丙烯酸)和聚(马来酸)及其共聚物和交联衍生物的聚合多元酸。
28.如权利要求9或10所述的组合物，还包含抗炎剂，镇痛剂，局部麻醉剂，焦油或用于治疗T细胞介导的炎性皮肤病的其它活性物质。
29.一种抑制银屑病诱导的促炎细胞因子分泌的方法，包括局部应用有效量的非诺多泮，从而抑制细胞因子分泌，其中非诺多泮的浓度小于5重量％。
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