CN109825458A - 一种复合微生态制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种水产用复合微生态制剂及其制备方法，该水产用复合微生态制剂按照重量百分比由以下组分构成：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％。本发明的水产用复合微生态制剂能迅速降低养殖水体水质的COD、氮磷、氨氮及亚硝酸盐氮，达到降解有机物的目的。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖微生物技术领域，具体地说，涉及一种水产用复合微生态制剂及其制备方法。
背景技术
我国作为水产品养殖生产大国和出口大国，水产品种类及产量都在逐年提高。但是近些年来随着集约化养殖模式的迅速发展，残留的饵料与粪便严重影响着养殖水体的水质。这些有机污染物的累积，让大量有害菌群有了繁殖的机会，使得水质持续恶化，严重削弱了鱼虾的抵抗力，导致疾病的大面积爆发，破坏了水产养殖业的健康发展。
近年来，微生态制剂被广泛应用于水产养殖水质改善和病害防治等方面，微生物调水技术通过硝化、反硝化、硫化、解磷等作用，将养殖水体中的氮、磷营养元素和有机物分解转化为对环境无害的产品，改善水质。通过营养竞争和产生有关成分，抑制水体中有害病原微生物的生长。减少副作用大、残留时间长的渔用化学药品及抗生素等的使用和频率。促进水产动物的生长，提高抗病能力，改善水产品的品质及风味。水产微生物制剂以其无毒副作用、无耐药性、无残留、成本低、效果显著、不污染环境等特点，使微生物制剂越来越受到养殖户的关注。
使用微生态制剂在水产养殖领域有着成功的经验，但由于使用方法的不规范，导致其应用效果不太明显，究其原因，主要有以下几点：①微生态制剂作用机理的研究还不完善，应更加深入地研究，以指导微生态制剂的研制、生产及使用。②菌种经反复扩培，逐渐失去优良特性，同时饲用微生态制剂菌种单一，或由少数几种菌组成，缺少配伍研究。③对于微生态制剂我国还没有相关产品标准，导致目前产品结构的混乱。④菌种针对性不强，同时菌株的剂量和浓度不够，产品中必须含有相当数量的活菌数才能达到效果。瑞典规定乳酸菌制剂活菌数要达到2×1011个/mL。我国在正式批准生产的制剂中，对含菌数量和用量也有规定，如芽孢杆菌含量≥5×108个/mL。添加量不够，不能达到应有的效果。⑤饲料加工、贮存和运输中，菌株活性下降。可以考虑采用真空冷冻干燥技术和微胶囊技术等以提高菌种活性。⑥产品活菌的不稳定性，活菌进入消化道后，多数不易耐受胃酸和胆酸的作用，很难有足够的数量到达肠道或定居肠道发挥作用。在与肠道内寄生的微生物竞争中难以获得优势地位，不能很好地起到抑制有害菌的作用。⑦微生态制剂应用缺少针对性，较少考虑作用对象、使用目的与使用环境，如反刍动物一般选用真菌类益生素；促进仔猪生长发育、提高日增重和饲料报酬，应选用双歧杆菌等菌株；用于改善养殖环境的主要是光合细菌和消化细菌；芽孢杆菌微生态制剂在防病促生长方面体现出一定效果。⑧片面夸大微生态制剂的作用。微生态制剂有良好的预防效果，但治疗效果微生态制剂仍不能完全与抗生素抗衡，再加上作用慢以及需长时间连续使用，费用相应增加。针对以上问题，一种良好的微生态制剂应具备以下特征：①菌种在分类学上为安全性菌株，无病原性、无毒性且无毒副作用，不与病原微生物产生杂交种，对机体无害。②体内外繁殖速度快，具有很强的竞争优势。③能在低pH值的胃酸、有机酸及胆汁环境中存活，抗逆性强，肠黏膜附着性能优秀。④能产生乳酸和过氧化氢，对有害微生物的抑制能力强。⑤生产、加工及保藏容易、存活率高、稳定性好。⑥具有明确的效果，能促进动物生长发育、预防疾病、抑制有害气体释放和减少圈舍内的蚊蝇等。
发明内容
有鉴于此，本发明针对微生态制剂菌种单一，针对性不强的问题，提供了一种复合微生态制剂及其制备方法与应用。
为了解决上述技术问题，本发明公开了一种水产用复合微生态制剂，按照重量百分比由以下组分构成：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％。
可选地，所述侧孢芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在30～35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～ 20％；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液；
所述地衣芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在30～35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到地衣芽孢杆菌菌液；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟。
可选地，所述的干酪乳杆菌菌液通过以下方法制备得到：将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在28～30℃摇瓶中用常规MRS培养基培养48小时；对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～ 20％；制备得到干酪乳杆菌菌液；常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温80 1.0，pH5.5～5.9， 118℃高压灭菌15分钟。
本发明还公开了一种水产用复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、制备侧孢芽孢杆菌菌液：
步骤2、制备地衣芽孢杆菌菌液：
步骤3、制备干酪乳杆菌菌液：
步骤4、按照重量百分比称量以下组分：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％；
步骤5、将称量好的侧孢芽孢杆菌菌液、干酪乳杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液进行混合，制备得到水产用复合微生态制剂。
可选地，所述步骤1中的侧孢芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：
步骤1.1、将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养；
步骤1.2、对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养；
步骤1.3、对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液。
可选地，所述步骤2中的地衣芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：
步骤2.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养；
步骤2.2、对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，
步骤2.3、对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养；制备得到地衣芽孢杆菌菌液。
可选地，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟。
可选地，步骤2.1中的培养时间为24小时，培养温度为30～35℃；步骤2.2中的接种量为10％～20％；步骤2.3中的接种量为10％～20％。
可选地，所述的干酪乳杆菌菌液通过以下方法制备得到：
步骤3.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在28～30℃摇瓶中用常规 MRS培养基培养48小时；
步骤3.2、对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％～20％；
步骤3.3、对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到干酪乳杆菌菌液。
可选地，常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠 5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温801.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15 分钟。
与现有技术相比，本发明可以获得包括以下技术效果：
1)本发明的水产用复合微生态制剂经活化，在养殖水体中能很快形成微生态优势菌群，达到降解有机物的目的。
2)本发明的水产用复合微生态制剂能迅速降低养殖水体水质的COD、氮磷、氨氮及亚硝酸盐氮。
3)本发明的水产用复合微生态制剂能有效提高养殖水产品的规格，提升产量及养殖效益。
4)本发明的水产用复合微生态制剂代替或减少使用化学药品及抗生素类药物，倡导绿色无公害养殖。
当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。
具体实施方式
以下将配合实施例来详细说明本发明的实施方式，藉此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。
本发明公开了一种水产用复合微生态制剂，按照重量百分比由以下组分构成：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％。
其中，在组分中，当侧孢芽孢杆菌菌液低于30％时，该复合微生态制剂对水体总磷的降解效果明显下降；当干酪乳杆菌菌液低于30％时，该复合微生态制剂对水体亚硝酸盐氮的降解效果明显下降，菌液高于40％时，对氨氮的降解效果明显下降；当地衣芽孢杆菌菌液低于20％时，该复合微生态制剂对水体COD及亚硝酸盐氮的降解效果明显下降，菌液高于30％时，对氨氮的降解效果明显下降。
本发明还公开了一种水产用复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、制备侧孢芽孢杆菌菌液：
步骤1.1、将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在30～35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤1.2、对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％～20％；
步骤1.3、对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液。
步骤2、制备地衣芽孢杆菌菌液：
步骤2.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在30～35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤2.2、对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％～20％；
步骤2.3、对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到地衣芽孢杆菌菌液。
步骤3、制备干酪乳杆菌菌液：
步骤3.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在28～30℃摇瓶中用常规 MRS培养基培养48小时；
其中，常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温801.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15分钟；
步骤3.2、对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％～20％；
步骤3.3、对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到干酪乳杆菌菌液。
步骤4、按照重量百分比称量以下组分：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％；
步骤5、将称量好的侧孢芽孢杆菌菌液、干酪乳杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液进行混合，制备得到水产用复合微生态制剂。
其中，侧孢芽孢杆菌有较强的解磷作用，能有效降低养殖水体中的总磷，并能预防蓝藻的爆发；干酪乳杆菌菌体泼洒于养殖水体后能直接或间接地分解硝酸盐、亚硝酸盐等物质，并能使养殖水体中生物量增加，起到肥水、调节水质和诱食等作用；地衣芽孢杆菌能有效降低养殖水体中COD及亚硝酸盐氮，并具有调节水体pH的作用。
在制备方法中，侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～ 40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％。当侧孢芽孢杆菌菌液低于30％时，该复合微生态制剂对水体总磷的降解效果明显下降；当干酪乳杆菌菌液低于30％时，该复合微生态制剂对水体亚硝酸盐氮的降解效果明显下降，菌液高于40％时，对氨氮的降解效果明显下降；当地衣芽孢杆菌菌液低于20％时，该复合微生态制剂对水体COD及亚硝酸盐氮的降解效果明显下降，菌液高于30％时，对氨氮的降解效果明显下降。
实施例1
步骤1、制备侧孢芽孢杆菌菌液：
步骤1.1、将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在32℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤1.2、对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 15％；
步骤1.3、对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量15％；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液。
步骤2、制备地衣芽孢杆菌菌液：
步骤2.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在32℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤2.2、对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 15％；
步骤2.3、对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量15％；制备得到地衣芽孢杆菌菌液。
步骤3、制备干酪乳杆菌菌液：
步骤3.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在29℃摇瓶中用常规MRS 培养基培养48小时；
其中，常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温801.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15分钟；
步骤3.2、对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 15％；
步骤3.3、对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量15％；制备得到干酪乳杆菌菌液。
步骤4、按照重量百分比称量以下组分：侧孢芽孢杆菌菌液30％，干酪乳杆菌菌液40％，地衣芽孢杆菌菌液20％，以上重量百分比总量为100％；
步骤5、将称量好的侧孢芽孢杆菌菌液、干酪乳杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液进行混合，制备得到水产用复合微生态制剂。
实施例2
步骤1、制备侧孢芽孢杆菌菌液：
步骤1.1、将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在30℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤1.2、对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 20％；
步骤1.3、对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量20％；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液。
步骤2、制备地衣芽孢杆菌菌液：
步骤2.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在30℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤2.2、对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 20％；
步骤2.3、对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量20％；制备得到地衣芽孢杆菌菌液。
步骤3、制备干酪乳杆菌菌液：
步骤3.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在28℃摇瓶中用常规MRS 培养基培养48小时；
其中，常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温801.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15分钟；
步骤3.2、对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％；
步骤3.3、对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％；制备得到干酪乳杆菌菌液。
步骤4、按照重量百分比称量以下组分：侧孢芽孢杆菌菌液40％，干酪乳杆菌菌液30％，地衣芽孢杆菌菌液30％，以上重量百分比总量为100％；
步骤5、将称量好的侧孢芽孢杆菌菌液、干酪乳杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液进行混合，制备得到水产用复合微生态制剂。
实施例3
步骤1、制备侧孢芽孢杆菌菌液：
步骤1.1、将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤1.2、对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％；
步骤1.3、对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液。
步骤2、制备地衣芽孢杆菌菌液：
步骤2.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟；
步骤2.2、对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为 10％；
步骤2.3、对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％；制备得到地衣芽孢杆菌菌液。
步骤3、制备干酪乳杆菌菌液：
步骤3.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在30℃摇瓶中用常规MRS 培养基培养48小时；
其中，常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温801.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15分钟；
步骤3.2、对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为20％；
步骤3.3、对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量20％；制备得到干酪乳杆菌菌液。
步骤4、按照重量百分比称量以下组分：侧孢芽孢杆菌菌液40％，干酪乳杆菌菌液40％，地衣芽孢杆菌菌液20％，以上重量百分比总量为100％；
步骤5、将称量好的侧孢芽孢杆菌菌液、干酪乳杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液进行混合，制备得到水产用复合微生态制剂。
实施例4水产用
复合微生态制剂在对虾养殖中的应用实验
一、材料与方法
1、试验产品：实施例1-3制备得到的水产用复合微生态制剂，微生物活菌量在109CFU/mL以上。
2、试验对虾：将虾苗分为2组，每组25万尾，规格为(0.6±0.05)cm。
3、实验场地：选取2个规格相同的养殖池塘作为监测对象。每个养殖池塘面积8亩，水深2米，配套独立的排污进水系统，水面及水底增氧充足，整体养殖条件较完善。
4、实验方法：试验周期84天，分试验、对照组，试验组包括三组，其中，三个试验组养殖过程中全池每周一次分别泼洒实施例1-3制备得到的水产用复合微生态制剂，对照组(对比例1)按常规管理水质方法进行操作。试验期间每隔7天随机取100mL养殖池塘的水样抽滤后进行氨氮、亚硝酸盐氮、总氮、总磷、COD等水质指标的测定。养殖3个月结束时，记录各组南美白对虾总产量及平均规格。计算各组的总产值，并根据成本，计算各组的利润及产出比。
二、试验结果
表1试验组各水质指标
1、在养殖期间，试验组各水质指标较对照组总体有下降趋势，其中COD 平均降解率为7％，氨氮22.7％，亚硝酸盐氮28％，总氮27.2％，总磷9.8％。
表2养殖收益
| 养殖收益(元) | |
| 实施例1 | 18260 |
| 实施例2 | 17700 |
| 实施例3 | 19980 |
| 对比例1 | 13900 |
2、养殖结束时，试验组成品虾规格要略大于对照组，且产量更高，由此带来的养殖收益较对照组平均提高14.6％。
上述说明示出并描述了发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离发明的精神和范围，则都应在发明所附权利要求的保护范围内。
Claims (10)
1.一种水产用复合微生态制剂，其特征在于，按照重量百分比由以下组分构成：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％。
2.根据权利要求1所述的水产用复合微生态制剂，其特征在于，所述侧孢芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在30～35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液；
所述地衣芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在30～35℃摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养24小时；对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到地衣芽孢杆菌菌液；
其中，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟。
3.根据权利要求1所述的水产用复合微生态制剂，其特征在于，所述的干酪乳杆菌菌液通过以下方法制备得到：将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在28～30℃摇瓶中用常规MRS培养基培养48小时；对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到干酪乳杆菌菌液；常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温801.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15分钟。
4.一种水产用复合微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、制备侧孢芽孢杆菌菌液：
步骤2、制备地衣芽孢杆菌菌液：
步骤3、制备干酪乳杆菌菌液：
步骤4、按照重量百分比称量以下组分：侧孢芽孢杆菌菌液30％～40％，干酪乳杆菌菌液30％～40％，地衣芽孢杆菌菌液20％～30％，以上重量百分比总量为100％；
步骤5、将称量好的侧孢芽孢杆菌菌液、干酪乳杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液进行混合，制备得到水产用复合微生态制剂。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的侧孢芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：
步骤1.1、将4℃保存的侧孢芽孢杆菌活化，在摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养；
步骤1.2、对活化后的侧孢芽孢杆菌进行一级液体扩大培养；
步骤1.3、对一级液体扩大培养后的侧孢芽孢杆菌进行二级液体扩大培养；制备得到侧孢芽孢杆菌菌液。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的地衣芽孢杆菌菌液通过以下方法制备得到：
步骤2.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在摇瓶中用胰蛋白胨大豆培养基培养；
步骤2.2、对活化后的地衣芽孢杆菌进行一级液体扩大培养，
步骤2.3、对一级液体扩大培养后的地衣芽孢杆菌进行二级液体扩大培养；制备得到地衣芽孢杆菌菌液。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，胰蛋白胨大豆培养基的配方如下(g/L)：胰蛋白胨17.0，大豆蛋白胨3.0，氯化钠5.0，磷酸氢二钾2.5，葡萄糖2.5，pH7.1～7.5，121℃高压灭菌15分钟。
8.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，步骤2.1中的培养时间为24小时，培养温度为30～35℃；步骤2.2中的接种量为10％～20％；步骤2.3中的接种量为10％～20％。
9.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的干酪乳杆菌菌液通过以下方法制备得到：
步骤3.1、将4℃保存的地衣芽孢杆菌活化，在28～30℃摇瓶中用常规MRS培养基培养48小时；
步骤3.2、对活化后的干酪乳杆菌进行一级液体扩大培养，接种量为10％～20％；
步骤3.3、对一级液体扩大培养后的干酪乳杆菌进行二级液体扩大培养，接种量10％～20％；制备得到干酪乳杆菌菌液。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，常规MRS培养基的配方如下(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉粉8.0，酵母粉4.0，葡萄糖20.0，磷酸氢二钾2.0，柠檬酸氢二铵2.0，乙酸钠5.0，硫酸镁0.2，硫酸锰0.04，吐温80 1.0，pH5.5～5.9，118℃高压灭菌15分钟。
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Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102050524A (zh) * | 2010-12-31 | 2011-05-11 | 东莞市保得生物工程有限公司 | 水质改良剂 |
| CN102092860A (zh) * | 2010-12-31 | 2011-06-15 | 东莞市保得生物工程有限公司 | 强效利水素 |
| CN102206585A (zh) * | 2011-04-29 | 2011-10-05 | 上海水大环境工程有限公司 | 用于净化水质的微生物复合制剂及其制备方法 |
| CN104673775A (zh) * | 2013-12-03 | 2015-06-03 | 青岛碧水蓝天生物技术有限公司 | 修复水产养殖水体环境的微生态制剂及其制备方法 |
| CN106085906A (zh) * | 2016-06-16 | 2016-11-09 | 陈燕 | 一种石斑鱼养殖污水改良用复合微生物制剂及其制备方法 |
| CN106754495A (zh) * | 2016-12-09 | 2017-05-31 | 浙江省淡水水产研究所 | 一种生物絮团的培养方法及水产养殖方法 |
| CN109251874A (zh) * | 2018-09-25 | 2019-01-22 | 厦门惠盈动物科技有限公司 | 一种益生菌制剂及其制备方法和应用 |
-
2019
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Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102050524A (zh) * | 2010-12-31 | 2011-05-11 | 东莞市保得生物工程有限公司 | 水质改良剂 |
| CN102092860A (zh) * | 2010-12-31 | 2011-06-15 | 东莞市保得生物工程有限公司 | 强效利水素 |
| CN102206585A (zh) * | 2011-04-29 | 2011-10-05 | 上海水大环境工程有限公司 | 用于净化水质的微生物复合制剂及其制备方法 |
| CN104673775A (zh) * | 2013-12-03 | 2015-06-03 | 青岛碧水蓝天生物技术有限公司 | 修复水产养殖水体环境的微生态制剂及其制备方法 |
| CN106085906A (zh) * | 2016-06-16 | 2016-11-09 | 陈燕 | 一种石斑鱼养殖污水改良用复合微生物制剂及其制备方法 |
| CN106754495A (zh) * | 2016-12-09 | 2017-05-31 | 浙江省淡水水产研究所 | 一种生物絮团的培养方法及水产养殖方法 |
| CN109251874A (zh) * | 2018-09-25 | 2019-01-22 | 厦门惠盈动物科技有限公司 | 一种益生菌制剂及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 朱长生等: "三种微生物制剂对有机物废水中氨氮及亚硝酸盐的影响", 《水产养殖》 * |
| 章秋虎等: "侧芽孢杆菌(PGPR菌)微生物制剂对养殖南美白对虾池塘水质的调控效应", 《浙江农业科学》 * |
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